авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 7 |

«На правах рукописи КОХАН СЕРГЕЙ ТИХОНОВИЧ АДАПТОГЕННЫЕ СВОЙСТВА РАСТИТЕЛЬНЫХ СРЕДСТВ И ИХ ВЛИЯНИЕ НА ТЕЧЕНИЕ ВНЕБОЛЬНИЧНЫХ ПНЕВМОНИЙ ...»

-- [ Страница 3 ] --

Второе место по частоте выделения возбудителя занимают представите ли рода Haemophilus – 7 %. На ассоциацию выделенных штаммов микроор ганизмов приходится - 4,9 %, из них в составе ассоциации, чаще всего выде лялись микроорганизмы родов: Streptococcus, Staphylococcus, Mycoplasma, грибы рода Candida и др. В 10 % случаев у исследуемой группы больных ВП какой-либо возбудитель диагностировать не удалось.

Учитывая тот факт, что организованный коллектив военнослужащих является приемлемой моделью для исследования особенностей течения ВП, где вероятность случайной и систематической ошибки сведена практически к минимуму, что позволило нам по возможности с большей точностью оце нить уровень носительства возбудителей внебольничной пневмонии.

Рисунок 2 - Этиологическая структура внебольничных пневмоний Мокроту от больных ВП подвергали стандартному бактериологиче скому исследованию с определением чувствительности к антибактериальным препаратам диско-диффузным методом (рис. 2). При анализе чувствительно сти патогенных микроорганизмов, выделенных у больных ВП, установлено, что чувствительность к антибактериальным препаратам составляет: к защи щенным пенициллинам (АМО/КК) и фторхинолонамIII поколения (Лево флоксацин) - 93,5 %;

к антибактериальным препаратам пенициллинового ря да (Ампициллин) – от 88 % до (Рифампицин) – 79 %;

к цефалоспоринам III поколения (Цефаклор) – 84 %;

к макролидам (Эритромицин) – 82 %;

анти биотикам класса оксазолидинонов(Линезолид) – 80 % (рис. 3).

Рисунок 3 - Уровень резистентности штаммов S.pneumoniae выделенных у больных внебольничной пневмонии.

Оценку фармакотерапевтической эффективности фитосредств драже «Астрагала», настойки «Женьшеня с астрагалом» и «Арура - Тан №7» в со ставе базисной терапии больных с нетяжелой внебольничной пневмонии проводили на основании изменений основных клинико-лабораторных, рент генологических и инструментальных данных. По рентгенологической карти не исходы заболевания оценивались, как полное разрешение инфильтратив ных изменений и выздоровление с остаточными патологическими измене ниями в виде усиления легочного рисунка за счет фиброзной трансформации макроструктур с формированием локальных участков пневмосклероза, плев ральных наложений, плевродиафрагмальных и плевроперикардиальных спа ек.

ГЛАВА 3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ РАСТИТЕЛЬНЫХ АДАПТОГЕННЫХ СРЕДСТВ 3.1. Исследование спектра адаптогенной активности и механизмов действия растительного сбора «Арура-Тан № 7»

В серии предварительных экспериментов была определена острая ток сичность отвара «Арура-Тан № 7».

Опыты проведены на крысах линии Wistar обоего пола массой 160- г. Острую токсичность «Арура-Тан № 7» определяли по методу Кербера (Бе ленький Л.М., 1963) при его однократном внутрижелудочном ведении в объ емах от 1,0 до 5,0 мл/кг массы животного. Животные контрольных групп по лучали эквиобъемное количество дистиллированной воды. Наблюдение за животными осуществляли в течение 14 дней с момента введения испытуемо го средства. В течение всего периода эксперимента наблюдали за общим со стоянием и поведением животных, регистрировали видимые признаки инток сикации и количество погибших животных с осмотром внутренних органов и гистологическим исследованием жизненно важных органов при гибели жи вотных.

Установлено, что внутрижелудочное введение испытуемой БАД в ука занных объемах не вызывало гибели животных в течение всего периода на блюдения. Кроме этого, у крыс, получавших испытуемое средство не отме чалось видимых признаков интоксикации;

поведенческие реакции и общее состояние не отличалось от такового у животных контрольной группы;

жи вотные опытных групп оставались активными, хорошо принимали корм, стул был нормальным в течение всего периода наблюдения.

Полученные данные позволяют отнести испытуемое средство к группе практически не токсичных веществ в соответствии с общепринятыми класси фикациями К.К. Сидорова (1973) и H.Hodge, R. Sterner (1975).

3.1.1. Влияние на общую физическую выносливость Эксперименты проведены на крысах линии Wistar обоего пола массой 180 – 220 г. Общую физическую выносливость определяли общепринятым методом по длительности плавания животных с 5-м % грузом до полного утомления. Животным опытной группы внутрижелудочно вводили отвар «Арура-Тан № 7» однократно в объемах 2,5;

5,0;

10,0 мл/кг (конечный объем вводимого водного раствора во всех группах составлял 1,0 мл/100 г) за 1 час до тестирования;

а также многократно в течение 7 дней до тестирования в объеме 5,0 мл/кг, 1 раз в сутки за 30 минут до кормления. Животные кон трольной группы получали эквиобъемное количество дистиллированной во ды. В качестве прототипа использовали деалкоголизированный водный рас твор экстракта элеутерококка в объеме 5,0 мл/кг. Через 1 час после введения испытуемого средства определяли общую физическую выносливость путем плавания животных с 5 % грузом до полного утомления, критерием которого служило 10-и секундное погружение животного под воду (Определение…, 1999). Полученные данные приведены в таблицах 3.1.1.1 – 3.1.1.2.

Таблица 3.3.1.1 - Влияние «Арура-Тан № 7» на общую физическую вынос ливость белых крыс при однократном введении № Группы животных Объем, мл/кг n Продолжительность пп плавания, мин 1 Контрольная - 10 4,6 0, 2 Арура-Тан № 7 2,5 8 5,2 0, 3 Арура-Тан № 7 5,0 8 6,4 0,40* 4 Арура-Тан № 7 10,0 8 6,7 0,35* 5 Элеутерококк 5,0 8 6,5 0,52* Примечание: * - здесь и далее означает достоверность различий по сравне нию с данными животных контрольной группы при Р0,05.

Как следует из данных, приведенных в таблице 3.1.1.1, однократное введение «Арура-Тан № 7» в объеме 2,5 мл/кг не оказывает статистически значимого влияния на продолжительность плавания мышей, тогда как введе ние его в объеме 5,0 мл/кг сопровождалось повышением общей физической выносливости животных в среднем на 40 % по сравнению с данными мышей контрольной группы. Увеличение объема испытуемого средства до 10, мл/кг оказывало аналогичное актопротекторное действие: продолжитель ность плавания повышалась на 46 % по сравнению с контролем. При этом эффективность адаптогенного средства в объемах 5,0 и 10,0 мл/кг была близ кой таковой у препарата сравнения – экстракта элеутерококка.

Таблица 3.1.1.2 - Влияние «Арура-Тан № 7» на общую физическую вынос ливость белых крыс при многократном введении № Группы животных Объем, мл/кг n Продолжительность пп плавания, мин 1 Контрольная - 8 5,5 0, 2 Арура-тан № 7 5,0 8 10,7 0,35* 3 Элеутерококк 5,0 8 8,5 0,28* Как следует из данных, приведенных в таблице 3.1.1.2, актопротектор ная активность «Арура-Тан № 7» повышается при его многократном введе нии, о чем свидетельствует увеличение продолжительности плавания мышей опытной группы на 95% по сравнению с данными животных контрольной группы. При этом эффективность испытуемого средства превосходила тако вую у препарата сравнения.

3.1.2. Влияние на скоростную выносливость Эксперименты проведены на крысах линии Wistar обоего пола массой 180 – 200 г. Скоростную выносливость определяли общепринятым методом принудительного бега животных в 10-дорожечном третбане, снабженном электростимулятором (70 в) (Савичев А.Т., 1971). Животным опытной груп пы внутрижелудочно вводили отвар «Арура-Тан № 7» однократно в объеме 5,0 мл/кг за 1 час до тестирования;

а также многократно – в аналогичном объеме в течение 7 дней до тестирования (1 раз в сутки за 30 минут до корм ления). Животные контрольной группы получали эквиобъемное количество дистиллированной воды. В качестве препарата сравнения использовали деал коголизированный водный раствор экстракта элеутерококка в объеме 5, мл/кг. Скоростную физическую выносливость определяли через 1 час после введения испытуемого средства по длительности бега животных до полного утомления при скорости движения полотна третбана 40 м/мин. Критерием полного утомления считали пребывание животного на электрической сетке третбана в течение 10 секунд. Полученные данные приведены в таблице Таблица 3.1.2.1 - Влияние «Арура-Тан № 7» на скоростную выносливость бе лых крыс № Группы животных n Продолжительность бега, мин пп Однократное введение Многократное вве дение 1 Контрольная 12 6,0 0,8 5,8 0, 2 Арура-тан № 7 10 10,2 1,1* 13,7 0,8* 3 Элеутерококк 10 8,9 0,9 10,5 0, Как следует из данных, приведенных в таблице 3.1.2.1, однократное введение «Арура-Тан № 7» животным опытной группы сопровождается уве личением продолжительности бега животных в среднем на 70 % по сравне нию с данными мышей контрольной группы. Многократное введение испы туемого средства оказывало более выраженное актопротекторное действие, о чем свидетельствует повышение скоростной физической выносливости крыс опытной группы более чем в два раза по сравнению с данными животных контрольной группы. При этом актопротекторная активность «Арура-Тан № 7» превосходила таковую у препарата сравнения - элеутерококка.

3.1.3. Влияние на силовую выносливость Эксперименты проведены на мышах линии СВА обоего пола массой - 20 г. Влияние испытуемого средства на силовую выносливость определяли по времени виса животных на шесте от начала удержания до момента паде ния (Арбузов С.Я. и соавт., 1960). Животным опытной группы отвар «Арура Тан № 7» вводили внутрижелудочно в объеме 5,0 мл/кг однократно за 1 ч до тестирования, а также многократно в течение 7 дней в указанном объеме раз в день за 30 мин до приема пищи. Животным контрольной группы внут рижелудочно вводили аналогичный объем дистиллированной воды. Полу ченные данные приведены в таблице 3.1.3.1.

Таблица 3.1.3.1 - Влияние «Арура-Тан № 7» на продолжительность виса бе лых мышей Группы Продолжительность виса, мин при однократном при многократном введении (n=8) введении (n=8) Контрольная 12,5 1,42 13,0 1, Арура-Тан № 7 16,3 1,35* 20,4 1,45* Как следует из данных, приведенных в таблице 3.1.3.1, при однократ ном введении «Арура-Тан № 7» в указанном объеме время виса мышей опытной группы повышается на 30 % по сравнению с таковым у животных контрольной группы. Многократное введение испытуемого средства сопро вождается более выраженным повышением силовой выносливости живот ных, о чем свидетельствует увеличение продолжительности виса мышей опытной группы в среднем на 60 % по сравнению с данными животных кон трольной группы.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют, что «Арура-Тан № 7» в объеме 5,0 мл/кг способствует повышению силовой выносливости животных.

3.1.4. Влияние на устойчивость к гипобарической гипоксии Эксперименты проведены на мышах линии СВА обоего пола массой - 20 г. Острую гипобарическую гипоксию воспроизводили по общепринятой методике в барокамере при атмосферном давлении 198,8 мм рт.ст., парци альном давлении кислорода 50 мм рт.ст., что соответствует «подъему» жи вотных на высоту 10000 м над уровнем моря. «Подъем» животных осуществ ляли со скоростью 20 м/мин до высоты 6000 м, на данной высоте с целью адаптации животных «подъем» прекращали на 2 мин, затем с той же скоро стью «подъем» продолжали до высоты 10000 м. Устойчивость животных к гипобарической гипоксии оценивали по продолжительности жизни на высоте 10000 м. Животным опытной группы внутрижелудочно вводили отвар «Ару ра-Тан № 7» в объеме 5,0 мл/кг однократно за 1 час до тестирования, а также многократно в аналогичном объеме предварительно в течение 7 дней (1 раз в сутки за 30 минут до кормления). Животные контрольной группы получали эквиобъемное количество дистиллированной воды. В качестве препарата сравнения использовали деалкоголизированный раствор элеутерококка в аналогичном объеме водного раствора, содержащем 5,0 мл экстракта.

Таблица 3.1.4.1 - Влияние «Арура-Тан № 7» на продолжительность жизни белых мышей при острой гипобарической гипоксии № Группы живот- n Продолжительность пп ных жизни, мин Однократное введе- Многократное введение ние 1 Контрольная 8 240,5 20,0 226,5 23, 2 Арура-Тан № 7 8 286,6 18,3* 410,5 38,5* 3 Элеутерококк 8 245,2 20,7 320,5 15,4* Как следует из приведенных данных, однократное введение «Арура Тан № 7» в указанном объеме сопровождается увеличением продолжитель ности жизни мышей в условиях гипобарической гипоксии в среднем на 20 % по сравнению с данными животных контрольной группы. При многократном введении испытуемого средства отмечалось более выраженное антигипокси ческое действие, о чем свидетельствует почти двукратное увеличение про должительности жизни мышей опытной группы по сравнению с данными животных контрольной группы. При этом антигипоксическая активность ис пытуемой БАД превосходила таковую у препарата сравнения.

3.1.5. Влияние на устойчивость к гемической гипоксии Эксперименты проведены на крысах линии Wistar обоего пола массой 180–200 г. Модель гемической гипоксии воспроизводили путем однократно го внутрибрюшинного введения крысам водного раствора натрия нитрита в дозе 70 мг/кг (Костюченков Ю.Ф., Фаращук Н.В., 1982). Животным опытной группы внутрижелудочно вводили отвар «Арура-Тан № 7» в объеме 5, мл/1кг профилактически в течение 3 дней до тестирования (1 раз в день за минут до кормления). Животным контрольной группы вводили эквиобъем ное количество дистиллированной воды в аналогичном режиме. Устойчи вость животных к действию гипоксии определяли по времени жизни живот ных от момента введения натрия нитрита до прекращения дыхания. Полу ченные данные приведены в таблице 3.1.5.1.

Таблица 3.1.5.1 - Влияние «Арура-Тан № 7» на продолжительность жизни белых крыс при гемической гипоксии Группы животных n Продолжительность жизни, мин Контрольная (Н2О) 10 25,6 ± 1, Арура-Тан № 7 12 31,0 ± 1,56* Элеутерококк 12 30,3 ± 1,23* Из приведенных данных следует, что трехдневное введение испытуе мого средства в объеме 5,0 мл/1кг сопровождается повышением устойчиво сти животных к гемической гипоксии в среднем на 20 % по сравнению с дан ными животных контрольной группы. Антигипоксическое действие иссле дуемого препарата было аналогичным таковому у препарата сравнения – экс тракта элеутерококка.

3.1.6. Влияние на устойчивость к гистотоксической гипоксии Опыты проведены на белых беспородных крысах обоего пола массой 160-180 г. Тканевую гипоксию вызывали однократным внутрибрюшинным введением нитропруссида натрия в дозе 4 мг/кг (Караев А.Я. и соавт., 1991).

Животным опытной группы внутрижелудочно вводили отвар «Арура-Тан № 7» в объеме 5,0 мл/кг однократно за 1 час до тестирования. Крысы контрольной группы получали эквиобъемное количество дистиллированной воды. В качестве препарата сравнения использовали деалкоголизированый экстракт элеутерококка в объеме 5,0 мл/кг. Оценивали продолжительность жизни животных после инъекции нитропруссида натрия. Полученные данные приведены в таблице 3.1.6.1.

Таблица 3.1.6.1 - Влияние «Арура-Тан № 7» на продолжительность жизни белых крыс при острой тканевой гипоксии Группы животных n Продолжительность жизни, мин Контрольная 8 17,6 1, Арура-тан № 7 10 22,4 2,34* Элеутерококк 10 23,3 1,55* Как следует из приведенных данных, однократное введение «Арура Тан №7» в указанном объеме сопровождалось увеличением продолжитель ность жизни животных опытной группы на 27% по сравнению с данными крыс контрольной группы. Экстракт элеутерококка оказывал аналогичное антигипоксическое действие.

3.1.7. Определение мембраностабилизирующей активности Эксперименты проведены с использованием 1% суспензии отмытых эритроцитов донорской крови. Воспроизводили осмотический гемолиз и два вида перекисного гемолиза: с реактивом Фентона и фотоактивированным хлорпромазином (Ковалев И.Е. и соавт., 1986). В инкубационную среду (об щим объемом 10 мл) добавляли испытуемое средство в объемах: 1,0;

0,5 и 0,25 мл. Степень гемолиза измеряли через 24 часа по поглощению при нм. Действие испытуемого средства на гемолиз оценивали в процентах по отношению к поглощению в контроле (без добавления испытуемого средст ва). Полученные данные приведены в таблицах 3.1.7.1. -.3.1.7.3.

Таблица 3.1.7.1 - Влияние «Арура-Тан № 7» на осмотический гемолиз эрит роцитов Условия опыта Объем средства Е 420 нм Гемолиз, % в пробе, мл Контроль - 0,802 Опыт 1,0 0,048 5, 0,5 0,634 79, 0,25 0,751 93, Таблица 3.1.7.2 - Влияние «Арура-Тан № 7» на перекисный гемолиз эритро цитов, индуцированный реактивом Фентона Условия опыта Объем средства в Е 420 нм Гемолиз, % пробе, мл Контроль - 0,405 Опыт 1,0 0,120 29, 0,5 0,069 17, 0,25 0,046 11, Таблица 3.1.7.3 - Влияние «Арура-Тан № 7» на перекисный гемолиз эритро цитов, индуцированный хлорпромазином Условия опыта Объем средства в пробе, Е 420 нм Гемолиз, % мл Контроль - 0,812 Опыт 1,0 0,240 29, 0,5 0,747 91, 0,25 0,717 88, Как следует из данных, приведенных в указанных таблицах, внесение «Арура-Тан № 7» в суспензию эритроцитов оказывает выраженное мембра ностабилизирующее действие, уменьшая степень осмотического и перекис ного гемолиза эритроцитов. При этом во всех экспериментах обнаружен до зозависимый эффект. При осмотическом гемолизе эффективность средства увеличивается с увеличением его объема в инкубационной среде: при добав лении 1 мл испытуемого средства степень осмотического гемолиза снижается на 94 % по сравнению с показателями контрольной пробы. При перекисном гемолизе обнаружена обратная зависимость: эффективность средства увели чивается с уменьшением его объема в инкубационной пробе и наиболее вы раженное уменьшение гемолиза (на 89 %) установлено при использовании данного средства в объеме 0,25 мл. При перекисном гемолизе, индуцирован ном фотоактивированным аминазином, наиболее выраженный мембраноста билизирующий эффект обнаружен при использовании средства в объеме 1, мл: гемолиз уменьшается на 70 % по сравнению с контролем.

3.1.8. Влияние на экссудацию и дегрануляцию тучных клеток при остром асептическом воспалении Эксперименты проведены на белых беспородных крысах обоего пола массой 160-180 г. Острое асептическое воспаление вызывали внутрибрю шинным введением 1,0 мл 0,2 % раствора нитрата серебра (Александров П.М. и соавт., 1986). Отвар «Арура-Тан №7» вводили внутрижелудочно в объеме 5,0 мл/кг за 30 минут и через 1 час после инъекции нитрата серебра.

Животным контрольной группы вводили соответствующий объем дистилли рованной воды по аналогичной схеме. Через 3 часа после введения нитрата серебра животных декапитировали под легким эфирным наркозом. Брыжейку фиксировали смесью Карнуа и окрашивали 0,05% раствором толуидинового синего. Критерием развития и выраженности острого асептического воспале ния являлись объем экссудата в брюшной полости и процент дегранулиро ванных тучных клеток в брыжейке. Полученные данные представлены в таб лице 3.1.8.1.

Таблица 3.1.8.1 - Влияние «Арура-Тан № 7» на экссудацию и дегрануляцию тучных клеток при остром асептическом воспалении Группы животных Объем внутрибрю- Дегрануляция тучных шинной жидкости, мл клеток, % Интактная - 3,05 0, Контрольная 0,46 0,04 83,3 2, Опытная (Арура-Тан № 7) 0,16 0,02* 30,2 2,36* Установлено, что развитие острого асептического воспаления у крыс контрольной группы сопровождается существенной экссудацией, о чем сви детельствовало появление в брюшной полости большого объема жидкости красновато-бурого цвета вследствие присутствия в ней значительного коли чества эритроцитов. Курсовое введение «Арура-Тан № 7» в объеме 5,0 мл/кг на фоне острого перитонита оказывало противовоспалительное действие.

Так, у животных опытной группы количество экссудата в брюшной полости снижалось почти в два раза по сравнению с аналогичными данными крыс контрольной группы. При этом внутрибрюшинная жидкость у животных, по лучавших испытуемую БАД, имела желтоватый цвет с опалесцирующим от тенком, что свидетельствует об отсутствии в ней эритроцитов. Наряду с этим, в брыжейке животных опытной группы снижалось количество дегра нулированных тучных клеток в среднем на 65% по сравнению с данными крыс контрольной группы.

3.1.9. Исследование антиоксидантной активности 3.1.9.1. Антирадикальная активность по отношению к супероксид ным анион-радикалам Оценку антирадикальной активности по отношению к супероксидным анион-радикалам (ССР) определяли по методу (Chen A.-S. и соавт., 2003), в котором продукция О2- осуществлялась в неэнзиматической системе феназин метосульфат – НАДФ с последующей спектрофотометрической регистрацией количества окисленного тетразолия нитросинего. Испытуемое средство в ин кубационную среду добавляли в объемах 0.03, 0.14, 0.21, 0.28, 0.56, 2,78, 5. мл/10 мл. В качестве препаратов сравнения использовали аскорбиновую ки слоту (АК) и таннин. Полученные данные приведены в таблице 3.1.9.1.1.

Таблица 3.1.9.1.1 - Влияние «Арура-Тан № 7» на уровень связывания супер оксидных радикалов Объект Концентрация, мл/10 мл 0,03 0,14 0,21 0,28 0,56 2,78 5, Таннин 31.12 62.00 70.50 81.20 90.40 97.40 АК 40.34 52.12 57.40 65.60 76.30 94.20 Арура-Тан №7 0.00 2.58 23.44 47.60 62.00 83.50 94. Как следует из приведенных данных, уровень связывания супероксид ных радикалов под влиянием испытуемого фитосредства увеличивается при повышении его концентрации в инкубационной среде и достигает макси мальных значений при концентрации 5,55 мг/мл. При этом, в указанной кон центрации антирадикальная активность «Арура-Тан №7» была аналогичной таковой у препаратов сравнения.

3.1.9.2. Антирадикальная активность по отношению к NO-радикалам Связывание NO (СNO) определяли по методу Govindarajan и соавт.

(2003), заключающийся в связывании веществом (препаратом) NO нитропрус сида натрия с последующей спектрофотометрической регистрацией остаточ ного содержания NO реактивом Грисса. Полученные результаты подвергали логарифмированию по концентрационной шкале с последующим регрессион ным анализом и определением величины 50% связывания NO (IC50). Получен ные данные приведены в таблице 3.1.9.2.1.

Таблица 3.1.9.2.1 - Влияние «Арура-Тан №7» на уровень связывания NO - ра дикалов Концентрация, мг/мл Объект 0.004 0.018 0.075 0.300 2. АК 0.00 11.60 18.11 35.70 73. Кверцетин 8.71 27.53 37.28 75.56 0.094 0.187 0.375 1.00 2.00 4. Арура-Тан № 0.00 5.92 41.43 96.71 100 Как следует из приведенных данных, исследуемое фитосредство обла дает антирадикальной активностью по отношению к NO-радикалам: с увели чением концентрации средства его способность связывать указанные радика лы увеличивается. Показано, что антирадикальная активность «Арура-Тан №7» (IC50 = 0.467 мг/мл) превосходила таковую аскорбиновой кислоты (IC = 1.14 мг/мл). При этом, исследуемое фитосредство уступало по своей анти радикальной активности кверцетину (IC50 = 0.150 мг/мл).

3.1.9.3. Влияние на инактивацию Н2О Способность испытуемого фитосредства инактивировать H2O2 опреде ляли по методу Chen A.-S. и соавт. (2003), основанному на способности H2O2 вызывать окислительную деструкцию красителя фенолового красного.

Испытуемое средство в инкубационную среду добавляли в объемах 0,04, 0,16, 0,37, 0,74, 1,85, 3,70, 7,40 мг/мл. Полученные результаты подвергали ло гарифмированию по концентрационной шкале с последующим регрессион ным анализом и определением величины 50% связывания H2O2 (IC50, мг/мл).

Полученные данные приведены в таблице 3.1.9.3.1.

Таблица 3.1.9.3.1 – Влияние «Арура-Тан № 7» на уровень связывания H2O Объект Концентрация, мг/мл 0,04 0,16 0,37 0,74 1,85 3,70 7, Ионол 8.97 21.13 28.87 87.13 100 100 Таннин 0.00 10.38 20.07 41.21 78.13 97.89 Арура 6.77 15.94 35.86 63.35 84.86 100 Тан Как следует из данных, приведенных в таблице, испытуемое фитосред ство оказывает выраженное инактивирующее действие на H2O2: уровень по ловинного ингибирования данного соединения (IC50) составляет 0,57 мг/мл, что соответствует таковому у препаратов сравнения ионола и таннина.

3.1.9.4. Железоcвязывающая активность Исследование проведено с использованием метода, основанного на способности о-фенантролина связывать ионы железа (Методы биохимиче ского исследования, 1987). В модельную систему, состоящую из 0,2 мл мМ раствора о-фенантролина;

0,2 мл 12,3 мМ раствора FeCl 3 ;

2,6 мл 96 % этанола, добавляли отвар «Арура-Тан №7» в объеме 0,2 мл при следующих разведениях: 1:0 (неразведенный);

1:2;

1:4;

1:8;

1:16;

1:32. Через 10 минут спектрофотометрически оценивали концентрацию железа при длине волны 505 нм. Железоcвязывающую активность испытуемого средства выражали в % по отношению к контролю, значения которого принимали за 100 %. Полу ченные данные приведены в таблице 3.1.9.4.1.

Таблица 3.1.9.4.1 - Железоcвязывающая активность «Арура-Тан № 7»

Условия опыта Разве- Показатели Концентрация Fe 3+, % дения Железосвязывающая активность, % Контроль - 100 Арура-Тан №7 1: 0 2,7 97, 1: 2 2,7 97, 1: 4 3,1 96, 1: 8 10,1 89, 1: 16 44,0 56, 1: 32 77,7 22, В результате проведенных исследований установлено, что «Арура-Тан №7» обладает выраженной хелатирующей активностью, заключающейся в способности взаимодействовать с ионами трехвалентного железа (табл. 15).

При этом обнаружен четкий дозазависимый эффект: уменьшение концентра ции испытуемой БАД сопровождается снижением хелатирующей активно сти. Так при добавлении в реакционную среду неразведенного средства и при разведениях 1:2 и 1:4 отмечается практически 100 %-ное связывание ионов железа. При дальнейшем уменьшении концентрации БАД отмечается моно тонное уменьшение концентрации связанного железа в инкубационных про бах.

3.2. Исследование адаптогенных свойств и механизмов защитного действия «Астрагала» и «Женьшеня с астрагалом»

В серии предварительных экспериментов определяли острую токсичность испытуемых средств. Опыты проведены на крысах линии Wistar обоего пола массой 160 180 г. Острую токсичность БАД «Астрагал»

определяли с использованием метода Кербера (Беленький, 1963) при его однократном внутрижелудочном ведении в дозах 5000 мг/кг в конечном объеме 10 мл/кг. При исследовании острой токсичности, а также в последующих экспериментах, настойку «Женьшень с астрагалом»

предварительно деалкоголизировали путем выпаривания на водяной бане, после чего доводили дистиллированной водой до исходного объема.

Животным опытных групп указанную БАД вводили одноратно внутрижелудочно в объемах 1,0 – 5,0 мл/кг. Животные контрольной группы получали эквиобъемное количество дистиллированной воды. Наблюдение за животными осуществляли в течение 14 дней с момента введения испытуемого средства. В течение всего периода эксперимента наблюдали за общим состоянием и поведением животных, регистрировали видимые признаки интоксикации и количество погибших животных с осмотром внутренних органов и гистологическим исследованием жизненно важных органов при гибели животных.

Установлено, что внутрижелудочное введение испытуемых БАД в ука занных дозах и объемах не вызывало гибели животных в течение всего пе риода наблюдения. Кроме этого, у крыс, получавших испытуемое средство, не отмечалось видимых признаков интоксикации;

поведенческие реакции и общее состояние не отличалось от такового у животных контрольной груп пы;

животные опытных групп оставались активными, хорошо принимали корм, стул был нормальным в течение всего периода наблюдения.

Полученные данные позволяют отнести БАДы драже «Астрагал» и на стойку «Женьшеня с астрагалом» к группе практически не токсичных веществ в состветствии с действующими классификациями К.К. Сидорова (1973), H.Hodge, R. Sterner (1975).

3.2.1. Влияние на усточивость к гиперкапнической гипоксии Эксперименты проведены на крысах линии Wistar обоего пола массой 165- 180 г. Нормобарическую гиперкапническую гипоксию моделировали в гермокамере методом Ковалева Г.В. (Буреш З.Я., 1999). Животным опытных групп испытуемые средства вводили внутрижелудочно: «Астрагал» - в дозах 50, 100 и 150 мг/кг, «Женьшень с астрагалом» - в объемах 0,5;

1,0 и 1,5 мл/кг в конечном объеме 10 мл/кг в течение 7 дней 1 раз в сутки. Крысы контроль ной группы получали эквиобъемное количество дистиллированной воды.

Оценивали продолжительность жизни животных в условиях гиперкапнии.

Полученные данные приведены в таблице 3.2.1.1.

Таблица 3.2.1.1 - Влияние «Астрагала» и «Женьшень с астрагалом» на про должительность жизни белых крыс при гиперкапнической гипоксии № Группы живот- Дозы Продолжительность пп ных жизни, мин Однократное введе- Многократное введение ние 1 Контрольная - 27,5±1, 2 Астрагал 50 мг/кг 25,6±2,07 28,6±3, 100 мг/кг 27,0±3,22 35,5±3,23* 150 мг/кг 26,5±1,68 42,0±3,57* 3 Женьшень 0,5 мл/кг 32,5± 2,35 39,0± 4,27* с астрагалом 1,0 мл/кг 39,4± 3,14* 51,5± 4,55* 1,5 мл/кг 43,8± 5,33* 46,7± 4,28* Как следует из приведенных данных, однократное введение «Астрага ла» во всех исследованных дозах не оказывает влияния на продолжитель ность жизни животных в условиях гиперкапнической гипоксии, тогда как при многократном введении испытуемое средство в дозах 100 и 150 мкг/кг начинает проявлять антигипоксические свойства. Так, продолжительность жизни подопытных животных при введении указанных доз повысилась в среднем на 50 % по сравнению с данными у мышей контрольной группы.

Введение настойки «Женьшеня с астрагалом» оказывает более выра женное антигипоксическое действие, о чем свидетельствует увеличение про должительности жизни животных уже при однократном его введении. При многократном введении антигипоксический эффект испытуемого средства повышается. Так, при его введении в объемах 1,0 и 1,5 мл/кг продолжитель ность жизни мышей увеличилась соответственно на 85 и 70 % по сравнению с контролем.

3.2.2. Влияние на интенсивность процессов СРО при гиперкапнической нормобарической гипоксии Эксперименты проведены на крысах линии Wistar обоего пола массой 165 – 180 г. Моделирование нормобарической гиперкапнической гипоксии осуществляли в гермокамере (Буреш З.Я., 1999). Животным опытных групп испытуемые средства вводили внутрижелудочно: «Астрагал» - в дозе мг/кг, настойку «Женьшеня с астрагалом» - в объеме 1 мл/кг в конечном объеме 10 мл/кг профилактически в течение 7 дней до моделирования пато логических состояний. Крысы контрольной группы получали эквиобъемное количество дистиллированной воды. Для оценки интенсивности процессов СРО в сыворотке крови определяли концентрацию ТБК-активных продуктов в липидной фракции по методу (Андреевой Л.И, 1988). Состояние антиокси дантной защиты оценивали методом хемилюминесценции (Владимиров Ю.А., 1972) с использованием хемилюминометра BioOrbit 1251 (США). По лученные данные приведены в таблице 3.2.2.1.

Таблица 3.2.2.1 - Влияние «Астрагала» и «Женьшень с астрагалом» на ин тенсивность процессов СРО при гиперкапнической гипоксии Группы животных Концентрация ТБК-активных продуктов, мкмоль/мг липидов гипоксия Интактные 5,8 + 0, Контрольная 12,1 + 1, Астрагал 8,8 + 1,51* Женьшень с астрагалом 6,0 + 0,51* Данные, приведенные в таблице 3.2.2.1, свидетельствуют, что нормо барическая гиперкапническая гипоксия приводит к резкой активации процес сов СРО и угнетению антиоксидантной защиты (АОЗ). Так, концентрация ТБК-активных продуктов в сыворотке крови животных контрольной группы была в два раза выше, чем у интактных крыс. Установлено, что превентивно курсовое введение испытуемых средств на фоне гиперкапнии оказывает вы раженное антиоксидантное действие, о чем свидетельствует снижение кон центрации ТБК-активных продуктов в крови животны, получавших «Астра гал» и настойку «Женьшеня с астрагалом» соответственно на 27 и 51% по сравнению с показателями у животных контрольной группы. Уменьшение концентрации ТБК-активных продуктов при гипоксии коррелировало с по вышением активности антиоксидантной защиты (АОЗ). По данным хемилю минограммы антиоксидантный фон увеличивался при введении «Астрагала»

на 43%, настойки «Женьшеня с астрагалом» - 89% (р=0,001) по сравнению с контролем.

3.2.3. Влияние на поведенческую активность Опыты проведены на крысах - самцах линии Wistar массой 180 -220 г.

Влияние фитосредств на поведенческую активность и ориентировочно исследовательскую реакцию животных изучали с использованием метода «открытое поле» (Воронина Т.А., Середенин С.Б., 1998). Животным опыт ных групп испытуемые средства вводили внутрижелудочно в течение 7 дней до тестирования: «Астрагал» - в дозе 150 мг/кг, «Женьшень с астрагалом» - мл/кг в конечном объеме 10 мл/кг. Крысам контрольной группы вводили эк виобъемное количество дистиллированной воды. С целью оценки ориенти ровочно-исследовательской активности и эмоционального поведения живот ных регистрировали горизонтальную активность, вертикальную активность, норковый рефлекс, дефекацию, груминг, количество выходов в центральную зону. Об общей двигательной активности судили по сумме вертикального, горизонтального компонентов и норковому рефлексу. Полученные данные приведены в таблице 3.2.3.1.

Таблица 3.2.3.1 - Влияние «Астрагала» и «Женьшеня с астрагалом» на ориен тировочно-исследовательскую реакцию белых крыс Показатели Группы животных Контрольная Астрагал настойка Женьшеня с астрагалом Общая двигательная активность 18,6 ± 1,55 28,0 ± 2,07* 32,0 ± 3,54* Горизонтальная активность 8,5 ± 0,41 9,0 ± 0,67 10,7 ± 0,58* Вертикальная активность 3,2 ± 0,23 6,7 ± 0,37* 7,4 ± 0,45* Норковый рефлекс 6,9 ± 1,32 11,3 ± 1,45* 13,9 ± 1,40* Дефекация 3,1 ± 0,43 1,4 ± 0,16* 1,7 ± 0,23* Груминг 10,2 ± 1,02 15,1 ± 0,85* 20,0 ± 0,17* Кол-во выходов в центральную 7,9 ± 0,54 6,0 ± 0,32 4,7 ± 0,26* зону Установлено, что помещение животных контрольной группы в экспе риментальную камеру «открытое поле» приводило к повышению общей дви гательной активности с преимущественным увеличением горизонтального компонента, что свидетельствует о высоком уровне эмоциональной активно сти, страха (табл. 18). По мере освоения в новых условиях животные начина ли посещать внутренние квадраты камеры, и как следует из приведенной таблицы, на 3-й минуте тестирования у крыс этой группы существенно воз растала вертикальная активность и норковый рефлекс. Достаточно высокое число болюсов (фекальных шариков) указывает на высокую эмоциональную реакцию, выраженное чувство страха, переживаемого животным. У живот ных, получавших испытуемые фитосредства при помещении их в новые, не знакомые условия наблюдалась несколько иная поведенческая картина: от мечалось существенное повышение общей двигательной активности при вве дении «Астрагала» -на 50 %, а при введении настойки «Женьшеня с астрага лом» - на 72 % по сравнении с показателями у крыс контрольной группы.

При этом, повышение двигательной активности у животных опытных групп происходило, преимущественно, за счет увеличения вертикальной активно сти и норкового рефлекса: эти показатели на фоне введения испытуемых средств увеличились в среднем в два раза по сравнению с налогичными пока зателями у крыс контрольной группы. Полученные данные свидетельствует о том, что испытуемые фитсредства стимулируют ориентировочно - исследо вательскую реакцию животных, помещенных в новые условия. Наряду с этим, под влиянием «Астрагала» отмечалось двукратное уменьшение числа болюсов и увеличение актов груминга на 48 %;

при введении настойки «Женьшеня с астрагалом» количество болюсов уменьшилось на 45 %, а ко личество актов груминга увеличилось в два раза по сравнению с аналогич ными показателями у крыс контрольной группы. Полученные данные указы вают на то, что под влиянием испытуемых фитосредств снижается уровень тревожности и ускоряется период адаптации животных к новым условиям.

Отмечено также, что у крыс, получавших «Астрагал» и настойку «Женьшень с астрагалом», уменьшается количество выходов в центральную зону соот ветственно на 24 и 41 % по сравнению с данными в контроле, что указывает на уменьшение выраженности эмоциональной оборонительной реакции жи вотных.

3.2.4. Влияние на познавательную активность Эксперименты проведены на белых крысах-самцах линии Wistar мас сой 220-240 г. Исследование познавательной активности проведено с исполь зованием метода Nuttin J. (Буреш З.Я. и соавт., 1991). Животным опытной группы испытуемое средство вводили внутрижелудочно в объеме 10 мл/кг в течение 7 дней до тестирования. Крысам контрольной группы вводили экви объемное количество дистиллированной воды. Для проведения эксперимента использовался ящик, дно которого было разделено на квадраты со сторонами 10х10 см, в центре каждого квадрата находились отверстия, такие же отвер стия были сделаны в стенках. В поле выставлялись предметы: белые кубики в 1 и 2 высадке и зеленые цилиндры в последующих (3, 4, 5 высадках). Для каждого животного проводилось пять высадок по 5 минут. После второй вы садки производилась смена предметов. При этом регистрировалась следую щие показатели: число подходов и обнюхиваний предметов в каждой высад ке;

количество заглядываний в отверстия;

вертикальная двигательная актив ность;

горизонтальная двигательная активность;

количество выходов в центр поля;

количество актов дефекации;

груминг. Познавательная активность оце нивалась по первым двум показателям. Подсчитывали индекс познаватель ной мотивации (ИПМ) как отношение числа подходов в данной высадке к числу подходов в 1 высадке. По приросту ИПМ между 2 и 1 высадками оце нивали динамику привыкания познавательной реакции. Полученные данные приведены в таблице 3.2.4.1.

Таблица 3.2.4.1 - Влияние «Астрагал» и «Женьшеня с астрагалом» на позна вательную активность белых крыс Количество Индекс познавательной мотивации (ИМП) заглядываний в отверстия Группы Номер высадки 2 3 4 5 Прирост ИПМ Контрольная 1.4 28,7 17,6 5,8 27,3 6,9+1, Опытная (Арура-Тан 4,8 64,3 23,8 7 59,5 13,9+1,4* №7) Как следует из данных, приведенных в таблице, курсовое введение «Астрагала» и «Женьшеня с астрагалом» сопровождается существенным увеличением познавательной активности животных. В частности, об этом свидетельствует возрастание индекса познавательной мотивации (ИПМ) крыс опытной группы после смены предметов в 2,2 раза по сравнению с дан ными животных контрольной группы. Общий прирост ИПМ также был выше в опытной группе в 2 раза. Кроме этого на повышение познавательной ак тивности указывает двукратное увеличение количества заглядываний в от верстия (норкового рефлекса).

3.2.5. Определение антирадикальной активности Оценку антирадикальной активности по отношению к супероксидным анион-радикалам (ССР) определяли по методу (Chen A.S. с соавт., 2003), в котором продукция О2- осуществлялась в неэнзиматической системе феназин метосульфат – НАДФ с последующей спектрофотометрической регистрацией количества окисленного тетразолия нитросинего. Испытуемое средство в ин кубационную среду добавляли в объемах 0.03, 0.14, 0.21, 0.28, 0.56, 2,78, 5. мл/10 мл. В качестве препаратов сравнения использовали аскорбиновую ки слоту (АК) и таннин. Полученные данные приведены в таблицах 3.2.5.1 – 3.2.5.2.

Таблица 3.2.5.1 - Влияние «Астрагала» на уровень связывания супероксид ных радикалов Объект Концентрация, мл/10 мл 0,03 0,14 0,21 0,28 0,56 2,78 5, Таннин 31.12 62.00 70.50 81.20 90.40 97.40 АК 40.34 52.12 57.40 65.60 76.30 94.20 Астрагал 0.00 2.58 23.44 47.60 62.00 83.50 94. Таблица 3.2.5.2 - Влияние «Женьшеня с астрагалом» на уровень связывания супероксидных радикалов Условия опыта Концентрации, Связывание суперок мл/10 мл сидных радикалов (% от контроля) Контроль - Опыт (Женьшень с аст- 0,2 70, рагалом) 0,4 69, 0,1 64, 0,02 59, 0,004 47, Как следует из приведенных таблиц, уровень связывания супероксид ных радикалов фитосредством «Астрагал» увеличивается при повышении концентрации испытуемого средства в инкубационной среде и достигает максимальных значений при концентрации 5,55 мг/мл. При этом, в указанной концентрации антирадикальная активность испытуемого средства была ана логичной таковой у препаратов сравнения. Аналогичное антирадикальное действие по отношению к супероксидным радикалам оказывал «Женьшень с астрагалом» (табл. 3.2.5.2). Из данных таблицы видно, что для комплексного средства О2•- IC50 составляет 0,015 мг/мл.

3.2.6. Определение железоcвязывающей активности Исследование проведено с использованием метода, основанного на способности о-фенантролина связывать ионы железа (Методы биохимиче ского исследования …, 1987). В модельную систему, состоящую из 0,2 мл мМ раствора о-фенантролина;

0,2 мл 12,3 мМ раствора FeCl 3;

2,6 мл 96 % этанола, добавляли отвар «Арура-Тан №7» в объеме 0,2 мл при следующих разведениях: 1:0 (неразведенный);

1:2;

1:4;

1:8;

1:16;

1:32. Через 10 минут спектрофотометрически оценивали концентрацию железа при длине волны 505 нм. Железосвязывающую активность испытуемого средства выражали в процентах по отношению к контролю, значения которого принимали за %. Полученные данные приведены в таблицах 3.2.6.1 – 3.2.6.2.

Таблица Железоcвязывающая активность «Арура-Тан № 7»

Условия опы- Разведения Показатели 3+ та Концентрация Fe, % Железосвязывающая активность, % Контроль - 100 Арура-Тан №7 1: 0 2,7 97, 1: 2 2,7 97, 1: 4 3,1 96, 1: 8 10,1 89, 1: 16 44,0 56, 1: 32 77,7 22, В результате проведенных исследований установлено, что «Арура-Тан №7» обладает выраженной хелатирующей активностью, заключающейся в способности взаимодействовать с ионами трехвалентного железа. При этом обнаружен четкий дозазависимый эффект: уменьшение концентрации испы туемой БАД сопровождается снижением хелатирующей активности. Так при добавлении в реакционную среду неразведенного средства и при разведениях 1:2 и 1:4 отмечается практически 100 %-ное связывание ионов железа. При дальнейшем уменьшении концентрации БАД отмечается монотонное уменьшение концентрации связанного железа в инкубационных пробах.

Железоcвязывающая активность «Тиреонорма»

Условия опыта Концентра- Показатели 3+ ция, мг/мл Концентрация Fe, Железосвязы % вающая актив ность, % Контроль 100 Опытная (Тирео- 1:0 2,7 98, норм) 1:2 2,7 98, 1:4 3,1 96, 1:8 10,1 82, 1:16 44,0 72, 1:32 77,7 25, Установлено, что «Тиреонорм» обладает выраженной хелатирующей активностью, заключающейся в способности взаимодействовать с ионами трехвалентного железа. При этом обнаружен дозазависимый эффект: умень шение концентрации испытуемого средства сопровождается снижением хе латирующей активности. Так при добавлении в реакционную среду неразве денного средства и при разведениях 1:2 и 1:4 отмечается практически 100% ное связывание ионов железа. При дальнейшем уменьшении концентрации отмечается уменьшение концентрации связанного железа в инкубационных пробах.

ГЛАВА 4. ИССЛЕДОВАНИЕ ФАРМАКОТЕРАПЕВТИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ ФИТОСРЕДСТВ 4.1. Фармакотерапевтическая эффективность «Арура-Тан №7»

при иммобилизационном стрессе Исследования выполнены на крысах линии Вистар обоего пола массой 160-170 г. Иммобилизационный стресс воспроизводили общепринятым методом путем фиксации животных в положении на спине в течение 24 часов.

Животным опытной группы внутрижелудочно вводили отвар «Арура-Тан № 7»

объеме 5,0 мл/кг в течение 7 дней до иммобилизации. Крысы контрольной группы получали эквиобъемное количество дистиллированной воды по анало гичной схеме. В качестве препарата сравнения использовали деалкоголизиро ванный раствор элеутерококка в объеме 5,0 мл/кг. На 8-е сутки эксперимента животных контрольной и опытных групп подвергали иммобилизационному стрессу, после чего животных декапитировали под легким эфирным наркозом и определяли выраженность «триады Селье»: гипертрофию надпочечников, ин волюцию тимуса и появление язвенных повреждений в слизистой оболочке же лудка. Для этого желудок разрезали по большой кривизне и подсчитывали ко личество деструкций, которые подразделяли на точечные кровоизлияния, эро зии и полосовидные язвы. Для каждого вида повреждений подсчитывали «яз венный индекс Паулса». Также для оценки интенсивности процессов свобод норадикального окисления (СРО) в сыворотке крови определяли концентра цию ТБК-активных продуктов (Темирбулатов В.И., Селезнев Ю.П., 1981). О со стоянии антиоксидантной системы судили по активности супероксиддисмутазы (СОД) (Чевари С. и соавт., 1985), каталазы (Королюк М.А. и соавт., 1988), со держанию восстановленного глутатиона в крови (Anderson M.E., 1989). Полу ченные данные приведены в таблицах 4.1.1. – 4.1.3.

Таблица 4.1.1 - Влияние «Арура-Тан № 7» на выраженность «триады Селье»

при 12-часовом иммобилизационном стрессе у белых крыс Масса, мг/100 г Группы животных тимуса надпочечников селезенки Интактная (n=8) 153,5 ± 7,21 20,0 ± 1,54 653,7 ± 24, Контрольная (Н2О) (n=8) 104,4 ± 10,40 31,3 ± 1,06 294,3 ± 26, Опытная 1 (Арура-Тан № 7) 125,5 ± 9,8* 22,5 ±1,03* 396,0 ±13,65* (n=10) Опытная 2 (элеутерококк) 119,6 ± 7,10* 22,5 ± 2,42* 429,6 ± 26,02* (n=10) Tаблица 4.1.2 - Влияние «Арура-Тан № 7» на выраженность повреждений сли зистой оболочки желудка у белых крыс на фоне 12-часового иммобилизацион ного стресса Группы животных Показатели Опытная 1 Опытная Интактная Контрольная (Арура-Тан № (Элеутерококк) (n=8) (Н2О)(n=10) 7) (n=10) (n=10) % поражения живот Точечные кро 0 42 50 ных воизл.

Среднее число дестр.

0 2,0 1,0 1, на 1 животное Индекс Паулса 0 0,84 1,0 1, % поражения живот 0 100 50 ных Эрозии Среднее число дестр.

0 1,0 1 на 1 животное Индекс Паулса 0 1,0 0,5 0, % поражения живот 0 100 0 Полос. язвы ных Среднее.число дест 0 1,6 0 рукций на 1 животное Индекс Паулса 0 1,6 0 Как следует из данных, приведенных в таблицах 4.1.1 – 4.1.2, в результате 24-часового иммобилизационного стресса у животных развивается комплекс дистрофических изменений внутренних органов, характерных для стрессорной реакции: инволюция лимфоидных органов, гипертрофия надпочечников, появ ление деструктивных поражений слизистой оболочки желудка. Профилактиче ское введение «Арура-Тан № 7» в объеме 5,0 мл/кг оказывало выраженное ан тистрессорное действие, о чем свидетельствовало уменьшение массы надпо чечников крыс опытной группы - на 28 %, увеличение относительной массы тимуса - на 16 % и селезенки - на 25 % по сравнению с аналогичными показа телями животных контрольной группы (табл. 4.1.1). Наряду с этим, превентив ное введение испытуемого средства оказывало выраженное гастропротективное действие, задерживая развитие глубоких деструкций слизистой оболочки же лудка белых крыс (табл. 4.1.2). Так, у опытных животных число эрозий встре чалось лишь в 50 % случаев при 100 % поражении в контроле. Соответственно, индекс Паулса для эрозий у животных, принимавших испытуемое средство, был меньше, чем таковой у крыс контрольной группы и составил 0,5 против 1,0 в контроле. При этом, у крыс, получавших «Арура-Тан № 7», не наблюда лось образования полосовидных язв, тогда как у животных контрольной группы в 80 % случаев отмечалось появление такого глубокого поражения слизистой как полосовидные язвы. При этом эффективность препарата сравнения не сколько уступала антистрессорной активности испытуемого средства.

Таблица 4.1.3 - Влияние «Арура-Тан № 7» на показатели процессов СРО и состояния антиоксидантной системы белых крыс на фоне ммобилизационного стресса Группы животных Показатели Интактная Контрольная Опытная 1 Опытная (n=6) (n=10) (Арура-Тан (элеутерококк №7) (n=10) (n=10) ТБК-акт. продукты, 7,4±0,48 14,9±2,38 11,0±0,95* 9,1±0, нмоль/мл Каталаза, мкат/л 1,07±0,11 1,1±0,14 1,4±0,02 1,3±0, СОД, мкмоль/мл 21,1±1,00 4,7±0,52 11,0±0,82* 12,5±0, Восстановленный глутатион, 354,2±25,81 248,8±29,03 280,6±18,55* 318,4±22, мкмоль/мл Данные приведенные в таблице 4.1.3 свидетельствуют о том, что 24 часовая иммобилизация вызывает у крыс контрольной группы повышение кон центрации ТБК-активных продуктов в - 2 раза и значительное снижение актив ности ферментов антиоксидантной защиты: СОД и каталазы соответственно на 78 и 30 % по сравнению с аналогичными данными интактных животных. Пре вентивное введение испытуемого средства оказывало выраженное антиокси дантное действие, о чем свидетельствует снижение концентрации Продуктов СРО на 20 % по сравнению с контролем, увеличение содержания восстановлен ного глутатиона в сыворотке крови, а также повышение активности каталазы и супероксиддисмутазы соответственно на 20 и 50% по сравнению с аналогич ными показателями животных контрольной группы. При этом антиоксидантная активность испытуемого средства была аналогичной таковой у препарата срав нения.

4.2. Фармакотерапевтическая эффективность «Арура-Тан №7»

при иммуносупрессивном состоянии Эксперименты проведены на мышах-самцах линий СВА и F (СВАхС57Вl/6) массой 18-20 г. Действие исследуемого средства на показатели клеточного и гуморального звеньев иммунитета было изучено на животных, находящихся в состоянии иммунодепрессии, вызванной цитостатиком азатио прином, который вводили контрольной группе животных в дозе 50 мг/кг перо рально 1 раз в сутки в течение 5 дней (Лазарева В.Н., Алехин Е.К., 1985). Рас тительное средство «Арура-Тан № 7» вводили опытной группе на фоне азатио прина в объеме 10 мл/кг перорально 1 раз в сутки в течение 14-и дней. Интакт ная и контрольная группы животных получали дистиллированную воду по ана логичной схеме. Действие испытуемого средства на состояние клеточного звена иммунного ответа оценивали в реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) согласно стандартной методике локальной ГЗТ (Руководство …, 2005). Мышей сенсибилизировали внутрибрюшинным введением 0,1 %-ой взвеси эритроцитов барана (ЭБ) в физиологическом растворе. На 4-е сутки под подошвенный апоневроз задней лапки вводили разрешающую дозу антигена 50 мкл 50 %-й взвеси ЭБ. В контралатеральную лапку инъецировали физиоло гический раствор в том же объеме. Оценку реакции ГЗТ проводили спустя часа по разнице массы опытной (Ро) и контрольной (Рк) лапок. Состояние гу морального иммунитета оценивали по количеству антителообразующих клеток (АОК), определяемых методом локального гемолиза по (Cunningham A.J., 1965). Мышей иммунизировали внутрибрюшинно ЭБ в дозе 2*108 клеток на мышь. Реакцию проводили на 5-е сутки после иммунизации. Наиболее распро страненный подход к изучению гуморального иммунитета заключается в ини циации процесса антигензависимой дифференцировки предшественников АОК до В-клеток, продуцирующих антитела. Информативным показателем такой инициации может служить уровень АОК. Полученные данные приведены в таблице 4.2.1 – 4.2.2.


Таблица 4.2.1 - Влияние «Арура-Тан № 7» на антителообразование Группы животных Абсолютное число Число АОК на 106 спленоцитов АОК на селезенку Интактная (n=10) 70773 3061 440 Контрольная (азатиоприн) (n=10) 33075 2831 271 Опытная (азатиоприн + «Арура-Тан 59535 3527* 398 26* № 7») (n=10) Введение азатиоприна приводило к снижению как абсолютного числа АОК, так и числа АОК на 106 спленоцитов на 53 % и 38 %, соответственно, по сравнению с теми же показателями в интактной группе (табл. 25).

При введении исследуемого средства на фоне иммуносупрессии наблю дали достоверное увеличение количества АОК как в абсолютных значениях, так и при расчете на 106 спленоцитов;

при этом первый показатель превышал уровень азатиоприновой супрессии в 1,8 раза, а второй показатель - в 1,5 раза.

Влияние «Арура-Тан № 7» на состояние клеточного звена иммунного от вета оценивали в реакции ГЗТ, дающей представление о функциональной ак тивности лимфоцитов Т-ряда.

Азатиоприновая иммунодепрессия проявилась в угнетении индекса реак ции ГЗТ на 36 % по сравнению с таковым в интактной группе (табл. 26). После введения животным указанного средства на фоне азатиоприна отмечали увели чение индекса реакции ГЗТ в 1,6 раза по отношению к контролю.

Таким образом, исследование иммуномодулирующих свойств раститель ного средства «Арура-Тан № 7» выявило его эффективность по отношению к реакциям клеточного и гуморального звеньев иммунного ответа при экспери ментальной азатиоприновой иммуносупрессии. Исследуемое средство в объеме 10 мл/кг способно ослаблять супрессивное действие азатиоприна на клеточно опосредованную иммунную реакцию ГЗТ и антителогенез, что выражается в восстановлении иммунологических показателей.

Таблица 4.2.2 - Влияние «Арура-Тан № 7» на выраженность гиперчувстви тельности замедленного типа (ГЗТ) Группы животных Индекс реакции ГЗТ, % Интактная (n=10) 22,1 1, Контрольная (азатиоприн) (n=10) 14,2 1, Опытная (азатиоприн + «Арура-Тан № 7») (n=10) 23,3 1,16* Установленное иммунокорригирующее действие испытуемого средства обусловлено наличием широкого спектра биологически активных веществ. За иммуномодулирующий эффект, по-видимому, ответственны гликозиды, поли сахариды, содержащиеся в корнях элеутерококка колючего;

дубильные вещест ва, флавоноиды, гликозиды, содержащиеся в корнях родиолы розовой;

тритер пеновые сапонины, содержащиеся в корнях солодки уральской;

эфирные масла, содержащиеся в траве тимьяна ползучего;

витамины, каротиноиды, содержа щиеся в побегах черники обыкновенной. Как известно из данных литературы, все перечисленные биологически активные вещества обладают иммуномодули рующими свойствами (Плецитый К.Д., 1990;

Бакуридзе А.Д. и соавт., 1993;

Сергеев А.В. и соавт., 1995;

Толкачев О.Н. и соавт., 1999;

Лазарева Д.Н. и со авт., 2005;

Kraus J., 1992;

Plohmann В. et.al., 1997). Кроме того, наши данные согласуются с данными (Лазарева Д.Н и соавт., 2005), из которых известно, что экстракт элеутерококка оказывает выраженный иммуномодулирующий эффект в условиях иммуносупрессии, вызванной циклофосфаном, а препараты из ро диолы розовой стимулируют клеточный иммунитет (Лазарева Д.Н. и соавт., 2005). В работе (Балтиной Л.А. и соавт., 1990) установлено, что глицирризино вая и глицирретовая кислоты и их производные, выделенные из корня солодки, усиливают выработку антител, стимулируют пролиферацию Т- и В лимфоцитов, реакцию ГЗТ, фагоцитарную активность макрофагов, а также ак тивность лизоцима (Балтиной Л.А. и соавт., 1990).

4.3. Фармакотерапевтическая эффективность «Астрагала» и «Женьшеня с астрагалом» при иммобилизационном стрессе Эксперименты проведены на мышах линии СВА обоего пола массой – 22 г. Иммобилизационный стресс вызывали иммобилизацией животных в ме таллических контейнерах, обеспечивающих полную неподвижность животных.

Иммобилизацию животных осуществляли в течение 12 часов. Животным опыт ных групп испытуемые средства вводили профилактически внутрижелудочно:

«Астрагал» - в дозе 50 мг/кг, «Женьшень с астрагалом» - в объеме 0,5 мл/кг в течение 7 дней до иммобилизации 1 раз в сутки. Мыши контрольной группы получали эквиобъемное количество дистиллированной воды. После окончания иммобилизации животных декапитировали под легким эфирным наркозом и произ водили забор крови и органов для последующих биохимических анализов. Опреде ляли количество эрозивных поражений в слизистой оболочке желудка, для это го желудки разрезали по большой кривизне. В сыворотке крови определяли концентрацию МДА (Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г., 1977);

содержание глю козы - глюкозооксидазным методом;

НЭЖК - по методике (Itaya, Ui, 1965).

Концентрацию кортикостерона в сыворотке крови определяли методом радио иммунологического анализа (RIA) после экстракции кортикостерона и 11-ДОК медицинским эфиром, с использованием стандартных наборов реактивов РИН В-3Н (Сухумский завод), RSL RAT Corticosteron (JH) kit (ICN Biomedical) и PHH-S-JH соответственно. Концентрацию гликогена в печени определяли по методике (Kemp А., Heijningen А., 1954). Полученные данные приведены в таб лицах 4.3.1 – 4.3.2.

Таблица 4.3.1 - Влияние «Астрагала» и «Женьшеня с астрагалом» на количест во эрозий в слизистой желудка мышей при иммобилизационном стрессе Группы Количество эрозий в слизистой желудка Интактные животные Контрольная 9,63±1, Астрагал 4,39+0,80* Женьшень с астрагалом 4,56+0,69* Как следует из приведенной таблицы, 12-и часовой иммобилизационный стресс вызывает у лабораторных животных развитие эрозивных повреждений слизистой оболочки желудка. Установлено, что курсовое профилактическое введение испытуемых средств оказывает выраженное стресс-протекторное дей ствие, о чем свидетельствует почти двукратное уменьшение количества эрозий.

Таблица 4.3.2 - Влияние «Астрагала» и «Женьшеня с астрагалом» на биохими ческие показатели сыворотки крови и концентрацию гликогена в печени мы шей при иммобилизационном стрессе Показатели Группы животных Интактные Контрольная Астрагал Женьшень с астрагалом Глюкоза, моль/л 4,44±0,14 5,15+0,17 4,37±0,19* 4,56+0,16* НЭЖК, мкэкв/л 280,1±11,9 401,3±23,6 317,5+28,3* 304,8+31,2* Гликоген печени, г 3,24±0,24 0,91+0,11 1,79±0,29* 1,95+0,33* % МДА, мкмоль/г 16,15+0,06 35,34±0,12 28,14+0,11* 20,67+0,10* Кортикостерон, 211,5±29,9 1222,5+36,1 925,6±35,2* 728,5±60,5* нг/мл Как следует из данных, представленных в таблице 4.3.2, 12-и часовая им мобилизация сопровождается стресс-индуцированным повышением основных энергетических субстратов с одновременным снижением концентрации гликоге на в печени, а также активация процессов свободнорадикального окисления и существенное повышение уровня кортикостерона в сыворотке крови животных.

На фоне введения испытуемых фитосредств отмечается достоверное снижение содержания глюкозы и НЭЖК. При этом концентрация глюкозы у животных, по лучавших «Астрагал» и настойку «Женьшеня с астрагалом», практически равня лась таковому у интакных животных, а содержание НЭЖК снижалось соответст венно на 21 % и 25 % по сравнению с данными у мышей контрольной группы.

Введение испытуемых средств на фоне иммобилизационного стресса оказывает также существенное антиоксидантное действие, о чем свидетельствует снижение концентрации МДА в гомогенате желудка: при введении «Астрагала» - на 20 %, а при введении настойки «Женьшеня с астрагалом» - на 43 % по сравнению с пока зателями в контроле. Установлено, что стресс-протекторное действие испытуе мых фитосредств связано, очевидно, со снижением выброса кортикостероидов. В частности, под влиянием «Астрагала» и настойки «Женьшеня с астрагалом» кон центрация кортикостерона в крови уменьшалась соответственно на 25 и 40 % по сравнению с данными у мышей контрольной группы.

4.4. Фармакотерапевтическая эффективность фитосредств при экспериментальном ларинготрахеите Опыты проведены на белых крысах линии Вистар с исходной массой 180 200 г. Экспериментальный ларинготрахеит у животных вызывали путем одно кратного нанесения на поверхность слизистой оболочки полости рта свежей культуры Staphylococcus aureus (0,2 мл с титром 1 млрд/мл). Животным опыт ных групп 1 раз в сутки в течение 7 дней внутрижелудочно вводили «Арура Тан №7» в объеме 10 мл/кг, «Астрагал» - в дозе 50 мг/кг, «Женьшень с астрага лом» в объеме 0,5 мл/кг в конечном объеме 10 мл/кг. В качестве препарата сравнения использовали алантон в дозе 40 мг/кг. Животным контрольной груп пы в эквивалентном объеме вводили внутрижелудочно дистиллированную воду по аналогичной схеме. Тяжесть течения экспериментального ларинготрахеита у лабораторных животных оценивали на 3 и 7 сутки эксперимента по общей клинической картине;

по частоте дыхательных движений;

по общим морфоло гическим показателям периферической крови. Для исследования влияния испы туемых средств на морфологический состав периферической крови при экспе риментальных повреждениях верхних дыхательных путей определяли СОЭ, концентрацию Hb, количество лейкоцитов и показатели лейкоцитарной форму лы (Меньшиков В.В. и соавт., 1987).

Поскольку, по данным последних лет, важную роль в патогенезе воспалительных заболеваний придают индукции процессов свободнорадикального окисления, было исследовано также интенсивность этих процессов и состояние антиоксидантной системы организма животных. Для этого, в сыворотке крови определяли концентрацию малонового диальдегида (Темирбулатов В.И., Селезнев Ю.П., 1981);

содержание восстановленного глутатиона (Anderson M.E., 1989);


активность супероксиддисмутазы (Чевари C.

и соавт., 1985) и каталазы (Королюк М.А. и соавт., 1988). Полученные данные приведены в таблицах 4.4.1 – 4.4.4.

Установлено, что нанесение на поверхность слизистой оболочки рта белых крыс культуры Staphylococcus aureus сопровождается развитием острого ларинготрахеита. Клиническая картина острого стафилококкового ларинготрахеита у белых крыс проявлялась в виде вялости, снижения двигательной активности и отказа от пищи. Наряду с этим отмечалось появление одышки, о чем свидетельствует достоверное увеличение частоты дыхания у крыс контрольной группы (табл. 4.4.1).

Таблица 4.4.1 - Влияние адаптогенных фитосредств на частоту дыхания белых крыс на 3 сутки острого стафилококкового ларинготрахеита Группы животных Частота дыханий в 1 мин Интактная 117,8 9, Контрольная (ларинготрахеит+Н2О) 173,1 ± 7, Опытная 1 (ларинготрахеит+Арура-Тан 130,1 ± 6,58* №7) Опытная 2 (ларинготрахеит+астрагал) 154,0 ± 8, Опытная 3 (ларинготрахеит+женьшень с 141,3 ± 5,82* астрагалом) Опытная 4 (ларинготрахеит+ алантон) 132,0 8,71* У крыс контрольной группы частота дыхания на 3-и сутки острого стафилококкового ларинготрахеита возрастала в среднем на 40 % по сравнению с уровнем физиологической нормы. У животных опытной группы, получавших «Арура-Тан №7» и настойку «Женьшеня с астрагалом» отмечалось достоверное снижение частоты дыхательных движений соответственно на 25 % и 20 % по сравнению в показателями крыс контрольной группы. При этом «Астрагал» не оказывал влияния на изучаемый показатель. Эффективность «Арура-Тан №7» и «Женьшеня с астрагалом» была сопоставима с таковой у препарата сравнения.

Таблица 4.4.2 - Влияние фитосредств на содержание гемоглобина и СОЭ при остром стафилококковом ларинготрахеите у белых крыс Группы животных Показатели Гемоглобин, СОЭ, г/л мм/час Интактная 140,0±1,22 3,2±0, 3 сутки Контрольная (ларинготрахеит+Н2О) 137,0±3,60 9,2±0, Опытная 1 (ларинготрахеит +Арура-Тан №7) 139,2±12,30 4,9±0,54* Опытная 2 (ларинготрахеит+астрагал) 142,1 ± 11,56 6,1 ± 0,47* Опытная 3 (ларинготрахеит+Женьшень с 140,5 ± 14,10 5,3 ± 0,34* астрагалом) Опытная 4 (ларинготрахеит +алантон) 136,5±10,12 5,2±0,37* 7 сутки Контрольная (ларинготрахеит+Н2О) 137,0±3,60 4,6±0, Опытная 1 (ларинготрахеит+Арура-Тан №7) 145,0±4,12 3,5±0,31* Опытная 2 (ларинготрахеит+астрагал) Опытная 3 (ларинготрахеит+Женьшень с астрагалом) Опытная 4 (ларинготрахеит+ алантон) 138,8±5,66 3,4±0, Как следует из данных, приведенных в таблице 4.4.2, инфицирование белых крыс культурой Staphylococcus aureus не оказывает заметного влияния на содержание гемоглобина, его концентрация у животных контрольной и опытных групп статистически не отличалось от таковой у интактных крыс. При этом установлено, что на фоне острого стафилококкового ларинготрахеита у белых крыс отмечается повышение скорости оседания эритроцитов (СОЭ), о чем свидетельствует повышение этого показателя на 3 и 7-е сутки воспалительного процесса соответственно в 3 и 1,5 раза по сравнению с показателями интактных крыс. Курсовое введение испытуемых средств оказывало противовоспалительное действие со снижением СОЭ. При этом более выраженную эффективность проявил сбор «Арура-Тан №7»: при его введении СОЭ на 3-и сутки эксперимента снизился на 47 % по сравнению с контролем, а на 7-е сутки – достиг значений физиологической нормы. На фоне введения «Астрагала» и настойки «Женьшеня с астрагалом» также отмечалось уменьшение выраженности воспалительной реакции, сопоставимое с таковым у препарата сравнения – алантона. На 7-е сутки эксперимента во всех опытных группах отмечалась нормализация СОЭ, тогда как у крыс контрольной группы этот показатель оставался повышенным.

В таблице 4.4.3 приведены результаты исследования влияния фитос редств на лейкоцитарную формулу белых крыс при экспериментальном остром ларинготрахеите. Как следует из приведенной таблицы, воспалительный про цесс в верхних дыхательных путях животных сопровождается развитием выра женного лейкоцитоза: количество лейкоцитов на 3-и сутки опыта у животных контрольной группы было почти в 1,5 раз выше, чем у интактных крыс. Уста новлено, что к указанному сроку исследования на фоне курсового введения сбора «Арура-Тан №7» отмечается достоверное уменьшение количества лейко цитов на 20 % по сравнению с данными у крыс контрольной группы. При этом уменьшение выраженности лейкоцитоза в этой группе происходит в основном за счет снижения палочкоядерных лейкоцитов, число которых снизилось на % по сравнению с контролем. На 7-е сутки наблюдения у животных получав ших испытуемое средство отмечалось снижение числа лейкоцитов до уровня физиологической нормы. При курсовом введении «Астрагала» и настойки «Женьшеня с астрагалом» также отмечалось уменьшение выраженности лейко цитоза: количество лейкоцитов на 3-и сутки уменьшилось соответственно на 23 и 33 % по сравнению с контролем. На 7-е сутки у крыс, получавших настой ку «Женьшеня с астрагалом», этот показатель снизился до уровня физиологи ческой нормы, тогда как при введении «Астрагала» оставался несколько повы шенным. Установлено, что эффективность «Арура-Тан №7» и «Женьшеня с ас трагалом» по данному показателю была сопоставима с таковой у препарата сравнения – алантона.

Таблица 4.4.3 - Влияние фитосредств на лейкоцитарную формулу при остром стафилококковом ларинготрахеите у бе лых крыс Группы животных Показатели Лейкоциты, х Палочкоядер- Сегментоядер- Эозинофилы, % Лимфоциты, % Моноциты, 109/л ные, % ные, % % Интактные 12,5±1,10 2,0±0,22 26,5±1,61 1,0±0,01 68,6±5,12 2,9±0, 3 сутки Контрольная 18,8±1,03 10,0±0,92 34,4±2,62 1,0±0,01 50,0±5,62 4,6±0, (ларинготрахеит+Н2О) Опытная 1 15,2±0,62* 6,4±0,20* 30,2±2,52 1,3 ± 0,14 59,3±4,82 4,1±0, (ларинготрахеит+Арура-Тан №7) Опытная 2 16,8 ± 0,93 7,7 ± 0,84* 33,6 ± 3,14 1,2 ± 0,16 61,3 ± 0,58 3,9 ± 0, (ларинготрахеит+Астрагал) Опытная 3 15,7 ± 0,11* 6,7 ± 0,54* 31,2 ± 0,36 1,1 ± 0,12 62,0 ± 0,61 4,2 ± 0, (ларинготрахеит+Женьшень с астрагалом) Опытная 4 (ларинготрахеит+ 17,2±0,86 8,2±0,20 32,0±2,42 0 55,4±4,42 4,4±0, алантон) 7 сутки Контрольная 17,2±1,12 8,4±0,60 32,4±1,62 1,3 ± 0,24 55,6±4,80 3,6±0, (ларинготрахеит+Н2О) Опытная 1 12,9±1,63* 3,6±0,37* 30,7±3,41 0 59,3±4,25 3,4±0, (ларинготрахеит+Арура-Тан №7) Опытная 2 14,0 ± 1,07 4,7 ± 0,97* 35,2 ± 3,27 1,0 ± 0,01 61,0 ± 1,57 3,8 ± 0, (ларинготрахеит+Астрагал) Опытная 3 13,3 ±1,06* 4,0 ± 0,25* 34,6 ± 2,77 1,0 ± 0,12 57,3 ± 2,36 3,7 ± 0, (ларинготрахеит+Женьшень с астрагалом) Опытная 4 (ларинготрахеит+ 13,5±1,24* 6,5±0,45* 33,6±2,28 0 56,4±4,48 3,5±0, алантон) Таблица 4.4.4. - Влияние фитосредств на интенсивность процессов свободно радикального окисления и состояние антиоксидантной системы белых крыс на 7-е сутки острого ларинготрахеита Группы животных Показатели СОД, Каталаза, Восстановлен МДА, мкмоль/мл мкат/л ный глутатион, мкмоль/мл мкмоль/мл Интактная 4,9 0,22 13,5 0, 21,1±1,00 354,2±25, Контрольная 8,7±0,52 248,0±29, 8,7 0,35 7,00 0, (ларинготрахеит+Н2О) 0,20* Опытная 1 24,0±1,03* 11,0±0,46* 340,6±18,5* 5, (ларинготрахеит+Арура-Тан №7) Опытная 2 5,6 ± 0,31* 21,3± 1,84* 12,8± 1,25* 321,0 ± 24,7* (ларинготрахеит+Астрагал) Опытная 3 (ларинготрахеит+ 4,8 ± 0,37* 20,8± 2,14* 11,5± 1,47* 362,2 ± 35,8* настойка Женьшеня с астрагалом) Опытная 4 (ларинготрахеит+ 5,08±0,41* 16,4±1,47* 10,2±1,24 275,4±23,7* алантон) Как следует из данных, приведенных в таблице 32, аппликация инфек ционного агента на слизистую ротовой полости животных сопровождается индукцией процессов свободнорадикального окисления и снижением мощ ности системы антиоксидантной защиты организма. Установлено, что курсо вое введение всех испытуемых фитосредств оказывало выраженное антиок сидантное действие, о чем свидетельствует достоверное снижение концен трации малонового диальдегида в крови животных опытных групп на 7 сутки исследования. Так, на фоне введения «Арура-Тан №7», «Астрагала» и «Женьшеня с астрагалом» отмечалось достоверное снижение концентрации этого метаболита. При этом, курсовое введение «Арура-Тан №7» на фоне воспалительного процесса в дыхательных путях оказывает выраженное анти оксидантное действие, о чем свидетельствует уменьшение концентрации продуктов пероксидации липидов (МДА) на 40 % по сравнению с данными крыс контрольной группы. Также отмечается повышение активности фер ментов антиоксидантной защиты СОД и каталазы соответственно в 2 и 1, раза по сравнению с аналогичными показателями у животных контрольной группы. Как видно из вышеуказанной таблицы эти показатели практически достигали уровня физиологической нормы. Аналогичная тенденция отмечена и в отношении восстановленного глутатиона: его концентрация также повы силась до значений у интактных животных. Полученные результаты сопоста вимы с таковыми у препарата сравнения – алантона, а по ряду показателей превосходят его.

ГЛАВА 5. ФАРМАКОТЕРАПЕВТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ РАСТИТЕЛЬНЫХ АДАПТОГЕННЫХ СРЕДСТВ В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ ВНЕБОЛЬНИЧНЫМИ ПНЕВМОНИЯМИ 5.1. Закономерности изменений клинической картины, иммунного, пе рекисного статуса и жирнокислотного состава липидов сыворотки крови у больных внебольничной пневмонией при базисной терапии 5.1.1. Динамика клинической картины при лечении внебольничной пневмонии базисной терапией Исследование клинической картины больных ВП показало, что жалобы пациентов, а также клинические проявления заболевания в обследованной группе были типичными для данного заболевания. Основными проявлениями являлись: астенический синдром, синдром интоксикации, фебрильная лихо радка, кашель с мокротой, болевой синдром (торакалгия) при кашле и глубо ком дыхании, одышка.

При поступлении в стационар жалобы на мышечную слабость, кашель с отделением мокроты, боль в грудной клетке на стороне поражения отмеча лись у 81 % пациентов, фебрильная лихорадка - у 88 % больных. У 41% па циентов наблюдалась одышка при минимальной физической нагрузке ( приседаний). При этой же физической нагрузке у большинства пациентов отмечались повышение частоты сердечных сокращений на 12±3 уд/мин. Ар териальная гипотензия наблюдалось у 53 % пациентов.

При физикальном обследовании наиболее часто отмечалось притупле ние перкуторного звука (66%), ослабленное или жесткое бронхиальное дыха ние (83%), усиление бронхофонии и голосового дрожания (соответственно 49% и 37%), фокус звонких мелкопузырчатых хрипов (37%) и инспираторная крепитация (20%). При рентгенологических исследованиях органов грудной клетки пневмоническая инфильтрация наиболее часто была выявлена в пра вом легком – 63% случая, с локализацией в нижних долях обеих легких – 49% случаев. У 73% больных отмечалось сегментарное поражение легких, при этом в 1, 2, 3-х сегментах соответственно в 2,5, 30 и 41% случаев. В пе риферической крови отмечался лейкоцитоз - 48 % ( 14,9*109 г/л), увеличе ние количества палочкоядерных нейтрофилов - 21% (10-20 %), повышение СОЭ 20 – 100%. При микробиологическом исследовании мокроты бактери альный возбудитель (в монокультуре и ассоциации штаммов) выявлен у больных (54%), из них основным возбудителем ВП заболевших военнослу жащих является S. pneumoniae, обнаруженный у 98 пациентов (49%). Второе место по частоте выделения возбудителя занимают представители грамотри цательной микрофлоры – H. Influenzae – 8,5% (17 чел.) и М. pneumonia – 6,0% (12 чел.). В 65% случаев выделенный возбудитель приходится на моно культуру. На ассоциацию выделенных штаммов микроорганизмов приходит ся – 19% (38) больных, из них в составе ассоциации, чаще всего выделялись микроорганизмы родов: Streptococcus, Staphylococcus, Mycoplasma, грибы рода Candida и др. В 15% случаев у исследуемой группы больных ВП какой либо возбудитель диагностировать не удалось. При анализе чувствительно сти микрофлоры к антимикробным препаратам (АМП) выявлен одинаково низкий уровень антибиотикорезистентности штаммов пневмококка к ингиби торзащищённым аминопенициллинам (амоксиклав) и фторхинолонам III по коления (левофлоксацин) – 94%, что согласуется с литературными данными (Чучалин А.Г. 2010;

Grudinina S.V. et al., 2005).

Стандарт клинико-инструментального обследования пациентов с ВП предусматривает подробное изучение показателей легочной вентиляции. В наших наблюдениях у пациентов всех групп динамически определялась функция внешнего дыхания (петля поток-объем) с использованием спиро графа «СПИРОСКОП». Нарушения бронхиальной проводимости при выпол нении имели место у 85,5 % больных;

при этом соответствующие инструмен тальным данным клинические проявления отмечались у 74,3 % пациентов.

Одним из ведущих механизмов нарушения дыхания при ВП является дина мический коллапс малых бронхов на выдохе, следствием чего является ги перинфляция легких (ГЛ). В наших наблюдениях отмечены объективные признаки повышения воздухозаполненности легких: показатель ООЛ превы сил референтный уровень на 14,9 % (р0,05), изменения такого рода зареги стрированы у 85,1 % пациентов.

Физикальные данные у большинства больных 1-группы представляли собой притупление и укорочение перкуторного звука, усиление голосового дрожания, крепитацию, мелкопузырчатые хрипы, шум трения плевры.

Результаты динамического наблюдения клинической картины у боль ных ВП представлены в таблице 37. Как следует из данных, представленных в указанной таблице, в 1-ой группе пациентов, получавших только базисную фармакотерапию, к 10-м суткам аускультативно выслушивалось ослабленное или жесткое бронхиальное дыхание у 17 пациентов;

29 человек предъявляли жалобы на сохраняющиеся колющие боли в грудной клетке при кашле и глу боком дыхании;

озноб и кашель сохранялись соответственно у 12 и 34-х па циентов от общего числа больных в группе. К 15-м суткам наблюдения у большинства пациентов этой группы отмечалась положительная динамика, хотя наличие жесткого, ослабленного дыхания в легких регистрировали у пациентов, а кашель сохранялся у 24 больных.

Состояние функции внешнего дыхания в первой группе изменялось незначительно, к 10 суткам наблюдения отмечалось снижение жизненной емкости легких (ЖЕЛ) и максимальной вентиляции легких (МВЛ), сохранялись признаки повышения воздухозаполненности легких: показатели ООЛ и МОД (минутный объем дыхания) оставались выше, чем у лиц контрольной группы (табл. 5.1.1.1).

Таблица 5.1.1.1 - Состояние функции внешнего дыхания в первой группе в динамике в сравнении с контрольными данными Группы наблюдения Показатель Контроль Группа 1 (БТ) n= 35 n= До лечения 10 сутки 15 сутки ЖЕЛ ( %) 105,3±2,1 79,7±2,43* 89,1±2,45* 89,3±2,43* ООЛ ( %) 110±3,12 141,1±1,62* 126±3,53* 127±2,43* МВЛ ( %) 98,2±5,51 68,3±4,64* 83,1±3,38* 82,1±3,31*/** МОД 8,8±1,17 13,1±1,82* 9,2±1,33* 9,1±1, (л/мин) * Различие с группой контроля статистически значимо (р 0,05).

** Различие между сутками статистически значимо (р 0,05).

По данным рентгенологического исследования у всех больных при по ступлении было выявлено усиление легочного рисунка;

очагово-сливная инфильтрация легочной ткани - у 192 больных, расширение корней легких на стороне поражения у 169, воспалительная реакция плевры - у 186 пациентов.

У больных 1-й группы на 10-е сутки наблюдения изменения в легких рентге нологически были незначительными, зоны инфильтрации уменьшались в среднем в 1,5 раза по сравнению с показателями до лечения.

Данная рентгенологическая картина сохранялась у большинства паци ентов 1- группы и на 15 сутки наблюдения (табл. 5.1.1.1).

Клинический пример. Больной М. (19 лет), военнослужащий по призы ву, поступил в пульмонологическое отделение 321 ОВКГ. При поступлении предъявлял жалобы на кашель с гнойной мокротой, повышение температуры тела до 38,20 С, сопровождающееся ознобом, боль в левой половине грудной клетки при кашле и глубоком дыхании, потливость, общую слабость. Из анамнеза выяснено, что пациент заболел остро 2 дня назад, отмечает факт переохлаждения. Первоначально возник насморк и кашель со скудной слизи стой мокротой, боли в горле, чему военнослужащий внимания не придавал.

Со второго дня болезни началась лихорадка до 380, в дальнейшем появился озноб и боль в грудной клетке, изменился характер мокроты.

Таблица 5.1.1.2 - Динамика клинических симптомов у больных внебольнич ной пневмонией 1-й группы при проведении базисной терапии (абс/ %) Пребывание в стацио- До лечения 10 сутки 15 сутки наре сутки/ симптом Группа 1 (БТ) (n= 50) (n= 50) (n= 50) Ослабленное или жест- 48/89 17/34 16/ кое бронхиальное ды хание Колющие боли при 50/100 29/58 10/ кашле и глубоком ды хании Кашель с мокротой 49/98 34/68 27/ Озноб 46/92 12/24 4/ Слабость, потливость 49/86 15/30 13/ Рентгенологическая характеристика пневмоний Инфильтрация легочной 50/100 26/52 22/ ткани Усиление легочного ри- 48/96 31/62 24/ сунка Расширение корней 45/90 35/70 28/ легких Побочные реакции Тошнота - 2/4 Диарея - 3/6 Аллергия - 2/4 С жалобами обратился в медицинский пункт части, откуда после мед осмотра был направлен на стационарное лечение госпиталь. При поступле нии кожные покровы бледные, температура тела – 38,30, частота дыхатель ных движений (ЧДД)=19-21 в минуту, SpO2=94-95 %;

тоны сердца ясные, ритмичные, частота сердечных сокращений (ЧСС) = 112 в минуту;

артери альное давление (АД)= 125 и 75 мм. рт. ст. Аускультативно в легких опреде лялось жесткое дыхание, звучные мелкопузырчатые хрипы ниже угла лопат ки слева. В общем анализе крови выявлен лейкоцитоз до 16,0х109/л, 6 % па лочкоядерных нейтрофилов, ускорение СОЭ до 45 мм/час. Проведена ком пьютерная томография органов грудной клетки, выявлена инфильтрация нижней доли левого легкого. Выставлен диагноз: Внебольничная нижнедо левая пневмония слева, нетяжелого течения, DHо. При определении уровня селена в крови у пациента был выявлен легкий селенодефицит – 88 мкг/л, в связи, с чем селеносодержащие препараты пациенту не были назначены (группа № 1). Получал базисную антибактериальной терапию (амоксиклав 0,625 мг 3 раза в сутки перорально), бронхо- и муколитики через небулайзер.

Спустя 5 суток у пациента отмечена незначительная положительная динами ка состояния: уменьшилась лихорадка до 37-37,50 С и общая слабость. В кон трольной рентгенограмме ОГК отмечалось уменьшение объема инфильтра ции. Разрешение инфильтрации легочной ткани рентгенологически было подтверждено на 20-й день госпитализации. Пациент выписан на 21-е сутки для завершения медицинской реабилитации в медицинском пункте части.

Таким образом, при внебольничной пневмонии нетяжёлого течения, по общепринятым маркёрам, довольно часто выявляются нарушения кардиоге модинамики и бессимптомные нарушения фильтрационной способности по чек, длительное время сохраняются клинические и рентгенологические при знаки пневмонии. Традиционная базисная терапия данной категории боль ных оказывается не всегда эффективной, что диктует необходимость приме нения дополнительных методов фармакокоррекции.

5.1.2. Динамика показателей системы «ПОЛ-антиоксиданты» и жирно кислотного состава липидов сыворотки крови при базисной терапии Исследования, проведенные до начала лечения показали, что у всех па циентов с ВП содержание всех продуктов липопероксидации было выше, чем в контрольной группе, отмечалось снижение содержания общих липидов (табл. 5.1.2.40). Так, количество ДК составило 154,0 % (р0.001) от нормы;

уровень КД и СТ превышал контроль на 61,4 % (р0.001);

коэффициент Е232/220 составил 110,6 % (р=0.024) от нормальных величин, а Е278/220 - 116,2 % (р=0.011). Повышенным было не только содержание начальных, но и про межуточных продуктов ПОЛ: значения ТБК-активных веществ в сыворотки крови превышали норму на 60,6 % (р0.001). Полученные нами данные со гласуются с литературными (Антонюк М.В, 2006;

Вахитов Х.М., 2006;

Га зифуллова Ю.В., 2006) и еще раз подтверждают важную роль процессов пе рекисного окисления липидов в патогенезе внебольничной пневмонии.



Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 7 |
 





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.