авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:     | 1 |   ...   | 6 | 7 || 9 | 10 |   ...   | 13 |

«ORGANIC TRACE ANALYSIS Klaus Beyermann Institute of Inorganic and Analytical Chemistry Mainz University Translated from the German: Organische Spurenanalyse Published by ...»

-- [ Страница 8 ] --

677. Everaerts F. M., Verheggen T. P. E. M., Mikkers F. E. P., J. Chromatog., 169, 21 (1979).

678. Bocek P., Demi M., Janak I., Laborpraxis, May 1979, 18.

679. Robinson D. V., Rimpler M., J. Clin. Chem. Clin. Biochem., 16, 1 (1978).

680. Mikkers F. E., Verheggen T. P. E. M., Everaerts F. M., Hulsman I., Meijers C, J. Chromatog., 182, Biomed. Appl., 8, 496 (1980).

681. Ho Y., Toyoda M., Suzuki H., Iwaida M., J. Assoc. Off. Anal. Chem., 63, 1219 (1980).

682. Rubach K., Offizorz P., Breyer C, Z. Lebensm. Unters. Forsch., 172, (1981).

683. Kenndler E., Kaniansky D., J. Chromatog., 209, 306 (1981).

684. Revercomb H. E., Mason E. A., Anal. Chem., 47, 970 (1975).

685. Karasek F. W., Res. Develop., 21, 34 (1970).

686. Karasek F. W., Kim H., Rokushika S., Anal. Chem., 50, 2013 (1978).

687. Preston J. M., Karasek F. W., Kim S. H., Anal. Chem., 49, 1746 (1977).

688. Той J. C, Boggs G. U., Anal. Chem., 48, 1351 (1976).

689. Can T. W., J. Chromatog. Sci., 15, 85 (1977).

690. Cohen M. J., Karasek F. W., J. Chromatog. Sci., 8, 330 (1970).

691. Can W. Т., in Trace Organic Analysis, pp. 697—703. NBS, Washington (1979).

692. Pierce A. E., Silylation of Organic Compounds, Pierce Co., Rockford, 111.

(1968).

693. Lawrence I. F., Frei R. №., Chemical Derivatization in Liquid Chromato graphy, Elsevier, Amsterdam (1976).

694. Blau K-, King G., Handbook of Derivatives for Chromatography, Heyden, London (1977).

695. Knapp D. R., Handbook of Analytical Derivatization Reactions, Wiley, New York (1979).

696. Drozd J., Chemical Derivatization in Gas Chromatography, Elsevier, Amster dam (1981).

697. Frei R. W., Lawrence J. F. (eds.), Chemical Derivatization in Analytical Chemistry, Plenum Press, New York (1981).

698. Frei R. W., Santi W., Z. Anal. Chem., 277, 303 (1975).

699. Jupille Т., J. Chromatog. Sci., 17, 160 (1979).

700. Frei R, W., J. Chromatog., 165, 75 (1979).

701. Frei R. W., Michel L., Santi W., J. Chromatog., 126, 665 (1976).

702. Frei R. W., Michel L, Santi W., J. Chromatog., 142, 261 (1977).

17— 258 5. Методы разделения и концентрирования 703. Deelder R. S, Кг oil M. G. F., Веегеп А. I В., van den Berg 1. h, M, J. Chromatog., 149, 669 (1978).

704. Kissinger P. Т., Anal. Chem., 49, 447A (1977).

705. Krause R. Т., J. Chromatog., 185, 615 (1979).

706. Skeggs L. F., Am. J. Clin. Pathol, 28, 311 (1957).

707. Udenfriend S., Stein S., Bohlen S., Dairman P., Leimgruber W., Weigele M., Science, 178, 871 (1972).

708. Roth M., Anal. Chem., 43, 880 (1971).

709. Deelder R. S., Kroll M. G. F., van den Berg J. H. M., J. Chromatog., 307 (.1976).

710. Schlabach T. D., Chang S. H., Goodring K. M., Regnier F. E., J. Chromatog., 134,91 (1977).

711. Jonker K. M., Poppe H., Huber J. F. K., Chromatographia, 11, 123 (1978).

712. Fret R. W., Scholten A. H. M. Т., J. Chromatog. Sci., 17, 152 (1979).

713. Sasaki K, Takeda M., Uchiyama M., J. Assoc. Off. Anal. Chem., 59, 1118 (1976).

714. Chen С. Т., Samejima K., Tamura Z, Chem. Pharm. Bull., 24, 97 (1976).

715. Dodson W.., Tyrala E. E., Hillman R. E., Clin. Chem., 23, 944 (1977).

716. Mathew J., Elzerman A. W., Anal. Lett, 14, 1361 (1981).

717. Tsuchiya H., Hayashi Т., Naruse H., Takagi N.. J. Chromatog., 234, (1982).

718. Gaynor J. D., MacTavish D., J. Agr. Food. Chem., 29, 626 (1981).

719. Gloor R., Leidner H., Chromatographia, 9, 618 (1976).

720. Hoshika Y., Takata Y., Bunseki Kagaku, 25, 529 (1976).

721. Klockow D., Bayer W., Faigle W., Z. Anal. Chem., 292, 385 (1978).

722. Chauhan M. S., Dakshinamurti K., J. Chromatog., 237, 159 (1982).

723. Agenian H., Chau A. S. Y., Analyst, 101, 732 (1976).

724. Dunges W., Meyer A., Muller K. E., Pietschmann R., Plachetta C, Sehr R-., Tuss H., Z. Anal. Chem., 288, 361 (1977).

725. Dunges W., Chromatographia, 9, 624 (1976).

726. Williams D. Т., Benoit F., Muzika K., O'Grady R., J. Chromatog., 136, (1977).

727. Pigulla I., Roder E., Z. Anal. Chem., 293, 404 (1978).

728. Roder E., Pigulla I., Troschutz J., Z. Anal. Chem., 288, 56 (1977).

729. Stan H. J., Hohls F. W., Z. Lebensm. Untersuch. Forsch., 166, 287 (1978.

730. Davis B. A., J. Chromatog., 151, 252 (1978).

731. Selby D. W., Munden R. P., Proc. Anal. Div. Chem. Soc, 14, 296 (1977).

732. Pribyl J., Herzel F., Z. Anal. Chem., 286, 95 (1977).

733. Lawrence J. F., Renault C, Frei R. W., J. Chromatog., 121, 343 (1976).

734. Johnson E., Abu-Shumays A., Abbott S. R., J. Chromatog., 134, 107 (1977.

735. Selim S., J. Chromatog, 136, 271 (1977).

736. Hesse G., Forberg W., Fricke H., Bradler G., Pharmazie, 32, 472 (1977).

737. Daughton C. G., Crosby D. G., Garnas R. L, Hsieh D. P. H., J. Agr. Food Chem., 24, 236 (1976).

738. Van Auken O. №., Hulse M., Durocher C. L, J. Assoc. Off. Anal. Chem., 6ty 1087 (1977).

739. Van Auken O. W., Hulse M., J. Assoc. Off. Anal. Chem, 60, 1081 (1977).

740. Nony C. R., Bowman M. C, Holder C. L, Young J. F., J. Pharm. Sci, 65y 1810 (1976).

741. Vermeulen N. P. E., de Roode D., Breimer D. D., Pharm. Weekbl, 112, (1977).

742. Vermeulen N. P. E., de Roode D., Breimer J. D., J. Chromatog, 137, (1977).

743. Braun W. H., J. Chromatog., 150, 212 (1978).

744. Van Peteghem C. H., Heyndrickx A. M., J. Agr. Food Chem, 24, (1976).

745. Ferretti A., Flanagan V. P., Anal. Lett, 11, 195 (1978).

5. Методы разделения и концентрирования 746. Chauhan M. S., Dakshinamurti К., J. Chromatog., 227, Biomed. Appl., 16, 323 (1982).

747. Goya S., Takadate A., Fujino H., Yakugaku Zasshi, 102, 63 (1982).

748. Чмиль В. Д., Клисенко М. А. Ж. аналит. химии, 32, 592 (1977).

749. Vessman /., Stromberg S., Anal. Chem., 49, 369 (1977).

750. Nakamura H., J. Chromatog., 131, 215 (1977).

751. Imai K... Tsukamoto M., Tamura Z., J. Chromatog., 137, 357 (1977).

752. Burkinshaw P. M., Morgan E. D., Poole С F., J. Chromatog., 132, (1977).

753. Poole С F., Sye W. F., Singhawangcha S., Hsu F., Zlatkis A., Arfwidson A., Vessman J., 3. Chromatog., 199, 123 (1980).

754. Kawabata Т., Ohshima H., Ishibashi Т., Matsui M., Kitsuwa Т., J. Chroma tog., 140, 47 (1977).

755 O'Neill P. J., Rahman R. G., 3. Pharm. Sci., 66, 893 (1977).

756. Matsubayashi K-, Hakusui H., Sano M., J. Chromatog., 143, 571 (1977).

757. Nicolau G., Lear G., Kaul В., Davidow В., Clin. Chem., 23, 1640 (1977).

758. Bailey E., Fenoughty M., Richardson P. L., 3. Chromatog., 131, 347 (1977), 759. Chapman R. A., Robinson J. R., J. Chromatog., 140, 209 (1977).

760. Lin E. Т., Brater D. C, Benet L. Z., J. Chromatog., 140, 275 (1977).

761. Petersen B. A., Vouros P., Anal. Chem., 49, 1304 (1977).

762. Feher Т., Bodrogi L., Feher K. G., Poteczin E., Chromatographia, 10, (1977).

763. Lawrence J. F., Ryan I. J., J. Chromatog., 130, 97 (1977).

764. Siezen R. J., Mague R. H., J. Chromatog., 130, 151 (1977).

765. Petersen B. A., Hanson R. N.. Giese R. W., Karger B. L., J. Chromatog., 126,503 (1976).

766. Lawrence J. F., 3. Chromatog., 123, 287 (1976).

767. Dziedzic S. W., Gitlow S. E., Krohn D. L., J. Pharm. Sci., 65, 1262 (1976).

768. Sieck F. F., Johnson W. S., Cockerill A. F., Mallen D. N. B, Osborne D. /., Barton S. J., J. Agr. Food Chem., 24, 617 (1976).

769. Laitem L., Gaspar P., J. Chromatog., 140, 266 (1977).

770. Lawrence I. F., 3. Assoc. Off. Anal. Chem., 59, 1061 (1976).

771. Sen N. P., Miles W. F., Seaman S., Lawrence J. F., J. Chromatog., 128, 169 (1976).

772. Young H., Anal. Biochem., 79, 226 (1977).

773. Sango C, Zimerson E., 3. Liq. Chromatog., 3, 971 (1980).

774. Wintersteiger R., Gamse G., Pacha W., Z. Anal. Chem., 312, 455 (1982).

775. Dadisch G. L., Wolschann P., Z. Anal. Chem., 292, 219 (1978).

776. Hopen T. J., Briner R. C, Sadler H. G., Smith R. L., 3. Forensic Sci., 21, 842 (1976).

777. Becker R., Arzneimittelforsch., 27, 102 (1977).

778. Klimisch H. I., Ambrosius D., 3. Chromatog., 121, 93 (1976).

779. Wolfram I. H., Feinberg J. I., Doerr R. C, Fiddler W., 3. Chromafog., 132, 37 (1977).

780. Nachtmann F., Spitzy H., Frei R. W., Anal. Chem., 48, 1576 (1976).

781. Nachtmann F., Spitzy H., Frei R. W., 3. Chromatog., 122, 293 (1976).

782. Clark С R., Teague J. D., Wells M. M., Ellis J. H, Anal. Chem., 49, (1977).

783. Nachtmann F., Budna K. W., J. Chromatog., 136, 279 (1977).

784. Froehlich P. M., Cunningham T. D., Anal. Chim. Acta, 97, 357 (1978).

785. Staruszkiewicz W. F., Waldron E. M., Bond J. F., 3. Assoc. Off. Anal.

Chem., 60, 1125 (1977).

786. Hoshika Y., Anal. Chem., 49, 541 (1977).

787. Neelakantan L., Kostenbauder H. В., 3. Pharm. Sci., 65, 740 (1976).

788. Nose N.. Kobayashi S., Tanaka A., Hirose A., Watanabe A., J. Chromatog., 125, 439 (1976).

789. Onley J. H., 3. Assoc. Off. Anal. Chem., 60, 679 (1977).

17* 260 5. Методы разделения и концентрирования 790. Agemian H., Chau A. S. У., J. Assoc. Off. Anal. Chem., 60, 1070 (1977).

791. Davis В., Anal. Chem., 49, 832 (1977).

792. Kogan M. J., Verebey K. G., DePace A. C, Resnick R. В., Mule S. J., Anal.

Chem., 49, 1965 (1977).

793. Koshy К. Т., Kaiser D. G., VanDerSlik A. L, J. Chromatog. Sci., 13, (1975).

794. Fitzpatrick F. A., Wynalda M. A., Kaiser D. G., Anal. Chem., 49, (1977).

795. Doms E. K., J. Chromatog., 140, 29 (1977).

796. Noggle F. Т., J. Assoc. Off. Anal. Chem., 63, 702 (1980).

797. King J. R., Nony С R., Bowman M. C, J. Chromatog. Sci., 15, 14 (1977).

798. Godse D. D., Warsh J. J., Stancer H. C, Anal. Chem., 49, 915 (1977) 799. Wilkinson D. R., Pavlokowski F., Jenson P., J. Forensic Sci., 21, (1976).

800. Caccia S., Jori A., J. Chromatog., 144, 127 (1977).

801. Davis B. A., Durden D. A., Pun-Li P., Boulton A. A., J. Chromatog., 142, 517 (1977).

802. Halaris A. E., Demet E. M., Halari M. E., Clin. Chim. Acta, 78, (1977).

803. Slemrova J., Nitsche I., J. Chromatog., 135, 401 (1977).

804. West S. D., Day E. W., J. Assoc. Off. Anal. Chem., 60, 904 (1977).

805. West S. D., Burger R. O., J. Assoc. Off. Anal. Chem., 63, 1304 (1980).

806. Phillipou G., Bigham D. A., Seamark R. F., Lipids, 10, 714 (1975).

807. Francis R. J., East P. В., McLaren S. J., Laman J., Biomed. Mass Spectrom., 3,281 (1976).

80S. Horrocks R. H., Hindle E. J., Lawson P. A., Orrell D. H., Poole A. J., Clin.

Chim. Acta, 69, 93 (1976).

809. Goodman S. I., Helland P., Stokke 0., Flatmark A., Jellum E., J. Chroma tog., 142,497 (1977).

810. Donike M., Gola R., Jaenicke L., J. Chromatog., 134, 385 (1977).

811. Gunther H. O., Z. Anal. Chem., 290, 389 (1978).

812. Kieninger H., Boeck D., Brauwiss., 30, 357 (1977).

813. Drawert F., Lessing V., Leupold G., Chem. Mikrobiol. Technol. Lebensm., 5, 65 (1977).

814. Mahy N., Gelpi E., J. Chromatog., 130, 237 (1977).

815. Wilson B. R., Snedden W., Siltnan R. E., Smith I., Mullen P., Anal. Biochem., 81,283 (1977).

816. Ivey M. C, Oehler D. D., J. Agr. Food. Chem., 24, 1049 (1976).

817. Lauwereys M., Vercruysse A., Chrornatographia, 9, 520 (1976).

818. Leimer K. R., Rice R. H., Gehrke С W., J. Chromatog., 141, 355 (1977).

819. Arjmand M., Mumma R. O., J. Agr. Food Chem., 24, 574 (1976).

820. Tatsukawa R., Itoh J., Wakimoto Т., J. Agr. Chem. Soc. Japan, 51, (1977).

821. Rosenfeld J., Anal. Lett., 10, 917 (1977).

822. Miyazaki H., Ishibashi M., Itoh M., Yamashita K., Nambara Т., J. Chroma tog., 133,311 (1977).

823. Sanghvi A., Galli-Kienle M., Galli G., Anal. Biochem., 85, 430 (1978).

824. Olek К., Wardenbach P., J. Clin. Chem. Clin. Biochem., 15, 657 (1977).

825. Singer G. M., Lijinsky W., J. Agr. Food Chem., 24, 550 (1976).

826. Ahnfelt N. O., Hartvig P., Acta Pharm. Suec, 17, 307 (1980).

827. Takeshita R., Takabatake E., Minagawe K., Takizawa Y., J. Chromatog., 133, 303 (1977).

828. Jungcalus G., J. Chromatog., 139, 174 (1977).

829. Sanchez M. C, Colome K., Gelpi E., J. Chromatog., 126, 601 (1976).

830. Herrmann V., Jilttner F., Anal. Biochem., 78, 365 (1977).

831. Eklund G., Josefson В., Roos C, J. Chromatog., 142, 575 (1977).

832. Mierzwa S., Wotek S., J. Chromatog., 136, 105 (1977).

5. Методы разделения и концентрирования 833. Schmidt R., Karobath M., J. Chromatog., 139, 101 (1977).

834. Razzouk С, Lhoest G., Roberfroid M., Mercier M., Anal. Biochem., 83, (1977).

835. Stantscheff P., Z. Anal. Chem., 292, 39 (1978).

836. Fittkau S., Pharmazie, 35, 646 (1980).

837. Trotter W. J., J. Assoc. Off. Anal. Chem., 58, 461 (1975).

838. Mansour M., Parlar H., J. Agr. Food Chem., 26, 483 (1978).

839. Friedman D., Lombardo P., J. Assoc. Off. Anal. Chem., 58, 703 (1975).

840. Dennis W. H., Cooper W. J., Bull. Environ. Contam. Toxicol., 16, (1976).

841. Carey J. H., Lawrence J., Tosine H. M., Bull. Environ. Contam. Toxicol., 16,697 (1976).

842. Lewis R. G., Hanish R. G., Macleod K. E., Sovocool G. W., J. Agr. Food Chem., 24, 1030 (1976).

843. Mes J., Davies D. J., Miles W., Bull. Environ. Contam. Toxicol., 19, (1978).

844. Lane R. H., Grodner R. M., Graves J. L., J. Agr. Food Chem., 24, (1976).

845. Erney D. R., J. Assoc. Off. Anal. Chem., 58, 1202 (1975).

846. Trotter W, J., Bull. Environ. Contam. Toxicol., 18, 726 (1977).

847. Putnam Т. В., Bills D. D., Libbey L. M., Bull. Environ. Contam. Toxicol., 13,662 (1975).

848. Ward P. M., J. Assoc. Off. Anal. Chem., 60, 673 (1977).

849. Ruzo L. O., Bunce N. J., Safe S., Hutzinger O., Bull. Environ. Contam.

Toxicol., 14, 341 (1975).

850. Plimmer J. R., Bull. Environ. Contam. Toxicol., 20, 87 (1978).

851. Kralovsky J., Matousek P., J. Chromatog., 147, 404 (1978).

852. Mraz M., Sedivec V., Collection Czech. Chem. Commun., 42, 1347 (1977).

853. Bromilow R. H., Lord K. A., J. Chromatog., 125, 495 (1976).

854. Abraham С V., Microchem. J., 21, 272 (1976).

855. Beyer W., Truppe W., Mlekusch W., Z. Med. Labortechnik, 17, 267 (1976).

856. Sengupta A., Peat M. A., J. Chromatog., 137, 206 (1977).

857. Wien R. G., Tanaka F. S., J. Chromatog., 130, 55 (1977).

858. Midha К. К-, McGilveray I. J., Wilson D. L., J. Pharm. Sci., 65, (1976).

859. De Graeve J., Vanroy J., J. Chromatog., 129, 171 (1976).

860. Kumps A., Mardens Y., Clin. Chim. Acta, 62, 371 (1975).

861. Kossa W. C, MacGee J., Ramachandran S., Webber A. J., J. Chromatog.

Sci., 17, 177 (1979).

862. Hammer R. H., Templeton J. L., Panzik H. L., J. Pharm. Sci., 63, (1974).

863. De Kok A., Geerdink R. В., Frei R. W., Brinkman U. А. Т., Intern. J. Envi ron. Anal. Chem., 9, 301 (1981).

864. Kerkhoff M. A., De Vries A., Wegman R. С. С, Hofstee A. W. M., Chemo sphere, 11, 165 (1982).

865. Wegman R. С. С, de Korte G. A. L., Intern. J. Environ. Anal. Chem., 9, 1 (1981).

866. Davis B. A., J. Chromatog., 151, 252 (1978).

867. Terwij-Groen С P., Kraak J. C, J. Chromatog., 138, 245 (1977).

868. Mellstrom В., Tybring G., J. Chromatog., 143, 597 (1977).

869. Fouda H. G., J. Chromatog. Sci., 15, 537 (1977).

870. Soczewinski E., Ratajewicz D., Rojowska M., Acta Polonia Pharm., 34, 181 (1977).

871. Horvath C, Melander W., Molnar I., Molnar P., Anal. Chem., 49, (1977).

872. Casy A. F., Proc. Ana-1. Div. Chem. Soc, 14, 292 (1977).

262 5. Методы разделения и концентрирования 873. Toei К., Miyata Н., Motomizu S., Tetsumoto J., Bunseki Kagaku, 27, (1978).

874. Oba K., Miura K., Sekiguchi H., Yagi R., Mori A., Water Res., 10, (1976).

875. Favretto L., Stancher В., Tunis F., Analyst, 103, 995 (1978).

876. Karlberg В., Johansson P. A., Thelander S., Anal. Chim. Acta, 104, (1979).

877. Kuczynski J., Soczewinski E., Chem. Anal. (Warsaw), 23, 421 (1978).

878. Eksborg S., Persson B. A., Allgen L. G., Bergstrom J., Zimmermann L., Furst P., Clin. Chem. Acta, 82, 141 (1978).

879. Persson B. A., Lagerstrom P. 0., J. Chromatog., 122, 305 (1976).

880. Moyer T. P., Jiang N. S., J. Chromatog., 153, 365 (1978), 881. Huen J. M., Frei R. W., Santi W., Thevenin J. P., J. Chromatog., 149, (1978).' 882. Terweij-Groen C. P., Kraak J. C, N lessen W. M. A., Lawrence J. F., Wer khoven-Goewie С E., Brinktnan U. А. Т., Frei R. W., Intern. J. Environ.

Anal. Chem., 9, 45 (1981).

883. Baker M. D., Mohammed H. Y., Veening H., Anal. Chem., 53, 1658 (1981).

884. Stevenson D., Reid E., Anal. Lett., 14, 741 (1981).

885. Warsh J. J., Chiu A., Godse D. D., i. Chromatog., 228, Biomed. Appl., 17, 131 (1982), 886. Kozma M., Pudleiner P., Vereczkey L., J. Chromatog., 241, 177 (1982).

887. Fritz D. W., Strahm R. D., J. High Resolut. Chromatog., Chromatog. Com mun., 4, 584 (1981).

888. Dent L. L, Stewart J. Т., Honigberg J. L., Anal. Lett., 14, 1031 (1981).

889. Roos B. E., Wickstrom G., Hartvig P., Nilsson J. L. G., Eur. J. Clin. Phar macol., 17,223 (1980).

890. Gyllenhaal O., Brotell H., Hartvig P., J. Chromatog., 129, 295 (1975).

891. Greving J. E., Jonkman J. H. G., Fiks F., de Zeeuw R., van Bork L. E., Orie N. G. M., J. Chromatog., 142, 611 (1977).

892. Arbin A., J. Chromatog., 144, 85 (1977).

893. Brotell H., Ersson H., Gyllenhaal O., J. Chromatog., 78, 293 (1973).

894. Hartvig P., Fagerlund C, J. Chromatog., 140, 170 (1977).

«95. Gyllenhaal O., Brotell H., Sandgren В., J. Chromatog., 122, 471 (1976).

896. Garle M., Petters I., J. Chromatog., 140, 165 (1977).

897. Gyllenhaal O., Tjarnlund U., Ehrsson H., Hartvig P., J. Chromatog., 156, 275 (1978).

898. Hartvig P., Gyllenhaal P., Hammarlund M., J. Chromatog., 151, 232 (1978).

899. Fagerlund C, Hartvig P., Lindstrom В., J. Chromatog., 168, 107 (1979).

900. Degen P. H., Schneider W., Vuillard P., Geiger U. P., Riess W., J. Chroma tog., 117,407 (1976).

901. Ervic M., Gustavii K-, Anal. Chem., 46, 39 (1974).

902. Lindstrom В., Molander M., J. Chromatog., 101, 219 (1974).

903. Lindstrom В., Molander M., J. Chromatog., 114, 459 (1975).

904. Hoffman D. J., J. Pharm. Sci., 69, 445 (1979).

905. Berg A., Lam J., J. Chromatog., 16, 157 (1964).

906. Gertz C, Z. Lebensm. Unters. Forsch., 173, 208 (1981).

907. Kolarovic L, Traitler H., J. Chromatog., 237, 263 (1982).

908. Morita K., Fukamachi K., Tokiwa H., Bunseki Kagaku, 31, 255 (1982).

909. Medvedev F. A., Melamed D. В., Kostyukovskii Y. L., Biomed. Mass Spect rom., 7, 354 (1980).

910. Kimoto W. I., Fidler W., J. Assoc. Off. Anal. Chem., 65, 1162 (1982).

911. De Kok A., Roorda J. M., Frei R. W., Brinkman U. А. Т., Chromatographia, 14, 579 (1981).

912. Scholten A. H. M. Т., De Vos B. J., Lawrence J. F., Brinktnan U. А. Т., Frei R. W., Anal. Lett., 13, 1235 (1980).

5. Методы разделения и концентрирования 913. Skarping G., Sango С, Smith В. Е. F., J. Chromatog., 208, 313 (1981).

914. Ting H. H., Quick M. P., J. Chromatog., 195, 441 (1980).

915. Nose N.. Hoshino Y., Kikuchi Y., Yamada F., Kawauchi S., Shokuhin Eisel gaku Zasshi, 22, 496 (1981).

916. Traore S., Aaron J. J., Talanta, 28, 765 (1981).

917. Nelson T. R., Gruenauer M. H., J. Chromatog., 212, 366 (1981).

918. Newsome W. H., J. Agr. Food Chem., 30, 778 (1982).

919. Gielsdorf W,, J. Clin. Chem. Clin. Biochem., 20, 65 (1982).

920. Makino K., Kashihira N.. Kirita K., Watanabe Y., Bunseki Kagaku, 31, 417 (1982).

921. McCrone W. C, Delly J. G., The Particle Atlas, 2nd Ed., 4 Vols., Ann Arbor (1973).

922. McCrone W. C, Z. Anal. Chem., 282, 275 (1976).

923. Hasenmaier D., Dissertation, Mainz (1980).

Методы определения и обнаружения следовых количеств органических веществ 6.1. Общие положения В аналитической химии органических веществ значащие ре зультаты почти всегда могут быть получены только с помощью молекулярно-специфических методов. В диапазоне следовых концентраций элементный анализ может служить в лучшем случае лишь довольно ненадежной основой для предположений о составе образца. По этой причине такой чрезвычайно эффек тивный метод определения следовых количеств неорганических веществ, как радиохимический активационный анализ, практи чески бесполезен в анализе следовых количеств органических соединений.

Анализ литературы показывает, что в методах определения наблюдается та же картина, что и в методах разделения: до статочно широко применяется крайне ограниченное число мето дов, несмотря на то что общее число предлагавшихся способов определения следовых количеств органических веществ доволь но велико (табл. 6.1).

В настоящее время наблюдается тенденция к более широко му применению радиоиммунохимических и флуориметрических (главным образом в сочетании с высокоэффективной жидкост ной хроматографией) методов, а также денситометрии в ком бинации с тонкослойной хроматографией.

Оценить преимущества и недостатки конкретного метода определения можно, руководствуясь следующими критериями:

1) способностью метода измерять молекулярные свойства опре деляемого соединения непосредственно и специфично;

2) степенью влияния со стороны других веществ и различных факторов;

3) чувствительностью, рабочим диапазоном концентраций, пре делом обнаружения;

4) разрушающим (например, пламенно-ионизационный детек тор) или неразрушающим (например, фотометрия) способом определения;

5) возможностью автоматизации метода.

6. Методы определения и обнаружения Таблица 6.1. Относительное количество опубликованных работ, в которых описано применение методов определения следовых количеств органических веществ (рассчитано по данным журнала Analytical Abstracts за 1978— 1979 гг.) Количество публи Метод каций, % Газо-жидкостная хроматография Масс-спектрометрия Ультрафиолетовая спектрофотометрия Тонкослойная денситометрия 1 univuwiujindji дсш-щимс1рпл Флуориметрия, измерение фосфоресценции Радиоиммунохимические и ферментативные методы Электрохимические методы Инфракрасная спектрометрия Ниже приведены примерные диапазоны рабочих концентраций для наиболее часто применяемых методов определения. Эту классификацию следует считать приближенной, поскольку пре дел определения ряда методов может быть существенно улуч шен. Приведенная схема показывает, что большинство методов может успешно применяться в диапазоне от 1 до 100 нг/мл, не достижимом еще 20 лет назад.

Шпг/мп • I нг/мл Юнг/мл 100нг/мл 1мкг/мл Масс-спектрометрия -УФ-спектроскопия, флуоримегприя -Детектор электронного захвата Термоионный Эетектор— -Пламенно ионизационный детектор Импульсная Зифференциальная полярография • Рабиоиммунохимический анализ 6.2. Общие замечания о спектроскопических методах Существуют два принципиально различных метода спектро-, скопии — адсорбционный и вторично-эмиссионный. Как в пер вом, так и во втором методе компоненты изучаемой пробы взаимодействуют с потоком первичной энергии 1\. Далее в ад сорбционной спектроскопии измеряется энергия / 2, не погло щенная образцом, а во вторично-эмиссионной спектроскопии определяется энергия L, выделяемая, в процессах флуоресцен-, 266 6. Методы определения и обнаружения ции или фосфоресценции. Для адсорбционных методов (при их применении в аналитической химии следовых количеств ве ществ) характерно относительно слабое взаимодействие пробы с потоком первичной энергии. В результате падающее на про бу и проходящее через нее излучение имеет приблизительно одинаковую энергию, и измерить небольшое (особенно в случае следовых количеств веществ) различие между ними можно лишь с помощью достаточно точной аппаратуры. Во вторично эмиссионных методах пробы с нулевым содержанием опреде ляемого соединения (в идеальном варианте) вообще не дают сигнала, но даже небольшие концентрации излучающего веще ства обусловливают появление измеримой вторичной эмиссии;

последнюю, очевидно, легче сравнить с нулевым эффектом, чем сигнал поглощения. По этой причине спектроскопические мето ды, основанные на принципе (вторичной эмиссии, обладают зна чительно более низким пределом определения, чем адсорб ционные.

и h Источник Детектор Проба энергии | ;

Источник Проба энергии Детектор Преимущества вторично-эмиссионных методов спектроско пии, однако, ограничиваются рядом практических и экспери ментальных факторов. Во-первых, не все молекулы способны давать вторичную эмиссию;

этот факт, с одной стороны, лими тирует область применения соответствующих методов, а с дру гой— способствует повышению их специфичности. Во-вторых, определение веществ этими методами часто затрудняет общее (рэлеевское) рассеяние излучения образцом.

6.3. Спектрометрия в ультрафиолетовой и видимой областях Спектрометрия в ультрафиолетовой и видимой областях базируется на измерении свойств не всей молекулы, а лишь ее части — хромофорной группировки. При этом химическая при рода последней определяет длину волны, при которой происхо 6. Методы определения и обнаружения 26?

дит максимальное поглощение. В процессе измерения опреде ляемое вещество не разрушается, и его можно параллельно определять иным методом (за исключением тех случаев, когда измеряет поглощение не самого определяемого соединения, а продукта его химического превращения). Для спектрофото метрии в ультрафиолетовой и видимой областях пригодны до вольно разбавленные растворы (~10~ 5 М) при условии пра вильного подбора растворителя. Определению не мешают лю бые вещества, не поглощающие в той же области длин волн, что и определяемое соединение;

в противном случае для по давления перекрывания спектров иногда применяют специаль ные приемы. Проточные кюветы позволяют проводить опреде ление в процессе хроматографического разделения.

«Измеряющий поглощение при 254 нм УФ-детектор наибо лее популярен из всех детекторов, использующихся в высоко эффективной жидкостной хроматографии. Он прост, дешев, дол говечен, надежен и чувствителен. Источником излучения в нем служит недорогая ртутная лампа низкого давления, большая часть излучения которой сосредоточена в узкой полосе спектра [1]. Для успешного применения этого детектора необходимы хромофорные группы с максимумом поглощения при (или око ло) 254 нм. Такие хромофоры легко могут быть введены в молекулы непоглощающих соединений. Для определения сле довых (порядка нанограммов) количеств веществ желатель но, чтобы определяемое соединение имело молярный коэффи циент экстинкции около 10. Чаще всего этой цели достигают путем превращения определяемого соединения в производное, содержащее замещенный (предпочтительно нитрогруппами) хромофор ароматического характера» [2]. Высокоспециализи рованные методики позволяют определять количества веществ порядка нескольких нанограммов и менее [3].

6.4. Инфракрасная спектрометрия 6.4.1. Общие положения В аналитической химии следовых количеств органических веществ по достигаемой молекулярной специфичности метод инфракрасной спектрометрии уступает только масс-спектромет рии. За исключением энантиомеров, нет двух различных хими ческих соединений, которые давали бы идентичные инфракрас ные спектры. Область «отпечатков пальцев» инфракрасных спектров позволяет надежно идентифицировать и определять органические соединения. К сожалению, предел обнаружения этого метода не очень низок. Даже количества порядка не скольких микрограммов можно определять только с помощью 268 6 Методы определения и обнаружения специальных методических приемов, а растворы изучаемых со единений должны быть довольно концентрированными. Напри мер, в микрокюветах объемом 1 мкл можно изучать 0,1%-ные растворы. Инфракрасная спектроскопия весьма чувствительна также к помехам со стороны других компонентов смеси, поэто му исследуемый следовый компонент должен находиться в до вольно чистом состоянии. Метод относится к числу неразру шающих, но выделение определяемого соединения после спект роскопии может быть затруднительным, поскольку очень часто его запрессовывают в таблетку КВг, выделить из которой сле довый компонент довольно трудно. Инфракрасные спектры мо гут быть получены в проточной ячейке в токе газа-носителя, если последний не поглощает в той же области, что и опреде ляемое соединение;

для этого необходимы специальные газовые ячейки или так называемые световоды.

Новый инструментальный подход, позволяющий существен но повысить отношение сигнала к шуму, основан на применении преобразования Фурье. В этом подходе один и тот же спектр сканируют многократно и полученные данные затем усредняют.

Это требует очень быстрого сканирования, для чего, в свою очередь, необходим очень эффективный сигнал детекторов и оптической системы. Сообщалось об определении нанограммо вых количеств веществ с помощью инфракрасной фурье-спект роскопии [4—6]. Имеется обзор, посвященный последним до стижениям в разработке инструментального оснащения ин фракрасной спектроскопии и его применению (библиография включает 621 наименование) [7].

6.4.2. Совершенствование конструкции инфракрасных спектрометров Компьютеризованный инфракрасный микроспектрофотометр типа Nanospec TM/20 IR (выпускаемый фирмой Nanometrics, Саннивейл, Калифорния, США) позволяет получать спектры образцов размером всего лишь 20 мкм. Чувствительность новых инфракрасных детекторов (на основе триглицинсульфата, тел лурида ртути-кадмия, антимонида индия) в сотни раз превы шает чувствительность обычных детекторов. Современные де текторы обладают очень хорошим временем отклика.

Другой интересный подход к расширению возможностей инфракрасной спектрометрии основан на применении в каче стве источников излучения лазеров с регулируемой длиной волны. Так, посредством изменения рабочей температуры лазе ра LS-3 (System of Spectra Physics, Бедфорд, США) от 15 до 100 К можно регулировать энергию его излучения в диапазоне 50—200 см" 1 со скоростью 4 см^/град. В принципе такая си 6. Методы определения и обнаружения «Or » 60 I400 20 00 Волновое число, ск 40 20 800 В00 1400 1200 1000 1200 волновое число, см-' Рис. 6.1. Пример вычитания двух инфракрасных спектров с помощью компью тера (с любезного разрешения фирмы Perkin-Elmer).

д _ стандартное смазочное масло (длина 1оптического пути 200 мкм);

В — об разец А, к которому добавлено 400 млн" трикрезилфосфата;

С — полученная с помощью компьютера разность спектров (В—А) после пересчета шкалы и цифрового сглаживания;

D — эталонный спектр трикрезилфосфата.

стема может функционировать даже без обычных призм или дифракционных решеток. Предлагалось использовать.приборы такого типа для определения следовых 1 концентраций газов, например SO2 в концентрации 170 млрд- (при длине оптиче ского пути 300 м).

270 6. Методы определения и обнаружения Сочетание инфракрасной спектроскопии с компьютеризован ными системами обработки данных позволяет складывать и вычитать спектры, создавать системы хранения и поиска спект ров, получать дифференциальные спектры, осуществлять авто матический коррекционный пересчет шкалы, а также усреднять и аккумулировать спектры и выполнять их цифровое сглажива ние. Пример такого типа операций приведен на рис. 6.1.

6.4.3. Подготовка проб Многообещающим новшеством в инфракрасной спектроско пии является использование микропроб с соответствующим уменьшением площади сечения луча [8]. Так, удовлетворитель ные спектры проб массой около 1 мкг могут быть получены в небольших (диаметром 1 мм) таблетках КВг.

Определенные трудности связаны с анализом водных раст воров методом инфракрасной спектроскопии. Поскольку КВг растворяется в воде, последнюю необходимо сначала упарить, но тогда возникает проблема переноса следовых количеств вы деленного соединения в порошок КВг. Для предотвращения чрезмерного рассеяния необходимо растереть исследуемое ве щество до достаточно мелкокристаллического состояния.

В спектроскопии пропускания для анализа водных растворов после их упаривания применяют и другие материалы, например сапфир [9] или алмаз [10]. В лаборатории автора для упари вания даже очень полярных растворителей и последующей ре гистрации спектров с большим успехом использовались носи тели в виде крошечных пластинок (диаметр 3 мм, толщина 1 мм), изготовленных из ZnSe или ТН—TIBr (KRS5).

Спектры водных растворов можно регистрировать методом простого или многократного нарушенного полного внутреннего отражения, но чувствительность метода не очень высока [11].

Предел обнаружения можно улучшить посредством электрон ного усреднения спектров.

Спектроскопию диффузного отражения можно использовать и в инфракрасной области благодаря применению накопителей спектров, основанных на использовании преобразования Фурье, что позволило детектировать рассеянное излучение очень малой интенсивности [12, 13]. Для этого метода характерен микро граммовый диапазон пределов обнаружения [14, 15]. Метод применялся для регистрации спектров хроматографических фракций после упаривания растворителя на КВг.

6. Методы определения и обнаружения 6.4.4. Инфракрасная спектроскопия отражения на микрозеркале Этот вариант инфракрасной спектроскопии свободен от мно гих недостатков, присущих регистрации спектров на таблетках КВг. В спектроскопии отражения исследуемый материал поме щают на крошечное (диаметром около 2 мм) зеркало путем упаривания капли раствора. Конечно, это возможно только при малой летучести определяемого соединения. Здесь пригоден любой достаточно летучий растворитель, в том числе и вода [16], что создает возможность для изучения многих биологи чески важных соединений, часто растворимых только в воде или очень полярных растворителях. Например, таким путем можно регистрировать спектры микрограммовых количеств бел ков [17]. Нанесение пробы представляет собой очень простую опе рацию (рис. 6.2) и сводится к упариванию капли раствора на зер кале, после чего зеркало укреп ляют в специальном держателе системы отражения и регистри руют спектр. Благодаря дву кратному прохождению света через слой изучаемого соеди нения (второй раз — после от ражения зеркалом) метод o6j ладает достаточно высокой чувствительностью. Так, полу чение спектров микрограммо вых количеств обычно не вы зывает затруднений, причем по качеству такие спектры практически не уступают спектрам, полученным обычны- Рис. 6.2. Микрозеркало для инфра ми методами с миллиграммо- красной спектроскопии отражения.

выми количествами вещества боты [16]. © Springer Verlag ) из ра (Воспроизведено с разрешения (рис. 6.3). Метод легко соче тается с операциями разделения, в том числе с тонкослойной хроматографией [18] и газо-жидкостиой хроматографией [19].

Многократное сканирование спектров и их последующее усред нение позволяют определять нелетучие следовые компоненты в диапазоне нанограммовых количеств [20].

Основной недостаток метода, как и в случае всех других вариантов инфракрасной спектроскопии, связан с необходи 272 6. Методы определения и обнаружения 700 см" ( 0 ( 0 90 8 10 0 0 0 too 9 Ш II 12 (3 Рис. 6.3. Инфракрасные спектры гидрохлорида морфина Вверху 2,5 мг в таб летке с 750 мг КВг, обычный метод;

внизу: 10 мкг на 3-мм микрозеркале, ме тод отражения. (Воспроизведено с разрешения из работы [161. © Springer Verlag.) мостью выделения следовых 'компонентов в практически чистом состоянии. Иногда, кроме того, в спектроскопии отражения наблюдается чрезмерное уширение полос.

6.4.5. Влияние температуры на ИК-спектроскопию следовых количеств веществ Охлаждение пробы до температуры жидкого азота или ниже приводит к уменьшению молекулярного разупорядоче ния и, следовательно, к повышению разрешения ИК-спектров [21—23]. Так называемая криогенная инфракрасная спектро скопия успешно применялась для идентификации фракций неф ти [24], обладающих практически одинаковыми спектрами при комнатной температуре.

6.4.6. Метод матричной изоляции В методах матричной изоляции компоненты изучаемого ма териала разбавляют 104—108-кратным количеством другого ве щества. Для этой цели часто применяют инертный газ, напри мер азот, аргон или неон, который вместе с компонентами пробы конденсируют при очень низких температурах. При этом 27$ 6. Методы определения и обнаружения 39 х"»

. 31 J 0 8 6 4 2 0 8 760 740 720 700 6ЭФ Волновое число, см-' Рис. 6.4. Инфракрасный спектр синтетической смеси пяти полициклических аро матических углеводородов (по 25 мкг каждого), полученный методом фурье спектроскопии с матричной изоляцией при температуре жидкого азота: Б а А — бензо[а]антрацен, Хр — хризен, Пир — пирен, Фл — флуорантен, БаП — бен зо[а]пирен. (Воспроизведено с разрешения из работы [291. © 1979 American Chemical Society.) все молекулы пробы оказываются в окружении молекул или атомов газа, так что они совершенно не взаимодействуют друг с другом и лишь слабо взаимодействуют с инертной матрицей.

Благодаря этому возмущение спектроскопических характеристик исследуемого вещества сводится к минимуму и получаются очень резкие спектры [25—29]. Этот метод применяется в ин фракрасной спектроскопии (рис. 6.4 [29]), но еще более впе чатляющие результаты получены в области спектроскопии флуо ресценции (рис. 6.5 и 6.6 [29]).

Метод матричной изоляции использовался в сочетании с га зо-жидкостной хроматографией. В таком комбинированном ме тоде каждую из разделенных фракций конденсировали на от дельном охлаждаемом зеркале. Путем тщательного подбора условий разделения и конденсации можно добиться того, что на каждой матрице будут конденсироваться молекулы только одного соединения (вместе с молекулами газа-носителя) [30], дающие резкие полосы поглощения в инфракрасном диапазоне.

По полосам сильного поглощения таким путем можно детекти ровать 0,16 нг вещества;

более слабые полосьу позволяют иден 18—, •л Х+БаД 390 Л, HW Рис. 6.5. Спектр флуоресценции ацетонового раствора полициклических арома тических углеводородов (К)-6 М) при комнатной температуре: П — пирен, СаА — бензо [а] антрацен, X — хризен, Т — трифенилен. (Воспроизведено с раз решения из работы [29]. © 1979 American Chemical Society.) БаА БаА - Л,нм Рис. 6.6. Спектр флуоресценции смеси 100 нг БаА, П и X и 4 мкг Т, получен яый методом матричной изоляции при температуре жидкого азота (обозначе ния те же, что и на рис. 6.5). БаА, Т и X — изомерные соединения! (Воспроиз ведено с разрешения из работы [29]. © 1979 American Chemical Society).

6. Методы определения и обнаружения 27S тифицировать приблизительно 80 нг определяемого соединения [31].

Обычно применяемые газы (N2, Аг, Не) выполняют роль как носителя в газо-жидкостной хроматографии, так и матрицы в спектроскопии, поскольку они не поглощают в инфракрасной области. К сожалению, они конденсируются только при очень низких температурах, поэтому для спектроскопии матричной изоляции рекомендовались и другие растворители, использовав шиеся в низкотемпературной флуориметрии [32, 33].

6.4.7. Сочетание ИК-спектроскопии с ГЖХ Как и в случае любых других способов хроматографического разделения и детектирования, инфракрасную спектроскопию можно комбинировать с газо-жидкостной хроматографией не посредственно в процессе хроматографического разделения или независимо от него. При детектировании в процессе хромато графирования элюат можно контролировать постоянно или периодически;

в последнем случае время от времени ход хро матографирования прерывают и регистрируют сигнал статиче ской системы. При детектировании независимо от хроматогра фирования элюат улавливают или собирают в отдельную газо вую кювету и затем анализируют с помощью самостоятельной спектроскопической системы.

Очевидно, экспериментально наиболее удобна и проста по стоянная непрерывная регистрация инфракрасного спектра^ элюата, поэтому разработке и совершенствованию такого рода комбинированных систем уделялось наибольшее внимание.

В этих системах элюат проходит через кювету или световод, где и подвергается облучению инфракрасным светом. Светово ды часто снабжают отражающими стенками, так что свет не сколько раз проходит через анализируемую смесь. В то же вре мя в целях предотвращения чрезмерного уширения пиков объем кюветы и связанный с ним оптический путь должны быть до статочно малыми. В литературе рассмотрены проблемы опти мизации объемов световодов в зависимости от объемов хрома тографических фракций [34, 35]. В общем случае объем кюве ты должен быть равен объему газа-носителя, соответствующему ширине пика на половине его высоты, или быть несколько меньше. В каждом конкретном случае исследователь должен решить, когда следует начать и закончить регистрацию спект ра данного компонента.

Успешное определение веществ возможно лишь при очень, быстром (в течение нескольких секунд) сканировании всего спектра. Приведенный на рис. 6.7 пример показывает, что да же при сканировании спектра в течение всего лишь 4 с могух 18* 276 6. Методы определения и обнаружения возникнуть трудности. Действительно, одна и та же полоса поглощения спектра будет менее интенсивной в начале первой секунды регистрации спектра и более интенсивной в конце вто рой секунды сканирования, что обусловлено соответствующими изменениями концентрации определяемого вещества в свето воде. Полоса поглощения, зарегистрированная на максимуме хроматографического пика, бу дет иметь полную интенсив ность, в то время как интен сивность другой полосы, запи санной в конце сканирования, будет занижена. Одно из ре шений этой проблемы сводится к многократному сканирова нию и последующему усредне нию спектров, полученных в процессе элюирования данного пика;

для этого необходимы достаточно быстродействую щие оптические и электронные системы.

Сбор данных начинается автоматически путем регист рации инфракрасных спектров и их записи в компьютерной Рис. 6.7. Зависимость определяемого системе хранения данных, как спектроскопическими методами коли- только высота хроматографи чества вещества от времени регистра- ческого пика превысит некото ции спектра. [Воспроизведено с раз рую заранее установленную решения из работы: Ettre L. S., McFad denW. H. (eds), Ancillary Techniques величину. В другом варианте спектры регистрируются не of Gas Chromatography, p. 229. © Wi ley-Interscience Inc.] прерывно в ходе всего хрома тографического процесса и группируются в серии из заданного числа сканирований;

далее рассматривается функциональная зависимость множества полу ченных спектров от времени. В промежуточном варианте спект ры регистрируются не постоянно, а только тогда, когда сигнал превысит некоторый заданный предел [36].

Если комбинированная система газо-жидкостной хромато г р а ф — инфракрасный фурье-спектрометр применяется в повсе дневных анализах, то из тысяч интерферограмм необходимо до статочно быстро выбрать те, которые содержат необходимую спектральную информацию [37]. Эта задача может быть реше на тремя путями:

1) Применением наряду с инфракрасным спектрометром дру гого детектора. Если последний разрушает определяемое 6. Методы определения и обнаружения вещество (а из неразрушающих детекторов пока что доступ ны только низкочувствительные устройства, измеряющие удельную теплопроводность), то хроматографическое раз деление должно выполняться дважды: для получения интер ферограмм и для измерения. Здесь основная трудность свя зана с достижением хорошей воспроизводимости хромато графического процесса.

2) Применением делителя потока, направляющего одну часть элюата в ячейку инфракрасного спектрометра, а другую в хроматографический детектор. К сожалению, делитель и другие дополнительные устройства могут повлиять на эффективность процесса хроматографического разделения.

3) Использованием в качестве детектора инфракрасного спект рометра, обладающего низким частотным разрешением, но быстродействующей системой обсчета.

Совместное применение газо-жидкостной хроматографии и инфракрасной спектроскопии описано в нескольких работах [38—47]. После внедрения инфракрасной фурье-спектроскопии наступил качественно новый этап в развитии этого направле ния (табл. 6.2).

Независимое от хроматографического процесса детектирова ние методом инфракрасной спектроскопии инструментально значительно проще, но более трудоемко и связано с повышен Таблица 6 2. Совместное применение инфракрасной фурье-спектроскопии и газо-жидкостной хроматографии Решаемая проблема или полученный результат Литература Достижение чувствительности на уровне нанограммовых ко [49] личеств Определение 100 нг изобутилметакрилата (в концентрации 100 млн- 1 в СН2С12) [50] Улучшение чувствительности за счет применения двухлучевой [51, 52] инфракрасной фурье-спектроскопии Определение 50 нг изобутилметакрилата по спектру вершины [53] хроматографического пика Анализ сточных вод [54, 55] Анализ кислот и оснований сланцевого масла [56] Предел обнаружения изобутилметакрилата 460 нг [57] Предел обнаружения полициклических ароматических угле водородов 720 нг [58] Обнаружение 21 основного загрязняющего вещества [59] Предел обнаружения изобутилметакрилата, валерианового альдегида и других соединений на уровне 20 нг 60] Определение 55 органических соединений 61] 278 6. Методы определения и обнаружения ной опасностью внесения загрязнений и потерь определяемых соединений. Чаще всего элюируемое соединение улавливают сорбцией, например на термически устойчивом сорбенте типа тенакс. Затем следовый компонент десорбируют, направляя ток газа-носителя через колонку с сорбентом и далее в газо вую кювету спектрометра или (что проще) помещая сорбент в кювету спектрометра и нагревая его для десорбции изучаемого следового компонента [62].

Промышленностью выпускаются комбинированные анали тические системы, применимые как для регистрации спектров в процессе разделения на вершинах хроматографических пиков,, так и для периодической записи спектров в момент прекраще ния хроматографического процесса. При желании входящие в состав таких систем хроматографы и спектрометры могут экс плуатироваться самостоятельно.

6.4.8. Сочетание ИК-спектроскопии с жидкостной хроматографией В тонкослойной хроматографии разделенные вещества обыч но сначала выделяют элюированием, а затем растворитель упаривают и остаток подвергают дальнейшему изучению. Та кой подход сравнительно трудоемок, не гарантирует количе ственный выход определяемых соединений и создает возмож ность для внесения загрязнений. В связи с этим неоднократно предпринимались попытки разработать методику, позволяющую регистрировать инфракрасные спектры непосредственно на пла стинках для тонкослойной хроматографии. Рассеяние света удалось свести к минимуму путем обработки слоя сорбента специальным маскирующим маслом (Fluorolube), показатель преломления которого очень близок показателю преломления сорбента [63]. Таким путем с помощью фурье-спектрометров были получены инфракрасные спектры микрограммовых коли честв пестицидов.

Для сочетания инфракрасной спектроскопии с колоночной жидкостной хроматографией применяются два подхода. В од ном из них элюат после колонки направляют непосредственно в микрокювету инфракрасного спектрометра;

основная труд ность здесь связана с необходимостью компенсации полос по глощения растворителя, что особенно сложно при изменении состава элюирующей смеси и скорости злюирования. К тому же большинство прозрачных в инфракрасной области материа лов, например КВг или NaCl, разрушается при действии поляр ных растворителей. Тем не менее такой подход успешно при менялся, например, для обнаружения диоктилфталата и ди 6. Методы определения и обнаружения этилфталата (в среде изооктана) [64], нанограммовых коли честв глицеридов, алканов и алкенов при градиентном элюиро вании [65], полиоксиэтиленовых поверхностно-активных ве ществ в хлороформе [66], а также 525 нг парафинового масла [67] Применение инфракрасной фурье-спектроокопии улучшает отношение сигнала к шуму, что существенно при прямом спектро скопическом изучении элюата;

здесь также необходима ком пенсация спектра поглощения растворителя [68].

В другом подходе растворитель упаривают на порошке КВг и регистрируют спектр диффузного отражения;

таким путем удается избежать необходимости учитывать поглощение раст ворителя [67]. Применение фурье-спектроскопии позволяет детектировать субмикрограммовые количества веществ [69].

6.4.9. Применение ИК-спектроскопии в аналитической химии следовых количеств органических веществ Наличие анионных поверхностно-активных веществ в сточ ных водах необходимо контролировать на уровне нанограммо вых концентраций в 1 мл или даже ниже. Для выделения сле довых количеств этих моющих средств применяют жидкостную экстракцию их солей с метиленовым голубым [70], или метод отделения под слоем растворителя и тонкослойную хромато графию [71, 72], или жидкостную экстракцию и тонкослойную хроматографию [73]. Инфракрасная спектроскопия позволяет контролировать содержание следовых количеств анионных по верхностно-активных веществ в процессе всех этих аналитиче ских операций [74].

В анализе газов методы инфракрасной спектроскопии при меняются для идентификации обычных слезоточивых газов [75] и для обнаружения следов метана в медицинских газах [76].


В газообразных продуктах сигаретного дыма определяли со держание этилена и изопрена [77]. Токсичные газы из образ цов биологических тканей выделяли мацерацией, концентриро вали методом анализа пара над раствором и определяли ин фракрасной спектроскопией [78]. В перечне OSHA (Админи страции профессиональной безопасности и здоровья США) пе речислены 170 вредных газообразных или парообразных ве ществ, содержание которых в атмосфере должно контролиро ваться Эти вещества адсорбируются на активированном угле (патрон с углем носит каждый рабочий, находящийся в за грязненной атмосфере);

далее их элюируют CS 2 и элюат из учают методом инфракрасной спектроскопии [79, 80]1 Следо вые количества примесей в газах определяют также совместной нодценсаций газа (выполняющего в данном случае роль мат 280 6. Методы определения и обнаружения рицы) и примесей с последующей регистрацией инфракрасных спектров конденсата при низкой температуре. Таким путем определяли фреон-12 и винилхлорид в концентрациях порядка млн-1 [81].

Методом фурье-спектроскопии в инфракрасной области про веряли чистоту бутандиола-1,4 после газо-жидкостной хрома тографии [82], а также определяли наличие высокотоксичного хлорметилметилового эфира в продажном хлороформе [83].

Обнаружить последний в концентрации 1 млн" 1, несмотря на сильное поглощение хлороформа, удалось только благодаря высокой чувствительности и эффективному подавлению шума (за счет усреднения спектров), присущим инфракрасной фурье спектроскопии.

Методы инфракрасной спектроскопии очень полезны при идентификации лекарственных препаратов и их производных в ходе судебных экспертиз [84, 85], а также в систематическом определении остаточных количеств взрывчатых веществ [86].

Часто возникает необходимость раздельного определения в пробах воды нефти, растительных масел и жидких животных жиров при их совместном присутствии [87];

такие пробы обыч но содержат и другие неполярные соединения, например поли циклические ароматические углеводороды. Для этой цели про бы экстрагируют четыреххлористым углеродом и экстракт из учают методом инфракрасной спектроскопии [88, 89]. Этими же методами определяли содержание нефти в морских отло жениях [90]| и в природных водоемах, где нефть подвергается быстрому изменению под действием воды и других факторов [91]. Жидкостной экстракцией, газо-жидкостной хроматогра фией и инфракрасной спектроскопией определяли остаточные количества (около 0,1 нг/мл) 2-хлорацетанилидов, содержав шиеся в воде [92].

Инфракрасная спектроскопия применялась для определения следовых количеств пестицидов, выделенных жидкостной экс тракцией и тонкослойной хроматографией из внутренностей человека [93]. Инфракрасная спектроскопия позволяет отли чить а-изомер (основная полоса поглощения при 1200 см - 1 ) от р-изомера (2950 и 4112 см~') эндосульфана, выделенные из биологических тканей экстрагированием, жидкостной экстрак цией и тонкослойной хроматографией [94]1 Показана примени мость различных методов, в том числе и инфракрасной спект роскопии, для обнаружения гербицидов — производных хлорсо держащих феноксикислот [95]. В образцах растительного про исхождения с помощью инфракрасной спектроскопии опреде ляли бензо[а]пирен, который выделяли экстрагированием, ко лоночной хроматографией, омылением, многократной жидкост ной экстракцией и, наконец, хроматографией [96].

6 Методы определения и обнаружения 6.4.10. Преимущества методов И К-спектроскопии Для идентификации алкилфлуоренонов-9 в пылевидной фракции выхлопных газов дизельных двигателей применяли га зо-жидкостную хроматографию высокого разрешения с пламен но-ионизационным детектором, инфракрасную фурье-спектро скопию и масс-спектрометрию. Использование любого одного из этих методов было бы недостаточно для вполне надежной идентификации этих соединений. Так, данные масс-спектромет рии свидетельствовали о наличии алкилбензо[с]циннолинов, которых на самом деле в смеси не было [97] Результаты это го исследования наглядно демонстрируют необходимость при менения взаимно дополняющих аналитических методов в случае анализа сложных смесей неизвестного состава.

Инфракрасная спектроскопия считается очень надежным методом в судебной химии Например, сравнение инфракрасной спектроскопии, двух колориметрических методов, четырех ТСХ систем и четырех ГЖХ-систем показало, что однозначная иден тификация героина возможна только методом спектроскопии в инфракрасной области [98]. Инфракрасная спектроскопия может быть также очень полезным средством объективного контроля за ходом разделения смесей методом высокоэффек тивной жидкостной хроматографии. Последний метод обладает рядом преимуществ, делающих его особенно ценным в судеб ной химии;

тем не менее при отсутствии способа контроля он не завоевал бы здесь прочных позиций столь быстро [99].

Сравнение возможностей комбинированных методов газо жидкостной хроматографии — инфракрасной фурье-спектроско пии, высокоэффективной жидкостной хроматографии — инфра красной фурье-спектроскопии и газо-жидкостной хроматогра ф и и — масс-спектрометрии — при определении хлорнитробен золов в сточных водах показало, что только инфракрасная фурье-спектроскопия в сочетании с хроматографическими мето дами (но не газо-жидкостная хроматография — масс-спектро метрия) позволяет различить изомеры хлорнитробензола [100].

Вообще с точки зрения информативности комбинированный метод газо-жидкостной хроматографии и инфракрасной фурье спектроскопии обычно по меньшей мере не уступает газо жидкостной хроматографии — масс-спектрометрии. В то же время идентифицировать определяемое соединение достаточно надежно можно только при совместном применении нескольких из перечисленных выше комбинированных методов. Чувстви тельность газо-жидкостной хроматографии — инфракрасной фурье-спектроскопии позволяет анализировать многие реальные пробы и не является более лимитирующим фактором. Приме нение этого комбинированного метода скорее ограничивается 282 6. Методы определения и обнаружения отсутствием достаточно полного набора эталонных инфракрас ных спектров веществ в газовой фазе. С другой стороны, при газо-жидкостной хроматографии — масс-спектрометрии не воз никает проблем с регистрацией хроматограмм, а спектры запи сываются быстрее. Кроме того, для этого метода имеется зна чительно большая по объему библиотека эталонных спектров, сравнение с которыми облегчается наличием автоматических систем поиска, в то время как поиск идентичных инфракрас нь'х спектров все еще производится вручную. Теоретически газо-жидкостная хроматография — масс-спектрометрия по чув ствительности превосходит газо-жидкостную хроматографию — инфракрасную фурье-спектроскопию на 2—3 порядка, однако уровень фона в пробах из объектов окружающей среды часто не позволяет обнаруживать менее 10 нг вещества. Таким об разом, по крайней мере для этих очень важных анализируе мых объектов различие в пределах обнаружения не столь существенно.

Необходимость применения в аналитической химии следо вых количеств органических веществ нескольких независимых методов подчеркивалась и в работе [101]. На ряде примеров были показаны преимущества другого комбинированного мето да, включающего газо-жидкостную хроматографию — инфра красную спектроскопию, отбор интересующих исследователя фракций и их изучение с помощью ЯМР;

в некоторых из этих примеров газо-жидкостная хроматография — масс-спектромет рия не обеспечивала необходимой специфичности.

6.5. Спектроскопия комбинационного рассеяния До настоящего времени спектроскопия комбинационного рассеяния (рамановская спектроскопия) не часто применялась в аналитической химии следовых количеств органических ве ществ. Этот метод упоминается только приблизительно в 0,3% работ, опубликованных в этой области в 1978—1979 гг. В то же время рамановская спектроскопия представляется довольно перспективным методом, а некоторые последние инструмен тальные усовершенствования расширяют ее возможности и в об ласти определения следовых количеств органических соеди нений.

При прохождении света через прозрачную среду небольшая его часть рассеивается молекулами среды за счет в основном упругого взаимодействия (рэлеевское рассеяние), но отчасти также и за счет неупругого взаимодействия (рамановское рас сеяние). Неупругое рассеяние содержит информацию о колеба тельных и вращательных уровнях энергии молекул, которая 6. Методы определения и обнаружения дополняет информацию, получаемую методом инфракрасной спектроскопии.

С экспериментальной точки зрения преимущества раманов ской спектроскопии перед инфракрасной спектроскопией за ключаются в возможности возбуждения изучаемых молекул более коротковолновым излучением, которое должно быть стро го монохроматичным. Обычно применяемые для генерации этого излучения лазеры обладают двумя положительными качествами: очень высокой мощностью излучения, благодаря чему рамановские спектры намного интенсивнее инфракрасных, и возможностью фокусирования луча на очень малой площади, что позволяет изучать небольшие образцы. В сочетании с со временными методами счета фотонов эти качества раманов ской спектроскопии обеспечивают высокую чувствительность и низкий предел обнаружения [102]. Промышленностью выпу скается рамановский микрозонд типа MOLE (Molecular Optics Laser Examiner — лазерный прибор для изучения оптических свойств молекул), позволяющий изучать образцы массой до не скольких пикограммов и диаметром около 1 мкм [103]. Как и в других вариантах рамановской спектроскопии, с помощью микрозонда можно исследовать и пробы воды. Разработана конструкция микроячейки, обеспечивающая предел обнаружения 1 нг р-каротина в 1 мкл раствора [104]. Микроячейку изготав ливают из двух небольших стеклянных капилляров (типа при меняемых для определения температуры плавления) такого внутреннего диаметра, что для возбуждения можно использо вать два лазера с перестраиваемой длиной волны. При сочета нии с хроматографическими методами искажения сигнала не наблюдается при изменении скорости элюирования от 0,1 до 10 мл/мин.


В аналитической химии следовых (количеств органических веществ спектроскопия комбинационного рассеяния применя лась главным образом для решения проблем контроля за за грязнением окружающей среды. Так, в пробах воды определя ли соединения фенольной природы в концентрациях 50— 300 млрд~' [105]. Сообщалось, что предел обнаружения поли циклических ароматических углеводородов этим методом со ставляет 10—100 пг [106]. Фенолы [Ш7] и амины [108]| в диа пазоне концентраций от миллиардных до миллионных долей определяли после их превращения в производные. Имеется об зорная статья, посвященная анализу возможностей раманов ской резонансной спектроскопии в определении загрязняющих веществ в воде [109].

Примером применения рамановской спектроскопии в биоло гических науках является определение каротиноидов без их выделения непосредственно в морском фитопланктоне в кон 281 6. Методы определения и обнаружения центрациях порядка 10~8 М с погрешностью около 10% [ПО].

Катехоламины в концентрациях порядка 10~5 М определяли в виде соответствующих аминохромов [111].

6.6. Флуоресценция и фосфоресценция Возбуждение химических систем электромагнитным излуче нием сопровождается вторичной эмиссией излучения молеку лами системы при длине волны, равной длине волны возбуж дения или отличающейся от нее (фотолюминисценция). Флуо ресценцией называется фотолюминисценция, затухающая прак тически одновременно с прекращением возбуждения, а фосфо ресценция продолжается какое-то измеримое время и после возбуждения [112—115]. Фосфоресценция находит довольно ограниченное применение в аналитической химии следовых количеств органических веществ, в то время как флуоресцен ция используется здесь все шире и шире. Многие органические соединения способны флуоресцировать сами по себе, а другие можно превратить во флуоресцирующие производные путем введения соответствующих группировок. По специфичности флуориметрия занимает промежуточное положение между ультрафиолетовой спектрофотометрией и инфракрасной спект роскопией. Флуоресценция возбуждается только при определен ных дискретных значениях длин волн, специфичных для дан ного соединения;

длина волны испускаемого излучения также определяется химическим строением данного вещества. Селек тивность флуориметрии определяется тем обстоятельством, что флуоресценция присуща только сравнительно небольшому числу органических соединений;

селективность можно повысить за счет контроля рН среды, подбора системы растворителей и т. д. Специализированные методики флуориметрического определения часто позволяют определять нанограммовые или даже меньшие количества веществ [116].

Одним из основных недостатков спектроскопии флуоресцен ции является гашение интенсивности флуоресценции опреде ляемого соединения другими присутствующими в смеси вещества ми. Поэтому следует либо отделять изучаемые соединения от всех мешающих определению веществ, либо подавлять гаше ние флуоресценции какими-либо другими способами, восполь зовавшись тем обстоятельством, что оптические свойства мно гих флуоресцирующих веществ зависят от рН, природы раст ворителя, температуры и других факторов.

Характер спектров флуоресценции и особенно фосфорес ценции зависит от температуры изучаемой пробы [117].

Во многих случаях снижение температуры пробы сопровож* 6 Методы определения и обнаружения дается уменьшением ширины и появлением более острых пиков (см. рис. 6.5 и 6.6 в разд. 6.4 6), что в свою очередь приводит к увеличению рабочего диапазона метода благодаря снижению»

предела обнаружения почти на два порядка. Регистрация за висимости гашения низкотемпературной фосфоресценции бензо[а]пирена от времени в сочетании с усреднением спект ров позволяет определять до 4 нг этого соединения [118, 119].

Чувствительность определения веществ по характеру фосфо ресценции часто удается повысить путем добавления к изучае мой смеси тех или иных соединений. Так, этанол иногда более чем в 100 раз увеличивает интенсивность фосфоресценции бар битуратов, хлорпромазина, сульфаметазина и других лекар ственных препаратов [120]. Фосфоресценцию можно измерять, и при комнатной температуре. Этой теме посвящены несколько обзорных статей [121—125] Флуориметрию можно сочетать с тонкослойной хроматогра фией и с достаточной точностью определять вещества непосред ственно на хроматографической пластинке. Флуориметрия на ходит все более широкое применение и для анализа злюатовг в высокоэффективной жидкостной хроматографии;

все это об условливает ее растущую популярность среди специалистов в области анализа следовых количеств органических веществ.

Фосфоресценцию, особенно низкотемпературную, также можно сочетать с тонкослойной хроматографией [126] Обработка пластинок некоторыми растворителями способствует улучше нию предела обнаружения веществ этим методом. Некоторые примеры использования флуоресценции и фосфоресценции в.

анализе следовых количеств органических веществ приведены в табл. 6.3.

6.7. Оптикоакустическая спектроскопия Оптикоакустическая или фотоакустическая спектроскопия:* представляет собой довольно перспективный метод определе ния следовых количеств органических соединений [147, 148].

В этом методе образец взаимодействует с модулированным монохроматическим излучением, поглощенная образцом энер гия переходит в тепловую, что сопровождается периодическим^ изменением давления газа, заполняющего камеру, в которую помещен изучаемый образец, и появлением акустического сиг нала, регистрируемого микрофоном. Таким образом, этот ме тод относится к числу вторично-эмиссионных, и ему присущие обычные для таких методов преимущества (потенциально вы сокая чувствительность) и недостатки (нелинейные калибро вочные кривые и связанные с этим трудности при количествен Таблица 6.3. Примеры примейения флуоресценции и фосфоресценции для определения следовых количеств органических веществ Метод раз Концентрация Лите Определяемый следовый компонент Матрица Примечания или количество деления ратура жэ Бутаперазин [127] Плазма 50—300 нг/мл Измерялась флуоресценция определяемого соединения жэ Сыворотка Кортизол [128] 5 0 нг Определение в виде производ ного жэ Плазма [129] Флекаинид 5 0 нг Измерялась флуоресценция определяемого соединения 2 0 фг (!) [130] Флуорантен Индуцированная лазерным из лучением флуоресценция жэ 8—300 млн- 1 [131] Рыбные консервы Гистамин Определение в виде производ ного (с фталевым альдегидом) иох Биологические [132] 1 нг/мл Определение в виде производ Гистамин ного (с фталевым альдегидом) ткани жэ/иох [133] 13 нг/мл Определение в виде производ Моча Гистамин ного (с фталевым альдегидом) жэ [134] Индолил-3-уксусная кислота Растения 0,1—1 нг Антрацен 1135] Нафтацен 0, 1 млн ароматиче- Каменный уголь Лазер, 4 К, стекло Шпольско- [136] Полициклические 1 пг/г го ские углеводороды Индуцированная лазерным из X Полициклические ароматиче- 10 пг лучением флуоресценция ские углеводороды жэ Перилен Растворители Шпольского, Сигаретный дым 2 мкг жидкий азот Матрицы Шпольского, 77 К Полициклические ароматиче- 50 нг/мл ские углеводороды Хинин Индуцированная лазерным из лучением флуоресценция 3 0 млн- Хинолины Сравнение результатов изме рения флуоресценции и фосфо ресценции жэ Серотонин Биологический ма- 1—100 иг териал Фосфоресценция при комнат 1—10 нг Силикагель Ароматические амины ной температуре Определение в виде производ 0,2 нг/мл Эпинефрин ного, измерение фосфоресцен ции Фосфоресценция при комнат жэ ароматиче- Продукты перера- 1 нг Полициклические ной температуре ботки каменного ские углеводороды угля Фосфоресценция при 77 К 0,5 нг/мл 22 полициклических аромати ческих углеводорода Сокращения. ЖЭ — жидкостная экстракция;

ИОХ — ионообменная хроматография;

X — хроматографические методы.

288 6 Методы определения и обнаружения яом определении). Применение в качестве источников излуче ния лазеров позволило достичь довольно низких пределов об наружения;

так, в потоке воздуха удалось обнаружить 1 млн-' этилена, а в статическом образце предел обнаружения при ближался к 10 млрд" 1 [149].

По-видимому, фотоакустическая спектроскопия перспектив на при изучении поверхностей, поскольку первичное излучение не проникает в глубоко расположенные слои изучаемых проб и вторичная эмиссия излучается только поверхностными слоя ми. Этот метод, в частности, может применяться для прямого определения органических веществ, адсорбированных на порош кообразных материалах, например на пластинках для тонко слойной хроматографии [150]. Показано, что таким путем мож но определить 0,2 мкг флуоресцеина на силикагеле [151] или количественно определять пищевые красители после разделения тонкослойной хроматографией [152]. Вещества, разделенные электрофоретическими методами, определяли непосредствен но на электрофореграммах. От денситометрии пропускания фотоакустический метод выгодно отличается большей чувстви тельностью и возможностью изучения бесцветных пятен [153].

Установлено, что предел обнаружения 40 полициклических ароматических углеводородов составляет 2 нг/мл в случае ла зерной флуориметрии и 8 нг/мл в случае фотоакустической 'Спектроскопии [154].

Описан однолучевой спектрометр для близкой инфракрасной юбласти [155]. Сообщалось, что сочетание инфракрасного ла зерного излучения и фотоакустического метода позволяет улуч опить предел обнаружения в газо-жидкостной хроматографии в 103 раз (по сравнению с «классическим» методом детектиро вания инфракрасной спектроскопией) и достичь величин около "20 пг [156]. Сочетание инфракрасного фурье-спектрометра с 'фотоакустической ячейкой [157] позволяет получать спектры порошкообразных образцов, которые напоминают спектры, по лучаемые методами диффузного отражения [158].

^6.8. Масс-спектрометрия «Я.8.1. Общие положения В аналитической химии следовых количеств органических веществ масс-спектрометрия занимает очень важное место.

"Приблизительно в 14% всех опубликованных за период с яо 1980 г. в этой области работ масс-спектрометрия применя -лась как метод анализа или являлась объектом изучения. Опуб ликовано несколько обзорных статей (табл. 6.4), имеются 6. Методы определения и обнаружения Таблица 6.4. Обзорные статьи по масс-спектрометрии Литература Тема обзора, область применения [159] Сравнение квадрупольных и магнитных масс-спектрометров [160] Проблемы конструкции ионных источников масс-спектрометров Сочетание газо-жидкостной хроматографии с масс-спектро [161, 162] метрией Обзор последней литературы по масс-спектрометрии (библио [163] графия— 1263 названия) Пути развития масс-спектрометрии (методические вопросы, [164] оборудование) [165] Полевая десорбция Определение углеводородов в атмосфере (библиография — 125 названий) [166] Анализ проб воды и воздуха методом газо-жидкостной хро матографии — масс-спектрометрии [167] Анализ выдыхаемого человеком воздуха и мочи методом га зо-жидкостной хроматографии — масс-спектрометрии (биб лиография— 98 названия) [168] Применение газо-жидкостной хроматографии —• масс-спектро метрии в анализе пестицидов [169] Применение масс-спектрометрии для решения задач охраны окружающей среды (библиография — 349 названий) [170] Масс-спектрометрия в анализе пищевых продуктов и това ров широкого потребления (библиография — 425 и 266 на званий) [171] Анализ сточных вод (библиография—178 названий) [172] N-Нитрозосоединения (библиография — 200 названий) [173[ Получение производных (библиография — 79 названий) [174] Метод выборочного контроля нескольких ионов [175] Успехи масс-спектрометрии [176, 177] Применение масс-спектрометрии для определения следовых количеств различных веществ в пищевых продуктах (биб лиография— 1978 названий) [178] Применение масс-спектрометрии отрицательных ионов, гене рируемых методом химической ионизации, в решении хи мических проблем охраны окружающей среды [179] Масс-спектрометрия хлорсодержащих дибензо-и-диоксинов (библиография—152 названия) [180] монографии по органической масс-спектрометрии (например, [181]), в особенности по применению маос-спектрометрии и биологических науках [182—184]. Масс-спектрометрии лосвя щены также отдельные главы в монографиях [185, 186] и ма териалы конференций [187, 188]. В других монографиях рас смотрены вопросы масс-сп©ктрометрического определения основ ных загрязняющих веществ [189] и практические вопросы при менения масс-спектрометрии [190]. Имеется обзорная статья, посвященная последним достижениям масс-спектрометрии Р [191].

19— 290 6. Методы определения и обнаружения 6.8.2. Принципы масс-спектрометрии В масс-спектрометрии молекулы образца ионизируют в ва кууме или в атмосфере того или иного газа. Для ионизации используются различные процессы возбуждения, а образующие ся ионы затем разделяют и идентифицируют. Разделение ионов обычно основано на различиях в их траекториях в магнитном и (или) электростатическом полях, а иногда на различиях в скоростях ионов в свободном от поля пространстве.

Имеется несколько способов измерения (с помощью одного или нескольких фотоумножителей) и записи масс-спектров Спо соб регистрации спектров влияет на чувствительность и преде лы обнаружения масс-спектрометрического процесса в целом.

Прежде всего мы рассмотрим обычно применяющиеся методы ионизации [160].

Электронный удар В настоящее время чаще всего используются ионные источ ники, в которых исследуемое вещество ионизируется под элект ронным ударом. Пучок электронов испускается раскаленным рениевым или вольфрамовым нитевидным катодом и ускоряет ся в электростатическом поле. При соударении электронов с молекулами образца последние ионизируются. Для большин ства органических соединений характерен потенциал иониза ции в диапазоне от 7 до 20 эВ, поэтому стандартный ионный источник, генерирующий пучок электронов с энергией около 70 эВ, обеспечивает ионизацию любых молекул. Образующиеся молекулярные ионы затем распадаются, причем характер фрагментации определяется структурой исходного соединения.

Положительно заряженные молекулярные и осколочные ионы удаляются из ионизационной камеры (под действием вытал кивающего напряжения) и ускоряются в сильном электриче ском поле. Дальнейшее разделение ионов осуществляется в анализаторе масс-спектрометра.

Химическая ионизация При ионизации электронным ударом многие органические соединения не образуют молекулярных ионов. Для преодоле ния этого недостатка был разработан метод химической иони зации, при котором сначала ионизируется газ-реагент (Аг, Н 2 О, NH 3, D2O, Н 2, СН 4 ) О 2 и др.), находящийся при давлении 0,2— + 2 мм рт. ст., а возникающие при этом ионы (например, CHs из СН 4 ) реагируют с молекулами изучаемого соединения, в ре зультате чего обычно образуются ионы типа МН+ (квазимоле кулярные), а иногда также ионы М+, М+2 и др. Приводящие к образованию указанных выше ионов ионно-молекулярные 6. Методы определения и обнаружения 0 80- NH «-С 3 Н 60- • 40 • 20,.,L •li 1.,,-J.. • - т If I I i 1 ii i 200 50 - 100 - 80 - 60 - 40 - 20 n—i—i—i—i—r -i—i—i—I—г h—r~i—i—r 1—1—I—I—I—I—Г 100 0 Рис. 6.8. Сравнение масс-спектров барбитурата с молекулярной массой (формула приведена в верхней части рисунка), полученных при ионизации электронным ударом (70 эВ) (о) и при химической ионизации (газ-реагент СН4) (б). (Воспроизведено с разрешения из работы [160]. © Preston Publica tions Inc.) реакции протекают в более мягких условиях, чем ионизация электронным ударом, поэтому квазимолекулярные ионы обычно устойчивее молекулярных ионов (образующихся при электрон ном ударе). По этой же причине обычно масс-спектры при химической ионизации проще, чем при электрокном ударе (рис. 6.8).

Химическая ионизация отрицательных ионов В последнее время все чаще применяется химическая иони зация с образованием отрицательных ионов, основанная на за хвате молекулами исследуемого вещества электронов, которые генерируются в ионном источнике при атмосферном давлении в реакции СН 4 —-СН 4 + +е~. Электроны захватываются элект ронодефицитными атомами или группами молекул изучаемых веществ, которые таким образом превращаются в весьма спе цифичные ионы с локализованным зарядом. Применение хими ческой ионизации с образованием отрицательных ионов в случае галогенсодержащих пестицидов позволяет повысить чувстви тельность в 10—100 раз по сравнению с масс-спектрометрией 19* 292 6 Меюды определения и обнаружения положительных ионов, причем линейная зависимость сигнала от количества вещества сохраняется в диапазоне, верхняя гра ница которого более чем на 3 порядка превышает нижнюю гра ницу. Если в качестве газа-реагента взять фреон (CF 2 C1 2 ), то к молекулам исследуемого вещества могут присоединяться хло рид-ионы, образуя (М+С1)-. Существенно, что последние могут образовываться и при отсутствии электроноакцепторных цент ров в молекуле. Опубликованы обзоры, посвященные послед ним достижениям в области масс-спектрометрии отрицатель ных ионов с химической ионизацией [192, 193]. Применение этого метода для определения дофамина позволило улучшить предел обнаружения в 10—1000 раз по сравнению с масс спектрометрией электронного удара или химической ионизации положительных ионов [194]. Предел обнаружения полибромби фенилов этим методом составляет несколько пг/мл, что пример но в 20 раз меньше, чем при обнаружении детектором элект ронного захвата [195]. Фосфорорганические пестициды опреде ляли масс-спектрометрически в виде (М+С1)~, образующихся при взаимодействии с газом-реагентом СН 2 С1 2 [196].

Полевая ионизация В этом способе ионизации на входе в ионный источник уста навливают тонкую (диаметром 10 мкм) вольфрамовую нить или очень острое вольфрамовое лезвие, находящиеся под на пряжением 8—14 кВ. В сильном электрическом поле переве денные в газовую фазу молекулы изучаемого вещества иони зируются, а образующиеся положительно заряженные ионы на правляются в ионный источник.

Полевая десорбция Метод полевой десорбции представляет собой вариант ме тода полевой ионизации, разработанный специально для из учения веществ, которые невозможно перевести в газовую фазу.

В таких случаях активированный проволочный эмиттер погру жают в раствор изучаемого вещества (или каплю раствора наносят на эмиттер) и растворитель упаривают. Затем на эмиттер подают высокое напряжение и одновременно его по степенно нагревают [197—199]. К эмиттерам предъявляются довольно жесткие требования- они должны обладать высокой эффективностью ионизации, иметь большую удельную поверх ность, быть механически прочными и в то же время достаточно простыми в изготовлении. Для изготовления эмиттеров приме няли углерод, никель, кобальт и кремний [200]. Метод нане сения пробы погружением в раствор не пригоден для количе ственных определений, поэтому лучше наносить капли раствора изучаемого вещества объемом несколько микролитров [201].

6. Методы определения и обнаружения Полевая десорбция применяется для изучения нелетучих ве ществ, важных в биохимическом отношении, например фосфо липидов [202], гуанозина, креатина, холинхлорида и пептидов в количествах 0,1—1 мкг [203], пестицидов карбаматного, тио карбаматного и фенилкарбамидного типов [204], микотоксинов [205] и олигосахаридов [206].

Ионизация при атмосферном давлении В этом методе ионизация осуществляется в результате ион но-молекулярных реакций, протекающих в низкоэнергетичной плазме инертного газа при атмосферном давлении. Плазму по лучают, или подвергая газ воздействию (3-излучения, генери рующегося при самопроизвольном распаде 63 Ni, или с помощью высоковольтного коронного разряда. Далее ионизированное исследуемое вещество вместе с частью инертного газа мигри рует через небольшое (диаметром 25—50 мкм) отверстие в вакуумированную аналитическую систему масс-спектрометра [207]. Масс-спектрометрию с ионизацией при атмосферном давлении неоднократно применяли для определения трихлор феноксиуксусной кислоты в пробах крови в 'концентрации око ло 20 млн-1 [208].



Pages:     | 1 |   ...   | 6 | 7 || 9 | 10 |   ...   | 13 |
 





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.