авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:     | 1 |   ...   | 18 | 19 || 21 | 22 |   ...   | 32 |

«НАЦИОНАЛЬНАЯ АКАДЕМИЯ МИКОЛОГИИ ОБЩЕРОССИЙСКАЯ ОБЩЕСТВЕННАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ СОВРЕМЕННАЯ МИКОЛОГИЯ В РОССИИ ТОМ 2 ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ ВТОРОГО ...»

-- [ Страница 20 ] --

такового – см., например: Коваль, 1974. Опред. энто мофильных грибов СССР, с. 160–161) входит в груп- Cordycipitaceae) в качестве анаморфы приводится evlachovaea sp., в силу сказанного не может служить пу, для которой установлены телеоморфы в родах byssochlamys, Talaromyces и Thermoascus, относящих- основанием считать типовой вид e. kintrischica (с не ся к сумчатым грибам сем. Trichocomaceae в порядке известной половой стадией) принадлежащим именно к Eurotiales (аскоспоры образуются в клейстотециях). этому же семейству. Он вполне может оказаться пред Но за многие годы на членистоногих и нематодах было ставителем как близких семейств, так и вообще за пре описано также немало видов Paecilomyces, у которых делами порядка Hypocreales (но в таких случаях будет были обнаружены в природе Torrubiella- и cordyceps- необходимо переописывать анаморфу e. ’spegazzinii‘ подобные телеоморфы (в прежнем понимании послед- под иным родовым названием). Всё сказанное указы него рода). Для других видов, половые стадии которых вает на необходимость проведения более основатель не найдены и, возможно, совсем утрачены, доказатель- ных сравнительных исследований с привлечением мо ства принадлежности к этой группе аскомицетов (об- лекулярно-генетических методов.

ТАКСОНОМИЯ И ФИЛОГЕНИЯ ГРИБОВ РОДА FuSarium Гагкаева Т.Ю.

всероссийский институт защиты растений (вИзР), Санкт-Петербург Вся история таксономии гетерогенного рода преобладающего числа перегородок, размера, характе Fusarium связана с попытками оценить существую- ра изогнутости, длины и формы апикальной и базаль щее разнообразие признаков, выявить амплитуды их ной клеток макроконидий;

пигментации.

изменчивости и выделить характеристики, имеющие С развитием молекулярных методов анализа ге таксономическую значимость. Отличительным при- нетической изменчивости таксономия грибов полу знаком грибов р. Fusarium является способность об- чила новый импульс. ДНК технологии (RfLp, AfLp, разовывать веретеновидные, с различной степенью секвенирование) в настоящее время широко исполь изогнутости конидии с перегородками на специали- зуются в изучении генома грибов, предпринимаются зированных фертильных гифах – конидиеносцах с попытки соотнести полученную информацию с су фиалидными конидиогенными клетками. Основными ществующими таксонами. Показано, что вид, опи диагностическими признаками для определений сек- санный по морфологическим критериям, часто яв ций являются наличие микроконидий и хламидоспор, ляется сложной системой, обладающей внутренней структурой. Говоря о виде sensu stricto и sensu lato, форма макроконидий. Секции делятся на виды и раз новидности на основе типа и формы конидиогенных надо представлять общие биологические свойства структур, характера образования и формы микрокони- организмов ограниченные рамками таксономичес дий;

типа спорообразования (спородохии, пионноты);

кого ранга.

316 ii СъезД МИколоГов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел Показана перспективность использования про- учитывая историческую связь между таксонами и об филей вторичных метаболитов в таксономических и щность их происхождения. Интенсивно используемый диагностических целях. Выявлены не только качес- в последние годы филогенетический анализ группи твенные и количественные различия в продуциро- рует организмы на основе их эволюционной истории.

вании метаболитов у разных видов, но и в пределах Филогенетический вид формирует филогенетическую вида (хемотипы) (Marasas et al., 1984;

Logrieco et al., субгруппу (кластер) имеющую меньшее сходство с ос 1999;

Thrane et al., 2001;

Кононенко и др., 2004;

Moss, тальными анализируемыми организмами. Для выявле Thrane, 2004). ния дивергенции различных таксонов и линий внутри В середине 80-х годов было предложено исполь- них особенно активно используется анализ последо зовать метод скрещивания гетероталличных штаммов вательности нуклеотидов. Согласно Leslie et al. (2005, грибов для выявления «интерстерильных групп» – 2007), линии, имеющие более 60 – 70 % сходства групп организмов репродуктивно изолированных от AfLp профилей, следует относить к одному виду, ме других морфологически сходных групп, впоследствии нее 40 % – к разным видам;

видовая принадлежность получивших статус биологического вида (Hsieh et al., штаммов филогенетических линий показывающих 1977;

kuhlman, 1982;

Leslie, 1991;

klittich, Leslie, 1992). сходство в пределах 40 – 60 % должна быть подвер Концепция биологического вида широко используется, гнута тщательному анализу. Дробление видов имеет например, в секции liseola (Гагкаева, Левитин, 2005). свою положительную сторону, выявляя дополнитель Существующие таксономические системы группи- ный спектр отличий, который может быть использован руют организмы на основании сходства их свойств, не для понимания свойств организма.

ФИЛОГЕНЕТИЧЕСКАЯ СИСТЕМА РОДА alTernaria Ганнибал Ф.Б.

всероссийский НИИ защиты растений (вИзР), Санкт-Петербург alternaria – род феодиктиоспоровых гифомицетов ков. Одна из альтернатив, – биологическая концепция, (анаморфы семейства pleosporaceae), включающий не работоспособна в отношении грибов частично или по некоторым оценкам не менее 150 видов. Изучение полностью утративших половое размножение, к кото рым относится и род alternaria. Более привлекательной таксономии этой группы грибов имеет длинную и насыщенную историю. Подходы к систематики рода для нас является филогенетическая концепция. Фило неоднократно пересматривались и обновлялись раз- генетические реконструкции, произведённые на осно ными исследователями и научными коллективами, ве молекулярно-генетических данных (генофилетика), однако ряд проблем остаётся по-прежнему нерешён- опираются на большое количество независимых при ным. знаков и являются формализованной объективной про Сохраняются разные конкурирующие точки зрения цедурой. В дополнение к филогенетической концепции на таксономию рода alternaria. Американским учёным вида была разработана методология «филогенетическо E.G.Simmons в течение последних трёх десятилетий го распознавания видов» у грибов (Taylor et al., 2000), опубликовано множество работ с результатами прово- наполняющая «филогенетический» вид не только «ис димой им ревизии рода. В своих скрупулёзных иссле- торическим», но и «биологическим» смыслом.

Исследования филогении рода alternaria немного дованиях он опирался исключительно на морфологи ческие признаки. Адепты альтернативной концепции, численны, но их результаты достаточно существенны.

изучая так называемые мелкоспоровые виды alter- С применением молекулярно-генетических методов naria, наоборот, уделяют основное внимание генети- установлено, что некоторые видовые группы (комп лексы видов, species-groups) alternaria, выделенные ческим и биохимическим особенностям и игнорируют данные морфологии (напр., kusaba, Tsuge, 1997). Оба по морфологическим признакам, не являются моно подхода к распознаванию видов, по сути, являются ти- филетическими. Ещё интереснее то, что виды родов ulocladium, nimbya и embellisia на филогенетичес пологическими и содержат в себе множество субъек тивных предпосылок. В результате чего идентифика- ком древе оказались частично перемешаны с видами alternaria (pryor, Bigelow, 2003). Таким образом, был ция многих видов рода, проводимая микофлористами и фитопатологами, нередко оказывается сопряжена с воскрешён вопрос о границах и экстенсии рода. Виды непреодолимыми трудностями, что снижает ценность четырёх перечисленных выше близких родов могут обоих подходов. быть разделены на 9 клад. Однако, принимая во внима Морфологическая (типологическая) концепция вида ние тот факт, что исследованиями были затронуты не все комплексы видов alternaria, есть основания пред в случае многих грибов имеет ограничения из-за при митивного строения микромицетов и малого количес- полагать, что эта группа грибов состоит из большего тва таксономически ценных морфологических призна- числа филогенетических линий.

Систематика и эволюция грибов Анализ молекулярной кладограммы и данных мор- Исследование внутривидового разнообразия пока зало, что некоторые виды alternaria, возможно, явля фологии, биохимии, физиологии и экологии в целом показал их взаимосвязь. При небольшой коррекции ются сборными, а ряд других видов, очень близких по таксономической значимости морфологических при- морфологии и экологии, вероятно, следует укрупнить.

знаков, на наш взгляд, можно добиться полного сов- Использование методов молекулярной генетики и фи падения состава групп, выделенных на основании логенетических реконструкций позволит уточнить как морфологических, так и молекулярных маркеров. статус таких спорных видов. Выделенные внутри рода Причём такая система будет обладать большой про- монофилетические группы видов могут получить ста гностической силой и окажется полезна при исследо- тус, например, секций.

вании экологии грибов, биохимии и других аспектов Исследования поддержаны грантом РФФИ 07–04– жизнедеятельности видов alternaria. 00096.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МЕТОДА ПЦР ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ ГРИБОВ РОДА fUsARIUM Гришина М.А., Антонов В.А., Ткаченко Г.А., Липницкий А.В.

ФГУз волгоградский научно-исследовательский противочумный институт, волгоград Многочисленное семейство трихотеценовых мико- ДНК изопрапонолом. Амплификацию выполняли на токсинов (ТМ) образуется сравнительно небольшим мультициклере «Терцик» (АО «ДНК-технология»).

числом грибных родов. Так, большинство простых Реакцию проводили с использованием «горячего стар трихотеценов синтезируется представителями рода та». Регистрацию результатов ПЦР осуществляли с по Fusarium. Идентификация грибов этого рода, основан- мощью гель-электрофореза в 1,5 % агарозе с окраской ная на морфологических характеристиках, чрезвычай- фрагментов ДНК этидиум бромидом и визуализацией но сложна и требует высокой квалификации, посколь- в УФ-свете.

ку культуры грибов нестабильны и таксономические В результате исследований специфические фраг признаки не всегда четко выражены. В настоящее вре- менты амплификации были выявлены у штаммов F.culmorum с использованием олигонуклеотидных за мя ведутся поиски альтернативных методов быстрой и точной идентификации этих патогенов, изучение раз- травок N1–2 и N1–2R, позволяющих определять мик нообразия на видовом и внутривидовом уровне. Срав- ромицеты, продуцирующие высокие дозы ТМ. Однако нительно недавно начаты молекулярно-генетические при повышенной концентрации ДНК-матрицы с помо исследования по характеристике грибов – продуцен- щью этих праймеров также детектировались штаммы F.graminearum и F.sporotrichioides. При использова тов ТМ. Основным молекулярно-генетическим мето дом, используемым для оценки штаммов Fusarium по нии олигонуклеотидных затравок 4056 и 3551, детек продукции токсина, является ПЦР. тирующих микромицеты с низкой продукцией ТМ, в В данной работе были апробированы праймеры реакции амплификации не выявлено ни одного из ана HATri/f и HATri/R, специфичные для Tri5 гена, ответс- лизируемых штаммов.

твенного за первую ключевую ступень в метаболизме С помощью праймеров HATri/f и HATri/R в ПЦР ТМ F.culmorum, F. sambucinum, F. рoae, F.graminearum специфические ампликоны обнаружены только при и F.sporotrichioides [Edwards S. et al., 2001], олигонук- анализе штаммов F.sporotrichioides, F.culmorum и F. graminearum, а штаммы F.sambucinum и F.poae не леотидные затравки N1–2, N1–2R и 4056,3551 сконс труированные на основе tri5-tri6 интергенного региона идентифицировались.

для идентификации F.culmorum обладающих высокой Полученные данные диктуют необходимость как и низкой продукцией микотоксинов. [B.Bakan et al., оптимизации условий проведения ПЦР, так и поиска 2002]. уникальных последовательностей ДНК токсинпроду цирующих грибов рода Fusarium с целью создания Объектом исследования служили штаммы f.culmorum, f.sambucinum, f.poae, f.avenaceum, высокоспецифичных амплификационных тест-сис f.oxysporum, f.solani, f.tricinctum, f.graminearum и тем.

f.sporotrichioides, полученным из ИБФМ им. Г.К. Скря- Дальнейшее развитие метод ПЦР получит в облас бина РАН. Культивирование штаммов fusarium прово- ти количественного определения ДНК, что позволит дили на картофельноглюкозном агаре. ДНК выделяли соотнести результаты реакции амплификации с коли фенол-хлороформным методом с переосаждением чеством ТМ в образцах зерновых культур.

318 ii СъезД МИколоГов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел ОСОБЕННОСТИ ОБЛАСТИ ВНУТРЕННИХ ТРАНСКРИБИРУЕМЫХ СПЕЙСЕРОВ ITs1–5,8s-ITs2 И МЕЖГЕННОГО ИНТЕРВАЛА IGs ЯДРЕНОЙ РИБОСОМАЛЬНОЙ ДНК leccinum PSeudoScabrum Иванов Д.М.

Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург В настоящее время виды рода leccinum S.f. Gray яв- сравнения L. scabrum (Bull. : fr.) S.f. Gray – 1350 п.

н., ляются единственными среди базидиальных грибов, у L. versipelle (fr. et Hцk) Snell – 1850 п.н. Анализ сек которых область внутренних транскрибируемых спей- венированной последовательности Af454588 изучае серов ITS1–5,8S-ITS2 ядерной рибосомальной ДНК мого участка L. pseudoscabrum показывает, что в ней организована с участием коротких повторяющихся отсутствуют повторы, характерные для последователь микросателлитных последовательностей. это приводит ностей других видов этого рода. Например, последова к существенному увеличению ее молекулярной массы. тельность L. scabrum Af454585 содержит 7 повторов Род leccinum, включает дикорастущие съедобные грибы GAAAAGTA и 9 – CTAATAGA, на долю которых при подосиновики и подберезовики, популярные у населе- ходится более 10 % от общего размера фрагмента.

Кроме того, l. pseudoscabrum обладает минималь ния. Виды этого рода образуют эктотрофную микоризу с господствующими древесными породами Северного ным размером межгенного интервала IGS1 – 700 п.н., для сравнения l. scabrum – 1000 п.н., l. versipelle – полушария. О морфологическом разнообразии пред ставителей рода leccinum окончательного мнения не 1070 п.н. После проведения рестрикционного анализа сформировано, поэтому анализ особенностей строения амплифицированного участка IGS1 был получен сле дующий набор фрагментов (п.н.): l. pseudoscabrum – указанного локуса с привлечением данных по другим 550, 150;

l. scabrum – 730, 200;

l. versipelle – 900,170.

участкам генома представляет интерес для изучения филогенетических связей между видами. К настоящему времени все виды, включаемые в Объект исследования: вид leccinum pseudosca- род leccinum согласно системе H.C. Den Bakker & brum (kallenb.) Љutara [Leccinum carpini (R. Schulz.) M.E. Noordeloos (2005) охарактеризованы с исполь D. Reid] – Грабовик. зованием указанных в работе методов. На основании приведенных экспериментальных данных l. pseudo Распространение: Европа в пределах ареалов Car scabrum, как обладающий минимальным размером pinus betulus L., C. caucasica А. Grossh. и С. orientalis Miller;

Северная Америка в пределах ареала C. caro- области внутренних транскрибируемых спейсеров liniana Walt. ITS1–5,8S-ITS2, не содержащей микросателлитные Предмет исследования: участки ITS1–5,8S-ITS2 и повторы и характеризующийся наименьшей длинной IGS1 ядерной рДНК l. pseudoscabrum. последовательности межгенного интервала IGS1, сле Места сборов плодовых тел l. pseudoscabrum, дует считать наиболее примитивным видом изучае послуживших материалом для исследования, – Крас- мого рода. Впервые в мире проведена амплификация нодарский край, Анапский р-н, окрестности хутора области межгенного спейсера IGS1 рДНК для видов рода leccinum. Размеры участков амплифицирован Куматырь (02.09.2003) и р-н Большого Сочи, село Вол конка, ущелье ручья Годлик (18.07.2005). ных со специфичными к базидиомицетам праймерами Методы исследования: выделение препаратов ДНК и наборы фрагментов, полученные в результате рес с использованием протеиназы К, амплификация ITS1– трикционного анализа, предлагается использовать в 5,8S-ITS2 с праймерами ITS1f и ITS4B, амплифика- качестве молекулярных маркеров для идентификации видов рода leccinum.

ция IGS1 с праймерами CNL12 и 5SA, рестрикцион ный анализ – эндонуклеаза HinfI. Работа проведена в рамках программы Рособразо Установлено, что L. pseudoscabrum обладает ми- вания и CRDf «Фундаментальные исследования и вы нимальным размером ITS1–5,8S-ITS2 – 1100 п.н., для сшее образование» (РНП 2.2.2.3.16048, Y5-B-12-02).

КОМПЛЕКСНАЯ ТЕРАПИЯ ОНИХОМИКОЗОВ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ АППАРАТНОГО МЕТОДА Коваленко А.А.

клиника «Ашарт Шифо-Нур», Ташкент, Узбекистан Научные публикации, посвященные проблеме они- нако, несмотря на большой объем накопленных дан хомикозов, имеют более чем столетнюю историю, од- ных, проблема остается весьма актуальной.

Систематика и эволюция грибов По данным проф. Сергеева А.Ю. онихомикозы в На базе частной клиники «Ашарт Шифо-нур» с подавляющем большинстве случаев (75 %) представ- участием специалистов Научно- исследовательского лены тяжелыми формами поражения ногтей – КИ- института дерматологии и венерологии МЗ РУз было ОТОС от 12 до 30, с сопутствующей патологией обследовано 32 пациента с гипертрофическими фор внутренних органов (чаще всего сахарный диабет, мами онихомикозов.

заболевания периферических сосудов, иммунодефи- В качестве системного антимикотика мы исполь цитные состояния). зовали орунгал методом пульс-терапии в зависимос В настоящее время в Узбекистане начато клиничес- ти от индекса КИОТОС. Для удаления пораженной кое наблюдение больных с гипертрофическими фор- ногтевой пластинки применяли аппаратный метод.

мами онихомикоза по методике комплексной терапии Для медицинского аппаратного педикюра был ис с применением аппаратной чистки ногтевого ложа. пользован аппарат «Герлах». Местно применялся Применялся комплексный подход к лечению боль- лак «Батрафен». В качестве препарата, улучшающего ных онихомикозами, который включает: рост ногтевой пластинки, использовался «Ревалид».

• Системные антимикотики Для коррекции сосудистой патологии применялся • Местные антимикотики «Трентал».

• Аппаратная чистка ногтевых пластинок и подног- Из 32 больных онихомикозами в статистический тевого гиперкератоза анализ вошло 27 пациентов, остальные 5 находятся • Препараты, улучшающие кровоснабжение и тро- под наблюдением и еще не прошли контроль излечен фику матрикса и ногтевого ложа. ности. Из 27 больных у 26 наступило полное клинико • Препараты, улучшающие рост ногтей микологическое излечение. эффективность комплекс • Иммуномодуляторы у больных с отклонением в ного метода лечения составила 96 %.

иммунном статусе Таким образом, можно прийти к выводу, что ком Цели настоящего наблюдения: максимальное повы- плексная терапия онихомикозов с применением аппа шение эффективности лечения онихомикозов с учетом ратного метода является оптимальным вариантом по коррекции сопутствующей патологии и улучшение ка- вышения эффективности стандартных схем терапии и чества жизни пациентов. улучшения качества жизни пациентов.

Раздел ГРИбНыЕ бИОТЕхНОЛОГИИ ОТБОР ЛИПОЛИТИЧЕСКИ АКТИВНЫХ КУЛЬТУР МИКРОМИЦЕТОВ С НОВЫМИ СВОЙСТВАМИ Айзенберг В.Л.1, Борисенко А.В.1, Захарченко В.Л.1, Курченко И.Н.1, Капичон А.П.1, Бурбан А.Ф.2, Коновалова В.В. 1 Институт микробиологии и вирусологии им. Д.к. заболотного Национальной акдемии наук Украины (ИМв НАНУ), киев 2 Национальный университет «киево-Могилянская Академия», киев Липолитические ферменты, осуществляющие ных микромицетов различного систематического по гидролиз разнообразных жиров и масел, могут найти ложения из разных местообитаний. Липолитическую применение в пищевой и легкой промышленности;

в активность определяли двумя методами: разработан медицине;

в косметической отрасли промышленности;

ным в отделе спектрофотометрическим методом по при выделке мехов и кож;

в сельском хозяйстве;

для реакции с пара-нитрофенилпальмитатом (пНФП) и приготовления кормов в животноводстве;

в бытовой титрометрическим – с использованием оливкового химии;

для очистки от жиров канализационных ком- масла.

муникаций и пр. В результате проведенных исследований получен новый штамм гриба Rhіzopus sp. 2000ФМ – активный Микроскопические грибы – перспективный источ ник получения ферментов промышленного значения. продуцент экзолипазы. Для культивирования штамма Поиск микромицетов-продуцентов термостабильных подобран состав питательной среды;

изучены некото и щелочеустойчивых липаз для использования в соста- рые физико – химические свойства экзолипазы, проду цируемой Rhіzopus sp. 2000ФМ: оптимумы температу ве моющих средств – актуальная биотехнологическая задача. ры и рН действия, термо- и рН-стабильность. Штамм В отделе физиологии и систематики микромицетов отличается высокой устойчивостью в широком диапа ИМВ НАНУ проводится селекционная работа по со- зоне щелочных значений рН.

зданию высокопродуктивных штаммов грибов-проду- Обладая повышенной щелочеустойчивостью, штамм гриба Rhіzopus sp. 2000ФМ сможет найти при центов экзолипазы – триацилглицеролгидролазы (КФ 3.1.1.3). Отбор липолитически активных штаммов менение в бытовой химии и соответствующих про осуществлялся среди 53 культур мезо- и термофиль- мышленных отраслях.

ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ПРОТИВ ПАРАЗИТИЧЕСКИХ НЕМАТОД РАСТЕНИЙ И ЖИВОТНЫХ Ананько Г.Г., Теплякова Т.В.

ФГУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии вектор Роспотребнадзора, п. кольцово Новосибирской области На основе эффективного штамма нематофагового рых заложен принцип 2-х этапного развития гриба, а гриба Duddingtonia flagrans f-882 разработаны техно- также используются методы погруженного и твердо логии получения препаративных форм, в основе кото- фазного культивирования.

322 ii СъезД МИколоГов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел Препарат в зависимости от назначения может быть в условиях холодильника не теряет эффективности 0, жидким, сыпучим, гранулированным. Для получения года и более;

сухой препарат при комнатной темпера жидкой формы биопрепарата наиболее подходящими туре – 2 года.

являются газовихревые безградиентные биореакторы Аналогичным образом, посредством 2-х этапного типа «БИОК», позволяющие получить эффективный процесса, получена сухая сыпучая форма на основе жидкий препарат на основе вышеуказанного штамма в вспученного вермикулита. В этом случае производит течение 2-х суток. Разработаны микроморфологические ся дополнительное введение питательной среды перед и цитологические показатели жидкой препаративной началом твердофазной ферментации. Такой двухэтап формы. В составе жидкой формы отсутствуют конидии ный процесс получения препарата занимает не более и хламидоспоры, характерные для данного штамма. 7 суток. На выходе получается препарат, не нуждаю Срок хранения данной формы биопрепарата в условиях щийся в сушке.

пониженной температуры составляет 2 – 3 месяца. Проведенные испытания препаративных форм Культивирование в биореакторе использовали против галловых нематод огурца и томата, цистооб также для получения сухих препаративных форм в разующей нематоды картофеля, стеблевой нематоды качестве посевного материала для засева зерновых земляники показали стимулирующий эффект на рост и сред. В этом случае используемый мицелий находится развитие растений и снижение их поражённости фито в более ранней стадии развития, продолжительность паразитическими нематодами на 80 % и более.

культивирования в биореакторе составляет не более В испытаниях жидкого и гранулированного препа 1,5 суток. Процесс зарастания зерновок происходит в рата на паразитических гельминтах мышей, лошадей, полипропиленовых пакетах или стеклянных емкостях маралов также установлено снижение численности в течение 2-х недель. Действующим началом гриба, паразитов. Нематоцидный эффект при скармливании кроме мицелия, являются хламидоспоры и немного- мышам проявлялся в деструктивных нарушениях кле численные конидии. Свежеприготовленный препарат ток всех тканей и органов гельминтов.

ВЛИЯНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ФЕНОЛА НА РОСТ И СИНТЕЗ ОКИСЛИТЕЛЬНЫХ ФЕРМЕНТОВ ГРИБОМ lenTinuS TiGrinuS И БАКТЕРИЕЙ rHodococcuS erYTHroPoliS ПРИ РАЗДЕЛЬНОМ И СОВМЕСТНОМ КУЛЬТИВИРОВАНИИ Атыкян Н.А., Костина Е.Г., Ревин В.В.

Мордовский государственный университет имени Н.П.огарева, Саранск Фенольные соединения, как известно, являются од- ся синтез окислительных ферментов гриба в присутс ними из самых токсичных и широко распространенных твии 1 и 5 % фенола, при этом в качестве косубстрата загрязнителей окружающей среды. По встречаемости использовали лигносульфонат в концентрации 0,5 % в биосфере и экологической опасности они занимают по а.с.в. Отбор проб, определение общей оксидазной третье место после тяжелых металлов и нефтепродук- активности (по окислению пирокатехина) и белка осу тов и являются основными токсичными компонентами ществляли каждые двое суток. В качестве контроля ис и/или отходами ряда производств. В связи с этим коли- пользовали глюкозную среду без добавления фенола и чество фенолов в окружающей среде должно быть све- лигносульфоната. Наши исследования показали, что в дено до минимума. Наряду с модернизацией традици- вариантах с фенолом, рост культуры гриба был очень онных химических методов утилизации этих веществ, слабым, ферментативная активность была ниже или разрабатываются новые методы. Наиболее перспек- сопоставима с контрольным (на глюкозе), максимум тивными в этом плане являются биотехнологичес- наблюдался на 6 сутки культивирования.

Различные представители рода rhodococcus спо кие методы по вовлечению специально подобранных ассоциаций микроорганизмов в биодеградацию фе- собны усваивать фенол и хлорфенолы в качестве нольных соединений. Биодеградация этих соединений единственного источника углерода и энергии, что под в природе – сложный многоступенчатый и черезвы- тверждает их высокий биодеградивный потенциал и в чайно длительный, а поэтому и малоэффективный связи с этим важную роль в биоремедиации загрязнен процесс, осуществляемый сообществом почвенных ных почв и воды. Поэтому на втором этапе мы про водили культивирование бактерий r. erythropolis ВКМ микроорганизмов. Поскольку лигнолитические грибы Ас-858Т при тех же условиях, что и гриб lentinus ti известны как эффективные деструкторы разнообраз grinus. В результате проведенных нами исследований ных токсичных веществ и, как показали наши пред варительные данные, способны снижать содержание было обнаружено, что культура бактерий активно рас свободного фенола в культуральной среде, на первом тет и синтезирует довольно активные оксидазы. При этапе наших исследований мы изучали, как изменяет- этом наблюдается два пика синтеза ферментов, что Грибные биотехнологии связано, по-видимому, с синтезом нескольких изоформ активности – первый пик совпадает по времени с оксидаз. активным синтезом окислительных ферментов Rho dococcus erythropolis, а второй пик, по-видимому, На следующем этапе мы попробовали объединить эти две культуры и прокультивировать их совмест- обусловлен синтезом дополнительно и грибных окис но при тех же условиях. Исследования по влиянию лительных ферментов.

фенола на синтез оксидаз при совместном культиви- Таким образом, переход к совместному культиви ровании rhodococcus erythropolis и lentinus tigrinus рованию rhodococcus erythropolis и lentinus tigrinus показали, что переход к совместному культивиро- приводит к синтезу более активных форм оксидаз, при ванию не вызывает ингибирования роста культур, а этом ингибирующий эффект фенола на ростовые и напротив – приводит к синтезу более активных форм синтетические процессы намного ниже, чем при мо оксидаз. При этом наблюдается 2 пика проявления нокультивировании.

ГЛИКОПОЛИМЕРЫ И УГЛЕВОДСВЯЗЫВАЮЩИЕ БЕЛКИ LENTINUs EDODEs Бабицкая В.Г.1, Никитина В.Е.2, Смирнов Д.А.1, Щерба В.В.1, Цивилева О.М.2, Филимонова Т.В.1, Осадчая О.В. 1 Институт микробиологии НАН Беларуси, Минск 2 Институт биохимии и физиологии растений и микроорганизмов РАН, Саратов Наличие уникального комплекса биологически ак- препаратов. Исследование 3-х лектинов, выделенных тивных веществ у культивируемых ксилотрофных ба- из гриба L. edodes показало, что углеводная часть в зидиомицетов позволяет использовать их как ценное них составляет 3,3 % (глубинный мицелий), 18,1 % сырьё для создания лечебно-профилактических препа- (пленка коричневая) и 19,8 % (плодовое тело). Белко ратов и биологически активных добавок. Целью наших вая часть соответственно 96,7 %, 81,9 % и 80,2 %.

исследований явилось исследование гликополимеров В больших количествах в белке присутствует серин и лектинов глубинного мицелия гриба l. edodes, пос- (7,5 %), глицин (10 %), треонин (13 %), пролин и ва кольку они во многом определяют его биологическое лин (7,3 и 7,5 %, соответственно). Установлено, что действие. углеводная часть лектинов глубинного мицелия пред экзо- и эндогликополимеры гриба оказались гли- ставлена на 58 % инозитом, 25 % глюкозой и 17 % копротеинами с содержанием белка – 2,0–9,2 %. Мо- галактозой. Углеводы лектинов плодовых тел состоят лекулярный вес высокомолекулярной фракции 1 000 из 8 % инозита, 79 % глюкозы и 13 % галактозы, ко кДа, низкомолекулярной – около 70 кДа. По мономер- ричневой мицелиальной пленки – из инозита (42 %), ному составу гликопротеины – гетерогликаны с преоб- глюкозы (46 %) и маннозы (12 %). Показано, что при ладающим мономером глюкозой (54–96 %). Показано, твердофазном культивировании активность лектинов что способ культивирования оказывает определенное на несколько порядков выше по сравнению с лекти влияние на строение образуемых L. edodes экзо- и новой активностью глубинной культуры. Все лектины эндогликопротеинов. На основании исследования наиболее высокое сродство проявляют по отношению структуры с использованием ИК-спектроскопии и де- к L-D-меллибиозе, D-лактозе и D-галактозе.

Изучено биологическое действие l. edodes. Уста градации по Смиту установлено, что углеводная часть экзо- и эндогликопротеинов представлена разветвлен- новлена высокая иммуностимулирующая активность ными гликанами, содержащими - и - гликозидные глубинного мицелия гриба, который стимулирует связи, основная цепь представлена гликанами с C1 преимущественно развитие гуморального иммунного ответа. Доказано, что l. edodes обладает гепатопротек C3, боковые цепи гликанами с C1C4 и C1C6 гли козидными связями. Наряду с гликополимерами грибы торным и антиоксидантным действием. Установлено, рода Lentinus образуют в мицелии высокомолекуляр- что эндогликопротеины, полученные из глубинного мицелия l. edodes, в концентрации 100 мкг/мл и выше ные фенольные соединения – меланины, наибольшее количество которых синтезируется на свету. стимулируют фагоцитарную активность нейтрофи лов крови человека по отношению к Staphylococcus Среди метаболитов культивируемых базидиоми цетов особое место занимают лектины – белки, не aureus.

относящиеся к классу иммунных, способные к обра- Таким образом, проведенные исследования пока тимому связыванию с углеводной частью гликоконъ- зали и показывают перспективность использования югатов без нарушения ковалентной структуры любых глубинного мицелия гриба для получения широкого из узнаваемых гликозильных лигандов. Уникальные спектра биологически активных соединений.

свойства лектинов позволяют их использовать для со- Работа выполнена при финансовой поддержке БР здания диагностических и лечебно-профилактических ФФИ-РФФИ (грант №Б06Р-059).

324 ii СъезД МИколоГов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел ФИЗИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ ГРИБОВ РОДА CORDYCEps Бабицкая В.Г.1, Бисько Н.А.2, Смирнов Д.А.1, Щерба В.В.1, Пучкова Т.А.1, Осадчая О.В.1, Поединок Н.Л. 1 Институт микробиологии НАН Беларуси, Минск 2 Институт ботаники им. Н.Г. Холодного НАН Украины, киев Целью исследования являлось изучение роста и об- Наиболее активное образование липидов (10–24 %) разования биологически активных соединений cordy- C.sinensis и C. militaris и полисахаридов происходило ceps sinensis и c. militaris в условиях глубинного куль- при рН 5,0–6,0. Изменение рН среды в кислую или ще тивирования. лочную зону снижало общий выход липидов в 1,5–1, Как показали исследования, C. sinensis и C. militaris раза, эндополисахаридов с 12,0 до 9,0 % и экзополиса предпочитали глюкозу, сахарозу и мелассу. Хорошо харидов с 4,0 до 2,5 г/л. Изменение рН среды с 4,0 до росли они на лактозе и крахмале, накапливая до 12 9,0 не оказало существенного влияния на жирнокис г/л биомассы, содержащей до 10 % полисахаридов, лотный состав липидов: во всех вариантах преоблада 15 % липидов, 22–25 % фосфолипидов, 20–24 % бел- ла кислота С18:2 (67–71 %). Наиболее высокий выход ка. В составе жирных кислот липидов преобладали биомассы и эндополисахаридов отмечен при скорости ненасыщенные, составившие 73–77 %. Из проверен- растворения кислорода 0,160 О2.л.ч, липидов – при ных источников азотного питания лучшими для роста 0,106 г О2.л.ч.

обоих видов оказались пептон, дрожжевой экстракт Проведенные исследования показали, что грибы рода cordyceps при глубинном культивировании на и (NH4)2HpO4. Стимулировало рост гриба внесение в среду (0,5г/л) растительных масел. Полученные ре- оптимизированных средах синтезируют полноценный зультаты позволили разработать промышленные пи- комплекс биологически активных соединений. За счет тательные среды, основу которых составили меласса, изменения температуры, рН среды и интенсивности сухая молочная сыворотка, ржаная мука. Сравнивая аэрации можно регулировать их соотношение в био полученные результаты с таковыми на стандартной массе.

глюкозо-пептонной среде, следует отметить, что на Оценка биохимического состава глубинного ми лучших промышленных средах значительно (с 33,8 целия исследованного гриба позволяет судить о его до 43,0–60,0 % у C. sinensis и с 12,08 до 55,84 % у C. высокой биологической ценности. Учитывая значи militaris) увечилось содержание ненасыщенной лино- мость ряда биологически активных соединений (по левой кислоты. Сумма ненасыщенных жирных кислот лисахаридов, липидов, фосфолипидов, эссенциальных на этих средах достигла 86–89 %. полиеновых кислот и др.) в жизнедеятельности чело Оптимальные температуры для активного роста, син- века возможно создание на основе этого ценного гри теза полисахаридов и липидов C. sinensis и C. militaris ба препаратов антиоксидантного и иммуномодулиру не совпадали: максимальное количество биомассы от- ющего действия для различных категорий населения, мечено при температуре 20–22 °С, полисахаридов и ли- в т.ч. спортсменов, лиц, подвергающихся физическим пидов – при 25–28 °С, фосфолипидной фракции в липи- нагрузкам, а также жителей, проживающих на эколо дах – при 20–22 °С. Анализ жирнокислотного состава гически загрязненных территориях. Препараты на ос липидов позволил выявить следующие особенности: с нове глубинной биомассы гриба рода Cordyceps, а так понижением температуры культивирования увеличива- же растительные и зерновые субстраты, обогащенные ется общая насыщенность липидов за счет повышения мицелием, могут найти применения в ветеринарии и удельного веса пальмитиновой и стеариновой кислот. животноводстве.

Повышение температуры культивирования до 26 и 30– 32 °С приводило к повышению ненасыщенности за счет Работа выполнена при поддержке БРФФИ-ГФФИУ усиленного синтеза линолевой кислоты. (грант Б07К-001).

УТИЛИЗАЦИЯ ЛИГНОСУЛЬФОНАТА ДЕРЕВОРАЗРУШАЮЩИМИ ГРИБАМИ Бойко М.И., Просянок М.В., Терещенко Г.С., Али М. Ибрагим Донецкий национальный университет, Донецк, Украина Лигносульфонат – продукт, образующийся при пе- блема требует глубокого изучения и разработки техно реработке древесины на целлюлозно-бумажных пред- логии по его утилизации. На современном этапе для приятиях при изготовлении бумаги и, являющийся утилизации углеродсодержащих материалов ученые загрязнителем окружающий среды. Поэтому эта про- ведут поиск активных деструкторов этих соединений Грибные биотехнологии среди микроорганизмов и грибов. Следует отметить, Полученные данные свидетельствуют о том, что штаммы P. ostreatus способны утилизировать лигно что в этом плане дереворазрушающие грибы как ути лизаторы лигносульфоната изучены недостаточно. Тем сульфонат, но с различной физиологической активнос более, что среди этих грибов выделяются те, которые тью.

предпочитают в первую очередь использовать целлю- Параллельно проведены эксперименты на полных лозный комплекс, другие – лигнин. Нами для иссле- средах Чапека-Докса, то есть с глюкозой, и присутс дования выбраны грибы, вызывающие белую гниль твием в них 0,1;

0,2 и 0,3 % лигносульфоната. Полу древесины. ченные результаты показали, что наличие в питатель Целью работы было изучить накопление биомассы ных средах глюкозы благоприятствовало увеличению штаммами НК-35, Р-70 и 007 Pleurotus ostreatus (Jacg.: биомассы у всех штаммов вешенки обыкновенной, по fr.) kumm и штаммами Д-1, Д-9 и Ч-03 irpex lacteus fr. сравнению со средами Чапека-Докса без глюкозы, но с на питательных средах, содержащих различные кон- лигносульфонатом. Накопление сухого вещества (8, центрации лигносульфоната. ± 0,24 г/л) штаммом НК-35 на полной среде и содер Установлено, что рост исследованных грибов на жанием 0,3 % лигносульфоната было на уровне кон среде Чапека-Докса без глюкозы, но в присутствии трольного варианта (8,70 ± 0, 40 г/л), штаммом Р- лигносульфоната в концентрациях 3 и 5 %, отсутс- (8,16 ± 0,34 г/л) – достоверно ниже ( 12,56 ± 0,52 г/л) твовал. Поэтому в последующих экспериментах кон- и штаммом 007 (13,32 ± 0,36 г/л) – достоверно выше центрация лигносульфоната в средах составляла 0,1;

контроля (11,16 ± 0,34 г/л).

0,2;

0,3;

0,5 и 1 %. Полученные результаты показали, Рост штаммов НК-35, К-99 p. ostreatus и штаммов что накопление биомассы штаммом НК-35 на средах Д-1, Д-9 и Ч-03 I. lacteus на глкозо-пептонных средах, с лигносульфонатом осуществлялось пропорциональ- содержащих 0,6;

1 и 2 % лигносульфоната показал, что но увеличению его концентрации. Наибольшее (2,56 накопление сухого вещества грибами осуществлялось ± 0,68 г/л) количество биомассы зарегистрировано на неодинаково. Так, для штамма НК-35 p. ostreatus оп питательной среде, содержащей 1 % лигносульфоната. тимальной для накопления биомассы концентрацией Штаммы Р-70 и 007 вешенки обыкновенной достовер- лигносульфоната являлась 0,6 %, для штамма К- но большее количество сухого вещества образовывали p. ostreatus – 1 %, а для штаммов Д-1, Д- 9 и Ч-03 I.

на средах Чапека-Докса, содержащих 0,5 % лигносуль- lacteus – 2 %.

фоната (3,58 ± 0, 18 и 2,36 ± 0,54 г/л соответственно). Таким образом, полученные результаты показыва ют, что штаммы Д-1, Д- 9 и Ч-03 irpex lacteus утили Следует отметить, что накопление биомассы штамма ми pleurotus ostreatus на среде Чапека-Докса с глюко- зируют лигносульфонат более активно, чем штаммы НК- 35 и К-99 Pleurotus ostreatus, о чем свидетельству зой (50 г/л) (контроль) было достоверно большим, чем на средах с лигносульфонатом. ет количество накопленного ими сухого вещества.

ВОЗМОЖНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ БАЗИДИАЛЬНЫХ ГРИБОВ ДЛЯ БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКОГО ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ МАЦЕРИРУЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ Бойко С.М., Филиппова Ю.О., Древаль К.Г.

Донецкий национальный университет, Донецк, Украина Базидиальные грибы своими ферментными систе- достаточно перспективными объектами в данном на мами разрушают субстрат, на котором они обитают. правлении.

Биодеструкция естественных субстратов это поли- Целью наших исследований было изучить способ энзимный процесс, в котором основную роль играют ность синтезировать ферменты целлюлозолитического внеклеточные целлюлазы, протеиназы, пектиназы, и пектолитического действия некоторыми представи большая часть которых находит практическое приме- телями базидиальных грибов для дальнейшего исполь нение в медицине, фармакологии и пищевой промыш- зования их как объектов биотехнологии. Объектами исследований были культуры К-1, I-6 irpex lacteus fr. и ленности. Так применение ферментных препаратов CS-1 coriolus sinuosus fr. Предварительные исследова целлюлолитического и пектолитического действия увеличивает экстракцию сапогенинов из стероидного ния показали способность данных культур к значитель сырья на 25–40 %, значительно увеличивает экстра- ному синтезу ферментов требуемой направленности.

кцию из лекарственного сырья гликоалкалоидов (пас- Так максимальная активность целлюлозолитических лен), сердечных гликозидов (джу, кендырь), эфирного ферментов в культуральных фильтратах наблюдалась масла (мята, шалфей). В настоящее время большую при культивировании на питательной среде содержа щей опилки древесины (род armeniaca) и составила для часть подобных препаратов получают с помощью низ культуры I-6 irpex lacteus на 15 сутки – 0,78 мг/мл, для ших грибов, однако, как показывают литературные культуры К-1 irpex lacteus – 0,57 мг/мл, для культуры источники, высшие базидиальные грибы являются 326 ii СъезД МИколоГов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел CS-1 coriolus sinuosus на 10 сутки – 0,18 мг/мл. Было коим образом не сказывалась на проявляемой гриба отмечено наличие у исследуемых грибов изофермент- ми активности. При добавлении к питательной среде, ных форм целлюлозолитического действия. в качестве субстрата, картофельной ткани активность культур К-1, I-6 i. lacteus оставалась на уровне пептон При исследовании пектолитических свойств куль пектиновой среды, а для культуры CS-1 c. sinuosus туральных фильтратов грибы культивировали на раз ных питательных средах. Наличие в питательной активность культурального фильтрата возрастала до среде субстрата (пектина) оказывало положительное 0,015–0,020 г/мл.

действие на активность пектолитических ферментов. Таким образом, полученные данные показали При культивировании на стандартной глюкозо-пеп- способность представителей высших грибов синте тонной среде активность у представителей irpex lac- зировать на хорошем уровне ферментные комплексы teus не превышала 0,020 г/мл, при внесении в среду целлюлозолитического и пектолитического действия.

пектина в концентрации 1 г/л активность культураль- Подбор состава питательной среды и его оптимизация ного фильтрата возрастала до значения 0,032 г/мл. положительно сказывается на проявляемой активнос Представитель coriolus sinuosus менее интенсивно ти, а так же ее сроках. Необходимо отметить высокую проявлял пектолитическую активность даже на среде полиферментную синтетическую способность пред ставителей irpex lacteus, которые можно рекомендо содержащей субстрат (0,007–0,010 г/мл). Дальнейшее повышение концентрации субстрата в среде (9 г/л) ни вать как перспективные объекты для биотехнологии.

ПОЛУЧЕНИЕ ЧИСТОЙ СУСПЕНЗИИ БАЗИДИОСПОР Владимирова С.Ф., Нефелова М.В., Жарикова Г.Г.

Российская экономическая академия им. Г.в. Плеханова, Москва Базидиомицеты и их культивирование привлекают ме 5–10 минут при I т.об., что отсекает значительную все большее внимание исследователей и практиков как часть более легких клеток других микроорганизмов.

продукты питания и как источники биологически ак- Возможна кратковременная обработка осадка базиди тивных и лечебных препаратов. В связи с этим встает оспор антисептиками с последующим промыванием и задача получения в достаточном количестве чистого центрифугированием. Важной частью процесса очист посевного материала в виде базидиоспор. Геминофо- ки базидиоспор является использование метода филь ры зрелых грибов, содержащие огромные количества трации через мембранный фильтр с соответствующей базидиоспор, обычно обсеменены другими микроор- величиной пор, например 10 мкм.

ганизмами, бактериями, дрожжами, низшими гриба- Проводимый на всех этапах очистки микроскопи ми, что сильно мешает при выращивании мицелия из ческий контроль и высев на вспомогательные пита базидиоспор. тельные среды показывают последовательное умень Для получения чистых базидиоспор из высушенных шение количества и разнообразия сопутствующих гименофоров разрабатывался комплексный метод пос- микроорганизмов.

ледовательной многоступенчатой обработки материала В конечном результате перенесенный в воду темно без нарушения жизнеспособности нужных спор. бурый или черный осадок представляет практически В методах используются такие свойства базиди- чистую суспензию базидиоспор, концентрация кото оспор как достаточно прочная защитная оболочка, рого может регулироваться соотношением количества большая масса и размеры, интенсивная окраска. Из- осадка и воды.

влечение базидиоспор из хранящихся в высушенном Вся работа проводится в боксе с использованием виде гименофоров ведется параллельно с освобожде- стерильной посуды, инструментов, воды, питательных нием от сопутствующих микроорганизмов. сред и пр.

Тщательно размешанный в нагретой до 40–50о С Количество, последовательность и параметры при воде порошок гименофоров несколько раз фильтруется меняемых методов могут варьироваться в зависимости через вату. Полученная взвесь спор многократно про- от степени загрязненности исходного и биологическо мывается водой и центрифугируется в мягком режи- го вида базидиоспор.

Грибные биотехнологии ПОВЫШЕНИЕ АКТИВНОСТИ БИОПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ ГРИБОВ-АНТАГОНИСТОВ TricHoderma SPP.

Войтка Д.В.

Институт защиты растений, Прилуки, Минская область Грибы Trichoderma spp. используются в мировой зерновом субстрате, и лигнорин, пс., титр спор не ме практике для создания и разработки биологических нее 5 млрд/г, получаемый способом глубинного куль тивирования на основе штамма-продуцента T. harzia препаратов исходя из высокого антагонистического потенциала, скорости роста и возможности культиви- num S-4.

рования в производственных условиях. Установлено, что добавление в зерновой субстрат Большинство препаратов на основе грибов-анта- для твердофазной наработки препарата триходермин гонистов Trichoderma spp. содержат живые клеточные БЛ неорганических солей – (NH4)2MoO4, MgSO4, структуры, их эффективность во многом зависит от NiCl2, znSO4, CoSO4, Li2SO4, MnSO4, kI, kBr – в количества жизнеспособных клеток. В связи с этим, концентрации 0,01 и 0,1 % индуцирует спорообразо повышение интенсивности спорообразования для пре- вание штамма-продуцента. Титр спор в сравнении с паратов, изготавливаемых твердофазным способом, контролем повышается на 4,3–162,2 %. Наиболее ак и стабилизация препаратов, изготавливаемых спосо- тивными индукторами спорообразования являются бом глубинного культивирования, – перспективные MgSO4, NiCl2, MnSO4 – добавление растворов указан направления по совершенствованию эффективности ных солей в питательную среду способствует повыше биопрепаратов на основе грибов Trichoderma spp. В нию титра спор в готовом препарате на 54,0–162,6 %.

этой связи исследование влияния неорганических со- Для биопрепарата лигнорин, пс. подобран консер лей на рост и развитие грибов Trichoderma spp. имеет вант – натрия бензоат, добавление которого способс большое значение, так как известно как положитель- твует повышению сохранности спор в препарате через ное, так и отрицательное влияние ионов металлов на 12 месяцев хранения в 2,5 раза по сравнению с препа микроорганизмы. Кроме того, ионы металлов входят в ратом без использования консерванта.

состав соединений, используемых для внекорневой и Таким образом, добавление в питательный субстрат корневой подкормок растений. для твердофазного культивирования биологическо В Беларуси разработано два биопрепарата на ос- го препарата триходермин-БЛ неорганических солей нове грибов Trichoderma spp.: триходермин-БЛ, титр микроэлементов способствует повышению интенсив спор не менее 6 млрд/г – изготавливается способом ности спорообразования. Стабилизация биопрепарата твердофазного культивирования на основе штамма- лигнорин, пс., полученного глубинным способом, до продуцента Trichoderma lignorum T 13–82 на сыпучем стигается добавлением натрия бензоата.

РАЗРАБОТКА СПОСОБА ПОЛУЧЕНИЯ КОМПЛЕКСА БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В ПТИЦЕВОДСТВЕ Гвоздкова Т.С.1, Черноок Т.В.1, Валюженич Т.Е.1, Щерба В.В.1, Бирман Б.Я.2, Гирис Д.А.2, Буйко Н.В.2, Зинина Н.В. 1 Институт микробиологии НАН Беларуси, Минск 2 Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н. вышелесского НАН Беларуси, Минск Существенное значение для всех видов и катего- широким спектром биологического действия для про рий птицы имеют биологически активные вещества мышленного птицеводства, являются актуальными и (БАВ) и особенно те, которые не синтезируются в их практически значимыми.

организме, являясь незаменимыми (в т.ч. каротинои- Таким источником БАВ является базидиальный гриб laetiporus sulphureus, глубинный мицелий кото ды, эссенциальные фосфолипиды и жирные кисло ты, провитаминные, стероидные соединения и др.). В рого содержит уникальный комплекс биологически макроорганизме они выполняют целый ряд жизненно активных веществ липидной природы, включающий важных функций, в частности, антиоксидантное, им- каротиноиды, фосфолипиды, полиеновые жирные муностимулирующее и др. В этой связи поиск источ- кислоты, провитамины и др.

ников биоактивных липидных соединений, особенно Настоящее исследование включало серию экспе природного происхождения, и разработка способов риментальных работ по отбору активного продуцента получения лечебно-профилактических препаратов с комплекса биологически активных веществ липидной 328 ii СъезД МИколоГов РоССИИ.


Тезисы докладов. Раздел природы среди 14 штаммов гриба L. sulphureus, опти- эргостерина – 4,2 %. Доминирующими в составе жир мизации условий его культивирования, подбору про- ных кислот липидов являются линолевая (42 – 55 % от мышленной питательной среды, которые в итоге обес- суммы жирных кислот) и олеиновая кислоты (15 % – печили активное накопление биомассы (свыше 16,0 18 %). На белковую и углеводную часть приходится г/л), в мицелии гриба – липидов (20–25 % в пересчете 1–2 % и 10–12 % соответственно. Установлена высо на сухие вещества мицелия), фосфолипидов (3–5 %), кая антиокислительная активность экстракта гриба ( линолевой кислоты (70–75 % от суммы жирных кис- 80 % по отношению к ионолу).

лот), каротиноидов (более 13 мг/г) и эргостерина (до При изучении острой токсичности экстрактивной 1,5 %). формы липокаротиноидной субстанции гибели лабора этиловый спирт оказался наиболее эффективным торных животных (белые мыши и крысы) не наблюда экстрагентом липокаротиноидного комплекса, позво- лось. По результатам испытаний LD50 установить не ляющий практически полностью извлекать каротино- удалось. При определении хронической токсичности иды и все целевые биоактивные липидные компонен- липокаротиноидного экстракта установлено, что ис ты из мицелия гриба. Исследование биохимического пользование его в дозах (по каротиноидам) – 0,34 – 3, состава лабораторного образца сконцентрированного мг/кг массы тела, в составе рациона белых крыс и цып экстракта, как основы лечебно-профилактического лят-бройлеров, не изменяло клинического состояния препарата иммуностимулирующего и антиоксидан- животных в течение всего срока наблюдения. экстракт тного действия, показало, что основная его часть ( оказывал ростостимулирующее действие (прирост у 80 % от с.в. экстракта) представлена липокаротиноид- крыс составил 8 – 9 %, у цыплят – 12,5 – 40 %). По ре ным комплексом. На долю липидов приходится 55,4 %, зультатам гематологических и биохимических иссле фосфолипидов – 14,5 %. Суммарное содержание каро- дований крови лабораторных животных установлено тиноидных пигментов в экстракте составило 5,5 %, его гепатопротекторное и антиоксидантное действие.

ГРИБЫ РОДА TRAMETEs fR. КАК ОБЪЕКТЫ БИОТЕХНОЛОГИИ Горшина Е.С.

Московский государственный университет инженерной экологии, Москва Интерес к базидиальным грибам как к объектам частности, наличие пряжек в глубинной культуре, не биотехнологии неуклонно растет год от года. Одним обходимое для микробиологического контроля в про из наиболее интересных родов в этом отношении яв- цессе производства, а также стабильность в глубинной ляется род Trametes fr. (coriolus), относящийся к се- культуре.

мейству Polyporaceae (Poriaceae) и принадлежащий Совместно с Институтом биохимии им. А.Н. Баха к экологической группе дереворазрушающих грибов. РАН разработана промышленная технология получения Грибы этого рода известны как продуценты различных ферментного препарата лакказы (п-дифенол:кислород биологически активных веществ, таких как иммуномо- оксидоредуктазы, КФ 1.10.3.2) с использованием при дулирующие полисахариды (T.versicolor (каваратаке) родного генетически интактного штамма-продуцента T.hirsuta 56. В качестве основного источника углерода известен как лекарственный гриб японской народной медицины и продуцент противоопухолевого препарата предложено использовать пшеничную муку. Состав крестина), ферменты (T.hirsuta, T.versicolor известны среды и условия культивирования (температура, рН как одни из лучших продуцентов лакказы), стеролы, среды, скорость перемешивания, аэрация) оптимизи вещества с антимикробной активностью и при этом не рованы. Разработанная технология отличается тем, что требовательны к составу питательных сред и облада- оксидазы, синтезируемые в соответствии с ней штам ют высокой скоростью роста, в том числе в глубинной мом, представлены преимущественно лакказой. Лак каза T.hirsuta обладает высоким окислительно-восста культуре, что делает их перспективными в качестве штаммов-продуцентов в промышленной биотехноло- новительным потенциалом (780±20 мВ), что позволяет гии. использовать препарат практически во всех областях В своей работе мы изучили особенности роста на возможного применения лакказ. Молекулярная масса различных средах и при различных условиях культи- лакказы составляет 70 кДа, изоэлектрическая точка – вирования 20 штаммов грибов это города, принадле- 4,5. На оптимизированной среде с пшеничной мукой жащих к 4 видам: T.hirsuta (Wulfen) pilбt, T.pubescens в оптимальных условиях культивирования оксидазная (Schumach.) pilбt, T.ochracea (pers.)Gilb. et Ryvarden, активность препарата составляет 20–60 МЕ за 65– T.versicolor (L.) Lloyd. Отбор штаммов проводили на часов роста. Подтверждена возможность применения основании анализа оксидазной активности (для штам- препарата для синтеза электропроводящего полиани ма-продуцента лакказы) и концентрации биомассы лина в процессе получения нанопокрытий для защиты (для продуцента биомассы). При выборе штамма учи- от электромагнитного излучения и статического элек тывали также морфологические характеристики, в тричества и коррозии, а также в качестве биосвязую Грибные биотехнологии щего в производстве биопластиков на основе древес- торную, онкостатическую и иммуномодулирующую новолокнистых материалов. Показана рентабельность активность. Препарат выпускается в таблетированной технологии. форме и имеет торговое название «Трамелан».

Совместно с ЗАО «Микротэп» разработана про- Разработанные технологии легко включаются в об мышленная технология получения биологически ак- щую схему переработки зерна, что позволяет получить тивной добавки на основе сухой биомассы T.pubescens дополнительные продукты (биологически активные 923–2, содержащей 1,3–в глюканы. Технология осу- белковые кормовые добавки) и снизить себестоимость ществима в промышленных ферментационных аппа- каждого из целевых продуктов.

Таким образом, грибы рода Trametes уже нашли ратах объемом 63 м3, что удешевляет производство.

Медико-биологические и клинические исследования применение в качестве штаммов-продуцентов в сов показали безопасность препарата и его высокую био- ременной рентабельной промышленной биотехноло логическую активность, в частности гепатопротек- гии.

ПАРАЗИТАРНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ В НОВОСИБИРСКОЙ ОБЛАСТИ И ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ХИЩНЫХ ГРИБОВ В БОРЬБЕ С ГЕЛЬМИНТОЗАМИ ЖИВОТНЫХ И ЧЕЛОВЕКА Ефремова Е.А.1, Бонина О.М.1, Коптенкова Н.Б.2, Теплякова Т.В.3, Урютова Л.А. 1 ГНУИнститут экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего востока Со Россельхозакадемии, 2 Управление Роспотребнадзора по Новосибирской области, 3 ФГУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии вектор Роспотребнадзора, п.кольцово Новосибирской области 4 Региональное управление № 25 Федерального медико-биологического агентства Ежегодно на протяжении многих лет в городе Но- районах. Такая неравномерность характерна для при восибирске и Новосибирской области регистрируются родно-очаговых заболеваний и свидетельствует о том, 13–17 нозоформ паразитарной этиологии. Наиболее что в разных районах складываются неравные условия актуальными заболеваниями являются лямблиоз, энте- для функционирования и поддержания очагов опис робиоз, описторхоз и токсокароз. Среди этих болезней торхоза.

по общей заболеваемости населения в Новосибирске Не последнюю роль в процессе заражения живот и Новосибирской области описторхоз занимает третье ных и человека паразитами даже после дегельмин место. При этом он лидирует с огромным отрывом от тизации высокоэффективными, и, как правило, до других природно-очаговых болезней. это неудивитель- рогостоящими препаратами, играет факт отсутствия но, так как Новосибирская область составляет часть са- каких–либо мероприятий по ограничению численнос мого крупного в мире Западно-Сибирского очага опис- ти яиц и личинок во внешней среде. Без ограничения торхоза, занимающего бассейн рек Обь и Иртыш. контаминации внешней среды инвазионными агента Заболеваемость описторхозом населения города ми немыслима идея оптимизации противопаразитар Новосибирска и области в целом отличается слабо ных мероприятий.

(127,6 и 120,0 на 100000 населения, соответственно). Особую актуальность в этой связи представляют В пищу жителей Новосибирска в наибольших коли- гельминтозы домашних животных, которые нередко чествах попадает карповая рыба (язь, лещ, плотва, служат источниками заражения человека. Известно, елец), отловленная в Новосибирском водохранилище, что из 82 видов гельминтов, зарегистрированных у со в акватории которого имеются локальные очаги опис- бак, 26 из них паразитирует у человека. Важное эпи торхоза. демиологическое значение имеет токсокароз – опас Что касается показателей заболеваемости детей па- ное заболевание человека, источником возбудителя разитарными болезнями, то в отличие от лямблиоза, которого являются собаки. Число учтённых больных в энтеробиоза и аскаридоза, в большей степени поража- России за последнее десятилетие увеличилось почти в ющих детей, описторхозом чаще болеет взрослое на- 100 раз, что связано не только с внедрением современ селение. Так, например, в Новосибирске относитель- ных методов диагностики, но и высокой численнос ный показатель заболеваемости (на 100000 населения) тью собак в городах. Только в Москве заражённость в целом составляет 127,6, то он же для детей до 14 бродячих собак токсокарозом достигает 55 %, а в 1г лет – 45,74, детей до 17 лет – 53,3. их фекалий содержится до 40тыс. яиц паразита. это Заболеваемость людей описторхозом по районам создаёт условие для высокого риска заражения токсо области распределена очень неравномерно и варьи- карозом населения, в первую очередь, детей (Сергиев рует от 6,36 в Болотнинском до 972,4 в Венгеровском В.П., 2005).


330 ii СъезД МИколоГов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел Для контроля численности паразитических нематод высокую лярвицидную активность гриба (93–100 %), домашних животных во внешней среде можно исполь- НО И НАЛИЧИЕ ОВОЦИДНЫХ СВОЙСТВ, зовать хищные грибы, обитающие в почве и являющи- Полученные результаты подтверждают актуаль еся их естественными врагами. Исследования, прове- ность исследований, направленных на поиск биоло денные нами с эффективным штаммом. Duddingtonia гических способов борьбы с возбудителями парази flagrans f-882 на ряде возбудителей гельминтозов жи- тарных болезней во внешней среде с использованием вотных (мыши, лошади, маралы )показали не только препаратов на основе хищных грибов – гифомицетов.

ГЛУБИННОЕ КУЛЬТИВИРОВАНИЕ НЕКОТОРЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ Кожемякина Н.В., Гурина С.В., Ананьева Е.П.

ГоУ вПо Санкт-Петербургская химико-фармацевтическая академия, Санкт- Петербург Высшие базидиальные грибы являются проду- культивирования и сопровождалось резким уменьше центами целого ряда биологически активных ве- нием содержания глюкозы и аминного азота в среде.

ществ. Многие лекарственные и профилактические Максимальный выход биомассы наблюдали на 9– препараты производятся на основе плодовых тел сутки культивирования, причем утилизация источника базидиомицетов, однако, перспективным методом углерода происходила практически полностью, а уро современной биотехнологии является глубинное вень содержания источников азота сохранялся значи культивирование грибов, так как оно позволяет син- тельным до конца ферментации.

тезировать стандартную продукцию с заданными Все штаммы грибов были способны к росту в широ свойствами. ком диапазоне рН от 3.0 до 7.5, наибольший выход был Были отработаны условия глубинного культивиро- отмечен при исходном рН среды 6.0–7.0. В процессе вания некоторых базидиомицетов:: flammulina velu- культивирования значение рН уменьшалось в течение tipes, fomes fomentarius и Ganoderma applanatum. 8 суток до 3.5, а затем возрастало до 6.5, что вероятно Для изучения влияния источников углерода на рост связано с интенсивным ростом культуры за счет пот грибов в базовой питательной среде (синтетическая ребления продуктов ЦТК в качестве субстрата.

глюкозо – пептонная среда) глюкозу заменяли на дру- При изучении способа культивирования было ус гие источники углерода, такие как сахароза, раствори- тановлено, что в динамических условиях выход био мый и нерастворимый крахмал, а также варьировали массы на оптимальной питательной среде был в 2 раза концентрацию глюкозы от 5 до 10 г/л. Наибольший выше, чем при выращивании в статических условиях.

выход биомассы наблюдали на среде с концентрацией В качестве посевного материала, обеспечивающего глюкозы 10 г/л, замена глюкозы на другие источники максимальное накопление грибного мицелия, исполь углерода приводила к снижению выхода. При исполь- зовали пеллеты 4-х суточной культуры грибов.

зовании пептона в качестве основного и единствен- На основании полученных результатов для дальней ного источника азота в базовой среде выход мицелия ших исследований была выбрана глюкозо – пептонная был наименьшим (не более 3г/л). Существенное повы- среда, так как она обеспечивала достаточно высокий шение выхода отмечали при добавлении дрожжевого выход биомассы и имела постоянный компонентный автолизата, что, вероятно, связано с наличием в нем состав, что необходимо для стандартизации условий необходимых для роста грибов витаминов, макро- и культивирования и получения конечного продукта с микроэлементов. Введение в базовую среду дополни- постоянными характеристиками.

тельных источников неорганического азота (нитрата В дальнейших исследованиях было показано, что натрия или сульфата аммония) не приводило к уве- углеводные фракции, выделенные из биомассы грибов личению выхода. Нужно отметить, что активное на- обладали иммунобиологической и противоопухолевой копление биомассы начиналось только с 5- 6-х суток активностью.

ГРИБЫ РОДА Penicillium КАК ПРОДУЦЕНТЫ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫХ АЗОТСОДЕРЖАЩИХ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ.

Козловский А.Г., Желифонова В.П., Антипова Т.В.

Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.к.Скрябина РАН, Пущино Микробное биоразнообразие в различных геогра- ченным, но практически неисчерпаемым источником фических и экологических нишах является малоизу- новых биологических структур, новых биорегуляторов.

Грибные биотехнологии Микроскопические грибы рода Penicillium, явля- ричных метаболитов. Были проведены исследования ются одними из наиболее креативных и перспектив- по оптимизации сред культивирования и определению ных источников биологически активных соединений. оптимальных условий биосинтеза вторичных метабо В настоящее время активный поиск продуцентов но- литов.

вых биологически активных соединений ведется сре- Новые продуценты новых биологически активных ди штаммов грибов, выделенных из экстремальных соединений и уже известных практически ценных ве местообитаний, так как новые вторичные метаболиты ществ были отобраны среди штаммов грибов, относя щиеся к роду Penicillium и выделенных из обычных (или новые потенциально биологически активные ве щества), по-видимому, помогают продуценту выжи- и малоизученных местообитаний. Для выделения, вать в специфических условиях и адаптироваться к установления строения и идентификации вторичных ним. В то же время, весьма вероятно, что штаммы гри- метаболитов были использованы современные хими бов, выделенные из древних мерзлотных отложений и ческие и физико-химические методы. В результате ра подвергавшиеся длительной природной консервации, боты были открыты новые, ранее неизвестные вторич будут отличаться по физиологическим и биохими- ные метаболиты различных структурных групп такие, ческим характеристикам (включая спектр вторичных как дикетопиперазины (гландиколины, пискаринины, метаболитов) от представителей тех же видов, но про- феллутанины и др.), хинолиновые алкалоиды (хино шедших другой путь эволюции. цитринины), эргоалкалоиды ( аурантиоклавины, эпок Интерес также представляли штаммы, местообита- сиагроклавин-1 и агроклавин-1), а также семейство N нием которых служила такая искусственная экобиосис- N-димеров эргоалкалоидов. эти соединения являются тема, как орбитальный комплекс «Мир», в котором в биологически активными веществами широкого спек специфических экстремальных условиях космическо- тра действия. Среди них есть биомолекулы, обладаю го полета эволюционные процессы протекали очень щие антимикробным действием, цитотоксичностью быстро. В качестве перспективных штаммов были (хиноцитринины, пискаринины), воздействующие на исследованы также грибы выделенные из почв, под- ЦНС, а также ингибиторы различных гормонов (эрго вергнутых антропогенным загрязнениям и находя- алкалоиды и их полусинтетические производные). эти щихся в регионах с неблагоприятными условиями для вещества крайне перспективны в качестве основы для существования. При поиске креативных штаммов учи- создания лекарственных препаратов.

тывались также таксономические характеристики и Изучены некоторые аспекты физиологии и биохи географическое положение местообитаний. Наиболее мии продуцентов. Созданы научные основы для разра вероятно найти активные штаммы среди представите- ботки биотехнологических методов получения биоло лей видов, которые уже известны как продуценты вто- гически активных метаболитов.

БИОДЕГРАДАЦИЯ НЕФТЯНЫХ УГЛЕВОДОРОДОВ ПРИ СОВМЕСТНОМ КУЛЬТИВИРОВАНИИ lenTinuS TiGrinuS И rHodococcuS erYTHroPoliS Костина Е.Г., Надежина О.С., Атыкян Н.А., Ревин В.В.

Мордовский государственный университет им. Н.П. огарева, Саранск Нефть и нефтепродукты в настоящее время явля- Объектом исследования служили гриб Lentinus ются самыми распространенными стойкими высо- (panus) tigrinus штамм ВКМ f-3616D, выделенный котоксичными техногенными загрязнителями. В ус- сотрудниками кафедры биотехнологии МГУ им. Н.П.

ловиях нефтяного загрязнения в водных экосистемах Огарева, и культура бактерий Rhodococcus erythopolis разрушение углеводородов в основном идет за счет штамм ВКМ Ас-858Т, полученная из Всероссийской деятельности микроорганизмов, поскольку они имеют коллекции микроорганизмов. Выращивание культур сравнительно высокий потенциал разрушения ксено- микроорганизмов проводили на среде эггерта с добав биотиков и проявляют способность к быстрой метабо- лением 1 и 5 % дизельного топлива в перемешиваемых лической перестройке и обмену генетическим матери- условиях на качалке (200 об/мин) при 26 °С в течение алом. В связи с этим им придается большое значение 10 суток. Убыль дизельного топлива определяли с по при разработке путей биоремедиации загрязненных мощью концентратомера «КН-2м» (Россия).

объектов. Долгое время считалось, что основная роль В результате проведённых нами исследований было в биодеградации углеводородов принадлежит бактери- обнаружено, что концентрация дизельного топлива по ям, однако позднее стало ясно, что следует учитывать разному влияет на его убыль.

и деструкционную деятельность грибов, а также воз- При внесении 1 % дизельного топлива при культи можность их совместной деятельности. В связи с этим вировании бактерии R. erythopolis к 10 суткам роста целью работы было изучение убыли дизельного топ- наблюдалась его максимальная убыль, которая соста лива при совместном культивировании культур гриба вила 64,3 %. При увеличении концентрации дизельно lentinus tigrinus и бактерии rhodococcus erythropolis. го топлива до 5 % убыль его также возрастала, однако 332 ii СъезД МИколоГов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел она была несколько ниже и к 10 суткам роста культуры При добавлении дизельного топлива в среду при составила 58,2 %. Сравнивая убыль 1 и 5 % дизельно- совместном культивировании L. tigrinus и R. erythropolis го топлива культурой R. erythropolis можно отметить максимальная убыль нефтепродукта также наблюдалась одинаковую закономерность влияния концентрации на 10 сутки роста и составила в варианте с концентра углеводорода. Не смотря на то, что в варианте с 5 % цией дизельного топлива 1 % – 68,5 %, а в варианте с дизельного топлива суммарная убыль ниже, чем в ва- концентрацией дизельного топлива 5 % – 65,2 %.

Таким образом, совместное культивирование l.

рианте с 1 % дизельного топлива, по абсолютным еди tigrinus и r. erythropolis на средах с добавлением ди ницам за один и тот же промежуток времени культу ра R. erythropolis «съела» дизельное топливо в 4 раза зельного топлива приводит к увеличению его убыли больше, чем в случае с 1 % содержанием. и превышает таковое в случае монокультивирования такого активного нефтедеструктора, как r. erythropo При культивировании L. tigrinus на среде с 1 % ди lis, что в свою очередь позволяет активно деструкти зельного топлива убыль данного гидрофобного суб страта к10 суткам роста составила 39,7 %, а в варианте ровать углеводороды нефтепродуктов и может найти с 5 % – 24,2 %. При этом, как и в случае с R. erythropolis широкое применение в технологиях биоремедиации убыль дизельного топлива по абсолютным величинам водных экосистем.

была выше в 5 % варианте, хотя по относительным – в Работа выполнена при поддержке программы «Раз 1 %. Кроме того, суммарная убыль была в 2–3 раза витие научного потенциала высшей школы 2006–2008»

ниже, чем при культивировании R. erythropolis. РНП.2.1.17708.

ПОГРУЖЕННАЯ БИОМАССА БАЗИДИАЛЬНЫХ КСИЛОТРОФНЫХ ГРИБОВ: ПОЛУЧЕНИЕ В УСЛОВИЯХ ВЫСОКОПРОДУКТИВНЫХ КРАТКИХ ПРОЦЕССОВ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ И СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ СВОЙСТВ Краснопольская Л.М.1, Автономова А.В.1, Белицкий И.В.1, Леонтьева М.И.1, Соболева Н.Ю.1, Баканов А.В.1, Евсенко М.С.1, Усов А.И.2, Трещалина Е.М.3, Седакова Л.А.3, Исакова Е.Б.1, Бухман В.М. 1 ГУ НИИНА им. Г.Ф.Гаузе РАМН, Москва 2 ИоХ им. Н.Д.зелинского РАН, Москва 3 НИИ ЭДиТо ГУ РоНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН, Москва Создание новых субстанций для лекарственных биомассы, в создании высокопродуктивных кратких средств, биологически активных добавок к пище или процессов погруженного культивирования отобран иных продуктов на основе лекарственных базидио- ных продуцентов, в сравнительной оценке противо мицетов, включает три основных взаимозависимых опухолевого действия ряда препаратов, полученных из направления исследований. Первое связано с выбором погруженной культуры исследуемых базидиомицетов.

вида и штамма гриба, выделением и идентификацией В работе использовали культуры базидиальных его биологически активных соединений. Второе – с ксилотрофных грибов коллекции лаборатории биосин разработкой биотехнологий или нанобиотехнологий теза биологически активных соединений ГУ НИИНА культивирования отобранных продуцентов. Способы им. Г.Ф.Гаузе РАМН. Отбору штаммов-продуцентов культивирования продуцентов должны обеспечивать предшествовало изучение штаммового разнообразия, при любом объеме производства стабильность их включая исследование макро- и микроморфологиче химического состава и воспроизводимость биологи- ких признаков на вегетативной и генеративной стади ческих эффектов, быть легко масштабируемыми для ях онтогенеза, показателей роста на плотных средах создания необходимой сырьевой базы, максимально и в погруженной культуре, пищевых потребностей.

снижать экономические риски производства. Третье В качестве критериев эффективности способов пог направление включает медико-биологические и токси- руженного культивирования были предложены выход кологические исследования. воздушно-сухой биомассы не менее 20 г /л культураль В настоящей работе обобщены результаты иссле- ной среды и длительность процесса культивирования дования противоопухолевых свойств погруженной не более 5–6 суток. Предложенные высокопродуктив биомассы ксилотрофных базидиальных грибов. Задачи ные краткие способы погруженного культивирования работы заключались в выявлении перспективных про- штаммов-продуцентов включали рецептуры оптими дуцентов, сочетающих высокую противоопухолевую зированных жидких питательных сред, условия аэра активность со значительным выходом погруженной ции и перемешивания, температурные режимы. Мак Грибные биотехнологии симальный выход воздушно-сухой биомассы – 35–38 в работе штамм p. eryngii. Торможение роста опухоли г/л обеспечили разработанные способы погруженного при применении водного экстракта мицелия культуры культивирования Hypsizygus ulmarius и Flammulina ve- этого вида составило 16 %. Изучение моносахарид lutipes. Созданные биотехнологии погруженного куль- ного состава водорастворимых полисахаридов мице тивирования базидиомицетов были успешно апроби- лия изученных культур показало наличие глюкозы, рованы в промышленных биореакторах объемом 1 м3. галактозы, арабинозы, маннозы, ксилозы и рамнозы.

Изучение противоопухолевого действия проводили Основными моносахаридами были глюкоза и галак in vivo на моделях перевиваемых мышиных опухолей. тоза. Наибольшее содержание глюкозы в суммарной Существенное внимание было уделено выбору опу- фракции водорастворимых полисахаридов мицелия холевого штамма, способа и длительности введения было отмечено у L. edodes. Содержание водораство испытуемых препаратов, используемых доз. Были по- римых полисахаридов зависело от видовой и штам казаны различия использованных моделей опухолей к мовой принадлежности культуры и от состава среды испытуемым препаратам. Для выявления четких разли- для погруженного культивирования. В погруженном чий в противоопухолевой активности были отобраны мицелии изученных культур оно варьировало в преде опухоли, отличающиеся невысокой чувствительностью. лах 9–35 %. Противоопухолевым действием обладали Основная часть работы была проведена с использова- не только водорастворимые, но и щелочерастворимые нием подкожно трансплантированного лимфолейкоза полисахариды G. lucidum, в том числе ранее не опи Р388 при пероральном введении препаратов. В качестве санный у этого вида разветвленный ксиломаннан, по испытуемых препаратов использовали сублимирован- казавший высокую биологическую активность. Изуче ную погруженную культуру базидиальных грибов, раз- ние зависимости противоопухолевого эффекта от дозы мельченную погруженную биомассу, водные экстракты полисахаридов выявило перспективность применения погруженной биомассы, в том числе предварительно низких доз. Полученные на основе погруженной био высушенные, препараты водо- и щелочерастворимых массы базидиальных грибов оригинальные препараты полисахаридов мицелия различной степени очистки, обладали более высокой противоопухолевой активнос композиции вышеперечисленных препаратов. тью по сравнению с рядом препаратов отечественного На основании изучения противоопухолевых и зарубежного происхождения, в том числе китайского свойств погруженной биомассы 13 видов базиди- и французского. С целью повышения противоопухо омицетов были отобраны перспективные штаммы левой активности были испытаны композиционные Hericium erinaceus, H. ulmarius, f. velutipes, Ganoderma препараты и выявлены виды базидиальных грибов, lucidum, Lentinus edodes, Lyophyllum shimeji, pleurotus совместное применение которых приводит к усиле ostreatus, p.djamor, Trametes versicolor. Впервые было нию эффекта. Далее были проведены токсикологичес описано противоопухолевое действие водораствори- кие исследования наиболее перспективных компози мых полисахаридов мицелия H. ulmarius. Показатели ционных препаратов, а также изучение возможности торможения роста опухоли под воздействием препара- их использования в сочетании с рядом цитостатиков.

тов H. ulmarius были значительно выше таковых препа- Полученные результаты свидетельствовали о перспек ратов мицелия исследованных штаммов H. marmareus. тивах практического использования разработанных Из изученных видов базидиомицетов противоопухо- композиционных препаратов на основе погруженного левым действием не обладал только использованный мицелия отобранных штаммов базидиальных грибов.

ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ МИКРОМИЦЕТОВ С ТЯЖЕЛЫМИ МЕТАЛЛАМИ: АККУМУЛЯЦИЯ И ТОКСИЧНОСТЬ Куимова Н.Г., Жилин О.В.

Амурский филиал Ботанического сада-института Дво РАН, Благовещенск Само понятие «тяжелые металлы» (ТМ) часто вод и извлечения ценных компонентов из промыш воспринимаются как синоним понятия токсичные ленных растворов, для биоремедиации экосистем, металлы, однако многие из них являются жизненно загрязненных токсикантами. Целью исследований необходимыми элементами. Индивидуальная потреб- явилось изучение аккумуляции тяжелых металлов ность в эссенциальных ТМ невелика, однако. многие (fe, Co, Mn, Cu, zn, Ni. pb. Hg, Ag) биомассой микро организмы склонны к их бионакоплению, что может мицов, а также токсическое воздействие металлов на привести к тяжелым нарушениям метаболизма. Изу- клетки грибов. Для экспериментальных исследова ний использовали штаммы Penicillium chrysogenum, чение закономерностей взаимодействия ТМ с клетка P. luteum, выделенные из пород россыпных место ми микроорганизмов имеет важное значение для по нимания механизмов адаптации микроорганизмов к рождений золота Амурской области и хранящиеся в экстремальным условиям существования, для разра- коллекции штаммов в лаборатории микробиологии и ботки биотехнологических методов очитки сточных биохимии ИГиП ДВО РАН.

334 ii СъезД МИколоГов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел Изучение динамики биосорбции показало: на- точной стенки). В другую группу входят те металлы, ибольшая скорость сорбции металлов биомассой аккумуляция которых происходит главным образом во наблюдалась в течение 60 мин. Установлена разная внутриклеточном пространстве – это Hg и Co.



Pages:     | 1 |   ...   | 18 | 19 || 21 | 22 |   ...   | 32 |
 





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.