авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:     | 1 |   ...   | 12 | 13 || 15 | 16 |   ...   | 19 |

«Doc. RNDr. PhMr. Magda SAR50NOVA, DrSc. RNDr. Vladimir SCHWARZ, CSc. RNDr. Cestmir MICHALEC A kolektiv CHROMATOGRAFIA NA TENKYCH VRSTVACH VO FARMACII A V ...»

-- [ Страница 14 ] --

целлюлозу с 3% полиамида и полиамид с 20% целлюлозы, Блей ер и сотр. [13] использовали для хроматографирования кверце тина, кемферола, морина, физетина, апигенина, патулетина, га лангина, кемферида и пектолинарингенина в 60%-ной уксусной кислоте и в системе хлороформ — метанол — метилэтилкетон — муравьиная кислота ( 7 0 : 1 0 : 5 : 1 ). Одновременно они пользова­ лись силикагелем и системой толуол — этилформиат — муравьи­ ная кислота ( 5 : 4 : 1 ).

Тонкими слоями чистой целлюлозы и системой хлороформ — муравьиная кислота — вода (50 : 45 : 5) пользовались для обна­ ружения флавонолов и флавонов в растительных материалах.

После элюирования пятен проводили количественное определение с чувствительностью 10 мг вещества в 1000 г свежего материала [137]. Авторы другой работы [138] разделили кемферид, изорам Таблица Значения hRF 2-фенилхромоновых, изофлавоновых, халконовых и ауроновых гликозидов Обнар} жениеа в г Вещества Заместители в агликонах А Б без Д 189 Д 90 Д реактива Производные апигенина (5,7,4'-ОН) Флавоновые гликозиды космозин 53 20 78 65 СвЖ/ЖК ж/ж роифолин 34 38 74 58 СвЖ/ЖК ж/ж апиин 36 33 72 57 -/ж витексин 35 25 68 44 -/ж Флавоноловые глико­ Производные кемферола (3,5,7,4'-ОН) зиды афцеллин 65 7 72 астрагалин 54 14 69 73 -ЖЗ никотифлорин 36 27 60 57 -ЖЗ робинии 16 70 40 41 СвЖ/ЖО ж/жз ж/ж ж/з —7-моноглюкозид 7 80 15 20 -/жз пеонозид 13 74 28 Производные кверцетина (3,5,7,4',5'-ОН) кверцитрин 62 9 64 72 СвЖ/К ж/тж ж/ж ж/о рутин 30 30 42 43 -/ж 3-диглюкозид 21 50 40 53 -/ж Производные мирицетина (3,5,7,3',4',5'-ОН) мирицитрин 57 11 54 54 СвЖ/ЖО тж/к -/жк кж/к —рутинозид 21 35 16 Флавононовые гликози­ нарингенин (5,7,4'-ОН) ды —7-рамноглюкозид 63 80 54 -СвЖ —/СвС -/ж -/жз а Тире перед сокращенным обозначением окраски расшифровывается так: дневной свет/УФзео.

Обозначения:

А силикагель;

бензол — пиридин — муравьиная кислота (36 : 9 : 5) [29];

Б полиамид;

этилацетат — метилэтилкетон — муравьиная кислота — вода ( 5 : 3 : 1 : 1 ) [25];

В полиамид;

вода — этанол — метилэтилкетон — ацетилацетон (65 : 15 : 15 : 5) [25];

Г целлюлоза;

хлороформ — метанол — метилэтилкетон (60: 14:26) [25].

Сокращения обозначений окрасок см. в примечаниях к табл. 73.

436 Специальная часть Таблица Значения RhF некоторых 2-фенилхромоновых, изофлавоновых и ауроновых агликонов Обнаружение Вещество (заместители) А Б без Д 90 Д Д реактива Флавоны жз/жз акацетин (5,7-ОН, 67 -/КрК Ж/Ж 4'-ОСН3) -/жз —/зж ж/зж апигенин (5,7,4'-ОН) 47 -/КрК ж/к ж/сж лутеолин (5,7,3',4'-ОН) 22 СвЖ/Ж Флавонолы -/ж изорамнетин (3,5,7,4'-ОН, 3'-ОСН3) ж/жз ж/кж ж/ж кемферол (3,5,7,4'-ОН) Ж/ЖЗ кверцетин (3,5,7,3',4'-ОН) ж/ж ж/ж к/о Ж/ЖЗ ж/ж ж/ж к/о рамнетин (3,5,3',4'-ОН, 39 Ж/ЗКр 7-ОСН3) Флаваноны -/жз -/к гесперетин (5,7,3'-ОН, СвЖ/ —/СвЗ 55.

4'-ОСНз) Ауроны ж/ сульфуретин ж/жз о/жо ауреузидин Обозначения. А силикагель;

бензол — пиридин — муравьиная кислота (36:9:5) [29]:

Б 30 г силикагеля G, 1,5 г ацетата натрия и 60 мл воды;

бензол — этилацетат — муравь­ иная кислота (4,5 : 3,5 : 2) [31].

Сокращения обозначений окрасок см. в приложениях к табл. 7Э.

нетин, кемферол и кверцетин на слое полиамида в системе бен­ зол — метилэтилкетон — метанол в различных соотношениях и вещества обнаруживали в ультрафиолетовом свете. Разделением флавоноидов занимались также Шмид [180] и Хирманн с сотр.

[173].

Гликозиды можно гидролизовать, разбавляя их метанольныи раствор равным объемом 2 н. НС1 и нагревая в течение 1 ч на кипящей водяной бане. Агликоны извлекают из водного, раствора этилацетатом и хроматографируют на силикагеле или кремнезе­ ме. Результаты хроматографии флавоноидных гликозидов в раз­ личных условиях приведены в табл. 77, а флавоноидных аглико­ нов — в табл. 78.

Специальная часть Большинство флавоноидов можно идентифицировать на хро матограмме по собственной окраске пятен на дневном свету, при ультрафиолетовом освещении и по цветным реакциям с реакти­ вами на фенольные группы, например аммиачным раствором окиси серебра (Д57), хлоридом железа(III) (Д97), а также вольфрамовомолибденовым реактивом (Д19). Цветные комплек­ сы образуются с раствором хлорида алюминия (Д90) и с раст­ вором нейтрального или основного уксусного свинца (Д160).

Флавоны и флавонолы дают характерное окрашивание при опры­ скивании 2%-ным раствором боргидрида натрия в метаноле, 5%-ным раствором хлорида алюминия в этаноле с последующим нагреванием (1—2 мин) до 120 °С [60].

Метод ТСХ оказался удобным для установления подлинности и обнаружения подмены целого ряда различных видов раститель­ ного сырья (табл. 79).

Для экстракции флавоноидов из сырья рекомендуется следую­ щий способ [69, 159].

0,3 г измельченного в порошок сырья нагревают с 5 мл метанола до кипе­ ния в течение 2 мин, охлаждают и фильтруют. На пластинку наносят 20 мкл фильтрата. Стандартные образцы для сравнения наносят в количествах 2— 3 мкл в метанольком растворе.

Для детального изучения флавоноидных гликозидов в семенах Trigonella foenum graecum польские исследователи [2] пользова­ лись хроматографией на силикагеле в системах этилацетат — ме тилэтилкетон — муравьиная кислота — вода ( 5 : 3 : 1 : 1 ) и этил ацетат— муравьиная кислота — вода ( 1 0 : 2 : 3 ). Они обнаружили витексин, витексингликозид и ориентинарабинозид. Другие исследователи [14] обнаружили 14 флавоноидных веществ в кор­ невищах Galanga (Alpinia officinarum Hanle) методом распреде­ лительной хроматографии на смеси полиамида и целлюлозы (8 : 2) в системе хлороформ — метанол — метилэтилкетон — ацетилаце тон (70:10:15:1) и на силикагеле в системе толуол — этилфор миат — муравьиная кислота ( 5 : 4 : 1 ). Флавоноиды женьшеня Panax ginseng были подвергнуты разделению на кремнеземе смесью этилацетат — метилацетат — муравьиная кислота — вода ( 5 : 3 : 1 : 1 ) и обнаружены опрыскиванием 5%-ным раствором углекислого натрия [61].

Разделение флавоноидов из Passiflora изучали Ледерфинк и соавт. [176], из Cadia elisiana Baker — Пари и сотр. [178], фла­ воноидных гликозидов из Cichorium endivia L. и Lactuca sati va L.— Вельдеке и сотр. [183], изофлавонов из Piptanthus пера lensis — Пари и сотр. [177] и из Trifolium pratense L. и Т. repens L.— Заксе [179]. Шмидтлейн и сотр. [181] подвергали разделе­ нию флаваноны и 3-оксифлаваноны, Отон-Дорж — флавоновые агликоны из Glycyrrhiza glabra L. [174], Гейсслер [172]—водо Таблица Хроматографирование флавоноидного растительного сырья Разделение вещества (в порядке возрастающих Обнаружение Сырье Система Литература значений hRp\ Скополин, катехин, аментофлавон, скопо Кора Viburnum pruni- Сг/Cl В V. opulus только ка­ УФзвв летин, полиен Д 190 техин [40] fol.

Д Цветки Arnica mont. Сг/С2 X, изокверцитрин, астрагалин, X, X, X, X A. chamissonis содержит Д П и другие вещества [70, 159] Сг/С2 Изорамнетин-3-рутинорамнозид, изорамне Цветки Calendula offic. Прочие сорта С. содер­ Д П тин-3-рутинозид, изорамнетин-3-глюкозид жат и другие вещест­ ва 1[72, 159] Сг/СЗ Листья, цветки, плоды Д 160 X, Х-флавон, витексинрамнозид, X, гиперо- Можно различать от­ Д 190—АЬа зид, витексин, X, X, катехин, X, кислоты Crataegum дельные виды сырья олеаноловая, урсоловая, кратеголовая, [44] iP-ситостерин, Х Сг/С2 [76, 78] Рутин, изокверцитрин Цветки Sambucum Сг/С4 Д 90 Можно отличать раз­ Цветки Tilia личные виды Т. [121] [76, 78] Сг/С2 Апигенин, апигенин-7-глюкозид, лютеолин-7 Трава Millefolium глюкозид Можно отличать раз­ Ц/С Трава Passiflora личные виды Р. [104] С. sinensis и С. paradisi Нобилетин (б,6,7,8,3',4'-гексаметоксифла Пары НС Сг/Сб, С Эфирное масло плодов содержат I и III, С. reti­ вон)(1), понканетин (5,6,7,8,4'-пентамето Па-Ц/С8 УФзв рода Citrus culata—!, II и III ксифлавш) (II), 3,5,6,7,8,3',4'-:гептамето [134] ксифлавон(Ш) Д 160 нижние три четверти хроматограммы и реактивом Д 190а - верхнюю четверть;

сушат при 130 °С и Опрыскивают реактивом рассматривают в дневном свете.

Обозначения:

X неизвестное вещество;

Сг силикагель;

ПА^ц'полиа'мид Д С (Merck) с 15% порошкообразной целлюлозы;

С1 хлороформ — уксусная кислота — ацетон ( 7 5 : 2 5 : 10);

С2 этилацетат—муравьиная кислота — вода ( 8 : 1 : 1 ) ;

СЗ этилацетат — метанол — вода (10 : 2 : 1);

С4 толуол - метилацетат — 100%-ная муравьиная кислота - вода (30. 50. 14. t», С5 к-бутанол — уксусная кислота — вода ( 4 : 1 : 5 ) ;

С6 бензол — этилацетат — ацетон — вода (40 : 40.: Л) : 1);

С7 бензол — этилацетат — уксусная кислота (70 : 30 : 0,1);

С8 метанол — формамид — вода ( 6 0 : 3 0 : 15).

440 Специальная часть растворимые рутинозиды. Рутин в траве Fagopyrum aesculentum определял Васевич [182], в лекарственных препаратах — Каравия и сотр. [175].

5.8.5. Каннабиноиды Хотя действующие начала и растительное сырье из конопли Cannabis sativa L. (Cannabinaceae), именно Herba Cannabis, ма­ рихуана, гашиш и харас, не применяются в качестве собственно лекарственных средств, они представляют интерес с точки зрения токсикологии, судебной химии и судебной медицины, как и другие наркотики и галлюциногены растительного происхождения — опий и алкалоиды мака, кокаин, эфедрин, мескалин, псилоцин и их производные героин, ЛСД и т. д., которые рассмотрены в других разделах этЬй книги.

Надежное и чувствительное обнаружение этих веществ, поми­ мо других хроматографических методов, возможно также и с по­ мощью тонкослойной хроматографии. В качестве сорбента поль­ зуются исключительно силикагелем, нередко в форме готовых пластинок. Импрегнирование азотнокислым серебром облегчает разделение благодаря различию растворимости комплексов с ионами Ag+ в зависимости от степени ненасыщенности отдельных каннабиноидов. Значения RF понижаются с увеличением числа изолированных двойных связей [142, 143]. Пользуются также ще­ лочными слоями, получаемыми с диэтиламином или пропилами ном [143] а также пропиткой Ы,Ы-диметилформамидом [149, 150, 151, 158], см. также [184, 188, 189].

Для элюирования пригодны бензол [146], толуол [142—144], ксилол [144], для слоев, импрегнированных диметилформами дом, — циклогексан [149, 150, 158] и для силикагеля без пропит­ ки — системы гексан — диоксан (8 : 2) или бензол — я-гексан — диэтиламин (25:10:1) [152]. Грлич [143] проводил хроматогра фирование на пластинках Eastman Chromagram 6060, обработан­ ных азотнокислым серебром, в системе изооктан — пиридин (8:2) или двумерно — толуолом в обоих направлениях. После первой ступени он проявлял хроматограмму в парах аммиака;

во втором же направлении используется полярность разделяемых веществ и меняется их чередование на хроматограмме. Для слоев, обра­ ботанных диметилформамидом, удобным оказалось трехкратное элюирование [149]. Пари и Пари [152] для препаративных целей пользовались более толстыми слоями (0,5 мм) и системой мета­ нол— диоксан — н-гексан ( 1 : 2 : 7 ).

Обнаружение осуществляют преимущественно бис-диазотиро ванным о-дианизидином (прочный синий В) в.виде 0,1%-ного раствора в воде или 70%-ном этаноле. После опрыскивания хро Специальная часть матограмму выдерживают в парах аммиака [146] или, по другим источникам [149—151], опрыскивают 1 или 0,1 н. раствором ще­ лочи. Каннабидиол (КД) дает окрашивание от оранжевого до красного, Д'-тетрагидроканнабинол (ТГК)—от розового до крас­ ного и каннабинол (КБ)—от пурпурного до фиолетового. Изо­ меры ТГК отличаются друг от друга цветовым оттенком. Чувстви­ тельность для ТГК и КБ составляет 5 нг, а для КД — менее чем 1 нг [42]. Окраска пятен и элюатов сохраняется в течение не­ скольких месяцев. См. также работы [185, 187].

В неполярных растворителях пятна основных веществ (по убывающим значениям RF) располагаются в следующем порядке:

КД, ТГК, КБ. Азотнокислое серебро заметно понижает подвиж­ ность КД, при хроматографировании в толуоле наблюдались сле­ дующие значения hRF: КБ 50, ТГК 32, КД 8 [142]. При приме­ нении силикагеля, обработанного азотнокислым серебром, и бо­ лее полярной системы изооктан — пиридин (8 : 2) подвижность КД как малополярного вещества понижается, тогда как на под­ вижность ТГК это не оказывает влияния (значения hRp: ТГК 31, КБ 19, КД И) [143]. Каннабиноиды с пентильной боковой цепью (КД, ТГК и КБ) обладают большей хроматографической подвиж­ ностью, чем их гомологи с пропильным остатком (каннабидива рин, А'-тетрагидроканнабиварин и каннабиварин) [158]. Кроме этого, проявляются пятна кислот — производных этих соединений и неизвестные вещества.

Устойчивость азокрасителей, образующихся с упомянутым ре­ активом [146], позволяет количественно определять эти вещест­ ва— денситометрически [ 152], измерением площади пятен, а также фотометрически после элюирования их этанолом [144] или смесью равных объемов уксусной кислоты и метанола [150, 151].

Растительный материал экстрагируют в атмосфере азота при комнатной температуре при перемешивании. Вытяжку упаривают досуха в вакууме в атмосфере азота и остаток перед нанесением растворяют в гедссане [149] или в гептане, содержащем неболь­ шое количество метилэтилкетона и этанола [150]. Вместо петро лейного эфира можно пользоваться хлороформом или гексаном, а для экстракции кислот — этанолом или метанолом с 5% бензола [152, 158]. Имеет также свои преимущества метод «испарение — разделение» (ИР) (разд. 3.4.3), при котором создаются условия, подобные курению марихуаны, во время которого каннабиноид ные кислоты декарбоксилируются [146]. Метаболиты марихуаны в человеческом организме изучали Ломброзо и сотр. [186].

Важность проблемы потребления галлюциногенов и других веществ, вызывающих привыкание, побудила Всемирную органи­ зацию здравоохранения (ВОЗ) дать указания к составлению библиографии по аналитическим методам, пригодным для обна­ ружения этих веществ [147].

29— 442 Специальная часть 5.8.6. Производные антрацена Слабительное действие некоторых растительных препаратов обусловлено присутствием производных антрацена, которые мо­ гут находиться в хиноннои, антраноловои или антроновои форме в свободном виде или в виде гликозидов. Могут также образовы­ ваться димеры. Своим действием отличаются преимущественно 1,8-диоксиантрахиноны. В растительном сырье, как правило, на­ ходятся смеси этих веществ, каждое из которых обладает раз­ личным действием;

поэтому целесообразно их подвергать разде­ лению. Для этой цели очень удобна тонкослойная хроматография.

Сорбентом чаще всего служит силикагель. Сначала пользо­ вались большинством растворителей, обычных в хроматографии производных антрацена на бумаге, именно смесью этилацетат — муравьиная кислота — вода (60:12:18);

позже муравьиную кис­ лоту заменили метанолом;

этим достигли большей устойчивости смеси и более легкого удаления ее из слоя. В несколько изменен­ ном соотношении (100:17:13) эту смесь Фармакопея ГДР, изд. 7, рекомендует для антрахинонового сырья коры Frangula, цветков и плодов сенны и алоэ, тогда как для корневища ревеня предписывается система хлороформ — метанол (4:1). Для диан троновых гликозидов значительно удобнее смесь н-пропанол — этилацетат — вода ( 4 : 4 : 3 ) [33]. Разделение антрахиноновых про­ изводных из различных природных источников описали Диэтикер и сотр. ! [191], Хаммуда и сотр. [192, 193], Хаснадь и сотр. [194], Имре и сотр. [196], Лабади [197] и Проске [198].

Антрахиноны обычно обнаруживают растворами щелочей (Д78 — Д80) или парами аммиака. Образующиеся окрашенные в красный цвет феноляты в длинноволновой ультрафиолетовой области обнаруживают флуоресценцию от темно-красной до фио­ летовой. Антроны, антранолы, диантроны и дигидродиантроны не дают красного окрашивания, однако некоторые из них окраши­ ваются в желтый цвет с желтой флуоресценцией (гликозильные производные антрона). В дальней УФ-области на слоях с люми­ нофором (силикагель GF254) наблюдается тушение флуоресцен­ ции. Для других антронов и антранолов пригоден раствор 4-нит розодиметиланилина в пиридине (Д 158). Для того чтобы приме­ нить специфические реакции, сеннозиды необходимо предвари­ тельно окислить, опрыскивая хроматограмму 25%-ной азотной кислотой и нагревая в течение 10 мин при температуре 120 °С.

При этом сеннозиды расщепляются и окисляются в соответствую­ щие антрахиноны, которые после действия раствора КОН обна­ руживают в УФ-свете красную флуоресценцию.

Кислотный гидролиз и окисление бывает удобнее проводить еще перед хроматографированием, так как деление гликозидов антрахинонов не всегда оказывается удовлетворительным.

Специальная часть 0,1 г измельченного в порошок материала смешивают с 5 мл 10 н. серной кислоты и 1 мл 30%-ной перекиси водорода и кипятят 1 мин. По охлаждении взбалтывают с бензолом (4—5 мл) и около 20 мкл бензольного раствора нано­ сят на хроматограмму [74]. Этот способ рекомендуется также Фармакопеей ГДР, изд. 7, для листьев и плодов сенны, только вместо бензола пользуются эфиром. Шталь [112] при подобных опытах упаривал бензольную вытяжку до объема около 1 мл и 10—15 мкл полученного раствора наносил на пластинку силикагеля GF254. Хроматографирование двуступенчатое — сначала на длину 5 см в системе этилацетат—метанол — вода (77: 13: 10) и после высушивания в течение 10,мин на длину пути 10 см в системе бензол — этилформиат — му­ равьиная кислота ( 7 5 : 2 4 : 1). Пятна наблюдают в ближней и дальней УФ-об ластях без обработки реактивами и после действия паров аммиака.

Условия разделения оксиантрахинонов и их наличие в расти­ тельном сырье приводятся в табл. 80, данные о хроматографии отдельных видов сырья — в табл. 81. Сорбенты и системы в этой таблице предписываются Фармакопеей ГДР, изд. 7, для хромато графического установления подлинности некоторых видов сырья.

При хроматографировании коры Rhamnum pursh. для сравнения удобно пользоваться алойном. Над и под его пятнами располага Таблица Значения hRF оксиантрахинонов (обнаружение реактивом Д 78) Положение заместителей Встречается г в А Б Д Вещество в сырье R3 R —н Хризофанол (1), 2, 3, -СН 4, —осн3 55 Фисцион (5), (6), -СНз —он 17 52 2, 3, 4, Франгулаэмодин -СН (5),(6), —н Алоэ-эмодин —СН2ОН 35 79 1, 2, 4, 5, 6, —н 3 (1), 5, 6, Рейн —С ООН 40 —н —Н 1,8-Диоксиантра хинон а 1 — алоэ;

2 — хризаробин;

3 — кора Frangula;

4 — кора Rhramnus pursh.;

5 — цветки Senna;

6 — плоды Senna;

7 — Radix rhei.

(В скобках приведены природные источники, содержащие малые количества антрахн ионов.) Обозначения:

А силикагель;

бензол — этилформиат ( 9 : 1 ) [115];

Б силикагель;

бензол — этилформиат — муравьиная кислота (15 : 5 : 1) [30];

В силикагель;

этилацетат — метанол — вода (100: 17: 13) 175];

Г силикагель;

петролейный эфир (т. кип. 40—70 °С) —этилацетат ( 9 : 1) [23];

Д полиамид MN;

бензол — метанол ( 2 : 8 ) [131].

9* 444 Специальная часть Таблица Хроматография антрахинонового растительного сырья Разделенные вещества расположены в порядке возрастающих значений Система Литература Сырье hRp (в скобках) ком Aloe capensis Сортировка Сг/Cl Смолистое вещество, алоино мерческих сор зиды А и В, алоин, 3 смо­ тов [16, 34 77] листых вещества [33, 112] разде­ плоды СгФ/С2 Сеннозид В (10—15), сеннозид Листья и ление веществ А (30—35), сеннозид D Senna других видов (35—45) реин-8-глюкозид кассии (45—55), сеннозид С (55—60) Сг/СЗ Radix rhei 4 антрахиноновых гликози- [71] да (?), возможно рапонти цин, 2 антрахиноновых гли козида (?), алоэ-эмодин и реум-эмодин, хризофанол, фисцион Кора Frangula Сг/Cl X, глюкофрангулин В, глюко- [36, 81, 112] франгулин А (25—35), фран гулин А+В, X, свободные эмодины Кора Rhamnus fal- Сг/Cl [36, 81] Ксанторамнин (?), X, глюко­ lacis франгулин, X, X, X, X, сво­ бодные эмодины Кора Rhamnus Сг/Cl [36, 81] X, алоин (40—50), Х,Х, 11-де pursh зоксиалоин, свободные эмо-.

дины Кора Rhamnus Сг/Cl 10 X [36, 81] cathart Хризаробин Сг/С Обозначения:

X неизвестное вещество;

Сг силикагель;

СгФ силикагель с флуоресцентной добавкой, GF2s C1 этилацетат — метанол — вода (100:17:13);

G2 этилацетат — к-пропанол — вода ( 4 : 4 : 3 ) ;

C3 хлороформ — метанол (4:1);

С4 гептан — бензол — хлороформ ( 1 : 1 : 1 ).

ются флуоресцирующие желто-коричневым цветом каскарозиды.

Флуоресцирующие синим пятна свидетельствуют о наличии дру­ гих видов Rhamnus, они не должны обнаруживаться в сырье указанного вида [112]. Для обнаружения моноантронов, которые не должны присутствовать в коре Frangula (свежий материал), пользуются 4-нитрозодиметиланилином (Д158). Он окрашивает моноантроны в цвета от серо-синего до сине-фиолетового [112].

Антрахиноны коры Frangula можно разделять также в смеси ме Специальная часть тиленхлорид — метанол (83,5:16,5) или на кислых слоях, обра­ ботанных 0,5 н. раствором щавелевой кислоты в смеси тех же растворителей в отношении (100:5).

Для плодов и листьев сенны пригодна также система этил ацетат— метанол — вода (100:17:13). Она удобна и для дока­ зательства наличия Cort. Frangula и Fol. Senna в препарате сеннагран. Ее неудобство, однако, заключается в том, что она не разделяет сеннозиды А и В. И здесь можно применять ступен­ чатое хроматографирование — на длину 7 см н-бутанолом, насы­ щенным водой и на второй ступени системой я-пропанол — эта­ нол— хлороформ — вода-—уксусная кислота ( 4 0 : 4 0 : 1 2 : 1 6 : 4 ).

Сырье извлекают метанолом или 50—70%-ным этанолом при кипя­ чении. По охлаждении раствор фильтруют, наносят на пластинку.

Кхафадь и сотр. [57] разработали способ количественного определения сеннозидов А, В, С и iD с предшествующим извлече­ нием веществ из пятен хроматограммы. Вещества подвергали разделению на силикагеле в системе пропанол-2—этилацетат — вода (36:36:28) и обнаруживали спиртовым раствором едкого натра. Другие исследователи [67] определяли сеннозиды А, В и С без элюирования in situ флуориметрическим способом после раз­ деления на силикагеле в смеси аммиак — этанол — пропанол-2 — этилацетат ( 7 : 2 : 4 : 5 ) и опрыскивания хроматограммы 65%-ным водным раствором гидразина (рН 8). См. также работу [195].

Тиме и сотр. [126] спектрофотометрически определяли алоин в алоэ. Они пользовались силикагелем и системами этилацетат— уксусная кислота-—вода ( 5 : 1 : 4 ) и хлороформ — этанол — вода в различных соотношениях;

двумерным хроматографированием — в первом направлении смесью хлороформ — 95%-ный этанол — вода (30:15:1), во втором — хлороформ — 95%-ный этанол (3:1). Индийский ревень анализировали хроматографией на си­ ликагеле в системе бензол — хлороформ — уксусная кислота (90: 10:0,5). Действием 10%-ного метанольного КОН удалось об­ наружить реин, реум-эмодин, алоэ-эмодин и хризофанол [109].

При изучении состава сырья из Rubia tinctorum был выделен кристофин (1,4-диокси-2-этоксиметилантрахинон). Берг и сотр.

[8] хроматографировали метанольно-этанольную вытяжку (1:1) на активированном силикагеле в бензоле и его смесях различной полярности. Шталь разработал метод ИР (разд. 3.4.3) для изуче­ ния антраценовых производных и лекарственного сырья [199].

Блейер [190] пользовался тонкослойной хроматографией для об­ наружения фальсификации ревеня 1,8-диоксиантрахиноном.

5.8.7. Производные флороглюцина Вещества, в основе строения которых лежит флороглюцин, являются действующими началами некоторых растительных анти гельминтиков (Rad. filicis, Kamala, Flos koso) и умеренно седа 446 Специальная часть тивного активного вещества хмеля (Strobilus Lupuli, Lupulinum).

Rad. Filicis и экстракт этого корня отличаются чрезвычайно непо­ стоянным содержанием действующего начала и эффективностью.

В их оценке значительную помощь оказала тонкослойная хрома­ тография.

Разделение этих веществ зависит от рН слоя;

Шталь и Шорн [117] показали это градиентной хроматографией на кислом и щелочном слоях, обработанных дигидрофосфатом натрия и аце­ татом натрия. На более кислых слоях соединения с одним флоро глюциновым циклом достигают лишь нижней трети хроматограм мы, в то время как, например, флаваспидиновая кислота, главная составная часть сырого филицина, перемещается с фронтом раст­ ворителя вместе с остальными веществами, содержащими два цикла.

Для обнаружения пользуются тушением флуоресценции на слоях, импрегнированных флуоресцентным индикатором;

можно пользоваться также солями диазония, хлоридом железа(III) с красной кровяной солью (Д 1006) и несколькими каплями азот­ ной кислоты (образуется темно-синее окрашивание), реактивом Фолина-Чокальте (Д 75) или вольфрамомолибденовым реактивом (Д19).

Экстракция. 1 г измельченного в порошок материала смешивают с 10 мл насыщенного раствора гидроокиси бария и часто взбалтывают в течение 30 мин.

Фильтруют, фильтрат слабо подкисляют разбавленной соляной кислотой и из­ влекают 2 раза порциями по 4 мл эфира, не содержащего перекисей. Эфирную вытяжку высушивают безводным сернокислым натрием и выпаривают досуха, остаток растворяют в 2 мл хлороформа и 10 мкл этого раствора наносят на хроматограмму |[Г17].

Условия хроматографирования приведены в табл. 82, в кото­ рой способ Д, т. е. метод хроматографии с обращенными фазами, показывает зависимость между значениями RF и числом флоро глюциновых циклов в молекуле (и соответственно молекулярной массой). Наивысшим значением RP обладают вещества с одним циклом (филициновая кислота, аспидинол), вещества с двумя циклами располагаются в средней части хроматограммы (напри­ мер, флаваспидиновая кислота, аспидин, альбаспидин), в то вре­ мя как филиксовая кислота, содержащая три цикла, практически остается на старте.

Лукнер и сотр. [72] подвергали разделению на силикагеле флороглюциды хмеля в системе н-гептан — этилацетат — муравь­ иная кислота (70:30:1). При детектировании раствором хлорида железа (III) (Д 97) интенсивность окраски пятен можно повысить нагреванием в токе горячего воздуха. Авторы иследовали таким образом группу гомологов ряда гумулона и лупулона в н-гепта новом экстракте растительного сырья. Флороглюциды из трех видов Dryopteris разделили Виден и сотр. [200].

Специальная часть Таблица Значения hRF флороглюциновых производных Формула Обна­ (в скобках в г Вещество руже­ А Б Д приведено ние число циклов) Филициновая кислота 3 0 100 КрФ С8Н10Оз (1) С„Н 13 0 4 (1)) 22 87 ОКр Деаспидинол С„Н 14 0 4 (1) 14 55 83 КрФ Метилфлоробутирофенон С12Н1604 (1) 5 81 КрО Бутирилфилициновая кислота 73 80—85а 78 КрФ Аспидинол С 12 Н, 6 0 4 (1) 41 72 о Флоропирон C 2 iH 26 0 7 (2) 60 7 53 26 70 ОКр Флаваспидиновая кислота С24Н30О8 (2) 82 12 70 о Дезаспидин С24Н3о08 (2) 85 33 иж Аспидин С25Н3208 (2) 87 11 ОКр Альбаспидин С25Н3208 (2) 16 50—60а 3 ОКр 90 Филиксовая кислота С3бН44012 (3) Значения взяты из работы [112].

Обозначения:

А силикагель G, обработанный буферным раствором Мак-Ильвейна рН 6,0;

петролейный эфир — хлороформ — этанол (47,5 : 47,5 : 5) [103];

Б силикагель G, обработанный 0,5 н. щавелевой кислотой;

бензол — хлороформ ( 1 : 1 ) [106];

В силикагель GF254, обработанный 0,3 М раствором ацетата натрия;

этилацетат, дву­ кратное хроматографирование [116];

Г сорбент, как в В;

хлороформ — метанол ( 8 5 : 1 5 ), двукратное хроматографирование [117];

Д силикагель GF254, импрегнированный смесью парафина и петролейного эфира (5 : 95);

метанол— муравьиная кислота — вода (75: 10: 15) [116].

Обнаружение опрыскиванием свежеприготовленным 0,5%-ным водным раствором проч­ ного голубого В и затем 0,1 н. раствором едкого натра.

5.8.8. Производные диферулоилметана Желтый краситель, содержащийся в корневищах некоторых видов Curcuma, например С. longa и С. xanthorrhiza, обладает желчегонным действием. Его можно выделить на силикагеле в системе хлороформ — уксусная кислота (9:1). После обнаруже­ ния смесью уксусного ангидрида и концентрированной серной кислоты (9:1) появляются пятна следующих веществ (в порядке возрастания значений RF) (в скобках указывается окрашивание:

дневной свет/УФ365) [73]: я,п'-ДИОксициннамоилметан (КрФ/ЖКр), /г-оксициннамоилферулоилметан (КрФ/КрК), диферулоилметан или куркумин (КрФ/КрК), неизвестное вещество (СсФ/СвКр).

и,/г'-Диоксициннамоилметан типичен для корневища Curcuma 448 Специальная часть longa, и его наличие позволяет отличить его от С. xanthorrhiza, Важной составной частью этих материалов является также эфирное масло (см. след. разд.).

5.8.9. Эфирные масла, смолы, бальзамы Эфирные масла представляют собой растительные выделения липофильной природы, с характерным запахом, перегоняющиеся с водяным паром. Они, как правило, состоят из многих веществ.

Природные смеси смол и эфирных масел называются бальза­ мами.

В эфирных маслах представлены самые разнообразные органические соеди­ нения;

до настоящего времени их идентифицировано около 500, причем один сорт масла может содержать до 50 соединений. Во многих эфирных маслах какая-либо одна составная часть настолько преобладает, что она. определяет целиком характер эфирного масла, его запах, химические и физические свойст­ ва и фармакологическое действие и, следовательно, может служить для иден­ тификации этого эфирного масла. Составные части эфирных масел — природные вещества всех биогенетических классов, ацетаты генинов или полиацетаты, тер­ пены, фенилпропаны и вещества, содержащие в молекуле атом серы или азота, и особенно вещества с невысокой молекулярной массой, небольшим числом кис­ лородсодержащих функциональных групп, не связанных с сахарами гликозид ной связью. Этими свойствами обладают главным образом монотерпены, сескви терпены, дитерпены и фенилпропаны. Они и являются обычными составными частями эфирных масел, например монотерпены тимол, гераниол, ментол, туйон, сесквитерпены типа фарнезола, гвайяна и т. п. Вплоть до соединений С[5, т. е.

сесквитерпенов, это жидкие составные части эфирных масел. Дитерпены не яв­ ляются типичными составными частями эфирных масел, но присутствуют в бальзамах и смолах главным образом вместе с соединениями более высокой молекулярной массы —• тритерпенами. Фенилпропаны, производные бензола с пропильной боковой цепью, представлены, например, эвгенолом, сафролом, ми ристццином. Вещества, содержащие органически связанные азот и серу, входят в состав эфирных масел семейства Ferula.

В зависимости от строения и содержания функциональных групп составные части эфирных масел представляют собой углеводороды — алифатические (к-геп тан, р-мирцен), ароматические ("n-цимол) и циклические (пинен, камфен), спир­ ты (гераниол, ментол), альдегиды (цитраль, бензальдегид, ванилин), фенолы (ти­ мол, анетол, эвгенол), кислоты алифатические (масляная, валериановая) и аро­ матические (бензойная, коричная), сложные эфиры (циннамеин), лактоны (ку­ марин) и т. д.

Столь сложные смеси веществ невозможно разделить удовлет­ ворительным образом без внедрения хроматографических мето­ дов. Хроматография на бумаге, которая в 50-х годах первенство­ вала в технике разделения, несмотря на различные сложные мо­ дификации, при делении этих липофильных веществ, не принесла значительных результатов. Они были достигнуты главным обра­ зом с введением тонкослойной хроматографии.

Был установлен ряд закономерностей, по которым протекает разделение составных частей эфирных масел в тонких слоях.

Адсорбционное сродство терпенов оказалось возможным предска Специальная часть зать на основании значений диэлектрической проницаемости. Для моно- и сесквитерпенов Шталь [156] нашел зависимость разде­ ления от числа и положения двойных связей. Способность этих веществ образовывать комплексы используют для хроматографии на силикагеле, обработанном азотнокислым серебром. Вещества с двойной связью координационно связываются с ионами Ag+ и поэтому адсорбируются прочнее, чем насыщенные соединения [154]. Положение окисей, эпокисей и перекисей терпенов на хро матограмме определяется полярностью основного соединения.

Сложные эфиры терпеновых спиртов, чаще всего с уксусной кис­ лотой, реже с муравьиной, пропионовой, масляной или валериа­ новой, имеют значения RF в 2,5 раза выше, чем свободные спирты.

Значения RF сложных эфиров гомологического ряда низших жир­ ных кислот повышаются с увеличением числа атомов в молекуле кислоты. Исключение составляют эфиры муравьиной кислоты, ко­ торые имеют ту же подвижность, что и эфиры пропионовой кисло­ ты. Значения RF альдегидов (коричного, ванилина) и кетонов (камфоры, карвона) зависят в определенной степени от поло­ жения гидроксильных и метоксильных групп. Монотерпеновые и сесквитерпеновые спирты на силикагеле в хлороформе или в смеси хлороформа и бензола имеют приблизительно одинаковые значения RF;

однако возможно разделить спирты Сю и Cis- Ге митерпеновые, монотерпеновые, сесквитерпеновые и дитерпеновые спирты при разделении на слоях, импрегнированных парафином или силиконовым маслом, обнаружили косвенную зависимость значений RF от числа атомов углерода. Спирты, разделенные по числу атомов углерода, можно затем разделить в зависимости от числа двойных связей С = С на силикагеле, импрегнированном 2,5%-ным раствором азотнокислого серебра. Таким образом удалось разделить неролидол, гераниол, борнеол и т. д.

Сильное влияние на адсорбционное сродство оказывают фе нольные группы. Одноатомные фенолы в бензоле или хлороформе обладают хроматографической подвижностью, двухатомные оста­ ются на старте. Простые эфиры фенолов имеют существенно бо­ лее низкое адсорбционное сродство, чем соответствующие фенолы (например, фенол — анизол). С возрастанием числа метоксигрупп значения RF убывают. Например, анетол, содержащий 1 группу ОСНз, имеет RF 0,83, метиловый эфир изоэвгенола (2 группы ОСНз)—0,22, изоазарон (3 группы ОСНз)—0,13. Оказывает влияние и положение метоксигрупп. Элемицин с 3 соседними метоксигруппами адсорбируется сильнее изоазарона, который можно считать производным оксигидрохинона. Более подробные сведения об этих закономерностях со ссылками на оригинальные статьи можно найти в статье Шталя и Иорка [157].

Моно- и сесквитерпены чаще всего обнаруживают концентри­ рованной серной кислотой, иногда с добавлением альдегида (на 450 • Специальная часть пример, ванилина или анисового альдегида), хлоридом сурь­ мы (III) или фосфорномолибденовой кислотой. Для обнаружения окисей и перекисей служит анисовый альдегид в серной кислоте, хлориды сурьмы(III) и (V), и-диметиламинобензальдегид и спе­ цифический реагент для обнаружения перекисей — смесь иодида калия и крахмала [155]. Лактоны можно детектировать раство­ ром перманганата калия, сложные эфиры — фосфорномолибде­ новой кислотой. Для обнаружения альдегидов и кетонов можно пользоваться 2,4-динитрофенилгидразином. Применяют также ванилин в серной кислоте и л-диметиламинобензальдегид,[133].

Фенилпропаны обнаруживают фосфорномолибденовой кислотой, анисовым альдегидом, хлоридом сурьмы(III) и (V). Для обнару­ жения при хроматографии эфирных масел некоторые исследова­ тели применяли опрыскивание раствором флуоресцеина и после­ дующее действие парами брома (образование эозина) [92], ро­ дамином В [6, 47] или парами иода,[42, 94]. Приготовление растворов реактивов см. в разд. «Реактивы для обнаружения».

В качестве сорбента, или соответственно стационарной фазы, применяют чаще всего силикагель, однако пользуются и силика­ том магния, силикатом алюминия, кремнеземом, далее кремне­ земом, обработанным формамидом или азотнокислым серебром, а также окисью алюминия, смесью силикагеля и бентонита, нако­ нец, полиамидом. Пригодны готовые силикагелевые пластинки силуфол UV254 производства ЧССР [22].

Подвижную фазу образуют неполярные растворители — н-гек сан, бензол, хлороформ и их смеси с этилацетатом, четыреххло ристым углеродом или петролейным эфиром, и полярные системы с уксусной или муравьиной кислотой, метанолом или ацетоном.

Спирты можно разделить в смеси метанол — вода (7 :3) на слоях, обработанных парафином или силиконовым маслом (обращенные фазы).

Карбонильные терпеновые соединения можно разделять с по­ мощью получения производных — динитрофенилгидразонов или эфиров динитробензойной кислоты. Из производных фенилпропа на в растительном сырье чаще всего встречаются метоксифенил пропановые, например апиол, азарон, катехин, элемол, метилха викол, миристицин и сафрол. Их разделяют на силикагеле, со­ держащем люминофор, в бензоле или в смесях петролейный эфир — эфир и w-гексан — этилацетат [98];

катехин и прочие ди- и трифенолы остаются на старте, и их разделяют потом более полярными растворителями. Для этого было предложено двумер­ ное хроматографирование: в первом направлении в бензоле или хлороформе и во втором — кислыми или щелочными системами [148]. Габель и сотр. делили изомерные фенолы тимол и карва крол на силикагеле в системе хлороформ — пиридин — бензол (65:5:30). На подщелоченном силикагеле или окиси алюминия Специальная часть фенолы образуют феноляты, и их RF заметно ниже, чем RF нейт­ ральных простых эфиров фенолов [107].

Указанные закономерности хроматографического поведения используются главным образом при разделении определенных групп веществ. Однако эфирные масла, как правило, содержат все эти группы вместе, и трудно ожидать удов­ летворительного разделения каким-либо одним способом. На практике при оп­ ределении подлинности эфирных масел ограничиваются поэтому обнаружением их главных характерных составных частей или тех веществ, которые являются специфическими для возможных заменителей или для испорченных масел. Не­ обходимо при этом также учитывать, что товарную продукцию почти всегда рек­ тифицируют тем или иным способом, чтобы добиться желаемого запаха и вкуса.

Фракционированной перегонкой, например, разделяют низко- и высококипящие составные части;

обычным явлением оказывается также смешивание эфирных масел разной сортности. Поэтому свежеперегнанное в лаборатории эфирное масло из растительного сырья обычно отличается по составу от товарного про­ дукта, в котором к тому же могут происходить изменения при старении.

Способы разделения эфирных масел методом ТСХ приведены в табл. 83.

При обнаружении анисовым альдегидом (Д7) анетол прояв­ ляется в виде желтого, линалилацетат и цинеол-—коричневого, карвон и цитраль — оранжевого и ментол •—сине-фиолетового пятен. При опрыскивании 0,1 н. раствором перманганата калия окисляющиеся соединения эфирных масел обнаруживаются в виде желтых пятен на розово-фиолетовом фоне. Анетол, цитраль, эв­ генол и карвон тушат флуоресценцию в ультрафиолетовом свете при длине волны 254 нм;

на зеленом фоне видны темно-фиолето­ вые пятна (на силуфоле UV254). При действии раствора формаль­ дегида в серной кислоте пятна анисового и коричного альдегидов и ментола окрашиваются в желтый, анетола и линалилацетата — в коричневый, борнеола — в оранжевый, борнилацетата и цитра ля— в желто-коричневый, цинеола, линалоола, гераниола и кар вона — в оранжевый, эвгенола — в фиолетовый и тимола — в крас­ но-фиолетовый цвета [22].

При испытании на подлинность и чистоту эфиромасличного сырья хроматографированию подвергают свежеотогнанное из него масло или метанольный экстракт. Фармакопея ГДР, изд. 7, при­ водит оба способа. Для извлечения эфирных масел из сырья мож­ но пользоваться также дихлорметаном или смесью хлороформ — метанол ( 1 : 1 ), а также применять метод ИР (испарение — разде­ ление) [112].

Различить корневища Curcuma longa и С. xanihorrhiza мож­ но хроматографированием свежеотогнанного эфирного масла в м-гексане [159] или метанольной вытяжки в смеси хлороформ — бензол — 96%-ный этанол (45:45:10). После обнаружения и-ди метиламинобензальдегидом, смесью уксусного ангидрида с сер­ ной кислотой или 3%-ным раствором борной кислоты в метаноле с добавкой 0,5% соляной кислоты (25%-ной) у Rh. Curcumae Таблица Хроматография эфирных масел Источник выделения Сорбент эфирного масла Реактив для Система Источник выделения Сорбент обнаружения эфирного масла растворителей Силикагель F254 { Цитрусовые Силикагель, силу- CI l[69, 160 161] Anisum Д 190 [69, 161] СиЛуфОЛ UV254 [22] фол UV254 [22] С2 [9, 136, 141] Д 466 [160, 161] СЗ [140] УФ«4 [124] Д 87 [43, 136] С4 [161] Силикагель+кремне зем [92] Д 76 [22] С5 [22, 124] С6 [22] Calamintha Силикагель С7 [159] Д 87 [159] Кремнезем [26] Coriandrum Carvum Д 190 [69, 100] Силикагель+AgNOs С7 [69] Силикагель D [69] Силикагель + кре Д 466 [43, 69, С2 [9] [49] незем [92] 100, 101] Концентрирован­ С8 [100] СиЛуфОЛ UV254 [ ная H 2 S0 4 [59] С4 [101] H2SO4+HNO3 [59] 50%-ная H 2 S0 С5 {22] Силуфол UV254 [22] [49] Силикат магния [ Эвкалипт Д 76 [22] С9 [49, 101], Силикагель УФ [59, 101], С6 [22] флуоресцеин-f- СиЛуфОЛ UV254 [ +Вг 2 [59] Представители се­ Силикагель+кремне- 018 [92] УФ365 [161] мейства Caryo- зем (4:2) [92] Д 190 [161] С32 [161] phyllaceae Cinnamomum Силикагель С2 [136] 0,1%-ный раствор Магнезоль [10] С1,[12] 2,6-дихлорхи нонхлоримида в этаноле [125] Силикагель [128] Foeniculum СЮ [86] Силуфол UV254 [22] Силикагель D [ СП [161] Бромфеноловый синий (бензой­ С6 [22] ная, коричная Кремнезем [26] С12,[125] кислоты) [125] Силикагель + С13 [125] окись кремния [ С14 [125] С15 [125] СиЛуфОЛ UV254 [ •Цитрусовые Д 190 [97, 161] С1 {53] Cиликaгeль+AgNOз [49] Д 466 [92, 99] С2 [136] Продолжение табл. Источник выделения Источник выделения Система Реактив для Сорбент Сорбент эфирного масла эфирного масла растворителей обнаружения Силикагель [ CnflHKareflb+AgN03 С2 [136] Д 190 [97] Salvia Geranium 118, 159], д [49] С25 [91] Д 87 {136 кремния [17] Силикагель С26 [123] 50%-ная H2SO« [49] С17 [97] СилуфОЛ UV254 [22] Силикат магни 19] С6 [22] С7 [41, 51] Кремнезем+AgNOs Д 87, [41, 136] Lavandula [139] С1 [69] Д 190 [69, 161] Thymus Силикагель С2 [136] Силуфол UV254 [22] Д 76 [ Силикагель+кр С7 [161] зем (4:1) [ С5 [22] С4, С9 [101] С6, [22] Силикагель [128, 142] С1 [69, 84, 99, Д 190 Ас [69,161, Mentha piperita 102, 128, 135] 128, 159] Силикагель + окись С7 [50, 128, 159, Д 116 [136] 161] алюминия [128] Родамин В [7] Силуфол UV254 [22] С23 [160] Д 7а [160] С2 [84, 136] Д 190В [90] Обозначения:

С27 [112] Д 466 [101] С1 бензол;

С2 бензол — хлороформ (1 : 1);

С4, С9 [101] Д 87 [135, 136, СЗ бензол — метанол (1 : 1);

С4 к-гексан — этилацетат ( 9 : 1);

102] С5 к-гептан — этилацетат ( 9 6 : 4 ) ;

С12 [84] Сб к-гексан — этилацетат (96 : 4);

Д 40 флуоресце С7 бензол — этилацетат ( 9 5 : 5 ) ;

ин+Вг [128] С24 [50, 90] С8 к-гексан — эфир (87: 13);

С9 к-гексан — этилацетат ( 8 5 : 15) С28, СП '[99] СЮ циклогексан— этилацетат ( ЮТОз+уксусная СМ бензол — метанол ( 1 9 : 1 ) ;

кислота [50] С5 [124, 22] С12 хлороформ;

С13 к-гексан — уксусная кислота ( С6 [22] Д 76 {22] С14 к-гексан — пиридин ( 9 5 : 5 ) ;

С15 бутиловый эфир — муравьиная С16 к-гексан — уксусная кислота — Силикагель [159] С7 [159] Petroselinum Д 87 [159] С17 к-гексан — хлороформ — у к с у :

С18 бензол — этилацетат ( 8 5 : 1 5 ) ;

С19 петролейный эфир — этилацет С29 [85] Силикагель+АёгГОз Pinus pumil. Д 7 [85, 161] С20 бензол — этилацетат ( 9 : 1 ) ;

[93] С30 [19] С21 к-гексан — этилацетат ( 9 5 : 5 ) ;

С22 бензол — этилацетат ( 7 : 3 ) ;

Силикагель F [85] С4 [161] С23 бензол — этилацетат ( 5 : 1 ) ;

С24 н-гексан;

С6 [22] Силуфол UV254 [22] С25 к-гексан — эфир ( 9 0 : 9 ) ;

С26 циклогексан — метилэтилкетон С27 бензол — хлороформ ( 2 5 : 7 5 ) ;

Силикагель [51] С20 [51] Rosmarinus Д 87 [136] С28 бензол — метанол ( 7 5 : 2 5 ) ;

С29 бензол — этилацетат ( 8 : ' 2 ) ;

СилуфОЛ UV254 [22] С2 [136] Д 190 Ас 161] СЗО метанол — ацетон — четыреххл С31 бензол — уксусная кислота ( С18 [90] СЭ2 бензол — пиридин ( 9 5 : 5 ) ;

СЗЗ к-гексан — эфир ( 6 : 4 ) ;

С7 [161] С34 к-гексан — эфир ( 8 : 2 ).

С6 [22] 456 Специальная часть longae дополнительно появляются пятна быс-десметоксикурку мина.

При изучении проазуленов пользовались хроматографировани ем петролеиноэфирнои, эфирной или хлороформной вытяжки из Matricaria chamomilla, Achillea millefolium, A. asplenifolia и Arte­ misia absinthium на силикагеле, активированном при 105 °С в те­ чение 1 ч, в системе бензол — этилацетат (2:1). Вещества обна­ руживали я-диметиламинобензальдегидом '[129].

При оценке Flos Chamomilla и эфирного масла ромашки важ­ но обнаружить бисаболол. После хроматографирования на сили­ кагеле в гексане и в смеси бензол — этилацетат (95:5) (—)-а бисаболол элюировали и количественно определяли УФ-спектро фотометрическим путем [105]. На силикагеле GF254 после разде­ ления в системе хлороформ — бензол (75:25) Шталю [112] уда­ лось наряду с бисабололом обнаружить еще н- и ызо-енинбицик лический эфир по тушению флуоресценции при 254 нм. Для ис­ следования изменений, происходящих в эфирном масле цветков Chamomilla после радиационной стерилизации растительного сырья, Блазек пользовался хроматографией на силикагеле в сис­ теме ксилол — этилацетат (9:1) [15]. В качестве реактива для обнаружения служил раствор л-диметиламинобензальдегида в ук­ сусной кислоте.

Автор другой работы [58] хроматографировал бергамотовое масло двумерным способом на смешанном слое силиката магния и кремнекислоты бензолом в обоих направлениях;

для детектиро­ вания служил 0,05%-ный раствор флуоресцеина и пары брома.

Кетоны он подвергал разделению двумерным способом на сме­ шанном слое активного угля и кремнекислоты в одном направ­ лении в смеси бензол — эфир — уксусная кислота (82:9:9).и в системе бензол — эфир (85:15)—в другом и обнаруживал их 2,4-динитрофенилгидразином в 2 н. соляной кислоте.

При исследовании влияния эндогенных и экзогенных факторов на содержание валепотриатов и эфирного масла в Valeriana offic.

L. эфирное масло хроматографировали на силикагеле в смеси хлороформ — бензол (8:2). Для обнаружения пользовались ва­ нилином в серной кислоте и нагреванием в течение 3 мин при 105 °С [132]. Валепотриаты из этого материала можно делить на силикагеле смесью гексан — метилэтилкетон (8:2) и обнару­ живать динитрофенилгидразином (Д46) и нагреванием в тече­ ние 5—10 мин при 105°С [64].

Смолы состоят главным образом из ди- и политерпенов и про­ изводных фенилпропана. У них по сравнению с эфирными масла­ ми низкая упругость пара, и они не перегоняются с водяным паром.

Смолы почти всегда содержат определенное небольшое коли­ чество эфирных масел. Если содержание эфирного масла дости Специальная часть гает такой величины, что составные части смолы находятся в нем в растворенном или эмульгированном состоянии, такие смеси называют бальзамами.

Шталь [111] сообщал о возможности хроматографировать смолы методом ТСХ уже в 1958 г. Этот метод используется не только в идентификации смол и бальзамов, но и в контроле их чистоты, установлении подлинности, определении возможных загрязнений и фальсификации.

Смолы и бальзамы (3%-ные растворы в этилацетате или хло­ роформе) Иорк [52] подвергал разделению в S-образной камере Шталя, насыщенной парами растворителя, двукратным хрома тографированием на активированном силикагеле в системе бен­ зол — метанол (95 : 5). Пятна он детектировал хлоридом сурь­ мы (III) (Д87а), а также в ультрафиолетовом свете при длине волны 365 нм. Для практических целей было бы желательно иметь возможность различать сиамскую и суматранскую разно­ видности бензойной смолы;

однако наиболее надежным остается обнаружение кристаллического возгона при нагревании сиамской смолы. Перуанский бальзам по Фармакопее ГДР, изд. 7, реко­ мендуется хроматографировать на силикагеле G в системе бен­ зол— н-нонан (95:5). Для обнаружения служит ванилин в сер­ ной кислоте и ультрафиолетовое освещение с длиной волны 365 нм. Канадский бальзам и некоторые смоляные кислоты Чал лен и сотр. [48] хроматографировали на силикагеле G в системе н-гексан — этилацетат (7:3) одно- или двумерным способом со смесью хлороформ — ацетон (9:1) во втором направлении.

5.8.10. Сапонины Сапонины являются гликозидами, генин которых может иметь тритерпеновую или стероидную (спиростаны) структуру.

Стероидные сапонины подразделяются на нейтральные, не содержащие азо­ та, и основные, содержащие гетероциклический азот. Последние относятся ско­ рее к стероидным алкалоидам. С агликоном (сапогенином) связано гликозидной или сложноэфирной связью до 12 моносахаридов или уроновых кислот. Они могут группироваться в одну цепь (монодесмозиды) и в две (бисдесмозиды).

Типичное свойство сапонинов — склонность к гемолизу эритроцитов и образова­ нию комплексов с холестерином — выражена преимущественно у монодесмози дов. Некоторые сапонины содержат также связанные сложноэфирной связью кислоты, например уксусную, тиглиновую и т. д. Сапонины, содержащие один остаток, сахара в молекуле, называются просапогенинами. Их сапониновые свой­ ства выражены слабо.

Тритерпеновые сапонины подразделяются на нейтральные и кислые. Кис­ лотность обусловливается карбоксильной группой в агликоне или в углеводном остатке (уроновой кислоте).

Тритерпеновые сапонины извлекают из растительного сырья разбавленным этанолом или метанолом. Для удаления примесей жировых веществ сырье удобно предварительно экстрагировать 30— 458 Специальная часть петролейным эфиром;

красящие вещества удаляют предваритель­ ной экстракцией хлороформом.

Выделение стероидных сапонинов. Растительный материал экстрагируют раз­ бавленным метанолом, вытяжку упаривают IB вакууме и извлекают изобутанолом.

Изобутанольный слой растворяют в метаноле. Из этого раствора неполярные вещества извлекают петролейным эфиром, водный слой упаривают досуха и повторно экстрагируют 90%-ным этанолом. Этанольные вытяжки соединяют, фильтруют и упаривают 1[145].

Для разделения нейтральных сапонинов пользуются большей частью водно-спиртовыми системами, например хлороформ — ме­ танол— вода (65:35:10). Эта система удобна и для препаратив­ ных целей, и ею можно пользоваться для хроматографии на ко­ лонке и для разделения сложных смесей сапонинов. Соотношение растворителей можно изменять в зависимости от полярности раз­ деляемых веществ;

для слабополярных сапонинов воду в смесь не добавляют, причем органические растворители берут в соотно­ шении (8:2). Удобной менее полярной смесью является система этилацетат — четыреххлористый углерод. Кислые сапонины делят в смесях, содержащих бутанол, например н-бутанол — этанол — 25%-ный аммиак ( 7 : 2 : 5 ). Качественное и количественное опре­ деления сапонинов описал Франк [201].

Полярные группы генинов или углеводного остатка влияют на хроматографическое поведение сапонинов. Они понижают RF Характерное свойство сапонинов — склонность к гемолизу эрит­ роцитов — можно использовать для довольно специфического ис­ пытания на подлинность. Удобнее наливать на хроматограмму раствор дефибринизированной крови и желатины (Д194), чем опрыскивать ее суспензией эритроцитов. Необходимо, однако, иметь в виду, что существуют сапонины, практически не проявля­ ющие гемолитических свойств. Поэтому для неизвестных веществ всегда дополнительно пользуются химическими реактивами. Для всех типов сапонинов пригодны хлорид сурьмы(III) (Д87а), ре­ актив Либермана — Бурхардта или хлорсульфоновая кислота.


Последняя окрашивает олеаноловую кислоту в цвет от коричне­ вого до фиолетового, а бетулиновую кислоту — в светло-голубой цвет. Пригодны также фосфорная или серная кислоты, без до­ бавок или с ванилином или анисовым альдегидом [55, 66, 113].

Реакцией с серной кислотой пользовались также для количест­ венного определения сапонинов с помощью ультрафиолетового света [46, 55].

Сорбентом служит обычно силикагель. Шталь хроматографи ровал сапонины корней растений Primula, Sarsaparilla, Senega и коры Quillaia в смеси м-бутанол — уксусная кислота — вода (5:1:4) [113] и пропанол-2 — вода — муравьиная кислота (80:15:5) [112]. Сапонины Herniaria glabra удалось разделить на силикагеле Н двумерным способом в системах этилацетат — Специальная часть муравьиная кислота — вода (72:10:16) и во втором направле­ нии — хлороформ — метанол — муравьиная кислота — вода (60 : 28 : 4 : 7), а их агликоны в системе хлороформ — метанол — во­ да (80:35:7) [55, 56]. Было обнаружено восемь сапонинов. Эсцин из Aesculus hippocastanum был выделен в системе хлороформ — метанол — вода (59 33 : 8). Сапонины Solidago исследовали Гил лер и сотр. )[202], женьшеня (Panax ginseng)—японские авторы [203].

ЛИТЕРАТУРА 1. Abdel-Hay F. M., Abu-Mustafa E. A., El-Tawil В. А. Н., Fayez М. В. Е., Planta med., 13, 91 (1965).

2. Adamska M., Lutomski J., Planta med., 20, 224 (1971).

3. Anton R., Duquenois P., Ann. pharm. franc, 26, 673 (1968).

4. Badawi M. M., Fayez M. В., Planta med., 15, 140 (1967).

5. Balbaa S. L, Hilal S. H., Naggag M. Y., Planta med., 22, 209 (1972).

6. Battaile J., Dunning R., Loomis W. D., Biochim. Biophys. Acta, 51, (1961).

7. Battaile I., Loomis W. D., Biochim. Biophys. Acta, 51, 545 (1961).

8. Berg W., Hesse A., Kraft R., Herrmann M., Pharmazie, 29, 478 (1974).

9. Betts T. J., J. Pharm. Pharmacol, 16, 131 (1964).

10. Betts T. J., J. Pharm. Pharmacol, 17, 520 (1965).

11. Beyrich Т., J. Chromatogr, 20, 173 (1965).

12. Bhramaramba A., Sidhu G. S., Perf. Essent. Oil Res, 54, 732 (1963).

13. Bteier W., Chirikdjian J. J., J. Chromatogr, 26, 156 (1971).

14. Bleier W., Chirildjian J. J., Planta med, 22, 145 (1972).

15. Blazek M., Pharmazie, 28, 339 (1973).

16. Bohme H., Kreutzig L., Dtsch. Apoth. Ztg, 103, 505 (1963).

17. Brieskom С H., Biechele W., Dtsch. Apoth.-Ztg, 111, 141 (1971).

18. Brieskom С H., Dalferth S, Dtsch. Apoth.-Ztg, 104, 1388 (1964).

19. Brieskom С N.. KUnger H., Polonius W., Arch. Pharm. 294, 389 (1961).

20. Bryant L. H., Nature, 175, 556 (1955).

21. Caporale G., Dall'Acqua F., Capozzi A., Marciani S., Crocco R., Z. Natur forsch, 26b, 1256 (1971).

22. Dandova J., дипломн. раб. Farm. fak. Univ. Karlovy, Hradec Kralove, 1974.

23. Danilovic M., Naumovic-Stefanovic 0., J. Chromatogr, 19, 613 (1965).

24. Duquenois P., Anton R., Ann. pharm. franc, 26, 607 (1968)..

25. Egger К., в кн. Stahl E.: Dunnschicht-Chromatographie. 2. Aufl. Springer Verlag, Berlin, 1967.

26. Фертман Г. И., Лесное П. П. Изв. высш. учебн. зав, 5, 165 (1971).

27. Friedrich Я, Zeruhn E., Pharm. Weekbl, 106, 198 (1971).

28. Gabel E., Muller К. Н., Sohoknecht J,, Dtsch. Apoth.-Ztg, 102, 293 (1962).

29. Gstirner G, Ftach G, Arch. Pharm, 302, 1 (1969).

30. Gyanchandani N. D., Yamamoto H., Nigam I. C, J. pharm. Sci, 58, (1969).

31. Hansel R., Langhammer L, Frenzel J., Ranft G., J. Chromatogr, 11, (1963).

32. Haznagy A., Szendrei K., Totr L, Pharmazie, 20, 651 (1965).

33. Horhammer L., Wagner E., Bittner G, Pharm. Ztg, 108, 259 (1963).

34. Horhammer L., Wagner H., Bittner G„ Graf F., Dtsch. Apoth.-Ztg, 105, 827 (1965).

35. Horhammer L., Wagner H., Hein K-, J. Chromatogr, 13, 235 (1964).

,36. Horhammer L., Wagner H., Horhammer H. P., Dtsch. Apoth.-Ztg, 107, (1967).

30' 460 Специальная часть 37. Horhammer L., Wagner H., Konig H., Dtsch. Apoth.-Ztg., 103, 1 (1963).

38. Horhammer L., Wagner H., Kraemer-Heydweille D., Dtsch. Apoth.-Ztg., 106, 1967 (1966).

39. Horhammer L., Wagner H., Ley В., Pharmazie, 15, 645 (1960).

40. Horhammer L., Wagner H., Reinhardt H., Dtsch. Apoth.-Ztg., 105, (1965).

41. Horhammer L., Wagner H., Richter G., Dtsch. Apoth.-Ztg., 103, 1737 (1963).

42. Horhammer L., Wagner H., Richter G., Konig H. W., Hang J., Dtsch. Apoth. Ztg., 104, 1398 (1964).

43. Horhammer L., Wagner H., Schilcher H., Dtsch. Apoth.-Ztg., 102, 733 (1962).

44. Horhammer L., Wagner H., Seitz H., Dtsch. Apoth.-Ztg., 103, 1302 (1963).

45. Hoton-Dorge M., J. Pharm. Belg., 18, 3 (1963).

46. Hubik J., Sci. Pharm.: Proc. 25th Congress Pharm. Sci. Butterworths, Lon­ don, 1, 467 (1966).

47. Huneck S., J. Chromatogr., 7, 561 (1962).

48. Challen S. В., Kucera M., J. Chromatogr., 32, 53 (1968).

49. Ikan R., Meiz R., Israel J. Chem., 3, 117 (1965);

Chem. Abstr., 1242 (1966).

50. Jaspersen-Schieb R., Pharm. Acta Helv., 36, 141 (1961).

51. Jaspersen-Schieb R., Fluck H., Boll. chim. farm., 101, 512 (1962).

52. Jork H., Dtsch. Apoth.-Ztg., 102, 1263 (1962).

53. Karawaya M. S., Wahba S. K-, Egypt. Pharm. Bull., 44, 31 (1964);

Chem.

Abstr., 62, 10288 (1965).

54. Karlsen J., Boomsma L. E. J., Baerhaeim-Svendsen A., J. Chromatogr., 42, 550 (1969).

55. Kartnig Т., Wegschaider 0., Planta med., 21, 144 (1972).

56. Kartnig Т., Wegschaider 0., Ri С Y., Planta med., 21, 29 (1972).

57. Khafagy S. M., Girgis A. N., Khayyal S. E., Helm M. A., Planta med., 21, 304 (1972).

58. Kirchner I. G., J. Chromatogr., 63, 3 (1971).

59. Kirchner J. G., Miller J. M., Keller G. J., Analyt. Chem., 23, 420 (1951).

60. Koeppen B. H., J. Chromatogr., 18, 604 (1965).

61. Komatsu M., Timimori Т., Makigushi Y., J. Pharm. Soc. Japan, 89, (1969).

62. Kraus L. J., Dupakova D., Pharmazie, 19, 1964 (1964).

63. Kretschmer P., Kny L., Pharmazie, 22, 368 (1967).

64. Kuhlhanek V., Pater В. К-, Siegfried В., Schweiz. Apoth.-Ztg., 110, (1972).

65. Kuhn M., Wartburg A., Helv. Chim. Acta, 46, 2127 (1963).

66. Lang W., Mennicke W. H., Arzneimittel-For'sch., 22, 1928 (1972).

67. Lawrence L. F., Frei R. W., J. Chromatogr., 79, 223 (1973).

68. Longo R., Fumagalli U., Boll. chim. farm., 105, 767 (1966).

69. Luckner M., Prufung von Drogen. G. Fischer-Verlag, Jena, 1966.

70. Luckner M., Bessler 0., Luckner R., Pharmazie, 20, 681 (1965).

71. Luckner M., Bessler 0., Luckner R., Pharmazie, 21, 556 (1966).

72. Luckner M., Bessler 0., Luckner R., Arzneimittelstandardisierung, 8, (1967).

73. Luckner M., Bessler 0., Luckner R., Pharmazie, 22, 371 (1967).

74. Luckner M., Bessler 0., Luckner R., Pharmazie, 22, 379 (1967).

75. Luckner M., Bessler 0., Luckner R., Pharmazie, 1967, 22, 384.

76. Luckner M., Bessler 0., Luckner R., Arzneimittelstandardisierung, 12, (1968).

77. Luckner M., Bessler 0., Luckner R., Arzneimittelstandardisierung, 14, (1968).

78. Luckner M., Bessler 0., Luckner R., Korn E., Arzneimittelstandardisierung, 16, 17 (1969).

79. Luckner M., Bessler 0., Luckner R., Korn E., Arzneimittelstandardisierung, 14, 157 (1968).

Специальная часть 80. Luckner M., Bessler О., Schroder P., Pharmazie, 20, 300 (1965).

81. Luckner M., Bessler 0., Schroder P., Arzneimittelstandardisierung, 7, (1966).

82. Macek K-, Pharmaceutical Applications of Thin-layer and Paper Chromato­ graphy. Elsevier Publishing Co. Amsterdam, 1972.

83. Madsen B. C, Latz H. W., J. Chromatogr., 50, 288 (1970).

84. Martelli A., Riv. Ital. Essenze, Perfumi, Piante Offic., Aromi, Saponi, Cosmet, Aerosol, 1971, 53, No. 10, 607;

Chem. Abstr., 76, 117418 (1972).

85. Martinek A., J. Chromatogr., 56, 338 (1971).

86. Masse J., Paris R., Ann. pharm. franc., 22, 349 (1964).

87. Mathisc C, Bull. Soc. Pharm. Strassbourg, 1970, 13, No. 1, 35;

Chem. Abstr., 72, 136491 (1970).

88. Messerschmidt W., Planta med., 13, 56 (1965).

89. Naubudiri E. S., Krishnamurthy N., Lewis Y. 5., Indian Perfum, 13 (Pt. 1), (1969), 22;

Chem. Abstr., 75, 67380-(1971).

90. Nigam I. C, Levi L., J. pharm. Sci., 53, 1008 (1964).

91. Nigam N. C, Nigam I. C, Levi L., J. Soc. Cosm. Chem., 16, 155 (1965).


92. Nigam S. S., Kumari G. L., Pert. Essent. Oil Res., 53, 529 (1962).

93. Norin Т., Westfelt L., Acta chem. scand., 17, 1828 (1963).

94. Novotny L., Herout V., Coll. Czechoslov. Chem. Commun., 27, 2462 (1962).

95. Paris R., J. Pharm. Belg., 18, 402 (1963).

96. Paris R., Cubukcu В., Ann. pharm. franc., 20, 583 (1962).

97. Пасечниченко В. А., Гусева А. Р. Ж. прикл. биохим. и микробиол., 1965, 529.

98. Pastuska G., Petrowitz H., Chemiker-Ztg., 86, 311 (1962).

99. Petrowits H. J., Angew. Chem., 72, 921 (1960).

100. Preuss R., Dtsch. Apoth.-Ztg., 104, 1797 (1964).

101. Reitsema R. H., Analyt. Chem., 26, 960 (1954).

102. Rotbacher H., Crisan C., Bedo E., Farmacia (Bucharest), 12, 733 (1964).

103. Schantz M., von, Planta med., 10, 22 (1962).

104. Schilcher H., Dtsch. Apoth.-Ztg., 107, 849 (1967).

105. Schilcher H., Planta med., 23, 132 (1973).

106. Schorn P. J., Thesis. Saarbrucken, 1963;

см. [82].

107. Schratz E., Qedan S., Pharmazie, 20, 710 (1965).

108. Schratz E., Schnelle F. L., Qedan 5., Sci. Pharm., 36, 13 (1968).

109. Shah С S., Qadry J. S., Bhatt J. G., Planta med., 22, 103 (1972).

110. Spiegel F., J. Chromatogr., 39, 93 (1969).

111. Stahl E., Part, und Kosmetik, 39, 564 (1958).

112. Stahl E., Chromatographische und mikroskopische Analyse von Drogen.

G. Fischer-Verlag. Stuttgart, 1970.

113. Stahl E., Arch, pharm., 306, 693 (1973).

114. Stahl E., Kaltenbach U., J. Chromatogr., 5, 458 (1961).

115. Stahl E., Schorn P. I., Z. phys. Chem., 325, 263 (1961).

116. Stahl E., Schorn P. J., Naturwiss, 49, 14 (1962).

117. Stahl E., Schorn P. J., в кн.: Stahl E., Dunnschichtchromatographie. 2. Aufl.

Springer-Verlag. Berlin, 1967.

118. 5taW E., Trennheuser L., Arch. Pharm., 293, 826 (1960).

119. Stanley W. L., Vannier S. N.. J. Amer. Chem. Soc, 79, 3488 (1957).

120. Steinegger E., Gebistorf J., Pharm. Acta Helv., 38, 840 (1963).

121. Steinegger E., Gebistorf L, Sci. Pharm., 31, 298 (1963).

122. Steinegger E., Hovel H., Pharm. Acta Helv., 47, 133 (1972).

123. Swalah M., Ehusman В., Sidhu G. 5., Perf. Essent. Oil Res., 54, 295 (1963).

124. Sita F., Chmelova V., Chmel K-, Chromatograficka analysa drog. Sklarny Kavalier, n. p., Votice, 1973.

125. Ter Helde R., J. agr. food Chem., 20, 747 (1972).

126. Thieme H., Dietz V., Pharmazie, 28, 331 (1973).

127. Tschiersch В., Schwabe K-, Pharmazie, 29, 484 (1974).

462. Специальная часть 128. Tyihak E., Vagujfalvi D., Herba Hung., 1, 96 (1962).

129. Tyihak., Vagujfatvi D., Planta med., 15, 269 (1967).

130. Vashist V. N.. Handa K. L„ J. Chromatogr., 18, 412 (1965).

131. Wagner В., Horhammer H. P., Dtsch. Apoth.-Ztg., 108, 633 (1968).

132. Wagner H., Schaette R., Horhammer L., Hdlzl J., Arzneimittel-Forsch., 22, 1204 (1972).

133. Wagner H., Sprinkmeyer L., Arzneimittel-Forsch., 23, 749 (1973).

134. Walther K, Rimpler H., Leuckert C, Planta med., 14, 453 (1966).

135. Wasicky R., Analyt. Chem., 34, 1346 (1962).

136. Wellendorf M., Dansk Tijdskr. Farm., 37, 145 (1963).

137. Wildanger W., Herrmann K-, J. Chromatogr., 76, 433 (1973).

138. Wollenweber E., Lebreton P., Chadenson M., Z. Naturforsch., 27b, 567 (1972).

139. Wollrab V., Riechst., Aromen, Korperpflegemittel., 10, 321 (1964);

Chem.

Abstr., 62, 3881 (1965).

140. Zacsko-Szasz M., Szasz G., Fette Seifen, Anstrichmittel., 67, 332 (1965).

141. Zacsko-Szasz M., Szasz G., Herba Hung., 5, 91 (1966).

142. Grlic L., Acta pharm. jugosl., 20, 19 (1970).

143. Grlic L., Acta pharm. jugosl, 20, 35 (1970).

144. Grlic L., J. Chromatogr., 48, 562 (1970).

145. Hiller K., Woitke H. D., см. [82].

146. Chiesa E.P., Rondina R.V.D., Coussio J.D., J. Chromatogr., 87, 298 (1973).

147. Chrusciel T. L., Chrusciel M., Selected' Bibliography on Detection of depen­ dence-producing Drugs in Body Fluids. WHO, Geneva, 1975.

148. Klouwen M. H., Ter Heide R., Parf. und Kosmetik, 1962, 43, 195.

149. Korte F., Sieper H., J. Chromatogr., 13, 90 (1964).

150. Korte F., Sieper H., J. Chromatogr., 14, 178 (1964).

151. Nielsen., Dansk Tijdskr. Farm., 44, 359 (1970).

152. Paris M., Paris R. R., Bull. Soc. chim. France, 1973, 118.

153. Salaschek M., Matte A., Seifert R., J. Chromatogr., 78, 393 (1973).

154. Schantz M. von, Juvonen St., Hemming R., J. Chromatogr., 20, 618 (1965).

155. Stahl E., Chemiker-Ztg., 82, 823 (1958).

156. Stahl., Arch. Pharm., 297, 500 (1964).

157. Stahl., Jork H., in Stahl E. Dunnschicht-Chromatographie. 2. Aufl. Sprin ger-Verlag, Berlin, 1967.

158. Zeeuw R. A., de Wijsbeek J., Breimer D. D., Vree Т. В., Ginneken С. А. М., Rossum J. M., Science, 175, 778 (1972).

159. Deutsches Arzneibuch DAB 7. Akademie-Verlag, Berlin, 1971.

160. Farmakopea Polska 4, Warszawa, 1965. (sv. 1), 1970 (sv. 11).

161. Pharmacopea Helvetica 6. Bern, 1971.

ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ЛИТЕРАТУРА 162. Sherbeini A. E. A. El, Ansari M. A., Planta Med., 29, 129 (1976).

163. Subramanian R., Krishnamurthy G., J. Chromatogr., 107, 230 (1975).

164. Brombeer J., Stahl., Dtsch. Apoth.-Ztg., 117, 1841 (1977).

165. Эйдлер Я. И., Ганкина Г. Л., Шакиров Т. Т. Хим. природн. соед., 11, (1975).

166. Федорин Г. Ф„ Георгиевский В. П. Раст. ресурсы, 11, 266 (1975).

167. Innocenti G., Dall'Acqua F., Caporale G., Planta Med., 29, 165 (1976).

168. Lau-Cam G. A., J. Chromatogr., 151, 391 (1978).

169. Stahl., Herting D., Planta Med., 29, 1 (1976).

170. Trkovnik M., Kules M., Tabakovic I., Zecevic M., J. Chromatogr., 128, (1976).

171. Wierzchowska-Renke K-, Acta Polon. Pharm., 31, 225 (1974).

172. Geissler G., Arzneimittel-Forsch., 25, 511 (1975).

173. Hiermann A., Karting Т., J. Chromatogr., 140, 322 (1977).

Специальная часть 174. Hoton-Dorge M., J. Pharm. Belg., 29, 560 (1974).

175. Karawya M. S., Ghourab M. G., Egypt. J. Pharm. Sci., 15, 341 (1974);

Chem.

Abstr., 86, 111219y (1977).

176. Lohderfink J., Dtsch. Apoth.-Ztg., 116, 557 (1976).

177. Paris R. R., Faugeras G., Dobremez J.-F., Planta Med., 29, 32 (1976).

178. Paris R. R., Faugeras G., Peltier M., Ann. Pharm. Franc.,32, 397 (1974).

179. Sachse L, J. Chromatogr., 96, 123 (1974).

180. Schmid P. P., J. Chromatogr., 157, 217 (1978).

181. Schmidtlein H., Herrmann K-, J. Chromatogr., 123, 385 (1976).

182. Wasiewicz., Herba Pol., 19, 191 (1973);

Chem. Abstr., 80 (1974).

183. Woldecke M., Herrmann K-, Z. Naturforsch., 29C, 355 (1974).

184. Bertulli G., Mosca L., Pedroni G., Boll. Chim. Farm., 115, 714 (1976).

185. El-Feraly F. S., Elsohly M. A., Turner C.., Acta Pharm. Jugosl., 27, No. 1, 43 (1977);

Chem. Abstr., 86, 177376d (1977).

186. Lombroso L., Kanters S. L., Hollister L. E., Res. Commun. Chem. Pathol.

Pharmacol., 15, 697 (1976);

Chem. Abstr., 86, 65269q (1977).

187. Rao N. V. R., Current Sci;

., 1977, 46, No. 5, 140;

Chem. Abstr., 151125w.

188. Segelman А. В., Segelman F. P., J. Chromatogr., 123, 79 (1976).

189. Wheals В. В., Smith R. N.. J. Chromatogr., 105, 396 (1975).

190. Bleier W., Sci. Pharm., 44, 140 (1976).

191. Dietiker H., Huhlemann H., Pharm. Acta, Helv., 50, 340 (1975).

192. Hammouda F. M., Rizk A. M., Seif AL-Nasr M. M., Pharmazie, 29, (1974).

193. Hammouda F. M., Rizk A. M., Seif Al-Nasr M. M., Z. Naturfirsch., 29C, (1974).

194. Haznagy A., Gyogyszereszet, 21, No. 7, 247 (1977);

Chem. Abstr., 88, 41709y (1978).

195. Christ В., Poppinghaus Т., Wirtz-Peitz F., Arzneimittel-Forsch., 28, (1978).

196. Imre S., Oztunc A., Z. Naturforsch., 31C, 403 (1976).

197. Labadie R. P., Pharm. Weekbl., 110, 446 (1975).

198. Proske G., Dtsch. Apoth.-Ztg., 115, 801 (1975).

199. Stahl., Brombeer 1., Arch. Pharm., 311, 58 (1978).

200. Widen C.-J., Lounasmaa M., Vida G., Reichstein Т., Helv. chim. Acta, 58, 880 (1975).

201. Franck H. P., Dtsch. Apoth.-Ztg., 115, 1206 (1975).

202. Hiller К., Genzel 5., Murach M., Franke P., Pharmazie, 30, 188 (1975).

203. Kaku Т., Miyata Т., Uruno Т., Sako /., Kinoshita A., Arzneimittel-Forsch., 25, 343 (1975).

5.9. Неорганические вещества 5.9.1. Катионы 7( 5.9.1.1. Щелочные и щелочноземельные металлы В практической работе часто бывает необходимо отделить ка­ тионы щелочных и щелочноземельных металлов друг от друга.

Разделить их обычными аналитическими методами довольно трудно;

однако разработаны хроматографические методы, кото­ рые позволяют успешно разделять всю группу катионов щелочных и щелочноземельных металлов.

Сорбенты. Зайлер и Ротвейлер [46] отделяли Mg от Li, Na и К на слое силикагеля с крахмалом в качестве связующего ве 464 Специальная часть щества в системе растворителей абсолютный этанол — ледяная уксусная кислота (100:0,5). В своей последующей работе [47] Зайлер пользовался теми же сорбентом и системой для разделе­ ния я последующего определения К, Na и Mg. Другие исследова­ тели [20] разделяли на силикагеле в системе 0,1 М раствор иода в нитробензоле все ионы щелочных металлов и NH+ в форме по лииодидных комплексов. В то время как Фрей и Штйльман [10] при разделении неорганических смесей пользовались целлюлозой MN 300 (этим же сорбентом пользовался и Фанер [8] для отде­ ления Na и К от Са и Mg), Гальярди и Лйкуссар [12] брали для этой цели целлюлозу повышенной чистоты марки MN 300 HR.

Для разделения ионов щелочных и щелочноземельных металлов можно применять и некоторые менее обычные сорбенты, напри­ мер аммонийные соли некоторых гетерополикислот — фосфорно молибденовокислый, арсеномолибденовокислый или германомо либденвокислый аммоний и другие их производные [29, 30, 32].

Исида и сотр. [69] изучали разделение ионов щелочноземель­ ных металлов на микрокристаллической целлюлозе. Лепри и сотр. [75] исследовали подвижность ионов щелочных и ще­ лочноземельных металлов на этом же сорбенте.

Системы растворителей* Для этой группы катионов в качестве систем для хроматографирования чаще всего пользуются смесями низших алифатических спиртов, именно метанола и этанола, и водных растворов кислот различной концентрации. Упомянутые выше авторы [12] сравнивали подвижность катионов щелочно­ земельных металлов в системах метанол — концентрированная соляная кислота — вода (73:12:15), этанол — концентрирован­ ная соляная кислота — вода (73:12:15), метанол—этанол — концентрированная соляная кислота — вода (36:36:13:15) и ди оксан — концентрированная соляная кислота — вода (58 :12 :30).

Другие исследователи [10, 46, 47] применяли смесь этанола и уксусной кислоты в различных соотношениях. При работе на слоях солей гетерополикислот системами служили растворы нит­ рата и хлорида аммония.

Обнаружение. Для обнаружения ионов щелочных металлов щгиболее удобна виолуровая кислота (ДНО) [8, 20, 46, 47]. Не­ которые исследователи обнаруживали их радиометрическим спосо­ бом, пользуясь мечеными 24Na, 42К, MRb и ls7Cs [12, 29, 30]. Ионы щелочноземельных металлов обнаруживают растворами 8-окси хинолина в этаноле (Д 81 б) и (Д81г) [12].

Количественное определение, Зайлер [47] описал способ ко­ личественного определения Na, К и Mg* После реакции с вио луровой кислотой он оценивал пятна планиметрически — вычис­ лением их площади. Фрей и Штйльман [10] определяли щелоч­ ноземельные металлы эмиссионной спектроскопией после обна­ ружения раствором 8-оксихииолина.

Специальная часть 5.9.1.2. Тяжелые металлы Тяжелые металлы часто присутствуют в ничтожных количе­ ствах как нежелательные примеси в целом ряде синтетических лекарственных средств и других веществ. Поэтому применение тонкослойной хроматографии для анализа и выделения тяжелых металлов имеет огромное значение.

Сорбенты. Зайлер и Зайлер [44] подвергали разделению на силикагеле G катионы Hg, Bi, Cd, Pb и Си. Силикагелем G поль­ зовались и другие исследователи [9, 18, 49, 51, 54, 66, 79, 80, 82].

Икеда и Огума [19] готовили слой сорбента из суспензии сили кагеля в 0,01 М водном растворе Na 2 HAs0 4 и делили на нем кати­ оны Cd, Fe, Bi, Си, Pb и iNi. Микетюкова и Фрей [34, 35] для раз­ деления некоторых тяжелых металлов пользовались готовыми пластинками силикагеля Eastman № 6064, содержащими в каче­ стве связующего поливиниловый спирт. Галик и Винцбурова [15] делили хелаты некоторых металлов на силуфоле. Силикагель с крахмалом как связующим применялся и в работе [31]. Зенф [50] использовал смешанные слои силикагеля D и окиси алюми­ ния D в отношении 1:1.

Некоторые исследователи подвергали разделению катионы тяжелых металлов на силикагеле, пропитанном жидким ионооб менником. Бринкман и сотр. [2, 3, 64, 70] исследовали подвиж­ ность ионов Ag, Ni, Мп, Со, Zn, Си, Pb, Fe(III), Sb и Bi на сили­ кагеле, пропитанном 0,1 М растворами жидких ионитов в хлоро­ форме, и одновременно сравнивали свойства жидких ионитов на основе замещенных аминов с длинным алифатическим остатком — амберлита LA-1 (N-додеценилтриалкилметиламин), амберлита LA-2 (N-лаурилтриалкилметиламин), примена JM-T (три-н-ал килметиламина с 18—24 атомами углерода в алифатическом ос­ татке), иодида тетрагексиламмония, триизооктиламина, три-н-ок тиламина, трибензиламина, аликвата 336 (хлорида метилкаприл аммония), аламина 336 (трикаприламина) и др. В-качестве сор­ бента пользовались силикагелем, обработанным 0,1 М и 0,04 М растворами окиси три-к-октилфосфина и 0,2 М раствором три-н бутилфосфата в хлороформе [4]. Огума [37]. разделял смесь катионов на смешанном слое силикагеля и целлюлозы ( 5 : 2 ), обработанном полисульфидом тиокол LP-32.

Окисью алюминия в хроматографии неорганических соедине­ ний пользуются сравнительно мало. Хашми и сотр. [17, 58] раз­ работали способ определения Си, Со и Ni после выделения из смеси 40 различных катионов на окиси алюминия G (Merck) круговым хроматографированием;

окись алюминия они применяли и в своей следующей работе [18]. Фрей и Райан [9] и упомяну­ тые ранее авторы [15] пользовались окисью алюминия только в смесях с другими сорбентами.

4^6 Специальная часть Многие исследователи применяли микрокристаллическую цел­ люлозу. Зай и сотр. [56] и другие [11, 14, 31, 42] применяли цел­ люлозу MN 300. Шольич и сотр. [53, 85] отделяли Ga от Fe, A1, In и Ti на слоях целлюлозы (Merck). Просперй и Ледерер [43] сравнивали деление тяжелых металлов на некоторых готовых слоях целлюлозы фирмы Macherey—Nagel. Мюррей и Пасарелли [36] разделяли Со, Fe и Zn на слоях целлюлозы MN 300 G, про­ питанных жидким ионитом аликват 336 или изооктиламином.

Лепри и сотр. [27] применяли для разделения тяжелых и щелоч­ ноземельных металлов смешанные слои смолы дауэкс-50-Х4 и кар боксиметилцеллюлозы (1:1) и слои смолы дауэкс-50-Х4. Курода и сотр. разделяли Rh и 1г на ДЭАЭ-целлюлозе в 2 н. серной кис­ лоте [74].

Кениг и сотр. подвергали разделению тяжелые металлы вме­ сте с щелочноземельными металлами на слоях гипофосфита цир­ кония Т22] и на слоях CePS, т. е. Се1^ — Р0 4 — S0 4 (1 :1,21:0,29) [23]. При делении тяжелых металлов пользовались также поли­ амидом [26]. Такесита и сотр. [55] разделяли смесь ртутьоргани ческих соединений с органическим остатком различной длины на смешанном слое крахмала и авицеля-SF с жидким парафином в качестве неподвижной фазы.

Ломюллер и сотр. '[76] воспользовались тонкослойной хро­ матографией для разработки условий разделения Hg, Cu, Zn, Ni, Со, Pb и Cd методом жидкостной хроматографии под давлением.

Системы растворителей. Для разделения тяжелых металлов тонкослойной хроматографией на силикагеле, целлюлозе или окиси алюминия системами растворителей служат большей ча­ стью смеси низших алифатических спиртов или кетонов с водны­ ми растворами сильных кислот. Покорный [42] для отделения железа(II) от железа(III) пользовался смесью этанола, м-пропа нола, к-бутанола, вгор-бутанола, грег-бутанола или нзобутанола с 6 н. соляной кислотой в отношении (75:25). Со смесями спиртов с соляной кислотой различной концентрации работали и другие исследователи [11, 26, 34, 35, 42, 43, 44, 53, 56]. Японские авторы [19, 37] разделяли Cd, Fe, Bi, Cu, Pb и Ni в смесях метанола или этанола с азотной кислотой. Гальярди и Покорный [14] отделяли Со от металлов третьей группы в системе ацетон — метилэтилке тон—6 н. соляная кислота (50:25:25), другие авторы [17] раз­ деляли Си, Со и Ni в системе ацетон — ацетилацетон — 4 н. соля­ ная кислота (91:4 :5). Фрей и Райан [9] подвергали разделению Ni, Mn, Cr, Co, Zn, Cu и Fe в системах ацетон — ацетилацетон — концентрированная кислота (100:1:0,5) и метилэтилкетон — кон­ центрированная соляная кислота — вода (15:3:2).

Для деления катионов на слоях, пропитанных жидким ионо обменником, в качестве системы растворителей пользовались вод­ ными растворами одноосновных кислот, именно соляной [2, 4, 36], •'•• '*№ Специальная часть фтористоводородной [6], азотной, бромистоводородной, йодисто водородной, роданистоводородной и хлорной [3], а также серной кислотой [7] и водным раствором хлорида лития [36].

При помощи некоторых комплексообразующих агентов катио­ ны можно делить в форме их хелатов. Зенф [49] разделял Hg, Pb, Cu, Bi и Cd в виде диэтилдитиокарбаматов, в других исследо­ ваниях пользовались хелатообразующей способностью 1-нитрозо 2-нафтола для разделения Fe(II), Fe(III), Co(III), Mn и Ni [50] или салицилальдоксима для разделения Со, Ni, Fe, Mn, Си и Bi [51]. Шольич [54] отделял Аи от Fe, БЬиОавформе комплексовс родамином В. Галик и Винцоурова [15] разделяли Со, Ni и Fe в форме хелатов с 1-(2'-пиридилазо)-2-нафтолом. Си и Со уда­ лось разделить в форме различных диалкилдитиокарбаматов [60]. Юи и сотр. [59] использовали тетрафенилпорфирин в каче­ стве комплексообразующего агента для разделения двухвалент­ ных катионов. Мухова и Иокль [62] разделили 17 катионов в ви­ де 8-оксихинолятов, дитизонатов и диэтилдитиокарбаматов. Было исследовано также разделение Mn, Fe, Сг, Со, Ni, Си, Zn, Cd и Hg в форме хелатов с ЭДТА [61].

Разделение тяжелых и щелочных металлов в форме комплек­ сов с ацетилацетоном на силикагеле и окиси алюминия в органи­ ческих растворителях описали Хэуорт и сотр. [67]. Пал и сотр.

[78] разделяли Си, Со, Mo, U, V, Ti и Fe на окиси алюминия в присутствии салицилгидроксамовой кислоты как комплексообра­ зующего агента. Сарваш и сотр. [84] исследовали влияние при­ меси рутина в системе на разделение Ti, W, UOsT, Mo, Al и Fe.

Обнаружение. Для обнаружения катионов тяжелых металлов пользуются обычными в качественном анализе цветными реак­ циями. Зайлер и Зайлер [44] детектировали Hg, Bi, Cd, Pb и Си иодидом калия и аммиаком (Д107), a Fe, Zn, Co, Mn, Cr, Ni и Al — 8-оксихинолином (Д81а). С этим же реактивом работали и другие авторы [36] (Д 81г) и i[37] (Д81в). Некоторые [9, 17] обнаруживали Си, Со и iNi рубеанововодородной кислотой (Д 128).

Ализарин (Д1) применяли для обнаружения Ga, Fe, Al, In и Ti [53], действием дитизона (Д51) обнаруживали тяжелые метал­ лы [22] и ртутьорганические соединения [55]. Микетюкова и Фрей [38, 39] и другие [22] пользовались раствором пиридилазо нафтола (Д170а). Фродыма и Зай [11] детектировали Ni ди метилглиоксимом (Д43), Си — неокупроином (Д 150) и Zn — ди метилнафтидином (Д44). Диметилглиоксимом пользовались так­ же Икеда и Огугла [19]. Для обнаружения Zn удобен дифенил карбазид (Д29) [36]. Упомянутые выше авторы [14] обнаружи­ вали Со, а также Fe(II) и Fe(III) 2%-ным раствором морфолин N-дитиокарбоновой кислоты [42].



Pages:     | 1 |   ...   | 12 | 13 || 15 | 16 |   ...   | 19 |
 





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.