авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:     | 1 |   ...   | 12 | 13 || 15 | 16 |   ...   | 19 |

«Doc. RNDr. PhMr. Magda SAR50NOVA, DrSc. RNDr. Vladimir SCHWARZ, CSc. RNDr. Cestmir MICHALEC A kolektiv CHROMATOGRAFIA NA TENKYCH VRSTVACH VO ...»

-- [ Страница 14 ] --

Разделение флавоноидов из Passiflora изучали Ледерфинк и соавт. [176], из Cadia elisiana Baker — Пари и сотр. [178], фла воноидных гликозидов из Cichorium endivia L. и Lactuca sati va L.— Вельдеке и сотр. [183], изофлавонов из Piptanthus пера lensis — Пари и сотр. [177] и из Trifolium pratense L. и Т. repens L.— Заксе [179]. Шмидтлейн и сотр. [181] подвергали разделе нию флаваноны и 3-оксифлаваноны, Отон-Дорж — флавоновые агликоны из Glycyrrhiza glabra L. [174], Гейсслер [172]—водо Таблица Хроматографирование флавоноидного растительного сырья Разделение вещества (в порядке возрастающих Обнаружение Сырье Литература Система значений hR) Скополин, катехин, аментофлавон, скопо Кора Viburnum pruni- Сг/Cl В V. opulus только ка УФзвв летин, полиен fol. Д 190 техин [40] Д Сг/С Цветки Arnica tnont. X, изокверцитрин, астрагалин, X, X, X, X содержит A. chamissonis Д П и другие вещества '[70, 159] Сг/С2 Изорамнетин-3-рутинорамнозид, изорамне Цветки Calendula offic. Прочие сорта С. содер Д П тин-3-рутинозид, изорамнетин-3-глюкозид жат и другие вещест ва 1[72, 159] Сг/СЗ Листья, цветки, плоды Д 160 X, Х-флавон, витексинрамнозид, X, гиперо- Можно различать от зид, витексин, X, X, катехин, X, кислоты Crataegum Д 190—АЬа дельные виды сырья олеаноловая, урсоловая, кратеголовая, [44] ф-ситостерин, Х Cr/C Цветки Рутин, изокверцитрин Sambucum [76, 78] Сг/С4 Д Цветки Tilia Можно отличать раз личные виды Т. [121] Сг/С2 Апигенин, апигенин-7-глюкозид, лютеолин-7- [76, 78] Трава Millefolium глюкозид Можно отличать раз Ц/С Трава Passiflora личные виды Р. [104] С. sinensis и С. paradisi Нобилетин (б,6,7,8,3',4'-гексаметоксифла Пары НС Сг/С6, С Эфирное масло плодов содержат I и III, С. reti вон)(1), понканетин (5,6,7,8,4'-пентамето Па—Ц/С рода Citrus culata — l, II и III ксифлавон) (II), 3,5,6,7,8,3',4'-,гептамето [134] ксифлавон(Ш) нижние три четверти хроматограммы и реактивом Д 190а - верхнюю четверть;

сушат при 130 °С и Опрыскивают реактивом Д а рассматривают в дневном свете.

Обозначения:

X неизвестное вещество;

Сг силикагель;

ПА^ц"полиа'мид Д С (Merck) с 15% порошкообразной целлюлозы;

С1 хлороформ — уксусная кислота — ацетон (75 : 25 : 10);

С2 этилацетат— муравьиная кислота — вода ( 8 : 1 : 1 ) ;

СЗ этилацетат — метанол — вода ( 1 0 : 2 : 1 ) ;

С4 толуол - метилацетат— 100%-ная муравьиная кислота - вода (30 : 50 : 14. t», С5 к-бутанол — уксусная кислота — вода (4 : 1 : 5 ) ;

С6 бензол - этилацетат - ацетон — вода (40 :.40 : 20 : 1);

С7 бензол - этилацетат - уксусная кислота (70 : 30 • 0,1);

С8 метанол — формамид — вода ( 6 0 : 3 0 : 15).

440 Специальная часть растворимые рутинозиды. Рутин в траве Fagopyrum aesculentutn определял Васевич [182], в лекарственных препаратах — Каравия и сотр. [175].

... Каннабиноиды Хотя действующие начала и растительное сырье из конопли Cannabis sativa L. (Cannabinaceae), именно Herba Cannabis, ма рихуана, гашиш и харас, не применяются в качестве собственно лекарственных средств, они представляют интерес с точки зрения токсикологии, судебной химии и судебной медицины, как и другие наркотики и галлюциногены растительного происхождения — опий и алкалоиды мака, кокаин, эфедрин, мескалин, псилоцин и их производные героин, ЛСД и т. д., которые рассмотрены в других разделах этЬй книги.

Надежное и чувствительное обнаружение этих веществ, поми мо других хроматографических методов, возможно также и с по мощью тонкослойной хроматографии. В качестве сорбента поль зуются исключительно силикагелем, нередко в форме готовых пластинок. Импрегнирование азотнокислым серебром облегчает разделение благодаря различию растворимости комплексов с ионами Ag+ в зависимости от степени ненасыщенности отдельных каннабиноидов. Значения RF понижаются с увеличением числа изолированных двойных связей [142, 143]. Пользуются также ще лочными слоями, получаемыми с диэтиламином или пропилами ном [143] а также пропиткой Ы,Ы-диметилформамидом [149, 150, 151, 158], см. также [184, 188, 189].

Для элюирования пригодны бензол [146], толуол [142—144], ксилол [144], для слоев, импрегнированных диметилформами дом, — циклогексан [149, 150, 158] и для силикагеля без пропит ки — системы гексан — диоксан (8 : 2) или бензол — я-гексан — диэтиламин (25:10:1) [152]. Грлич [143] проводил хроматогра фирование на пластинках Eastman Chromagram 6060, обработан ных азотнокислым серебром, в системе изооктан — пиридин (8:2) или двумерно — толуолом в обоих направлениях. После первой ступени он проявлял хроматограмму в парах аммиака;

во втором же направлении используется полярность разделяемых веществ и меняется их чередование на хроматограмме. Для слоев, обра ботанных диметилформамидом, удобным оказалось трехкратное элюирование [149]. Пари и Пари [152] для препаративных целей пользовались более толстыми слоями (0,5 мм) и системой мета нол— диоксан — н-гексан ( 1 : 2 : 7 ).

Обнаружение осуществляют преимущественно бис-диазотиро ванным о-дианизидином (прочный синий В) в виде 0,1%-ного раствора в воде или 70%-ном этаноле. После опрыскивания хро Специальная часть матограмму выдерживают в парах аммиака [146] или, по другим источникам [149—151], опрыскивают 1 или 0,1 н. раствором ще лочи. Каннабидиол (КД) дает окрашивание от оранжевого до красного, Д'-тетрагидроканнабинол (ТГК)—от розового до крас ного и каннабинол ( К Б ) — о т пурпурного до фиолетового. Изо меры ТГК отличаются друг от друга цветовым оттенком. Чувстви тельность для ТГК и КБ составляет 5 нг, а для КД — менее чем 1 нг [42]. Окраска пятен и элюатов сохраняется в течение не скольких месяцев. См. также работы [185, 187].

В неполярных растворителях пятна основных веществ (по убывающим значениям RF) располагаются в следующем порядке:

КД, ТГК, КБ. Азотнокислое серебро заметно понижает подвиж ность КД, при хроматографировании в толуоле наблюдались сле дующие значения hRF: КБ 50, ТГК 32, КД 8 [142]. При приме нении силикагеля, обработанного азотнокислым серебром, и бо лее полярной системы изооктан — пиридин (8 : 2) подвижность КД как малополярного вещества понижается, тогда как на под вижность ТГК это не оказывает влияния (значения hRp: ТГК 31, КБ 19, КД И) [143]. Каннабиноиды с пентильной боковой цепью (КД, ТГК и КБ) обладают большей хроматографической подвиж ностью, чем их гомологи с пропильным остатком (каннабидива рин, А'-тетрагидроканнабиварин и каннабиварин) [158]. Кроме этого, проявляются пятна кислот — производных этих соединений и неизвестные вещества.

Устойчивость азокрасителей, образующихся с упомянутым ре активом [146], позволяет количественно определять эти вещест в а — денситометрически {152], измерением площади пятен, а также фотометрически после элюирования их этанолом [144] или смесью равных объемов уксусной кислоты и метанола [150, 151].

Растительный материал экстрагируют в атмосфере азота при комнатной температуре при перемешивании. Вытяжку упаривают досуха в вакууме в атмосфере азота и остаток перед нанесением растворяют в гедссане [149] или в гептане, содержащем неболь шое количество метилэтилкетона и этанола [150]. Вместо петро лейного эфира можно пользоваться хлороформом или гексаном, а для экстракции кислот — этанолом или метанолом с 5% бензола [152, 158]. Имеет также свои преимущества метод «испарение — разделение» (ИР) (разд. 3.4.3), при котором создаются условия, подобные курению марихуаны, во время которого каннабиноид ные кислоты декарбоксилируются [146]. Метаболиты марихуаны в человеческом организме изучали Ломброзо и сотр. [186].

Важность проблемы потребления галлюциногенов и других веществ, вызывающих привыкание, побудила Всемирную органи зацию здравоохранения (ВОЗ) дать указания к составлению библиографии по аналитическим методам, пригодным для обна ружения этих веществ [147].

29- 442 • Специальная часть 5.8.6. Производные антрацена Слабительное действие некоторых растительных препаратов обусловлено присутствием производных антрацена, которые мо гут находиться в хинонной, антраноловой или антроновой форме в свободном виде или в виде гликозидов. Могут также образовы ваться димеры. Своим действием отличаются преимущественно 1,8-диоксиантрахиноны. В растительном сырье, как правило, на ходятся смеси этих веществ, каждое из которых обладает раз личным действием;

поэтому целесообразно их подвергать разде лению. Для этой цели очень удобна тонкослойная хроматография.

Сорбентом чаще всего служит силикагель. Сначала пользо вались большинством растворителей, обычных в хроматографии производных антрацена на бумаге, именно смесью этилацетат — муравьиная кислота — вода (60:12:18);

позже муравьиную кис лоту заменили метанолом;

этим достигли большей устойчивости смеси и более легкого удаления ее из слоя. В несколько изменен ном соотношении (100:17:13) эту смесь Фармакопея ГДР, изд. 7, рекомендует для антрахинонового сырья коры Frangula, цветков и плодов сенны и алоэ, тогда как для корневища ревеня предписывается система хлороформ — метанол ( 4 : 1 ). Для диан троновых гликозидов значительно удобнее смесь н-пропанол — этилацетат — вода ( 4 : 4 : 3 ) [33]. Разделение антрахиноновых про изводных из различных природных источников описали Диэтикер и сотр. [191], Хаммуда и сотр. [192, 193], Хаснадь и сотр. [194], Имре и сотр. [196], Лабади [197] и Проске [198].

Антрахиноны обычно обнаруживают растворами щелочей (Д 78 — Д80) или парами аммиака. Образующиеся окрашенные в красный цвет феноляты в длинноволновой ультрафиолетовой области обнаруживают флуоресценцию от темно-красной до фио летовой. Антроны, антранолы, диантроны и дигидродиантроны не дают красного окрашивания, однако некоторые из них окраши ваются в желтый цвет с желтой флуоресценцией (гликозильные производные антрона). В дальней УФ-области на слоях с люми нофором (силикагель GF254) наблюдается тушение флуоресцен ции. Для других антронов и антранолов пригоден раствор 4-нит розодиметиланилина в пиридине (Д 158). Для того чтобы приме нить специфические реакции, сеннозиды необходимо предвари тельно окислить, опрыскивая хроматограмму 25%-ной азотной кислотой и нагревая в течение 10 мин при температуре 120 °С.

При этом сеннозиды расщепляются и окисляются в соответствую щие антрахиноны, которые после действия раствора КОН обна руживают в УФ-свете красную флуоресценцию.

Кислотный гидролиз и окисление бывает удобнее проводить еще перед хроматографированием, так как деление гликозидов антрахинонов не всегда оказывается удовлетворительным.

Специальная часть 0,1 г измельченного в порошок материала смешивают с 5 мл 10 н. серной кислоты и 1 мл 30%-ной перекиси водорода и кипятят 1 мин. По охлаждении взбалтывают с бензолом (4—5 мл) и около 20 мкл бензольного раствора нано сят на хроматограмму [74]. Этот способ рекомендуется также Фармакопеей ГДР, изд. 7, для листьев и плодов сенны, только вместо бензола пользуются эфиром. Шталь [112] при подобных опытах упаривал бензольную вытяжку до объема около 1 мл и 10—15 мкл полученного раствора наносил на пластинку силикагеля GF254. Хроматографирование двуступенчатое — сначала на длину 5 см в системе этилацетат—метанол — вода (77: 13: 10) и после высушивания в течение 10 мин на длину пути 10 см в системе бензол — этилформиат — му равьиная кислота ( 7 5 : 2 4 : 1). Пятна наблюдают в ближней и дальней УФ-об ластях без обработки реактивами и после действия паров аммиака.

Условия разделения оксиантрахинонов и их наличие в расти тельном сырье приводятся в табл. 80, данные о хроматографии отдельных видов сырья — в табл. 81. Сорбенты и системы в этой таблице предписываются Фармакопеей ГДР, изд. 7, для хромато графического установления подлинности некоторых видов сырья.

При хроматографировании коры Rhamnum pursh. для сравнения удобно пользоваться алойном. Над и под его пятнами располага Таблица Значения hRr оксиантрахинонов (обнаружение реактивом Д 78) Положение заместителей Встречается г в Вещество А Б Д в сырье а R R —н Хризофанол -СН3 73 (1), 2, 3, 4, —осн3 Фисцион -СН3 30 (5), (6), —он Франгулаэмодин -СН3 12 2, 3, 4, (5),(6), —н Алоэ-эмодин —СН 2 ОН 35 1, 2, 4, 5, 6, —н Рейн —СООН 3 (1), 5,6, 49 —н —Н 1,8-Диоксиантра- хинон а 1 — алоэ;

2 — хризаробин;

3 — кора Frangula;

4 — кора Rhramnus pursh.;

5 — цветки Senna;

6 — плоды Senna;

7 — Radix rhei.

(В скобках приведены природные источники, содержащие малые количества антракн ионов.) Обозначения:

А силикагель, бензол — этилформиат ( 9 : 1 ) [115];

Б силикагель;

бензол — этилформиат — муравьиная кислота (15 : 5 : 1) [30];

В силикагель: этилацетат — метанол — вода (100: 17: 13) 175];

Г силикагель петролейный эфир (т. кип. 40—70 °С) —этилацетат ( 9 : 1 ) [23];

Д полиамид MN;

бензол — метанол ( 2 : 8 ) [131].

444 Специальная часть Таблица Хроматографии антрахинонового растительного сырья Разделенные вещества расположены в порядке возрастающих значений Сырье Система Литература hRp (в скобках) Сортировка ком Aloe capensis Сг/Cl Смолистое вещество, алоино зиды А и В, алоин, 3 смо- мерческих сор листых вещества тов [16, 34, 77] [33, 112] разде плоды СгФ/С2 Сеннозид В (10—15), сеннозид Листья и А (30—35), сеннозид D ление веществ Senna (35—45) реин-8-глюкозид других видов (45—55), сеннозид С (55—60) кассии Сг/СЗ Radix rhei 4 антрахиноновых гликози- [71] да (?), возможно рапонти цин, 2 антрахиноновых гли козида (?), алоэ-эмодин и реум-эмодин, хризофанол, фисцион Кора Frangula Сг/Cl X, глюкофрангулин В, глюко- [36, 81, 112] франгулин А (25—35), фран гулин А + В, X, свободные эмодины Кора Rhamnus fal- Сг/Cl [36, 81] Ксанторамнин (?), X, глюко франгулин, X, X, X, X, сво lacis бодные эмодины Кора Rhamnus Сг/Cl [36, 81] X, алоин (40—50), Х,Х, 11-де зоксиалоин, свободные эмо-.

pursh дины Кора Rhamnus Сг/Cl 10 X [36, 81] cathart Хризаробин Сг/С Обозначения:

X неизвестное вещество;

Сг силикагель;

СгФ силикагель с флуоресцентной добавкой, GF254;

С1 этилацетат — метанол — вода (100: 17: 13);

С2 этилацетат — к-пропанол — вода ( 4 : 4 : 3 ) ;

СЗ хлороформ — метанол ( 4 : 1 ) ;

С4 гептан — бензол — хлороформ ( 1 : 1 : 1 ).

ются флуоресцирующие желто-коричневым цветом каскарозиды.

Флуоресцирующие синим пятна свидетельствуют о наличии дру гих видов Rhamnus, они не должны обнаруживаться в сырье указанного вида [112]. Для обнаружения моноантронов, которые не должны присутствовать в коре Frangula (свежий материал), пользуются 4-нитрозодиметиланилином (Д158). Он окрашивает моноантроны в цвета от серо-синего до сине-фиолетового [112].

Антрахиноны коры Frangula можно разделять также в смеси ме Специальная часть тиленхлорид — метанол (83,5:16,5) или на кислых слоях, обра ботанных 0,5 н. раствором щавелевой кислоты в смеси тех же растворителей в отношении (100:5).

Для плодов и листьев сенны пригодна также система этил ацетат— метанол — вода (100:17:13). Она удобна и для дока зательства наличия Cort. Frangula и Fol. Senna в препарате сеннагран. Ее неудобство, однако, заключается в том, что она не разделяет сеннозиды А и В. И здесь можно применять ступен чатое хроматографирование — на длину 7 см н-бутанолом, насы щенным водой и на второй ступени системой я-пропанол — эта нол— хлороформ — вода-—уксусная кислота ( 4 0 : 4 0 : 1 2 : 1 6 : 4 ).

Сырье извлекают метанолом или 50—70%-ным этанолом при кипя чении. По охлаждении раствор фильтруют, наносят на пластинку.

Кхафадь и сотр. [57] разработали способ количественного определения сеннозидов А, В, С и iD с предшествующим извлече нием веществ из пятен хроматограммы. Вещества подвергали разделению на силикагеле в системе пропанол-2—этилацетат — вода (36 : 36 : 28) и обнаруживали спиртовым раствором едкого натра. Другие исследователи [67] определяли сеннозиды А, В и С без элюирования in situ флуориметрическим способом после раз деления на силикагеле в смеси аммиак — этанол — пропанол-2 — этилацетат ( 7 : 2 : 4 : 5 ) и опрыскивания хроматограммы 65%-ным водным раствором гидразина (рН 8). См. также работу [195].

Тиме и сотр. [126] спектрофотометрически определяли алоин в алоэ. Они пользовались силикагелем и системами этилацетат— уксусная кислота-—вода ( 5 : 1 : 4 ) и хлороформ — этанол — вода в различных соотношениях;

двумерным хроматографированием — в первом направлении смесью хлороформ — 95%-ный этанол — иода (30:15:1), во втором — хлороформ — 95%-ный этанол (3:1). Индийский ревень анализировали хроматографией на си ликагеле в системе бензол — хлороформ — уксусная кислота (90: 10:0,5). Действием 10%-ного метанольного КОН удалось об наружить реин, реум-эмодин, алоэ-эмодин и хризофанол [109].

При изучении состава сырья из Rubia tinctorum был выделен кристофин (1,4-диокси-2-этоксиметилантрахинон). Берг и сотр.

[8] хроматографировали метанольно-этанольную вытяжку (1:1) на активированном силикагеле в бензоле и его смесях различной полярности. Шталь разработал метод ИР (разд. 3.4.3) для изуче ния антраценовых производных и лекарственного сырья [199].

Блейер [190] пользовался тонкослойной хроматографией для об наружения фальсификации ревеня 1,8-диоксиантрахиноном.

5.8.7. Производные флороглюцина Вещества, в основе строения которых лежит флороглюцин, являются действующими началами некоторых растительных анти гельминтиков (Rad. filicis, Kamala, Flos koso) и умеренно седа 446 • Специальная часть тивного активного вещества хмеля (Strobilus Lupuli, Lupulinum).

Rad. Filicis и экстракт этого корня отличаются чрезвычайно непо стоянным содержанием действующего начала и эффективностью.

В их оценке значительную помощь оказала тонкослойная хрома тография.

Разделение этих веществ зависит от рН слоя;

Шталь и Шорн [117] показали это градиентной хроматографией на кислом и щелочном слоях, обработанных дигидрофосфатом натрия и аце татом натрия. На более кислых слоях соединения с одним флоро глюциновым циклом достигают лишь нижней трети хроматограм мы, в то время как, например, флаваспидиновая кислота, главная составная часть сырого филицина, перемещается с фронтом раст ворителя вместе с остальными веществами, содержащими два цикла.

Для обнаружения пользуются тушением флуоресценции на слоях, импрегнированных флуоресцентным индикатором;

можно пользоваться также солями диазония, хлоридом железа(III) с красной кровяной солью (Д 1006) и несколькими каплями азот ной кислоты (образуется темно-синее окрашивание), реактивом Фолина-Чокальте (Д 75) или вольфрамомолибденовым реактивом (Д19).

Экстракция. 1 г измельченного в порошок материала смешивают с 10 мл насыщенного раствора гидроокиси бария и часто взбалтывают в течение 30 мин.

Фильтруют, фильтрат слабо подкисляют разбавленной соляной кислотой и из влекают 2 раза порциями по 4 мл эфира, не содержащего перекисей. Эфирную вытяжку высушивают безводным сернокислым натрием и выпаривают досуха, остаток растворяют в 2 мл хлороформа и 10 мкл этого раствора наносят на хроматограмму |[Г17].

Условия хроматографирования приведены в табл. 82, в кото рой способ Д, т. е. метод хроматографии с обращенными фазами, показывает зависимость между значениями RF и числом флоро глюциновых циклов в молекуле (и соответственно молекулярной массой). Наивысшим значением RP обладают вещества с одним циклом (филициновая кислота, аспидинол), вещества с двумя циклами располагаются в средней части хроматограммы (напри мер, флаваспидиновая кислота, аспидин, альбаспидин), в то вре мя как филиксовая кислота, содержащая три цикла, практически остается на старте.

Лукнер и сотр. [72] подвергали разделению на силикагеле флороглюциды хмеля в системе н-гептан — этилацетат — муравь иная кислота ( 7 0 : 3 0 : 1 ). При детектировании раствором хлорида железа (III) (Д 97) интенсивность окраски пятен можно повысить нагреванием в токе горячего воздуха. Авторы иследовали таким образом группу гомологов ряда гумулона и лупулона в н-гепта новом экстракте растительного сырья. Флороглюциды из трех видов Dryopteris разделили Виден и сотр. [200].

Специальная часть Таблица Значения hR,- флороглюциновых производных Формула Обна (в скобках в г д Вещество А Б руже приведено ние число циклов) Филициновая кислота 100 КрФ С8Н10Оз (1) СпН,зО 4 (1)) 87 ОКр Деаспидинол Четилфлоробутирофенон 83 КрФ СпН 1 4 О 4 (1) С 1 2 Н 1 6 О 4 (1) 81 КрО Бутирилфилициновая кислота а 73 80—85 78 КрФ Аспидинол С 1 2 Н, 6 О 4 (1) 41 о 50 Флоропирон C 2 iH 2 6 O 7 (2) 9 26 70 ОКр Флаваспидиновая кислота С 2 4Н 30 О 8 (2) 7 о 12 Дезаспидин С 2 4 Н 3 0 О 8 (2) 82 ж 33 Аспидин С 2 5 Н 3 2 О 8 (2) 85 26 11 ОКр Альбаспидин С 2 5 Н 3 2 О 8 (2) 87 16 50—60а 3 ОКр Филиксовая кислота С 3 6 Н 4 4 О 1 2 (3) 90 а Значения взяты из работы [112].

Обозначения:

А силикагель G, обработанный буферным раствором Мак-Ильвейна рН 6,0;

петролейный эфир — хлороформ — этанол (47,5 : 47,5 : 5) [103];

Б силикагель G, обработанный 0,5 н. щавелевой кислотой;

бензол — хлороформ ( 1 : 1 ) [106];

В силикагель GF254, обработанный 0,3 М раствором ацетата натрия;

этилацетат, дву кратное хроматографирование [116];

Г сорбент, как в В;

хлороформ — метанол ( 8 5 : 1 5 ), двукратное хроматографирование [117];

Д силикагель GF 25 4, импрегнированный смесью парафина и петролейного эфира (5 : 95);

метанол — муравьиная кислота — вода ( 7 5 : 10: 15) [116].

Обнаружение опрыскиванием свежеприготовленным 0,5%-ным водным раствором проч ного голубого В и затем 0,1 н. раствором едкого натра.

Производные диферулоилметана 5.8.8.

Желтый краситель, содержащийся в корневищах некоторых видов Curcuma, например С. tonga и С. xanthorrhiza, обладает желчегонным действием. Его можно выделить на силикагеле в системе хлороформ — уксусная кислота ( 9 : 1 ). После обнаруже ния смесью уксусного ангидрида и концентрированной серной кислоты ( 9 : 1 ) появляются пятна следующих веществ (в порядке возрастания значений RF) (в скобках указывается окрашивание:

дневной свет/УФ365) [73]: яХ-диоксициннамоилметан (КрФ/ЖКр), (КрФ/КрК), диферулоилметан тг-оксициннамоилферулоилметан или куркумин (КрФ/КрК), неизвестное вещество (СсФ/СвКр).

и,я'-Диоксициннамоилметан типичен для корневища Curcuma 448 Специальная часть longa, и его наличие позволяет отличить его от С. xanthorrhiza.

Важной составной частью этих материалов является также эфирное масло (см. след. разд.).

5.8.9. Эфирные масла, смолы, бальзамы Эфирные масла представляют собой растительные выделения липофильной природы, с характерным запахом, перегоняющиеся с водяным паром. Они, как правило, состоят из многих веществ.

Природные смеси смол и эфирных масел называются бальза мами.

В эфирных маслах представлены самые разнообразные органические соеди нения;

до настоящего времени их идентифицировано около 500, причем один сорт масла может содержать до 50 соединений. Во многих эфирных маслах какая-либо одна составная часть настолько преобладает, что она. определяет целиком характер эфирного масла, его запах, химические и физические свойст ва и фармакологическое действие и, следовательно, может служить для иден тификации этого эфирного масла. Составные части эфирных масел — природные вещества всех биогенетических классов, ацетаты генинов или полиацетаты, тер пены, фенилпропаны и вещества, содержащие в молекуле атом серы или азота, и особенно вещества с невысокой молекулярной массой, небольшим числом кис лородсодержащих функциональных групп, не связанных с сахарами гликозид ной связью. Этими свойствами обладают главным образом монотерпены, сескви терпены, дитерпены и фенилпропаны. Они и являются обычными составными частями эфирных масел, например монотерпены тимол, гераниол, ментол, туйон, сесквитерпены типа фарнезола, гвайяна и т. п. Вплоть до соединений Cis, т. е.

сесквитерпенов, это жидкие составные части эфирных масел. Дитерпены не яв ляются типичными составными частями эфирных масел, но присутствуют в бальзамах и смолах главным образом вместе с соединениями более высокой молекулярной массы —• тритерпенами. Фенилпропаны, производные бензола с пропильной боковой цепью, представлены, например, эвгенолом, сафролом, ми ристццином. Вещества, содержащие органически связанные азот и серу, входят в состав эфирных масел семейства Ferula.

В зависимости от строения и содержания функциональных групп составные части эфирных масел представляют собой углеводороды — алифатические (к-геп тан, (З-мирцен), ароматические ("п-цимол) и циклические (пинен, камфен), спир ты (гераниол, ментол), альдегиды (цитраль, бензальдегид, ванилин), фенолы (ти мол, анетол, эвгенол), кислоты алифатические (масляная, валериановая) и аро матические (бензойная, коричная), сложные эфиры (циннамеин), лактоны (ку марин) и т. д.

Столь сложные смеси веществ невозможно разделить удовлет ворительным образом без внедрения хроматографических мето дов. Хроматография на бумаге, которая в 50-х годах первенство вала в технике разделения, несмотря на различные сложные мо дификации, при делении этих липофильных веществ, не принесла значительных результатов. Они были достигнуты главным обра зом с введением тонкослойной хроматографии.

Был установлен ряд закономерностей, по которым протекает разделение составных частей эфирных масел в тонких слоях.

Адсорбционное сродство терпенов оказалось возможным предска Специальная часть зать на основании значений диэлектрической проницаемости. Для моно- и сесквитерпенов Шталь [156] нашел зависимость разде ления от числа и положения двойных связей. Способность этих веществ образовывать комплексы используют для хроматографии на силикагеле, обработанном азотнокислым серебром. Вещества с двойной связью координационно связываются с ионами Ag+ и поэтому адсорбируются прочнее, чем насыщенные соединения [154]. Положение окисей, эпокисей и перекисей терпенов на хро матограмме определяется полярностью основного соединения.

Сложные эфиры терпеновых спиртов, чаще всего с уксусной кис лотой, реже с муравьиной, пропионовой, масляной или валериа новой, имеют значения RF в 2,5 раза выше, чем свободные спирты.

Значения RF сложных эфиров гомологического ряда низших жир ных кислот повышаются с увеличением числа атомов в молекуле кислоты. Исключение составляют эфиры муравьиной кислоты, ко юрые имеют ту же подвижность, что и эфиры пропионовой кисло ты. Значения RF альдегидов (коричного, ванилина) и кетонов (камфоры, карвона) зависят в определенной степени от поло жения гидроксильных и метоксильных групп. Монотерпеновые и сесквитерпеновые спирты на силикагеле в хлороформе или в смеси хлороформа и бензола имеют приблизительно одинаковые значения RF;

однако возможно разделить спирты Сю и Cis- Ге митерпеновые, монотерпеновые, сесквитерпеновые и дитерпеновые спирты при разделении на слоях, импрегнированных парафином или силиконовым маслом, обнаружили косвенную зависимость значений RF от числа атомов углерода. Спирты, разделенные по числу атомов углерода, можно затем разделить в зависимости от числа двойных связей С = С на силикагеле, импрегнированном 2,5%-ным раствором азотнокислого серебра. Таким образом удалось разделить неролидол, гераниол, борнеол и т. д.

Сильное влияние на адсорбционное сродство оказывают фе нольные группы. Одноатомные фенолы в бензоле или хлороформе обладают хроматографической подвижностью, двухатомные оста ются на старте. Простые эфиры фенолов имеют существенно бо лее низкое адсорбционное сродство, чем соответствующие фенолы (например, фенол — анизол). С возрастанием числа метоксигрупп значения RF убывают. Например, анетол, содержащий 1 группу ОСНз, имеет RF 0,83, метиловый эфир изоэвгенола (2 группы ОСНз)—0,22, изоазарон (3 группы ОСНз)—0,13. Оказывает влияние и положение метоксигрупп. Элемицин с 3 соседними метоксигруппами адсорбируется сильнее изоазарона, который можно считать производным оксигидрохинона. Более подробные сведения об этих закономерностях со ссылками на оригинальные статьи можно найти в статье Шталя и Иорка [157].

Моно- и сесквитерпены чаще всего обнаруживают концентри рованной серной кислотой, иногда с добавлением альдегида (на 450 • Специальная часть пример, ванилина или анисового альдегида), хлоридом сурь мы (III) или фосфорномолибденовой кислотой. Для обнаружения окисей и перекисей служит анисовый альдегид в серной кислоте, хлориды сурьмы(III) и (V), и-диметиламинобензальдегид и спе цифический реагент для обнаружения перекисей — смесь иодида калия и крахмала [155]. Лактоны можно детектировать раство ром перманганата калия, сложные эфиры — фосфорномолибде новой кислотой. Для обнаружения альдегидов и кетонов можно пользоваться 2,4-динитрофенилгидразином. Применяют также ванилин в серной кислоте и л-диметиламинобензальдегид,[133].

Фенилпропаны обнаруживают фосфорномолибденовой кислотой, анисовым альдегидом, хлоридом сурьмы(III) и (V). Для обнару жения при хроматографии эфирных масел некоторые исследова тели применяли опрыскивание раствором флуоресцеина и после дующее действие парами брома (образование эозина) [92], ро дамином В [6, 47] или парами иода,[42, 94]. Приготовление растворов реактивов см. в разд. «Реактивы для обнаружения».

В качестве сорбента, или соответственно стационарной фазы, применяют чаще всего силикагель, однако пользуются и силика том магния, силикатом алюминия, кремнеземом, далее кремне земом, обработанным формамидом или азотнокислым серебром, а также окисью алюминия, смесью силикагеля и бентонита, нако нец, полиамидом. Пригодны готовые силикагелевые пластинки силуфол UV254 производства ЧССР [22].

Подвижную фазу образуют неполярные растворители — н-гек сан, бензол, хлороформ и их смеси с этилацетатом, четыреххло ристым углеродом или петролейным эфиром, и полярные системы с уксусной или муравьиной кислотой, метанолом или ацетоном.

Спирты можно разделить в смеси метанол — вода (7 :3) на слоях, обработанных парафином или силиконовым маслом (обращенные фазы).

Карбонильные терпеновые соединения можно разделять с по мощью получения производных — динитрофенилгидразонов или эфиров динитробензойной кислоты. Из производных фенилпропа на в растительном сырье чаще всего встречаются метоксифенил пропановые, например апиол, азарон, катехин, элемол, метилха викол, миристицин и сафрол. Их разделяют на силикагеле, со держащем люминофор, в бензоле или в смесях петролейный эфир — эфир и м-гексан — этилацетат [98];

катехин и прочие ди- и трифенолы остаются на старте, и их разделяют потом более полярными растворителями. Для этого было предложено двумер ное хроматографирование: в первом направлении в бензоле или хлороформе и во втором — кислыми или щелочными системами [148]. Габель и сотр. делили изомерные фенолы тимол и карва крол на силикагеле в системе хлороформ — пиридин — бензол ( 6 5 : 5 : 3 0 ). На подщелоченном силикагеле или окиси алюминия Специальная часть фенолы образуют феноляты, и их RF заметно ниже, чем RF нейт ральных простых эфиров фенолов [107].

Указанные закономерности хроматографического поведения используются главным образом при разделении определенных групп веществ. Однако эфирные масла, как правило, содержат все эти группы вместе, и трудно ожидать удов летворительного разделения каким-либо одним способом. На практике при оп ределении подлинности эфирных масел ограничиваются поэтому обнаружением их главных характерных составных частей или тех веществ, которые являются специфическими для возможных заменителей или для испорченных масел. Не обходимо при этом также учитывать, что товарную продукцию почти всегда рек тифицируют тем или иным способом, чтобы добиться желаемого запаха и вкуса.

Фракционированной перегонкой, например, разделяют низко- и высококипящие составные части;

обычным явлением оказывается также смешивание эфирных масел разной сортности. Поэтому свежеперегнанное в лаборатории эфирное масло из растительного сырья обычно отличается по составу от товарного про дукта, в котором к тому же могут происходить изменения при старении.

Способы разделения эфирных масел методом ТСХ приведены в табл. 83.

При обнаружении анисовым альдегидом (Д7) анетол прояв ляется в виде желтого, линалилацетат и цинеол-—коричневого, карвон и цитраль — оранжевого и ментол •—сине-фиолетового пятен. При опрыскивании 0,1 н. раствором перманганата калия окисляющиеся соединения эфирных масел обнаруживаются в виде желтых пятен на розово-фиолетовом фоне. Анетол, цитраль, эв генол и карвон тушат флуоресценцию в ультрафиолетовом свете при длине волны 254 нм;

на зеленом фоне видны темно-фиолето вые пятна (на силуфоле UV204). При действии раствора формаль дегида в серной кислоте пятна анисового и коричного альдегидов и ментола окрашиваются в желтый, анетола и линалилацетата — в коричневый, борнеола — в оранжевый, борнилацетата и цитра л я — в желто-коричневый, цинеола, линалоола, гераниола и кар вона — в оранжевый, эвгенола — в фиолетовый и тимола — в крас но-фиолетовый цвета [22].

При испытании на подлинность и чистоту эфиромасличного сырья хроматографированию подвергают свежеотогнанное из него масло или метанольный экстракт. Фармакопея ГДР, изд. 7, при водит оба способа. Для извлечения эфирных масел из сырья мож но пользоваться также дихлорметаном или смесью хлороформ — • метанол ( 1 : 1 ), а также применять метод ИР (испарение — разде ление) [112].

Различить корневища Curcuma tonga и С. xanihorrhiza мож но хроматографированием свежеотогнанного эфирного масла в м-гексане [159] или метанольной вытяжки в смеси хлороформ — бензол — 96%-ный этанол (45:45:10). После обнаружения и-ди метиламинобензальдегидом, смесью уксусного ангидрида с сер ной кислотой или 3%-ным раствором борной кислоты в метаноле с добавкой 0,5% соляной кислоты (25%-ной) у Rh. Curcumae Продолжение табл. Таблица Хроматография эфирных масел Реактив для Система Источник выделения Сорбент обнаружения растворителей эфирного масла Реактив для Система Источник выделения эфирного масла Сорбент растворителей обнаружения С16 [83] Силикагель F254 [83] 87 [136] Цитрусовые С7 [161] * Силикагель, силу- C l l[69, 160 161] Д 190 [69, 161] Anisum %-ная H 2 SO С4, С9 [101, 119] Силуфол UV254 [22] фол UV254 [22] С2 [9, 136, 141] Д 466 [160, 161] [49], УФ254 [101, С12 [49] 119] СЗ [140] УФ«4 [124] Д 20 [119] С17 [97] Д 87 [43, 136] С4 [161] Силикагель+кремне зем [92] С18, С19 [92] Д 76 [22] С5 [22, 124] Д 76 [22] С5 [22] С6 [22] С6 [22] Силикагель С7 [159] Д 87 [159] Calamintha Д 190 [97] С2 [136] Кремнезем [26] Conundrum Д 190 [69, 100] Силикагель+AgNOs С7 [69] Carvum Д 87 [42, 136] Силикагель + крем- С7 [42] Силикагель D [69] Д 466 [43, 69, С2 [9] [49] незем [92] 100, 101] С18 [26] С1, С4, С9 [101] Концентрирован С8 [100] СиЛуфОЛ UV254 [22] ная H 2 SO 4 [59] С17 [97] С4 [101] H 2 SO 4 +HNO 3 [59] С6 [22] 50%-ная H 2 SO С5 {22] Силуфол UV254 [22] Д 7 [161] [49] С20 [161] Силикат магния [20] Эвкалипт LJ Д 190 [160] С1 [101] С9 [49, 101] Силикагель Д 76 [22] Д 87 [86, 136] С4, С9 [101] УФ [59, 101], С6 [22] флуоресцеин-f- Силуфол UV 254 [22] С21 [86] Д 76 [22] + B r 2 [59] СЮ [86] Представители се- Силикагель+кремне- С18 [92] УФ365 [161] С22 [87] мейства Caryo- зем (4:2) [92] Д 190 [161] С32 [161] С23 [160] phyllaceae С2 [136] Cinnamomum Силикагель С2 [136] С5 [22] 0,1%-ный раствор Магнезоль [10] С1 [12] С6 [22] 2,6-дихлорхи нонхлоримида в Д 76 [22] С1 [42, 69, Силикагель [128] этаноле [125] Foeniculum 160] СЮ [86] Д 190 [69] Силуфол UV254 [22] Силикагель D [69] Д 466 [69, СП [161] Бромфеноловый С24 [42, 128] 161] синий (бензой С6 [221 J ная, коричная С2 [136] Кремнезем [26] Д 87 [42, 136] С12 [125] кислоты) [125] Д 40, КМпО4, фл дву - С7 [128, 161] Силикагель + С13 [125] оресцеин+Вгг окись кремния [128 С5 [22] С14 [125] [128] С6 [22] С15 [125] Силуфол UV254 [22] Цитрусовые Д 190 [97, 161] Cl [53] Cиликaгeль+AgNOз [49] Д 466 [92, 99] С2 [136] Продолжение табл. Продолжение табл. Реактив для Система Источник выделения Источник выделения Система Реактив для Сорбент обнаружения растворителей эфирного масла эфирного масла Сорбент растворителей обн аружения Д 190 Ас [69] Силикагель [18, 19, С12, С34 [118] Силикагель+АгМОз С2 Д 190 [97] Salvia [136] Geranium 118, 159], двуокись СНС1з—СНзОН Д 87 |[19, 159] Г Л Г\ [49] С2Е Д 87 { [91] кремния [17] [17], С1 [18,19, Д 7а [124] Силикагель С26 50%-ная H2SO« [123] 69, 101, 118] [49] С Силуфол UV2S4 [22] [97] Силикат магния [18, С4, С9 [101] С6 19] [22] С7, [159] С27 [112] С Кремнезем+AgNOs Д 87, [41, 136] [41, 51] Lavandula [139] С1 Д 190 [69, 161] [69] С32 Д 87 [136] Силикагель С12, С31, Thymus Г С Силуфол UV254 [22] Д 76 [ [136] 4-Аминоантипи Силикагель+кремне- С7 [69, 159] С7 [161] зем (4:1) [89] рин, С5 [22] Д 190 Ас [69] С20 [107] С4, С9 [101] Д 116 [118] С18 [89] С6, [22] 4-Аминоантипи С1 [28] рин+KaFeX Силикагель [128, 142] С1 {69, 84, 99 Д 190 Ас [69,161, Mentha piperita СЗЗ [88] X(CN) 6 +NH 102, 128, 135] 128, 159] С27 [118] [159] Силикагель + окись С7 [50, 128, 159, Д 116 [136] алюминия [128] 161] Родамин В [7] Силуфол UV254 '[22] С23 [160] Д 7а [160] С2 [84, 136] Д 190В [90] Обозначения:

С27 [112] Д 466 [101] С1 бензол;

С2 бензол — хлороформ (1 : 1);

С4, С9 [101] Д 87 [135, 136, СЗ бензол — метанол (1 : 1);

102] С4 к-гексан — этилацетат ( 9 : 1);

С5 к-гептан — этилацетат ( 9 6 : 4 ) ;

С12 [84] Сб к-гексан — этилацетат (96 : 4);

Д 40 флуоресце С7 бензол — этилацетат ( 9 5 : 5 ) ;

ин+Вг [128] С24 [50, 90] С8 к-гексан — эфир ( 8 7 : 13);

С9 к-гексан — этилацетат ( 8 5 : 15);

С28 СП '[99] СЮ циклогексан — этилацетат ( 9 5 : 5 ) ;

Н1ЧО3+уксусная СП бензол — метанол ( 1 9 : 1 ) ;

кислота [50] С5 [124, 22] С12 хлороформ;

С13 к-гексан — уксусная кислота ( 9 5 : 5 ) ;

С6 [22] Д 76 '[22] С14 к-гексан — пиридин ( 9 5 : 5 ) ;

С15 бутиловый эфир — муравьиная кислота (100: 1);

С16 к-гексан — уксусная кислота — этилацетат (150 : 1 : 50);

Силикагель [159] С7 [159] Д 87 [159] Petroselinum С17 к-гексан — хлороформ — уксу:ная кислота ( 6 : 2 : 2 ) ;

С18 бензол — этилацетат ( 8 5 : 1 5 ) ;

С29 [85] С19 петролейный эфир — этилацетат ( 8 5 : 15);

Силикагель+АйгГОз Д 7 [85, 161] Pinus pumil.

С20 бензол — этилацетат ( 9 : 1 ) ;

[93] СЗО [19] С21 к-гексан — этилацетат ( 9 5 : 5 ) ;

С22 бензол — этилацетат ( 7 : 3 ) ;

Силикагель F [85] С4 [161] С23 бензол — этилацетат ( 5 : 1 ) ;

С24 н-гексан;

С6 [22] Силуфол UV254 [22] С25 к-гексан — эфир ( 9 0 : 9 ) ;

С26 циклогексан — метилэтилкетон ( 9 5 : 5 ) ;

С27 бензол — хлороформ ( 2 5 : 7 5 ) ;

Силикагель [51] С20 [51] Д 87 [136] Rosmarinus С28 бензол — метанол ( 7 5 : 2 5 ) ;

С29 бензол — этилацетат ( 8 : 2);

С2 [136] Силуфол UV254 [22] Д 190 Ас 161] СЗО метанол — ацетон — четыреххлористый углерод (5 : 20 : 75);

С31 бензол — уксусная кислота ( 9 5 : 5 ) ;

С18 [90] СЭ2 бензол — пиридин ( 9 5 : 5 ) ;

СЭЗ к-гексан — эфир ( 6 : 4 ) ;

С7 [161] С34 к-гексан — эфир ( 8 : 2 ).

С6 [22] 456 Специальная часть longae дополнительно появляются пятна быс-десметоксикурку мина.

При изучении проазуленов пользовались хроматографировани ем петролейноэфирной, эфирной или хлороформной вытяжки из Matricaria chamomilla, Achillea millefolium, A. asplenifolia и Arte misia absinthium на силикагеле, активированном при 105 °С в те чение 1 ч, в системе бензол — этилацетат ( 2 : 1 ). Вещества обна руживали л-диметиламинобензальдегидом [129].

При оценке Flos Chamomilla и эфирного масла ромашки важ но обнаружить бисаболол. После хроматографирования на сили кагеле в гексане и в смеси бензол — этилацетат (95:5) (—)-а бисаболол элюировали и количественно определяли УФ-спектро фотометрическим путем [105]. На силикагеле GF254 после разде ления в системе хлороформ — бензол (75:25) Шталю [112] уда лось наряду с бисабололом обнаружить еще н- и ызо-енинбицик лический эфир по тушению флуоресценции при 254 нм. Для ис следования изменений, происходящих в эфирном масле цветков Chamomilla после радиационной стерилизации растительного сырья, Блазек пользовался хроматографией на силикагеле в сис теме ксилол — этилацетат (9:1) [15]. В качестве реактива для обнаружения служил раствор л-диметиламинобензальдегида в ук сусной кислоте.

Автор другой работы [58] хроматографировал бергамотовое масло двумерным способом на смешанном слое силиката магния и кремнекислоты бензолом в обоих направлениях;

для детектиро вания служил 0,05%-ный раствор флуоресцеина и пары брома.

Кетоны он подвергал разделению двумерным способом на сме шанном слое активного угля и кремнекислоты в одном направ лении в смеси бензол — эфир — уксусная кислота ( 8 2 : 9 : 9 ).и в системе бензол — эфир ( 8 5 : 1 5 ) — в другом и обнаруживал их 2,4-динитрофенилгидразином в 2 н. соляной кислоте.

При исследовании влияния эндогенных и экзогенных факторов на содержание валепотриатов и эфирного масла в Valeriana offic.

L. эфирное масло хроматографировали на силикагеле в смеси хлороформ — бензол ( 8 : 2 ). Для обнаружения пользовались ва нилином в серной кислоте и нагреванием в течение 3 мин при 105 °С [132]. Валепотриаты из этого материала можно делить на силикагеле смесью гексан — метилэтилкетон (8:2) и обнару живать динитрофенилгидразином (Д 46) и нагреванием в тече ние 5—10 мин при 105°С [64].

Смолы состоят главным образом из ди- и политерпенов и про изводных фенилпропана. У них по сравнению с эфирными масла ми низкая упругость пара, и они не перегоняются с водяным паром.

Смолы почти всегда содержат определенное небольшое коли чество эфирных масел. Если содержание эфирного масла дости Специальная часть гает такой величины, что составные части смолы находятся в нем в растворенном или эмульгированном состоянии, такие смеси называют бальзамами.

Шталь [111] сообщал о возможности хроматографировать смолы методом ТСХ уже в 1958 г. Этот метод используется не только в идентификации смол и бальзамов, но и в контроле их чистоты, установлении подлинности, определении возможных загрязнений и фальсификации.

Смолы и бальзамы (3%-ные растворы в этилацетате или хло роформе) Иорк [52] подвергал разделению в S-образной камере Шталя, насыщенной парами растворителя, двукратным хрома тографированием на активированном силикагеле в системе бен зол — метанол (95 : 5). Пятна он детектировал хлоридом сурь мы (III) (Д87а), а также в ультрафиолетовом свете при длине волны 365 нм. Для практических целей было бы желательно иметь возможность различать сиамскую и суматранскую разно видности бензойной смолы;

однако наиболее надежным остается обнаружение кристаллического возгона при нагревании сиамской смолы. Перуанский бальзам по Фармакопее ГДР, изд. 7, реко мендуется хроматографировать на силикагеле G в системе бен з о л — н-нонан (95:5). Для обнаружения служит ванилин в сер ной кислоте и ультрафиолетовое освещение с длиной волны 365 нм. Канадский бальзам и некоторые смоляные кислоты Чал лен и сотр. [48] хроматографировали на силикагеле G в системе н-гексан — этилацетат (7:3) одно- или двумерным способом со смесью хлороформ — ацетон (9:1) во втором направлении.

5.8.10. Сапонины Сапонины являются гликозидами, генин которых может иметь тритерпеновую или стероидную (спиростаны) структуру.

Стероидные сапонины подразделяются на нейтральные, не содержащие азо та, и основные, содержащие гетероциклический азот. Последние относятся ско рее к стероидным алкалоидам. С агликоном (сапогенином) связано гликозидной или сложноэфирной связью до 12 моносахаридов или уроновых кислот. Они могут группироваться в одну цепь (монодесмозиды) и в две (бисдесмозиды).

Типичное свойство сапонинов — склонность к гемолизу эритроцитов и образова нию комплексов с холестерином — выражена преимущественно у монодесмози дов Некоторые сапонины содержат также связанные сложноэфирной связью кислоты, например уксусную, тиглиновую и т. д. Сапонины, содержащие один остаток сахара в молекуле, называются просапогенинами. Их сапониновые свой ства выражены слабо.

Тритерпеновые сапонины подразделяются на нейтральные и кислые. Кис лотность обусловливается карбоксильной группой в агликоне или в углеводном остатке (уроновой кислоте).

Тритерпеновые сапонины извлекают из растительного сырья разбавленным этанолом или метанолом. Для удаления примесей жировых веществ сырье удобно предварительно экстрагировать 30— 458 Специальная часть петролейным эфиром;

красящие вещества удаляют предваритель ной экстракцией хлороформом.

Выделение стероидных сапонинов. Растительный материал экстрагируют раз бавленным метанолом, вытяжку упаривают IB вакууме и извлекают изобутанолоч.

Изобутанольный слой растворяют в метаноле. Из этого раствора неполярные вещества извлекают петролейным эфиром, водный слой упаривают досуха и повторно экстрагируют 90%-ным этанолом. Этанольные вытяжки соединяют, фильтруют и упаривают 1[145].

Для разделения нейтральных сапонинов пользуются большей частью водно-спиртовыми системами, например хлороформ — ме танол— вода (65:35:10). Эта система удобна и для препаратив ных целей, и ею можно пользоваться для хроматографии на ко лонке и для разделения сложных смесей сапонинов. Соотношение растворителей можно изменять в зависимости от полярности раз деляемых веществ;

для слабополярных сапонинов воду в смесь не добавляют, причем органические растворители берут в соотно шении ( 8 : 2 ). Удобной менее полярной смесью является система этилацетат — четыреххлористый углерод. Кислые сапонины делят в смесях, содержащих бутанол, например н-бутанол — этанол — 25%-ный аммиак ( 7 : 2 : 5 ). Качественное и количественное опре деления сапонинов описал Франк [201].

Полярные группы генинов или углеводного остатка влияют на хроматографическое поведение сапонинов. Они понижают RF Характерное свойство сапонинов — склонность к гемолизу эрит роцитов — можно использовать для довольно специфического ис пытания на подлинность. Удобнее наливать на хроматограмму раствор дефибринизированной крови и желатины (Д194), чем опрыскивать ее суспензией эритроцитов. Необходимо, однако, иметь в виду, что существуют сапонины, практически не проявля ющие гемолитических свойств. Поэтому для неизвестных веществ всегда дополнительно пользуются химическими реактивами. Для всех типов сапонинов пригодны хлорид сурьмы(III) (Д87а), ре актив Либермана — Бурхардта или хлорсульфоновая кислота.

Последняя окрашивает олеаноловую кислоту в цвет от коричне вого до фиолетового, а бетулиновую кислоту — в светло-голубой цвет. Пригодны также фосфорная или серная кислоты, без до бавок или с ванилином или анисовым альдегидом [55, 66, 113].

Реакцией с серной кислотой пользовались также для количест венного определения сапонинов с помощью ультрафиолетового света [46, 55].

Сорбентом служит обычно силикагель. Шталь хроматографи ровал сапонины корней растений Primula, Sarsaparilla, Senega и коры Quillaia в смеси м-бутанол — уксусная кислота — вода (5:1:4) [ИЗ] и пропанол-2 — вода — муравьиная кислота (80:15:5) [112]. Сапонины Herniaria glabra удалось разделить на силикагеле Н двумерным способом в системах этилацетат — Специальная часть муравьиная кислота — вода (72:10:16) и во втором направле нии — хлороформ — метанол — муравьиная кислота — вода (60 : 28 : 4 • 7), а их агликоны в системе хлороформ — метанол — во да (80:35:7) [55, 56]. Было обнаружено восемь сапонинов Эсцин из Aesculus hippocastanum был выделен в системе хлороформ — метанол — вода (59 33 : 8). Сапонины Solidago исследовали Гил лер и сотр )[202], женьшеня (Рапах ginseng)—японские авторы [203].

ЛИТЕРАТУРА 1 Abdel Hay F M, Abu-Mustafa Е A, El Tamil BAH, Fayez MB E, Planta med, 13, 91 (1965) 2 Adamska M, Lutomski I, Planta med, 20, 224 (1971) 3 Anton R, Duquenois P, Ann pharm franc, 26, 673 (1968) 4 Badawi M M, Fayez M. В., Planta med, 15, 140 (1967) 5 Balbaa S I, Hilal S H, Naggag M Y, Planta med, 22, 209 (1972) 6 Battaile J, Dunning R, Loomis W D, Biocmm Biophys Acta, 51, (1961) 7 Battaile I, Loomis W D, Biochim Biophys Acta, 51, 545 (1961) 8 Berg W, Hesse A, Kraft R., Herrmann M., Pharmazie, 29, 478 (1974).

9 Betts T J, J Pharm Pharmacol, 16, 131 (1964) 10 Betts T J, J Pharm Pharmacol, 17, 520 (1965) 11 Beynch Т., J Chromatogr, 20, 173 (1965) 12 Bhramaramba A, Sidhu G S, Perf Essent Oil Res, 54, 732 (1963) 13 Bleier W, Chinkdjian J J, J Chromatogr, 26, 156 (1971) 14 Bleier W, Chinldjian J. J., Planta med, 22, 145 (1972) 15 Blazek M, Pharmazie, 28, 339 (1973) 16 Bohme H, Kreutzig L, Dtsch Apoth Ztg, 103, 505 (1963) 17 Brieskorn С H, Biechele W, Dtsch Apoth-Ztg, 111, 141 (1971) 18 Brieskorn С Н, Dalferth S, Dtsch Apoth-Ztg, 104, 1388 (1964) 19 Brieskorn С N, Khnger H, Polonius W., Arch Pharm 294, 389 (1961) 20 Bryant L H, Nature, 175, 556 (1955) 21 Caporale G, Dall'Acqua F, Capozzi A, Maraani S, Crocco R, Z Natur forsch, 26b, 1256 (1971) 22 Dandova J., дипломн раб Farm fak Umv Karlovy, Hradec Kxalove, 1974.

23 Damlovic M, Naumovic-Stefanovic O, J Chromatogr, 19, 613 (1965) 24 Duquenois P, Anton R, Ann pharm franc, 26, 607 (1968) 25 Egger / (, в ш Stahl E Dunnschicht-Chromatographie 2 Aufl Springer Verlag, Berlin, 26 Фертман Г И, Лесное П П Изв высш учебн зав, 5, 165 (1971) 27 Fnednch Н, Zeruhn Е, Pharm Weekbl, 106, 198 (1971) 28 Gabel E, Muller К Н, Sohoknecht J, Dtsch Apoth-Ztg, 102, 293 (1962) 29 Gstirner G, Ftach G, Arch Pharm, 302, 1 (1969) 30 Gyanchandani N D, Yamamoto H, Nigam I C, J pharm Sci, 58, (1969) 31 Hansel R, Langhammer L, Frenzel J, Ranft G., J Chromatogr, 11, (1963) 32 Haznagy A, Szendrei K., Totr L., Pharmazie, 20, 651 (1965) 33 Horhammer L, Wagner E, Bittner G, Pharm Ztg, 108, 259 (1963) 34 Horhammer L., Wagner H, Bittner G., Graf F, Dtsch Apoth -Ztg, 105, 827 (1965) 35 Horhammer L, Wagner H, Hem К J Chromatogr, 13, 235 (1964).


36 Horhammer L, Wagner H, Horhammer H P, Dtsch Apoth -Ztg, 107, (1967) 30' 460 Специальная часть 37. Horhammer L., Wagner H., Konig H., Dtsch. Apoth.-Ztg., 103, 1 (1963).

38. Horhammer L., Wagner H., Kraemer-Heydweille D., Dtsch. Apoth.-Ztg., 106, 1967 (1966).

39. Horhammer L, Wagner H., Ley В., Pharmazie, 15, 645 (1960).

40. Horhammer L, Wagner H., Reinhardt H., Dtsch. Apoth.-Ztg., 105, (1965).

41. Horhammer L., Wagner H., Richter G., Dtsch. Apoth.-Ztg., 103, 1737 (1963).

42. Horhammer L, Wagner H., Richter G., Konig H. W., Hang J., Dtsch. Apoth. Ztg., 104, 1398 (1964).

43. Horhammer L., Wagner H., Schilcher H., Dtsch. Apoth.-Ztg., 102, 733 (1962).

44. Horhammer L., Wagner H., Seitz H., Dtsch. Apoth.-Ztg., 103, 1302 (1963).

45. Hoton-Dorge M., J. Pharm. Belg., 18, 3 (1963).

46. Hubik J., Sci. Pharm.: Proc. 25th Congress Pharm. Sci. Butterworths, Lon don, 1, 467 (1966).

47. Huneck S., J. Chromatogr., 7, 561 (1962).

48. Challen S. В., Kucera M., J. Chromatogr., 32, 53 (1968).

49. Ikan R., Meiz R., Israel J. Chem., 3, 117 (1965);

Chem. Abstr., 1242 (1966).

50. Jaspersen-Schieb R., Pharm. Acta Helv., 36, 141 (1961).

51. Jaspersen-Schieb R., Fluck H., Boll. chim. farm., 101, 512 (1962).

52. Jork H., Dtsch. Apoth.-Ztg., 102, 1263 (1962).

53. Karawaya M. S., Wahba S. K-, Egypt. Pharm. Bull., 44, 31 (1964);

Chem.

Abstr., 62, 10288 (1965).

54. Karlsen J., Boomsma L. E. J., Baerhaeim-Svendsen A., J. Chromatogr., 42, 550 (1969).

55. Kartnig Т., Wegschaider O., Planta med., 21, 144 (1972).

56. Kartnig Т., Wegschaider 0., Ri С Y., Planta med., 21, 29 (1972).

57. Khafagy S. M., Girgis A. N., Khayyal S. E., Helm M. A., Planta med., 21, 304 (1972).

58. Kirchner I. G., J. Chromatogr., 63, 3 (1971).

59. Kirchner J. G., Miller J. M., Keller G. J., Analyt. Chem., 23, 420 (1951).

60. Коерреп В. Н., J. Chromatogr., 18, 604 (1965).

61. Komatsu M., Timimori Т., Makigushi Y., J. Pharm. Soc. Japan, 89, (1969).

62. Kraus L. J., Dupakovd D., Pharmazie, 19, 1964 (1964).

63. Kretschmer P., Kny L., Pharmazie, 22, 368 (1967).

64. Kuhlhanek V., Pater В. К-, Siegfried В., Schweiz. Apoth.-Ztg., 110, (1972).

65. Kuhn M., Wartburg A., Helv. Chim. Acta, 46, 2127 (1963).

66. Lang W., Mennicke W. H., Arzneimittel-For'sch., 22, 1928 (1972).

67. Lawrence L. F., Frei R. W., J. Chromatogr., 79, 223 (1973).

68. Longo R., Fumagalli U., Boll. chim. farm., 105, 767 (1966).

69. Luckner M., Prufung von Drogen. G. Fischer-Verlag, Jena, 1966.

70. Luckner M., Bessler O., Luckner R., Pharmazie, 20, 681 (1965).

71. Luckner M., Bessler O., Luckner R., Pharmazie, 21, 556 (1966).

72 Luckner M., Bessler O., Luckner R., Arzneimittelstandardisierung, 8, (1967).

73. Luckner M., Bessler O., Luckner R., Pharmazie, 22, 371 (1967).

74. Luckner M., Bessler O., Luckner R., Pharmazie, 22, 379 (1967).

75. Luckner M., Bessler O., Luckner R., Pharmazie, 1967, 22, 384.

76. Luckner M., Bessler O., Luckner R., Arzneimittelstandardisierung, 12, (1968).

77. Luckner M., Bessler O., Luckner R., Arzneimittelstandardisierung, 14, (1968).

78. Luckner M., Bessler 0., Luckner R., Korn E., Arzneimittelstandardisierung, 16, 17 (1969).

79. Luckner M., Bessler O., Luckner R., Korn E., Arzneimittelstandardisierung, 14, 157 (1968).

Специальная часть 80 Luckner M, Bessler О, Schroder P, Pharmazie, 20, 300 (1965) 81 Luckner M, Bessler О., Schroder P, Arzneimittelstandardisierung, 7, (1966) 82 Macek К Pharmaceutical Applications of Thin-layer and Paper Chromato graphy Elsevier Publishing Co Amsterdam i 83 Madsen В С, Latz H W, J Chromatogr, 50, 288 (1970) 84 Martelh A, Riv Ital Essenze, Perfumi, Piante Offic, Aromi, Sapom, Cosmet, Aerosol, 1971, 53, No 10, 607, Chem Abstr, 76, 117418 (1972) 85 Marttnek A, J Chromatogr, 56, 338 (1971) 86 Masse J, Pans R, Ann pharm franc 22, 349 (1964) 87 Mathisc С, Bull Soc Pharm Strassbourg, 1970, 13, No 1, 35, Chem Abstr., 72, 136491 (1970) 88 Messerschmtdt W, Planta med, 13, 56 (1965) 89 Naubudm E S, Knshnamurthy N, Lewis Y S, Indian Perfum, 13 (Pt 1), (1969), 22 Chem Abstr, 75, 67380 (Ш71) 90 Nigam I С, Levi L., J pharm Sci, 53, 1008 (1964) 91 N^gam N C, Nigam I C, Levi L, J Soc Cosm Chem, 16, 155 (1965) 92 Nigam S S., Kuman G L., Perf Essent Oil Res, 53, 529 (1962) 93 Norm T, Westfelt L, Acta chem scand, 17, 1828 (1963) 94 Novotny L, Herout V., Coll Czechoslov Chem Commun, 27, 2462 (1962).

95 Pans R, J Pharm Belg, 18, 402 (1963) 96 Pans R, Cubukcu B, Ann pharm fran?, 20, 583 (1962) 97 Пасечниченко В А, Гусева А Р Ж прикл биохим и микробиол, 1965, 98 Pastuska G, Petrowitz H., Chemiker-Ztg, 86, 311 (1962) 99 Petrowits H J, Angew Chem, 72, 921 (1960) 100 Preuss R, Dtsch Apoth-Ztg, 104, 1797 (1964) 101 Reitsema R H, Analyt Chem, 26, 960 (1954) 102 Rotbacher H, Crisan C, Bedo E., Farmacia (Bucharest), 12, 733 (1964).

103 Schantz M, von, Planta med, 10, 22 (1962) 104 Schilcher H, Dtsch Apoth-Ztg, 107, 849 (1967) 105 Schilcher H, Planta med, 23, 132 (1973) 106 Schorn P. J, Thesis Saarbrucken, 1963, см [82] 107 Schratz E, Qedan S, Pharmazie, 20, 710 (1965) 108 Schratz E, Schnelle F. L, Qedan S, Sci Pharm, 36 13 (1968) 109 Shah С S, Qadry J S., Bhatt I. G, Planta med, 22, 103 (1972) 110 Spiegel F, J Chromatogr, 39, 93 (1969) 111 Stahl E, Part und Kosmetik, 39, 564 (1958) 112 Stahl E, Chromatographische und mikroskopische Analyse von Drogen G Fischer Verlag Stuttgart, 113 Stahl E, Arch pharm, 306, 693 (1973) 114 Stahl E, Kaltenbach U, J Chromatogr, 5, 458 (1961) 115 Stahl E, Schorn P I, Z phys Chem, 325, 263 (1961) 116 Stahl E, Schorn P J, Naturwiss, 49, 14 (1962) 117 Stahl E, Schorn P /, в ш Stahl E, Dunnschichtchromatographie 2 Aufl.

Sprmger-Verlag Berlin, 118 Stahl E, Trennheuser L Arch Pharm, 293, 826 (1960) 119 Stanley W L, Vanmer S. N, J Amer Chem Soc, 79, 3488 (1957) 120 Steinegger E, Gebistorf J., Pharm Acta Helv, 38, 840 (1963) 121 Steinegger E, Gebistorf I, Sci Pharm, 31, 298 (1963) 122 Steinegger E, Hovel H, Pharm Acta Helv, 47, 133 (1972) 123 Swalah M, Ehusman В, Sidhu G S., Perf Essent Oil Res, 54, 295 (1963).

124 Sita F, Chmelova V, Chmel K, Chromatograficka analysa drog Sklarny Kavaher, n p, Votice, 125 Ter Heide R,i agr food Chem, 20, 747 (1972) 126. Thieme H, Dietz V, Pharmazie, 28, 331 (1973) 127 Tschiersch В, Schwabe K, Pharmazie, 29, 484 (1974) 462 Специальная часть 128 Tyihak E, Vdgujfalvi D, Herba Hung, 1, 96 (1962) 129 Tyihak E., Vagujfatvi D, Planta med, 15, 269 (1967) 130 Vashist V N, Handa К L., J Chromatogr, 18, 412 (1965) 131 Wagner В, Horhammer H. P, Dtsch Apoth -Ztg, 108, 633 (1968) 132 Wagner H., Schaette R, Horhammer L, Holzt J, Arzneimittel-Forsch, 22, 1204 (1972) 133 Wagner H, Spnnkmeyer L, Arzneimittel-Forsch, 23, 749 (1973) 134 Walther K, Rimpler H, Leuckert С, Planta med, 14, 453 (1966) 135 Waswky R Analyt Chem, 34, 1346 (1962) 136 Wellendorf M, Dansk Tijdskr Farm, 37, 145 (1963) 137 Wddanger W Herrmann K, J Chromatogr, 76, 433 (1973) Wollenweber E, Lebreion P, Chadenson M, Z Naturforsch, 27b, 567 (1972) 139 Wollrab V, Riechst, Aromen, Korperpflegemittel, 10, 321 (1964), Chem Abstr, 62, 3881 (1965) 140 Zacsko-Szasz M Szasz G, Fette Seifen, Anstrichmittel, 67, 332 (1965) 141 Zacsko Szasz M, Szasz G, Herba Hung, 5, 91 (1966) 142 Grhc L, Acta pharm jugosl, 20, 19 (1970) 143 Grhc L, Acta pharm jugosl, 20, 35 (1970) 144 Grhc L, J Chromatogr, 48, 562 (1970) 145 Hitler K, Woitke H D, см [82] 146 Chiesa Б P, Rondina R V D, Coussio J D, J Chromatogr, 87, 298 (1973) 147 Chrusctel T L, Chrusciel M, Selected Bibliography on Detection of depen dence-producing Drugs in Body Fluids WHO, Geneva, Klouwen M H, Ter Heide R, Parf und Kosmetik, 1962, 43, Korte F, Sieper H, J Chromatogr, 13, 90 (1964) Korte F, Sieper H, J Chromatogr, 14, 178 (1964) Nielsen E, Dansk Tijdskr Farm, 44, 359 (1970) Pans M, Paris R. R, Bull Soc chim France, 1973, 153 Salaschek M, Matte A, Seifert R, J Chromatogr, 78, 393 (1973) 154 Schantz M von Juvonen S, Hemming R, J Chromatogr, 20, 618 (1965) 155 Stahl E, Chemiker-Ztg, 82, 823 (1958) 156 Stahl E, Arch Pharm, 297, 500 (1964) 157 Stahl E, Jork H, in Stahl E Dunnschicht-Chromatographie 2 Aufl Sprin ger Verlag, Berlin, 158 Zeeuw R A, de Wijsbeek J., Breimer D D, Vree T B, Ginneken CAM, Rossum J M, Science 175, 778 (1972) 159 Deutsches Ar7neibuch DAB 7 Akademie-Verlag, Berlin, 160 Farmakopea Polska 4, Warszawa, 1965 (sv 1), 1970 (sv 11) 161 Pharmacopea Helvetica 6 Bern, ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ЛИТЕРАТУРА A, P l a n t a M e d, 29, 129 ( 1 9 7 6 ) 162 Sherbeim A E. A El, Ansan M G, J C h r o m a t o g r, 107, 2 3 0 ( 1 9 7 5 ) 163 Subramanian R, Knshnamurthy A p o t h - Z t g, 117, 1841 ( 1 9 7 7 ) 164 J, Stahl E, D t s c h Brombeer 165 Эйдлер Я И, Ганкина Г JI, Шакиров Т Т Хим природн соед, 11, (1975) 166 Федорин Г Ф, Георгиевский В П Раст ресурсы, 11, 266 (1975) 167 Innocenti G, Dall'Acqua F., Caporale G, Planta Med, 29, 165 (1976) Chromatogr, 151, 391 (1978) 168 Lau-Cam G A,i 169 Stahl E. Herting D, Planta Med,^29, 1 (1976) 170 Trkovmk M, Kules M, Tabakovic I, Zecevic M, J Chromatogr, 128, (1976) 171 Wierzchowska-Renke K, Acta Polon Pharm, 31, 225 (1974) 172 Geissler G, Arzneimittel-Forsch, 25, 511 (1975) 173 Hiermann A., Karting T, J Chromatogr, 140, 322 (1977) Специальная часть 174. Hoton-Dorge M., J. Pharm. Belg., 29, 560 (1974).

175 Karawya M. S., Ghourab M. G., Egypt. J. Pharm. Sci., 15, 341 (1974);

Chem.

Abstr., 86, 111219y (1977).

176. Lohderfink J., Dtsch. Apoth.-Ztg., 116, 557 (1976).


177. Paris R. R., Faugeras G., Dobremez I.-F., Planta Med., 29, 32 (1976).

178. Paris R. R., Faugeras G., Peltier M., Ann. Pharm. Franc.,32, 397 (1974).

179. Sachse J., J. Chromatogr., 96, 123 (1974).

180. Schmid P. P., J. Chromatogr., 157, 217 (1978).

181. Schmidtlein H., Herrmann K., J. Chromatogr., 123, 385 (1976).

182. Wasiewicz E., Herba Pol., 19, 191 (1973);

Chem. Abstr., 80 (1974).

183. Wdldecke M., Herrmann K-, Z. Naturforsch., 29C, 355 (1974).

184. Bertulli G., Mosca L., Pedroni G., Boll. Chim. Farm., 115, 714 (1976).

185. El-Feraly F. S., Elsohly M. A., Turner C. E., Acta Pharm. Jugosl., 27, No. 1, 43 (1977);

Chem. Abstr., 86, 177376d (1977).

186. Lombroso L., Kanters S. L., Hollister L. E., Res. Commun. Chem. Pathol.

Pharmacol., 15, 697 (1976);

Chem. Abstr., 86, 65269q (1977).

187. Rao N. V. R., Current Sci., 1977, 46, No. 5, 140;

Chem. Abstr., 151125w.

188. Segelman А. В., Segelman F. P., J. Chromatogr., 123, 79 (1976).

189. Wheats В. В., Smith R. N.. J. Chromatogr., 105, 396 (1975).

190. Bleier W., Sci. Pharm., 44, 140 (1976).

191. Dietiker H., Huhlemann H., Pharm. Acta, Helv., 50, 340 (1975).

192. Hammouda F. M., Rizk A. M., Seif AL-Nasr M. M., Pharmazie, 29, (1974).

193. Hammouda F. M., Rizk A. M., Seif Al-Nasr M. M., Z. Naturfirsch., 29C, (1974).

194. Haznagy A., Gyogyszereszet, 21, No. 7, 247 (1977);

Chem. Abstr., 88, 41709y (1978).

195. Christ В., Poppinghaus Т., Wirtz-Peitz F., Arzneimittel-Forsch., 28, (1978).

196. Imre S., Oztunc A., Z. Naturforsch., 31C, 403 (1976).

197. Labadie R. P., Pharm. Weekbl., 110, 446 (1975).

198. Proske G., Dtsch. Apoth.-Ztg., 115, 801 (1975).

199. Stahl E., Brombeer J., Arch. Pharm., 311, 58 (1978).

200. Widen C.-J., Lounasmaa M., Vida G., Reichstein Т., Helv. chim. Acta, 58, 880 (1975).

201. Franck H. P., Dtsch. Apoth.-Ztg., 115, 1206 (1975).

202. Hitler K-, Genzel S., Murach M., Franke P., Pharmazie, 30, 188 (1975).

203. Kaku Т., Miyata Т., Uruno Т., Sako I., Kinoshita A., Arzneimittel-Forsch 343 (1975).

5.9. Неорганические вещества 5.9.1. Катионы 5.9.1.1. Щелочные и щелочноземельные металлы В практической работе часто бывает необходимо отделить ка тионы щелочных и щелочноземельных металлов друг от друга.

Разделить их обычными аналитическими методами довольно трудно;

однако разработаны хроматографические методы, кото рые позволяют успешно разделять всю группу катионов щелочных и щелочноземельных металлов.

Сорбенты. Зайлер и Ротвейлер [46] отделяли Mg от Li, Na и К на слое силикагеля с крахмалом в качестве связующего ве 464 Специальная часть щества в системе растворителей абсолютный этанол — ледяная уксусная кислота (100:0,5). В своей последующей работе [47] Зайлер пользовался теми же сорбентом и системой для разделе ния я последующего определения К, Na и Mg. Другие исследова тели [20] разделяли на силикагеле в системе 0,1 М раствор иода в нитробензоле все ионы щелочных металлов и NH+ в форме по лииодидных комплексов. В то время как Фрей и Штйльман [10] при разделении неорганических смесей пользовались целлюлозой MN 300 (этим же сорбентом пользовался и Фанер [8] для отде ления Na и К от Са и Mg), Гальярди и Ликуссар [12] брали для этой цели целлюлозу повышенной чистоты марки MN 300 HR.

Для разделения ионов щелочных и щелочноземельных металлов можно применять и некоторые менее обычные сорбенты, напри мер аммонийные соли некоторых гетерополикислот — фосфорно молибденовокислый, арсеномолибденовокислый или германомо либденвокислый аммоний и другие их производные [29, 30, 32].

Исида и сотр. [69] изучали разделение ионов щелочноземель ных металлов на микрокристаллической целлюлозе. Лепри и сотр. [75] исследовали подвижность ионов щелочных и ще лочвйземельных металлов на этом же сорбенте.

Системы растворителей. Для этой группы катионов в качестве систем для хроматографирования чаще всего пользуются смесями низших алифатических спиртов, именно метанола и этанола, и водных растворов кислот различной концентрации. Упомянутые выше авторы [12] сравнивали подвижность катионов щелочно земельных металлов в системах метанол — концентрированная соляная кислота — вода (73:12:15), этанол — концентрирован ная соляная кислота — вода (73 :12:15), метанол — этанол — концентрированная соляная кислота — вода (36:36:13:15) и ди оксан — концентрированная соляная кислота — вода (58:12:30).

Другие исследователи [10, 46, 47] применяли смесь этанола и уксусной кислоты в различных соотношениях. При работе на слоях солей гетерополикислот системами служили растворы нит рата и хлорида аммония.

Обнаружение. Для обнаружения ионов щелочных металлов наиболее удобна виолуровая кислота (ДНО) [8, 20, 46, 47]. Не которые исследователи обнаруживали их радиометрическим спосо бом, пользуясь мечеными 24Na, 42K, MRb и l s 7 Cs [12, 29, 30]. Ионы щелочноземельных металлов обнаруживают растворами 8-окси хинолина в этаноле (Д 81 б) и (Д 81 г) [12].

Количественное определение* Зайлер [47] описал способ ко личественного определения Na, К и Mg, После реакции с вио луровой кислотой он оценивал пятна планиметрически — вычис лением их площади. Фрей и Штйльман [10] определяли щелоч ноземельные металлы эмиссионной спектроскопией после обна ружения раствором 8-оксихинолийа.

Специальная часть 5.9.1.2. Тяжелые металлы Тяжелые металлы часто присутствуют в ничтожных количе ствах как нежелательные примеси в целом ряде синтетических лекарственных средств и других веществ. Поэтому применение тонкослойной хроматографии для анализа и выделения тяжелых металлов имеет огромное значение.

Сорбенты. Зайлер и Зайлер [44] подвергали разделению на силикагеле G катионы Hg, Bi, Cd, Pb и Си. Силикагелем G поль зовались и другие исследователи [9, 18, 49, 51, 54, 66, 79, 80, 82].

Икеда и Огума [19] готовили слой сорбента из суспензии сили кагеля в 0,01 М водном растворе Na 2 HAs04 и делили на нем кати оны Cd, Fe, Bi, Си, Pb и Ni. Микетюкова и Фрей [34, 35] для раз деления некоторых тяжелых металлов пользовались готовыми пластинками силикагеля Eastman № 6064, содержащими в каче стве связующего поливиниловый спирт. Галик и Винцоурова [15] делили хелаты некоторых металлов на силуфоле. Силикагель с крахмалом как связующим применялся и в работе [31]. Зенф [50] использовал смешанные слои силикагеля D и окиси алюми ния D в отношении 1:1.

Некоторые исследователи подвергали разделению катионы тяжелых металлов на силикагеле, пропитанном жидким ионооб менником. Бринкман и сотр. [2, 3, 64, 70] исследовали подвиж ность ионов Ag, Ni, Мп, Со, Zn, Си, Pb, Fe(III), Sb и Bi на сили кагеле, пропитанном 0,1 М растворами жидких ионитов в хлоро форме, и одновременно сравнивали свойства жидких ионитов на основе замещенных аминов с длинным алифатическим остатком — амберлита LA-1 (N-додеценилтриалкилметиламин), амберлита LA-2 (N-лаурилтриалкилметиламин), примена JM-T (три-н-ал килметиламина с 18—24 атомами углерода в алифатическом ос татке), иодида тетрагексиламмония, триизооктиламина, три-н-ок тиламина, трибензиламина, аликвата 336 (хлорида метилкаприл аммония), аламина 336 (трикаприламина) и др. В качестве сор бента пользовались силикагелем, обработанным 0,1 М и 0,04 М растворами окиси три-к-октилфосфина и 0,2 М раствором три-н бутилфосфата в хлороформе [4]. Огума [37]. разделял смесь катионов на смешанном слое силикагеля и целлюлозы (5:2), обработанном полисульфидом тиокол LP-32.

Окисью алюминия в хроматографии неорганических соедине ний пользуются сравнительно мало. Хашми и сотр. [17, 58] раз работали способ определения Си, Со и Ni после выделения из смеси 40 различных катионов на окиси алюминия G (Merck) круговым хроматографированием;

окись алюминия они применяли И в своей следующей работе [18]. Фрей и Райан [9] и упомяну тые ранее авторы [15] пользовались окисью алюминия только в смесях с другими сорбентами.

466 Специальная часть Многие исследователи применяли микрокристаллическую цел люлозу. Зай и сотр. [56] и другие [11, 14, 31, 42] применяли цел люлозу MN 300. Шольич и сотр. [53, 85] отделяли Ga от Fe, A1, In и Ti на слоях целлюлозы (Merck). Проспери и Ледерер [43] сравнивали деление тяжелых металлов на некоторых готовых слоях целлюлозы фирмы Macherey — Nagel. Мюррей и Пасарелли [36] разделяли Со, Fe и Zn на слоях целлюлозы MN 300 G, про питанных жидким ионитом аликват 336 или изооктиламином.

Лепри и сотр. [27] применяли для разделения тяжелых и щелоч ноземельных металлов смешанные слои смолы дауэкс-50-Х4 и кар боксиметилцеллюлозы (1:1) и слои смолы дауэкс-50-Х4. Курода и сотр. разделяли Rh и Ir на ДЭАЭ-целлюлозе в 2 н. серной кис лоте [74].

Кениг и сотр. подвергали разделению тяжелые металлы вме сте с щелочноземельными металламиIV на слоях гипофосфита цир кония [22] и на слоях CePS, т. е. Ce — РО 4 — SO4 (1 :1,21:0,29) [23]. При делении тяжелых металлов пользовались также поли амидом [26]. Такесита и сотр. [55] разделяли смесь ртутьоргани ческих соединений с органическим остатком различной длины на смешанном слое крахмала и авицеля-SF с жидким парафином в качестве неподвижной фазы.

Ломюллер и сотр. [76] воспользовались тонкослойной хро матографией для разработки условий разделения Hg, Cu, Zn, Ni, Со, Pb и Cd методом ЖИДКОСТНОЙ хроматографии под давлением.

Системы растворителей. Для разделения тяжелых металлов тонкослойной хроматографией на силикагеле, целлюлозе или окиси алюминия системами растворителей служат большей ча стью смеси низших алифатических спиртов или кетонов с водны ми растворами сильных кислот.

Покорный [42] для отделения железа(II) от железа(III) пользовался смесью этанола, м-пропа нола, к-бутанола, вгор-бутанола, грег-бутанола или нзобутанола с 6 н. соляной кислотой в отношении (75:25). Со смесями спиртов с соляной кислотой различной концентрации работали и другие исследователи [11, 26, 34, 35, 42, 43, 44, 53, 56]. Японские авторы [19, 37] разделяли Cd, Fe, Bi, Cu, Pb и Ni в смесях метанола или этанола с азотной кислотой. Гальярди и Покорный [14] отделяли Со от металлов третьей группы в системе ацетон — метилэтилке тон—6 н. соляная кислота (50:25:25), другие авторы [17] раз деляли Си, Со и Ni в системе ацетон — ацетилацетон— 4 н. соля ная кислота (91:4:5). Фрей и Райан [9] подвергали разделению Ni, Mn, Сг, Со, Zn, Си и Fe в системах ацетон — ацетилацетон — концентрированная кислота (100:1:0,5) и метилэтилкетон — кон центрированная соляная кислота — вода (15:3:2).

Для деления катионов на слоях, пропитанных жидким ионо обменником, в качестве системы растворителей пользовались вод ными растворами одноосновных кислот, именно соляной [2, 4, 36], Специальная часть фтористоводородной [6], азотной, бромистоводородной, йодисто водородной, роданистоводородной и хлорной [3], а также серной кислотой [7] и водным раствором хлорида лития [36].

При помощи некоторых комплексообразующих агентов катио ны можно делить в форме их хелатов. Зенф [49] разделял Hg, Pb, Си, Bi и Cd в виде диэтилдитиокарбаматов, в других исследо ваниях пользовались хелатообразующей способностью 1-нитрозо 2-нафтола для разделения Fe(II), Fe(III), Co(III), Mn и Ni [50] или салицилальдоксима для разделения Со, Ni, Fe, Mn, Си и Bi [51]. Шольич [54] отделял Аи от Fe, ЭЬиОавформе комплексовс родамином В. Галик и Винцоурова [15] разделяли Со, Ni и Fe в форме хелатов с 1-(2'-пиридилазо)-2-нафтолом. Си и Со уда лось разделить в форме различных диалкилдитиокарбаматов [60]. Юи и сотр. [59] использовали тетрафенилпорфирин в каче стве комплексообразующего агента для разделения двухвалент ных катионов. Мухова и Иокль [62] разделили 17 катионов в ви де 8-оксихинолятов, дитизонатов и диэтилдитиокарбаматов. Было исследовано также разделение Mn, Fe, Cr, Co, Ni, Cu, Zn, Cd и Hg в форме хелатов с ЭДТА [61].

Разделение тяжелых и щелочных металлов в форме комплек сов с ацетилацетоном на силикагеле и окиси алюминия в органи ческих растворителях описали Хэуорт и сотр. [67]. Пал и сотр.

[78] разделяли Си, Со, Mo, U, V, Ti и Fe на окиси алюминия в присутствии салицилгидроксамовой кислоты как комплексообра зующего агента. Сарваш и сотр. [84] исследовали влияние при меси рутина в системе на разделение Ti, W, UO^, Mo, A1 и Fe.

Обнаружение. Для обнаружения катионов тяжелых металлов пользуются обычными в качественном анализе цветными реак циями. Зайлер и Зайлер [44] детектировали Hg, Bi, Cd, Pb и Си ИОДИДОМ калия и аммиаком (Д107), a Fe, Zn, Co, Mn, Cr, Ni и Al — 8-оксихинолином ( Д 8 1 а ). С этим же реактивом работали и другие авторы [36] (Д 81г) и {37] (Д81в). Некоторые [9, 17] обнаруживали Си, Со и iNi рубеанововодородной кислотой (Д 128).

Ализарин (Д1) применяли для обнаружения Ga, Fe, Al, In и Ti [53], действием дитизона (Д51) обнаруживали тяжелые метал лы [22] и ртутьорганические соединения [55]. Микетюкова и Фрей [38, 39] и другие [22] пользовались раствором пиридилазо нафтола (Д170а). Фродыма и Зай [11] детектировали Ni ди метилглиоксимом (Д43), Си — неокупроином (Д 150) и Zn — ди метилнафтидином (Д44). Диметилглиоксимом пользовались так же Икеда и Огугла [19]. Для обнаружения Zn удобен дифенил карбазид (Д29) [36]. Упомянутые выше авторы [14] обнаружи вали Со, а также Fe(II) и Fe(IH) 2%-ным раствором морфолин N-дитиокарбоновой кислоты [42].

Количественное определение. Тяжелые металлы в большинст ве случаев количественно определяли спектрофотометрически на 4вй Специальная часть основе цветных реакций. Фродыма и сотр. [11] определяли Ni, Си и Zn спектрофотометрически in situ. Фрей и Райан [9], а так же Зай и сотр. [56] разработали метод количественного спектро фотометрического определения в отраженном свете значительного числа катионов. Количество- Со [14] и Fe(II) и Fe(III) [42] оп ределяли спектрофотометрически после элюирования из слоя.

Хашми и сотр. [17] пользовались колориметрическим методом для определения Си, Со и Ni после извлечения из слоя окиси алюминия при круговой хроматографии (степень извлечения со ставляла 98%).

Дуткевич и соавт. [65] определяли Hg, Cd, Co, Ni, а Судзуки и сотр. [ 8 3 ] — H g, Cu, Pd, Bi, Ni, Co, Zn и Pb после разделения в виде дитизонатов колориметрическим путем. Разделение Си, Ni и Со на ОКИСИ алюминия и определение с помощью спектрофото м«трии в отраженном свете описали Костиков и сотр. [71]. Полу количественный метод определения токсичных металлов Pb, Cd, Hg и Zn после разделения на готовых слоях целлюлозы и сили кагеля предложил Тилеманн [86]. Мясоедова и др. [81] опреде ляли микрограммовые количества Ag.

5.9.1.3. Редкоземельные металлы Редкоземельные металлы встречаются в природе большей ча стью совместно, причем в очень небольших количествах. Ввиду близости химических свойств их смеси удается разделить обыч ными способами лишь с огромным трудом. Хроматографические методы дают хорошие результаты разделения.

Некоторые исследователи в своих работах отделяли радиоизо топы преимущественно урана и тория от тяжелых металлов или от ионов некоторых актиноидов и лантаноидов. Радиоактивным изотопам в этой книге посвящен разд. 4.2.1.

Сорбенты. Джохри и Мехра,[21] выделяли U и Th из смеси катионов на силикагеле G с 2% флуоресцентного индикатора.

+ Для выделения UOs из смеси Fe, Cu, Co, Ni, Cr, А! и Th Зайлер и Зайлер [45] применяли силикагель G. Эти же авторы [48] 4 + разделили " T h и 1Юг на слоях MN-силикагеля SHR (силика гель повышенной чистоты, главным образом не содержащий сульфатов). Некоторые авторы [52] исследовали подвижность металлов группы редких земель U, Th и Zr на слоях силикагеля с жидким ионитом амберлит LA-2 в качестве неподвижной фазы.

Слои силикагеля с три-к-бутилфосфатом, ди-(2-этилгексил) гидро фосфатом и триизооктиламином в качестве неподвижной фазы применяли для разделения смеси редкоземельных и тяжелых металлов [41].

Гальярди и Покорный [13] отделяли UOjT от смеси тяжелых металлов на слоях целлюлозы MN 300 HR. Курода и сотр. [25] ^^^ 46& Специальная часть изучали подвижность некоторых актиноидов и лантаноидов, U, Th и некоторых тяжелых металлов, пользуясь DEAE-целлюлозой, подготовленной реакцией на хлорид и азид, и авицелем SF. Си мидзу и сотр. [63] также разделяли некоторые редкоземельные металлы на DEAE-целлюлозе. Лепри и сотр. [28] разделяли металлы этой группы на слое натриевой соли карбоксиметилцел люлозы и дауэкса-50-Х4 (в Ыа+-форме). Пирс и Флинт [40] при меняли в качестве носителя корвик (Corvic) (сополимер поливи нилхлорида и винилацетата), а неподвижной фазой служил ди (2-этилгексил) гидрофосфат;

на таких слоях проводили разделе ние смесей редкоземельных металлов.

Системы растворителей. Для выделения UOl + из смесей при годна система ацетон — изобутанол — концентрированная соляная кислота — вода (25:50:13:12) [13]. Джохри и Мехра [21] по мимо растворов соляной кислоты пользовались также ледяной уксусной кислотой в смеси с различными изомерными бутанола ми. Зайлер и Зайлер [45, 48] отделяли UOo+ в системе этилаце тат — эфир, насыщенный водой — три-«-бутилфосфат (50 : 20 : 2).

На слоях, содержащих жидкий ионит в качестве неподвижной фазы, редкоземельные металлы делили в водных растворах со ляной кислоты [40, 41] или серной кислоты и сульфата аммония [52]. Применяли также смеси растворов азида натрия и 0,5 М соляной кислоты [52]. Лепри и сотр. [28] в качестве системы растворителей применяли буферные растворы — лактатный, аце татный и глюконатный, которые готовили из соответствующей кислоты и ее солей в отношении 1 :2.

Обнаружение. Для обнаружения редкоземельных металлов пользуются цветными реакциями с различными реактивами, на пример 8-оксихинолином (Д 816) [28] и (Д 81д) [40]. Некоторые автору обнаруживали UO2 двумя способами: раствором пиридил азонафтола (Д170 6) и раствором желтой кровяной соли (Д71) + [45, 48]. Гальярди и Покорный [13] для обнаружения иОг пользовались раствором морфолин-Ы-дитиокарбоновой кислоты.

Джорхи и Мехра [21] —раствором кверцетина (Д 172). Симидзу и Исикура [52] обнаруживали редкоземельные металлы раствором арсеназоШ (Д 10).

Количественное определение. Гальярди и Покорный [13] раз работали способ количественного спектрофотомет,рического оп + ределения UO1 в форме хелата с морфолин-Г\[-дитиокарбоновой кислотой после элюирования из слоя сорбента.

5.9.1.4. Полный анализ смеси катионов Опубликовано несколько обзорных статей, в которых описы вается исследование подвижности всех групп катионов в различ ных хроматографических системах.

470 Специальная часть Бринкман и сотр. [5] для систематического разделения HITHOHOB 1 разбавленных растворах соляной кислоты различных концентраций воспользовались слоями силикагеля DO с жидкими ионообменниками примен JM-T, амберлит LA-1 и аламин 336 в качестве неподвижной фазы. Меркус [33] разработал быстрый микрометод для разделения щелочных, щелочноземельных и тя желых металлов на предметных стеклах, покрытых целлюлозой (Merck), содержащей флуоресцентный индикатор. В качестве хроматографической системы он пользовался бинарными смесями полярных растворителей с растворами соляной кислоты. Грэм и сотр. [16] применяли целлюлозу, обработанную ионитом примен JM-T. Многие авторы проводили разделение катионов на микро кристаллической целлюлозе авицель SF [38, 39, 57] или на DEAE-целлюлозе [38, 39]. Курода, Иосикуни и Кавабути [24] исследовали на целлюлозе подвижность 52 катионов, в том числе щелочных и щелочноземельных металлов, актиноидов и ланта ноидов, тяжелых металлов, урана и тория.

Хусаин и сотр. [68] исследовали подвижность 39 ионов на слоях силикагеля HF'254 в различных системах растворителей.

Курода и сотр. подвергали разделению 40 ионов на DEAE-целлю лозе в муравьиной кислоте [72] и 41 ион на том же сорбенте в соляной кислоте [73].



Pages:     | 1 |   ...   | 12 | 13 || 15 | 16 |   ...   | 19 |
 





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.