авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |   ...   | 8 |

«П.Ф. Забродский, В. Г. Лим ИММУНОПАТОЛОГИЯ ПРИ ОСТРЫХ ОТРАВЛЕНИЯХ СПИРТАМИ И ХЛОРИРОВАННЫМИ УГЛЕВОДОРОДАМИ. ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ КОРРЕКЦИЯ ...»

-- [ Страница 5 ] --

Плужников Н.Н. и соавт., 2003а]. В дальнейшем происходит изменение функциональных свойств белков, входящих в состав мембран и мембраносвязанных ферментов и рецепторов, от их активации до полного ингибирования. Это может быть связано с изменением состава фосфолипидных мембран ИКК, с прямым окислением SH-групп в активных центрах мембраносвязанных ферментов, с образованием внутри- и межмолекулярных "сшивок", гидроперекисей липидов, способных также трансформировать активность ряда ферментов, например, моноаминооксидазы с моноаминов на другие амины, а малоновый диальдегид может образовывать ковалентные связи со многими амидами ИКК [Арчаков А.И., 1993;

Плужников Н.Н. и соавт., 2003б].

Ранее было показано, что весьма высокотоксичным и относительно стабильным является супероксидный анион. Он взаимодействует с молекулами белка, липопротеидов, вызывает разрыв спиралей ДНК, окисление тиоловых групп, инициирует ПОЛ, вызывая структурные нарушения биологических мембран иммуноцитов и других клеток. С прямым или опосредованным через другие активные формы кислорода действием супероксидного аниона связывают мутагенные и канцерогенные эффекты, а также нарушение многочисленных функций иммунитета [Голиков С.Н. и соавт., 1986;

Арчаков А.И., 1993;

Плужников Н.Н. и соавт., 2003а, 2003б;

Куценко С.А., 2004].

В литературе имеются сведения о том, что исследование суммарной продукции радикалов (СПР), активности каталазы, пероксидазы и количественного содержания малонового альдегида являются информативными показателями ПОЛ при интоксикацияхТХВ [Кунцевич А.Д.

и соавт., 1994]. Доказано, что каталаза и пероксидаза характеризуют активность ферментативной антиоксидантной защиты, а малоновый альдегид является показателем развития процессов ПОЛ.

Наши исследования по оценке влияния спиртов и хлорированных углеводородов на ПОЛ показали (табл. 7.5), что все испытуемые токсиканты активируют интенсивность процессов свободно – радикального ПОЛ.

Таблица 7. Действие острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами (0,75 ЛД50) на показатели перекисного окисления липидов у крыс через 3 сут (M+m) Суммарная Каталаза, Пероксидаза, Малоновый Токсиканты продукция ммоль/мин/л мкмоль/мин/л диальдегид, радикалов, нмоль/мл усл. ед.

Контроль 20,4+5,9 264,5+27,5 39,7+3,9 6,54+0, М 48,3+6,0* 162,8+ 27,5 29,3+ 2,9** 8,56+ 0,58* ЭГ 43,2+6,3* 176,0+ 24,5** 28,0+ 2,7* 9,07+ 0,61* Э 31,4+6,2** 187,5+ 20,1** 30,3+ 2,5** 7,38+ 0, ДХЭ 65,7+6,8* 145,2+ 25,0* 23,7+ 2,4* 9,05+ 0,60* ТХМ 70,2+9,0* 135,7+ 20,7* 20,1+ 2,0* 9,89+ 0,64* ТХЭ 51,0+6,7* 150,0+ 26,8* 24,0+ 2,3* 8,68+ 0,67* Примечание: в каждой серии использовалось от 9 до 14 крыс;

*;

**- различие с контролем достоверно - р0,05 (*;

** - для расчета достоверности различий использовали соответственно t –критерий Стьюдента и непараметрический критерий U Вилкоксона Манна- Уитни).

Проведенные эксперименты свидетельствуют о том, что под влиянием всех использованных ксенобиотиков, происходит увеличение СПР и количественного содержания МДА в крови, а также снижение активности каталазы и пероксидазы. Так, метанол, этиленгликоль, этанол, дихлорэтан, тетрахлорметан и трихлорэтилен статистически значимо (p0,05) повышали СПР соответственно в 2,37;

2,12;

1,54;

3,22;

3,44 и 2,50 раза, а содержание в крови МДА - в 1,31;

1,39;

1,13 (p0,05);

1,38;

1,51 и 1,33 раза соответственно.

По степени увеличения СПР токсиканты располагались в последовательности: тетрахлорметан, дихлорэтан, трихлорэтилен, метанол, этиленгликоль и этанол, а по нарастанию содержания МДА – в порядке:

тетрахлорметан, дихлорэтан, трихлорэтилен, этиленгликоль, метанол, этанол.

Существенных различий в увеличении данных показателей под влиянием отдельных ядов не выявлено, за исключением действия дихлорэтана и этанола. Метанол, этиленгликоль, этанол, дихлорэтан, тетрахлорметан и трихлорэтилен статистически достоверно (p0,05) снижали активность каталазы в крови соответственно в 1,62;

1,50;

1,41;

1,82;

1,95 и 1,76 раза.

Аналогичное действие токсиканты оказывали на активность пероксидазы.

Статистически значимых различий в редукции данных показателей под влиянием различных спиртов и хлорированных углеводородов не выявлено.

При вычислении средней степени активации ПОЛ хлорированными углеводородами и спиртами установлено, что хлорированные углеводороды инициируют ПОЛ в 2,01 раза, а спирты – в 1,54 раза (p0,05).

С нашей точки зрения, изменения показателей ПОЛ в плазме крови, несомненно, отражают интенсивность процессов свободно-радикального ПОЛ, как всех клеток различных органов в целом, так и органов системы иммунитета и, в частности, лимфоцитов. Существуют основания считать, что стресс-реакция, приводящая к повышению уровня кортикостероидов и катехоламинов в крови под влиянием ксенобиотиков, может являться одним из факторов, инициирующим ПОЛ [Меерсон Ф.З., 1984;

Валеева И.Х. и соавт., 2002]. Показана, в частности, активация ПОЛ при гипоксической гипоксии [Зарубина И.В., Миронова О.П., 2001]. Следует отметить, что вследствие поражения дыхательной системы спирты и хлорированные углеводороды вызывают этот вид гипоксии [Лужников Е.А., Костомарова Л.Г., 2000].

В нашем исследовании обращает на себя внимание то, что активация процессов свободно-радикального ПОЛ под влиянием тетрахлорметана максимальная. Это объясняется высокой активностью радикалов данного соединения, образующихся при его метаболизме, и согласуется с данными других авторов [Тиунов Л.А., 1990а]. Так, доказано, что свободный радикал ССl+3 взаимодействует с субклеточными структурами двумя путями. Во первых, он непосредственно повреждает ферментные системы. Во – вторых, свободный радикал ССl+3 оказывает, так называемое, прооксидантное действие, то есть является фактором, включающим цепную реакцию переокисления липидов. Первичным объектом такого прооксидазного ССl+ действия радикала являются ненасыщенные жирные кислоты внутриклеточных мембран (олеиновая, линолевая, линолиновая, арахидоновая), которые в свою очередь образуют свободный радикал как результат акта одноэлектронного окисления (отрыв атома водорода от реагирующей цепи). Образуются радикалы (RО+2) и гидроперекиси (RООН) жирных кислот, что приводит к структурной и функциональной перестройке мембран. В результате увеличивается проницаемость мембран для ионов Н+, К+, Nа+, Са2+ с последующим пространственным разобщением окислительных цепей [Меерсон Ф.З. 1984;

Плужников Н.Н. и соавт., 2003а]. Наконец, разрывается мембрана с выходом внутриклеточных протеолитических ферментов и клетка погибает [Лужников Е.А., 1999]. На наш взгляд, приведенные факты в полной мере можно отнести к ММС и лимфоцитам.

Процесс этот носит специфический характер только в самом начале - на стадии образования радикала ССl+3, который запускает всю цепь. Весь механизм переоксидации липидов как цепной реакции, однажды индуцированной, является неспецифическим. Это обычный, стандартный путь повреждения внутриклеточных мембран, которым завершается любая патология, любое острое отравление ксенобиотиками, ведущие к истощению антиоксидантных систем организма. Однако имеются работы, в которых доказано повреждение тетрахлорметаном мембран лизосом клеток, не связанного с ПОЛ, и последующее высвобождение и активация кислых гидролаз [Ахматова М.А. и соавт., 1982].

Коэффициенты корреляции между показателями системы иммунитета (числом АОК к ЭБ, реакцией ГЗТ) при остром отравлении тетрахлорметаном и суммарной продукцией радикалов составили соответственно -0, (p0,05) -0,783 (p0,05). Коэффициенты корреляции при острых отравлениях спиртами и хлорированными углеводородами между АОК к ЭБ, реакцией ГЗТ и содержанием каталазы и пероксидазы в крови крыс составляли от 0, до 0,759. Коэффициенты корреляции между содержанием МДА в крови и показателями иммунного статуса при действии спиртов и хлорированных углеводородов составляли от -0,639 до -0,769. Значения r между параметрами были статистически значимы, за исключением показателей, сравниваемых после действия этанола.

Таким образом, острая интоксикация спиртами и хлорированными углеводородами приводит к инициации интенсивности процессов свободно радикального ПОЛ, что проявляется угнетением активности ферментативной антиоксидантной защиты (редукция каталазы и пероксидазы) и увеличением суммарной продукции радикалов и количественного содержания малонового альдегида в плазме крови. Хлорированные углеводороды в целом в большей степени инициируют ПОЛ, чем спирты. Установлена прямая корреляция между показателями гуморального, клеточного звена иммунитета и активностью каталазы, пероксидазы в крови крыс и обратная корреляция между Т-зависимой гуморальной иммунной реакцией, ГЗТ и суммарной продукцией радикалов, количественным содержанием малонового альдегида в плазме крови крыс после острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами. Инициация интенсивности процессов свободно радикального ПОЛ под влиянием спиртов и хлорированных углеводородов является одним из факторов, способствующих формированию постинтоксикационного иммунодефицитного состояния.

Резюме На основании результатов наших исследований можно отметить, что под влиянием острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами происходит активация ГГАС (регистрируемая по функции коры надпочечников) вследствие постинтоксикационной стресс-реакции.

Выявлено, что при отравлении токсикантами через 1 сут относительная масса надпочечников увеличивается, через 3 сут она незначительно уменьшается, восстанавливаясь до контрольного значения в течение 6 сут. Острое действие спиртов и хлорированных углеводородородов повышает концентрацию кортикостерона в плазме крови через 1 и 3 ч. Затем в последующие 24 ч содержание КС в плазме крови после действия токсикантов восстанавливается до контрольного значения. Установлена обратная корреляция между гуморальной иммунной реакцией, формированием ГЗТ и концентрацией кортикостерона в крови после острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами.

Доказано, что концентрация кортикостерона, соизмеримая с содержанием этого гормона в крови при острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами, способна играть определенную роль в супрессии Т-зависимой гуморальной иммунной реакции и клеточного звена иммунитета (ЕЦ, АЗКЦ и реакции ГЗТ, характеризующей функцию Th1 лимфоцитов и макрофагов).

Острое отравление спиртами и хлорированными углеводородами (0, ЛД50) приводит к активации САС, что сопровождается статистически значимым увеличением концентрации адреналина и норадреналина в плазме крови крыс. Существенных различий между токсическими эффектами метанола, этиленгликоля, этанола, дихлорэтана, тетрахлорметана и трихлорэтилена не выявлено. Установлена обратная корреляция между Т зависимым гуморальным иммунным ответом, ГЗТ и концентрацией адреналина в крови после острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами.

При действии адреналина в концентрации соизмеримой с содержанием данных медиаторов после острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами (введение А и НА в дозе 0,025 мг/кг) установлено увеличение основных иммунных реакций. Следовательно, несмотря на выявленную обратную корреляцию между Т-зависимым гуморальным иммунным ответом, реакцией ГЗТ и концентрацией адреналина в крови после острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами, иммуносупрессивные эффекты данных токсикантов не связаны с увеличением концентрации при их остром действии в плазме крови А и НА.

Доза А и НА, составляющая 1,0 мг/кг, вызывает редукцию основных показателей гуморального и клеточного звена иммунитета.

Острая интоксикация дихлорэтаном, тетрахлорметаном и трихлорэтиленом вызывает существенное снижение активности ацетилхолинэстеразы в Т-лимфоцитах тимуса и селезенки, -нафтил-АS ацетатэстеразы и -нафтилбутиратэстеразы в спленоцитах крыс. При этом антиэстеразный эффект испытуемых спиртов не выявлен. Установлена прямая корреляция между Т-зависимым гуморальным иммунным ответом, ГЗТ и активностью ацетилхолинэстеразы в Т- лимфоцитах тимуса, содержанием эстераз в спленоцитах крыс после острого отравления хлорированными углеводородами.

Токсическое действие спиртов и хлорированных углеводородов приводит к инициации интенсивности процессов свободно-радикального ПОЛ, что проявляется угнетением активности ферментативной антиоксидантной защиты. Хлорированные углеводороды в целом в большей степени инициируют ПОЛ, чем спирты. Установлена прямая корреляция между показателями гуморального, клеточного звена иммунитета и активностью каталазы, пероксидазы в крови крыс и обратная корреляция между Т-зависимой гуморальной иммунной реакцией, ГЗТ и суммарной продукцией радикалов, содержанием малонового альдегида в плазме крови крыс после острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что в патогенезе формирования иммунодефицита после острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами важную роль играют постинтоксикационная активация ГГАС, увеличение функции надпочечников, приводящие к возрастанию концентрации кортикостероидов в крови, инициация ПОЛ, а также ингибирование хлорированными углеводородами эстераз Т-клеток.

ГЛАВА 8.

КОРРЕКЦИЯ НАРУШЕНИЙ ИММУННОГО ГОМЕОСТАЗА ПРИ ОСТРЫХ ОТРАВЛЕНИЯХ СПИРТАМИ И ХЛОРИРОВАННЫМИ УГЛЕВОДОРОДАМИ 8.1. Патогенетическое обоснование коррекции нарушений неспецифической резистентности организма и основных гуморальных и клеточных иммунных реакций после острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами Патогенетическое обоснование научных принципов, средств и методов применения различных лекарственных средств и анализ их возможной эффективности для коррекции нарушений механизмов регуляции иммуногенеза при острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами предполагает краткое рассмотрение широко используемых в настоящее время для профилактики и лечения вторичных иммунодефицитных состояний иммуностимуляторов [Германчук В.Г., 2000;

Беликов В.Г., 2001;

Молотков А.О., 2002;

Василенко О.А., 2004;

Сидельникова Н.М., 2004;

Нестерова И.В., 2005].

Исследованиями многих авторов доказано, что к иммуностимуляторам обычно относят соединения, способные увеличивать нормальный или пониженный гуморальный и клеточный иммунный ответ [Лазарева Д.Н., Алехин Е.К., 1985;

Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., 1995]. В настоящее время иммуностимуляторы по основным функциональным признакам подразделяются на препараты, стимулирующие преимущественно НРО (продигиозан, метилурацил, пентоксил, нуклеинат натрия, ликопид), клеточный иммунитет (тималин, тактивин, тимоптин, тимоген, витамин А, молграмостин, леакадин), В-систему иммунитета (миелопид, спленин) [Виноградов В.М. и соавт., 1986;

Утешев Б.С. и соавт., 1995;

Хаитов Р.М. и соавт., 2000, 1995;

Коготкова О.И. и соавт., 2004;

Сидельникова Н.М., 2004].

Известно, что по происхождению иммуностимуляторы подразделяются на продукты жизнедеятельности микроорганизмов, растений и животных (полисахариды, фосфолипиды мембран, гликопептиды, модифицированные токсины, ДНК и РНК микроорганизмов, вакцины и др.) [Лазарева Д.Н., Алехин Е.К., 1985;

Виноградов В.М. и соавт., 1986;

Хаитов Р.М. и соавт., 2000;

Чекнёв С.Б, Бабаева Е.Е, 2004;

Медуницин Н.В., 2005;

Хабибуллаев Б.Б., 2005;

Khaitov R.M., 1993], пептидные эндогенные стимуляторы иммунитета (препараты тимуса, селезенки, костного мозга, интерлейкины, интерфероны и др.) [Арион В.Я., 1981;

Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., 1978, 1983;

Яковлев Г.М. и соавт., 1987;

Базарный В.В., Ястребов А.П., 1990;

Нестерова И.В., 2005;

Петров Р.В. и соавт., 2005;

Minich E. et al., 1983;

Georgiev V.St. et al., 1993;

Stevens G., 1993], синтетические стимуляторы иммунитета (левамизол, леакадин, тимоген) [Утешев Б.С. и соавт., 1995;

Kimball E. S., 1993;

Janik G., Kopp W.C., 1993;

Sosa М., Sana A., 1993], стимуляторы метаболических процессов - экстраиммунная терапия (анаболические гормоны, рибоксил, плазмол, витамины и др.) [Лазарева Д.Н., Алехин Е.К., 1985;

Хаитов Р.М. и соавт., 1995].

Наряду с иммуностимуляторами для коррекции постинтоксикационных нарушений системы иммунитета могут использоваться средства экстраиммунной терапии - стимуляторы метаболических процессов, антигипоксанты, психоэнергизаторы, актопротекторы (анаболические гормоны, рибоксил, плазмол, витамины пирроксан, цитохром С, олифен, бемитил, пирацетам, оротат калия, инозин и др.) [Плецитый К.Д., Сухих Г.Т., 1984, 1985;

Лазарева Д.Н., Алехин Е.К., 1985;

Забродский П.Ф., 1986;

Хаитов Р.М. и соавт., 1995;

Зарубина И.В., Миронова О.П., 2001].

Кроме того, синтетические низкомолекулярные пептиды (тафтсин, его аналог ригин, вещество Р, трипептид SKE и др.) также обладают иммуностимулирующей активностью [Чейдо М.А. и соавт., 1990;

Белокрылов Г.А. и соавт., 1999]. Характерная особенность данных пептидов – наличие в их химических структурах основных аминокислот (аргинина и лизина), а также тирозина и фенилаланина, определяющих специфичность действия иммуностимуляторов [Чейдо М.А. и соавт., 1990]. Так, хлорированные углеводороды левамин и церебролизин (смеси иммуноактивных и неактивных аминокислот) при пероральном введении крысам в дозе 10-500 мкг/кг усиливают Т-зависимый иммунный ответ [Белокрылов Г.А. и соавт., 1991а].

Число существующих в настоящее время средств коррекции нарушений системы иммунитета включает несколько сотен соединений, однако широко используются лишь несколько десятков из них. Необходимо учитывать, что практически все иммуностимуляторы имеют те или иные нежелательные побочные эффекты. Однако при применении тимогена, Т-активина и имунофана они не выявлены [Хавинсон В.Х. и соавт., 1990;

Забродский П.Ф., Германчук В.Г., 2001], а при использовании миелопида – незначительны [Машковский М.Д., 2000].

Поэтому помимо имеющихся на сегодня данных об иммунотропных эффектах токсикантов при назначении иммуностимуляторов в случаях острых и хронических отравлений спиртами и хлорированными углеводородами необходимо руководствоваться поставленным иммунологическим диагнозом, то есть характером нарушения комплекса показателей НРО и системы иммунитета [Ширинский В.С., Жук Е.А.,1991;

1994]. Иммунотерапия должна проводиться на фоне мониторирования иммунного статуса, причем должна проводиться не только моно-, но и комбинированная иммуномодулирующая терапия [Нестерова И.В., 2005].

Известно, что клеточное звено иммунитета, которое в наибольшей степени поражается при интоксикации всеми использованными спиртами и хлорированными углеводородами, кроме менее выраженного эффекта на Т клетки метанола (впрочем, стимуляторы Т-звена иммунитета обязательно будут стимулировать в той или иной степени В-систему иммунитета, тесно связанную и зависимую от функции Т-клеток), может коррегироваться тималином, Т-активином, тимоптином, тимогеном и другими препаратами, полученными из тимуса, и их синтетическими аналогами [Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., 1978, 1983;

Арион В.Я.,1981;

Лазарева Д.Н., Алехин Е.К., 1985;

Виноградов В.М. и соавт., 1986;

Яковлев Г.М. и соавт., 1987;

Базарный В.В., Ястребов А.П., 1993;

Белокрылов Г.А. и соавт., 1991б;

Утешев Б.С. и соавт., 1995;

Забродский П.Ф., Киричук В.Ф., 1999;

Minich E., Fefer A., 1983;

Georgiev V.St. et al., 1993;

Khaitov R.M., 1993;

Kimball E. S., 1993;

Janik G., Kopp W.C., 1993;

Stevens G., 1993;

Sosa M., Sana A., 1993].

Изучение иммуностимулирующих характеристик различных препаратов [Осипова Л.О.,1990;

Хавинсон В.Х. и соавт., 1990;

Яковлев Г.М. и соавт., 1990;

Гюллинг Э.В. и соавт., 1991;

Земсков В.М., 1991;

Петров Р.В., 1991;

Ширинский В.С., Жук Е.А.,1991, 1994;

Семина О.В. и соавт., 1993, 1997;

Юшков В.В., Хавинсон В.Х., 1993;

Утешев Б.С. и соавт., 1995;

Ершов Ф.И., 1995;

Невидимова Т.И., Суслов Н.И., 1995;

Жук Е.А., Галенюк В.А., 1996;

Нечаев В.И. и соавт., 2003;

Забродский П.Ф., Киричук В.Ф., 1999;

Забродский П.Ф. и соавт., 2004а;

Елизарова Н.Л. и соавт., 2005] показывает, что наиболее эффективным при нарушении Т-звена иммунитета и снижении активности ЕКК являются тимоген и Т-активин, при поражении В-звена иммунитета – миелопид, а при комбинированной супрессии Т- и В-системы иммунитета имунофан. Следует учитывать, что в связи с тесной взаимосвязью всех звеньев, факторов и элементов иммунной системы, ряд авторов относят такие препараты, как полиоксидоний и миелопид, к препаратам, влияющим практически на все компоненты иммунной системы и НРО [Хаитов Р.М. и соавт., 2000]. И.В. Нестерова (2005) к препаратам, восстанавливающим функционирование фагоцитов, ЕКК и дефекты гуморального иммунитета, относит ликопид и полиоксидоний, востанавливающим гуморальный иммунитет – миелопид, а функционирование Т-клеточного звена – Т-активин (тактивин), тимоген, имунофан, бестим и т.д.

В литературе имеются противоречивые отрывочные данные относительно характера изменения факторов НРО и иммунного гомеостаза под влиянием спиртов и хлорированных углеводородов, а также отдельные сведения, имеющие отношения к сравнительной характеристике действия некоторых иммуностимуляторов на НРО, клеточный и гуморальный иммунитет [Арион В.Я. и соавт., 1984, 1987, 1991;

Земсков В.М., 1991;

Петров Р.В., 1991;

Ширинский В.С., Жук Е.А.,1991,1994;

Утешев Б.С. и соавт., 1995;

Бажигитова Б.Б., Шортанбаев А.А., 2003;

Михайлова М.Н. и соавт., 2003;

Попова Е.А. и соавт., 2003;

Щеглова М.Ю., Макарова Г.А., 2003;

Елизарова Н.Л. и соавт., 2005], которые позволяют считать наиболее приемлемыми препаратами для коррекции постинтоксикационных нарушений, вызванных отравлениями спиртами и хлорированными углеводородами, тимоген, Т-активин, миелопид и имунофан.

Анализируя результаты работ многих исследователей можно отметить, что тимоген представляет собой соединение двух молекул аминокислот – глутамина и триптофана. Данный препарат является синтетически полученным дипептидом. Он оказывает регулирующее влияние на реакции клеточного, гуморального иммунитета и НРО, стимулирует процессы регенерации в случаях их угнетения, а также улучшает течение клеточного метаболизма [Хавинсон В.Х. и соавт., 1990]. Тимоген усиливает процесы дифференцировки антигенов на поверхности лимфоцитов и нормализует количество Т-хелперов, клеток-супрессоров и их соотношение при различных иммунодефицитных состояниях [Осипова Л.О.,1990;

Хавинсон В.Х. и соавт., 1990;

Юшков В.В., Хавинсон В.Х., 1993;

Утешев Б.С. и соавт., 1995;

Ершов Ф.И., 1995;

Невидимова Т.И., Суслов Н.И., 1995;

Семина О.В. и соавт., 1993, 1997;

Забродский П.Ф., Киричук В.Ф., 1999].

Так, например, в условиях стресса тимоген в дозе 100 мкг/кг в опытах на мышах линии СВА приближал сниженные показатели системы иммунитета (количество клеток в тимусе, индекс цитотоксичности тимоцитов) к контрольным значениям [Невидимова Т.И., Суслов Н.И., 1995]. Тимоген in vitro влияет на функцию "активных" розеткообразующих лимфоцитов и на реактивность базофилов периферической крови [Осипова Л.О.,1990;

Гюллинг Э.В. и соавт., 1991]. Данный препарат коррегирует стресс индуцированные дисфункции иммунной системы [Яковлев Г.М., Хавинсон В.Х. 1989], обладает противовоспалительным действием, механизм которого, возможно, включает снижение чувствительности тканей к медиаторам воспаления и усиление синтеза антигистаминовых и антисеротониновых антител, нейтрализующий характер которых и их патогенетическая роль показаны на моделях агарового и серотонинового воспаления [Яковлев Г.М.

и соавт., 1990;

Юшков В.В., Хавинсон В.Х., 1993]. Тимоген оказывает стимулирующее действие практически на все звенья дифференцировки Т лимфоцитов (от стволовой клетки до эффекторов клеточного иммунитета), что выражается в значительном повышении функции клеточного и гуморального звеньев иммунитета и НРО. Он усиливает процессы дифференцировки лимфоидных клеток, индуцирует экспрессию дифференцировочных антигенов, нормализует количество Т-хелперов, Т супрессоров и В-клеток, восстанавливает коэффициент дифференцировки иммунокомпетентных клеток. По своей биологической активности тимоген в 10-100 раз, а в отдельных случаях в 1000 раз превосходит природный препарат тимуса тималин [Яковлев Г.М. и соавт., 1990]. По показаниям к применению тимоген в основном сходен с другими иммуностимуляторами и используется в комплексной терапии взрослых и детей при острых и хронических инфекционных заболеваниях, сопровождающихся снижением показателей клеточного иммунитета, при угнетении репаративных процессов после тяжелых травм, а также при других иммунодефицитных состояниях [Машковский М.Д., 2000].

Положительными свойствами препарата являются отсутствие побочных эффектов при лечении, совместимость практически со всеми лекарственными препаратами различных фармакологических групп, возможность использования с традиционными методами лечения [Яковлев Г.М. и соавт., 1990;

Невидимова Т.И., Суслов Н.И., 1995;

Утешев Б.С. и соавт., 1995]. В экспериментах на животных установлено, что иммуностимулирующая доза тимогена в зависимости от патологического состояния и вида животных находится в пределах от 1 до 100 мкг/кг [Невидимова Т.И., Суслов Н.И., 1995;

Забродский П.Ф., Киричук В.Ф., 1999]. При отравлениях дихлорэтаном, нитрилами, некоторыми спиртами и ФОС тимоген способен в той или иной степени восстанавливать некоторые показатели системы иммунитета [Забродский П.Ф. и соавт., 1997].

Известно, что Т-активин является иммуномодулирующим препаратом полипептидной природы, полученным из вилочковой железы крупного рогатого скота. При иммунодефицитных состояниях он восстанавливает измененные функциональные показатели Т-системы иммунитета, стимулирует продукцию лимфокинов, в том числе интерферонов, нормализует другие показатели клеточного иммунитета. Применяют Т активин у взрослых в комплексной терапии инфекционных, гнойных, септических процессов и других заболеваний, сопровождающихся иммунодефицитным состоянием с преимущественным поражением Т системы иммунитета [Ковальская Н.И. и соавт., 1984;

Арион В.Я. 1981;

Арион В.Я. и соавт., 1984, 1987, 1991;

Базарный В.В., Ястребов А.П., 1993;

Нечаев В.И. и савт., 2003]. Препарат противопоказан при атопической форме бронхиальной астмы и беременности [Машковский М.Д., 2000]. Показана эффективность Т-активина при отравлениях хлорорганическими соединениями [Вахидова Г.А. и соавт.,1990].

Имеются сведения, что Т-активин обладает более высокой эффективностью в связи с его способностью активировать выработку интерферона Т-лимфоцитами [Вахидова Г.А. и соавт., 1990;

Борисова А.М. и соавт., 1991;

Ханафиева И.В. и соавт., 1992;

Базарный В.В., Ястребов Ф.П., 1993;

Машковский М.Д., 2000]. Этот лимфокин активирует ЕКК и восстанавливает постинтоксикационное нарушение их функции, а также индуцирует экспрессию рецепторов ИЛ-2 на их поверхности [Сухих Г.Т. и соавт., 1984]. Препарат оказывает существенное иммуномодулирующее влияние на функцию макрофагов и различные иммунные реакции в очень широком диапазоне доз от 0,001 до 5 мкг/кг [Большаков и соавт., 1991;

Кириличева Г.Б. и соавт., 1990]. В литературе описаны свойства Т-активина увеличивать пролиферацию, дифференцировку и функциональную активность Т-клеток [Шляхов Э.Н., Гылка В.В., 1989;

Арион В.Я. и соавт., 1987;

Стасий Е.Д. и соавт., 1990;

Арион В.Я., Иванушкин Е.Ф., 1991]. Т активин способен также стабилизировать В-звено иммунитета [Имантаева Г.М., 2005].

Сравнительно недавно стало известно, что Т-независимый иммунный ответ на антигены 2-го класса, к которым относятся полисахариды бактериальных стенок и, в частности, Vi-Ag, обеспечивается взаимодействием В-лимфоцитов с тимуснезависимыми Т-лимфоцитами (Т) [Хаитов Р. М. и соавт., 2000]. Поэтому вполне логично предположить, что Т активин способен стимулировать и Т-независимый гуморальный иммунный ответ, активируя Т. Кроме того, Т-активин, повышая функцию макрофагов [Таранов В.А., Короткова М.И., 1989], приводит к увеличению ими продукции ИЛ-1, который может активировать Т-независимое антителообразование [Gillbert R.V., Hoffmann M.K., 1985] при остром отравлении различными ТХВ.

Миелопид - иммуностимулирующий препарат пептидной природы, получаемый из культуры клеток костного мозга млекопитающих (свиней или телят). При иммунодефицитных состояниях миелопид восстанавливает показатели В- и Т-систем иммунитета, стимулирует продукцию антител и функциональную активность иммунокомпетентных клеток и способствует восстановлению ряда других показателей гуморального звена иммунитета, коррегирует дифференцировку кроветворных клеток – предшественников у мышей с экспериментальным Т-иммунодефицитом, обладает стресспротективным действием, оказывает терапевтический эффект при различных инфекционных заболеваниях [Руднева Т.Б. и соавт., 1989;

Подосинников И.С. и соавт.,1991;

Степаненко Р.Н. и соавт., 1991;

Турсунов Б.С. и соавт., 1992;

Михайлова А.А. и соавт., 1989;

Михайлова А.А., 1997;

Баранова И.Д. и соавт., 1998;

Кирилина Е.А. и соавт., 1998;

Хаитов Р.М. и соавт., 2000;

Mikhailova A.A., Fonina L.A., 1990].

Исследованиями последних лет показано, что имунофан (аргинил-альфа аспартил-лизил-тирозил-аргинин) – гексапептид с молекулярной массой Д. Препарат относится к синтетическим иммуностимуляторам, обладает иммунорегулирующим, детоксикационным, гепатопротективным действием и вызывает инактивацию свободнорадикальных процессов ПОЛ [Покровский В.И. и соавт., 1997;

Лебедев В.В. и соавт., 2000]. Фармакологическое действие пептидного иммунооксидредуктанта основано на достижении коррекции иммунной и окислительно-антиокислительной систем организма.

Действие препарата начинает развиваться в течение 2-3 часов (быстрая фаза) и продолжается до 4 мес (средняя и медленная фазы).

В течение быстрой фазы (продолжительность до 2-3 суток) прежде всего, проявляется детоксикационный эффект – усиливается антиоксидантная защита организма путем стимуляции продукции церулоплазмина, лактоферрина, активности каталазы. Препарат нормализует перекисное окисление липидов, ингибирует распад фосфолипидов клеточной мембраны и синтез арахидоновой кислоты с последующим снижением уровня холестерина крови и продукции медиаторов воспаления. При токсическом и инфекционном поражении печени имунофан предотвращает цитолиз, снижает активность трансаминаз и уровень билирубина в сыворотке крови [Караулов А.В., 2000а, 2000б;

Константинов Б.А. и соавт, 2000;

Лебедев В.В. и соавт., 2000].

В течение средней фазы (начинается через 2-3 суток, продолжительность – до 7-10 суток) происходит усиление реакций фагоцитоза и гибели внутриклеточных бактерий и вирусов. В течение медленной фазы (начинает развиваться на 7-10 сут, продолжительность до 4 месяцев) проявляется иммунорегуляторное действие препарата – восстановление нарушенных показателей клеточного и гуморального иммунитета. В этот период наблюдается восстановление иммунорегуляторного индекса, отмечается увеличение продукции иммуноглобулинов [Лебедев В.В. и соавт., 2000;

Бажигитова Б.Б., Шортанбаев А.А., 2003;

Михайлова М.Н. и соавт., 2003;

Попова Е.А. и соавт., 2003;

Щеглова М.Ю., Макарова Г.А., 2003].

Влияние препарата на продукцию специфических противовирусных и антибактериальных антител эквивалентно действию некоторых лечебных вакцин. В отличие от последних препарат не оказывает существенного влияния на продукцию реагиновых антител класса IgE и не усиливает реакцию гиперчувствительности немедленного типа [Лебедев В.В., 1999;

Лебедев В.В., Покровский В.И., 1999а, 1999б].

В связи с установленным нами поражением различных элементов системы иммунитета, нарушением его разнообразных реакций, популяций лимфоцитов под влиянием токсикантов имунофан, возможно, может являться препаратом выбора при остром отравлении различными спиртами и хлорированными углеводородами. Имунофан в отличие от тимогена и Т активина способен оказывать не только иммуностимулирующее влияние на все звенья системы иммунитета, но и обеспечивать детоксицирующий, гепатопротективный и антиоксидантный эффекты [Покровский В.И. и соавт., 1997;

Лебедев В.В., 1999;

Лебедев В.В., Покровский В.И., 1999а, 1999б;

Забродский П.Ф., Германчук В.Г., 2001]. Антиоксидантное действие имунофана предотвращает повреждение ДНК лимфоцитов и гранулоцитов, вызванное гонотоксическими факторами окружающей среды (токсикантами) [Караулов А.В. и соавт., 2005].

Исходя из имеющихся в литературе данных и в связи с важностью теоретического и практического значения проблемы коррекции иммунодефицитных состояний после интоксикации ТХВ, учитывая эффективность Т-активина [Таранов В.А., Короткова М.И., 1989;

Большаков И.Н. и соавт., 1991] и тимогена [Забродский П.Ф., 1999], в частности, при некоторых постинтоксикационных иммунодефицитных состояниях, целесообразно было уточнить и провести дополнительную оценку их действия на различные иммунные реакции после острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами. Нуждается во всестороннем исследовании и возможность коррекции иммунного гомеостаза имунофаном после острого токсического действия спиртов и хлорированных углеводородов, которая практически не исследована. Предположительно эффективность имунофана для восстановления показателей иммунного статуса при постинтоксикационных иммунодефицитах, вызванных алкоголем, его суррогатами и хлорированными углеводородами можно оценить, как очень высокую [Забродский П.Ф. и соавт, 2004а].

В литературе также описано подавление иммуностимулятором реафероном (-интерфероном) потребления алкоголя у мышей [Давыдова Т.В., Фомина В.Г., 2001]. Это создает научную предпосылку и практическую возможность лечить иммунодефицит после отравления этанолом и одновременно снижать тягу к его потреблению. Однако реаферон имеет большое число побочных эффектов и противопоказаний [Забродский П.Ф., Германчук В.Г., 2001]. Т-активин способен приводить к увеличению интерферонов, активируя Тh-1-лимфоциты [Базарный В.В., Ястребов Ф.П., 1993;

Машковский М.Д., 2000].

Исследованиями последних лет показано, что длительное введение иммуностимулятора полиоксидония алкоголизированным крысам в период депривации снижало влечение к алкоголю [Кушнир Е.А. и соавт., 2004].

Поэтому данный препарат, наряду с имунофаном, Т-активином, тимогеном и миелопидом, можно рассматривать как весьма перспективное средство восстановления функции иммунной системы после острого отравления спиртами. Однако в отличие от имунофана у полиоксидония не описано гепатопротективного и антиоксидантного эффекта.

В литературе имеются сведения о том, что одним из способов профилактики и лечения, возникающего при этом постинтоксикационного иммунодефицитного состояния, может быть применение фолината кальция (ФК) для ускорения метаболизма высокотоксичного продукта биотрансформации метанола муравьиной кислоты (МК), так как основной путь деградации данного соединения является фолат-зависимым [Кожемякин Л. А. и соавт., 1991;

Ройт А и соавт., 2000]. Вероятно, возможное иммунопротективное (иммуностимулирующее) действие ФК в отношении антителообразования, обусловленного функцией В-клеток, объясняется тем обстоятельством, что при практически полном потреблении фолиевой кислоты метанолом ФК, восполняя ее ресурсы, возможно, способен восстанавливать антителообразование (синтез Ig) В-лимфоцитами.

Таким образом, сравнительная оценка эффективности тимогена, Т активина, миелопида и имунофана показывает возможность их изолированного или комбинированного применения для восстановления НРО, Т-, В-звена иммунитета, активности ЕКК и АЗКЦ после отравления спиртами и хлорированными углеводородами. Для восстановления функции В-клеток после отравления метанолом может быть целесообразным использование фолината кальция.

8.2. Сравнительная оценка эффективности иммуностимуляторов после острого действия спиртов и хлорированных углеводородов 8.2.1. Влияние иммуностимуляторов на показатели неспецифической резистентности организма Сравнительное влияние иммуностимуляторов на показатели НРО проводили при остром отравлении всеми испытуемыми ТХВ в дозе 0,75 ЛД50.

Результаты исследования показали, что данная доза для оценки эффекта иммунокорректоров является оптимальной, так как использованные спирты и хлорированные углеводороды вызывают при данной дозе гибель животных, существенно меньше 15% в течение 2 сут.

Нами установлено, что при острой интоксикации метанолом в дозе 0, ЛД50 тимоген, Т-активин, миелопид и имунофан через 3 сут после их применения увеличивают активность основных факторов НРО (табл. 8.1).

Таблица 8. Влияние иммуностимуляторов на основные показатели НРО у крыс после острого отравления метанолом (0,75 ЛД50) (M+m) Препараты Лизоцим, ТКБ,% Индекс активности мг/л нейтрофилов (НСТсп) Контроль 8,7+0,3 (42) 65,4+2,3 (40) 0,26+0,01 (41) Метанол 5,4+0,5* 45,8+4,3* 0,12+0,02* Метанол + тимоген 6,7+0,6** 53,1+4,0* 0,16+0,02* Метанол+Т-активин 7,1 +0,7** 55,0+4,2* 0,19+0,03** Метанол+миелопид 6,3 +0,8* 51,9+4,5* 0,20+0,02* Метанол + имунофан 8,9+0,9 67,3+5,1 0,28+0, Примечание: в скобках – число животных;

в каждой серии использовалось от 10 до животных;

*;

**- различие с контролем достоверно - р0,05 (*;

** - для расчета достоверности различий использовали соответственно t –критерий Стьюдента и непараметрический критерий U Вилкоксона-Манна- Уитни).

При этом до контрольного значения активность лизоцима, содержание ТКБ и фагоцитарно-метаболическую активность нейтрофилов (индекс активности нейтрофилов в спонтанном НСТ-тесте) повышал только имунофан. Сывороточную активность лизоцима тимоген, Т-активин и миелопид увеличивали по сравнению с показателем после отравления, который был снижен по сравнению с контролем в 1,61 раза, соответственно в 1,24;

1,31 и 1,10 раза.

Содержание ТКБ в крови тимоген, Т-активин и миелопид увеличивали по сравнению с показателем после отравления, который был снижен по сравнению с контролем в 1,43 раза, соответственно в 1,16;

1,20 и 1,13 раза, а индекс активности нейтрофилов - в 1,33;

1,58 и 1,67 раза соответственно.

Существенных различий в активности использованных иммуностимулятров не выявлено, за исключением более выраженного эффекта имунофана по сравнению с действием тимогена и миелопида в отношении ряда показателей НРО. В целом по увеличению степени активности они располагались в порядке: миелопид, тимоген, Т-активин и имунофан.

В экспериментах на белых крысах нами установлено (табл. 8.2), что при острой интоксикации дихлорэтаном в дозе 0,75 ЛД50 тимоген увеличивал активность лизоцима, ТКБ и ФМАН соответственно в 1,34;

1,10 и 1,45 раза через 3 сут по сравнению с показателем при интоксикации.

Таблица 8. Влияние иммуностимуляторов на основные показатели НРО у крыс после острого отравления дихлорэтаном (0,75 ЛД50) (M+m) Препараты Лизоцим, ТКБ,% Индекс активности мг/л нейтрофилов (НСТсп) Контроль 8,7+0,3 (42) 65,4+2,3 (40) 0,26+0,01 (41) ДХЭ 5,0+0,6* 45,1+4,3* 0,11+0,02* ДХЭ + тимоген 6,7 +0,8* 50,0+4,0* 0,16+0,02* ДХЭ +Т-активин 7,0 +0,7* 54,4+4,2* 0,18+0,03* ДХЭ +миелопид 6,5 +0,9* 55,9+4,3** 0,19+0,03** ДХЭ + имунофан 9,1+0,9 69,0+5,1 0,29+0, Примечание: в скобках – число животных;

в каждой серии использовалось от 10 до животных;

*;

**- различие с контролем достоверно - р0,05 (*;

** - для расчета достоверности различий использовали соответственно t –критерий Стьюдента и непараметрический критерий U Вилкоксона-Манна- Уитни).

Применение Т-активина приводило к статистически значимому повышению данных параметров по сравнению с показателями при отравлении ДХЭ соответственно в 1,40;

1,21 и 1,64 раза, а миелопида - в 1,30;

1,24 и 1,73 раза соответственно.

Эффекты тимогена, Т-активина и миелопида практически не отличались и не приводили к полному восстановлению активности исследованных показателей. Иммуностимулирующее действие имунофана полностью восстанавливало, сниженную острой интоксикацией дихлорэтаном, активность исследованных гуморальных и клеточных факторов НРО. По степени активности иммуностимуляторы существенно не отличались, за исключением имунофана, эффективность которого по сравнению с другими препаратами в отношении ряда показателей НРО была существенно выше. В целом в порядке увеличения активности иммуностимуляторы располагались в последовательности: миелопид-тимоген-Т-активин-имунофан.

Принимая во внимание то обстоятельство, что при использовании иммуностимуляторов после острой интоксикации метанолом и дихлорэтаном, которые поражали систему НРО в большей степени, чем другие спирты и хлорированные углеводороды (см. главу 3), наибольшей активностью отличался имунофан, именно данный препарат применялся нами для оценки его эффективности после отравления этиленгликолем, тетрахлорметаном, трихлорэтиленом и этанолом.

Нашими исследованиями показано (табл. 8.3), что при острой интоксикации ЭГ в дозе 0,75 ЛД50 имунофан через 3 сут после его применения существенно увеличивал активность лизоцима, ТКБ и ФМАН соответственно в 1,52;

1,34 и 2,33 раза через 3 сут по сравнению с показателем при интоксикации.

Данный препарат повышал активность лизоцима, ТКБ и ФМАН соответственно в 1,29;

1,22 и 1,31 раза через 3 сут по сравнению с параметром после отравления этанолом, отмечалось увеличение данных факторов НРО в 1,55;

1,38 и 2,00 раза по сравнению с показателем при интоксикации ТХМ и в 1,56;

1,46 и 1,71 раза по сравнению с показателем при интоксикации ТХЭ (р0,05). Использование имунофана полностью восстанавливало активность лизоцима, ТКБ и ФМАН до контрольных уровней после действия ЭГ, Э, ТХМ и ТХЭ.

Таблица 8. Влияние имунофана на основные показатели НРО у крыс после острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами (0,75 ЛД50) (M+m) Препараты Лизоцим, мг/л ТКБ,% Индекс активности нейтрофилов (НСТ сп) Контроль 8,7+0,3 (42) 65,4+2,3 (40) 0,26+0,01 (41) ЭГ 6,0+0,5* 50,1+4,2* 0,12+0,02* Э 7,1+0,6* 55,9+4,6** 0,19+0,03* ТХМ 5,5 +0,5* 46,2+4,1* 0,13+0,02* ТХЭ 5,7+0,6* 47,1+4,7* 0,17+0,02* ЭГ + имунофан 9,1+0,8 67,0+5,1 0,28+0, Э+ имунофан 9,2+1,2 68,5+5,7 0,25+0, ТХМ+ имунофан 8,5+1,0 64,0+5,2 0,26+0, ТХЭ+ имунофан 8,9+1,1 69,0+5,5 0,29+0, Примечание: в скобках – число животных;

в каждой серии использовалось от 10 до животных;

*;

**- различие с контролем достоверно - р0,05 (*;

** - для расчета достоверности различий использовали соответственно t –критерий Стьюдента и непараметрический критерий U Вилкоксона-Манна- Уитни).

Рассматривая иммуностимулирующие свойства тимогена и имунофана уместно упомянуть работы, в которых показано (опыты на мышах), что глутаминовая, аспарагиновая кислоты, треонин, валин стимулируют антителогенез и фагоцитоз. Лизин, пролин, тирозин и лейцин не изменяют гуморальный иммунный ответ, но повышают фагоцитоз, а аргинин угнетает антителогенез, но увеличивает фагоцитарную активность нейтрофилов.

Авторы считают, что регуляция иммуногенеза аминокислотами (а тимоген и имунофан – это соответственно две и шесть иммунологически активных аминокислот) является эволюционно древним механизмом, сохранившим свое значение и на более позднем этапе эволюции [Белокрылов Г.А. и соавт., 1991б]. Доказано, что механизм иммунотропного действия аспарагиновой кислоты связан с активацией цАМФ, последующей стимуляцией синтеза ДНК, что приводит к увеличению продукции иммунокомпетентных клеток в тимусе, повышению функции лимфоцитов [Базарный В.В., Ястребов А.П., 1993]. При лечении больных с заболеваниями легких (следует отметить, что пневмонии являются наиболее частыми осложнениями после отравлений спиртами и ХУ [Лужников Е.А., Костомарова Л.Г., 2000]) доказана эффективность имунофана в повышении ФМАН [Жубантурлиева А.Б. и соавт., 2003].

Таким образом, применение тимогена, Т-активина и миелопида в течение 3 сут приводило к частичному восстановлению факторов НРО после отравления спиртами и хлорированными углеводородами (0,75 ЛД50).

Использование имунофана в течение 3 сут в дозе 10 мкг/кг обеспечивало полное восстановление до контрольных уровней основных факторов НРО.

В целом в порядке увеличения активности иммуностимуляторы располагались в последовательности: миелопид – тимоген - Т-активин имунофан.

8.2.2. Оценка действия иммуностимуляторов на основные показатели гуморального звена иммунитета Нами установлено (табл. 8.4), что применение тимогена в дозе 10 мкг/кг при его использовании в течение 3 сут частично восстанавливало Т зависимое антителообразование, увеличивая число АОК к ЭБ в селезенке крыс в 1,53 раза по сравнению с данным показателем при отравлении метанолом. Т-активин и миелопид в дозе 5 мкг/кг также частично восстанавливали Т-зависимый гуморальный иммунный ответ, повышая число АОК к ЭБ соответственно в 1,71 и 1,44 раза.

Таблица 8. Влияние иммуностимуляторов на основные показатели В-звена иммунитета у крыс при острой интоксикации метанолом (0,75 ЛД50) (M+m) Метанол и его АОК, 3 комбинации с АОК к Vi-Ag, 10 синтезирующие АОК к ЭБ, IgG, иммуностимуля торами Контроль (23) 35,1+1,7 28,5+1,6 18,4+1, Метанол 19,7+2,2* 17,8+2,3* 10,0+1,5* Метанол+тимоген 30,2+2,5 21,2+2,5* 15,8+1, Метанол+Т-активин 33,7+2,3 19,9+2,2* 17,1+1, Метанол+миелопид 28,3+2,2 26,2+2,3 14,2+1, Метанол+имунофан 37,0+3,7 33,8+3,3 23,3+2, Примечание: в скобках – число животных;

в каждой серии опытов использовалось 7- животных;

*- различие с контролем достоверно - р0,05.

Анализируя результаты наших исследований, можно отметить, что введение тимогена и Т-активина обеспечивало частичное восстановление Т независимого антителообразования. Так, использование данных препаратов увеличивало АОК к Vi-Ag соответственно в 1,19 и 1,12 раза по сравнению с параметром при отравлении метанолом. Практически полностью данный параметр восстанавливало применение миелопида и имунофана, увеличивая его по сравнению с показателем при отравлении метанолом в 1,42 и 1,9 раза соответственно.

На основании полученных данных показано, что синтез В-клетками IgG практически полностью восстанавливали все иммуностимуляторы. Так, тимоген, Т-активин, миелопид и имунофан увеличивали число АОК, синтезирующих IgG, соответственно в 1,58;

1,71;

1,42 и 2,33 раза.

Максимальный эффект установлен при применении имунофана, который в дозе 10 мкг/кг полностью восстанавливал Т-зависимую антителопродукцию после острой интоксикации метанолом в дозе 0,75 ЛД50, увеличивая АОК к ЭБ, АОК к Vi-Ag и АОК, синтезирующих IgG, соответственно в 1,89;

1,90 и 2,33 по сравнению с показателями после отравления метанолом.

По возрастанию степени активности в отношении Т-зависимой антителопродукции (число АОК к ЭБ;

АОК, синтезирующие IgG) при острой интоксикации метанолом иммуностимуляторы располагались в последовательности: миелопид- тимоген-Т-активин-имунофан, а в отношении Т-независимого антителобразования в порядке увеличения эффекта – в последовательности: Т-активин - тимоген - миелопид – имунофан.

Проведенный анализ результатов исследования позволяет обобщить, что Т-активин повышает Т-зависимый иммунный ответ, возможно, вследствие его стимулирующего влияния на функцию макрофагов [Большаков И.Н. и соавт., 1991;

Кирилличева Г.Б. и соавт., 1990]. Известно, что эти клетки поставляют после поглощения и переработки антиген Т-хелперам, после чего происходит кооперация макрофагов, Т- и В-лимфоцитов, осуществляющих синтез иммуноглобулинов [Ройт А., 1991;

Хаитов Р.М. и соавт., 2000].

Стимуляция Т-независимой антителопродукции осуществляется тимогеном и имунофаном, вероятно, путем увеличения секреции ИЛ- макрофагами или экспрессии рецепторов к ИЛ-1 на В-клетках, а также активацией процессов пролиферации и дифференцировки В-лимфоцитов [Georgiev V.St., Albright J.E., 1993]. Стимуляция Т-активином, тимогеном и имунофаном Т-независимого антителообразования при остром отравлении спиртами и хлорированными углеводородам, возможно, обусловлена их действием на макрофаги [Таранов В.А., Короткова М.И., 1989], в результате которого они продуцируют ИЛ-1, являющийся помимо антигена фактором, участвующим в независимом от тимуса антителообразовании [Gillbert R.V., Hoffmann M.K., 1985]. Не исключена также активация иммуностимуляторами тимуснезависимых Т-лимфоцитов (Т), индуцирующих продукцию В клетками антител к Vi-Ag [Хаитов Р.М. и соавт., 2000], В настоящее время при лечении острых интоксикаций метанолом и этиленгликолем в качестве антидота обязательно используется этанол [Лужников Е.А., Костомарова Л.Г., 1989, 2000;

Маркова И.В. и соавт., 1998;

Маркизова Н.Ф. и соавт., 2001;

Куценко С.А. и соавт., 2004]. Известно, что этот спирт при комбинированном применении с метанолом усиливает его иммунодепрессивный эффект [Забродский П.Ф., Германчук В.Г., 2001], поэтому представляет интерес исследование эффективности иммуностимуляторов при комбинированном действии метанола и его антидота этанола.


Проведенные нами эксперименты показали (табл. 8.5), что после Таблица 8. Влияние иммуномодуляторов на показатели В-звена иммунитета у крыс при интоксикации метанолом (0,75 ЛД50) с применением этанола (M+m) Вещества АОК к ЭБ, АОК к Vi-Ag, АОК, 3 10 10 синтезирующие IgG, Контроль (23) 35,1+1,7 28,5+1,6 18,4+1, Метанол 19,7+2,2* 17,8+2,3* 10,0+1,5* Этанол 28,3+2,6* 22,7+2,1* 14,1+1,6* Метанол +этанол 15,5+2,0* 12,9+1,8* 8,2+0,9* Метанол +этанол+ 27,0+2,3* 20,3+2,0* 12,8+1,3* имунофан Метанол +этанол+ 29,5+2,4** 22,5+2,1* 13,9+1,4* фолинат кальция Метанол +этанол+Т- 25,1+2,2* 19,8+2,0* 11,3+1,2* активин Метанол +этанол+ 31,0+2,4 23,6+2,0** 15,8+1, Т-активин+имунофан Метанол +этанол+ 38,2+3,9 34,9+3,4 24,0+2, имунофан+фолинат кальция Примечание: в скобках – число животных;

в каждой серии опытов использовалось 7- животных;

этанол вводили внутрибрюшинно в дозе 3 г/кг 2 раза в сутки);

*;

**- различие с контролем достоверно - р0,05 (*;

** - для расчета достоверности различий использовали соответственно t –критерий Стьюдента и непараметрический критерий U Вилкоксона Манна-Уитни).

применения имунофана в дозе 10 мкг/кг в течение 3 сут после отравления метанолом и лечения его назначением этанола частично восстанавливало Т зависимое антителообразование, увеличивая число АОК к ЭБ в селезенке крыс в 1,74 раза по сравнению с данным показателем при остром воздействии метанола в комбинации с этанолом. Число АОК к Vi-Ag и АОК, синтезирующих IgG, имунофан после действия метанола в комбинации с этанолом увеличивал соответственно в 1,57 и 1,56 раза по сравнению с показателем после отравления метанолом в сочетании с этанолом.

Применение фолината кальция после отравления метанолом в комбинации с этанолом повышало по сравнению с показателями при интоксикации Т зависимое антителообразование, число АОК к Vi-Ag (Т-незавимую антителопродукцию) и число АОК, синтезирующих IgG, соответственно в 1,90;

1,74 и 1,69 раза. Применение Т-активина, а также комбинации имунофана и Т-активина восстанавливало показатели гуморального иммунитета частично. Использование имунофана в комбинации с фолинатом кальция после действия метанола в сочетании с этанолом полностью восстанавливало исследованные показатели В-системы иммунитета.

Проведенные нами исследования показали (табл. 8.6), что применение Т-активина в дозе 10 мкг/кг (как препарата, повышающего большинство показателей В-звена иммунитета) после отравления этиленгликолем и лечения его интоксикации назначением этанола частично восстанавливало Т-зависимое антителообразование, увеличивая число АОК к ЭБ в селезенке крыс в 1,79 раза по сравнению с данным показателем при остром воздействии этиленгликоля в комбинации с этанолом. Число АОК к Vi-Ag и АОК, синтезирующих IgG, Т-активин после отравления этиленгликолем в комбинации с этанолом увеличивал соответственно в 1,56 и 1,38 раза по сравнению с показателем после некомбинированного действия спиртов.

Применение имунофана после отравления этиленгликолем в комбинации с этанолом повышало по сравнению с показателями при интоксикации данными спиртами Т-зависимое антителообразование, число АОК к Vi-Ag (Т-незавимую антителопродукцию) и число АОК, синтезирующих IgG, соответственно в 1,85;

1,74 и 1,61 раза. Использование имунофана в комбинации с Т-активином после действия этиленгликоля в сочетании с этанолом полностью восстанавливало исследованные показатели В-звена иммунитета.

Таблица 8. Влияние иммуномодуляторов на основные показатели В-звена иммунитета у крыс при острой интоксикации этиленгликолем (0,75 ЛД50) с применением его антидота этанола (M+m) АОК к ЭБ, 103 АОК к Vi-Ag, Вещества АОК, синтезирующие IgG, Контроль (23) 35,1+1,7 28,5+1,6 18,4+1, Этиленгликоль 20,1+2,2* 18,2+2,3* 10,5+1,5* Этанол 28,3+2,6* 22,7+2,1* 14,1+1,6* ЭГ +Э 16,1+1,9* 13,3+1,8* 8,7+0,9* ЭГ +Э+ Т-активин 28,9+2,0** 20,7+2,0** 12,0+1,4* ЭГ +Э+ имунофан 29,8+2,3** 23,3+2,2** 14,0+1,3* ЭГ +Э+ Т-активин 36,9+3,0 29,6+2,1 19,9+1, +имунофан Примечание: в скобках – число животных;

в каждой серии опытов использовалось 7- животных;

этанол вводили внутрибрюшинно в дозе 3 г/кг 2 раза в сутки;

*;

**- различие с контролем достоверно - р0,05 (*;

** - для расчета достоверности различий использовали соответственно t –критерий Стьюдента и непараметрический критерий U Вилкоксона Манна-Уитни).

В ходе проведенных нами опытов установлено (табл. 8.7), что применение тимогена, Т-активина, миелопида и имунофана увеличивало Т зависимое антителообразование по сравнению с данным параметром при острой интоксикации ДХЭ соответственно в 1,64;

1,70;

1,93 и 2,44 раза. При этом только при действии имунофана число АОК к ЭБ в селезенке крыс достигало контрольного уровня.

Т-независимая антителопродукция под влиянием тимогена, Т-активина, миелопида и имунофана увеличивалась соответственно в 1,48;

1,39;

1,70 и 2,30 раза по сравнению с показателем при интоксикации ДХЭ. При этом содержание числа АОК к Vi-Ag в селезенке крыс существенно не отличалось от контрольного уровня только при использовании имунофана.

Таблица 8. Влияние иммуностимуляторов на основные показатели В-звена иммунитета у крыс при острой интоксикации дихлорэтаном (0,75 ЛД50) (M+m) АОК к ЭБ, 103 АОК к Vi-Ag, Вещества АОК, синтезирующие IgG, Контроль (23) 35,1+1,7 28,5+1,6 18,4+1, ДХЭ 14,1+1,9* 13,5+1,8* 9,8+1,2* ДХЭ+ тимоген 23,1+2,0** 20,0+3,0** 14,3+1,5** ДХЭ + 24,0+2,3** 18,7+2,5* 15,2+1, Т-активин ДХЭ+ миелопид 27,2+2,4** 23,0+2,2** 16,1+1, ДХЭ +имунофан 34,4+3,4 31,1+3,0 19,3+1, Примечание: в скобках – число животных;

в каждой серии опытов использовалось 7- животных;

*;

**- различие с контролем достоверно - р0,05 (*;

** - для расчета достоверности различий использовали соответственно t –критерий Стьюдента и непараметрический критерий U Вилкоксона-Манна- Уитни).

Поведенный анализ результатов исследования показал, что использование тимогена, Т-активина, миелопида и имунофана обеспечивало практически полное восстановление синтеза IgG после интоксикации ДХЭ.

Наибольший эффект был зарегистрирован у имунофана. По увеличению степени активности в отношении Т-зависимого иммуногенеза при острой интоксикации ДХЭ иммуностимуляторы располагались в последовательности: миелопид – тимоген – Т-активин – имунофан, а в отношении Т-независимого антителобразования (число АОК к Vi-Ag) в порядке увеличения эффекта – в последовательности: Т-активин - тимоген миелопид – имунофан.

Установленная нами возможность активации использованными иммуностимуляторами синтеза IgM и IgG позволяет полагать, что тимоген, Т активин, миелопид и имунофан восстанавливают функцию как Th1 лимфоцитов, так и Th2-лимфоцитов. Известно, что Th1-лимфоциты участвуют в синтезе IgM, G2 (и формировании ГЗТ), а Th2-лимфоциты способствуют синтезу IgG1, A, E [Pfeifer C. et al., 1991;

Georgiev V.St., Albright J.E., 1993].

Учитывая, что под влиянием спиртов и хлорированных углеводородов в наибольшей степени страдает Т-зависимая антителопродукция, а действие Т активина и миелопида на Т-независимую гуморальную реакцию существенно не отличалось, в последующих экспериментах оценивалось действие иммуностимуляторов после отравления хлорированными углеводородами и этанолом только на Т-зависимое антителообразование.

Проведенные нами исследования показали (рис. 8.1), что применение тимогена, Т-активина, миелопида и имунофана увеличивало Т-зависимый гуморальный иммунный ответ по сравнению с данным параметром при острой интоксикации тетрахлорметаном соответственно в 1,55;

1,99;

1,69 и 2,53 раза.

К * * * * 1 2 3 4 Рис. 8.1. Влияние иммуностимуляторов на Т-зависимое антителообразование у крыс после острой интоксикации тетрахлорметаном (0,75 ЛД50) (M+m).

По оси абсцисс: 1, 2, 3, 4, 5 – ТХМ, ТХМ+ тимоген, ТХМ +Т-активин, ТХМ+миелопид, ТХМ+имунофан соответственно;

по оси ординат: содержание АОК к ЭБ, 103;

К – контроль (n=23);

в каждой серии опытов использовали 7-9 крыс;

*- различие с контролем достоверно - р0,05.

При этом только при действии имунофана число АОК к ЭБ в селезенке крыс достигало контрольного уровня. По увеличению степени активности иммуностимуляторы располагались в последовательности: миелопид – тимоген - Т-активин – имунофан.

Наши эксперименты свидетельствуют (рис. 8.2), что использование К * 30 * * * 1 2 3 4 Рис. 8.2. Влияние иммуностимуляторов на Т-зависимое антителообразование у крыс при острой интоксикации трихлорэтиленом (0, ЛД50) (M+m).

По оси абсцисс: 1, 2, 3, 4, 5 – ТХЭ, ТХЭ+тимоген, ТХЭ+Т-активин, ТХЭ+миелопид, ТХЭ+имунофан соответственно;

по оси ординат: содержание АОК к ЭБ, 103;

К – контроль (n=23);

в каждой серии опытов использовали 6-8 крыс;

*- различие с контролем достоверно - р0,05.

тимогена, Т-активина, миелопида и имунофана увеличивало Т-зависимую продукцию антител (синтез IgM) по сравнению с данным показателем при острой интоксикации ТХЭ соответственно в 1,33;

1,43;

1,26 и 1,98 раза.

Только эффект имунофана обеспечивал полное восстановление исследованного гуморального иммунного ответа. По увеличению степени активности иммуностимуляторы располагались в последовательности:

миелопид – тимоген - Т-активин – имунофан.

Мы считаем, что при Т-зависимом антителообразовании действие тимогена и имунофана, вероятно, реализуется путем активации процесса кооперации макрофагов, Т-клеток и В-лимфоцитов, антителопродуцирующих В-клеток, функции Th1-лимфоцитов и Th2-клеток, cекретируемых соответственно ИЛ-1, ИЛ-3, -интерферон, -фактора некроза опухоли (лимфотоксин), гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор и ИЛ-3, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ-10 [Kimber I., 1996].

Наши эксперименты свидетельствуют (рис. 8.3), что применение тимогена, Т-активина, миелопида и имунофана увеличивало гуморальный иммунный ответ к тимусзависимому антигену ЭБ по сравнению с данным параметром при острой интоксикации этанолом соответственно в 1,13;


1,25;

1,10 и 1,36 раза.

К * 1 2 3 4 Рис. 8.3. Влияние иммуностимуляторов на Т-зависимое антителообразование у крыс при острой интоксикации этанолом (0,75 ЛД50) (M+m).

По оси абсцисс: 1, 2, 3, 4, 5 – Э, Э+тимоген, Э+Т-активин, Э+миелопид, Э+имунофан соответственно;

по оси ординат: содержание АОК к ЭБ, 103;

К – контроль (n=23);

в каждой серии опытов использовали 7-9 крыс;

*- различие с контролем достоверно - р0,05.

При этом все иммуностимуляторы восстанавливали число АОК к ЭБ в селезенке крыс до контрольного уровня. Относительно большей активностью по сравнению с другими препаратами обладали имунофан и Т-активин.

Существенной разницы между иммуностимулирующим эффектом миелопида, тимогена, Т-активина и имунофана не выявлено.

Таким образом, использование в качестве иммуностимуляторов при острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами (0, ЛД50) любого из использованных препаратов (тимогена, Т-активина, миелопида, имунофана) обеспечивало полное восстановление основных показателей В-системы иммунитета только при отравлении этанолом.

Нормализация гуморального иммунного ответа, изменяемого действием дихлорэтана, тетрахлорметана и трихлорэтилена, достигалась только при применении имунофана. После острого действия метанола в комбинации с этанолом лишь использование имунофана в сочетании с фолинатом кальция полностью восстанавливало показатели В-системы иммунитета. При остром отравлении этиленгликолем и применении в качестве антидота этанола только использование имунофана в комбинации с Т-активином полностью восстанавливало показатели В-звена системы иммунитета. В целом по увеличению степени активности в отношении Т-зависимого иммуногенеза при острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами иммуностимуляторы располагались в последовательности: миелопид – тимоген - Т-активин - имунофан, а в отношении Т-независимого антителобразования в порядке увеличения эффекта – в последовательности:

Т-активин - тимоген - миелопид – имунофан.

8.2.3. Исследование действия иммуностимуляторов на основные показатели клеточного звена иммунитета В процессе сравнительной оценки действия различных иммуностимуляторов на показатели клеточного звена иммунитета нами установлено (табл. 8.8), что применение тимогена в дозе 10 мкг/кг при его использовании в течение 3 сут частично восстанавливало функцию Th1 лимфоцитов, оцениваемую по реакции ГЗТ, увеличивая ее в 1,45 раза по сравнению с данным показателем при отравлении ДХЭ. Т-активин в дозе мкг/кг частично восстанавливал данный показатель, повышая его в 1,68 раза по сравнению с параметром при интоксикации, а миелопид в дозе 5 мкг/кг – в 1,25 раза, Имунофан в дозе 10 мкг/кг практически полностью восстанавливал формирование ГЗТ, повышая ее в 2,27 раза по сравнению с данной реакцией при отравлении ДХЭ в дозе 0,75 ЛД50.

Таблица 8. Влияние иммуностимуляторов на показатели клеточного иммунитета у крыс при острой интоксикации ДХЭ в дозе 0,75 ЛД50 (M+m) Препараты Реакция ГЗТ, % ЕЦ, % АЗКЦ,% Контроль (23) 30,2+1,3 31,2+1,4 19,1+0, ДХЭ 12,0+1,9* 11,2+ 2,0* 7,5+1,2* ДХЭ+ тимоген 17,4+2,4* 24,4+2,2* 15,0+1,5** ДХЭ+Т-активин 20,1+2,3* 30,5+2,5 19,7+1, ДХЭ+ миелопид 15,0+2,0* 17,8+2,1* 12,9+1,3* ДХЭ+имунофан 27,2+3,1 29,8+3,0 23,4+2, Примечание: ЕЦ и АЗКЦ определяли соответственно через 3 и 5 сут;

в каждой серии опытов использовали 7-9 животных;

*;

**- различие с контролем достоверно - р0,05 (*;

** - для расчета достоверности различий использовали соответственно t –критерий Стьюдента и непараметрический критерий U Вилкоксона-Манна- Уитни).

Вместе с тем выявлено, что введение тимогена, Т-активина, миелопида и имунофана обеспечивало активацию ЕЦ по сравнению с показателем при отравлении дихлорэтаном соответственно в 2,18;

2,72;

1,59;

и 2,66 раза. При этом только имунофан приводил к полному восстановлению ЕЦ, характеризующую активность ЕКК.

Показано, что тимоген, Т-активина, миелопид и имунофан увеличивали АЗКЦ (приблизительно в той же степени, что и ЕЦ) соответственно в 2,00;

2,63;

1,72 и 3,12 раза.

Доказанная нами возможность частичного восстановления тимогеном функции Т-, В-системы иммунитета и ЕКК дает основания полагать, что механизм его действия связан с неспецифической стимуляцией функций клеток организма, способных к пролиферации. Возможно, иммуностимулирующие свойства тимогена обусловлены активацей зрелых лимфоцитов полипотентных стволовых кроветворных клеток. Этот механизм, вероятно, обеспечивается стимуляцией синтеза энзимов и других белков вследствие активации тимогеном цАМФ, РНК-полимеразы, синтеза ДНК [Чейдо М.А. и соавт., 1990;

Белокрылов Г.А. и соавт., 1991а, 1999;

Базарный В.В., Ястребов А.П., 1993]. По нашему мнению, Т-активин стимулирует ЕКК после интоксикации ТХВ вследствие его способности активировать выработку -интерферона Т-лимфоцитами [Вахидова Г.А. и соавт., 1990;

Борисова А.М. и соавт., 1991;

Ханафиева И.В. и соавт., 1992;

Базарный В.В., Ястребов Ф.П., 1993;

Машковский М.Д., 2000]. Этот лимфокин активирует ЕКК и восстанавливает постинтоксикационное нарушение их функции, а также индуцирует экспрессию рецепторов ИЛ-2 на их поверхности [Сухих Г.Т. и соавт., 1984].

Итак, в целом по степени активности в отношении Т-звена иммунитета при острой интоксикации дихлорэтаном иммуностимуляторы располагались в последовательности: миелопид - тимоген - Т-активин - имунофан. В отношении ЕЦ Т-активин и имунофан обладали практически равной активностью.

Проведенные нами эксперименты показали (рис. 8.4), что применение тимогена в дозе 10 мкг/кг при его использовании в течение 3 сут частично восстанавливало реакцию ГЗТ, увеличивая ее по сравнению с данным показателем при острой интоксикации ТХМ, в 1,35 раза (p0,05). Т-активин в дозе 5 мкг/кг повышал данный показатель в 1,57 раза по сравнению с показателем при острой интоксикации ТХМ (p0,05), а миелопид в дозе мкг/кг – в 1,20 раза. Использование имунофана в дозе 10 мкг/кг полностью восстанавливало функцию Th-лимфоцитов (и макрофагов) после острой интоксикации ТХМ, повышая ГЗТ в 2,01 раза.

* * 25 * * 20 * * 15 * К 1 2 3 4 5 К 1 2 3 4 ГЗТ ЕЦ Рис. 8.4. Влияние иммуностимуляторов на реакцию ГЗТ и ЕЦ у крыс при острой интоксикации ТХМ в дозе 0,75 ЛД50 (M+m).

По оси абсцисс: 1, 2, 3, 4, 5 – ТХМ, ТХМ+тимоген, ТХМ+Т-активин, ТХМ+миелопид, ТХМ+имунофан соответственно;

по оси ординат: ГЗТ и ЕЦ, %;

К – контроль (n=23);

ЕЦ и АЗКЦ определяли соответственно через 3 и 5 сут;

в каждой серии опытов использовали 7-9 крыс;

*- различие с контролем достоверно - р0,05.

На основании результатов наших исследований, можно отметить, что введение тимогена, Т-активина, миелопида и имунофана повышало ЕЦ соответственно 1,84;

2,67;

1,33 и 2,58 раза по сравнению с параметром при интоксикации ТХМ. При этом использование Т-активина и имунофана обеспечивало практически полное восстановление активности ЕКК.

Таким образом, по увеличению активности в отношении Т-звена при острой интоксикации ТХМ иммуностимуляторы иммунитета располагались в последовательности: миелопид – тимоген - Т-активин имунофан. В отношении стимуляции ЕКК Т-активин и имунофан обладали практически равной активностью.

В ходе проведенных нами экспериментов установлено (рис. 8.5), что применение тимогена, Т-активина, миелопида и имунофана увеличивало реакцию ГЗТ по сравнению с данным параметром при острой интоксикации ТХЭ соответственно в 1,31;

1,59;

1,20 и 1,89 раза.

* * 25 * * * * К 1 2 3 4 5 К 1 2 3 4 ГЗТ ЕЦ Рис. 8.5. Влияние иммуностимуляторов на реакцию ГЗТ и ЕЦ у крыс при острой интоксикации ТХЭ в дозе 0,75 ЛД50 (M+m).

По оси абсцисс: 1, 2, 3, 4, 5 – ТХЭ, ТХЭ+тимоген, ТХЭ+Т-активин, ТХЭ+миелопид, ТХЭ+имунофан соответственно;

по оси ординат: ГЗТ и ЕЦ, %;

К – контроль (n=23);

ЕЦ определяли через 3 сут;

в каждой серии опытов использовали 7-9 крыс;

*- различие с контролем достоверно - р0,05.

Однако только при действии имунофана формирование ГЗТ достигало контрольного уровня.

Вместе с тем, использование тимогена, Т-активина, миелопида и имунофана повышало ЕЦ соответственно 1,53;

2,18;

1,34 и 2,11 раза по сравнению с показателем при интоксикации ТХЭ. При этом использование Т активина и имунофана обеспечивало практически полное восстановление ЕЦ.

Таким образом, по возрастанию активности в отношении Т-звена иммунитета и активности ЕКК при острой интоксикации трихлорэтиленом иммуностимуляторы располагались в последовательности: миелопид – тимоген - Т-активин - имунофан.

Проведенные нами исследования параметров клеточного иммунитета у крыс показали (табл. 8.9), что при острой интоксикации метанолом в дозе 0,75 ЛД50 тимоген, Т-активин, миелопид и имунофан существенно повышали реакцию ГЗТ (активность Тh-лимфоцитов и макрофагов) соответственно в 1,42;

1,53;

1,23 и 1,84 раза по сравнению с показателем при интоксикации.

При этом все иммуностимуляторы, за исключением миелопида, обеспечивали восстановление параметра практически до контрольного значения.

Таблица 8. Влияние метанола (0,75 ЛД50) и его комбинаций с иммуностимуляторами на основные показатели клеточного иммунитета у крыс (M+m) Вещества Реакция ГЗТ, % ЕЦ, % АЗКЦ,% Контроль (23) 30,2+1,3 31,2+1,4 19,1+0, Метанол 18,0+1,9* 17,2+ 2,1* 8,7+1,1* Метнол + тимоген 25,6+2,5 24,7+2,3** 16,1+1, Метанол + Т-активин 27,5+2,6 32,2+2,0 20,2+1, Метанол + миелопид 22,1+2,2* 20,9+2,0* 13,0+1,4* Метанол + имунофан 33,1+3,1 34,0+3,3 21,9+2, Примечание: ЕЦ и АЗКЦ определяли через 3 и 5 сут соответственно;

в каждой серии опытов использовалось 7-9 животных;

* - различия достоверны по сравнению с контролем (р0,05).

Наряду с этим при исследовании ЕЦ установлено, что тимоген, Т активин, миелопид и имунофан вызывали увеличение активности ЕКК по сравнению с показателем при отравлении метанолом соответсвенно в 1,44;

1,87;

1,21 и 1,98 раза. При этом тимоген, Т-активин и имунофан обеспечивали практически полное восстановление ЕЦ.

Помимо этого АЗКЦ тимоген, Т-активин, миелопид и имунофан увеличивали в 1,85;

2,32;

1,49 и 2,51 раза соответственно по сравнению с показателем при интоксикации метанолом, при этом обеспечивая практически полное его восстановление до контрольного уровня.

В связи с тем, что под влиянием этанола (0,75 ЛД50) существенная супрессия отмечалась только в отношении активности ЕКК, исследовалось влияние иммуностимуляторов именно на данный показатель. Наши эксперименты свидетельствуют (рис. 8.6), что применение тимогена, Т активина, миелопида и имунофана увеличивало ЕЦ по сравнению с данным параметром при острой интоксикации Э соответственно в 1,42;

1,69;

1,32 и 1,76 раза. При действии всех иммуностимуляторов активность ЕКК не отличалась от контрольного показателя.

статистически значимо Максимальная активность установлена у имунофана, минимальная – у миелопида.

К * 1 2 3 4 Рис. 8.6. Влияние иммуномодуляторов на естественную цитотоксичность у крыс при острой интоксикации этанолом (0,75 ЛД50) (M+m).

По оси абсцисс: 1, 2, 3, 4, 5 – Э, Э+тимоген, Э+Т-активин, Э+миелопид, Э+имунофан соответственно;

по оси ординат: %;

К – контроль (n=23);

ЕЦ определяли через 3 сут;

в каждой серии опытов использовали 7-9 крыс;

*;

**- различие с контролем достоверно р0,05 (*;

** - для расчета достоверности различий использовали соответственно t – критерий Стьюдента и непараметрический критерий U Вилкоксона-Манна- Уитни).

Как уже отмечалось, в настоящее время при лечении острых интоксикаций метанолом и этиленгликолем в качестве антидота обязательно используется этанол [Лужников Е.А., Костомарова Л.Г., 1989, 2000;

Маркова И.В. и соавт., 1998;

Маркизова Н.Ф. и соавт., 2001;

Куценко С.А. и соавт., 2004]. Доказано, что этот спирт при комбинированном применении с метанолом (в качестве антидота) усиливает его иммуносупрессивный эффект [Забродский П.Ф., Германчук В.Г., 2001], поэтому представляет интерес исследование эффективности иммуностимуляторов при комбинированном действии метанола, этиленгликоля и их антидота этанола.

В ходе проведенных нами опытов установлено (табл. 8.10), что применение Т-активина (как препарата, восстанавливающего наряду с имунофаном показатели клеточного иммунитета) в дозе 10 мкг/кг после отравления метанолом и лечения его назначением этанола частично восстанавливало реакцию ГЗТ, увеличивая ее в 1,63 раза по сравнению с данным показателем при комбинированном действии спиртов.

Таблица 8. Влияние иммуномодуляторов на показатели клеточного иммунитета у крыс при острой интоксикации метанолом с применением его антидота этанола (0,75 ЛД50) (M+m) Вещества Реакция ГЗТ, ЕЦ, % АЗКЦ,% % Контроль (23) 30,2+1,3 31,2+1,4 19,1+0, Метанол 18,0+1,9* 17,2+ 2,1* 8,7+1,1* Этанол 24,3+2,5** 21,5+2,2* 13,8+1,4* Метанол +этанол 15,0+1,8* 12,9+1,5* 6,6+0,8* Метанол +этанол + Т-активин 24,5+2,3 24,2+2,1* 12,3+1,9* Метанол +этанол + имунофан 26,1+2,5 26,2+2,0* 14,1+1,8* Метанол+этанол+Т-активин+ 31,4+2,6 32,4+3,0 22,3+2, имунофан Примечание: ЕЦ и АЗКЦ определяли через 3 и 5 сут соответственно;

в каждой серии опытов использовалось 6-9 животных;

этанол вводили внутрибрюшинно в дозе 3 г/кг раза в сутки;

*;

**- различие с контролем достоверно - р0,05 (*;

** - для расчета достоверности различий использовали соответственно t –критерий Стьюдента и непараметрический критерий U Вилкоксона-Манна- Уитни).

Активность ЕКК и АЗКЦ Т-активин после действия метанола совместно с этанолом увеличивал соответственно в 1,87 и 1,86 раза по сравнению с показателем после комбинированного воздействия спиртов без применения иммуностимулятора. Применение имунофана после отравления метанолом в комбинации с этанолом повышало по сравнению с показателями при интоксикации данными веществами формирование ГЗТ, ЕЦ и АЗКЦ соответственно в 1,74;

в 2,03 и 2,14 раза. При этом ЕЦ и АЗКЦ после применения Т-активина и имунофана оставались ниже контрольного уровня (p0,05). Использование имунофана в комбинации с Т-активином после действия метанола в сочетании с этанолом полностью восстанавливало исследованные показатели клеточного иммунитета.

Представленные в табл. 8.11 экспериментальные данные свидетельствуют о том, что применение Т-активина (как препарата, восстанавливающего наряду с имунофаном показатели клеточного звена иммунитета) после отравления этиленгликолем и лечения его этанолом (этанол вводили внутрибрюшинно в дозе 3 г/кг 2 раза в сутки) частично восстанавливало реакцию ГЗТ, увеличивая ее в 1,70 раза по сравнению с данным показателем при остром комбинированном воздействии спиртов.

Таблица 8. Влияние иммуномодуляторов на показатели клеточного иммунитета у крыс при острой интоксикации этиленгликолем с применением его антидота этанола (0,75 ЛД50) (M+m) Вещества Реакция ГЗТ, % ЕЦ, % АЗКЦ,% Контроль (23) 30,2+1,3 31,2+1,4 19,1+0, ЭГ 19,5+2,0* 18,3+ 2,0* 9,0+0,9* Этанол 24,3+2,5** 21,5+2,2* 13,8+1,4* ЭГ +этанол 14,8+1,7* 13,3+1,3* 5,7+0,9* ЭГ +этанол +Т-активин 25,2+2,4 23,0+2,2* 13,2+1,8* ЭГ +этанол+имунофан 27,0+2,6 25,1+2,1* 15,3+1,7** ЭГ +этанол+Т-активин+ 32,5+2,7 32,1+3,1 20,4+2, имунофан Примечание: ЕЦ и АЗКЦ определяли через 3 и 5 сут соответственно;

в каждой серии опытов использовалось 6-7 животных;

этанол вводили внутрибрюшинно в дозе 3 г/кг раза в сутки;

*;

**- различие с контролем достоверно - р0,05 (*;

** - для расчета достоверности различий использовали соответственно t –критерий Стьюдента и непараметрический критерий U Вилкоксона-Манна- Уитни).

Активность ЕКК и АЗКЦ Т-активин после действия этиленгликоля в комбинации с этанолом увеличивал соответственно в 1,73 и 2,31 раза по сравнению с показателем после отравления данными соединенями.

Применение имунофана после отравления этиленгликолем в сочетании с этанолом повышало по сравнению с показателями при интоксикации этими спиртами без применения иммуностимулятора формирование ГЗТ, ЕЦ и АЗКЦ соответственно в 1,82;

в 1,88 и 2,18 раза. При этом ЕЦ и АЗКЦ после применения Т-активина и имунофана оставались ниже контрольного уровня (p0,05). Использование имунофана в комбинации с Т-активином после действия этиленгликоля в сочетании с этанолом полностью восстанавливало исследованные показатели клеточного иммунитета.

Анализируя результаты экспериментальных исследований, можно отметить, что иммуностимулирующий эффект тимогена, Т-активина и имунофана в отношении клеточных иммунных реакций, сниженных острым токсическим воздействием спиртов и хлорированных углеводородов, на клеточном и субклеточном уровне обеспечивается восстановлением способности Th1-лимфоцитов синтезировать ИЛ-1, ИЛ-3, -интерферон, фактор некроза опухоли (лимфотоксин) и гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор. Реализация реакции ГЗТ обеспечивается в основном действием ИЛ-1, ИЛ-3, -интерферона [Kimber I., 1996]. Кроме того, тимоген, Т-активин и имунофан, вероятно, стимулируют и другие клетки, обеспечивающие ГЗТ – Т-клетки памяти и макрофаги [Белокрылов Г.А. и соавт., 1999].

Таким образом, использование в качестве иммуностимуляторов после острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами тимогена и Т-активина в дозе 10 мкг/кг в течение 3 сут обеспечивало частичное восстановление основных показателей клеточного иммунитета. Применение миелопида в дозе 5 мкг/кг (3 сут) не восстанавливало клеточные иммунные реакции (за исключением эффекта после отравления этанолом). Имунофан в дозе 10 мкг/кг при назначении его в течение 3 сут полностью восстанавливал функцию Th1-лимфоцитов (в реакции ГЗТ), активность ЕКК и АЗКЦ после острого отравления метанолом, этиленгликолем, этанолом, дихлорэтаном, тетрахлорметаном и трихлорэтиленом. При комбинированном действии метанола и этанола, а также этиленгликоля и этанола (использование этанола в качестве антидота после отравления метанолом и этиленгликолем) только использование Т-активина в комбинации с имунофаном в течение трех суток приводило к полному восстановлению параметров клеточного звена иммунитета. При острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами по степени увеличения активности иммуномодуляторы в отношении основных показателей клеточного иммунитета располагались в последовательности: миелопид – тимоген - Т-активин - имунофан.

Стимуляция активности ЕКК и АЗКЦ Т-активином и имунофаном была практически одинаковой.

8.3. Влияние имунофана на перекисное окисление липидов после острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами Учитывая антиоксидантные свойства имунофана, представляет интерес исследование его влияния на состояние ПОЛ при остром отравлении спиртами и ХУ. Наши исследования влияния имунофана на ПОЛ после острой интоксикации данными токсикантами показали (табл. 8.12), что применение имунофана в дозе 10 мкг/кг в течение 3 сут частично восстанавливает показатели ПОЛ, увеличенные воздействием ядов.

Установлено, что под влиянием имунофана после действия спиртов и хлорированных углеводородов происходит снижение суммарной продукции радикалов (СПР) и содержания МДА в крови по сравнению с показателями при отравлении ксенобиотиками.

Таблица 8. Действие острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами (0,75 ЛД50) на показатели перекисного окисления липидов у крыс через 3 сут (M+m) Суммарная Малоновый Токсиканты продукция диальдегид, нмоль/мл радикалов, усл. ед.



Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |   ...   | 8 |
 





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.