авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:     | 1 |   ...   | 4 | 5 || 7 | 8 |

«П.Ф. Забродский, В. Г. Лим ИММУНОПАТОЛОГИЯ ПРИ ОТРАВЛЕНИЯХ ЯДОВИТЫМИ ТЕХНИЧЕСКИМИ ЖИДКОСТЯМИ. ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ КОРРЕКЦИЯ ...»

-- [ Страница 6 ] --

Контроль 33,4+4,0 8,51+ 0, Метанол 53,6+6,1* 10,43+ 0,47* Метанол+имунофан 42,1+4,0** 9,34+ 0,40** Этиленгликоль 56,3+6,5* 11,15+ 0,53* Этиленгликоль+имунофан 43,0+5,1** 9,87+ 0,50** Этанол 44,5+3,9** 9,36+ 0, Этанол+имунофан 36,1+3,7 8,90+ 0, Дихлорэтан 67,8+6,9* 12,13+ 0,59* Дихлорэтан+имунофан 51,9+5,3* 10,49+ 0,60* Тетрахлорметан 75,5+7,1* 14,27+ 0,61* Тетрахлорметан+имунофан 56,9+5,8* 11,82+ 0,63* Трихлорэтилен 60,0+6,8* 11,56+ 0,62* Трихлорэтилен+имунофан 49,8+5,4* 9,39+ 0,44** Примечание: в каждой серии использовалось от 9 до 14 крыс;

*;

**- различие с контролем достоверно - р0,05 (*;

** - для расчета достоверности различий использовали соответственно t –критерий Стьюдента и непараметрический критерий U Вилкоксона Манна - Уитни).

Так, имунофан снижал редукцию СПР, увеличенную действием ядов по сравнению с соответствующими параметрами после отравления метанолом, этиленгликолем, этанолом, дихлорэтаном, тетрахлорметаном и трихлорэтиленом соответственно в 1,27;

1,31;

1,23;

1,30;

1,33 и 1,20 раза, а супрессию содержания МДА в крови, который повышался под влиянием спиртов и хлорированных углеводородов, соответственно - в 1,12;

1,13;

1,05;

1,16;

1,21 и 1,23 раза. При этом полное восстановление ПОЛ до контрольного уровня происходило только при применения имунофана после отравления этанолом. Следует отметить, что показатели ПОЛ под влиянием этого спирта снижались незначительно. При объединении всех показателей в единую совокупность установлено, что имунофан в среднем достоверно снижал СПР и МДА соответственно в 1,27 (p0,05) и 1,15 (p0,05) раза.

Известно, что антиоксидантное действие имунофана предотвращает повреждение ДНК лимфоцитов и гранулоцитов, вызванное действием токсикантов, вызывая редукцию образования апоптотических клеток [Караулов А.В. и соавт., 2005].

Таким образом, имунофан снижает процессы свободно-радикального перекисного окисления липидов (в том числе, по всей видимости, липидов ИКК) после острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами. Этот эффект имунофана является одним из факторов, способствующих восстановлению показателей системы иммунитета после острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами.

Резюме Подводя итог данной главы, можно заключить, применение тимогена, Т активина и миелопида в течение 3 сут приводило к частичному восстановлению факторов НРО после отравлении спиртами и хлорированными углеводородами (0,75 ЛД50). Использование имунофана в течение 3 сут в дозе 10 мкг/кг обеспечивало полное восстановление до контрольных уровней основных факторов НРО. В целом в порядке увеличения активности иммуностимуляторы располагались в последовательности: миелопид-тимоген-Т-активин-имунофан.

Использование в качестве иммуностимуляторов после острой (0,75 ЛД50) интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами любого из использованных препаратов (тимогена, Т-активина, миелопида, имунофана) обеспечивало полное восстановление основных показателей В системы иммунитета только при отравлении этанолом. После острого действия дихлорэтана, тетрахлорметана и трихлорэтилена только при действии имунофана достигалась нормализация показателей гуморального звена иммунитета. После острого действия метанола в комбинации с этанолом только использование имунофана в сочетании с фолинатом кальция полностью восстанавливало показатели В-системы иммунитета. После острого отравления этиленгликолем и применения после него в качестве антидота этанола только использование имунофана в комбинации с Т активином полностью восстанавливало показатели В-звена системы иммунитета. В целом по увеличению степени активности в отношении Т зависимого иммуногенеза при острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами иммуностимуляторы располагались в последовательности: миелопид – тимоген - Т-активин - имунофан, а в отношении Т-независимого антителобразования (число АОК к Vi-Ag) в порядке увеличения эффекта – в последовательности: Т-активин - тимоген миелопид – имунофан.

Применение в качестве иммуностимуляторов после острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами тимогена и Т-активина в дозе 10 мкг/кг в течение 3 сут обеспечивало частичное восстановление основных показателей клеточного иммунитета. Применение миелопида в дозе 5 мкг/кг (3 сут) не восстанавливало клеточные иммунные реакции (за исключением эффекта после отравления этанолом). Имунофан в дозе 10 мкг/кг при назначении его в течение 3 сут полностью восстанавливал функцию Th1 лимфоцитов (в реакции ГЗТ), активность ЕКК и АЗКЦ после острого отравления метанолом, этиленгликолем, этанолом, дихлорэтаном, тетрахлорметном и трихлорэтиленом. При комбинированном действии метанола и этанола, а также этиленгликоля и этанола (использование этанола в качестве антидота после отравления метанолом и этиленгликолем) только использование Т-активина в комбинации с имунофаном в течение трех суток приводило к полному восстановлению параметров клеточного звена иммунитета. При острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами по степени увеличения активности иммуномодуляторы в отношении основных показателей клеточного иммунитета располагались в последовательности: миелопид – тимоген - Т-активин - имунофан.

Стимуляция активности ЕКК и АЗКЦ Т-активином и имунофаном была практически одинаковой.

Таким образом, тимоген, Т-активин, миелопид и иммунофан способны восстанавливать показатели НРО, гуморального и клеточного иммунитета.

Максимальная стимулирующая способность выявлена у имунофана.

Высокая эффективность в отношении Т-зависимого антителообразования, клеточного звена иммунитета и Т-независимой антителопродукции Т-активина и миелопида. При установлена соответственно у комбинированном действии метанола и этанола, этиленгликоля и этанола восстановление иммунного статуса достигается примененением соответственно имунофана в сочетании с фолинатом кальция и имунофана в сочетании с Т-активином. Имунофан снижает процессы свободно радикального перекисного окисления липидов после острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами. Этот эффект имунофана является одним из факторов, способствующих восстановлению показателей системы иммунитета после острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ Проведенные исследования закономерностей острого иммунотоксического действия спиртов и хлорированных углеводородов на состояние НРО и иммунной защиты позволили выявить глубину и основные тенденции происходящих нарушений иммунного гомеостаза, определить направления патогенетически обоснованной коррекции изменений наиболее важных показателей НРО, а также гуморальных и клеточных иммунных реакций, вызванных данными ТХВ. В ходе обобщения обширного информационного материала и результатов собственных исследований проанализированы причинно- следственные связи в процессах изменения характера и механизмов нарушений НРО и иммунного статуса при отравлении спиртами и хлорированными углеводородами, что позволило сформулировать основные положения заключения и выводы.

В последнее десятилетие частота острых интоксикаций различными химическими соединениями и, в частности, спиртами и хлорированными углеводородами существенно увеличилась [Алиев Н.А., 1991а;

Алиев Н.А., Мустафаев М.А., 1992;

Лукомская М.И., 1992;

Бонитенко Е.Ю., 1995;

Немцов А.В., 1995;

Лужников Е.А., Костомарова Л.Г. 2000;

Забродский П.Ф. и соавт., 2004б]. Наибольшие темпы роста характерны в последние годы в отношении уровня острых отравлений этанолом, этиленгликолем и метанолом. Данные отравления по числу летальных исходов занимают первое место среди интоксикаций другими химическими веществами [Кожемякин Л.А. и соавт., 1991;

Нужный В.П., Прихожан Л.М., 1996;

Нужный В.П., 2001]. Это связано с постоянно увеличивающимся потреблением этилового спирта [Ливанов Г.А., 2000], которое может сопровождаться в случаях использования вместо него с целью опьянения ядовитых спиртов и хлорированных углеводородов.

Данные токсиканты оказывают многосторонее действие на все системы организма, а особенностями острых отравлений этими ТХВ является их групповой или массовый характер [Забродский П.Ф., 1999;

Бонитенко Ю.Ю., Куценко С.А., 2004;

Маркизова Н.Ф. и соавт., 2004].

Не вызывает сомнения, что одной из причин танатогенеза при острых отравлениях спиртами и хлорированными углеводородами являются инфекционные заболевания и осложнения (постинтоксикационные пневмонии), обусловленные нарушениями НРО и иммунной защиты.

Патогенез поражения НРО и иммунной системы спиртами и хлорированными углеводородами в настоящее время изучен недостаточно, не исследована взаимосвязь нарушений иммунного гомеостаза с перекисным окислением липидов и изменением функции гипоталамо-гипофизарно-адреналовой системы [Лужников Е.А., Костомарова Л.Г., 2000;

Забродский П.Ф. и соавт., 2004а, 2004б].

Изучение влияния патогенетически обоснованной коррекции нарушений НРО и иммунного статуса при остром токсическом действии спиртов и хлорированных углеводородов имеет как теоретическое значение, раскрывая неизвестные механизмы регуляции иммуногенеза, так и практическое, позволяя обеспечить профилактику и лечение возникающих при острых и хронических интоксикациях спиртами и хлорированными углеводородами многочисленных инфекционных заболеваний в результате дисфункций системы иммунитета [Хаитов Р. М. и соавт., 2000;

Агапов В.И. и соавт., 2004;

Забродский П. Ф. и соавт., 2004а;

Descotes J., 1986;

Luster M. J. et al., 1987;

Georgiev V. St., Albright J. E., 1993].

Анализ источников литературы, посвященных патогенезу поражения различными ядами печени, позволяет считать, что данный эффект тесно связан с реализацией иммунных реакций и функцией цитокинов [Kaplowitz N., 2004]. Токсиканты и их метаболиты в результате взаимодействия с протеинами, липидами и нуклеиновыми кислотами гепатоцитов, а также вследствие инициирования ПОЛ приводят к поражению митохрондрий и последующему некрозу клеток. Кроме того, реализация повреждений, связанных с «внутриклеточным стрессом» (повреждение различных органелл клеток – ядра, микротрубочек, эндоплазматического ретикулума и др.), вызывает апоптоз гепатоцитов. К апоптозу приводит также сенситизация (увеличение чувствительности) клеток к цитокинам, в частности к факторам некроза опухоли (TNF). Являясь гаптенами, а также инициируя их появление вследствие повреждения цитохрома Р-450 и других энзимов, гепатотропные яды активируют иммунные реакции, в частности апоптоз вследствие действия гранзимов ЕКК [Kaplowitz N., 2004].

Систематизированные сведения о влиянии различных иммуностимуляторов на НРО и иммунную систему при острых отравлениях спиртами и хлорированными углеводородами крайне ограниченны и не отражают даже минимального уровня представлений о характере влияния этих препаратов на основные гуморальные и клеточные иммунные реакции.

большое прикладное значение, несомненно, что его Этот вопрос имеет решение будет способствовать снижению числа инфекционных осложнений и заболеваний, уменьшению частоты смертельных исходов после острых отравлений не только спиртами и хлорированными углеводородами, но и другими токсикантами.

Таким образом, проблема нарушений неспецифической резистентности организма и иммунного статуса при острых отравлениях спиртами и хлорированными углеводородами и их коррекция в постинтоксикационный период важна как в теоретическом, так и в практическом отношении, учитывая достаточно широкое распространение и использование в промышленности, технике и быту спиртов и хлорированных углеводородов, а также ядовитых технических жидкостей, содержащих эти соединения, высокую летальность при отравлении ими (возможность использования метанола, этиленгликоля и хлорированных углеводородов в качестве суррогатов алкоголя), недостаточно изученные особенности их действия на механизмы регуляции системы иммунитета.

Полученные результаты нашего исследования в экспериментах на беспородных белых крысах после острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами в дозах 0,75 LD50 по изучению состояния антиинфекционной неспецифической резистентности организма показали, что под влиянием метанола, этиленгликоля, этанола, дихлорэтана, тетрахлорметана и трихлорэтилена происходят однотипные изменения интегральной антиинфекционной НРО, выраженные в ее снижении.

Увеличение летальности от экспериментальной инфекции через 2 сут после острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами может быть связано с редукцией бактерицидной активности сыворотки крови, сывороточной активности лизоцима, тромбоцитарно – катионного белка ( лизина) и фагоцитарно-метаболической активности ПЯЛ, системы комплемента и пропердина, а также с изменением активности ГГАС, что согласуется с результатами исследований других авторов [Горизонтов П.Д., 1981а, 1981б;

Петров Р.В., 1987;

Ледванов М. Ю., Киричук В.Ф., 1996;

Шмидт Р., Тевс Г., 1996;

Василенко О.А., 2004].

На устойчивость животных к инфекции оказывают влияние состояние симпатического и парасимпатического отдела вегетатиной нервной системы, функциональное состояние ГГАС и ГАМК-ергической нейромедиаторной системы, измененное острой интоксикацией ксенобиотиками [Забродский П.Ф., 1999а;

Забродский П.Ф. и соавт., 2004а;

Агапов В.И. и соавт., 2004;

Madden K.S., Livnat S., 1991;

Rinner I. et al., 1995].

Анализируя результаты, следует отметить, что под влиянием спиртов и БАСК хлорированных углеводородов происходит дозозависимая редукция в течение 6-9 сут после острого отравления. По степени снижения параметра токсиканты в порядке уменьшения эффекта располагались в следующей последовательности: хлорированные углеводороды, метанол, этиленгликоль, этанол.

По нашему мнению, снижение БАСК, которая определяется активностью лизоцима, ТКБ, комплемента и других факторов, под влиянием спиртов и хлорированных углеводородов может быть связано с нарушением синтеза данных антибактериальных ферментов, уменьшением их активности и/или секреции из клеток крови. Можно предположить, что БАСК уменьшается также вследствие взаимодействия и последующей инактивации метаболитов спиртов и хлорированных углеводородов с пептидными антибиотиками, синтезируемыми организмом животных и человека.

Полученные данные показывают, что спирты и хлорированные углеводороды вызывают прямо связанное с дозой уменьшение активности лизоцима в сыворотке крови. По степени снижения параметра токсиканты в порядке уменьшения эффекта располагались в последовательности: хлорированные углеводороды, метанол, этиленгликоль, этанол. Сывороточная активность лизоцима после острого действия токсикантов восстанавливается к 9 сут. наблюдения.

Редукция активности лизоцима под влиянием спиртов и хлорированных углеводородов, вероятно, связана с ингибированием неспецифических эстераз клеток крови, а также вследствие эффекта токсикантов и их метаболитов, ингибирующих многочисленные биохимические реакции. Редукция синтеза лизоцима может происходить также вследствие воздействия продуктов биотрансформации спиртов и хлорированных углеводородов на ДНК, что приводит к нарушению нуклеинового обмена [Голиков С.Н. и соавт., 1986;

Тиунов Л.А., 1990а].

Нами установлено, что спирты и хлорированные углеводороды при остром отравлении вызывают прямо связанное с дозой уменьшение активности тромбоцитарно-катионного белка в сыворотке крови. При этом активность ТКБ в крови после острого действия токсикантов восстанавливается к 9 сут. наблюдения. Степень снижения активности ТКБ хлорированными углеводородами превышала редукцию ее спиртами.

Снижение сывороточной активности ТКБ может быть связано с действием спиртов, хлорированных углеводородов и их метаболитов на его синтез и выделение тромбоцитами. Механизм супрессии активности ТКБ ( лизина), видимо, обусловлен нарушением функции тромбоцитов в результате взаимодействия с сульфгидрильными и аминогруппами ферментов высокотоксичных продуктов биотрансформации испытуемых токсикантов, ингибированием тканевого дыхания и окислительного фосфорилирования, инициацией перекисного окисления липидов, что не противоречит литературным данным [Ротенберг Ю.С., 1982;

Голиков С.Н. и соавт., 1986;

Gabon P.A., 1986;

Iokobsen D.,1984;

Забродский П.Ф. и соавт., 2004а, 2004б;

Василенко О.А., 2004]. Нарушение продукции ТКБ, вероятно, наряду с действием спиртов, хлорированных углеводородов и их метаболитов на клеточном уровне может быть обусловлено изменением активности ГГАС [Бухарин О.В. и соавт., 1998].

Показано, что острое токсическое действие спиртов и хлорированных углеводородов через 1-3 сут после отравления вызывает незначительную редукцию активности системы комплемента. При этом дозозависимый эффект ядов выражен слабо.

Исходя из данных литературы [Кульберг А.Я., 1985, 1986;

Тиунов Л.А., 1990а, 1990б;

Kondo M. et al., 1986], установленный факт может быть объяснен тем, что система комплемента представляет собой сложную многокомпонентную биологическую систему, для нарушения которой токсическое действие яда должно быть направлено на определенные ключевые ее энзимы (то есть должна быть обеспечена специфичность). Кроме того, такая сложная система способна к саморегуляции в случаях воздействия химических и физических факторов, которое не превышает ее возможности сохранить свою функцию. Система комплемента высокодинамична и биосинтез ее компонетов с большой скоростью осуществляется в клетках паренхимы печени и моноцитарно-макрофагальной системы [Хаитов Р.М. и соавт., 2000].

Результаты наших исследований свидетельствуют о том, что при острой интоксикации спирты и ХУ вызывают дозависимое снижение ФМАН в течение 1-3 сут (этанол), 3-6 сут (трихлорэтилен) и до 9 сут (метанол, этиленгликоль, дихлорэтан, тетрахлорметан). Максимальное снижение ФМАН зарегистрировано после отравления дихлорэтаном, минимальное – после действия этанола. По степени редукции ФМАН токсиканты в порядке уменьшения эффекта располагались в последовательности: дихлорэтан, тетрахлорметан, трихлорэтилен, метанол, этиленгликоль, этанол.

Анализируя ФМАН, следует отметить, что характер изменений показателей при действии исследуемых спиртов и хлорированных углеводородов практически не отличался. Менее токсичные соединения трихлорэтилена и этанола вызывали более кратковременные и менее выраженные сдвиги параметров ФМАН.

Похожий характер изменений ФМАН был обнаружен ранее в экспериментах с пероральным отравлением дихлорэтаном [Давыдова Е.В. и соавт., 1995] при обследовании пациентов с отравлениями суррогатами алкоголя [Романенко О.И., Гребенюк А.Н., 1997;

Сосюкин А.Е. и соавт., 1997]. Несмотря на различные специфические механизмы действия метанола и дихлорэтана, проявление их токсичности на уровне ПЯЛ, как и в проведенных нами опытах, было сходным [Гребенюк А.Н., Романенко О.И., 1996].

Результаты, полученные нами в НСТ-тесте, свидетельствуют, что действие спиртов и хлорированных углеводородов на ФМАН реализуется вследствие взаимодействия токсикантов и их метаболитов с НАДФ·Н, НАДФ+. Это подтверждают данные литературы [Румянцев А.П. и соавт., 1981;

Брызгина Т. М., 1989]. Кроме того, токсическое действие спиртов и хлорированных углеводородов может связано с ингибированием ФАД+, ФАД·Н, восстановленным и окисленнным убихиноном и цитохромом b лейкоцитов. Кроме кислородзависимых антиинфекционных систем фагоцитоза спирты, хлорированные углеводороды и продукты их биотрансформации, вероятно, поражают и кислороднезависимые микробицидные системы фагоцитов [Гребенюк А.Н. и соавт., 1998].

Существенное значение в угнетении ФМАН может иметь дисфункция ГГАС под влиянием спиртов и хлорированных углеводородов, приводящая к изменению чувствительности микро- и макрофагов к микроорганизмам, в результате чего угнетается их цитотоксичность [Маянский А. Н., Маянский Д. Н., 1983;

Петров Р. В., 1987;

Брюхин Г. В., Михайлова Г. И., 1990;

Гребенюк А.Н. и соавт., 1998]. Показано, что глюкокортикоиды снижаю суммарную фагоцитарную активность фагоцитов крыс, причем существенную роль в данном феномене играют адреналин [Шилов Ю.И., 2001].

Нарушение активности ФМАН, по нашему мнению может быть связано с мембранотоксическим действием спиртов и хлорированных углеводородов, инициацией процессов ПОЛ мембран нейтрофилов, их взаимодействием с сульфгидрильными, гидроксильными и другими группами мембран фагоцитов, нарушением функции ферментов тканевого дыхания митохондрий ПЯЛ [Ротенберг Ю.С., 1980, 1982;

Голиков С.Н. и соавт., 1986;

Забродский П.Ф., 2002;

Gabon P.A., 1986;

Iokobsen D.,1984]. Не исключено ингибирование неспецифичекой эстеразы нейтрофилов хлорированными углеводородами и их метаболитами [Забродский П. Ф., 1996;

Забродский П.

Ф. и соавт, 1997, 2000;

Harris A., 1973;

Li C. G. et al., 1983].

Нами экспериментально установлено, что под влиянием острого отравления спиртами и ХУ снижается миграция КОЕс из КМ. Редуцирующий эффект токсикантов уменьшался в последовательности: дихлорэтан, тетрахлорметан, трихлорэтилен, метанол, этиленгликоль и этанол.

При острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами уменьшение числа КОЕс обусловлено, видимо, преимущественно специфическим и неспецифическим действием исследуемых токсикантов и их метаболитов. Данные эффекты, связанные с ингибированием ферментных систем лимфоидной стволовой клетки и КОЕс, а также с реализацией стресс реакции, по всей видимости, приводят к редукции пролиферации КОЕс и/или увеличению их гибели. Кроме того, острое отравление хлорированными углеводородами, вероятно, вызывает инактивацию эстераз КОЕс [Петров Р.В., Хаитов Р.М., 1981;

Беликов В.Г., 2001;

Василенко О.А., 2004;

Забродский П. Ф., 1998]. Следует отметить, что среди клеток костного мозга эстеразопозитивными клетками являются мегакариоциты, монобласты, миэлобласты, промиелоциты [Хейхоу Ф.Г.Дж., Кваглино Д., 1983].

Снижение числа КОЕс под влиянием спиртов может быть обусловлено ингибированием тканевого дыхания и окислительного фосфорилирования в лимфоидных стволовых клетках, КОЕс (реализация одного их общих механизмов токсичности большого числа ксенобиотиоков [Ротенберг Ю.С., 1982]), нарушением функции ферментов этих клеток в результате взаимодействия метаболитов токсикантов с их сульфгидрильными и аминогруппами [Iokobsen D., 1984;

Gabon P.A., 1986].

Инициация процессов ПОЛ под влиянием спиртов и хлорированных углеводородов, как одного из общих механизмов иммунотоксичности [Забродский П.Ф., 2002], также, вероятно, может приводить к снижению КОЕс.

Следует отметить, возможна активация парасимпатического отдела вегетативной нервной системы вследствие антихолинэстеразного эффекта хлорированных углеводородов [Тиунов Л.А., 1990а;

Забродский П.Ф. и соавт., 2003]. При этом ацетилхолин, вероятно, способен активировать м холинорецепторы КОЕс, что приводит к увеличению их миграции из костного мозга в селезенку с последующим образованием пяти типов колоний [Забродский П. Ф., 1993]. Многочисленные данные литературы косвенно подтверждают это предположение [Горизонтов П.Д., 1981а, 1981б;

Петров Р.В. и соавт., 1981а;

Дешевой Ю. Б., 1985;

Kutty K. M., 1976;

Maslinski W. et al., 1992]. Однако, несомненно, факторы, снижающие КОЕс, существенно превышают возможный стимулирующий миграцию КОЕс эффект ацетилхолина при действии хлорированных углеводородов (дихлорэтан, трихлорэтилен) [Тиунов Л.А., 1990б;

Забродский П.Ф. и соавт., 2004а].

Снижение числа КОЕс прямо связано с миграцией В-клеток из КМ [Петров Р.В. и соавт., 1981б], поэтому вполне обоснованно можно полагать, что спирты и ХУ снижают также и этот важный параметр индуктивной фазы иммуногенеза.

Результаты исследования острого токсического действия спиртов и хлорированных углеводородов показали дозозависимое в течение 1-3 сут снижение лимфоидных индексов тимуса и селезенки. Показатели восстанавливаются до контрольного уровня в последующие 6 сут.

Максимальное уменьшение показателя характерно для токсического действия хлорированных углеводородов, минимальное - для спиртов.

Установленный эффект токсикантов может быть связан с апоптозом клеток органов иммунной системы в результате действия ядов и их метаболитов, а также с эффектом кортикостероидов [Петров Р. В. и соавт., 1981а, 1981б] вследствие реализации стресс-реакции после острого действия ксенобиотиков [Идова В.Г. и соавт., 2004].

Проведенный анализ результатов исследования выявил, что под влиянием острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами в прямой зависимости от дозы снижается содержание Т-лимфоцитов в тимусе и лимфоцитов в селезенке через 1-3 сут после интоксикации. Существенных различий между установленными показателями редукции, вызванной ядами, выявлено не было, хотя максимальное снижение показателя характерно для дихлоэтана, а минимальное - для этиленгликоля и этанола. В последующие сроки наблюдения, через 6 сут после действия токсикантов содержание лимфоцитов в тимусе и селезенке восстанавливалось до контрольного уровня.

Выявленное изменение содержания в тимусе и селезенке лимфоцитов является показателем, характеризующим способность данных органов обеспечивать иммуногенез, то есть реализацию клеточных и гуморальных иммунных реакций. Поддерживая мнение других исследователей, мы считаем, что спирты и хлорированные углеводороды способны снижать массу тимуса и селезенки, а также содержание в них лимфоцитов в результате реализации стресс-реакции (действие гормонов коры надпочечников, в частности, кортикостерона) [Мутускина Е.А. и соавт., 2001], уменьшая миграцию в эти органы лимфоцитов из костного мозга [Петров Р. В. и соавт., 1981а, 1981б;

Забродский П.Ф., 1998;

Молотков А.О., 2002], подавляя пролиферацию лимфоцитов в тимусе и селезенке [Петров Р. В., 1987], усиливая миграцию из тимуса и селезенки лимфоцитов в циркулирующую кровь (реализация перераспределения, вследствие действия кортикостероидов и катехоламинов) [Горизонтов П.Д., 1981а;

Dhabhar F. S. et al., 1996]. Кроме данных процессов, после отравления спиртами и хлорированными углеводородами возможен лизис лимфоцитов в органах системы иммунитета под влиянием кортикостероидов [Claman H.N., 1983].

Можно предположить, что дихлорэтан, трихлорэтилен, оказывая антихолинэстеразный эффект [Тиунов Л.А., 1990а, 1990б], снижают число клеток в тимусе не только вследствие апоптоза [Хаитов Р.М и соавт., 2000;

Durant S., 1986], но и в результате их миграции из органа.

Содержание лимфоцитов в селезенке зависит от функционального состояния -адренорецепторных структур этого органа [Горизонтов П.Д., 1981а, 1981б]. Возможно, изменение активности ГГАС приводит к снижению лимфоцитов в данном органе.

При остром токсическом действии спиртов и хлорированных углеводородов снижение содержания лимфоцитов в тимусе и селезенке происходит, вероятно, и вследствие их общетоксического эффекта за счет подавления пролиферации иммуноцитов в результате ингибирования ферментов тканевого дыхания митохондрий ИКК, а также инактивации метаболитами токсикантов многочисленных ферментных систем лимфоцитов. Кроме того, спирты и хлорированные углеводороды способны нарушать процесс позитивной (положительной) селекции Т-лимфоцитов [Fink P.J., Bevan M.J., 1995;

Maekawa Y., Yasutomo K., 2005]. Один из метаболитов дихлорэтана – хлоруксусная кислота – является сильным митохондриальным ядом, ингибитором цикла трикарбоновых кислот (тканевого дыхания) ИКК [Маркизова Н.Ф. и соавт., 2004].

Необходимо отметить, что миграция лимфоцитов из органов системы иммунитета весьма динамичный процесс, зависящий от времени суток [Dhabhar F. S. et al., 1996] и различных физических и химических факторов, в частности от изменения функционального состояния органов системы иммунитета под влиянием ГГАС, в частности от кортикостероидов [Горизонтов П. Д., 1981б;

Claman H.N., 1983;

Dhabhar F. S. et al., 1996], катехоламинов [Маdden K. S., Livnat S., 1991], а также изменения состояния холинергической системы [Забродский П.Ф. и соавт., 2001].

Результаты исследования влияния спиртов и хлорированных углеводородов в дозе 0,75 ЛД50 на число лимфоцитов в костном мозге и лимфоузлах показали, что редукцию показателей вызывают в течении 1-3 сут только хлорированные углеводороды. При этом установлено, что снижение количества лимфоцитов в крови вызывает отравление дихлорэтаном. Для дихлорэтана характерно снижение лимфоцитов в иммунных органах, которое носит дозозависимый характер.

Существуют основания полагать, что снижение лимфоцитов в органах системы иммунитета может быть связано с активацией ГГАС при действии хлорированных углеводородов, изменением характера холинергической иннервации лимфоидных органов при остром отравлении дихлорэтаном и тетрахлорметаном. Кроме того, спирты, хлорированные углеводороды и их метаболиты способны, ингибируя многочисленные энзимы ИКК и инициируя ПОЛ, вызывать нарушение гемопоэза и гибель иммуноцитов (апоптоз) [Хаитов Р.М и соавт., 2000;

Durant S., 1986].

Выраженное токсическое действие метанола на В-лимфоциты в отличие от эффектов других исследуемых токсикантов обусловлено, вероятно, основным фолат-зависимым метаболизмом формиата [Румянцев А.П. и соавт., 1981]. Можно предположить, что при этом формиат является своего рода антагонистом фолиевой кислоты, активно ее используя, снижает ресурсы дигидрофолатредуктазы. В результате уменьшается образование тетрагидрофолиевой кислоты, ингибируется перенос метильных групп, снижается синтез ДНК преимущественно в В-лимфоцитах [Ройт А. и соавт., 2000]. Вероятно, метанол также способен нарушать и процесс селекции естественных аутореактивных В-лимфоцитов [Hayakawa K., 1999].

Полученные данные показали, что острое действие спиртов и хлорированных углеводородов (0,75 ЛД50) приводит к снижению Т зависимого антителообразования, оцениваемого по ОДЛТА к ЭБ в крови через 5, 8 и 11 сут после иммунизации, в большей степени в продуктивную фазу антителогенеза по сравнению с индуктивным периодом. Токсиканты располагались в порядке снижения эффекта в последовательности:

дихлорэтан, тетрахлорметан, трихлорэтилен, метанол, этиленгликоль и этанол.

Проведенные нами экспериментальные исследования свидетельствуют, что при остром отравлении спиртами и хлорированных углеводородов в продуктивной фазе иммуногенеза их токсическое воздействие выражено в большей степени, чем в индуктивной фазе антителогенеза. Это может быть связано с большим поражающим действием спиртов и особенно их метаболитов на синтез IgM и IgG В-клетками (плазмоцитами) cпленоцитов, нарушением процессов дифференцировки В-лимфоцитов, перераспределением лимфоцитов между органами системы иммунитета в период максимальной антителопродукции (3-5 сут после иммунизации), а также с ингибирующим синтез антител действием кортикостероидов [Claman H.N., 1983], концентрация которых в крови при действии различных токсикантов увеличивается (стресс-реакция) [Селье Г., 1972].

Из полученных данных следует, что спирты и хлорированные углеводороды при острой интоксикации вызывают дозозависимое снижение Т-зависимого антителообразования (оцениваемого по числу АОК в селезенке, отражающему синтез IgМ) в большей степени в продуктивный период иммуногенеза по сравнению с индуктивной фазой антителогенеза. По степени редукции синтеза IgМ токсиканты располагались в порядке снижения эффекта в последовательности: дихлорэтан, тетрахлорметан, трихлорэтилен, метанол, этиленгликоль и этанол.

Существуют основания полагать, что под влиянием спиртов и хлорированных углеводородов в продуктивной фазе иммуногенеза по сравнению с индуктивным периодом происходит более выраженная редукция функции Th1-лимфоцитов, индуцирующих синтез IgM, а также, в меньшей степени, Тh2-лимфоцитов [Pfeifer C. et al., 1991], участвующих в синтезе IgG плазмоцитами селезенки [Heyman B., 2003].

Снижение функции Т-зависимого антителообразования под влиянием спиртов и хлорированных углеводородов, по нашему мнению, может быть связано с реализацией различных механизмов иммунотоксических эффектов:

на уровне систем – с активацией ГГАС, на уровне взаимодействия клеток - со снижением кооперации Т-и В-лимфоцитов, на субклеточном уровне - с инициацией ПОЛ, ингибированием эстераз иммуноцитов, мембранотоксическим действием, в частности, повреждением мембран лизосом ИКК с высвобождением и активацией кислых гидролаз, на молекулярном уровне – с ингибированием энзимов тканевого дыхания митохондрий ИКК, что не противоречит литературным данным [Голиков С.Н.

и соавт., 1986;

Забродский П.Ф., 2002;

Ротенберг Ю.С., 1982].

Показано, что стресс-реакция вследствие психоэмоционального напряжения, может приводить к снижению АОК в селезенке мышей в 4 раза [Идова В.Г. и соавт., 2004] вследствие увеличения содержания в крови логично полагать, глюкокортикоидов [Свирид В.Д., 2002]. Вполне постинтоксикационный стресс оказывает существенное влияние на супрессию гуморального иммунного ответа [Забродский П.Ф., и соавт., 2000].

Исходя из полученных результатов следует, что под влиянием спиртов и хлорированных углеводородов уменьшается антителообразование, в частности, синтез IgG, что свидетельствует о снижении функции Th2 лимфоцитов. По степени уменьшения числа АОК, синтезирующих IgG в селезенке, токсиканты располагались в последовательности:

тетрахлорметан, метанол, дихлорэтан, трихлорэтилен, этиленгликоль и этанол. Обращает на себя внимание наибольший иммунотоксический эффект тетрахлорметана. Это связано с оценкой показателя на 8 сут после отравления. Тетрахлорметан, который по сравнению с другими хлорированными углеводородами и спиртами выводится из организма очень медленно [Тиунов Л.А., 1990а]. Именно на 8 сут он оказывает максимально выраженный по сравнению с другими ядами эффект.

К факторам, супрессирующим синтез IgG при острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами (это относится и к другим ядам, не ингибирующим синтез гормонов надпочечниками), вероятно, относится эффект кортикостероидов [Хусинов А.А. и соавт., 1991;

Szot R.J., Murphy S.D., 1970;

Tiefenbach B. et al., 1980, 1983, 1985;

Szelenyi J.G. et al., 1982;

Casale G.P. et al., 1983].

Кроме того, установленное снижение синтеза IgG (а также IgM) под влиянием спиртов и хлорированных углеводородов, по всей видимости, обусловлены ингибированием многочисленных энзимов, в том числе неспецифических эстераз Т-лимфоцитов (в основном, Th2) и макрофагов [Хейхоу Ф.Г.Дж., Кваглино Д., 1983] как самими токсикантами, так и их метаболитами [Забродский П. Ф., 2004б]. Также редукция антителобразования может быть обусловлена снижением процессов тканевого дыхания вследствие взаимодействия метаболитов спиртов и хлорированных углеводородов с различными компонентами тканевого дыхания и окислительного фосфорилирования митохондрий ИКК.

Результаты наших исследований показали, что острое отравление спиртами и хлорированными углеводородами (0,75 ЛД50) снижает число РОК в селезенке крыс. В порядке снижения эффекта данного показателя токсиканты располагаются в последовательности: тетрахлорметан, метанол, дихлорэтан, трихлорэтилен, этиленгликоль, этанол. Мы поддерживаем мнение исследователей и считаем, что различная степень иммунотоксичности спиртов и хлорированных углеводородов может быть обусловлена особенностями их токсикокинетики и токсикодинамики.

Выраженное действие метанола на В-лимфоциты (сходное по величине эффекта с действием ТХМ и ДХЭ) обусловлено, по нашему мнению, преимущественно биотрансформацией его метаболита формиата энзимами, связанными с фолиевой кислотой, повышенное расходование которой на метаболизм метанола нарушает нуклеиновый обмен преимущественно в В лимфоцитах [Ройт А. и соавт., 2000].

Кроме того, снижение РОК при токсическом действии спиртов и хлорированных углеводородов может быть связано с действием гормонов коры надпочечников (стресс-обусловленная активация ГГАС), а также с возможной инициацией апоптоза иммуноцитов или снижением их функции спиртами, хлорированными углеводородами и их метаболитами [Хусинов А.А. и соавт., 1991;

Хаитов Р. М. и соавт., 2000;

Durant S., 1986;

Rinner I. et al.. 1995;

Dhabhar F. S. et al, 1996].

При изучении кооперации Т- и В-лимфоцитов мышей СВА in vitro оценка функции этих популяций иммуноцитов в данной реакции осуществлялась по формированию АОК к ЭБ. Удельный вес Т- и В-клеток в обеспечении антителопродукции определяли путем сравнения числа АОК после инкубации той или иной популяции лимфоцитов с различными концентрациями спиртов и хлорированных углеводородов. Кооперацию Т- и В-лимфоцитов можно рассматривать, как механизм на уровне взаимодействия клеток, определяющий антителопродукцию. В модели in vitro роль клеток, представляющих антиген Т-лимфоцитам, вместо макрофагов выполняют В клетки [Хаитов Р.М. и соавт., 2000]. Ex vivo данный процесс изучался в модели, предусматривающей забор Т- или В-клеток через 1 сут от сингенных доноров после воздействия на них ядов для изучения in vitro кооперации этих клеток соответственно с В- или Т-лимфоцитами интактных животных.

В результате проведенных исследований по оценке кооперации Т- и В лимфоцитов при остром токсическом действии спиртов, хлорированных углеводородов и их метаболитов in vitro, нами установлено, что по степени снижения редукции кооперации Т- и В-клеток токсиканты располагались в последовательности: дихлорэтан, тетрахлорметан, трихлорэтилен, метанол, этиленгликоль, этанол. Существенных различий между действием на кооперацию клеток исследуемых спиртов (а также различных хлорированных углеводородов) не отмечено. Мы полагаем, что спирты и хлорированные углеводороды нарушают кооперацию Т- и В-лимфоцитов преимущественно вследствие иммунотоксического эффекта продуктов их биотрансформации.

Под влиянием токсикантов в большей степени поражались Т-клетки.

Выявленная закономерность отсутствовала при действии метанола на клетки при переносе in vitro Т- или В-лимфоцитов от мышей после отравления. По степени супрессии кооперации Т- и В-клеток при действии спиртов и хлорированных углеводородов на Т-лимфоциты in vitro при выделении этих клеток от сингенных мышей после отравления токсиканты располагались в последовательности: дихлорэтан, тетрахлорметан, трихлорэтилен, метанол, этиленгликоль, этанол, а по степени редукции кооперации клеток при действии ядов на В-лимфоциты (in vivo с выделением клеток и изучением реакции in vitro) - в последовательности: метанол, дихлорэтан, тетрахлорметан, трихлорэтилен, этиленгликоль, этанол. По степени снижения функции Т-клеток в эффекте кооперации клеток in vitro спирты и их метаболиты располагались в порядке уменьшения эффекта в последовательности: глиоксиловая кислота, гликолевый альдегид, гликолевая кислота, муравьиная кислота, ацетальдегид, метанол, этиленгликоль и этанол, а по степени супрессии активности В-клеток – в последовательности:

муравьиная кислота, глиоксиловая кислота, гликолевый альдегид, гликолевая кислота, ацетальдегид, метанол, этиленгликоль, этанол. Сравнительная оценка действия дихлорэтана и его продуктов биотрансформации на кооперацию Т- и В-лимфоцитов in vitro в процессе антителогенеза позволяет заключить, что увеличение их иммунотоксичности происходит в последовательности: дихлорэтан – хлорэтанол – хлоруксусный альдегид – хлоруксусная кислота. Действие ядов было прямо связано с их концентрацией или дозой (при переносе клеток in vitro от мышей после отравления).

Анализируя результаты наших исследований, мы полагаем, что патогенез редукции активности Т- и В-клеток в процессе их кооперации, вероятно, связан с нарушением их функции как в результате прямого мембранотоксического эффекта испытуемых токсикантов, так и вследствие взаимодействия с сульфгидрильными и аминогруппами энзимов лимфоцитов высокотоксичных продуктов их биотрансформации, ингибирования ими тканевого дыхания, окислительного фосфорилирования и синтеза белков, уменьшения активации Т- и В-лимфоцитов вследствие снижения продукции циклических нуклеотидов и секреции Т-клетками ИЛ-2 и ИЛ-4, а также в результате повреждения мембраны лизосом ИКК с высвобождением и активацией кислых гидролаз, что согласуется с результатами исследований других авторов [Козлов В.А. и соавт., 2001;

Шуршалина А.В. и соавт., 2001;

Gabon P.A., 1986;

Parker D.C., 1993].

Данные литературы свидетельствуют о том, что in vivo иммунотоксический эффект метаболита этиленгликоля глиоксиловой кислоты, по-видимому, минимальный. Это обусловлено тем, что наиболее токсичная глиоксиловая кислота определяется в биосредах в концентрации 1300 раз меньшей, чем гликолевая кислота [Chou S.Y., Richardson K.E., 1978], вероятно, вследствие ее быстрой биотрансформации.

Как уже указывалось, более выраженное повреждающие воздействие муравьиной кислоты в отношении В-клеток (по сравнению с Т-лимфоцитами) обусловлено преимущественно фолат-зависимым метаболизмом формиата [Румянцев А.П. и соавт., 1981].

Полученные данные свидетельствуют о том, что спирты и хлорированные углеводороды при остром токсическом воздействии снижают Т-независимое антителообразование, оцениваемое по ОДЛТА к Vi-Ag в крови через 5 и 8 сут после иммунизации, преимущественно в продуктивную фазу антителогенеза по сравнению с индуктивным периодом антителопродукции. В порядке уменьшения редукции синтеза антител спирты и хлорированные углеводороды располагались в последовательности:

метанол, дихлорэтан, тетрахлорметан, трихлорэтилен, этиленгликоль, этанол.

Существенные различия в действии токсикантов отсутствовали, за исключением иммунотоксического эффекта этанола, который был ниже, чем у других ядов.

После острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами выявлено дозозависимое снижение Т-независимого антителообразования (оцениваемого по числу АОК в селезенке, отражающему синтез IgМ) в большей степени в продуктивный период антителогенеза по сравнению с индуктивной фазой антителопродукции. По степени редукции синтеза IgМ В-клетками в Т-независимой гуморальной иммунной реакции токсиканты располагались в порядке снижения эффекта в последовательности: метанол, дихлорэтан, тетрахлорметан, трихлорэтилен, этиленгликоль, этанол.

Снижение Т-зависимой антителопродукции под влиянием спиртов и хлорированных углеводородов, вероятно, обусловлено редукцией синтеза ряда лимфокинов: BSF-1, активирующего В-клетки;

росткового фактора В клеток – BCGF-II, стимулирующего клональную экспансию активированных клеток;

фактора дифференцировки В-клеток - - BCDF, который способствует созреванию клеток с высокой скоростью секреции IgM;

фактора BCDF, вызывающего переключение синтеза с IgM на IgG и высокую скорость его секреции [Ройт А., 1991;

Хаитов Р.М. и соавт., 2000;

Delves P.J., Roitt I.M., 2000;

Kracker S., Radbruch A., 2004].

Обращает на себя внимание максимальная супрессия Т-независимого антителообразования под влиянием метанола по сравнению с другими ядами.

Известно, что Т-независимая антителопродукция осуществляется В-клетками без участия Т-хелперов (в данном случае Тh1-лимфоцитов) [Hausmann S., Wucherpfennig K.W., 1997;

Ройт А. и соавт., 2000;

Kracker S., Radbruch A., 2004]. Полученные данные подтверждают результаты наших экспериментов in vitro, в которых доказано поражение метанолом В-лимфоцитов в большей степени, чем Т-клеток, по-видимому, вследствие нарушения обмена фолиевой кислоты метаболитом метанола формиатом [Ройт А. и соавт., 2000].

Сравнительная оценка влияния спиртов и хлорированных углеводородов на Т-зависимое и Т-независимое антителообразование показывает, что под влиянием токсикантов наблюдается преимущественное нарушение Т зависимой антителопродукции. По нашему мнению это обусловлено, наряду с другими механизмами, действием токсикантов одновременно на макрофаги, В-лимфоциты и Т-клетки (преимущественно на Th1-лимфоциты) [Delves P.J., Roitt I.M., 2000]), участвующие в реализации данной иммунной реакции, в то время как Т-независимый гуморальный иммунный ответ обеспечивается в основном функцией В-клеток, активируемых антигеном в присутствии ИЛ 1, секретируемом макрофагами, [Ройт А., 1991;

Ройт и соавт., 2000;

Gillbert K. M., Hoffman M. K., 1985;

Sinha A.A. et al., 1987], и нарушается в меньшей степени. Вполне естественно, что иммунотоксическое действие на три элемента, взаимодействующих в процессе антителообразования, проявляется большим его угнетением, чем при поражении одного или двух элементов, если нет оснований предполагать реализации селективного иммунотропного эффекта. Следует отметить, что метанол не способен избирательно поражать только В-лимфоциты. Оказывая максимальный повреждающий эффект на эти клетки по сравнению с другими ядами, он, как показали наши эксперименты, действует и на Т-клетки. При этом суммарный редуцирующий эффект на Т- и В-клетки (Т-зависимый антителогенез) у метанола меньше, чем у дихлорэтана.

Снижение числа АОК, синтезирующих IgM и IgG, под влиянием спиртов и хлорированных углеводородов свидетельствует о нарушении функции как Тh1-, так и Th2-лимфоцитов (Т-хелперов первого и второго типа) [Pfeifer C.

et al., 1991;

Ellmeier W. et al., 1999;

Maekawa Y., Yasutomo K., 2005].

Наши исследования выявили существенные нарушения клеточных иммунных реакций при остром токсическом действии спиртов и хлорированных углеводородов. Установлено, что под влиянием острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами (0,75 ЛД50) происходит снижение функции Т-клеток, оцениваемой по ингибированию миграции лейкоцитов, в течение времени до 6-9 сут. По степени редукции функции Т-лимфоцитов, связанной с синтезом фактора ингибирования миграции лейкоцитов, исследуемые токсиканты в порядке уменьшения эффекта располагались в последовательности: дихлорэтан, тетрахлорметан, трихлорэтилен, метанол, этиленгликоль, этанол. Существенных различий в супрессии активности Т-клеток не выявлено, за исключением действия дихлорэтана с эффектом этанола.

Изучение формирования ГЗТ под влиянием спиртов и хлорированных углеводородов в модели, не связанной с переносом клеток, позволяет установить их действие на клеточный иммунитет, в частности, на функцию Th1 и продукцию ими лимфокинов [Georgiev V.St., Albright J.E., 1993], а также на участвующие в реализации гиперчувствительности IV типа Т-клеток памяти и макрофагов [Ройт А., 1991]. В адоптивной реакции (связанной с переносом клеток от доноров реципиентам, «to adopt» – принимать, присваивать) существует возможность оценить действие токсикантов на вторичный клеточный иммунный ответ, формирование Th1-лимфоцитов в селезенке.

Результаты наших исследований показали, что острая интоксикация спиртами и ХУ дозозависимо снижает реакцию ГЗТ, характеризующую как первичный, так и вторичный клеточный иммунный ответ. При этом выявлено, что наименьшей активностью обладает этанол, а действие остальных токсикантов существенно не отличается. В целом эффект ХУ превышает действие спиртов.

Известно, что Тh1-лимфоциты обеспечивают реализацию реакции ГЗТ путем активации макрофагов. В основном Тh1-лимфоциты регулируют физиологические механизмы, обеспечивающие функцию Т-звена иммунитета [Хаитов Р.М и соавт., 2000;

Georgiev V.St., Albright J.E., 1993;

Kimber I., 1996]. Полученные нами результаты косвенно свидетельствуют о том, что ТХВ уменьшают способность Th1-лимфоцитов синтезировать ИЛ-1, ИЛ-3, интерферон и -фактор некроза опухоли (лимфотоксин), участвующие в формировании ГЗТ [Шуршалина А.В. и соавт., 2001;

Kimber I., 1996;

Bhushan V. et al., 2001], а также гранулоцитарно – макрофагальный колониестимулирующий фактор лимфоцитов. Кроме того, использованные спирты и хлорированные углеводороды путем реализации различных иммунотропных механизмов, вероятно, снижают активность и других лимфокинов и клеток, обеспечивающих формирование ГЗТ, в частности, ИЛ 10, Т-клеток памяти, клеток Лангерганса и макрофагов [Ройт А., 1991;

Kimber I. et al., 2001].

К ЕКК, открытым в 1976 году, относятся клетки, не имеющие антигенных маркеров Т- и В-лимфоцитов (так называемые, О-клетки).

Предполагают, что ЕКК происходят из предшественников Т-лимфоцитов [Ройт А., 1991;

Kimber I., Moore M., 1985]. ЕКК и К-клетки - это одни и те же клетки, отличающиеся лишь механизмами реализации киллинга (убийства) клеток-мишеней. Они узнают определенные структуры высокомолекулярных гликопротеидов, которые экспрессируются на мембране инфицированных вирусом клеток [Ройт А. и соавт., 2000].

Полученные данные свидетельствуют, что при остром токсическом действии спирты и хлорированные углеводороды дозозависимо снижают активность ЕКК в течение 1-9 сут. При этом этанол уменьшает параметр в течение 3-6 сут. Статистически значимых различий между эффектами редукции ЕЦ различными токсикантами, кроме этанола, не отмечается. В целом хлорированные углеводороды вызывают большую редукцию ЕЦ по сравнению со спиртами, причем максимальная редукция активности ЕКК (по степени эффекта и по длительности) обусловлена тетрахлорметаном.

Учитывая то, что печень является органом, в котором образуется большая часть ЕКК [Хаитов Р.М. и соавт., 2000], а тетрахлорметан обладает максимальным гепатотропным эффектом из использованных нами ядов [Тиунов Л.А., 1990а;


Лужников Е.А., Костомарова Л.Г., 1989, 2000;

Куценко С.А. и соавт., 2004], наиболее выраженная редукция активности ЕКК именно данным токсикантом вполне объяснима. Именно поэтому, все хлорированные углеводороды, являясь гепатотропными ядами, поражают ЕКК в большей степени, чем спирты.

По нашему мнению, снижение активности ЕКК под влиянием хлорированных углеводородов (и возможно спиртов), вероятно, связано с ингибированием их эстераз, которые, по-видимому, содержатся в ЕКК, как предполагаемых потомках предшественников Т-клеток [Ройт А., 1991].

Кроме того, эффекты кортикостероидов и катехоламинов вследствие активации токсикантами ГГАС [Тиунов Л.А., 1990] также могут обусловливать редукцию активности ЕКК [Rey A. et al., 1984;

Маdden K. S., Livnat S., 1991;

Claman H.N., 1993]. Однако, как показали наши эксперименты, иммуносупрессивные эффекты спиртов и хлорированных углеводородов не связаны с увеличением содержания при их действии в плазме крови адреналина и норадреналина, а роль кортикостерона в формировании постинтоксикационного иммунодефицита весьма незначительна.

Вероятно, спирты, хлорированные углеводороды и их метаболиты способны снижать активность ЕКК вследствие поражения механизмов порообразования перфорином и выделения в клетки мишени гранзимов (или снижением их синтеза) [Ройт А. и соавт., 2000;

Nogueira N., 1984], а также индукцией апоптоза ЕКК [Хаитов Р. М. и соавт., 2000;

Kimber I., More M., 1985;

Durant S., 1986].

Результаты наших исследований показали, что в опытах in vitro редуцирующее действие спиртов и хлорированных углеводородов на активность ЕКК прямо зависит от концентрации, а иммунотоксичность ядов обусловлена преимущественно эффектами их метаболитов. По степени снижения ЕЦ токсиканты располагались в последовательности:

тетрахлорметан – дихлорэтан – трихлорэтилен – метанол – этиленгликоль – дихлорэтан и его метаболиты Э. В порядке увеличения супрессии ЕКК располагались в последовательности: дихлорэтан, 2-хлорэтанол, хлоруксусный альдегид, хлоруксусная кислота, а спирты и их метаболиты – в последовательности: глиоксиловая кислота, муравьиная кислота, гликолевый альдегид, гликолевая кислота, ацетальдегид.

Данные литературы свидетельствуют, что in vivo решающую роль в повреждении ЕКК играют, вероятно, не глиоксиловая кислота, а гликолевый альдегид и гликолевая кислота, так как уже указывалось, несмотря на меньшую по сравнению с глиоксиловой кислотой токсичностью гликолевой кислоты, ее концентрация в биосредах более чем в 1300 раз выше, чем глиоксиловой кислоты [Chou S.Y., Richardson K.E., 1978 ].

Полученные результаты свидетельствуют, что патогенез супрессии активности ЕКК in vivo под влиянием этиленгликоля, метанола и этанола обусловлен преимущественно взаимодействием с ферментными системами ЕКК высокотоксичных продуктов их биотрансформации, которые могут действовать на сульфгидрильные и аминогруппы энзимов ЕКК, а также ингибировать тканевое дыхание и окислительное фосфорилирование этих клеток. In vivo снижение активации ЕКК также возможно вследствие недостатка продукции ИЛ-2 и -интерферона Тh1-лимфоцитами.

Последние исследования в области иммунологии показали, что клетки киллеры - К-клетки (кроме миелоидных) - это ЕКК, использующие для усиления реакции антитела (IgG) [Ройт А. и соавт., 2000;

Хаитов Р. М. и соавт., 2000]. Естественные клетки-киллеры, активированные связанными с клеткой-мишенью антителами, уничтожают ее. При этом антитела (IgG) привлекают своим Fc-хвостом ЕКК, имеющие для этого соответствующий FcRIII. Возникает комплекс клетка – мишень – антитело – ЕКК, в котором ЕКК реализует свою киллерную функцию в отношении клетки-мишени [Хаитов Р. М. и соавт., 2000]. Эта система получила название антителозависимая клеточная цитотоксичность. Помимо ЕКК в эту систему входят полиморфноядерные лейкоциты (ПЯЛ) – моноциты, базофилы, эозинофилы, сегментоядерные лейкоциты, а также другие фагоцитирующие и нефагоцитирующие миелоидные клетки [Ройт А., 1991].

Результаты наших исследований показали, что острое отравление спиртами и хлорированными углеводородами дозозависимо снижает АЗКЦ спленоцитов преимущественно в продуктивной фазе иммуногенеза по сравнению с индуктивным периодом. При этом установлено, что хлорированные углеводороды обладают более выраженными эффектами редукции АЗКЦ по сравнению со спиртами. Максимальная супрессия показателя характерна для острого токсического действия дихлорэтана.

В наших исследованиях роль метаболитов хлорированных углеводородов в реализации их иммунотоксичности подтверждена опытами на собаках, в которых установлена обратная корреляция между содержанием метаболитов дихлорэтана (2-хлорэтанола и хлоруксусной кислоты) в селезенке и ЕЦ и АЗКЦ спленоцитов собак, r составляли от –0,767 до -0,831 (p0,05).

Можно полагать, что спирты и хлорированные углеводороды, по видимому, способны уменьшать АЗКЦ в результате реализации общих механизмов иммунотоксичности вследствие нарушения электролитного обмена клетки, приводящего к изменению соотношения цАМФ/цГМФ [Trinchievi G., de Marchi M., 1976].

Относительная масса (массовый индекс) надпочечников после острого воздействия токсикантов (отношение массы надпочечника в мг к массе тела животного в г) в определенной степени отражает реакцию ГГАС (стресс реакцию) на химический раздражитель.

Проведенный анализ результатов исследования функционального состояния коры надпочечников и симпато – адреналовой системы выявил, что под влиянием острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами через 1 сут относительная масса надпочечников увеличивается, в течении последующих 3 сут незначительно уменьшается.

Восстановление показателя до контрольного значения наблюдается на 6 сут.

Увеличение относительной массы надпочечников при действии спиртов и хлорированных углеводородов, по нашему мнению, обусловлено активацией ГГАС и увеличением синтеза и выделения гипофизом АКТГ, который стимулирует пролиферацию клеток надпочечников (увеличение их массы) и продукцию ими кортикостероидов, что согласуется с данными других авторов [Селье Г., 1972;

Лемус В. Б., Давыдов В. В., 1974;

Мутускина Е.А. и соавт., 2001]. Увеличение массы надпочечников может быть обусловлено также под влиянием спиртов и хлорированных углеводородов активацией симпатико-адреналовой системы [Сидорин Г.И. и соавт., 2004].

Тенденция к снижению токсикантами массового индекса надпочечников через 3 сут после воздействия (при объединении всех показателей в одну группу эта редукция достоверна (р0,05), показатель по сравнению с контролем уменьшался в 1,23 раза), вероятно, обусловлена поражением (ингибированием) многочисленных ферментных систем этого органа ядами и их метаболитами, в частности, 2-хлорэтанолом, хлоруксусным, гликолевым, уксусным альдегидами, хлоруксусной, глиоксиловой, гликолевой, муравьиной кислотами.

Массовый индекс надпочечников, естественно, не может в полной мере отражать функцию коры надпочечников, а также ее мозгового вещества.

Анализировать влияние на ГГАС спиртов и хлорированных углеводородов следует, исследуя содержание в крови кортикостероидов и адреналина.

Увеличение массы надпочечников не всегда является свидетельством повышения ими продукции гормонов [Лемус В. Б., Давыдов В. В., 1974].

В фомировании иммунного ответа роль кортикостероидов неоднозначна, физиологические концентрации этих гормонов необходимы для реализации полноценного гуморального имммунного ответа [Корнева Е.А., 1990].

Высокие концентрации кортикостероидов, в частности, при интоксикации ФОС [Иванова А.С.. 1998;

Szot R.J., Murphy S.D.. 1970], вызывают супрессию ряда показателей системы иммунитета [Хусинов А.А. и соавт., 1991;

Забродский П.Ф. и соавт., 2000;

Claman H.N., 1983;

Tiefenbach B. et al., 1980, 1983, 1985].

Нами показано, что острая интоксикация спиртами и хлорированными углеводородами повышает концентрацию кортикостерона в плазме крови через 1 и 3 ч. В последующие 24 ч содержание кортикостерона в плазме крови после действия токсикантов восстанавливается до контрольного значения.

По-видимому, увеличение кортикостерона в крови под влиянием дихлорэтана и тетрахлорметана, помимо общей для всех токсикантов активации ГГАС, может быть обусловлено стимуляцией ацетилхолином центральных м-холинореактивных структур, приводящей к увеличению продукции АКТГ [Гурин В.Н., 1970;

Денисенко П.П., Чередниченко Р.П., 1970;

Денисенко П.П., 1980] вследствие их антихолинэстеразного эффекта.

Кроме того, нами установлено, что концентрация кортикостерона, соизмеримая с содержанием этого гормона в крови при острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами, способна играть определенную роль в супрессии гуморальной иммунной реакции и клеточного звена иммунитета (ЕЦ, АЗКЦ и реакции ГЗТ, характеризующей функцию Th1 лимфоцитов и макрофагов).

Можно полагать, что десинхронизация суточных колебаний концентрации кортикостерона под влиянием спиртов и хлорированных углеводородов также изменяет физиологическую регуляцию иммунного гомеостаза, что отмечено и другими исследователями [Dhabhar F.S. et al., 1996].

При вычислении коэффициентов корреляции между концентрацией кортикостерона в крови и АОК к ЭБ при остром отравлении крыс метанолом и дихлорэтаном установлено, что они составляли соответственно -0, (p0,05) [n=8] и -0,727 (p0,05) [n=9]. Коэффициенты корреляции при острых отравлениях метанолом, дихлорэтаном между концентрацией кортикостерона в крови и реакцией ГЗТ составляли соответственно -0,708 (p0,05) [n=8]и 0,794 (p0,05) [n=9]. Значения r между АОК к ЭБ, реакцией ГЗТ крыс и концентрацией кортикостерона в крови при острых интоксикациях этиленгликолем, этанолом, тетрахлорметаном, трихлорэтиленом находились в пределах от -0,642 до -0,785. При этом r для всех сравниваемых пар показателей после действия токсикантов были достоверны (p0,05), за исключением действия этанола (АОК к ЭБ и концентрация кортикостерона).


Следует отметить, что, несмотря на наличие относительно высоких и достоверных коэффициентов линейной корреляции между концентрацией кортикостерона и показателями системы иммунитета после отравления спиртами и хлорированными углеводородами, роль кортикостерона в формировании постинтоксикационного иммунодефицита весьма незначительна.

исследований показали, что под влиянием острой Результаты интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами (0,75 ЛД50) активировалась САС, что сопровождалось статистически значимым увеличением концентрации адреналина и норадреналина в плазме крови крыс при воздействии всех токсикантов. При этом, установлена обратная корреляция между Т-зависимым гуморальным иммунным ответом, ГЗТ и концентрацией адреналина в крови после острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами.

Увеличение катехоламинов в плазме крови под влиянием спиртов и хлорированных углеводородов обусловлено реализацией стресс-реакции, активацией симпатико-адреналовой системы. Кроме того, дихлорэтан и тетрахлорметан вследствие выявленного нами антихолинэстеразного эффекта приводят к реализации действия ацетилхолина на н-холинорецепторы мозгового вещества надпочечников, что приводит к последующему выделению адреналина в циркулирующую кровь.

В настоящее время доказано наличие на лимфоцитах адренорецепторов, на которые способны воздействовать катехоламины, повышая в физиологических концентрациях иммунные реакции, за исключением активности ЕКК [Маdden K.S., Livnat S., 1991]. Описано усиление дифференцировки незрелых лимфоидных клеток [Coffey R.G., Hadden J.W., 1985], в частности, В-лимфоцитов [Holte H., et al., 1988] под влиянием активации их -адренорецепторов.

Коэффициенты корреляции между концентрацией адреналина в крови и АОК к ЭБ, реакцией ГЗТ при остром отравлении крыс дихлорэтаном составляли соответственно -0,708 (p0,05) [n=9] и -0,755 (p0,05) [n=9].

Коэффициенты корреляции при острых отравлениях другими спиртами и хлорированными углеводородами между концентрацией адреналина в крови и реакцией ГЗТ, АОК к ЭБ составляли от -0,576 до -0,767. При этом r для всех сравниваемых пар показателей после действия токсикантов были достоверны (p0,05), за исключением действия этанола.

Нами показано, что при действии адреналина и норадреналина в концентрации соизмеримой с содержанием данных медиаторов после острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами (введение адреналина и норадреналина в дозе 0,025 мг/кг) наблюдается увеличение основных иммунных реакций. Следовательно, несмотря на выявленную обратную корреляцию между Т-зависимым гуморальным иммунным ответом, реакцией ГЗТ и концентрацией адреналина в крови после острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами, иммуносупрессивные эффекты данных токсикантов не связаны с увеличением концентрации при их остром действии в плазме крови Доза адреналина и норадреналина, адреналина и норадреналина.

составляющая 1,0 мг/кг, вызывает редукцию основных показателей гуморального и клеточного звена иммунитета.

Возможно усиление дифференцировки незрелых лимфоидных клеток, в частности, В-лимфоцитов под влиянием активации их -адренорецепторов объясняет выявленное нами и описанное в литературе увеличение антителопродукции преимущественно к Т-независимому антигену при введении адреналина и норадреналина в малых дозах [Gilbert K.M., Hoffmann M.K., 1985;

Holte H., et al., 1988].

Стимулирующее действие катехоламинов опосредуется через - и адренорецепторы иммуноцитов, путем синтеза цАМФ, приводящего к продукции соответствующих интерлейкинов, осуществляющих регуляцию иммунных реакций [Маdden K. S., Livnat S., 1991]. Известно, что цАМФ стимулирует дифференцировку незрелых лимфоидных клеток [Coffey R.G., Hadden J.W., 1985], в частности, В-лимфоцитов [Holte H., et al., 1988].

Предполагают, что активация -адренорецепторов иммунокомпетентных клеток в первые 12 ч после (индуктивная фаза иммунного ответа) антигенного стимула увеличивает антителообразование.

Данные литературы свидетельствуют, что увеличение под влиянием адреналина L3T4 (Т-хелперов/Тгзт) и особенно Lyt-1 (Т-хелперов/Тгзт), а также Lyt-2 (цитотоксических Т-лимфоцитов/Т-супрессоров) в селезенке мышей через 90 мин после его введения [Techima H.et al., 1991], видимо обусловливает активацию индуктивной фазы иммуногенеза, сопровождающуюся увеличением числа АОК, реакции ГЗТ и АЗКЦ.

Существуют основания полагать, что увеличение адреналина и дихлорэтаном и норадреналина в крови при острой интоксикации тетрахлорметаном сопровождается их уменьшением в мозгу и надпочечниках вследствие действия ацетилхолина [Brzezinski J., 1972]. Угнетение иммунных реакций при высоких дозах катехоламинов [Денисенко П.П., 1980] объясняется тем обстоятельством, что эти дозы являются пусковым фактором В-клеточной активации, но одновременно подавляют Т-клеточную хелперную активность [Gilbert K.M., Hoffmann M.K., 1985]. Незначительная редукция ЕЦ под влиянием катехоламинов обусловлена увеличением соотношения цАМФ/цГМФ [Garoroy M.R. et al., 1975]. Доказано, что при адреналэктомии функция ЕКК повышается [Маdden K. S., Livnat S., 1991]. Не исключено, что введение катехоламинов в продуктивную фазу иммунного ответа может приводить к сдвигам исследованных иммунных реакций существенно отличающихся от описанных [Маdden K. S., Livnat S., 1991].

Нельзя исключить, что при постинтоксикационной стресс-реакции катехоламины, возможно, способны усиливать иммунодепрессивный эффект кортикостероидов [Rey A. et al., 1984]. Известно, что супрессирующее действие кортикостероидов на суммарную фагоцитарную активность фагоцитов частично отменяется блокадой -адренорецепторов [Шилов Ю.И., Ланин Д.В., 2001].

Неспецифические эстеразы являются лизосомальными ферментами. Эти энзимы играют важную роль в реализации киллерной функции Т-лимфоцитов [Fergula J. et al., 1972;

Li C. Y. et al., 1973]. Изменение эстеразной активности в клетках отражает, с одной стороны, функциональную активность иммуноцитов, с другой - может служить количественным критерием Т-клеток в циркулирующей крови, так как именно эта субпопуляция лимфоцитов является эстеразопозитивной [Хейхоу Ф. Г. Дж., Кваглино Д., 1983;

Li C. G et al.,1973;

Kutty K. M. et al., 1976;

Кullenkampff J. et al., 1977]. Роль ацетилхолинэстеразы на поверхности Т-лимфоцитов [Kutty K. M. et al., 1976;

Szelenyi J.G. et al., 1982] до сих пор не ясна. Возможно, она регулирует влияние ацетилхолина на холинореактивные структуры Т-лимфоцитов [Забродский П.Ф. и соавт., 2001;

Gordon M.A. et al., 1978 Richman D.P., Arnason B.G.W., 1989].

Нами показано, что острое отравление дихлорэтаном, тетрахлорметаном и трихлорэтиленом вызывает существенное снижение активности -нафтил-АS ацетилхолинэстеразы в Т-лимфоцитах тимуса и селезенки, ацетатэстеразы и -нафтилбутиратэстеразы в спленоцитах крыс. При этом антиэстеразный эффект дихлорэтана в среднем выше действия других хлорированных углеводородов. Влияния спиртов на активность АХЭ, -нафтилбутиратэстеразы нафтил-АS-ацетатэстеразы и Т-лимфоцитов селезенки не выявлено. Результаты наших исследований и данные литературы свидетельствуют, что инактивация эстераз в моноцитах, цитотоксических Т-лимфоцитах, интактных и активированных лимфокинами ЕКК ксенобиотиками ослабляет иммунологический контроль и эффекторные функции, опосредуемые данными видами клеток. Выдвигается гипотеза, что торможение активности эстераз иммунокомпетентных клеток, вызываемое токсикантами, ослабляет процесс эстеразозависимой детоксикации, в результате чего способствует развитию процесса лимфомогенеза.

Анализируя результаты наших исследований, можно отметить, что коэффициенты корреляции между активностью ацетилхолинэстеразы в Т лимфоцитах тимуса крыс и АОК к ЭБ, реакцией ГЗТ при остром отравлении крыс дихлорэтаном составляли соответственно 0,755 (p0,05) [n=9] и 0, (p0,05) [n=9]. Коэффициенты корреляции при острых отравлениях другими ХУ между активностью ацетилхолинэстеразы в Т- лимфоцитах тимуса крыс и реакцией ГЗТ, АОК к ЭБ составляли от 0,767 до 0,805, а между содержанием различных эстеразопозитивных клеток в спленоцитах и реакцией ГЗТ, АОК к ЭБ - от 0,756 до 0,798. При этом r для всех сравниваемых пар показателей после действия тетрахлорметана и трихлорэтилена были достоверны (p0,05).

Наши исследования выявили, что при острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами происходит инициация процессов ПОЛ, которое проявляется снижением активности ферментативной антиоксидантной системы (редукция каталазы и пероксидазы), увеличением суммарной продукции радикалов и содержания малонового альдегида в плазме крови. Установлено, что хлорированные углеводороды в целом в большей степени инициируют процессы ПОЛ.

По нашему мнению, изменения показателей ПОЛ в плазме крови, отражают процесс свободно-радикального окисления липидов, как всех клеток различных органов в целом, так и клеток системы иммунитета и, в частности, лимфоцитов. Существуют основания считать, что стресс-реакция, приводящая к повышению уровня кортикостероидов и катехоламинов в крови под влиянием ксенобиотиков, может являться одним из факторов, инициирующим ПОЛ [Меерсон Ф.З., 1984;

Валеева И.Х. и соавт., 2002].

Показана, в частности, активация ПОЛ при гипоксической гипоксии [Зарубина И.В., Миронова О.П., 2002]. Следует отметить, что всдедствие поражения дыхательной системы спирты и хлорированные углеводороды вызывают этот вид гипоксии [Лужников Е.А., Костомарова Л.Г., 2000].

Обращает на себя внимание то, что активация ПОЛ под влиянием тетрахлорметана максимальная, что объясняется высокой активностью радикалов данного соединения, образующихся при его метаболизме.

Свободный радикал ССl+3 взаимодействует с субклеточными структурами и непосредственно повреждает ферментные системы, а также оказывает, так называемое, прооксидантное действие, то есть является фактором, включающим цепную реакцию переокисления липидов. Первичным объектом такого прооксидазного действия радикала ССl+3 являются ненасыщенные жирные кислоты внутриклеточных мембран (олеиновая, линолевая, линолиновая, арахидоновая), которые в свою очередь образуют свободный радикал как результат акта одноэлектронного окисления (отрыв атома (RО+2) водорода от реагирующей цепи). Образуются радикалы и гидроперекиси (RООН) жирных кислот, что приводит к структурной и функциональной перестройке мембран. На наш взгляд, это в полной мере можно отнести к ММФ системе и лимфоцитам. Процесс этот носит специфический характер только в самом начале - на стадии образования радикала ССl+3, который запускает всю цепь. Весь механизм переоксидации липидов как цепной реакции, однажды индуцированной, является неспецифическим. Это обычный, стандартный путь повреждения внутриклеточных мембран, которым завершается любая патология, любое острое отравление ксенобиотиками, ведущая к истощению антиоксидантных систем организма. Доказано повреждение тетрахлорметаном мембраны лизосом клеток, не связанного с ПОЛ, и последующее высвобождение и активация кислых гидролаз [Ахматова М.А. и др., 1982].

При вычислении коэффициентов корреляции между числом АОК к ЭБ, реакцией ГЗТ при остром отравлении тетрахлорметаном и суммарной продукцией радикалов установлено, что они составляли соответственно 0,732 (p0,05) и -0,783 (p0,05). Коэффициенты корреляции при острых отравлениях спиртами и хлорированными углеводородами между АОК к ЭБ, реакцией ГЗТ и содержанием каталазы и пероксидазы в крови крыс составляли от -0,645 до -0,759. Коэффициенты корреляции между содержанием МДА в крови и показателями иммунного статуса при действии спиртов и хлорированных углеводородов составляли от -0,639 до -0,769.

Значения r между параметрами были статистически значимы, за исключением показателей, сравниваемых после действия этанола.

Полученные нами результаты позволяют заключить, что общие механизмы иммунотоксичности спиртов и хлорированных углеводородов определяются активацией функции коры надпочечников (сопровождающейся увеличением в плазме крови кортикостерона, воздействующего на лимфоциты), инициацией перекисного окисления липидов мембран иммуноцитов и гибелью (вероятно, в результате апоптоза) иммунокомпетентных клеток. Вместе с тем, частные механизмы иммунотоксичности обусловлены инактивацией ацетилхолинэстеразы, -нафтил-бутиратэстеразы нафтил-АS-ацетатэстеразы и Т-лимфоцитов хлорированными углеводородами, действием метаболитов спиртов и хлорированных углеводородов, приводящих к снижению функции лимфоцитов, в том числе В-лимфоцитов метаболитом метанола формиатом.

Особенности иммунотоксичности спиртов и хлорированных углеводородов определяются спецификой поражения ими популяций и субпопуляций лимфоцитов.

Характер изменения факторов НРО и иммунного гомеостаза под влиянием спиртов и хлорированных углеводородов, а также сравнительная характеристика действия некоторых иммуностимуляторов на НРО, клеточное и гуморальное звено иммунитета [Лазарева Д.Н., Алехин Е.К., 1985;

Арион В.Я., 1991;

Земсков В.М.,1991;

Петров Р.В.,1991;

Утешев Б.С. и соавт., 1995;

Попова Е.А. и соавт., 2003;

Щеглова М.Ю., Макарова Г.А., 2003 и др.] позволяют считать наиболее приемлемыми для коррекции постинтоксикационных нарушений, вызванных спиртами и хлорированными Т-активин, миелопид и имунофан. Для углеводородами, тимоген, восстановления функции В-клеток после отравления метанолом может быть целесообразным использование фолината кальция.

Полученные данные показали, что применение тимогена, Т-активина и миелопида в течение 3 сут приводило к частичному восстановлению факторов НРО после отравления спиртами и хлорированными углеводородами (0,75 ЛД50). Использование имунофана в течение 3 сут в дозе 10 мкг/кг обеспечивало полное восстановление до контрольных уровней основных факторов НРО. В целом в порядке увеличения активности иммуностимуляторы располагались в последовательности: миелопид – тимоген - Т-активин – имунофан.

Рассматривая стимулирующие свойства тимогена и имунофана в отношении НРО следует упомянуть работы, в которых показано (опыты на мышах), что глутаминовая, аспарагиновая кислоты, треонин, валин стимулируют антителогенез и фагоцитоз. Лизин, пролин, тирозин и лейцин не изменяют гуморальный иммунный ответ, но повышают фагоцитоз, а аргинин угнетает антителогенез, но увеличивает фагоцитарную активность нейтрофилов. Регуляция иммуногенеза аминокислотами (а тимоген и имунофан – это соответственно две и шесть иммунологически активных аминокислот) является эволюционно древним механизмом, сохранившим свое значение и на более позднем этапе эволюции [Белокрылов Г.А. и соавт., 1991б].

В наших исследованиях установлено, что использование в качестве иммуностимуляторов после острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами (0,75 ЛД50) любого из использованных препаратов (тимогена, Т-активина, миелопида, имунофана) обеспечивало полное восстановление основных показателей В-системы иммунитета только при отравлении этанолом. После острого действия дихлорэтана, тетрахлорметана и трихлорэтилена только при действии имунофана достигалась нормализация показателей гуморального звена иммунитета.

Следует отметить, что после острого действия метанола в комбинации с этанолом только использование имунофана в сочетании с фолинатом кальция полностью восстанавливало показатели В-системы иммунитета. После острого отравления этиленгликолем и применения для лечения в качестве антидота этанола только использование имунофана в комбинации с Т активином полностью восстанавливало показатели В-звена системы иммунитета. Полученные данные согласуются с результатами исследований других авторов [Жубантурлиева А.Б. и соавт., 2003].

В целом по увеличению степени активности в отношении Т-зависимого иммуногенеза при острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами иммуностимуляторы располагались в последовательности:

миелопид – тимоген - Т-активин - имунофан, а в отношении Т-независимого антителобразования в порядке увеличения эффекта – в последовательности:

Т-активин - тимоген - миелопид – имунофан.

Т-активин повышает Т-зависимый иммунный ответ, возможно, помимо прямого действия на Т-клетки, также вследствие его стимулирующего влияния на функцию макрофагов.

Стимуляция Т-независимой антителопродукции осуществляется тимогеном и имунофаном, вероятно, путем увеличения секреции ИЛ- макрофагами или экспрессии рецепторов к ИЛ-1 на В-клетках, а также активацией процессов пролиферации и дифференцировки В-лимфоцитов [Georgiev V.St., Albright J.E., 1993]. Стимуляция Т-активином, тимогеном и имунофаном Т-независимого антителообразования при остром отравлении спиртами и ХУ обусловлена его действием на макрофаги, в результате которого они продуцируют ИЛ-1, являющийся помимо антигена фактором, участвующим в независимом от тимуса антителообразовании. Не исключена также активация иммуностимуляторами тимуснезависимых Т-лимфоцитов (Т), индуцирующих продукцию В-клеток антител к Vi-Ag [Хаитов Р. М. и соавт., 2000].

Установленная нами возможность активации использованными иммуностимуляторами синтеза IgM и IgG позволяет полагать, что тимоген, Т активин, миелопид и имунофан восстанавливают функцию как Th1 лимфоцитов, так и Th2-лимфоцитов. Известно, что Th1-лимфоциты участвуют в синтезе IgM, G2 (и формировании ГЗТ), а Th2-лимфоциты способствуют синтезу IgG1, A, E [Pfeifer C. et al., 1991;

Georgiev V.St., Albright J.E., 1993].

При Т-зависимом антителообразовании действие тимогена и имунофана, вероятно, реализуется путем активации процесса кооперации макрофагов, Т клеток и В-лимфоцитов;

антителопродуцирующих В-клеток, функции Th1 лимфоцитов и Th2-клеток, секретирующие соответственно ИЛ-1, ИЛ-3, интерферон, -фактора некроза опухоли (лимфотоксин), ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ-10 и ГМ-КСФ [Kimber I.et al., 2001;

Delves P.J., Roitt I.M.,2000].

Полученные данные свидетельствуют о том, что использование в качестве иммуностимуляторов после острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами тимогена и Т-активина в дозе 10 мкг/кг в течение 3 сут обеспечивало частичное восстановление основных показателей клеточного иммунитета. Показано, что применение миелопида в дозе 5 мкг/кг (3 сут) не восстанавливало клеточные иммунные реакции (за исключением эффекта после отравления этанолом). В экспериментах установлено, что имунофан в дозе 10 мкг/кг при назначении его в течение 3 сут полностью восстанавливал функцию Th1-лимфоцитов (в реакции ГЗТ), активность ЕКК и АЗКЦ после острого отравления метанолом, этиленгликолем, этанолом, дихлорэтаном, тетрахлорметаном и трихлорэтиленом. Следует подчеркнуть, что при комбинированном действии метанола и этанола, а также этиленгликоля и этанола (использование этанола в качестве антидота после отравления метанолом и этиленгликолем) только использование Т-активина в комбинации с имунофаном в течение 3 суток приводило к полному восстановлению параметров клеточного звена иммунитета. При острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами по степени увеличения активности иммуномодуляторы в отношении основных показателей клеточного иммунитета располагались в последовательности:

миелопид – тимоген - Т-активин - имунофан. Стимуляция активности ЕКК и АЗКЦ Т-активином и имунофаном была практически одинаковой.



Pages:     | 1 |   ...   | 4 | 5 || 7 | 8 |
 





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.