авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:     | 1 |   ...   | 19 | 20 || 22 | 23 |   ...   | 32 |

«НАЦИОНАЛЬНАЯ АКАДЕМИЯ МИКОЛОГИИ ОБЩЕРОССИЙСКАЯ ОБЩЕСТВЕННАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ СОВРЕМЕННАЯ МИКОЛОГИЯ В РОССИИ ТОМ 2 ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ ВТОРОГО ...»

-- [ Страница 21 ] --

степень извлечения ТМ за первые 60 мин взаимодейс- Токсическое воздействие металла на клетки прояв твия: Hg (87 %) pb, zn (73 %) Cu, Co (58–65 %) лялось в дефомации мицелия (неравномерное набуха fe, Mn, Ni (40–48 %). Однако через 24 ч извлечение ние гиф), отслаивание клеточной стенки, нарушение всех металлов составило более 90 %, за исключением ЦМ, пигментообразование. В качестве одного из ос zn и Ni (78 %). Результаты исследований показали, новных протекторных механизмов клеток мицелия к что живая биомасса микромицетов активно аккуму- воздействию токсичных металлов явилось выделение лирует такие токсичные металлы, как Hg+2 (до 120 большого количества внеклеточных полимеров, чаще мкг /г сухого вещества). pb (от 100 до 300 мг/г), Cd всего имеющих полисахаридную основу. Подобные (60 мг/г). Основным механизмом аккумуляции ТМ выделения способны к значительному связыванию ме микромицетами является биосорбция на клеточной таллов и устранению их токсического воздействия на стенке, за исключением ртути и кобальта, которые на- клетки. Наиболее активное выделение слизи наблюда иболее активно накапливались во внутриклеточном лось при воздействии Hg, pb, fe, zn на биомассу. Ус пространстве. При продолжительном взаимодействии тановлено влияние ТМ на рост и спорообразование ТМ с биомассой микромицетов отмечено формирова- микромицетов, степень такого воздействия зависит от ние минеральных агрегатов на клеточной стенке и в концентрации металлов. Ингибирование роста и споро межгифальном пространстве, инкрустация мицелия образования вызывают такие металлы как fe, Co, Mn, металлом. Все изученные металлы условно можно pb, тогда как Hg, Ag, – стимулируют данные процессы разделить на две группы. Первую группу составляют при концентрациях ниже 0,03 мг/л. Концентрирование металлы, аккумуляция и трансформация которых про- ТМ происходило главным образом на широких гифах, исходит на клеточной стенке – это fe, Mn, Cu, pb. Для молодой растущий мицелий оставался чистым. Отсю таких элементов, как zn, Ni, Ag показаны не только да можно сделать вывод, данный процесс является од активная биосорбция, но и биогенная минерализация ним из способов устранения токсического воздействия металлов (формирование агрегатов, литификация кле- ТМ на клетки.

ПОИСК МИКРООРГАНИЗМОВ – АКТИВНЫХ ПРОДУЦЕНТОВ ЛАКТАТОКСИДАЗЫ Куплетская М.Б., Кураков А.В., Нетрусов А.И.

Московский государственный университет имени М.в. ломоносова, Москва Лактатоксидаза (КФ 1.1.3.X) – фермент, катализи- огурцов. К настоящему времени выделено 18 штаммов G. candidum, с активностью при первоначальной про рующий окисление лактата до пирувата и перекиси во дорода. Фермент необходим для определения молоч- верке от 3 до 50 ед./л.

ной кислоты у больных в постинсультном состоянии. Для образования лактатоксидазы клеткам необхо Лактатоксидаза – внутриклеточный фермент, который дима сильная аэрация. Очень важен также состав сре встречается у немногих микроорганизмов. ды, особенно соотношение в ней глюкозы и лактата.

При поиске продуцентов лактатоксидазы было про- Благоприятно сказывается периодическое внесение верено 50 музейных штаммов мицелиальных грибов и лактата. Стабилизацию лактатоксидазы в гомогенате бактерий, близких к тем видам, у которых описано в гриба обеспечивают замораживание при –18 °С, до литературе наличие этого фермента. Однако лишь два бавление инозита, глицерина. В результате подбора штамма грибов рода Gliocladium имели слабую лакта- среды и условий культивирования выход лактатокси токсидазную активность. Одновременно были постав- дазы у выделенного штамма G. candidum достиг 130– лены накопительные культуры с использованием 60- 140 ед./л, что значительно выше величины (19 ед./л), ти различных природных источников. Большинство для описанного в литературе для такого же вида гриба штаммов, выделенных из накопительных культур, не (Sztajer et al., 1996).

дали положительного результата. И только из рассола Куплетская М.Б., Сухачева М.В., Кураков А.В., Не квашеных огурцов удалось получить штаммы Geot- трусов А.И. Поиск микроорганизмов – продуцентов richum candidum, обладающие лактатоксидазой. этот лактатоксидазы // Прикладная биохимия и микробио вид грибов выделялся почти из всех образцов рассола логия, 2007, т.43, №2, с.199–202.

Грибные биотехнологии ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ИСТОЧНИКОВ АЗОТА И УГЛЕРОДА НА РОСТ ВЫСШИХ ДЕРЕВОРАЗРУШАЮЩИХ БАЗИДИАЛЬНЫХ ГРИБОВ Линовицкая В.М.1, Дзыгун Л.П.1, Клечак И.Р.1, Бухало А.С. 1 Национальный технический университет Украины «киевский политехнический институт», факультет биотехнологии и биотехники, киев 2 Институт ботаники им.Н.Г.Холодного НАН Украины, 01601, киев Одним из актуальных направлений исследований Глубинное культивирование проводилось в колбах в микологии и биотехнологии является поиск и разра- эрленмейера разного объема на качалке (160–170 об/ ботка новых экологически чистых пищевых продуктов мин) при температуре +28 °С. Определение влияния и лечебно-профилактических медицинских препаратов различных источников азота и углерода на интенсив на основе высших дереворазрушающих базидиальных ность роста исследуемых штаммов проводили по ме грибов. К известным продуцентам с лекарственными тодике, предложенной Бухало (1988). При этом, для свойствами относятся такие ксилотрофные базиди- каждого варианта питательной среды в качестве единс омицеты как Grifola frondosa (Dicks: fr.)S.f.Gray и твенного добавляемого источника углерода исполь Schizophyllum commune fr. На их основе получают зовали одно из следующих веществ в концентрации ряд противоопухолевых препаратов: Sonifilan, SpG и эквивалентной 20 г глюкозы: инулин, ксилозу, лактозу, Schizofyllan из культуральной жидкости S.commune;

мальтозу, маннит, глицерин, крахмал, сахарозу, фрук грифолан, грифрон и др. из биомассы G.frondosa, об- тозу или глюкозу. Азотсодержащие соединения (гис ладающие иммуномодулирующим, онкостатическим, тидин, лейцин, лизин, триптофан, NH4NO3, NaNO3, антибактериальным, антивирусным, противовоспали- NaNO2, NH4Cl, пептон) вносились в концентрации эк тельным и гепатопротекторным действием [Stametes, вивалентной 0,33 г/л азота. Влияние выбранных источ 2000;

Wasser, 2002]. К менее изученным дереворазру- ников азота и углерода на рост исследуемых штаммов шающим базидиомицетам с лекарственными свойства- определяли по уровню накопления биомассы (весовым ми можно отнести трутовик серно-желтый laetiporus методом) на десятые сутки культивирования.

sulphureus (Bull.: fr.) Murrill., у которого установлены В результате проведенных исследований роста бази антиоксидантная, антибиотическая и противовирус- диомицетов на разных источниках азота было установ ная активность и Polyporus squamosus (Huds.) fr. с лено, что у S.commune и P.squamosus наибольшее коли антифунгальными и антибактериальными свойствами чество биомассы наблюдалось на средах с добавлением пептона, для G.frondosa лучшим источником был нитрат [Бабахин, 1999;

Бадалян, 2000;

Suay, 2000;

Тихонова, аммония, а для штаммов l.sulphureus высокий уровень 2001;

Гвоздкова 2002, 2004;

Ершова, 2003].

Так как одним из важных этапов создания биотех- накопления биомассы был отмечен как в случае исполь нологии является подбор оптимальных источников зования пептона, так и нитратов аммония или натрия.

Таким образом, базидиомицет l.sulphureus способен азота и углерода для глубинного культивирования штаммов-продуцентов, то целью представленной ра- утилизировать более широкий спектр источников азота, чем S.commune, P.squamosus и G.frondosa – как амин боты было исследование влияния различных азот- и углеродсодержащих веществ на накопление биомассы ный, так и в виде нитратов, нитритов и солей аммония.

лекарственными базидиальными грибами. Изучение влияния источников углерода на рост гри Объектами исследований были 5 штаммов бази- бов показало, что для изученных видов лучшими для диомицетов, относящихся к родам Grifola, laetiporus, получения биомассы также были различные вещест Polyporus и Schizophyllum, из коллекции шляпочных ва: крахмал и глюкоза для l.sulphureus и G.frondosa, глюкоза и глицерин для S.commune и фруктоза для грибов Института ботаники им.Н.Г.Холодного НАН Украины. P.squamosus.

эНТОМОПАТОГЕННЫЕ ГРИБЫ КАК ИСТОЧНИК НОВЫХ РЕСУРСОВ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ Лиховидов В.Е., Исангалин Ф.Ш., Наумов А.Н., Артюхин В.И., Асланян Е.М., Быстрова Е.В., Коробова Н.А., Уткина Н.Н.

ФГУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии», оболенск, Московская область Для изучения ресурса энтомопатогенных грибов природно-климатические зоны. В результате поиска, на территории России ГНЦ ПМБ провел в 2002–2005 выделения и идентификации микромицетов создана годах 9 научных экспедиций в различные регионы и самая крупная в России и странах СНГ коллекция эн 336 ii СъезД МИколоГов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел томопатогенных грибов. Коллекция претендует также них содержатся значительные количества свободных на одно из первых мест в Европе. Рабочая коллекция жирных кислот. Впервые показано, что только не насчитывает около 1200 штаммов 170 видов 70 родов насыщенные жирные кислоты (пальмитолеиновая, микромицетов. Микологический гербарий состоит из олеиновая, линолевая и линоленовая) обладают мос 2500 эксикатов 44 видов грибов. китоцидной активностью: LC50 для личинок комаров Проведен скрининг штаммов энтомопатогенных составляет 145–680 м.д. это позволяет рассматривать грибов anamorphic ascomycota на активность в отно- их в качестве потенциальных агентов для создания но шении тест-объектов эпизоотологического и фармако- вых москитоцидных препаратов логического скрининга: кровососущие комары – aedes Протестировано на антимикробную активность aegypti;

возбудитель бактериоза – Staphylococcus aureus 185 штаммов, из них 38 штаммов обладают бактери (штамм ATCC 6538, и метицилин-устойчивый штамм цидними и фунгициднымии свойствами. Антимик MRSA 353);

возбудитель микоза – candida albicans. робная активность ряда штаммов носит селективный Протестировано на москитоцидную активность характер, что является важным признаком для оцен 180 штаммов, из которых 11 штаммов являются высо- ки перспектив их использования. Например, штаммы Simplicillium lamellicola, Sesquicillium candelabrum, коактивным, а 30 – умеренно-активными штаммами.

metarhizium anisopliae обладают исключительно бак Для ряда штаммов москитоцидные свойства выявле ны впервые: Polycephalomyces, cordyceps, botryotri- терицидной активностью. Штаммы calcarisporium ar chum, calcarisporium, chrisosporium, dactilaria, engy- buscula, cordyceps militaris, Polycephalomyces sp. про odontium, Sesquicillium, evlachovaea, Pestalotiopsis. являют только фунгицидную активность.

Наивысшей активностью из этого списка обладают Высокой бактерицидной активностью облада грибы calcarisporium arbuscula f-80 и Sesquicillium ют также штаммы грибов acrostalagmus luteoalbus, candelabrum f-114). эти грибы следует рассматривать clonostachus rosea, conidiobolus coronatus, Harziella capitata, Tolypocladium nubicola. Зона подавления ими как наиболее перспективные для разработки москито метицилин-устойчивоого штамма Staphilococcus aurea цидных препаратов метаболитного действия.

Выделен и изучен ряд метаболитов штамма гриба превышает 20 мм. Высокой фунгицидной и бактери calcarisporium arbuscula f-80. Выявлено, что одним цидной активностью (диаметр зоны подавления тест культур не менее 20 мм) обладает штамм chaetomium из них является нанокетид – ауровертин «В». Впер cohliodes. По литературным данным, у всех перечис вые установлено, что этот метаболит обладает высо кой москитоцидной активностью: LC50 для личинок ленных штаммов грибов, к настоящему времени, не комаров составляет 8,7 м.д. (одна миллионная доля выявлены метаболиты с антимикробной активностью.

соответствует концентрации 1 мкг/мл). Высокая мос- Наиболее активные штаммы грибов с бактери цидными свойствами Simplicillium lamellicola (f-496, китоцидная активность ауровертина «В» позволяет рассматривать его в качестве перспективного вещества f-852, f-856, f-738) были использованы для получе для создания нового москитоцидного препарата. ния экстрактов и их фракционирования. Из экстракта Выделен и изучен ряд метаболитов гриба Sesquicil- гриба S. lamellicola f-852 выделен и изучен метаболит lium candelabrum f-114. Одним из них является тетра- с удельной бактерицидной активностью 0,05 м.д. в от ношении метицилин-устойчивоого штамма Staphylo кетид 2,3-диметокси 5, 6-диметил бензохинон. Впер coccus aureus. Показано, что это соединение является вые установлено, что это вещество продуцируется грибом Sesquicillium candelabrum. Впервые выявлена производным фузидиевой кислоты.

высокая москитоцидная активность этого вещества: Полученные данные позволяют рассматривать штамм Simplicillium lamellicola f-852 и синтезируе LC50 для личинок комаров составляет 23,0 м.д. эти данные позволяет считать 2,3-диметокси 5,6-диметил мый им метаболит в качестве перспективных агентов бензохинон в качестве перспективного вещества для для создания эффективного лекарственн6ого препара создания нового москитоцидного препарата. та для борьбы со стафилококковыми инфекциями.

Выделен и изучен ряд метаболитов гриба Paecilo- Работа поддержана грантом МНТЦ # 2338р «энто myces farinosus, штамм vL-51. Выявлено, что среди мопатогенные грибы и их метаболиты».

ПОЛУЧЕНИЕ ПОСЕВНОГО МАТЕРИАЛА ПРОДУЦЕНТА ГЛЮКОЗООКСИДАЗЫ pENICILLIUM fUNICULOsUM 46.1 НА РАЗЛИЧНЫХ СУБСТРАТАХ Павловская Ж.И., Семашко Т.В., Михайлова Р.В., Виноградова Н.В., Лобанок А.Г.

ГНУ «Институт микробиологии НАН Беларуси», Минск.

Глюкозооксидаза (КФ 1.1.3.4) – представитель определения глюкозы в крови и других биологических класса оксидоредуктаз – широко используется в хи- жидкостях.

мической, пищевой промышленности и в медицине. Ранее нами методом индуцированного мутагенеза Фермент является незаменимым реагентом в методах получен высокоактивный продуцент глюкозооксидазы Грибные биотехнологии Penicillium funiculosum 46.1, в настоящее время раз- ровой суспензии p. funiculosum 46.1 показал, что на рабатывается технология производства ферментного процесс образования глюкозооксидазы существенное препарата Глюкозооксидаза. Одним из этапов техно- влияние оказывает субстрат и срок выращивания гри логии является разработка промышленного посевного ба. При инокуляции среды споровыми суспензиями 2-х материала. недельной культуры уровень синтеза глюкозооксидазы Цель исследований – анализ использования различ- составил 10,1–15,4 ед/мл. Максимальное образование ных субстратов (пшена, пшеничных отрубей, ячневой данного фермента в условиях глубинного культивиро крупы и геркулеса) для получения посевного материа- вания отмечено в вариантах опытов с использованием ла P. funiculosum 46.1. спорового посевного материала, полученного на пше Исследуемые субстраты увлажняли стерильной не и пшеничных отрубях. Исследование применения водой, степень увлажнения составила для ячневой споровой суспензии месячного посевного материала крупы – 30 %, пшена – 40 %, геркулеса – 50 %, пше- показало, что уровень синтеза глюкозооксидазы гри ничных отрубей – 60 %. После стерилизации субстра- бом не изменялся или снижался на 5–14 %. По проду ты инокулировали водной суспензией спор (5–6105) цирующей способности мицелия наилучший результат 10-суточной культуры p. funiculosum 46.1 в количестве получен в вариантах опыта с использованием в качес 2 мл на 10 г субстрата и выращивали в термостате при тве субстрата пшена, пшеничных отрубей и ячневой 260. Образование глюкозооксидазы p. funiculosum 46.1 крупы. Каталаза синтезировалась p. funiculosum 46. исследовали в условиях глубинного культивирования только при инокуляции питательной среды посевным гриба, используя в качестве посевного материала сы- материалом, полученным на геркулесе. Следует отме пучий посевной или водную суспензию спор гриба, тить, что после 1 мес выращивания гриба на всех суб выросшего на вышеуказанных субстратах. стратах количество выживших спор резко уменьшался При использовании сыпучего посевного материала и составлял 3,1–14 %, а после 2 мес – 1–1,2 %. В усло для глубинного культивирования P. funiculosum 46.1 виях глубинного культивирования с использованием отмечен хороший рост гриба и высокий уровень обра- мес посевного материала гриб синтезировал глюкозо зования глюкозооксидазы (до 20,3 ед/мл). Однако при оксидазу в следовых количествах.

Таким образом, для культивирования P.°funiculosum этом гриб синтезирует до 48,4 ед/мл каталазы.

Установлено, что p. funiculosum 46.1 образует 46.1 с целью получения ферментного препарата Глю 1,1106–4,8107 спор на грамм применяемых в опытах козооксидаза в качестве посевного материала можно субстратов. Максимальное количество спор выявлено использовать водную суспензию спор гриба, выращен при выращивании Р. funiculosum 46.1 на пшене. Ана- ного на пшене, пшеничных отрубях и ячневой крупе в лиз применения в качестве посевного материала спо- течение 0,5–1,0 месяцев.

ДЕСТРУКЦИЯ ФЕНОЛА ГРИБОМ «БЕЛОЙ ГНИЛИ» LENTINUs TIGRINUs Паршин А.А., Надежина О.С., Кадималиев Д.А., Атыкян Н.А.

Мордовский государственный университет им. Н.П. огарева, Саранск Одной из актуальных проблем экологии в насто- туры в различной концентрации (1 и 5 %). В результа ящее время становится антропогенное загрязнение те проведенных нами исследований было обнаружено, окружающей среды устойчивыми токсичными вещес- что фенол не вызывает угнетения роста и развития твами фенольной природы. В создании новых биотех- культуры гриба и по-разному влияет на биосинтез и нологических методов очистки окружающей среды секрецию ферментов на различных этапах развития наиболее перспективным является применение микро- культуры. Наибольшее стимулирующее воздействие организмов, способных к деструкции данных соедине- на биосинтез Мn-пероксидазы оказывало добавление ний в природных условиях. Гриб белой гнили lentinus фенола в концентрации 1 %, а лакказы в концентрации tigrinus, продуцирующий внеклеточный лигнолитичес- 5 % в трофофазу. Максимальная активность перокси кий комплекс ферментов – пероксидазу растительного дазы растительного типа наблюдалась при добавлении типа, Мn-пероксидазу, лакказу, и глюкозооксидазу, фенола в концентрации 5 % в идиофазу. Степень де способен разрушать ароматические соединения, в ос- струкции фенола культурой гриба зависела от его кон нове чего лежит его способность разлагать сложномо- центрации, времени внесения, а также наличия фер лекулярные компоненты лигноцеллюлозного сырья. ментативной активности и в среднем составила 70 % Поэтому целью работы было исследование де- от исходной концентрации.

Таким образом, лигнолитический гриб l. tigrinus струкции фенола лигнолитическим грибом белой гни ли l. tigrinus. способный к биодеструкции фенола в условиях пог Гриб выращивали на модифицированной среде эг- руженного культивирования и его можно использовать герта в течение 6 и 9 суток с добавление фенола на 3 для очистки стоков и почв от фенолов и его производ (трофофаза) и 6 (идиофаза) сутки роста грибной куль- ных.

338 ii СъезД МИколоГов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел Работа выполнена при поддержке программы 2008» РНП.2.1.17708 и гранта Роснауки шифр 2006 «Развитие научного потенциала высшей школы 2006– РИ-19.0/001/079.

ВЛИЯНИЕ МИНЕРАЛЬНЫХ И ОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ НА СОРБЦИОННУЮ АКТИВНОСТЬ ГРИБНЫХ СОРБЕНТОВ Ровбель Н.М.

Институт микробиологии НАН Беларуси, Минск Проблема загрязнения окружающей среды тяжелы- Известно, что анионы аминокислот образуют с ми металлами, попадающими в организм человека с пи- ионами переходных металлов комплексные (хелат тьевой водой и пищей и губительно влияющими на его ные) соединения, стойкие к разложению в кислой здоровье, является весьма актуальной для нашей рес- среде, характерной для желудка. При этом в коорди публики. Клеточные стенки и хитин-глюкановый комп- национном взаимодействии могут быть задействова лекс (ХГК) грибов, содержащие в своем составе хитин, ны как карбоксильные группы, так и аминогруппы.

обладающий способностью активно взаимодействовать В наших исследованиях глутаминовая кислота и ас с ионами тяжелых металлов, могут стать основой для парагин, способные образовывать с ионами металлов получения эффективных энтеросорбентов. хелатные комплексы, снижали сорбционную емкость В естественных условиях сорбция того или иного ве- клеточных стенок в 2 раза, ХГК – почти в 3 раза. При щества протекает в присутствии соединений различной сутствие белков также ослабляло активность связы природы, которые способны конкурировать за центры вания тяжелых металлов, хотя и не столь значитель связывания или вступать в активное взаимодействие с но, как аминокислот (уровень связывания меди ХГК сорбатом Связывание ионов меди глубинным мицелием понизился в 2,5 раза). Добавление к сульфату меди базидиальных грибов и их структурных компонентов мочевины привело к снижению сорбционной емкости (клеточные стенки, ХГК) было исследовано в присутс- ХГК всего на 10–13 %.

твии катионов биогенных и токсичных металлов, а так- Органические кислоты (особенно лимонная кис же некоторых соединений, входящих в состав химуса: лота и ее соли), синтезируемые многими грибами в белков, аминокислот, поли- и моносахаридов. Хорошо больших количествах, также является эффективными известна индифферентность хитина по отношению к комплексообразователями, обеспечивающими деток биогенным элементам. Результаты исследования пока- сикацию среды, загрязненной токсичными металлами.

зали, что ионы калия, кальция, магния не принимают Лимоннокислый натрий снижал сорбционную актив участия в конкурентном взаимодействии с сайтами свя- ность грибной биомассы и ее структурных компонен зывания ионов меди и не влияют на сорбционную ем- тов по отношению к ионам меди столь же значительно, кость мицелия, клеточных стенок и ХГК. как аминокислоты и их производные. Внесение в рас Как известно, для биосорбентов характерно конку- твор сульфата меди углеводов моносахаров (глюкоза) рирование между ионами тяжелых металлов. При ис- и (крахмал) практически не влияло на сорбционные пользовании в качестве сорбента биомассы изученных свойства биомассы исследованных грибов.

грибов также выявлено торможение связывания ионов Таким образом, биогенные элементы, микроэле меди ионами кадмия и свинца, в присутствии которых менты, сахара практически не участвуют в конкурен сорбционная емкость мицелия уменьшилась в 2,0–2,2 тном взаимодействии за сайты связывания тяжелых раза. Наличие в сорбционной системе ионов цинка металлов биомассой. Наибольшее влияние на эффек практически не повлияло на сорбционную активность тивность связывания тяжелых металлов оказывает грибной биомассы по отношению к ионам меди. присутствие органических кислот и аминокислот.

ВЛИЯНИЕ ИОНОВ МЕДИ НА СИНТЕЗ ЛАККАЗЫ ПРИРОДНЫМ ШТАММОМ БАЗИДИАЛЬНОГО КСИЛОТРОФА TrameTeS HirSuTa (WULfEN) pILБT В УСЛОВИЯХ ГЛУБИННОГО КУЛЬТИВИРОВАНИЯ Сальцова И.Ю., Горшина Е.С.

Московский государственный университет инженерной экологии, Москва Лакказа – медьсодержащий фермент класса окси- круга органических и неорганических субстратов мо доредуктаз (КФ 1.10.3.2 п-дифенол: кислород окси- лекулярным кислородом с сопутствующим восстанов доредуктаза), катализирующий окисление широкого лением последнего непосредственно до воды, минуя Грибные биотехнологии стадию образования пероксида водорода. В природе Uvmini1240) при 410 нм с использованием пирокате функцию этого фермента связывают с деградацией хина (10–2 М) в качестве субстрата в 0,1 М цитратно лигнина. Лучшими продуцентами лакказы считаются фосфатном буфере (рН 4,5).

лигнолитические ксилотрофы, вызывающие белую В среде без внесения дополнительного сульфата гниль древесины, в частности, базидиальные грибы меди содержание меди было менее 1 мкМ, при этом рода Trametes. максимальная оксидазная активность составляла ме Молекула лакказы содержит в активном центре 4 нее 4 МЕ. Предварительными опытами было пока иона меди, и, следовательно, для синтеза лакказы необ- зано, что оптимальным временем внесения меди яв ходимо наличие ионов меди в питательной среде. Также ляется экспоненциальная фаза роста гриба (1 сутки есть данные о том, что медь участвует в синтезе мелани- роста), что соответствовало имеющимся литератур на в клеточных стенках, что подтверждается потемнени- ным данным. Исследования, проведенные в широком ем биомассы при высоких концентрациях меди в среде диапазоне концентраций (от 5 мкМ до 2 мМ CuSO4), и увеличивающимся содержанием меланина в биомас- показали, что для получения максимальной оксидаз се [2]. Кроме того, известно, что образование лакказы ной активности (42 МЕ) в данных условиях проведе регулируется на уровне генной транскрипции атомами ния эксперимента достаточной является концентрация меди. С другой стороны соли меди являются фунгици- 20 – 30 мкМ. Дальнейшее увеличение концентрации дами и ингибируют рост. Очевидно, что для максималь- меди практически не приводило к повышению окси ного синтеза лакказы необходимо найти оптимальное дазной активности, но позволяло увеличить продол количество меди в питательной среде, а также опреде- жительность сохранения максимальной активности лить время внесения меди в питательную среду. до суток. В исследованном диапазоне концентраций В качестве продуцента лакказы использовали отоб- ингибирование роста штамма (по данным накопления ранный в предыдущих исследованиях [1] отечествен- биомассы) не наблюдалось.

ный штамм-продуцент лакказы Trametes hirsuta 56 1. Горшина Е. С., Т. В. Русинова, В. В. Бирюков, (Wulfen) pilбt (сем. Polyporaceae, кл. basidiomycetes). О. В. Морозова, С. В. Шлеев. А. И. Ярополов. Динами Штамм-продуцент выращивали методом глубинного ка оксидазной активности в процессе культивирования культивирования в колбах эрленмейера на круговой базидиального гриба рода Trametes fr.// Прикладная качалке в жидкой питательной среде с мукой. Медь биохимия и микробиология.–2006.-№6.-С. 638–644.

вносили в виде сернокислой соли. 2. Galhaup C, Haltrich D. Enhanced formation of экстрацеллюлярную оксидазную активность (ОА) laccase activity by the white-rot fungus Trametes pubes в глубинной культуре определяли в фильтрате культу- cens in the presence of copper// Appl Microbiol Biotech ральной жидкости спектрофотометрически (Shimadzu nol. – 2001. – Jul. –56(1–2). – р. 225–32.

ФЕРМЕНТНЫЙ ПРЕПАРАТ ЛАККАЗЫ БАЗИДИОМИЦЕТА TrameTeS HirSuTa (WULfEN) pILAT И ОСОБЕННОСТИ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ Самохвалова Н.С., Горшина Е.С., Бирюков В.В.

Московского государственного университета инженерной экологии (МГУИЭ), Москва Лакказа представляет собой медьсодержащий фер- питательной среде с мукой. Для получения фермент мент, катализирующий окисление фенолов в хиноны, ного препарата использовали баромембранный метод, может окислять орто- и пара-дифенолы. Лакказы из являющийся наиболее современными и перспектив базидиальных грибов обладают широкой субстратной ными способом очистки ферментных растворов. Про специфичностью по отношению к различным орга- цесс разделения проводили с использованием трубча ническим и неорганическим соединениям, что делает тых керамических мембран фирмы ТАМИ Industries возможным их использование совместно с медиатора- (Франция).

ми во многих областях промышленности. экстрацеллюлярную оксидазную активность опре Одной из важнейших стадий производства фермен- деляли спектрофотометрически при 410 нм с исполь тных препаратов является стадия концентрирования зованием пирокатехина (10–2 М) в качестве субстрата (выделения). Известно, что в связи существенными на спектрофотометре Shimadzu Uvmini1240 (Япония).

различиями в физико-химических свойствах фермен- Показано, что молекулярная масса лакказы штам тных растворов необходимо разрабатывать процесс ма-продуцента Trametes hirsutа 56 (Wulfen) pilat со мембранного выделения индивидуально для каждого ставляет 70±2 кДа [Shleev, 2004], что дает возмож препарата. ность предположить необходимость использования В качестве продуцента использовали базидиаль- для концентрирования фермента мембран в диапазоне ный гриб, известный как продуцент лакказы [Горшина ультрафильтрации (15–50 кДа).

и др., 2006]. Культуру выращивали методом глубин- Проведенные исследования показали, что на мем ного культивирования на специально разработанной бранах 15, 30 и 50 кДа производительность мембран 340 ii СъезД МИколоГов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел различается между собой, причем наибольшая наблю- мальным соотношение производительности и потерь на дается на мембране 50 кДа. При этом выход фермента мембране 0,14 мкм. Активность фермента в пермеате в концентрате составляет 79 %. Отмечено, что макси- составляла всего около 0,72 %, в то время как в концент мальная селективность (99 %) по отношению к лакказе рате – около 89,6 %. Можно предположить, что удержа обеспечивает мембрана 15 кДа. Однако потери за счет ние лакказы мембранами в диапазоне микрофильтрации инактивации при концентрировании примерно одина- происходит за счет связывания ее комплексами экзобио ковы и составляют около 14 %. полимеров и образования лакказных олигомеров.

С целью отделения экзобиополимеров из культу- Таким образом, проведенные нами исследования рального фильтрата (КФ) с молекулярной массой выше, показали, что при производстве ферментного препара та лакказы из КФ гриба Trametes hirsute 56 целесооб чем молекулярная масса фермента использовали мем браны с порогом задерживания 150 кДа, а также 0,14 разно использовать мембраны в диапазоне микрофиль и 0,45 мкм. Обнаружено, что на этих мембранах также трации, что позволяет повысить производительность и осуществляется концентрирование фермента с опти- уменьшить энергетические расходы производства.

ЗАЩИТА ГЕНОМА И ВОЗМОЖНОСТИ ГРИБНОЙ БИОТЕХНОЛОГИИ Сенюк О.Ф.1, Горовой Л.Ф.2, Курченко В.П. 1 Институт проблем безопасности АЭС НАН Украины, Чернобыль 2 Институт клеточной биологии и генетической инженерии НАН Украины, киев 3 Белорусский государственный университет, Минск Современное развитие цивилизации ставит задачу биодобавка «Микотон», которая показала широкий ком сохранения и восстановления здоровья на первое мес- плекс целебных свойств. На основе жидкой фракции то в шкале человеческих ценностей. На эти цели тра- разработан и выведен на рынок Украины экологичес тятся огромные материальные и людские ресурсы. В ки безопасный биофунгицид «Микосан», который по последние десятилетия заметно возрастающий вклад своей эффективности не уступает лучшим химическим в этом направлении делают грибные биотехнологии. препаратам для защиты растений.

Наряду с традиционным использованием микромице- Кроме того, получен растворимый меланин-глюка тов для получения антибиотиков резко возросли объ- новый комплекс с высокой биологической активнос емы производства и использования макромицетов для тью.

Препарат показал сильные антибиотические, ан питания и медицины. В этом плане широким фронтом тивирусные и антигрибковые свойства. этот комплекс проводятся научные исследования по скринингу и ис- проходит широкие медико-биологические исследова пытаниям новых биологически активных веществ и ния и испытания. В частности, полученный препарат технологические работы по культивированию новых показал мощные генопротекторные свойства, которые видов грибов. позволяют защитить ДНК от повреждающего действия В Украине разработана комплексная, безотходная, проникающей радиации, химических мутагенов и др.

экологически чистая биотехнология получения ряда неблагоприятных факторов внешней среды. В экспери ментах in vitro и в опытах на лабораторных животных продуктов из трутовых грибов. По этой технологии из плодовых тел грибов получают нерастворимую хитин- было показано, что меланин-глюкановый препарат содержащую волокнистую массу клеточных стенок способен практически полностью устранить действие гриба и комплекс растворимых биологически активных хронического облучения в малых дозах и существенно веществ. Из твердой фракции можно изготавливать бу- уменьшить последствия острого радиоактивного излу магоподобные или формованные изделия как в чистом чения на однонитевые разрывы ДНК. Как следствие, виде, так и в композициях с другими волокнистыми ма- этот препарат уменьшает смертность лабораторных териалами. Разработанные перевязочные хитин-содер- мышей, увеличивает рождаемость и является мощным жащие волокнистые материалы практически в два раза профилактическим средством от онкологических за сокращают сроки лечения гнойных ран и трофических болеваний.

язв. На основе таких хитин-содержащих материалов Разрабатываемое направление показывает большие разработана и прошла широкие промышленные испы- перспективы биотехнологии и практического исполь тания серия биосорбентов для тажелых маталлов и ра- зования трутовых грибов в разных отраслях медици дионуклидов. Разработана и имеется на рынке пищевая ны, сельского хозяйства и промышленности.

Грибные биотехнологии ГУМИНОВЫЕ КИСЛОТЫ КАК СТИМУЛЯТОРЫ РОСТА ГРИБОВ Сидоренко М.Л., Ефремова Н.Ю.

Биолого-почвенный институт Дво РАН, владивосток В настоящее время в отечественной и мировой 25–27 °С. За основу была принята известная питатель науке наблюдается повышенный интерес к изучению ная среда следующего состава: k2HpO4 * 3Н2О – 1 г/л, грибов. это связано, прежде всего, с кардинальным MgSO4 * 7Н2О – 0.5 г/л, kCl – 0.5 г/л, глюкоза – 20 г/л, пересмотром значимости и уникальности экологичес- солодовое сусло 150Б – 115 мл, вода – до 1 л, в кото ких функций, контролируемых грибами в природных рую в качестве стимулирующего питательного агента экосистемах. Во-вторых, грибы были и остаются од- добавляли гуммат аммония в количествах от 0,0001 до ним из основных и перспективных объектов биотех- 1 г/л. Препараты гуминовых кислот, выделенные по нологии. Многие грибы обладают не только ценными стандартной методике любезно предоставлены к.б.н.

пищевыми, но и лечебными свойствами. В последние Нестеровой О.В. В работе также использовали ком десятилетия грибами стали интересоваться как источ- мерческий препарат ГК-3 (Aldrich, Германия).

ником антибиотических и лекарственных средств. Но- Математическую обработку результатов исследо вые пути в области эффективных антибактериальных вания проводили с использованием статистических лекарственных препаратов дали высшие базидиальные функций Microsoft Excel 2000.

грибы. В связи с этим возрастает необходимость в их В результате исследований установлено, что добав искусственном культивировании. Глубинное культи- ление гуминовых кислот оказывает стимулирующее вирование является одним из наиболее перспективных действие на рост грибов в культуре. Принципиальное направлений, способствующих быстрому получению повышение выхода биомассы было получено при введе мицелия с определенными характеристиками. нии в среду гуммата аммония в количестве 0,01 г/л, не Целью данного исследования является изучение зависимо от вида препарата. При этом обеспечивалось питательной ценности гуминовых кислот, полученных двукратное увеличение выхода биомассы по равнению с из разных источников и, и их способности стимулиро- исходной средой. Последующее ведение процессов пог вать рост грибов в культуре. руженного культивирования на средах с добавлением В работе использовали штаммы грибов Fomitopsis гуминовых кислот показало, что максимум содержания officinalis, Ganoderma lucidum, lentinus edodes из кол- биомассы отмечается к 4–7-мым суткам (в зависимости лекции культур грибов Биолого-почвенного института от вида гриба) и варьирует в пределах 10–20 г/л (также в ДВО РАН. Культуры хранили при 4 °С на сусло-агаре, зависимости от вида гриба). Полученные данные могут пересевали 1 раз в месяц. Для получения глубинного быть объяснены тем, что в начальный период роста ми мицелия культуры выращивали в колбах эрленмейе- целия происходит использование периферических час ра на 250 мл со 100 мл питательной среды на качалке тей молекул гуминовых кислот, которые могут служить со скоростью вращения 200 об/мин, при температуре источником азота для грибов.

БЕЛКОВО-ВИТАМИННЫЙ ПРЕПАРАТ НА ОСНОВЕ МИКРОМИЦЕТОВ: ПОЛУЧЕНИЕ, ХАРАКТЕРИСТИКА И АСПЕКТЫ ПРИМЕНЕНИЯ Супрун С.М.1, Харкевич Е.С.2, Донченко Г.В.1, Пархоменко Ю.М.1, Кучмеровская Т.М. 1 Институт биохимии им. А.в. Палладина НАНУ, 2 Институт микробиологии и вирусологии им. Д.к. заболотного НАНУ, киев Микромицеты являются перспективными для ис- бовательны к субстрату, устойчивы к экологическому пользования в различных отраслях народного хозяйс- стрессу.

тва – экологии, сельском хозяйстве, медицине. Они со- Целью наших исследований была разработка без держат природный комплекс биологически активных отходной биотехнологии для получения полноценной веществ: незаменимые аминокислоты, ненасыщенные кормовой и пищевой добавки на основе совместного жирные кислоты, витамины, коферменты, многие из культивирования штаммов-продуцентов.

которых обладают свойствами антимутагенов и ан- Ранее нами были отобраны штаммы-продуценты:

тиоксидантов. Наличие хитина в грибной клетке, его fusarium sambucinum ИMB f-10011 – продуцент ком производные, комплексы хитина с глюканами, явля- плекса биологически активных веществ, с преоблада ются природными сорбентами и обладают рядом дру- нием никотиновой и пантотеновой кислот, кофермента гих полезных свойств. Грибы технологичны, нетре- А;

fusarium sambucinum BkПM f-850 – продуцент 342 ii СъезД МИколоГов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел никотиновой кислоты и ее коферментных форм, цел- гласно регламенту в полупроизводственных условиях люлозолитических ферментов;

Рenicillium sclerotiorum на стендовой установке Научно-технического центра ИМВ f-10015 – продуцент каротиноидов (5,0–12,0 производственной биотехнологии ОАО «Стиролбио мг/г асв), биотина и пектотолитических ферментов;

тех» (Киев) на среде Чапека со свекловичной мелассой Mycelia sterilia ИМВ f-100014 – продуцент белка (1 % по р.в.) в качестве источника углерода была нара (45–50 % асв), водорастворимых витаминов;

Thielavia ботана партия белково-витаминного препарата. В ре terrestris ВКПМ f-308 –продуцент белка, пектолити- зультате совместного культивирования в 2–3 раза по ческих ферментов. Основываясь на изучении их фи- вышен выход ряда витаминов, увеличено количество зиолого-биохимических особенностей, биосинтезе белка до 48–50 % асв, сокращены сроки ферментации отдельных компонентов, скорости роста, отсутствии до 42 часов. Полученный биопрепарат содержал ком антогонизма, были подобраны культуры для совмест- плекс витаминов: биотин, пантотеновую кислоту, уби ного культивирования с целью получения кормовых и хинон Q10, а также ненасыщенные жирные кислоты, пищевых добавок. Для процессов биотрансформации в частности олеиновую, арахидоновую, незаменимые растительных отходов в белково-витаминный продукт аминокислоты (лизин, триптофан), микроэлементы.

интерес представляет полученная нами комплекс- Белково-витаминный препарат был включен в рацион ная культура fusarium sambucinum f-850 и Thielavia мышей, рыб, перепелов и шелкопряда. Биопрепарат terrestis f-308. Для получения пищевой и кормовой оказывал благоприятное влияние на показатели крови, добавки предложена комплексная культура fusarium активность холинэстеразы, количество аммиака в тка sambucinum f-10011 – продуцент витаминов, обла- нях мозга мышей снижалось в 2,85 раза. Применение дающий высокой скоростью роста (µ 0,19 час–1), и препарата не только повышало выживаемость живот Рenicillium sclerotiorum f-10015 – продуцент кароти- ных и их производственные показатели, но также спо ноидов, медленно растущий (µ 0,11 час–1). Нами отра- собствовало их защите от инфекционных заболеваний ботаны условия их совместного культивирования и со- (полиэдроза шелкопряда и сапролегниоза карпа).

ФЕРМЕНТНЫЕ ПРЕПАРАТЫ ИЗ МИКРОСКОПИЧЕСКИХ ГРИБОВ Телишевская Л.Я., Овчинников Р.С.

ФГУ «вГНкИ», Москва В последние годы в связи с бурным развитием био- бами родов Acremonium, Alternaria, Aspergillus, Cephalo технологии возрастает интерес к микроскопическим sporium, fusarium, penicillium, Trichoderma, verticillium грибам, как потенциальным продуцентам различных и др., расщепляют эфирные связи, а также связи, обра хозяйственно-значимых ферментных препаратов. Син- зованные остатками ароматических аминокислот, лей тезируемые грибами ферменты находят применение цина, метионина. Карбоксильные, или кислые протеазы в пищевой и легкой промышленности, сельском хо- грибов расщепляют пептидные связи, образованные зяйстве, медицине и медицинской промышленности, ароматическими и другими гидрофобными аминокис косметологии. Перспективно использование грибных лотами, и способны гидролизовать казеин, гемоглобин, ферментов при создании современных наукоемких бычий сывороточный альбумин, белки сои (ферменты технологий. Широкий спектр продуцируемых микро- родов Aspergillus, Mucor, penicillium, Trichoderma, Rhi мицетами ферментов, неприхотливость грибов-про- zopus). Металлопротеазы грибов также имеют широкую дуцентов, относительно низкая себестоимость тех- субстратную специфичность. Так, протеаза, образуемая нологии получения ферментных препаратов делают penicillium roqueforty расщепляет казеин, гемоглобин, микроскопические грибы эффективным объектом сов- протамин, гистоны, желатин, фибрин, слабо расщепля ременной биотехнологии. ет эластин (О. Кислухина, 2002). Как правило, проте Грибы способны продуцировать ферменты различ- олитические препараты, получаемые из грибов, содер ных классов. Так, гликозидазы микологической при- жат не один фермент, а комплекс протеаз.

роды эффективно гидролизуют высокомолекулярные Особый практический интерес представляют фер трудно расщепляемые растительные полисахариды – менты грибов, гидролизующие структурные животные целлюлозу, гемицеллюлозы, лигнин, пектин, которые белки: коллаген, кератин и эластин. эти склеропротеи не усваиваются в пищеварительном тракте животных ны отличаются механической прочностью и химичес и человека. Гликозидазы, синтезируемые микромице- кой инертностью, обусловленной их аминокислотным тами родов Trichoderma, Aspergillus, Mucor, penicillium составом и конформацией молекул. Склеропротеины – находят применение в пищевой и легкой промышлен- основные белки покровных тканей, составляющие ности, в кормопроизводстве. 25 – 30 % от веса тела млекопитающих.

Существенную практическую ценность представля- Склеропротеины практически не усваиваются же ют синтезируемые микромицетами протеолитические лудочно-кишечным трактом человека и высших живот ферменты. Сериновые протеазы, продуцируемые гри- ных. Исключение составляют некоторые представители Грибные биотехнологии плотоядных. При этом те же белки могут расщепляться Использование грибов-дерматофитов в качестве рядом микроорганизмов, в частности грибами и актино- продуцентов ферментных препаратов для гидролиза мицетами. По специфичности действия на структурные структурных белков открывает широкие перспективы белки различают «истинные» и «неспецифические» промышленного использования склеропротеаз. Нами склеропротеазы. «Истинные» склеропротеазы действу- была установлена возможность получения и прак ют только на специфические для них субстраты и не тического использования комплекса протеаз струк расщепляют других белков. Так, «истинные» коллаге- турных грибов при культивировании дерматофитов назы гидролизуют коллаген, воздействуя на первичную видов Trichophyton verrucosum, T. mentagrophytes, T.

структуру белка, и расщепляют аминокислотную цепь equinum, Microsporum canis, M. gypseum (Патент RU в неполярных участках молекулы по связям (-х-гли-). 2244741 С1, приоритет от 27.06.2003). Было показано, «Неспецифические» протеазы – коллагенолитические что эффективные ферментные препараты могут быть ферменты – гидролизуют как коллаген (в большей сте- получены из отходов производства вакцин против де пени денатурированный), так и другие белковые суб- рматофитозов животных, выпускаемых рядом пред страты. При этом они действуют преимущественно на приятий биологической промышленности.

полярные участки коллагена (телепетиды), с нетипич- Было установлено, что различные штаммы-проду ным для него аминокислотным составом, в т.ч. по внут- центы дерматофитов проявляют разные профили фер ри- и межмолекулярным связям. (Н. Дёмина, С. Лысен- ментативной активности в отношении различных суб ко, 1996). стратов (коллагена, кератина и эластина), что позволяет «Неспецифические» склероптореазы довольно ши- получать препараты с заданными свойствами в зависи роко распространены как среди грибов, так и среди мости от цели использования. Например, применение актиномицетов, однако «истинные» склеропротеазы препаратов склеропротеаз для обработки кожевенного синтезируются лишь немногими микроорганизмами. и пушного сырья позволяет получать продукцию с Уникальными в этом смысле являются патогенные гри- требуемыми характеристиками, в зависимости от ис бы-дерматофиты родов Trichophyton и Microsporum, пользуемого ферментного препарата (Р. Овчинников, способные к специфическому расщеплению структур- О. Талянский, Л.Я. Телишевская и др., 2004). Очевид ных белков. Очевидно, такая способность связана со но, что препараты склеропротеаз, которые могут быть способом паразитирования грибов-дерматофитов, у адаптированы под конкретные цели, имеют перспекти которых склеропротеазы выступают в качестве фак- вы широкого практического использования.

торов вирулентности и обеспечивают инвазию гриба Таким образом, микроскопические грибы являются в ткани хозяина (I. Weitzman et al., 1995). Образование уникальными продуцентами ферментных систем раз коллагеназ, кератиназ, эластаз, а также их комплексов, ной специфичности и активности, в т.ч. склеропроте установлено у различных видов грибов-дерматофи- аз, крайне редко встречающихся у других организмов.

тов (v. Meevotisom et al., 1979;

M. Asahi et al., 1985;

A. Ферментные препараты грибного происхождения мо Sanyal et al., 1985;

B. Mignon et al., 1998;

f. Brouta et al., гут быть использованы для решения самого широкого 2002 и др.) круга прикладных задач.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ TRICHODERMA В ПРОЦЕССЕ ПЕРЕРАБОТКИ ОТХОДОВ СПИРТОВОГО ПРОИЗВОДСТВА Тухбатова Р.И., Рафаилова Э.А., Тазетдинова Д.И., Алимова Ф.К., Скворцов Е.В., Мельникова Т.А.

ГоУ вПо «казанский государственный университет им.в.И.Ульянова-ленина», казань При производстве спирта из зерна (например, пше- барду белком. Однако дрожжевой кормоконцентрат ницы, кукурузы или ржи) получается довольно боль- обладает невысокими кормовыми свойствами и, соот шое количество отработанной массы прошедшего фер- ветственно, ценой реализации, что заставляет техно ментацию сырья, из которого путем дистилляции был логов спиртового производства и научных работников извлечен алкоголь. эту жидкую массу – послеспирто- продолжать поиски более эффективных методов пере вую барду – необходимо утилизировать, и проблема работки послеспиртовой барды.

с этим актуальна во всем мире. На сегодняшний день Целью работы являлось исследование эффектив послеспиртовая барда высушивается или перераба- ности предварительного культивирования грибов тывается в дрожжевой кормоконцентрат – основу Trichoderma для увеличения содержания белка в дрож комбикорма, предназначенного для кормления сель- жевом кормовом концентрате, получаемом в процессе скохозяйственных животных и птицы. Применяемая переработки послеспиртовой барды.

в настоящее время технология предусматривает куль- В работе использовался штамм T. asperellum 302, тивирование кормовых дрожжей на барде с добавкой который был отобран нами в ходе проведенного ранее источника азота (мочевины и др.). Дрожжи обогащают широкого скрининга штаммов грибов Trichoderma.

344 ii СъезД МИколоГов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел Штамм характеризуется сочетанием высоких пока- кормовом концентрате, полученном без применения зателей протеазной, целлюлазной и ксиланазной ак- предварительного культивирования Triсhoderma. Та тивностей. После того, как были определены пики ак- ким образом, нами получены данные, показывающие тивности гидролитических ферментов исследуемого что в процессе культивирования Trichoderma на пос штамма T. asperellum 302, мы провели эксперименты леспиртовой барде в среде происходит накопление по последовательному культивированию Trichoderma гидролитических ферментов. Максимум ферментатив с кормовыми дрожжами с целью увеличения выхода ной активности приходится на 3–4 сутки культивиро кормового белка. Было установлено, что при засеве вания гриба. Как показали проведенные исследования, кормовых дрожжей в барду, где предварительно куль- максимум ферментативной активности в среде явля тивировали T. asperellum 302, наблюдается увеличение ется оптимальным временем для инокуляции перера накопления дрожжевого белка. Нами была определена батываемой послеспиртовой барды кормовыми дрож зависимость увеличения накопления дрожжевого бел- жами. Максимальное содержание белка в дрожжевом ка от продолжительности предварительного культи- концентрате получено при инокулировании дрожжей вирования T. asperellum 302 на барде. Небольшое уве- Candida tropicalis на 3 сутки предварительного культи личение накопления дрожжевого белка (от 5 до 7 %) вирования Trichoderma.

наблюдали при предварительном культивировании Полученные результаты показывают, что процесс Triсhoderma на барде в течение 1–2 суток. Наибольшее происходит в два этапа: первый – ферментативный увеличение накопления белка наблюдалось после пред- гидролиз части сырья, в процессе предварительного варительного гидролиза барды Triсhoderma в течение 3 культивирования гриба Trichoderma, с получением до и 4 дней. Прирост абсолютного содержания белка со- ступных для дрожжей сахаров, второй – ферментация ставил около 10 %, что составляет прибавку порядка образующихся сахаров дрожжами, что позволяет по 35 % в сравнении с содержанием белка в дрожжевом лучить высокий выход кормового белка.

ИЗУЧЕНИЕ НЕНАСЛЕДСТВЕННОЙ ВАРИАБЕЛЬНОСТИ МИТОСПОРОВОГО ГРИБА ARTHRObOTRYs LONGA – ПРОДУЦЕНТА ЛОНГОЛИТИНА, ТРОМБОЛИТИКА С АКТИВАТОРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ Шаркова Т.С., Подорольская Л.В., Серебрякова Т.Н., Неумывакин Л.В.

Московский государственный университет им. М.в. ломоносова, Москва Институт Молекулярной Генетики РАН, Москва Лонголитин (ЛГ) перспективный для клиники препа- Изучение вариабельности гриба A.longa проводи рат – тромболитик, область применения которого в виде лось с использованием моноспоровых рассевов мик мази – лечение тромбофлебитов и флеботромбозов. ромицета на плотной среде Чапека обычного состава Рентабельность биотехнологических предприятий при температуре 26–28 °С ( агар пластинчатый ГОСТ в равной степени зависит как от внедрения прогрес- 17206).

сивных технологий, так и от использования высоко- В таких условиях выявляется два основных типа эффективных продуцентов биологически активных колоний и целый ряд промежуточных форм.

веществ. ! тип – представляют широкорастущие колонии, на Микромицет Arthrobotrys longa принадлежит к ми- 12 сутки имеющие размер.


тоспоровым грибам, которые размножаются исключи- 4.0х4.0 см. Воздушный мицелий хорошо развит, тельно бесполым путем, что делает невозможным со- тяжистый или тяжисто-. –пушистый. В центре ко здание путем традиционной селекции продуктивных и лонии может быть «хохолок» более длинных слегка стабильных гомотипов. извитых тяжей. Пигментация от кремовой до светло Микроконидии и мицелий A. longa многоядерны. оранжевой.

Такая внутриклеточная ассоциация генетически раз- Обратная сторона колонии имеет оранжевую ок личных ядер называется гетерокариозом. это способс- раску;

бывает лучисто-складчатой.

твует постоянной диссоциации культуры- продуцента 11 тип – отличается плотным «войлочным» ростом на многочисленные варианты, которые, отличаясь меж- воздушного мицелия;

ду собой рядом морфологических и физиологических скорость роста слегка замедлена ( размер колоний признаков, не выходят, однако, за пределы вида. на 12 сутки – 3,2х3,2 см) Для таких продуцентов полезно иметь данные об Пигментация воздушного мицелия от кремовой до их естественной изменчивости (вариабельности при- различных оттенков оранжевой. Обратная сторона ко знаков) с целью постоянного проведения поддержива- лонии оранжевая.

ющей селекции и отбора потенциально продуктивных Многочисленные промежуточные варианты могут вариантов. отличаться более горизонтально тяжистым рисунком Грибные биотехнологии воздушного мицелия, зональностью, клочковатым ха- ной и конидиальной. Максимальная продуктивность рактером роста, яркой оранжевой пигментацией. в отношении ЛГ совпадает с периодом интенсивной При визуальном отборе потенциально продуктив- удельной скорости роста гриба в момент прорастания ных штаммов ЛГ мы учитывали общие положения микроконидий и развития новых генераций мицелия.

биотехнологии, требующие от продуцентов биологи- Безусловно, перспективными в отношении биосин чески активных веществ способности обильно обра- теза ЛГ – комплекса ферментов с фибринолитической, зовывать в глубинной культуре вегетативные клетки и активаторной и тромболитической активностью – ока споры, быстро накапливая инокулюм для засева про- зываются колонии близкие к 1 типу. Наиболее ценная мышленных ферментеров. активаторная активность в препаратах ЛГ при культи Селекция потенциально продуктивных штаммов вировании таких штаммов составляет не менее 50 % гриба A.longa проводилась путем отбора среди полу- от общей фибринолитической активности.

ченных вариантов колоний с хорошо развитым воз- Регулярно проводя моноспоровые рассевы проду душным мицелием, на коротких гифах которого в оби- цента ЛГ гриба A.longa и отбирая по морфологичес лии находились микроконидии.. ким признакам потенциально продуктивные штаммы, При росте такого мицелия продуцента ЛГ в глу- мы убедились в возможности поддерживать стабиль бинной культуре на синтетической среде, специально но высокую биосинтетическую активность культуры, подобранной методом математического планирования независимо от времени года, наблюдая лишь незначи экспериментов, микромицет образует густую мелко- тельное снижение показателей в зимний период, что дисперсную массу, состоящую из двух фаз: мицелиаль- характерно и для многих стабильных гомотипов.

БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ ПОТЕНЦИАЛ МИКОСИМБИОНТНЫХ БАКТЕРИЙ Широких А.А., Широких И.Г.

ГУ зональный НИИ сельского хозяйства Северо-востока им. Н.в. Рудницкого РАСХН, киров bacillus subtilis и b. cereus) выявлена целлюлолитичес Глубинный способ культивирования базидиоми цетов является одним из перспективных направлений кая и хитинолитическая активность, способствующая грибной биотехнологии, поскольку позволяет созда- открытию споровых сумок и прорастанию аскоспор вать полностью контролируемые условия для роста (Gazzanelli et al., 1999). В связи с этими данными фак грибных культур. Используя эту технологию можно тором ускорения роста базидиомицетов в глубинной получать биологически активные соединения для культуре могут быть метаболиты бактерий, обладаю фармакологии, парфюмерии, а также мицелиальную щих полезными для роста мицелия свойствами (Степа биомассу для пищевой индустрии непосредственно из нова и др., 2007). Как правило, используемые для этих культуральной жидкости, минуя стадию образования целей штаммы бактерий, относятся к группе pGpB (Plant Grouth Promoting bacteria), известные способ плодовых тел (Феофилова, 2002). Одной из проблем глубинного культивирования базидиальных грибов ностью оказывать положительное влияние на рост и является относительно низкая, по сравнению с микро- развитие растений, благодаря способности к фиксации мицетами, скорость роста мицелия, что предполагает атмосферного азота, продукции фитогормонов, а так повышенные требования к соблюдению стерильности, же контролю развития фитопатогенов. Очевидно, бла а также ведёт к неоправданно высоким энергетичес- гоприятное взаимодействие этих бактерий с высшими ким затратам (Никитина и др., 2007). грибами основывается на схожих аспектах.

В природе базидиальные макромицеты сущест- Целью нашей работы являлось выделение и изу вуют как компонент сложных ассоциаций, в состав чение культурально-морфологических и физиолого которых входят бактерии (fitter, Garbaye, 1994), спо- биохимических свойств микосимбионтных бактерий, собные оказывать на грибы, на их рост, развитие и изолированных из плодовых тел базидиомицетов, соб плодоношение как стимулирующее, так и угнетаю- ранных в лесных биогеоценозах Кировской области.

щее влияние (Garbaye, 1994;

frey-klett et all., 1997). В результате изоляции бактерий из поверхностно В процессе эволюции сложилось приспособление для стерилизованных базидиом макромицетов на среду привлечения грибами нужных им бактерий – вещества RHM была собрана рабочая коллекция, включающая (моносахариды, спирты, аминосахара и аминокисло- 32 штамма. Изучение морфологических и физиоло ты), выделяемые спорами грибов, действуют на под- го-биохимических свойств выделенных культур по вижные бактерии как аттрактанты (Gupta, Arora, 1987). казало, что комплекс микосимбионтных бактерий Из плодовых тел эктомикоризного гриба Tuber borchii представлен в равной мере как грамотрицательными vitta были выделены флюоресцирующие псевдомона- (47 %), так и грамположительными (53 %), в основном ды и спорообразующие бактерии (Barbieri et al., 2000). неподвижными (72 %) и неспороносными (69 %) па У ряда штаммов (Pseudomonas fluorescens, P. syringae, лочками, различающимися по форме и размерам. По 346 ii СъезД МИколоГов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел результатам теста Хью-Лейфсона среди 32-х изоля- гибиторов методом диффузии в агар в отношении тов обладали аэробным типом метаболизма 28 %, фа- микромицетов fusarium sporotrichiella, f.oxysporum, культативно-анаэробным – 72 % культур. Абсолютное Trichoderma sp., Bipolaris sorokiniana подтвердила ан большинство штаммов были каталазоположительны- тифунгальную активность бактерии Bacillus sp. 330-3.

ми (91 %). В тестах с желатиной и крахмалом полови- Штамм Rhodococcus sp. 324-11 при тестировании в на культур проявила протеолитическую и 12 % куль- чистой культуре не проявил антифунгальных свойств, тур – амилолитическую активность. но характеризовался высокой (более 50 мкг/мл) ин Мицелий грибов, из которых были выделены изуча- тенсивностью синтеза индолил-3-уксусной кислоты емые штаммы бактерий, культивировали в конических (ИУК), избыток которой в среде мог отразиться нега колбах объёмом 250 мл с глюкозо-пептонной средой тивно на развитии базидиального гриба.

(50 мл) на качалке при 180 об/мин и температуре 26 °С. Скрининг микосимбионтных бактерий по способ В колбы с мицелиальными культурами после трёх дней ности к синтезу ауксинов выявил не только частую культивирования добавляли по 1 мл культуральной встречаемость в комплексе продуцентов ИУК (91 %), жидкости (КЖ) бактерий, которые были изолированы но и высокую активность отдельных штаммов в обра из плодовых тел этих же грибов. Контролем служили зовании ауксинов. Только 3 микосимбионтных куль колбы с добавлением синтетической ИУК (20 мкг/мл) туры обеспечили накопление ауксинов в количествах, и без неё. После 7 дней инкубации определяли грави- меньших 8 мкг/мл, культуральная жидкость 22 % изо метрически сухую биомассу мицелия, и по её приросту лятов содержала ИУК в количествах от 35 до 62 мкг/ относительно контроля судили о ростстимулирующем мл. Содержание ауксинов в культуральных жидкостях влиянии культуральной жидкости бактерий. остальных изолятов изменялось в пределах от 12,5 до Не оказали ингибирующего действия на рост бази- 32,5 мкг/мл.

диомицетов в мицелиальной культуре метаболиты 8 из Способность природных изолятов продуцировать 10 изученных бактериальных штаммов, 6 бактериаль- фитогормоны представляет интерес с точки зрения ных культур обладали способностью стимулировать возможности их использования в фитобиотехнологии.

рост грибов-базидиомицетов. Стимулирующий эффект Среди ассоциированных с базидиомицетами бактерий бактериальных метаболитов по величине был сопоста- выявлены штаммы, обладающие фиторегуляторным вим с таковым при добавлении синтетического регуля- действием. Так, проверка фиторегуляторной способ тора роста ИУК в концентрации 20 мкг/мл, и в ряде слу- ности метаболитов микосимбионтных бактерий на чаев достоверно превосходил синтетический регулятор проростках пшеницы показала, что увеличению сухой роста. Добавление в питательную среду раствора син- массы (на 11–36 % к контролю) способствует замачи тетической ИУК увеличивало скорость роста биомас- вание семян в культуральных жидкостях 47,2 % изо сы грибов (мг/сут) в среднем в 1,5–2 раза. Накопление лятов;


стимулировали апикальный рост (на 11–52 % сухой биомассы мицелия при добавлении к культуре к контролю) 52,8 % изолятов;

возрастанию линейных базидиомицета №10 КЖ бактерий Bacillus sp. 323–10 и размеров корней (на 8–33 % к контролю) способство Bacillus sp.319–10 увеличивалось втрое по сравнению вали 44,4 % изолятов. Комплексное стимулирующее с контролем. Вдвое увеличивалось накопление мице- действие на проростки оказали 30,5 % культур мико лиальной массы базидиомицета №3 под воздействием симбионтных бактерий. К числу штаммов, наиболее метаболитов культуры Bacillus sp. 311–3–1. Стимуляция активных в фиторегуляторном отношении, отнесе мицелиального роста наблюдалась при выращивании ны Agrobacterium sp. 321–6, pseudomonas sp. 314–9;

базидиомицета №3 в присутствии культуральных жид- Bacillus sp. 312–6;

Bacillus sp. 311–3–1;

Enterobacter sp.

костей бактерий Bacillus sp. 318–8 и Bacillus sp.313–8, а 315–9, продуцирующие ауксины в количествах 20,0;

также базидиомицета №11 при добавлении КЖ бакте- 23,5;

24;

35 и 42 мкг/мл среды соответственно.

рии Rhodococcus sp. 305–11 (на 84–85 % к контролю). Вместе с тем, среди бактерий, изолированных из В меньшей степени, чем КЖ грамположительных бак- плодовых тел грибов, относительно редко встречались терий, содействовала приросту (на 27 % к контролю) культуры с антагонистической активностью. Так, сла грибной биомассы культивирование базидиомицета бая антифунгальная активность обнаружена только у №12 с добавлением КЖ грамотрицательной бактерии 4, а бактерицидная активность – у 7 культур из 23 тес Ervinia 300–12. Не оказали положительного влияния на тированных бактериальных изолятов.

скорость роста и накопление сухой биомассы грибом Полученные данные показывают, что плодовые №12 метаболиты коринеформной бактерии 307–12–6. тела базидиальных грибов являются перспективным Вместе с тем, добавление к культурам базидиоми- источником ценных в биотехнологическом отношении цетов №11 и №3 соответственно метаболитов бактерий штаммов бактерий, которые могут быть использованы Rhodococcus sp. 324–11 и Bacillus sp. 330–3 привело к как для стимуляции роста мицелия базидиомицетов снижению на 15–28 % интенсивности мицелиально- при глубинном способе культивирования, так и для го роста базидиомицетов по сравнению с контролем. производства ростостимулирующих препаратов в фи Проверка антагонистических свойств бактерий-ин- тобиотехнологии.

Раздел ВЕТЕРИНАРНАЯ МИКОЛОГИЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ФАРМАЙОДА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ ТРИХОФИТИЕЙ ЖИВОТНЫХ Алешкевич В.Н.

кафедра микробиологии и вирусологии Уо «вГАвМ», витебск Своевременное и правильное лечение больных жи- Длительность лечения, развитие побочных явле вотных – одно из мероприятий в комплексе мер борь- ний и известный процент неудач диктуют необходи бы с дерматофитозами. мость дальнейшего совершенствования схем лечения Для лечения дерматофитозов животных настоящее трихофитии и микроспории в направлении сокраще время применяют различные медикаментозные пре- ния сроков терапии, уменьшения количества использу параты как отечественного, так и зарубежного произ- емых препаратов, а также изыскания вспомогательных водства. В механизм действия большинства лечебных терапевтических средств.

средств, используемых для традиционных местных Целью наших исследований явилась изучение тера обработок при дерматофитозах, положен принцип певтической эффективности фармайода, выпускаемо обеззараживания кожного покрова, что сопровожда- го УП «Могилевский завод ветеринарных препаратов, ется обычно воспалительной реакцией или даже ожо- российский аналог йодез. Фармайод – дезинфициру гами на месте их аппликации. У разных животных ющий и антисептический препарат широкого спектра степень выраженности кожной реакции различна. это действия, в состав которого входит йодополимерный необходимо учитывать при выборе медикаментозного комплекс.

средства и его рабочей концентрации (С.В.Петрович, Для изучения лечебной эффективности препарата 1989;

А.А.Конопаткин и др., 1993). «Фармайод» в начале в условиях кафедры микробио Известно, что препараты йода обладают общим логии и вирусологии УО ВГАВМ было подобрано две фунгицидным свойством. Они выделяются кожными группы морских свинок, массой 250–300 г, по 5 жи железами и накапливаются в воспалительных участках вотных в каждой и произведено экспериментальное кожи и этим способствуют ликвидации очагов пораже- заражение. Для заражения животных использовали ния. Практические работники с этой целью использу- штамм Tr.verrucosum № 153. Дерматофиты выращи ют 5–10 % спиртовую настойку йода, 5–10 % раствор вали на сусло-агаре (рН 6,4) при 26 °С в течение однохлористого йода. Одновременно рекомендуется дней и после снятия с поверхности питательной среды дача с кормом или водой йодистого калия или йодисто- гомогенизировали в миксере в течение 15 мин с добав го натрия в дозе 2 г. на 100 кг. веса животного в течение лением стерильного изотонического раствора NaCl.

10–15 дней (П.Н.Кашкин, 1967;

И.А.Голубев, 1970). Концентрацию грибных элементов подсчитывали в Вместе с тем, большинство отечественных и зару- камере Горяева. Суспензии клеток дерматофитов вво бежных исследователей сходятся в едином мнении, дили всем животным с помощью инъекционной иглы что наиболее эффективной в терапии и профилактике внутрикожно в объёме 0,1 мл при концентрации стригущего лишая должна быть комплексная обработка клеток\мл. Ежедневно животных осматривали и при животных, включающая лечение у больных животных появлении клинических признаков дерматофитоза па очагов поражений эффективным средством и общая тологический материал (корочки, чешуйки) с целью обработка всего кожного покрова. Однако, обработка подтверждения диагноза исследовали микроскопи животных рекомендуемыми дезинфицирующими рас- чески с последующим выделением ретрокультуры на творами (натрия гидроокись, формалин и др.), не всегда сусло-агаре.

дает хорошие результаты, трудоемка в применении, осо- В дальнейшем животных 1-ой группы подвергали бенно в зимнее время, а иногда и вредна для животных лечению 5 %, а 2-ой – 10 %-ными растворами фармайо и обслуживающего персонала (И.А.Голубев, 1970). да по схеме используемой при употреблении йодистых 348 ii СъезД МИколоГов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел препаратов (5–10 % растворы однохлористого йода, от 10 до 18 дней. У некоторых животных пораженные 10 % спиртовой раствор йода). эффективность лечения участки появлялись даже на мордочке.

морских свинок контролировалось по клиническому При лечении морских свинок 10 %-ным раствором выздоровлению животных и выделением ретрокульту- фармайода выздоровление наступало на 8–15-е сутки.

ры дерматофитов из пораженных участков кожи. Лечебный эффект клинически проявлялся в следую Затем изучение лечебной эффективности фармайо- щем: трихофитийные корочки начинали постепенно да проведено в условиях животноводческих хозяйств размягчаться и крошиться, воспалительные и экссу неблагополучных по трихофитии. С этой целью в дативные явления уменьшались. В дальнейшем мес КУСХП «Адаменки» Лиозненского района на ферме та поражения полностью освобождались от корочек и Черноручье были сформированы три группы телят в чешуек и на этих местах образовывались гладкие, мяг возрасте 5–7 месяцев больных трихофитией: живот- кие, облысевшие участки кожи темной пигментации.

ным 1-й группы (18 гол) фармайод в виде 10 %-ного В последующем отмечали полное восстановление во раствора наносили ватно-марлевым тампоном и вти- лосяного покрова. Все животные хорошо переносили рали в пораженные участки кожного покрова. Обра- обработку фармайодом. Каких-либо отклонений в об ботку проводили 3–4 дня ежедневно, а затем через 6 щем состоянии животных не наблюдали. Температура, дней курс лечения повторяли;

животным 2-ой группы пульс, дыхание оставались в пределах физиологической (11 голов) одновременно с обработками фармайодом с нормы. Дерматиты и ожоговые явления на месте нане лечебной целью вводили живую вакцину против три- сения препарата отсутствовали. У 4-х морских свинок хофитии крупного рогатого скота производства Витеб- подвергавшихся лечению 5 %-ным раствором фармайо ской биофабрики, серия 164, контроль 164, согласно да отторжение корочек и дальнейшее выздоровление наставления по применению биопрепарата;

3-я группа происходило на 22–30 сутки, одной – на 38 сутки.

(11 голов) – животных подергали обработке с лечеб- В дальнейшем при проведении производственных ной целью только вакциной. испытаний лечебной эффективности фармайода в ус Диагноз на трихофитию у крупного рогатого скота ловиях КУСХП « Адаменки» Лиозненского района на был предварительно поставлен по клиническим при- МТФ «Черноручье» нами использовалась 10 %-ная знакам с последующим подтверждением на основе концентрация препарата. Нами установлено, что сре проведения микологического исследования проб ма- ди телят, подвергавшихся лечению только вышеука териала (пораженные волосы, чешуйки, корочки). В занным препаратом, выздоровели все животные. Срок 1-ый и последний дни исследований, с целью санации излечиваемости составил 27 дней. Животные под помещения и всего кожно-волосяного покрова живот- вергавшиеся лечению фармайодом с одновременным ных, провели аэрозольную дезинфекцию 4,5 %-ным введением противотрихофитийной вакцины выздо раствором фармайода из расчета 10 мл\м3 с помощью равливали в течение 25 дней. В третьей группе телят, аэрозольного генератора в присутствии животных которым с лечебной целью вводилась вакцина, клини Оценку качества дезинфекции проводили соглас- ческие признаки выздоровления наступали в течение но «Методических указаний по контролю качества 40 дней. Отрицательного влияния препарата на орга дезинфекции объектов подлежащих ветеринарному низм животных не установлено. Температура, пульс, надзору», утвержденных ГУВ МСХ СССР 1988 г., по дыхание были в пределах физиологических норм.

выявлению стафилококков и возбудителей данного де- После проведения санации животноводческого рматофитоза (пункт 1.3.3.4. инструкции). помещения фармайодом в присутствии животных не эффективность обработок определяли по срокам отмечено также появления на кожном покрове новых излечиваемости животных, проявляющейся по оттор- трихофитийный очагов. В опыте, проведенном в усло жению трихофитийных корочек и росту новых волос, виях СПК «Подгорный» (МТФ Козлы) Берестовицкого привесам и проведению микологических исследова- района Гродненской области, были получены анало ний из соскобов участков поражения. гичные результаты.

Для опытов в СПК «Подгорный» Берестовицко- В результате исследований установлено, что пре го района Гродненской области использовали телят парат «Фармайод» обладает высокой лечебной эффек черно-пёстрой породы в возрасте 4–6 месяцев. После тивностью, уменьшая срок выздоровления животных постановки диагноза было отобрано 66 телят с различ- на 13–15 дней по сравнению с использованием одной ной степенью поражения трихофитией. Схема лечения лишь противотрихофитийной вакцины.

животных фармайодом была аналогична таковой как, Заключение указано выше. 1. Использование фармайода для лечения больных В ходе опытов телята находились под наблюдением животных позволяет сократить сроки выздоровления в течение 52 дней. телят от трихофитии в 1,48 раза по сравнению с исполь Исследованиями по экспериментальному воспро- зованием противотрихофитийной вакцины, увеличить изведению трихофитии у морских свинок установлено, прирост живой массы на 31 % и получить экономичес что клинические признаки дерматофитоза появлялись кую эффективность 4,93 рубля на рубль затрат.

на 7–8-е сутки в виде гиперемированных, уплотнен- 2. Санация животноводческих помещений фар ных, округлой формы участков кожи, диаметром 1,0– майодом в присутствии животных в целях обеззаражи 1,2 см, покрытых асбестовидными корочками серого вания их шерстного покрова одновременно с лечением цвета. Период возникновения новых очагов колебался данным препаратом трихофитозных очагов предуп ветеринарная микология реждает возникновение новых случаев заболевания Кашкин П.Н. Дерматомикозы. – Л.: Медгиз, 1967. – телят трихофитией. 333 с.

ЛИТЕРАТУРА эпизоотология и инфекционные болезни сель Голубев, И.А. Дерматофитозы животных / И.А. Го- скохозяйственных животных \\ А.А.Конопаткин, лубев. – М.: Колос, 1970. – 192 с. В.Т.Артюмов, И.А.Бакулов и др.: Под ред. А.А. Коно Петрович, С.В. Микозы животных / С.В. Петро- паткина.- М.: колос,1993.- 688 с.

вич. – М.: Росагропромиздат, 1989. – 173 с.

СОВРЕМЕННЫЕ ДЕЗИНФЕКТАНТЫ ПРИ ТРИХОФИТИИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА Алешкевич В.Н.

кафедра микробиологии и вирусологии Уо «вГАвМ», витебск Несмотря на достигнутое благополучие по дерма- животных. С другой стороны, в результате многолет тофитозам крупного рогатого скота трихофития до него применения формальдегид- и хлорсодержащих сих пор регистрируется среди поголовья этого вида препаратов создались условия для формирования ус животных в хозяйствах РБ. Животные миконосители тойчивой к этим дезинфектантам микрофлоры. Кро выделяют в окружающую среду обитания возбудителя ме того, установлено, что большинство применяемых инфекции и при этом создаются условия, при которых препаратов может длительно находиться во внешней возможно заражение нарождающегося невакциниро- среде без изменения или трансформироваться до кан ванного молодняка. Согласно литературных данных церогенов и экотоксинов (Кузьмин В.А. и др., 2002).

возбудители трихофитии животных находящиеся на В качестве дезинфицирующих препаратов при объектах внешней среды в споровой форме и к тому трихофитии рекомендуется использовать в случае же под защитой рогового слоя волоса, и ороговевших влажного метода дезинфекции 3 %-ный раствор фор чешуек эпидермиса сохраняют жизнеспособность до мальдегида с добавлением 1 %-ного едкого натра, 2 % 3–7 лет, оставаясь вирулентными до 1,5 лет, в наво- ного раствора формальдегида с добавлением 1 %-ного зе – 8 месяцев, в почве – до 142 суток. Дерматофиты едкого натра и 3 %-ного креолина, 12 %-ный фенолят представляют угрозу не только для животных, но и для натрия с добавлением 1 %-ного едкого натра. Темпера обслуживающего персонала и членов их семей, о чем тура растворов +30-+50 °С. Норма расхода на кирпич свидетельствуют нередкие случаи заражения трихофи- ные, бетонные и деревянные поверхности – 1л/м2.

тией животноводов, зарегистрированные в ходе прове- Надежное обеззараживание деревянных, бетонных дения собственных исследований. и металлических поверхностей обсемененных возбу Как и при других инфекционных болезнях, разрыв дителями трихофитии также достигается при приме эпизоотической цепи – уничтожение возбудителя во нении 4 %-ных растворов глутарового альдегида, 2 % внешней среде является неотъемлемой частью комп- ного раствора метафора при экспозиции 3 ч и расходе лекса оздоровительных мер при трихофитии крупно- 1л/м2 поверхности (Поляков А.А., Тарабукина Н.П., го рогатого скота. С этой целью в животноводческих Павлова И.Б. (1987).

помещениях необходимо регулярно проводить ме- Наибольший процент больных трихофитией живот ханическую очистку и дезинфекцию. Практика вете- ных регистрируется в период стойлового содержания, ринарно-санитарных мероприятий показывает, что вследствие этого использование 3 %-ного раствора обеззараживание животноводческих помещений, тер- формальдегида и других дезинфицирующих средств, ритории вокруг них, проведенное в летний период, проблематично. С целью обеззараживания помещений когда животные временно находятся в лагерях, заго- в присутствии животных в зимне-стойловый период нах, устраняет опасность возникновения трихофитии в ветеринарии широко используется метод аэрозоль в зимнее время, даже в тех помещениях, которые были ной дезинфекции. При данном способе дезинфекции в заняты заведомо неблагополучными по данному забо- несколько раз сокращаются нормы расхода препарата леванию животными. и затраты рабочего времени операторов, достигается В основном для дезинфекции животноводческих надежное обеззараживание труднодоступных мест:

помещений для профилактики различных инфекци- потолочные перекрытия, вентиляционные трубопро онных заболеваний до настоящего времени использо- воды, электроосветительная арматура и др. (Карпович вались гидроокись натрия, растворы формальдегида, Т.И. и др., 2002).

глутарового альдегида, препараты хлора. Вместе с тем Встречаются лишь единичные работы, в которых эффективность их применения невысока, они обладают освящаются аспекты аэрозольной дезинфекции при в рекомендуемых концентрациях коррозийным дейс- дерматофитозах. Аэрозольную дезинфекцию, соглас твием, после применения необходима нейтрализация но данных П.И.Левченко (1987), можно проводить воздуха, и их невозможно применять в присутствии формалин-креолиновой эмульсией.

350 ii СъезД МИколоГов РоССИИ. Тезисы докладов. Раздел В последние годы разработаны и рекомендованы фекции объектов подлежащих ветеринарному надзо для применения в медицине и ветеринарии новые не- ру», утвержденных ГУВ МСХ СССР 1988 г токсичные, экономичные, безвредные дезинфектанты: Результаты исследований и их обсуждение. Иссле Сандим-Д, КДП, Фармайод, Моноклавит-1, Глютар, дованиями установлено, что 15–25-дневные агаровые Глютекс, Белстерил, Витан, Бромсепт-50, Аламинол, культуры возбудителей трихофитии погибают после Пенохлор, Ветоксид и др. Вместе с тем при дермато- воздействия дезин- фектантов с учетом зависимости фитозах животных в результате высокой устойчивости и вида препарата, времени контакта и концентрации, возбудителя к воздействию физических и химических что не противоречит общепринятым правилам. Так, факторов выбор дезинфицирующих средств ограни- 4 %-ный раствор глютара обеспечивал 100 % гибель чен. трихофитонов при экспозиции 1 час, а 4 %-ные рас Материалы и методы. Учитывая вышеизложенное, творы натрия гидроксида, TH4+ и Сандима Д только целью наших исследований было изучение эффектив- в течении 3 часов.

ности некоторых дезинфектантов для проведения де- КДП, Сандим НУК в 1 %-ной и фармайод в 4,5 % зинфекции в неблагополучных по трихофитии крупного ной концетрации в течении 1часа обеспечивали 100 % рогатого скота хозяйствах. Действие дезинфицирующих ную гибель Tr. verrucosum и Tr. mentagrophytes.

средств вначале изучали in vitro на культурах возбудите- Вместе с тем, возбудители трихофитии находящиеся лей трихофитии – Tr. verrucosum и Tr. mentagrophytes, а в пораженных волосах и чешуйках теряли свою жизне также на патологическом материале (волосы, чешуйки, способность при воздействии таких же концентраций корочки) от больных трихофитией телят в трехкратной растворов дезинфектантов при удвоенной экспозиции повторности. Дезинфектанты испытывали, начиная с контакта с ними или повышенных концентрациях рас низкой концентрации, постепенно переходя к высокой, творов препаратов. Следовательно, трихофитоны на экспозиции – от 1, 2, 3, 4, 6, 12 и 24 часов. После обра- ходящиеся в патологическом материале, значительнее ботки дезинфектантами грибную массу и другой пато- устойчивы к воздействию дезинфицирующих средств, логический материал отмывали дважды центрифугиро- чем в культуре, что необходимо учитывать при прове ванием в изотоническом растворе хлорида натрия при дении дезинфекции.



Pages:     | 1 |   ...   | 19 | 20 || 22 | 23 |   ...   | 32 |
 





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.