авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:     | 1 |   ...   | 9 | 10 || 12 | 13 |   ...   | 19 |

«Doc. RNDr. PhMr. Magda SAR50NOVA, DrSc. RNDr. Vladimir SCHWARZ, CSc. RNDr. Cestmir MICHALEC A kolektiv CHROMATOGRAFIA NA TENKYCH VRSTVACH VO ...»

-- [ Страница 11 ] --

127. Knobloch E., Krenovd L, Int. Z. Vitaminforsch., 39, 131 (1969).

128. Kritchevsky D., Tapper S. A., J. Chromatogr., 37, 361 (1968).

129. Krol G. I., Boyden G. R., Moody R. H., Comeau J. C, Kho В. Т., J. Chroma togr., 61, 187 (1971).

130. Kuramoto Т., Kikuchi H., Sanemori H., Hoshita Т., Chem. pharm. Bull., 21, 952 (1973).

131. Kuwada S., Hori M., Chem. pharm. Bull., 12, 298 (1964).

132. Lambertsen G., in: Stahl E., Dunnschicht-Chromatographie. 1. Aufl., Sprin ger-Verlag, Berlin, 1962.

133. Levorato C, Farmaco (Pavia), Edizione Pratica, 24, 227 (1969);

Chem. Abstr., 70, 118146 (1969).

134. Lewis R. W., Lipids, 8, 321 (1973).

135. Lisboa B. P., Acta Endocr., 43, 47 (1963).

136. Lisboa B. P., J. Chromatogr., 39, 173 (1969).

137. Lisboa B. P., Steroids, 7, 41 (1966).

138. Lisboa B. P., Steroids, 8, 319 (1966).

139. Lisboa B. P., Diszfalusy E., Acta Endocr., 40, 60 (1962).

140. Lisboa B. P., Dissfalusy E., Acta Endocr., 43, 545 (1963).

141. Lovelady H. G., J. Chromatogr., 78, 449 (1973).

142. Lowry R. R., J. Lipid Res., 9, 397 (1968).

143. Ludwig E., Freimuth U., Nahrung, 8, 563 (1964).

144. Manes H., Flueckiger В., Schneider D. L., J. agr. food Chem., 20, (1972).

145. Mangold H. K-, Malins D. C, J. Amer. Oil Chem. Soc, 37, 383 (1963).

146. Massaglia A., Rosa U., J. Chromatogr., 14, 516 (1964).

147. Masukawa W. A., Parkhurst R. M., J. Chromatogr., 14, 69 (1964).

148. Matschiner R., Bell H., Amelotti J. M., Knauer T. F., Biochim. Biophys. Acta, 201, 309 (1970).

149. Matthews J. S., Pereda A. L. V., Aguilera A. P., J. Chromatogr., 9, (1962).

150. McCarthy J. L., Brodsky A. L., Mitchell J. A., Herrscher R. F., Analyt. Bio chem., 8, 164 (1964).

151. Mieten T. A., Ahrens E. H. jr., Grundy S. M., J. Lipid Res., 6, 311 (1963).

152. Mirhom Y. W., Clin. Chim. Acta, 30, 347 (1970).

153. Mooney R. P., Pasarela N. R., J. agrgfood Chem., 14, 12 (1966).

154. Mottier M., Mitt. Cebiete Lebensmitt. Unterss. Hyg., 43, 118 (1952).

155. Nair P. P., Pinelli A., J. Chromatogr., 47, 513 (1970).

156. Nau H., J. Chromatogr., 53, 391 (1970).

157. Neuninger H., Sci. Pharm., 33, 230 (1965).

158. Norman A. W., de Luca H. N.. Analyt. Chem., 35, 1247 (1963).

159. Nurnberg E., Dtsch. Apoth. Ztg., 101, 142 (1961).

160. Nyqvist S. E., Ban R., Morre D. J., Biochim. Biophys. Acta, 208, 532 (1970).

161. Ono Т., Vitamins (Kyoto), 30, 280 (1964).

162. Parakh С. К., Bell N. H., J. Chromatogr., 20, 407 (1965).

163. Passera C, Pedroth A., Ferrari G., J. Chromatogr., 14, 289 (1964).

344 Специальная часть 164. Pennock J., Dunphy P., in: Stahl E., Dunnschicht-Chromatographie, 2. Aufl., Springer-Verlag, Berlin, 1967, 274.

165 Penzes L, Menzel P., Oertel G. №., J. Chromatogr,, 44, 189 (1969).

166. Petrovic S. E., Bella B. E., Mukalovlc D. В., Analyt. Chem., 40, (1968).

167 Planta C, Schwleter U., Chopard-dit-Jean L., Ruegg R., Issler 0., Helv.

chim. Acta, 45, 548 (1962).

168. Pomonis J. G., Severson R. F., Freeman P. I., J. Chromatogr., 40, (1969).

169. Popova I., Popov K-, Hieva M., J. Chromatogr., 21, 164 (1966).

170. Popova L, Popov K-, lUeva M., J. Chromatogr., 24, 263 (1966).

171. Porgesova O., Porges E., J. Chromatogr., 24, 478 (1966).

172. Rabek V., Pitra J., Horak P., Prochazka I., Chundela В., Votruba M., Sbirka pfedpisu pro aplikaci desek Silufol. 1. Dil. Sklarny Kavalier, n. p., Sazava, zavod Votice. (Сборник инструкций по применению пластинок силуфол, ч. 1, Изд-во з-да Вотице, Сазава, ЧССР.) 173. Rebel G., Mandel P., Biochem. Biophys. Acta, 98, 380 (1965).

174 Returners V., Schmitt H., Solbach H. G., Staib W., Zlmmermann H., J. Chro matogr., 32, 760 (1968).

175 Repole R., Gasbarro R., Maglione S., Rossi P., Biochim. Appl, 12, (1965), Chem. Abstr., 64, 20112 (1966).

176. Roder E., Dtsch. Apoth. Ztg., 107, 1007 (1967).

177. Rougham P. G., J. Chromatogr., 29, 293 (1967).

178. Ruegg R., Issler O., Planta med., 9, 386 (1962).

179 Sachweh H., Seidenglanz G., Richter J., Arzneimittelstandartisierung, 7, (1966), Chem. Abstr., 67, 25428 (1967).

180. Sanders G. M., Harrlnga E., Rec. Trav. Chim., 83, 665 (1964).

181. Scavino C., Chiaramonti D., J. Pharm. Belg., 20, 204 (1965).

182. Segura R., Ord J., Zlatkls A., J. Chrom. Sci., 8, 449 (1970).

183. Seher A., Fetten, Seifen, Anstrichmittel, 73, 557 (1971).

184. Seher A., Microchim. Acta, 1, 308 (1961).

185. Seher A., Nahrung, 4, 466 (1960).

186. Seher A., Homberg E., Fetteg Seifen, Anstrichmittel, 73, 55 (1971).

187. Semenuk G., Beher W. Т., J. Chromatogr., 21, 27 (1966).

188. Shaw H. W. C, Jefferies I., Holt Т. Е., Analyst, 82, 26 (1952).

189. Shepherd 1. S., Ross L. F., Morton I. D., Chem. Ind. (London), 1966, 1706.

ч 190. Schindke H., J. Chromatogr., 14, 123 (1964)., 191. Schneider G., Schneider C, Z. Physiol. Chem., 232, 316 (1963).

192. Schorn H., Winkler C, J. Chromatorg., 18, 69 (1965).

193. Schwarz V., Protlva J., Cs. farm., 16, 126 (1967).

194. Simard M. В., Lodge B. A., J. Chromatogr., 51, 517 (1970).

195. Singh H., John J., Cama R., J. Chromatogr., 75, 146 (1973).

196. Skinner W. A., Parkhurst R. M., J. Chromatogr., 13, 69 (1964).

197. Skinner W. A., Parkhurst R. M., Alaupovic P., J. Chromatogr., 13, (1964).

198. Sklan D., Budowski P., Analyt. Chem., 413, 200 (1973).

199. Smith E. C, Metzler D., J. Amer. Chem. Soc, 85, 3285 (1963).

200. Smith L. L., Foell Т., J. Chromatogr., 9, 339 (1962).

201. Smith L. L., Matthews W. W., Price J. C, Bachmann R. C, Reynolds В., J. Chromatogr., 27, 187 (1967).

202. Stahl E., Arch. Pharm., 292, 411 (1959).

203. Stahl E., Chemiker-Ztg., 82, 323 (1958) 204. Stahl E., Pfeifle J., Z. analyt. Chem., 200, 377 (1964).

205. Stevens P. I., Turner А. В., J. Chromatogr., 43, 282 (1969).

206. Stiehl A., Wollenweber J., Wagener H., J. Chromatogr., 43, 278 (1969).

Специальная часть 207. Stowe H. D., Arch. Biochem., 103, 42, (1963).

208. Strohecker R., jr., Henning H., Vitamin-Bestimmungen, Verlag Chemie, Wein heim, 1963.

209. Strohecker R. jr., Pies H., Z. Lebensmitt. Unterss., 118, 349 (1966).

210. Struck H., Microchim. Acta, 1961, 634.

211. Subbiah M. Т., Kuksis A., J. Lipid Res., 9, 288 (1968).

212. Sundaram G. S., Singh H., Sodhi H. S,, Clin. Chim. Acta, 34, 425 (1971).

213. Sundaram G. S., Sodhi H. S., J. Chromatogr., 34, 425 (1971).

214. Szonyi D. G., Kovacs K-, Matkovics В., Microchim. J., 18, 215 (1973).

215. Skdrka В., Chem. zvesti, 22, 794 (1968).

216. Templeton R. I., Arnett W. A., Jakovljevic I. M., J. pharm. Sci., 57, (1968).

217. Thielemann H., Microchim. Acta, 1972, 227.

218. Thomen H., Chemia, 15, 433 (1961).

219. Thompson I. N.. Erdody P., Brien R., Morway Т. К., Biochem. Med., 5, (1971).

220. Touchstone J. C, Balin A. K-, Knapstein P., Steroids, 13, 199 (1969).

221. Touchstone J. C, Balin A. K-, Murawec Т., Kasparow M., J. Chrom. Sci., 8, 443 (1970).

222. Touchstone 1. C, Murawec Т., Brual O., J. Chromatogr., 37, 359 (1968).

223. Touchstone I. C, Murawec Т., Kasparow M., Wortman W., J. Chromatogr., 66, 172 (1972).

224. Treiber I., Rindt W., Oertel G. W., J. Chromatogr., 24, 480 (1966).

225. Tung Y. Ch., Wang К- Т., Nature, 208, 581 (1965).

226. Vaedtke J., Gajewska A., J. Chromatogr., 9, 345 (1962).

227. Vachek J., Kakdc В., Sarsunova M., Cs. farm., 16, 229 (1967).

228. Vandenheuvel F. A., J. Chromatogr., 38, 373 (1968).

229. Van der Venne M. Th., T. Siobbel J. В., J. Pharm. Belg., 19, 332 (1964).

230. Varma T. N. R., Morway Т. К-, Analyt. Chem., 36, 1864 (1964).

231. Varon H. H., Darnold H. A., Murphy M., Forsythe J., Steroids, 9, (1967).

232. Veluz L., Amicard G., Petit A., Bull. Soc. Chim. France, in press.

233. Vlassak W., Willems G., J. Pharm. Belg., 19, 195 (1964).

234. Vroman H. E., Cohen Ch. F., J. Lipid Res., 8, 150 (1967).

235. Vuilleumier J. P., Brubacher G., Kalivoda G., Helv. chim. Acta, 46, (1963).

236. Wagner H., Dengler В., Biochem. Z., 336, 380 (1962).

237. Wagner H., Horhammer L., Dengler В., J. Chromatogr., 7, 211 (1962).

238. Wahba S. K-, Amin S. W., Nazmy R., J. pharm. Sci., 57, 1231 (1968).

239. Waldi D, Arch. Pharm., 33, 1 (1963).

240. Waldi D., in: Stahl E., Dunnschicht-Chromatographie. 2. Aufi., Springer-Ver lag, Berlin, 1967, 286.

241. Watson D. J, Bartosik D., J. Chromatogr., 54, 91 (1971).

242. Weber F., Wiss C, Helv. physiol. pharmacol. Acta, 21, 131 (1963).

243. West С D., Chavre V. J., Wolfe M., J. clin. Invest., 44, 1109 (1965).

244. Whitte K- J-, Pennock G. F., Analyst, 92, 423 (1967).

245. Wientjes H. J. M., de Zeeuw R. A., Wijsbeek J., J. Lipid Res., 11, (1970).

246. Winter stein A., Hegedus В., Z. physiol. Chem., 321, 97 (1960).

247. Winterstein A., Hegedus В., Chimia, 14, 18 (1960).

248. Winterstein A., Studer A., Ruegg R., Chem. Ber., 93, 2951 (1960).

249. Wright R. S., J. Chromatogr., 1968, 37, 363.

250. Wright R. S., J. Chromatogr., 1971, 59, 220.

251. Yamada M., Saito A., Bitamin, 1964, 29, 300.

252. Yoshida M., Veda J., Making-Yamashita O.t Bitamin, 1965, 31, 115.

253. Adamski R./Dobrucki R., Marchlewska В., Farm, pol., 1974, 30, 1023.

23- 346 Специальная часть 254. Berger J. A., Meynel G., Petit J., Blanquet P., Bull. Soc. chim. France, 1963, 2662.

255. Blesova M., Zahradnliek M., Cs. farm., 1974, 23, 303.

256. Frgacic S., Kniewald Z., J. Chromatogr., 1974, 94, 291.

257. Grochulski A., Acta Pol. pharm., 1975, 32, 715.

258. Huang T. L., Nichols B. L., J. Chromatogr., 1974, 101, 235.

259. Huang T. L., Nichols B. L, J. Chromatogr., 1975, 109, 427.

260. Chelkowski J., Holyniewska-Codlewska В., Przem. Spozyw., 28, 440 (1974);

Chem. Abstr., 82, 123434 (1975).

261. Ikawa S., Goto M., J. Chromatogr., 114, 237 (1975).

262. Joneidi M., Koleva M., Budevsky O., Pharmazie, 30, 453 (1975).

263. Kammerl E., Mutschler E., Pharm. Acta Helv., 50, 269 (1975).

264. Li B. S., Kim D. H., Ryv G. O., Punsoh Hwahak, 12, No. 3, 112 (1974);

Chem.

Abstr., 83, 4085 (1975).

265. Lisboa B. P., Hoffmann U., J. Chromatogr., 115, 177 (1975).

266. Lockwood G. В., Brain K. R-, Turner T. D., J. Chromatogr., 95, 250 (1974).

267. Rienzi R., Girilli G., Rocchi R., Tec. Molitoria, 25, 811 (1974);

Chem. Abstr., 82, 137815 (1975).

268. Sable-Amptis R., Agid R., Abadie D., J. Chromatogr., 94, 287 (1974).

269. Schroeder I., Lopez-Sanchez G., Medina-Acevedo J. G., del Carmen Espino za M., J. Chromatogr., 13, 37 (1975).

270. Thielemann H., Pharmazie, 30, 336 (1975).

271. Torre Noceda V., Inaraja E., Cienc. Ind. Farm., 5, 203 (1973);

Chem. Abstr., 82, 160314 (1975).

ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ЛИТЕРАТУРА 272. Adamski R., Dobrucki R., Marchlewska В., Farm. Pol, 30, 1023 (1974);

Chem.

Abstr., 82, 175273m (1975).

273. Богословский Н. А., Лопотько Н. В., Провотор В. С, Хорина О. П., Острин ская Н. В. Хим.-фарм. ж., 8, № 5, 56 (1974).

274. Doboszynska В., Lipka E., Chemia anal. (Warszawa), 21, 673 (1976).

275. Fung У. К-, Rahwan R. G., Sams R. A., J. Chromatogr., 145, 528 (1978).

276. Li B. S., Kim D. H., Ryu G. O., Punsoh Hwahak, 12, No. 3, 112 (1974);

Chem. Abstr., 83, 4085t (1975).

277. Muller-Mulot W., Rohrer G., Medweth R., Fette, Seifen, Anstrichmittel., 78, 257 (1976).

278. Muller-Mulot W., J. Am. Oil Chem. Soc, 53, 732 (1976).

279. Rittich В., Simek M., Krska M., Cs. farm., 25, 65 (1976).

280. Rittich В., Simek M., Coupek I., J. Chromatogr., 153, 345 (1977).

281. Ruh T. S., J. Chromatogr., 121, 82 (1976).

282. Сергеева Н. В., Захарова Н. Л. Фармация, 26, № 1, 34 (1977).

283. Степанова И. В., Аман М. Б. Рыбн. хоз-во, № 1, 75 (1977).

284. Sirec M., et al., Chromatographie, 11, 217 (1978).

285. Baczyk S., Szczesniak L., Acta Pol. Pharm., 32, 347 (1975).

286. Blesova M., Zahradnicek M., Cs. farm., 23, 303 (1974).

287. Blesova M., Zahradnicek M., Venerkova J., Hlavdcova M., Cs. farm., 27, (1978).

288. Davidek J., et al., J. Chromatogr., 140, 316 (1977).

289. Frgacic P., Kniewald Z., J. Chromatogr., 94, 291 (1974).

290. Gaudiano A., Bellomonte G., Sanzini E., Gilardi G., Renzi M., Ann. 1st. Super.

Sanita, 13, 783 (1977);

Chem. Abstr., 89, 204279v (1978).

291. Geisler C, Arzneimittel-Forsch., 25, 511 (1975).

292. Joneidi M., Koleva M., Budevsky Q., Pharmazie, 30, 453 (1975).

293. Mahuren J. D., Coburn S. P., Anal. Biochem., 82, 246 (1977).

294. Navon A., Levinson H. Z., Z. Naturforsch., 290, 777 (1974).

295. Chmel K., Biochem. clin. bohemoslov., 2, 211 (1974).

Специальная часть 296. Kohli I. С, Ann. Chim. (Paris), 10, No. 3, 145 (1975);

Chem. Abstr., 84, 12086e (1976).

297. Scott R. M., Sawyer R. Т., Microchem. J., 20, 309 (1975).

298. Берлянд А. С, Зац А. А., Колбенева Г. И., Книжник А. 3. Исслед. в обл.

фарм. хим., 1975, 65.

299. Egert D., J. Chromatogr., 135, 481 (1977).

300. Cavina G., Moretti G., Petrella M., J. Chromatogr., 103, 368 (1975).

301. Szonyi D. G., Matkovics В., Microchem. J., 20, 278 (1975).

302. Amin M., Jakobs U., J. Chromatogr., 131, 391 (1977).

303. Vanderhaeghe H., Hoebus J., J. Pharm. Belg., 31, 25 (1976).

304. Petrovic J. A., Petrovic S. M., J. Chromatogr., 119, 625 (1976).

305. Stanciu Т., Farmacia (Bucuresti), 119, 625 (1976).

306. Knights B. A., Anal. Biochem., 80, 324 (1977).

307. Szonyi D. G., Matkovics В., Microchem. J., 20, 269 (1975).

308. Touchstone J. C, Dobbins M. F., Hirsch С Z., Baldino A. R., Kritchevsky D., Clin. Chem., 24, 1496 (1978).

309. Beke R., De Weerdt G. A., Parijs I., Huybrechts W., Barbier F., Clin. Chim.

Acta, 70, 197 (1976).

310. Goldberg W. M., J. Chromatogr., 134, 246 (1977).

5.6. Лекарственные средства и вещества природного происхождения 5.6.1. Алкалоиды Алкалоиды представляют собой азотсодержащие соединения основного характера растительного происхождения;

они имеют чрезвычайно разнообразное строение и обладают большим теоре тическим и практическим значениями. Многие из этих веществ являются ценными лекарственными средствами;

тонкослойная хро матография сделалась незаменимой для их аналитического конт роля, для токсикологических исследований и для борьбы с нарко манией.

В этой главе мы придерживаемся деления алкалоидов на груп пы по их растительным источникам, не учитывая химического строения.

Сорбенты. Как и для всех других органических соединений, для алкалоидов чаще всего пользуются силикагелем. Ввиду слабо кислотного характера силикагеля алкалоиды адсорбируются на нем довольно прочно, поэтому следует пользоваться либо подще лоченным силикагелем, либо — что оказывается удобнее — вво дить в систему растворителей компонент основного характера.

Подщелачивание силикагеля чаще всего осуществляют с помощью 0,5 н. КОН;

иногда, однако, достаточно подвергнуть его действию паров аммиака. Некоторые слабоосновные алкалоиды можно раз делять и на обычном силикагеле в более полярных проявляющих системах растворителей.

Удобным сорбентом является также окись алюминия, приме няемая большей частью без какой-либо специальной обработки.

23* 348 Специальная часть Хороших результатов достигают иногда на незакрепленных сло ях окиси алюминия. Для разделения некоторых групп алкалоидов получает все большее распространение распределительная хрома тография, обычно на слоях целлюлозы, пропитанной формамидом.

Этот способ имеет значительные преимущества главным образом при разделении структурно близких веществ, которые оказывается невозможным делить с помощью адсорбционной хроматографии.

Обычно работают с готовыми слоями силикагеля, окиси алюми ния и целлюлозы. Изредка применяется в качестве сорбента крах мал;

слои толщиной до 5 мм служат для препаративных целей.

Удобством этого материала оказывается ничтожная задержка ве ществ [2]. Лепри и сотр. [321] подвергали алкалоиды разделе нию на слоях ионитов.

Следует упомянуть любопытное предложение Симона и Леде рера [308] -применить в тонкослойной хроматографии алкалоидов известный прием газовой хроматографии. Авторы рекомендуют для разделения данной смеси алкалоидов пользоваться одной и той же системой растворителей на нескольких различных сорбентах.

Для хроматографии алкалоидов это система н-бутанол — уксусная кислота — вода (45:3:12), а сорбенты — целлюлоза, ацетилцел люлоза, окись алюминия и силикагель. Значения RF, найденные на различных сорбентах при применении одной системы раствори телей, представляют собой значительно лучшую характеристику веществ, чем величины для одного сорбента. Если заменить (по предложению К. Мака) каждый интервал значений RF опреде ленной буквой, например 0,00—0,05 обозначить А, для каждого вещества, подвергнутого хроматографированию на этих четырех сорбентах, получим группу из четырех знаков («слово»). На при мере 16 алкалоидов было показано, что ни в одном случае такие «слова» не повторялись, что подтверждает удобство предложенной характеристики веществ. Танелл идентифицировал алкалоиды в моче [322].

Системы растворителей. Для хроматографирования алкалои дов на тонких слоях силикагеля большей частью пользуются систе мами с добавлением компонента основного характера, чаще всего органического основания, например диэтиламина или пиридина, а также системами, в которые входит аммиак. Обычной составной частью систем, применяемых для хроматографирования на сили кагеле, служит хлороформ, как правило в смеси с низшим спир том, например метанолом, этанолом или изопропанолом. Для сло ев окиси алюминия помимо хлороформа часто пользуются бензо лом, также в смеси с низшим алифатическим спиртом. Выбор систем ничем не ограничен, и какую-либо данную смесь веществ можно одинаково удобно делить с помощью различных систем.

Обнаружение. Наиболее употребительным реактивом для об наружения алкалоидов, как и в хроматографии на бумаге, оказы Специальная часть вается реактив Драгендорфа, обычно в модификации Мюнье (Д 53). Недостатком способа является одинаковая окраска пятен исследуемых алкалоидов. Поэтому в настоящее время стал нахо дить большее распространение иодоплатинат калия (Д109), кото рый образует пятна характерных цветов с рядом алкалоидов;

поль зуются также сернокислым церием (Д180). Ряд алкалоидов обна руживает флуоресценцию в ультрафиолетовом свете. Это явление известно главным образом для алкалоидов спорыньи, однако та ким образом можно обнаруживать и значительное число алкалои дов иных типов, например некоторые алкалоиды раувольфии. Для количественного колориметрического определения пользуются главным образом реактивом ван Урка (Д 39). Обнаружение ио дом удобно при хроматографировании алкалоидов ипекакуаны;

для недеструктивного обнаружения алкалоидов (например, при препаративном выделении или при количественных определениях) пары иода можно рекомендовать лишь с оговоркой. С помощью инфракрасной спектроскопии было найдено, что некоторые веще ства, главным образом с третичным азотом, при действии иода образуют комплексы N-HI-I 2 ;

иногда может происходить и насы щение двойных связей [229, 230]. Некоторые авторы даже приме няли пары иода для химического превращения алкалоидов;

при этом могут образоваться продукты, облегчающие идентификацию.

Иод действует как окислитель с невысоким окислительным потен циалом (около +0,4 В), и первым продуктом одноэлектронного окисления является катион-радикал который с данной молекулой может реагировать различным обра зом [266].

К универсальным неспецифическим реактивам относится М,2,6-трихлор-я-бензохинонимин. Его применяют в виде 0,1%-ного раствора в смеси 9 частей хлороформа и 1 части диметилсульфок сида (перед этим растворители насыщают бикарбонатом натрия).

На слой дают действовать парам аммиака, чем повышается чувст вительность определения [318]. Алкалоиды, относящиеся к пер вичным и вторичным аминам, можно обнаруживать также флуо : / рескамином (4-фенилспиро/фуран-2 (ЗН),1'-фталан/-3,3 -дион) в виде 0,02%-ного раствора в безводном ацетоне [304].

Прочие реактивы, главным образом специфические, будут упо мянуты при отдельных группах алкалоидов.

5.6.1.1. Алкалоиды спорыньи Алкалоиды спорыньи подразделяются на несколько основных групп — группы эрготамина, эргометрина, эрготоксина и менее важную группу клавина. Хроматографии этих веществ посвящено Специальная часть Специальная часть 350 Таблица алкалоидов спорыньи Значения hRF некоторых Окись кагель Целлюлоза Сили алюминия (формами д) Вещество ею а С7 С8 С9 СИ С12 С С6 С14 С15 С16 С С сз С С С 0 (0) 68 0 Лизергиновая кислота Дигидролизергиновая кислота 45 (29) 6 22 ЛСД 14 (3) 11 13 64 3 17 12 24 6 2 Эргометрин (эргобазин, эргоновин) 62 44 14 25 39 12 Эргометринин 16 59 31 43 42 16 65 9 10 Эрготамин 64 (37) 48 ' 68 73 34 24 51 78 48 42 Эрготаминин 21 12 Дигидроэрготамин 74 (66) 54 70 56 51 38 26 75 37 Эр гокр истин 9 80 62 70 81 61 57 74 35 83 Эргокристинин 0 38 42 30 Дигидроэргокристин 15 41 67 58 59 33 75 Эргокорнин 10 83 81 73 40 Эргокорнинин 56 31 Дигидроэргокорнин 62 (29) 67 41 60 55 69 Эргокриптин 74 38 15 61 85 75 81 Эргокриптинин 81 57 46 Дигидроэргокриптин 35 43 13 0 Эргозин 10 2 74 32 Эргозинин 45 18 (5) Метилэргометрин С7 метанол [255];

С8 хлороформ — этанол ( 9 5 : 5 ) [1111:

а Щелочной силикагель.

С9 хлороформ — этанол ( 9 : 1 ) [111," 112];

В скобках приведены значения hRp соответствующих 10-оксипроизводньг. СЮ хлороформ — метанол ( 9 : 1) i[18];

СП гексафторбензол — диметилформамид — абсолютный этанол ( 1 3 : 1, 9 : 0, 1 ) [59];

Обозначения:

С12 хлороформ — метанол ( 8 : 2 ) [4];

С1 хлороформ — ацетон — диэтиламин ( 5 : 4 : 1 ) [255];

С13 хлороформ — диэтиламин ( 9 : 1 ) [4];

С2 хлороформ — диэтиламин ( 9 : 1) [255];

С14 хлороформ [255];

СЗ этилацетат — диметилформамид — этанол ( 1 3 : 1, 9 : 0, 1 ) [135];

С15 хлороформ — эфир — вода (87,5:12,5:25) [135];

С4 бензол — диметилформамид ( 1 3 : 2 ) [135];

С16 этилацетат — гептан — диэтиламин ( 5 : 6 : 0, 0 2 ) [79];

С5 бензол — хлороформ — абсолютный этанол ( 2 : 4 : 1 ) [273];

С17 двумерное проявление: 1) бензол — гептан — хлороформ ( 6 : 5 : 3 ) ;

2) бензол — геп С6 гептан — четыреххлористый углерод — пиридин ( 1 : 3 : 2 ) [273];

тан (6 : 5) [235].

значительное число работ;

в частности, это касается диэтиламида системы растворителей средней полярности без компонентов ос лизергиновой кислоты (ЛСД) (см., например,,[323, 324, 326]). новного характера. Пятна можно локализовать визуально в уль Благодаря слабоосновному характеру алкалоидов спорыньи мож- трафиолетовом свете. Описаны и другие способы обнаружения^ но работать просто на немодифицированном силикагеле, применяя например опрыскивание раствором тетрацианоэтилена в ацетони 352 Специальная часть триле [72] (этот способ рекомендуется для обнаружения галлю циногенов) или обнаружение аммиачным раствором сернокислой меди (Д182) [65]. Пептидные основания можно обнаруживать также нингидрином [271].

Шталь [213] подвергал разделению главные вещества эрго метриновой, эрготаминовой и эрготоксиновой групп на силикаге ле G в системе хлороформ—• метанол (95:5). В большинстве других работ также применяли силикагель G. Силикагель оказал ся пригодным для группового разделения пептидных оснований, но на нем не удалось добиться разделения алкалоидов внутри от дельных групп [237]. В табл. 53 приведены данные статей, посвя щенных этому вопросу. Вальди и сотр. [255] описали разделение 8 алкалоидов спорыньи;

они пользовались системами, содержав шими в качестве составной части растворитель основного харак тера, так как применение щелочного силикагеля оказалось менее удобным (табл. 53). Указанная работа посвящена систематическо му анализу смеси алкалоидов различного строения. Хроматогра фированием в системе циклогексан — хлороформ — диэтиламин ( 5 : 4 : 1 ) по значениям RF смесь алкалоидов делилась на две ос новные группы, которые затем подвергали разделению в других системах по значениям их RF И окраске пятен при действии иодо платината калия. В работе Царнака и Пфейфера [272] показано обычное использование тонкослойной хроматографии для анализа ряда лекарственных средств, в том числе и алкалоидов спорыньи.

Эргометрин и эрготамин гладко разделялись в системе бензол — • ацетон — эфир — аммиак ( 4 : 6 : 1 : 0, 3 ), но попытка разделения ди гидропроизводных эрготамина, эргокристина и эргокриптина ока залась безуспешной. Клавен [111, 112] пользовался системой хло роформ — этанол, но и ему не удалось разделить структурно близ кие алкалоиды эрготоксиновой группы. Хотя статья Мак-Лафлина и сотр. [135] посвящена главным образом возможности иденти фикации алкалоидов спорыньи, в ней можно найти некоторые лю бопытные сведения, необходимые для количественного определе ния этих веществ.

Разделение проводили на силикагеле G в системе этилацетат — диметил формамид — этанол или соответственно бензол — диметилформамид на окиси алюминия (табл. 53). Частичное разделение эргокристина и эргокорнина или эргокристина и эргокриптина происходило на силикагеле в системе СЗ, а изо мерных оснований эргокриптина и эргокорнина, эргокристинина, эргокорнинина и эргокриптинина — на окиси алюминия в системе С15 (табл. 53). Алкалоиды наносили на слой в форме узких полосок.

Грегер и Эрге [63] успешно разделяли главные алкалоиды спорыньи на силикагелях различного происхождения. На силика геле же были разделены и диастереомерные ( + )-1-окси-2-бутил амиды D- и ь-лизергиновой и D- и ь-изолизергиновой кислот;

удобными оказались системы эфир — этанол — 1 М имидазол Специальная часть ( 9 0 : 5 : 5 ), хлороформ—-этанол — 0,1 М имидазол в том же отно шении [89], а также двумерное элюирование в системах хлоро форм— метанол (8:2) и хлороформ—диэтиламин (9:1) [4].

Блейк и сотр. [18] исследовали качество ЛСД и других соедине ний;

при облучении исходной смеси веществ перед собственно хро матографированием образовывались соответствующие 10-оксипро изводные, которые имели отличающиеся значения RF (табл. 53), чем удобно пользоваться для идентификации этих веществ. Гиб сон [59] пользовалась для хроматографии алкалоидов спорыньи системой гексафторбензол — диметилформамид—абсолютный эта нол (13:1,9:0,1) или пентафторбензол — диметилформамид — абсолютный этанол в том же соотношении. Эта система не разде ляла эргокристин, эргокриптин и эргокорнин и, следовательно, могла служить лишь групповому отделению алкалоидов эрготок синовой группы от прочих оснований. Описан также электрофорез алкалоидов спорыньи на силикагеле с буферным раствором рН 5,6 в одном направлении, комбинированный с обычной хромато графией в другом [4]. И здесь также не удалось разделить эрго токсиновые основания. Разделение и идентификацию диастереоме ров малеата D-эргоновина описали Зондак и сотр. [329].

Сравнительно часто пользовались окисью алюминия [4, 56, 65, 89, 108, 231, 255], хотя, кажется, и этот сорбент не дает никаких очевидных преимуществ.

Успешного разделения близкородственных эрготоксиновых осно ваний, которые невозможно разделить адсорбционной хроматогра фией, удалось добиться применением принципа распределения, например, на тонких слоях целлюлозы, обработанной формами дом. Тейхерт с сотр. [235, 237] пользовался для проявления смесью бензол —гептан—-хлороформ ( 6 : 5 : 3 ). Пептидные алка лоиды (группы эрготамина и эрготоксина) отделялись удовлетво рительно, группа эргометрина и клавиновые алкалоиды остава лись на старте;

их делили далее на силикагеле. Еще лучшее раз деление оказалось возможным при двумерном элюировании: в первом направлении указанной выше системой растворителей, и во втором — смесью бензол — гептан (6:5) (табл. 53) [235].

Гофман и Рохельмейер [79] описали успешное разделение структурно родственных оснований на слое целлюлозы, импрегни рованной формамидом;

смесь этилацетат-—гептан — диэтиламин (табл. 53) позволила разделить эрготоксиновые основания. При разделении алкалоидов спорыньи в фармацевтических препаратах применяли также тальк, обработанный формамидом, и систему гептан — тетрагидрофуран — толуол ( 5 : 4 : 1 ) [271]. Весьма при годными оказались слои силикагеля, обработанные той же стацио нарной фазой [184]. В смеси бензол — алифатический углеводород удается разделить эргозин, эргокорнин и эргокриптин. Удобна так 354 Специальная часть же система петролейный эфир — этилацетат—1 н. аммиак (65:35:1).

Рейхельт и Кудрнач [305] хроматографировали 16 алкалоидов спорыньи на силикагеле, обработанном формамидом, в системах диизопропиловый эфир — тетрагидрофуран — толуол — диэтиламин (70:15:15:0,1) и диизопропиловый эфир — толуол — этанол — диэтиламин (75:20:5:0,1).

Извлечение алкалоидов из спорыньи. 5 г тонкоистертой спорыньи оставляют стоять в течение ночи в 100 мл петролейного эфира. Остаток отфильтровывают, сушат, смешивают с 50 мл ацетона, содержащего 1 мл 25%-ного NH 4 OH, и смесь перемешивают 1 ч. После отфильтровывания раствор упаривают до объема около 5 мл и в количествах 10—20 мкл наносят на пластинку [233].

Количественное определение алкалоидов спорыньи изучали многие авторы. В цитированной выше статье Мак-Лафлина и сотр. [135] описывается определение нескольких важных соедине ний на слое силикагеля или окиси алюминия с применением сис тем, приведенных в табл. 54. Определение вели без доступа света.

Раствор алкалоидов в смеси хлороформа и метанола ( 9 : 1 ) наносили на стартовую линию пластинки в форме узких полосок так, чтобы 10 мкл раствора с концентрацией 1 мкг/1 мкл на силикагеле располагались на длине 1,5 см, а на окиси алюминия • 3 см. При нанесении большего количества длину полос — ки следует пропорционально увеличить. Хроматографирование вели в системе, приведенной в табл. 54. После локализации зон веществ в ультрафиолетовом свете эти зоны снимали с пластинки, помещали в центрифужные пробирки с 2 мл смеси метанол — вода — уксусная кислота (4,5:4,5:1) и центрифугирова Таблица Сорбенты и системы растворителей, применяемые для количественного определения алкалоидов спорыньи [135] Алкалоид Система Сорбент С Эргометрин Силикагель G Эрготамин+эргозин С т С Эргометринин •»

СЗ Эргокриптин+эргокорнин Окись алюминия G Силикагель G Эрготамин+эргозинин С С Окись алюминия G Эргокристинин+эргокриптининЧ +эргокорнин Обозначения:

CI этилацетат — диметилформамид — этанол ( 1 3 : 1, 9 : 0, 1 ) ;

С2 хлороформ — эфир — вода (87,5 : 12,5 : 25) а ;

СЗ хлороформ — эфир — вода ( 3 : 1 : 1 ) ;

а После взбалтывания смесь оставляли стоять 18—24 ч при 20 "С для установления рав яовесия и перед употреблением отделяли органическую фазу.

Специальная часть ли 8—10 мин. Затем в пробирки прибавляли раствор и-диметиламинобензальде гида, перемешивали и снова центрифугировали 7 мин;

затем раствор помещали в кварцевую кювету и через 30 мин (считая от момента прибавления реактива ван Урка) измеряли поглощение при длине волны 590 нм.

Карачоньи и Сарвадь [107] определяли алкалоиды спорыньи на окиси алюминия венгерского производства в системах хлоро форм— этанол (97:3) или эфир — этанол в том же отношении.

После проявления и локализации водорастворимые алкалоиды элюировали смесью хлороформ — бутанол ( 5 : 1 ), а нерастворимые в воде — смесью тех же растворителей (1:1) при нагревании. Со держание веществ определяли колориметрически после реакций со слабоподкисленным раствором тропеолина 000.

Цинзер и Баумгертель [273] для разделения главных алкалои дов спорыньи применяли силикагель и системы бензол — хлоро форм— абсолютный этанол ( 2 : 4 : 1 ) или гептан — четыреххлорис тый углерод — пиридин ( 1 : 3 : 2 ). После разделения зоны отдель ных веществ элюировали 40%-ным метанолом, содержавшим 1% винной кислоты, и определяли алкалоиды фотометрически после реакции с реактивом ван Урка (Д39).

Прохазка с сотр. [182, 183] описал спектрофотометрическое определение алкалоидов спорыньи.

Эргометрин и эрготамин разделяли на незакрепленном слое силикагеля в системе бензол — пропанол—1 н. NH 4 OH (100:10:2) (верхний слой). Зоны локализовали в ультрафиолетовом свете. Эргометрин элюировали 10 мл 75% ного водного ацетона, содержавшего 0,5 г аммиака в 1 л, эрготамин •—10 мл смеси ацетон—хлороформ (2 : 1), содержавшей в 1 л 3% об. воды и 0,5 г аммиа ка. Растворитель упаривали досуха и после растворения остатка в 1%-ном вод ном растворе винной кислоты измеряли поглощение при 318 нм.

Этим же вопросом занимались и другие авторы [85, 195].

Тейхерт и сотр. [237] подвергали разделению алкалоиды спо рыньи на целлюлозе, обработанной формамидом, или на силика геле. Пептидные алкалоиды элюировали из слоя смесью этилаце тат — диметилформамид (19:1) и определяли спектральным пу тем. Согласно этому автору, клавиновые алкалоиды удобнее всего определять колориметрически реакцией с реактивом ван Урка.

Этим же реактивом пользовались Клавен и сотр. [111, 112];

коли чественное определение практически одинаково со способом Мак Лафлина и сотр. [135]. Реактив ван Урка применяли и в других работах, например при определении эргометрина и эргометринина в препаратах в присутствии клавиновых алкалоидов после пред варительного хроматографирования на незакрепленном слое сили кагеля в системе толуол — бутанол ( 6 : 4 ), насыщенный 4 н. НС (проточный способ) [82, 85]. Подобным же образом поступали Кейперт и Фойгт [108]. По их мнению, выделение вещества из слоя зависит от ряда факторов, как, например, относительной подвижности отдельных алкалоидов, длины и ширины полосы на 356 Специальная часть слое, концентрации растворов, нанесенных на старт, способов на несения смеси на слой, рода сорбента и т. д. Оптимальное элюи рование из слоя было достигнуто интенсивным взбалтыванием в течение 15 мин со смесью хлороформ — метанол ( 1 : 1 ). Фойгт и Цир [252] с помощью тонкослойной хроматографии изучали био синтез алкалоидов спорыньи.

Многие работы были посвящены идентификации и определению содержания ЛСД в различных запрещенных материалах [36].

Образец, содержащий ЛСД, растворяют или размешивают в 20 мл воды и устанавливают рН 8,5—9,0. Смесь насыщают хлоридом натрия и трижды экст рагируют хлороформом. Органический слой промывают 5 мл 0,01 н. НС1, кис лый экстракт подщелачивают и водную фазу извлекают 10—15 мл хлороформа.

Объединенные вытяжки после высушивания выпаривают досуха. Остаток хро матографируют на силикагеле в системе 1,1,1-трихлорэтан—метанол (9: 1);

при употреблении окиси алюминия пользуются той же системой в отношении (98: 2).

ЛСД элюируют из слоя метанолом и к элюату прибавляют 0,001 н. НС1. По глощение измеряют при 360 и 430 нм.

Спектрофотометрическое определение ЛСД исследовали Про хазка и сотр. [184];

Нивагути и Иноуэ [152] применяли флуори метрию in situ при 330 и 410 нм.

Флуороденситометрическое определение алкалоидов спорыньи описал Просек с сотр. [327, 328].

Идентификация ЛСД и других алкалоидов разрушением при ультрафиолетовом облучении \[б] 2—10 мкл раствора в хлороформе, содержащего 10 мкг алкалоидов, облу чают ультрафиолетовым светом с длиной волны 366 нм. Время экспозиции необходимо определить экспериментально. Разделение проводят на силикагеле в системе хлороформ —ацетон ( 1 : 4 ). В статье приведена таблица значений hRF исходных веществ и продуктов их деградации и ряд литературных ссылок об использовании тонкослойной хроматографии в токсикологии вообще.

Для извлечения ЛСД из измельченных таблеток может слу жить также 28%-ный аммиак;

образующуюся после прибавления этанола кашицу перемешивают 5 мин, затем центрифугируют и раствор наносят на пластинку. Для разделения можно пользовать ся готовыми слоями силикагеля и хроматографировать в системе этилацетат — пропанол — 28%-ный аммиак (40:30:3) [28].

Шперлинг [310] с успехом разделял ЛСД и другие вещества на силикагеле в системе хлороформ — метанол (9: 1) или соответ ственно (18:1);

последнюю смесь насыщали аммиаком. Польские исследователи [309] описали выделение и определение ЛСД из мочи, Кристи и сотр. [325]—из биологических жидкостей. Шар шунова и Хадрабова [314] хроматографировали некоторые син тетические производные алкалоидов спорыньи.

Значения hRF некоторых клавиновых алкалоидов приведены в табл. 55.

Специальная часть Таблица Значения hR,- некоторых клавиновых алкалоидов на силикагеле сз Вещество С1 С2 С Ханоклавин 2 4 Элимоклавин 13 15 Пенниклавин 17 20 -йзопенниклавин 30 35 Агроклавин 38 45 Сетоклавин 42 50 Изосетоклавин 46 60 •Фестуклавин Пироклавин Костаклавин б?

Норагроклавин Обозначения:

С1 хлороформ — этанол ( 9 : 1) [111];

С2 хлороформ — этанол ( 8 : 2 ) i j l l l j ;

СЗ хлороформ — метанол (8 : 2) [5];

С4 хлороформ — диэтиламин ( 9 : 1),[4].

5.6.1.2. Алкалоиды опия Хроматографическое разделение этой фармацевтически чрез вычайно важной группы алкалоидов явилось предметом много численных исследований. Ряд опийных алкалоидов относится к из вестным лекарственным препаратам;

в последнее время усилилось внимание, уделяемое их анализу с позиций токсикологии, а также обнаружения препаратов с содержанием наркотиков. Здесь мы упоминаем только те работы, которые посвящены хроматографии алкалоидов опия;

сведения о хроматографии комбинированных препаратов, содержащих эти вещества (анальгетики и т. д.) упо минаются в соответствующих разделах.

Как можно видеть из табл. 56, алкалоиды опия можно подвер гать разделению во многих системах на различных сорбентах, при чем широко применяются готовые слои. Из чехословацких мате риалов следует упомянуть в первую очередь силуфол, как и ма териал на основе целлюлозы люцефол квик, обработанный форма мидом или грмс (оксиметил) метиламином, которыми пользовались при хроматографии большого числа алкалоидов и местных анесте тиков [153]. Применение готовых пластинок описывают и другие авторы [например, 8, 27, 54, 80, 151, 159]. За рубежом существуют Таблица алкалоидов опия Значения hR? некоторых Окись алюминия Целлюлоза Полиамид! СаСО Сили б С Вещество С а СЮ С С11 С15 С В С16 С17 С18 С20 С сз С а б С7 С С С С2 С С 8 14 20 10 0 0 14 0 0 9 11 Морфин 3 12 66 19 Этилморфин 38 71 22 36 15 27 73 37 38 24 21 Кодеин 26 26 64 75 38 45 60 76 91 51 40 Тебаин 50 45 67 90 54 74 84 86 69 75 Папаверин 86 47 95 69 92 84 90 81 68 Наркотин 57 92 0 0 4 0 Нарцеин 40 42 Лауданозин 26 Лауданин Протопин Криптопин Котарнин Моноацетилморфин Ацетилкодеин 100 Реадин 22 Героин Дигидрокодеинон СЮ хлороформ — ацетон — диэтиламин ( 5 : 4 : 1 ) [105];

а Силикагель/КОН. СП диоксан — этанол — диэтиламин (98 : 1 : 1) [159];

С12 толуол — ацетон — 95%-ный этанол — 25%-ный аммиак ( 4 5, 5 : 4 5, 5 : 6, 5 : 2, 5 ) [151];

Готовые пластинки DCFertigplatte Merck Kieselgel 60 F.

С13 ацетон — коилол — метанол — 25%-ный аммиак (49,5. 41,5 • 5 : 4) [66], в Люцефол квик (народное предприятие S k l a r n y Kavalier, Votice).

С14 бензол —- ацетон — метанол ( 7 : 2 : 1);

hRp отнесен к реадину [169];

Обозначения: I С15 гептан — хлороформ — эфир ( 4 : 5 : 1);

hRp отнесен к реадину [169];

С1 бензол — этилацетат — диэтиламин ( 7 : 2 : 1) [255];

j C16 циклогексан — хлороформ ( 3 : 7, 0,05% диэтиламина) [255];

С2 ксилол — метилэтилкетон — метанол — диэтиламин ( 4 : 6 : 1 : 0,3) [12];

, С17 бензол — этанол ( 9 : 1 ) [74];

СЗ бензол — ацетон — эфир — 25%-ный аммиак ( 4 : 6 : 1 : 0,3) [272];

'- С18 люцефол, обработанный 1 г грыс-оксиметиламинометана в 20 об. ч. формамида, С4 этилацетат — этанол — диметилформамид — диэтиламин (75 : 20 : 5 : 2) [236];

разбавленного этанолом до 100 мл;

подвижная фаза циклогексан [153];

С5 метанол — ацетон — триэтаноламин ( 1 : 1 : 0, 0 3 ) [ И ] ;

С19 целлюлоза, обработанная формамидом;

подвижная фаза гептан — бензол — хлоро С6 бензол — метанол ( 8 : 2 ) [150];

I1 форм — диэтиламин ( 5 : 6 : 1 : 0,02) [236];

С7 двумерное проявление: 1) бензол — метанол ( 9 : 1 ) ;

2) хлороформ — этанол — аце i^ C20 циклогексан — этилацетат — пропанол — диэтиламин ( 3 0 : 2, 5 : 0, 9 : 0, 1 ) [87];

тон — этилацетат ( 6 : 2 : 1 : 1 ) [13];

С хлороформ — этилацетат ( 1 : 1 ) [48].

щ С8 хлороформ — этанол ( 8 : 2 ) [236];

( С9 хлороформ — ацетон — метанол — 25%-ный аммиак (20 : 20 : 3 : 1) [35];

360 Специальная часть в продаже и чрезвычайно простые устройства, позволяющие хро матографировать лекарственные препараты прямо с поверхности, например коробочки из пластмассы, служащие в качестве миниа тюрных проявительных камер, готовые микропластинки и т. д.

[54]. Пользуются также электрофорезом на тонких слоях целлю лозы в кислых или щелочных электролитах при 500 или 3000 В [260]. Разделение простейших смесей веществ можно осуществить и на микропластинках, приготовленных из щелочного силикагеля, в системе ацетон — бензол (1:1) 1[164]. Морфин подвергали ана лизу на слоях полиамида [125] или на готовых пластинках сили кагеля, разрезанных на квадраты размером 3X3 см [78].

Для фармацевтических целей пригоден также тальк (2 г талька, 0,3 г гипса, 4 мл метанола);

на нем определяли кодеин, дионин и папаверин в присутствии новокаина в системах вода — ацетон — этанол — аммиак ( 3 0 : 1 : 1 0 : 5 ) и вода — этанол — ам миак— хлороформ ( 3 0 : 1 0 : 5 : 1 ) [61]. Описаны и другие сорбен ты [335].

Одну из наиболее важных работ по хроматографии алкалоидов мака опубликовал Пфейфер. Он подвергал их разделению на си ликагеле или окиси алюминия [169]. Для первого из сорбентов служила очень удобная система бензол — ацетон — метанол ( 7 : 2 : 1 ), для другого — гептан — хлороформ — эфир (4:5:1).

Значения hRF некоторых веществ в этих системах приведены в табл. 56. Этими же системами Пфейфер пользовался и для изуче ния стабильности алкалоидов в органических растворителях [171].

В своей дальнейшей работе [299] он перечисляет целый ряд дру гих растворителей, удобных для хроматографии менее обычных алкалоидов из разных видов мака. Для силикагеля, кроме указан ной выше, рекомендуются системы: бензол — ацетон — эфир — 25%-ный аммиак ( 4 : 6 : 1 : 0, 3 ), бензол — ацетон — метанол — ди этиламин ( 7 : 2 : 1 : 0, 1 ), бензол — этилацетат — диэтиламин (5:4:

: 1), бензол — этанол — концентрированный аммиак (40:10:0,15), бензол — этилацетат — метанол ( 1 : 1 : 1 ), н-бутанол — уксусная кислота — вода ( 1 0 : 1 : 3 ), циклогексан — диэтиламин (8:2) и ди хлорметан—метанол ( 8 : 2 ), для окиси алюминия — хлороформ, хлороформ — гептан (9:1 или соответственно 8:2), хлороформ — эфир (1 : 1), хлороформ — метанол (99 : 1), гептан — хлороформ — эфир ( 5 : 3 : 2 ), бензол — этилацетат (1:1), бензол — этилацетат — метанол ( 1 : 1 : 1 ). Последние две системы пригодны главным об разом для окиси алюминия, вырабатываемой в ГДР, остальные для окиси алюминия G (Merck).

Нейбауэр и Мотес [150] успешно разделяли большое число веществ в системе С6 (табл. 56). Тейхерт и сотр. [236] работали на обыкновенном силикагеле и на силикагеле, подщелоченном ед ким кали;

системы растворителей также приведены в табл. 56. По их данным различие между папаверином и наркотином, как в пре Специальная часть дыдущем случае, недостаточно выражено. Хорошего разделения обеих этих веществ добился Вальди с сотр. [255] в системе С (табл. 56) или соответственно в смеси циклогексан — хлороформ— диэтиламин ( 5 : 4 : 1 ). На подщелоченном силикагеле (при элюи ровании с помощью метанола) разделение было значительно ху же. На окиси алюминия (системы С14—С17) разделение также не было удовлетворительным.

Чичиро [35] работала с силикагелем советского производства;

хроматографирование велось в насыщенной парами растворителя камере. Удобнее всего оказалась система С9 (табл. 56). Ее способ служил для анализа таблеток (часть таблетки измельчали, раз мешивали в 0,1 мл воды и кашицу наносили непосредственно на пластинку). Байер [12] пользовался сложной системой С2 для разделения главных алкалоидов опия;

тем не менее деление проте кало удовлетворительно. Смесь толуол — метанол — хлороформ ( 1 0 : 4 : 2 ) [227] хорошо разделяла ряд алкалоидов опия, как и система СЗ в табл. 56 [272]. Сас и сотр. [228] подвергали разде лению эти вещества в достаточно удобной системе метанол —• ам миак (99:1). Была также исследована целлюлоза, импрегниро ванная формамидом [236] (табл. 56). Для лучшей воспроизводи мости результатов Редер [193] рекомендует пользоваться гомоген ными азеотропными смесями растворителей, у которых состав жид кой фазы и пара одинаков и остается таким даже при длительной работе в одной и той же камере. Для алкалоидов опия пригодна система пропанол-2—1,2-дихлорэтан — диизопропиламин ( 5 : 4 : 1 ).

Основные алкалоиды опия удобно делить на силуфоле в системе ксилол — метилэтилкетон — метанол — 25%-ный аммиак (40:40:

: 6 : 4 ). Значения hRF некоторых алкалоидов: нарцеин 0, морфин 6, кодеин 17, тебаин 37, папаверин 52, наркотин 71 [316]. Лашточ кова [290] отделяла папаверин от продуктов его окисления на этом же сорбенте в системе ксилол • метилэтилкетон — метанол— — диэтиламин ( 2 0 : 2 0 : 3 : 1 ). Лирас [292] хроматографировал мор фин, кодеин и продукты их окисления.

Анализом лекарственных препаратов, содержащих алкалоиды опия, занимались многие исследователи. Папаверин и продукты его окисления в инъекционных растворах хроматографировали на силикагеле, применяя хлороформ, насыщенный аммиаком [67];

описан также анализ морфина в инъекционных растворах;

анти оксиданты, псевдоморфин и продукты разложения разделяли на колонке и в элюате определяли морфин спектрофотометрическим путем. Эффективность разделения проверяли тонкослойной хро матографией [80]. В статье Кампа и Ондерберга [106] есть упо минание о двумерной хроматографии опийных алкалоидов в опии..

Предложенный Шталем метод ИР (разд. 3.4.3) позволяет, помимо* всего, проводить микроперегонку с водяным паром из препарата прямо на старт хроматограммы;

он применялся и для алкалоидоа 24— 362 Специальная часть опия. Для хроматографирования служили системы хлоро форм— диэтиламин ( 9 : 1 ), циклогексан — диэтиламин (9:1), циклогексан — хлороформ — диэтиламин ( 5 : 4 : 1 ) [102]. Спе цифический способ обнаружения морфина в таблетках, экстрактах и т. д. основан на хроматографическом раз делении на силикагеле в системах хлороформ — пропанол-2 — ди этиламин (18:20:10) или метанол — 20%-ный аммиак (100:1).

После 1—2-часового нагревания в ультрафиолетовом свете можно наблюдать пятна со слабой голубой флуоресценцией. Морфин за тем идентифицируют, опрыскивая 5%-ным раствором йодновато кислого натрия в 1%-ном аммиаке. Спустя несколько минут появ ляется серовато-зеленое флуоресцирующее пятно при длине вол ны 365 нм. После полного высыхания слоя окраска изменяется на серовато-голубую, при легком смачивании водой опять становится зеленой [114].

Морфин экстрагируют из мочи или из мозга (10%-ный гомогенат) 5 мл бу танола после добавления к пробе 0,3 мл 16 н. КОН. После 10 мин взбалтыва ния смесь центрифугируют, отбирают пипеткой бутанольный слой и отгоняют растворитель. Дансилирование проводят в водном растворе (20—50 мкл), до бавляя 30—50 мкл 0,1 М NaHCO 3 и 30—50 мкл дансилхлорида (1 мг/1 мл аце тона). Смесь нагревают 2 ч в темноте, затем подкисляют 2 каплями 1 н.

СНзСООН. На пластинку наносят 0,05 мкл раствора. По окончании разделения в ультрафиолетовом свете обнаруживаются сильно флуоресцирующие пятна, так что морфин можно обнаружить в пикограммовых количествах |[125].

Идентификация морфина возможна и на готовых пластинках, например, на пластинках Rapid-plates с системой метанол — аммиак (95:5) или этилацетат — метанол — NH 4 OH (85:10:5) [204]. Кислую мочу экстрагируют эфиром, щелочную — хлорофор мом, для нейтральной пользуются этилацетатом. Далее следует подкисление соляной кислотой и экстракция эфиров. Затем мочу подщелачивают до значения рН 8,5—9, экстрагируют 2—3 раза этилацетатом и вытяжку выпаривают;

остаток содержит гидро лизованные производные морфина, которые подвергают двумерно му разделению в указанных выше системах (значения hRF неко торых веществ приведены в табл. 57). См. также работы [333, 337].

Героин (диацетилморфин) выделяют из мочи, как морфин;

око ло двух третей его находится в форме глюкуронида, остальное в свободном виде [208, 336]. После кислотного или энзиматического (при рН 9,0) гидролиза проводят экстракцию смесью хлоро форм— изоамиловый спирт (95:5) [249]. При экстракции морфи на и других наркотических веществ лучше промывать вытяжку буферным раствором. Таким способом удаляют мешающие опре делению продукты гидролиза [257]. При извлечении морфина из мочи курящих примешивается никотин, могущий быть источником ошибок [60]. Для идентификации различных наркотиков пользу Специальная часть Таблица Значения hRp некоторых наркотиков на силикагеле С1 а С2 б с2б Вещество С1 а Вещество 72 85 82 Ацедикон Эйкодал 64 78 Кодеин Морфин 57 71 46 Дикодид Паракодин 29 Дилаудид Героин Дионин Хинин 70 Дроморан а Пластинки Rapid-plates Woelm silica gel F»4.


6 Пластинки DC Fertigplatte Merck Kjeselgel 60 F;

hRp отнесено к хинину.

Обозначения:

С1 этилацетат — метанол — аммиак (85 : 10 : 5) [204];

С2 ацетонитрил — 96%-ный этанол — вода — уксусная кислота (50 : 50 : 50 : 5) [1511.

ются цветными реакциями и микрокристаллическим способом [27].

В литературе описано выделение морфина из тканей при вскрытии и главным образом из жидких выделений [92]. Выделе нием морфина из биологических материалов занимались Прани тис и Стольман [302], Уоллес с сотр. [256] и Кристопулос с сотр. [287], которые указывают на возможность ошибочного обна ружения морфина в печени, когда его там нет.

Обнаружение алкалоидов опия реактивом Гиббса описано в статье [330], кобальтинитритом натрия — в статье [334].

Предварительная экстракция желчи или мочи. 10 мл пробы подвергают гид ролизу с 1 мл концентрированной соляной кислоты в сосуде под давлением при температуре 120 °С в течение 15 мин. Раствор дважды промывают бутилацета том, нагревают несколько минут при 50 °С, затем подщелачивают до рН 9,0— 9,5 твердым углекислым калием и фильтруют через бумажный фильтр, смочен ный фосфатным буферным раствором рН 9. Фильтр промывают 2—3 мл буфер ного раствора и объединяют фильтрат и промывные воды.

Предварительная экстракция печени и крови. 10 г гомогенизованной ткани печени или крови насыщают углекислым калием и извлекают в течение 3—5 мин 200 мл смеси изобутанол — хлороформ (1 : 9 ). После отфильтровывания раствора морфин повторно извлекают 10 мл 0,5 н. НС1 и водный слой подщелачивают до рН 9,0—9,5.

Пробы от предварительной экстракции взбалтывают 5 мин с 50—100 мл хлороформа, насыщенного 10%-ным раствором трег-бутанола. Органический слой промывают трижды по 5 мл 2 М ЫагСОз (рН раствора устанавливают равным 10,5, добавляя твердый бикарбонат натрия). Органический слой отделя ют и после фильтрования выпаривают в вакууме досуха при температуре 60 °С [256].

24*.

364 Специальная часть Экстракцию и анализ опия описывает Нейнингер [151]. Экст ракцию проводят 70%-ным этанолом [151, 233]. Отдельные со ставные части можно идентифицировать после хроматографиче ского разделения с помощью цветных реакций. Махата анализи ровал [128] содержимое желудка человека, отравленного настой кой опия.

Мери и Брохман-Ганссен [134] разработали количественное определение морфина, кодеина, тебаина, папаверина и наркотина.

Эталонные растворы для построения калибровочной кривой нано сили на пластинку в концентрациях 2—60 мкг. Определение алка лоидов после элюирования метанолом производилось спектрофо тометрическим методом (морфин 286 нм, кодеин 285 и 215 нм, те баин 285 нм, папаверин 279 нм, наркотин 312 нм). Напротив, Ланг [119] измерял поглощение отдельных веществ при следую щих длинах волн (в нм): морфин 297 и 340, кодеин 340, этилмор фин 340, тебакон 290, гидроморфон 302, гидрокодон 290 и 340, ок сикодон 290, папаверин 278, 315 и 325, наркотин 310. Для хрома тографии служили целлюлоза и бутанольные системы.

Экстракция и анализ опия ][134] 200 мг порошка опия смешивают с 0,5 мл метанола и 0,5 мл концентриро ванного аммиака. К смеси прибавляют 3 г окиси алюминия (Merck), перемеши вают и переносят в хроматографическую колонку размером 30X1 см. Алкалои ды элюируют 80 мл смеси хлороформ — пропанол-2 ( 3 : 1 ). Элюат упаривают в атмосфере азота досуха, остаток растворяют в 5 мл смеси хлороформ — метанол ( 4 : 1 ) и наносят на две пластинки с силикагелем по 0,05 мл в пяти точках.

Первую пластинку хроматографируют в смеси хлороформ — метанол (4:1) для разделения смеси морфина, кодеина и тебаина, вторую — системой бензол — этанол (4:1) для разделения папаверина и наркотина. Одну полосу обнаружи вают иодоплатинатом калия (папаверин можно обнаружить в ультрафиолетовом свете), остальные четыре используют для собственно количественного определе ния (берут среднее арифметическое из результатов определения).

Петке и Кинце [175] для определения алкалоидов опия поль зовались спектрометрическим устройством с интегратором. Эти же авторы [174] опубликовали способ фотометрического определения кодеина, тебаина, папаверина и наркотина. Вещества подвергали разделению на слое окиси алюминия, пользуясь двумерным элюи рованием — в первом направлении смесью бензол — метанол (9:1) с добавлением двух капель 80%-ной муравьиной кислоты, во вто ром — смесью бензол — уксусная кислота (9: 1).

0,5 г опия смешивают с 1,5 мл 15%-ного раствора едкого натра и 7—8 г щелочной окиси алюминия, перемешивают и помещают в колонку диаметром 2 см на слой морского песка. Элюируют 50 мл хлороформа, растворитель отго няют досуха в токе азота, остаток растворяют в 5 мл хлороформа и наносят на пластинку. Обнаружение проводят парами иода. Алкалоиды извлекают из слоя либо в экстракторе Сокслета, либо в малой хроматографической колонке. Элюа ты выпаривают досуха, к остаткам прибавляют 10 мл 0,5%-ного раствора пик риновой кислоты в ледяной уксусной кислоте и после кратковременного взбалты вания измеряют поглощение при 420 нм в кювете 1=2 см. Калибровочную кри.вую строят, нанося чистые алкалоиды в количествах 50—1000 мкг.

Специальная часть Описано также полуколичественное определение алкалоидов, основанное на измерении размеров пятен [150, 215]. Чулис [91] с помощью тонкослойной хроматографии проверял содержание ал калоидов в сигаретах с марихуаной, смоченных экстрактом опия, а также в разных наркотиках, например в опии, гашише или ма рихуане. Папаверин и кодеин, выделенные из некоторых лекарст венных препаратов, разделяли на силикагеле СН (Lachema): па паверин в системе этилацетат — бензол — аммиак (60:35:5), ко деин— в системе хлороформ — метанол — эфир — аммиак ( 1 5 : 2 :

:2:0,2). После извлечения из слоя экстинкцию папаверина изме ряли при 308 нм, а кодеина — при 235 нм [19]. Для определения кодеина и этилморфина применяли колориметрию [270]. Колори метрическое определение обоих алкалоидов после реакции с бром ной водой можно проводить и в присутствии эфедрина или тер пингидрата (эти вещества не мешают), однако в присутствии 10% эметина ошибка определения может достигать 25%. Количествен ным определением морфина занимался Пари [298]. Спектрофото метрическое и колориметрическое определения морфина описаны и в ряде других работ {например, 76, 120, 147]. Лауданин в опии определяли денситометрически [58]. Определение кодеина и стрих нина в таблетках см. в статье [331].

5.6.1.3. Хинные алкалоиды Разделение главных алкалоидов коры хинного дерева (хини на, хинидина, цинхонина, цинхонидина) вследствие структурной близости отдельных оснований представляет собой трудную зада чу. Успешного разделения указанных алкалоидов удалось добить ся ван Северену [22, 243]. См. также [338]. В системе С (табл. 58) разделяются хинин (соответственно хинидин) и цинхо нин (соответственно цинхонидин), система С2 позволяет разделить все четыре основания. Хотя цинхонин, цинхонидин и хинидин не образуют отдельных друг от друга пятен, хинин и хинидин можно обнаружить в ультрафиолетовом свете. После элюирования систе мой С2 сначала локализуют пятна в ультрафиолетовом свете, за тем опрыскивают реактивом Драгендорфа. Если впереди (т. е.

ближе к фронту растворителя) флуоресцирующего хинидина есть алкалоид, то это цинхонин;

ближе к старту находится цинхони дин. Полного разделения всех четырех оснований достигают дву мерным хроматографированием — в первом направлении в систе ме С2 и во втором — в системе С1 (табл. 58).

Двумерным способом были разделены хинин, хинидин, цинхо нин, цинхонидин, дигидрохинин и дигидрохинидин. В первом на правлении элюировали смесью метилэтилкетон — метанол — вода ( 6 : 2 : 1 ), во втором — смесью пропанол-2 — бензол — диэтиламин ( 2 : 4 : 1 ) [20].

366 Специальная часть Таблица Значения IIRF ХИННЫХ алкалоидов на силикагеле сз С С4 С С С Вещество Хинин 60 56 47 50 Хинидин 60 74 43 Цинхонин 41 80 Цинхонидин 41 Дигидрохинин 37 Дигидрохинидин 31 Дигидроцинхонин Дигидроцинхонидин Обозначения:

С1 циклогексанол — циклогексан — гексан ( 1 : 1 : 1 ) с добавлением 5% диэтиламина [243];

С2 хлороформ — м е т а н о л — д и э т и л а м и н ( 8 0 : 2 0 : 0, 2 ) [243];

СЗ хлороформ — метанол — диэтиламин ( 8 0 : 2 0 : 1 ) [226];

С4 хлороформ — метанол — диэтиламин ( 5 0 : 5 0 : 1 ) [225];

С5 хлороформ — ацетон — диэтиламин ( 5 : 4 : 1 ) [211];

С6 силуфол;

хлороформ — диэтиламин ( 9 : 1) [233].

Исследования по разделению хинных алкалоидов опубликова ны также в других статьях. Вальди и сотр. [255] подвергали раз делению хинин, хинидин и цинхонин во многих системах. Сравни тельно неплохого разделения им удалось достичь на силикагеле в системе хлороформ — ацетон — диэтиламин ( 5 : 4 : 1 ). Значения IIRF ЭТИХ трех веществ составляли 19, 33 и 38 соответственно. Для разделения этих веществ пользовались также пластинками силу фол (табл. 58) [233]. Царнак и Пфейфер [272] делили хинин и хинидин в системе бензол — ацетон — эфир — 25%-ный аммиак ( 4 : 6 : 1 : 0,3) (значения hRp 35 и 43). Польские исследователи [226] успешно отделяли хининовые основания от их дигидропро изводных, однако не смогли разделить отдельные основания (табл. 58). Частичное разделение хинина, хинидина и их дигидро производных возможно на щелочном силикагеле в системе хло роформ— метанол — диэтиламин (50:50:1) [225] (табл. 58). Хи нин и дигидрохинин разделяли в системах ацетон — аммиак и этил ацетат — аммиак [166], хинин и хинидин — на готовых пла стинках силуфол или на силикагеле в системе бензол — ацетон — диэтиламин ( 8 : 2 : 1 ) и соответственно хлороформ — ацетон — ди этиламин ( 1 0 : 9 : 1 ) [238]. Локализацию пятен осуществляли в ультрафиолетовом свете после опрыскивания 30%-ной муравьи ной кислотой.


В отличие от хинина и хинидина их дигидропроизводные после прибавления бромной воды и аммиака к их раствору в винной Специальная часть кислоте давали зеленое окрашивание. Все четыре вещества час тично различались, если перед нанесением на пластинку к их сме си в разбавленной уксусной кислоте прибавляли уксуснокислую ртуть [221].

Шталь и Шмитт [311] описали термофрактографию (разд.

3.4.3) хинных алкалоидов. Шаршунова и Гривнак [315] для деле ния их комбинировали тонкослойную и газовую хроматографию.

Смит и сотр. [211] (табл. 58) анализировали фармацевтиче ские препараты, содержавшие хинные алкалоиды.

Часть таблетки или содержимого капсулы измельчают и растворяют в 50% ном этаноле так, чтобы концентрация исследуемых веществ составляла около 5 мг/мл. При анализе инъекционных растворов в делительную воронку помеща ют объем раствора, соответствующий приблизительно 80 мг веществ, подкисля ют несколькими каплями серной кислоты и экстрагируют эфиром. Вытяжку от деляют, водный слой подщелачивают аммиаком и извлекают 50 мл эфира;

вы тяжку промывают 25 мл дистиллированной воды и растворитель упаривают в токе воздуха. Остаток растворяют в таком количестве спирта, чтобы получи лась концентрация около 5 мг/мл. Количественное определение проводят, изме ряя интенсивность флуоресценции при длине волны 345 нм. Другой способ за ключается в элюировании из слоя, смешивании элюата в центрифужной про бирке с 10 мл 0,1 н. H 2 SO 4, взбалтывании в течение 30 мин и центрифугирова нии. Слой жидкости помещают в 1-см кювету. Интенсивность флуоресценции измеряют при длине волны возбуждения 350 или 455 нм (в проходящем свете), сравнивая с холостым опытом.

Гертель и Корхонен [69] привели описание метода определе ния хинидина, дигидрохинидина и их метаболитов в биологических тканях и жидкостях. Вытяжки хроматографируют на силикагеле в системе метанол — ацетон ( 4 : 1 ), флуоресцирующие зоны элюи руют смесью тех же растворителей в отношении (1:1) и затем из меряют интенсивность флуоресценции. Сыворотку, мочу или тка ни экстрагируют смесью амиловый спирт-—бензол (1:1), затем извлекают балластные вещества серной кислотой и смесью амило вый спирт — бензол. При выделении веществ из тканей сердца, пе чени и мышц сначала удаляют кровь фильтровальной бумагой, затем небольшое количество ткани гомогенизуют в 5 мл физиоло гического раствора. Гомогенизованную суспензию подщелачивают и извлекают смесью амиловый спирт — бензол ( 1 : 1 ). Описано также определение хинидина в плазме крови человека [312].

Экстракция алкалоидов из лекарственного сырья. 1 г материала растирают, перемешивают в течение 10 мин с 50 мл разбавленной серной кислоты (1 :24);

после отфильтровывания подщелачивают фильтрат едким натром до рН 12— 13 с одновременным охлаждением и извлекают 50 мл хлороформа. Органичес кий слой отделяют, фильтруют и упаривают до объема около 10 мл [233].

5.6.1.4. Алкалоиды раувольфии В табл. 59 мы приводим обзор работ, касающихся разделения алкалоидов раувольфии. Из нее можно видеть, что успешное раз деление может быть достигнуто на силикагеле и других сорбен 368 Специальная часть Таблица Значения hRF некоторых алкалоидов заувольфии сза Г С4б Г Вещество С7 С8« а а В С С1 С2 С Серпентин 24 15 0 34 2 Аймалин. 47 56 51 42 Резерпин 69 89 60 72 80 Аймалицин Серпентинин 53 56 12 Иохимбин 63 62 60 Раувольсцин 55 63 68 Ресциннамин Сарпагин 12 4 Резерпинин Силижагель.

Щелочной силикагель.

В Окись алюминия.

г Незакрепленная окись алюминия.

д Целлюлоза/формамид.

Обозначения:

С1 хлороформ — ацетон — диэтнламин ( 5 : 4 : 1 ) [255];

С2 хлороформ — диэтиламин ( 9 : 1 ) [255);

СЗ хлороформ — циклогексан—диэтиламин ( 7 : 2 : 1 ) [1051'.

С4 метанол [255];

С5 хлороформ [255];

С6 хлороформ — этанол — ацетон (90 : 5 : 5) [94];

С7 хлороформ — ацетон ( 8 5 : 15) [94];

С8 гептан — метилэтилкетон (1 : 1) [51].

тах. Для обнаружения помимо реактива Драгендорфа пользуются смесью хлорной кислоты и хлорида железа(III) (Д 98), а также исследованием в ультрафиолетовом свете [236].

Корт и Хабиб [276] хроматографировали 12 алкалоидов рау вольфии на силикагеле в 10 отобранных системах растворителей.

Ни в одной из нескольких сотен исследованных систем не удалось добиться разделения смеси всех 12 веществ.

Результаты количественного определения резерпина и соответ ствующей суммы алкалоидов в лекарственном сырье и фармацев тических препаратах опубликовали Рутковска и Войса [194]. Для хроматографии пользовались смесью силикагеля, целлюлозы и крахмала в отношении 10:4:0,25;

10 г сорбента суспендировали в 10 мл ацетатного буфера рН 4,7. Для элюирования служила сис тема метилэтилкетон — ксилол — метанол ( 1 0 : 1 0 : 2 ) ;

определение производили спектрофотометрически при 545 нм после добавления Специальная часть • к исследуемому раствору тропеолина (см. также работу [339]).

Шлеммер и Линк [202] описали количественное определение ре зерпина, ресциннамина и серпентина в лекарственном сырье.

Локализацию пятен проводили в ультрафиолетовом свете после одноминут ного нагревания слоя при температуре 100 "С. Сорбент элюировали центрифуги рованием со смесью диоксан — этанол (1:1) и после отделения производили спектрофотометрическое определение.

Этим способом можно определять резерпин и 3-изорезерпин наряду с про дуктами их разложения при анализе некоторых фармацевтических препаратов.

Все операции, насколько возможно, следует производить в темноте. Хроматогра фируют на силикагеле в системе гептан — метилэтилкетон — метанол (58 : 33,6 :

:8,4). Количества веществ рассчитывают по формуле:

Количество резерпина E-f-A/B-loo v, веществе') щ (ИЛИ 3-изорезерпина), % мг вещества '' мг/мл= ^раствора (в инъекционном растворе), мг/1 таблетку^ 4JJ^T0K (в таблетках), где Е — поглощение, f — фактор, отнесенный к мг/5 мл при измерении в кювете 1=1 см (для резерпина f=0,198, для 3-изорезерпина 0,204), А — количество рас творителя в мл, в котором было растворено вещество или остаток после выпа ривания, и В — количество миллилитров растворителя, взятого при нанесении на пластинку.

Ульман и Касалицкий [242] также определяли резерпин и притом в присутствии веществ, повышающих растворимость.

Анализ таблеток и драже, содержащих резерпин, описывают польские авторы [280].

5.6.1.5. Алкалоиды ипекакуаны Описание разделения алкалоидов Cephaelis ipecacuanha мож но найти в монографии Шталя [214]. Автор пользовался сили кагелем и системой хлороформ —метанол (85:15). Значения IIRF были следующими: для цефаэлина—13, для психотрина — 16, для 2-дегидроизоэметина—18, для 2-дегидроэметина—21, для эметина—28, для О-метилпсихотрина—47, для протоэметина — 63, для эметамина — 67.

Алкалоиды этой группы, выделенные из лекарственного сырья, можно также делить на силикагеле в системах четыреххлористый углерод —бутанол —метанол—10%-ный NH 4 OH ( 4 0 : 3 0 : 3 0 : 2 ), петролейный эфир — эфир — этанол — диэтиламин (4:16:2:1) или ксилол — метилэтилкетон — метанол — диэтиламин (20 : 20 :

: 3 : 1) [106]. Употребляют также слои незакрепленной окиси алю миния, например при анализе инъекционных растворов эметина [74]. Легко можно выделять алкалоиды, в том числе и ипекакуа новые, из сырья или готовых форм микроперегонкой с водяным 370 Специальная часть паром прямо на пластинку [102]. В упомянутой работе приводится метод, служащий для того, чтобы различить картагенскую ипека куану от ипекакуаны Рио [214].

100 мг измельченного сырья смешивают с 1 каплей концентрированного рас твора аммиака и 5 мл хлороформа. Через 3—4 ч на пластинку наносят 5 мкл раствора. В качестве эталона на эту же пластинку наносят 5 мкл 0,01%-ного раствора смеси цефаэлин — эметин ( 1 : 1 ). Хроматографируют в смеси хлоро форм— метанол (85:15). У первого сырья пятна цефаэлина и эметина соот ветствуют эталону, тогда как у второго пятна цефаэлина существенно меньше.

Определением некоторых алкалоидов этой группы занимались Менкинова [294] и Хабиб [281].

5.6.1.6. Алкалоиды лобелии Лобелии, лобеланин и лобеланидин вследствие значительных различий в полярности хорошо разделяются на слоях силикагеля, незакрепенных слоях окиси алюминия и на других сорбентах при использовании разнообразных систем растворителей (табл. 60).

Таблица Значения hRF алкалоидов лобелии сзб С5б С4 б Вещество С2 а С1а Лобелии 27 Лобеланин 92 84 Лобеланидин 10 24 а Силикагель.

" Незакрепленная окись алюминия.

Обозначения:

С1 хлороформ — этанол ( 3 5 : 1 ) [236];

С2 хлороформ — бензол ( 1 : 1 ), насыщенная 25%-ным аммиаком [161];

СЗ бензол — этанол ( 9 5 : 5 ) [205];

С4 хлороформ — этанол ( 9 8 : 2 ) [205];

С5 эфир — этанол (97 : 3) [205].

Паррак, Радеёва и Маховичова [161] описали идентификацию продуктов расщепления лобелина в фармацевтических препара тах. Хроматографировали на наливных слоях силикагеля с гипсом в смеси хлороформ — бензол (1:1), насыщенной 25%-ным ам миаком. Сравнением свежеприготовленного и старого инъекцион ных растворов лобелина можно было обнаружить наличие шести веществ, среди них, вероятно, лобеланина и лобеланидина.

Специальная часть 5.6.1.7. Тропановые алкалоиды Разделение главнейших тропановых алкалоидов, как правило, не представляет затруднений, Вальди и сотр., а также Тейхерт и сотр. пользовались для хроматографии необработанным или соответственно подщелоченным силикагелем [236, 255] и целлю лозой, импрегнированной формамидом, с двукратным элюирова нием [236] (табл. 61). Для удаления формамида перед обнару жением необходимо сушить хроматограмму в течение 15 мин при температуре 110°С в вакуумном сушильном шкафу. Повышения чувствительности при обнаружении реактивом Драгендорфа до стигают дополнительным опрыскиванием раствором 10 г нитрита натрия в 100 мл воды [185].

Были исследованы нитрование и дегидратация тропановых ал калоидов (дегидратацию проводили нагреванием слоя с нанесен Таблица Значения hRp некоторых тропановых алкалоидов сюг сза С9 В С7° С4 а С5а Вещество С11Д С1а С2 а С6 а С Тропин 17 Белладонин Атропин 38 17 21 8 20 Апоатропин 54 26 73 Скополамин 56 52 52 83 34 37 Гиосциамин Кокаин 73 58 80 Гоматропин 37 23 15 Скопин Силикагель.

Щелочной силикагель.

в Окись алюминия.

г Незакрепленная окись алюминия.

д Целлюлоза/формамид.

Обозначения:

С1 хлороформ — ацетон — диэтиламин ( 5 : 4 : 1) [2551;

С2 бензол — этилацетат — диэтиламин ( 7 : 2 : 1 ) [231];

СЗ диметилформамид — диэтиламин — этанол — этилацетат (1 : I : 6 : 12) [236];

С4 бензол — ацетон — эфир — 10%-ный аммиак ( 4 : 6 : 1 : 0,3) [272];

С5 бензол — ацетон — эфир — 25%-ный аммиак ( 4 : 6 : 1 : 0,3) [272];

С6 80%-ный этанол — 25%-ный аммиак ( 9 7 : 3) [1];

С7 метанол [255];

С8 70%-ный э т а н о л — 25%-ный аммиак ( 9 9 : 1) [236];

С9 циклогексан — хлороформ ( 3 : 7, 0,05% диэтиламина) [255];

СЮ бензол — этанол ( 9 : 1) [205];

СП двукратное элюирование: 1) гептан — диэтиламин ( 5 0 0 : 1 ) ;

2) бензол — гептан—хло роформ — диэтиламин ( 6 : 5 : 1 : 0,02) [236].

372 Специальная часть ной смесью веществ в течение 30 мин при температуре 105 °С, а нитрование — опрыскиванием стартовой зоны пластинки 90%-ной азотной кислотой с последующим нагреванием в течение 5 мин при 105°С) [176], а также щелочной гидролиз микрограммовых количеств скополамина в капилляре с последующей хроматогра фией [177]. В статье Клиссюниса и Коккоты [113] есть упоми нание о выделении атропина из мочи на колонке флорисила и по следующей идентификации веществ тонкослойной хроматогра фией. Редер i[193] рекомендует для разделения тропановых ал калоидов азеотропную смесь ацетон —диэтиламин ( 9 : 1 ) ;

соот ношение обоих компонентов системы остается неизменным и при последующей работе в этой же камере. Этим обеспечивается и воспроизводимость результатов.

Спиртовые вытяжки растений семейства Hyoscyamus с успехом хроматографировали на слоях целлюлозы в системе изобутанол концентрированная соляная кислота — вода ( 7 : 1 : 2 ) ;

после элю ирования возможно спектрофотометрическое определение веществ [196]. Тонкослойная хроматография нашла себе применение и для исследования стабильности растворов кокаина [64]. Для идентификации алкалоидов в лекарственных формах применяли активированные слои силикагеля и системы хлороформ — аце тон— диэтиламин ( 5 : 4 : 1 ) или хлороформ — метанол — диэтил амин ( 1 8 : 2 : 1). Идентификация облегчалась щелочным гидролизом образцов в запаянном капилляре перед нанесением на пластинку.

Идентификацию настоек, содержащих, например, атропин и гио сциамин, описала Пруска-Высоцка [303].

Идентификацией алкалоидов и продуктов их разложения в глазных каплях занимался Брэдли [21];

ему не удалось разде лить только атропин и гоматропин. Другие авторы [49] опреде ляли пилокарпин и гоматропин в глазных каплях, измеряя вели чины площади пятен на слое. Быструю хроматографию тропано вых алкалоидов в инъекционных растворах, включая и колори метрическое определение, разработали Адамский и сотр. [1].

Вег и сотр. [246] определяли атропин в присутствии папаверина и амидопирина. Гебер с сотр. определяли скополамин и продукты его разложения в глазных каплях [340] и исследовал продукты разложения бромметилата атропина [341].

Количественное определение тропановых алкалоидов [93]. Алкалоиды экст-* рагируют из корня и листьев Datura fastuosa и после хроматографирования на окиси алюминия элюируют хлороформом. Содержание алкалоидов определяют титрованием 0,01 н. раствором NaOH в присутствии метилового красного Точ ность определения 0,2—1,3 мг алкалоидов.

Для определения гиосциамина и скополамина пользовались прямой фотоденситометрией [269];

вещества очень хорошо разде лялись на силикагеле в системе метанол — аммиак (200:1). Би чан-Фиштер [15] в своей работе приводит способ колориметриче Специальная часть ского определения, с одной стороны, сульфата атропина в таб летках в присутствии тартрата эрготамина и фенобарбитала, а с другой стороны, бромгидрата скополамина в инъекционных раст ворах в присутствии морфина после реакции с N-нафтилэтилен диамином при длине волны 545 нм.

Многие авторы занимались анализом лекарственного сырья, содержащего тропановые алкалоиды [57, 93, 131, 203, 219, 342].

Выделение тропановых алкалоидов из Folium Belladonnae^ F. Hyoscyami и F. Stramonii [233]:

5 г измельченного материала смешивают с 50 мл воды и 7 мл концентриро ванной соляной кислоты, взбалтывают в течение 5 мин и фильтруют. Остаток снова смешивают с 10 мл воды, взбалтывают, фильтруют, фильтраты соединя ют, подщелачивают аммиаком и экстрагируют эфиром. Органический слой отде ляют, фильтруют и после осушения упаривают приблизительно до 1 мл.

5.6.1.8. Стрихниновые алкалоиды Стрихнин и бруцин легко разделяются на силикагеле, неза крепленных слоях окиси алюминия и других сорбентах. Вальди с сотр. [255] делил оба вещества на силикагеле в хлороформе (значения hRF для стрихнина, бруцина составляют 38 и 19 соот ветственно) или в смеси хлороформ — диэтиламин (9:1) (hRF и 63);

Царнак и Пфейфер [272] пользовались системой бензол — ацетон —эфир—25%-ный аммиак ( 4 : 6 : 1 : 0, 3 ) (hRF 40 и 25);

на насыпных слоях окиси алюминия оказалась пригодной смесь бензол — этанол (9:1) (HRF 75 и 61), петролейный эфир — ди оксан (1 : 1) (hRF 37 и 18) и эфир —этанол (95:5) (hRF 35 и 15) [205].

Петкович [167] разделил пять алкалоидов из стрихниновой настойки на силикагеле в системе абсолютный этанол — диэтил амин (47,5:2,5) (значения HRF ДЛЯ стрихнина и бруцина состав ляют 54 и 34 соответственно). Зависимостью между значениями RF И строением ряда стрихниновых алкалоидов занимались Фил липсон и Биссет [172]. На силуфоле в системе хлороформ — аце тон—диэтиламин ( 5 : 4 : 1 ) значения hRF стрихнина и бруцина составили соответственно 50 и 39 [233].

Шаршунова и сотр. [232] определяли стрихнин и бруцин радиометрически после хроматографирования на незакрепленном слое окиси алюминия в системе эфир — этанол (95:5).

Метвалли [295] разработал определение стрихнина. Его метод основывается на наблюдении, что отношение Ds/D;

является ли нейной функцией логарифма массы материала (Ds и Д—средние диаметры пятен эталона и внутреннего эталона, в данном случае иохимбина). К обоим растворам — исследуемому и эталонному — прибавляют одинаковое количество внутреннего эталона и калиб ровочную прямую строят нанесением значений отношения Ds/Du против значений логарифма навесок.

374 Специальная часть 5.6.1.9. Прочие алкалоиды Что касается хроматографии алкалоидов иных типов, нежели описанные в этом разделе, заинтересованным лицам рекоменду ется ознакомиться с некоторыми важными обзорными работами [например, 236, 255, 272]. Определению аконитина и псевдоако нитина в галеновых препаратах посвящена статья Деноэля и ван Коттема [40]. Кониин и другие алкалоиды из Conium maculatum [142] Молл хроматографировал на силикагеле в системе хлоро форм— абсолютный этанол — 25%-ный аммиак ( 1 8 : 2 : 2 ). Обна ружение проводилось парами иода.

Хроматографию алкалоидов группы, колхицина в тонком слое изучали главным образом Шантавый и сотр. [296, 300, 301].

В одной из первых работ в этой области авторы исследовали про дукты фотоизомеризации 1-демекольцина хроматографированием,[296], в следующей обширной работе они описали хроматографи ческое разделение 38 алкалоидов колхицинового типа и их глико зидов на силикагеле в пяти системах растворителей: 1) бензол — этилацетат — диэтиламин ( 5 : 4 : 1 ) с добавкой 8% метанола;

2) бензол — этилацетат — диэтиламин ( 5 : 4 : 1 ) ;

3) хлороформ — ацетон — диэтиламин ( 7 : 2 : 1 ) ;

4) хлороформ — ацетон — диэтил-* амин ( 7 : 2 : 1 ) с добавкой 8% метанола;

5) бензол — этилацетат — диэтиламин ( 7 : 2 : 1 ). Система 1 служила для разделения нейт ральных алкалоидов, система 2 — для более полярных веществ, система 3 — для основных алкалоидов, система 4 для высокополяр ных веществ и система 5 — для разделения веществ с трополоно вым циклом [300]. Значения hRF некоторых веществ в системах 1 и 3 приведены в табл. 62. В последней работе приводится опи сание хроматографии р- и •у-люмипроизводных некоторых колхи циновых алкалоидов на силикагеле G или на чехословацком си Таблица Значения hRF некоторых алкалоидов типа колхицина [300] сз сз Вещество Вещество С С 61 Дезацетилколхицеин Колхицин 63 Дезацетилизоколхицеин Корнигерин 27 2-Деметилколхицин Демекольцин 36 Демекольцеин З-Деметилколхицин 32 2-Деметилдемекольцин Колхицеин 42 З-Деметилдемекольцин Изоколхицин Дезацетилколхицин Специальная часть ликагеле в системах 1 и 5 предыдущей работы, а также в смеси циклогексан — диэтиламин ( 8 : 2 ).

Другие, исследователи [47] хроматографировали колхицин в присутствии демекольцина или соответственно колхицеина в фармацевтических препаратах на силикагеле в системе хлоро форм— метанол (95:5). После элюирования из слоя вещества определяли спектрофотометрически.

Тейхерт и сотр. [236] подвергали разделению алкалоиды та бака. Они пользовались щелочным силикагелем и в качестве систем — смесями хлороформа с этанолом. Щелочной силикагель применяли также для отделения никотина и норникотина и дру гих алкалоидов этой группы [97].

0,3 г табака взбалтывали с 1 мл 5%-ного едкого натра, 2 мл эфира и 2 мл петролейного эфира;

смесь оставляли стоять 5 мин и отделяли верхний слой, со держащий алкалоиды 1[97].



Pages:     | 1 |   ...   | 9 | 10 || 12 | 13 |   ...   | 19 |
 





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.