авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 8 |

«РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК Отделение биологических наук Радиобиологическое общество Научный совет по радиобиологии МЕЖДУНАРОДНАЯ АССОЦИАЦИЯ АКАДЕМИЙ НАУК ...»

-- [ Страница 3 ] --

ДВАДЦАТИЛЕТНЕЕ НАБЛЮДЕНИЕ ЗА ЭЛИМИНАЦИЕЙ НЕСТАБИЛЬНЫХ АБЕРРАЦИЙ ХРОМОСОМ У ЛИЦ, ОБЛУЧЁННЫХ В РАЗНЫХ ДОЗАХ ПРИ АВАРИИ НА ЧЕРНОБЫЛЬСКОЙ АЭС Нугис В.Ю.1, Севанькаев А.В.2, Хвостунов И.К.2, Голуб Е.В.2, Дудочкина Н.Е.1, Козлова М.Г. Федеральный медицинский биофизический центр им. А.И.Бурназяна ФМБА России, Москва, Россия, fmbc-fmba@bk.ru Российский радиологический научный центр РАМН, Обнинск, Россия, mrrc@mrrc.obninsk.ru С помощью классического метода окраски на протяжении свыше 20 лет после аварии на Чернобыльской АЭС осуществлялось слежение за изменениями уровней аберраций хромосом в культурах лимфоцитов периферической крови лиц, подвергшихся в подавляющем большинстве случаев относительно равномерному (за исключением кожи) облучению в различных дозах от 0,2 до 9,8 Гр (исходная оценка по средним частотам дицентриков в ближайшие сроки после радиационного воздействия). В общей сложности в данное исследование вошли 74 человека, которые в зависимости от полученной дозы распределялись следующим образом: 31 пациент – 0,2-2,4 Гр (101 повторная культура с частотой взятия от 1 до 19 раз у отдельных лиц), 28 пациентов – 2,6-4,4 Гр (118 повторных культур с частотой взятия от 1 до 15 раз) и 15 пациентов – 4,6-9,8 Гр (73 повторных культуры с частотой взятия от 2 до 15 раз). Наиболее адекватной моделью для описания элиминации дицентриков и всех аберраций нестабильного типа на протяжении указанного срока наблюдения оказалась двойная экспоненциальная зависимость, описывавшая первоначальное быстрое снижение их частоты с последующим его замедлением. Частота хроматидных аберраций в некоторые годы после облучения была подвержена значительным индивидуальным колебаниям, но лишь в отдельных случаях явно выходила за границы спонтанного уровня, что не свидетельствует о развитии феномена хромосомной нестабильности. Парадоксально, что на фоне высокой индивидуальной вариабельности и существенного перераспределения из нестабильных в стабильные клетки усредненный выход атипичных хромосом снизился до примерно 30%, 50% и 90% от первоначального уровня у пациентов с оценками доз 0,2-2,4, 2,6-4,4 и 4,6-9,8 Гр соответственно.

ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКАЯ АКТИВНОСТЬ ПОТОМСТВА САМЦОВ КРЫС, ПОДВЕРГШИХСЯ ОСТРОМУ ГАММА ОБЛУЧЕНИЮ Панфилова В. В., Колганова О.И., Чибисова О.Ф., Харитонова Е.С.

Медицинский радиологический научный центр РАМН (МРНЦ), Обнинск, Россия, o.kolgan.obn@mail.ru В последние годы изучению последствий острого воздействия ионизирующей радиации на половые клетки самцов для развития их потомства уделяется значительное внимание. Особый интерес представляет изучение функционирования центральной нервной системы (ЦНС), которая определяет постнатальную адаптацию и взаимодействие с окружающей средой, что весьма существенно для выживания и воспроизведения вида.

Одним из методов оценки состояния ЦНС животных является изучение их способности к исследованию незнакомой среды (метод открытого поля).

Объектом исследования явились самцы крыс линии Вистар и их потомство первого поколения. Половозрелых самцов крыс облучали на гамма - установке в дозе 1,5 Гр при мощности дозы 0.33 Гр/мин. Затем самцов спаривали с интактными самками через 5, 18, или 90 суток после облучения (чтобы в оплодотворении участвовали половые клетки, облученные на стадии сперматозоиды, сперматиды, сперматоциты или сперматогонии, соответственно). В подопытные группы в трехмесячном возрасте отбирали по два внешне здоровых детеныша от каждой самки-матери. Тестирование проводилось отдельно для групп самок и самцов. Контрольную группу составляли интактактные самцы и самки.

У крыс-самцов, в зачатии которых участвовали половые клетки самцов родителей, облученные на стадии сперматоцитов, почти по всем изученным показателям исследовательская двигательная активность была снижена в 2-3 раза. Активность самок была значительно подавлена у животных, родившихся из яйцеклеток, оплодотворенных облученными мужскими половыми гаметами на стадии сперматиды или сперматоциты.

На основании изучения исследовательской активности самцов и самок первого поколения можно сделать вывод, что у самцов родителей при облучении значительно пострадали половые клетки, находящиеся на стадиях «сперматиды» и «сперматоциты», причем поврежденный генетический материал самцы-родители передали своим потомкам.

МИШЕНЕВЫЕ И ВНЕМИШЕНЕВЫЕ ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ У ЧЕЛОВЕКА В РАЗЛИЧНИЕ СРОКИ ПОСЛЕ ЧЕРНОБЫЛЬСКОЙ АВАРИИ Пилинская М.А., Дыбский С.С., Шеметун Е.В., Дыбская Е.Б., Талан О.А., Педан Л.Р.

Научный Центр радиационной медицины АМН Украины, Киев, Украина, pww@ukr.net В ближайшие и отдалённые сроки после Чернобыльской аварии проводили селективный цитогенетический мониторинг среди приоритетных групп пострадавших с использованием традиционных (анализ равномерно и G-дифференциально окрашенных метафазных хромосом человека) и новых (FISH-WCP) методов исследований. Помимо прямых цитогенетических эффектов в клетках-мишенях, оценивали и внемишеневые эффекты - радиационно-индуцированную нестабильность генома, адаптивный ответ и “эффект свидетеля”. Для исследования хромосомной нестабильности использовали тестирующее мутагенное воздействие (G2-bleomycin sensitivity assay) и двухсрочное культивирование лимфоцитов (в течение 48 и 144 час., соответственно). “Эффект свидетеля” изучали в разработанной нами модельной системе - смешанной культуре лимфоцитов, полученной от разнополых доноров. Показали, что во всех обследованных группах индуцировался и сохранялся цитогенетический эффект в облучённых клетках мишенях;

его среднегрупповая частота зависела от характера, интенсивности, продолжительности облучения и времени, прошедшего после аварии, а вариабельность цитогенетических показателей при идентичном радиационном воздействии определялась индивидуальной радиочувствительностью. Подтвердили реальность радиационно индуцированной модификации чувствительности хромосом соматических клеток человека к мутагенному воздействию, которая экспрессировалась как скрытая хромосомная нестабильность (у лиц, перенесших острую лучевую болезнь);

адаптивный ответ (у детей, проживающих на загрязненной радионуклидами территории);

трансмиссивная хромосомная нестабильность, которая проявлялась в последовательных клеточных генерациях у потомков облученных родителей. Обнаружили взаимодействие между облученными (in vitro или in vivo) и необлученными соматическими клетками человека, которое экспрессировалось не только как классический «bystander effect» в необлучённых клетках-свидетелях, но и как достоверное снижение частоты хромосомных аберраций в облучённых клетках-мишенях при длительном культивировании их с интактными клетками.

РАДИАЦИОННО-ИНДУЦИРОВАННАЯ ХРОМОСОМНАЯ НЕСТАБИЛЬНОСТЬ В КЛЕТКАХ СНО-К1 И ЕЕ МОДИФИКАЦИЯ ИНГИБИТОРАМИ СИНТЕЗА ДНК Пятенко В.С.1, Хвостунов И.К.1, Эйдельман Ю.А.2, Коровчук О.Н.1, Севанькаев А.В.1, Андреев С.Г. Медицинский радиологический научный центр РАМН, Обнинск, Россия Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН, Москва, Россия.

andreev_sg@mail.ru Изучение механизмов хромосомной нестабильности (ХН) является одной из актуальных задач радиобиологии и онкологии, которая имеет важное значение в вопросах практической медицины. В настоящей работе исследовались закономерности радиационно-индуцированной ХН (аберрации хромосомного типа) в клетках китайского хомячка линии CHO-K1 и модифицирующее действие ингибиторов синтеза ДНК.

Исследовалась времення зависимость частоты аберраций в отдаленные сроки (до суток, или до 33 поколений клеток) после -облучения (60Co, доза 3 Гр). Изучалось влияние различных модификаторов (репликативного, репаративного) синтеза ДНК, а также совместное действие радиации и модификаторов, на кинетическую кривую частоты дицентриков. Цитозин-1--арабинофуранозид (АраЦ, 0.1 мМ), оксимочевина (ОМ, 4 мМ), 2,2’-бипиридил (0.2 мМ) добавлялись за 0.5 ч до облучения и удалялись через 2 ч после облучения.

Кратковременное добавление ингибитора инициации репликации ДНК 2,2’ бипиридила (хелатор железа) в логарифмической фазе роста клеток повышает частоту дицентриков на временах до 6 суток после удаления ингибитора. Совместное действие облучения и 2,2’-бипиридила существенно повышает ХН и изменяет форму временной зависимости частоты дицентриков по сравнению с кривой только для облучения. При облучении клеток в стационарной фазе роста добавление ингибиторов АраЦ+ОМ практически не влияет на повышенную частоту дицентриков в потомках облученных клеток, тогда как при облучении в логарифмической фазе роста добавление АраЦ+ОМ значительно повышает частоту дицентриков в потомках облученных клеток во всем диапазоне времен до 17 суток. Облучение с добавлением одного АраЦ увеличивает выход дицентриков на временах до 2-8 суток в 15-100 раз по сравнению с контролем.

БЫСТРЫЙ ДИЦЕНТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА ПОСЛЕ ВОЗДЕЙСТВИЯ ИОНИЗИРУЮЩИХ ИЗЛУЧЕНИЙ Репин М.В. 1, Репина Л.А. Объединенный институт ядерных исследований, Дубна, Россия, Mikhail.Repin@yahoo.com;

Институт медико-биологических проблем РАН, Москва, Россия, L_Repina@mail.ru Авария на Чернобыльской АЭС показала необходимость разработки надежных методов биологической дозиметрии, позволяющих быстро оценить дозу поглощенного излучения.

В настоящей работе рассмотрены как теоретические, так и экспериментальные основания для применения дицентрического анализа лимфоцитов крови человека с определением общего количества хромосом (их центромер) только в метафазных клетках, несущих хромосомные аберрации (быстрый дицентрический анализ). Показано, что такой подход позволяет без применения специализированного дорогостоящего автоматизированного оборудования уменьшить время микроскопического анализа метафазных клеток до 1,5 раз по сравнению с обычным дицентрическим анализом.

Учет при быстром дицентрическом анализе аберрантных клеток, имеющих только полный набор хромосом (центромер), позволяет сохранить принятые классификацию хромосомных аберраций и регистрацию проанализированных клеток, разработанные для обычного дицентрического анализа. Кроме того, цитогенетический анализ метафазных клеток без определения общего количества хромосом (центромер) при отсутствии в них аберрантных хромосом, уменьшает утомляемость специалиста, а его внимание концентрируется на самих хромосомах и их перестройках.

В работе теоретически и экспериментально показано, что быстрый дицентрический анализ может быть применен в радиационной цитогенетике с теми же ошибками, что и при обычном дицентрическом анализе.

ИЗУЧЕНИЕ ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ В ЛИМФОЦИТАХ КРОВИ ОБЕЗЬЯН ПОСЛЕ ХРОНИЧЕСКОГО И ФРАКЦИОНИРОВАННОГО ГАММА-ОБЛУЧЕНИЯ IN VIVO Репина Л.А., Ворожцова С.В.1, Абросимова А.Н.1, Шафиркин А.В.1, Новицкая Н.Н. 1) Институт медико-биологических проблем РАН, Москва, Россия;

2) Российский научный центр рентгенорадиологии «Росмедтехнологий», Москва, Россия;

L_Repina@mail.ru Целью исследования являлось изучение хронического и фракционированного воздействия -излучения Cs на хромосомный аппарат лимфоцитов крови обезьян Macaca mulatta.

Четыре обезьяны первой группы подвергались хроническому воздействию -лучей Cs 18 часов в сутки по 0,25 Гр в день в течение 5 дней. После 2 дней перерыва обезьяны были повторно облучены по той же схеме. Суммарная доза хронического облучения составила 2,5 Гр, а эффективная остаточная доза — 1,0 Гр. Четыре обезьяны второй группы подвергались фракционированному воздействию -лучей Cs в дозе 0,66 Гр в течение трех часов. Аналогичное облучение этой же группы обезьян было проведено через 9 дней. При этом суммарная доза фракционированного облучения составила 1,32 Гр, а эффективная остаточная доза — также 1,0 Гр. Забор крови для цитогенетического анализа осуществлялся на 20-й и 50-ый день после облучения.

Результаты цитогенетического анализа нестабильных аберраций хромосом в лимфоцитах крови обезьян, проведенного спустя 20-е и 50-е сутки после воздействия -лучей Cs показали, что наблюдается статистически значимое (p0,05) повышение частоты дицентриков и центрических колец (маркеров радиационного воздействия) у обезьян хронической группы облучения (2,5 Гр) по отношению к обезьянам, подвергшихся фракционированному воздействию в дозе 1,32 Гр.

НОВЫЕ ВОЗМОЖНОСТИ БИОДОЗИМЕТРИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ МАЛЫХ ДОЗ ИЗЛУЧЕНИЯ 1, Росина Й., 1Xон З., 1Зоелзер Ф., 1Фреинтингер-Скалицка З., 1Шкопек Й., 1, Навратил Л.

Южночешский университет, Медико-социальный факультет, Чешске Будейовице, Чешский технический университет, Факультет биомедицинской инженерии, Кладно, Чешская Республика, rosina@fbmi.cvut.cz Использующиеся в настоящее время лабораторные методы оценки эффектов малых доз ионизирующего излучения имеют ряд недостатков. Нестабильные хромосомные аберрации, такие как дицентрики и центрические кольца, не составляет труда выявить, однако полупериод элиминации аберрантных клеток из циркулирующей крови составляет примерно 3 года. Стабильные хромосомные аберрации (транслокации или делеции) сохраняются дольше, могут быть обнаружены даже через десятки лет после облучения, но их анализ требует сложного лабораторного оборудования (метод флуоресцентной гибридизации in situ). Альтернативным методом оценки дозы облучения является подсчет микроядер в клетках крови. Этот метод значительно проще и быстрее оценки хромосомных аберраций, но менее чувствителен. Обычно метод подсчета микроядер используют, начиная с доз от сотен мГр. Целью работы явилось расширение возможностей метода подсчета микроядер для оценки дозы облучения.

Установлено, что модификация метода с помощью флюоресцентной микроскопии значительно увеличивает его чувствительность и позволяет определять дозы около мГр. Другая модификация метода основана на выявлении различий в структуре микроядер, возникших при радиационном воздействии или спонтанно. Показано, что спонтанные микроядра чаще содержат центромеры, а микроядра, образованные действием ионизирующего излучения, – нет. Выявлено, что отношение микроядер без центромеры к микроядрам, содержащим центромеры, – параметр очень чувствительный.

Предположительно, указанный параметр может значительно отличаться от параметра фоновой активности после дозы облучения в 100 мГр.

Результаты свидетельствуют, что на современном этапе развития науки представленный метод является одним из наиболее перспективных, так как не дорог и позволяет с высокой точностью определять дозу облучения даже через десятки лет.

Работа выполнена при поддержке гранта Министерства образования, молодежи и физической культуры Чешской Республики № NVP II 2B08001.

МИКРОЭВОЛЮЦИОННЫЕ ПРОЦЕССЫ В ХРОНИЧЕСКИ ОБЛУЧАЕМЫХ ПОПУЛЯЦИЯХ МОДЕЛЬНЫХ ВИДОВ МЛЕКОПИТАЮЩИХ Рябоконь Н.И.

Институт генетики и цитологии Национальной академии наук Беларуси, Минск, Республика Беларусь, n.ryabokon@igc.bas-net.by Ранее коллективом нашей лаборатории установлено, что в популяциях модельного вида мышевидных грызунов, рыжей полевки, обитающей в течение 22 поколений на территориях, загрязненных вследствие аварии на Чернобыльской АЭС, одновременно протекают разнонаправленные биологические процессы, отражающие микроэволюционные изменения в исследуемых популяциях. Так, наблюдается, с одной стороны, индукция цитогенетических повреждений у каждого облучаемого поколения («прямой», не трансгенерационный эффект облучения) и трансгенерационное накопление цитогенетических повреждений, а с другой стороны, формирование адаптивных эффектов. Дальнейший сравнительный анализ этих и литературных данных, накопленных при изучении различных модельных видов мышевидных грызунов из районов с обширным радиационным загрязнением - чернобыльской зоны и Восточно-Уральского радиоактивного следа - позволили выделить и другие особенности микроэволюционных преобразований в хронически облучаемых популяциях млекопитающих. В частности, наблюдается (1) сохранение увеличенных частот цитогенетических повреждений в соматических клетках животных на протяжении смены нескольких десятков поколений, населяющих территории с широким диапазоном радиоактивного загрязнения почв (18 37000 кБк/м2 по 137 Cs или Sr) и более раннее снижение частоты цитогенетических повреждений у животных, обитающих при высоких уровнях загрязнения (от кБк/м2);

(2) низкий уровень индуцированных цитогенетических повреждений в половых клетках самцов и медленное его снижение в ряду более 20 облучаемых поколений животных;

(3) существенный рост эмбриональной смертности в ряду более 20 поколений животных;

(4) зависимость интенсивности формирования радиоадаптивных эффектов от мощности дозы облучения и других факторов.

Представленный обзор подготовлен в ходе выполнения Государственной комплексной программы научных исследований «Биологическая инженерия и биобезопасность».

ЧАСТОТЫ СПОНТАННЫХ И ИНДУЦИРОВАННЫХ ХРОМОСОМНЫХ АБЕРРАЦИЙ В ЛИМФОЦИТАХ ЧЕЛОВЕКА В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ГЕНОТИПОВ ПО ЛОКУСАМ ДЕТОКСИКАЦИИ, РЕПАРАЦИИ И ОКСИДАТИВНОГО ОТВЕТА Сальникова Л.Е., Рубанович А.В.

Институт общей генетики им. Н.И. Вавилова РАН, Москва, Россия;

lyuba_s@list.ru Изучены ассоциации изменчивости 7 генов детоксикации, 9 генов репарации и генов оксидативного ответа с частотой хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови человека. Данные по генотипированию (26 полиморфных сайтов) сопоставлялись с оценками частот спонтанных и -индуцированных аберраций хромосом (1 Гр in vitro) для группы здоровых доноров (97 мужчин до 25 лет) при учете 500- метафазных клеток на человека.

Спонтанный уровень аберраций хромосомного типа был понижен для гомозигот по делеции локуса GSTM1 и носителей мажорных аллелей гена XPD в сайтах T2251G и G862A.

Частота -индуцированных аберраций хромосом оказалось сниженной для гомозигот G/G по минорному аллелю малоизученного сайта CYP1A1 T606G (p = 0,004) и носителей мажорного аллеля OGG1*C977 (p = 0,011). Достоверно повышенный уровень индуцированных хромосомных аберраций отмечался также для носителей мажорных аллелей CAT*T21, XRCC1 *G1996 и XRCC1*C589.

Обсуждаются возможные механизмы влияния изученной генетической изменчивости на радиочувствительность хромосом человека.

ОСОБЕННОСТИ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ГЕНЕТИЧЕСКИХ, РАДИАЦИОННЫХ И ХИМИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ В РЕАЛИЗАЦИИ ДЕТЕРМИНИРОВАННЫХ И СТОХАСТИЧЕСКИХ ЭФФЕКТОВ У ЛЮДЕЙ Тельнов В.И.

Южно-Уральский институт биофизики, Озерск, Россия, tvi@subi.su Многочисленные исследования свидетельствуют о важной роли генетической предрасположенности в развитии широкого спектра патологии и неблагоприятных эффектов под влиянием факторов различной, в том числе радиационной природы. Это указывает на необходимость учета генетической предрасположенности при оценке радиационного риска.

Материалом для исследования явились результаты обследования работников ПО «Маяк» и ряда литературных данных, в которых изучалась связь детерминированных и стохастических эффектов (всего 10) облучения, радио-химиотерапии и курения с генетическими полиморфными системами (всего 24).

Результаты изучения генетической предрасположенности к эффектам облучения на основе оценки относительного риска (ОР) у людей свидетельствуют о достаточно высоком риске детерминированных (средний ОР=3,3) и стохастических (средний ОР=1,6) эффектов у лиц с радиочувствительными генотипами. Анализ роли генетических маркеров в развитии радиационных эффектов показал, что в пределах той или иной генетической системы можно лишь условно выделить отдельные радиочувствительные маркеры, поскольку каждый из генотипов в разной степени может обуславливать генетическую предрасположенность к различным радиационным эффектам.

Особенностью совместного действия генетических факторов, с одной стороны, и радиационных или (и) химических факторов, с другой стороны, является их взаимодействие, как правило, превышающее мультипликативное. Существенное значение в реализации генетической предрасположенности к радиационным и химическим эффектам у людей имеет и то обстоятельство, что последняя наиболее выражена при действии минимальных эффективных доз облучения. Очевидно, в общем плане можно думать о том, что генетические механизмы, определяющие различия людей в реакциях на воздействие неблагоприятных факторов, не имеют абсолютного значения. Вследствие этого данные механизмы максимальны при относительно малых эффективных воздействиях, уменьшаются при относительно больших и не имеют существенного значения при значительных воздействиях.

ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ В ПОПУЛЯЦИЯХ СОСНЫ ОБЫКНОВЕННОЙ (PINUS SYLVESTRIS L.) В УСЛОВИЯХ ХРОНИЧЕСКОГО ОБЛУЧЕНИЯ Усачева Л.В., Гераськин С.А., Дикарев В. Г.

ГНУ ВНИИ сельскохозяйственной радиологии и агроэкологии РАСХН, Обнинск, Россия, usacheva_shr@mail.ru Целью исследования было изучение изоферментного полиморфизма в популяциях сосны обыкновенной (Pinus sylvestris L.), произрастающих в Брянской области на контрастных по уровню радиоактивного загрязнения (2950-17800 Бк/кг) участках. Для оценки генетической изменчивости использовали электрофоретический анализ изоферментов. Ферменты экстрагировали из эндоспермов и зародышей семян, смесью, состоящей из 1% раствора тритона Х-100 и 2% раствора -меркаптоэтанола. Ферменты разделяли в вертикальных пластинах 7.5%-ного полиакриламидного геля в Трис глициновом электродном буфере с рН 8.3. Гистохимическое окрашивание изоферментов проводили по стандартным прописям с модификациями.

Клеточное или тканевое дыхание — один из основных процессов жизнедеятельности всех живых организмов, в ходе которого происходит окисление углеводов, липидов и аминокислот до углекислого газа и воды, а также образования молекул, необходимых для биосинтеза. Нарушения этих процессов ведут к широкому спектру патологических проявлений и объективными показателями этих процессов являются нарушения в работе изоферментных систем, катализирующих процессы дыхания. В докладе представлены результаты анализа генетической изменчивости локусов глутаматдегидрогеназы (GDH), малатдегидрогеназы (MDH) и лейцинаминопептидазы (LAP). Электрофоретический спектр MDH состоит из 4-х пространственно разделенных зон активности, кодируемых 4-мя независимыми локусами:

Mdh-1, Mdh-2, Mdh-3, Mdh-4. Локус Mdh-1 - является мономорфным, локусы Mdh-2 и Mdh-З диаллельны, локус Mdh-4 представлен 4-мя аллелями. В исследованных популяциях локус Gdh представлен двумя аллелями, продуцирующими однополосные варианты. LAP локализуется в двух диаллельных локусах Lap-1 и Lap-2.

Количественные показатели генетической изменчивости (гетерозиготность, частота полиморфных локусов, индекс Животовского) по изученным локусам достоверно увеличиваются с дозой, поглощённой критическими органами растений. Т.е. в исследованных популяциях сосны обыкновенной формируется семенное потомство с высоким уровнем мутационной изменчивости.

УЧАСТИЕ ПРОТООНКОГЕНОВ И ГЕНОВ СУПРЕССОРОВ ОПУХОЛЕЙ В МЕХАНИЗМАХ РАЗВИТИЯ ОТДАЛЕННЫХ ПОСЛЕДСТВИЙ РАДИАЦИОННОГО ПОРАЖЕНИЯ.

Ушенкова Л.Н., Шуленина Л.В., Шагирова Ж.М., Михайлов В.Ф.

Федеральный медицинский биофизический центр им. А.И. Бурназяна ФМБА России, Москва, fmbc-fmba@bk.ru Взаимодействие генов нуклеофозмина (NPM), Р53, ARF и Myc влияет на процессы пролиферации и дифференцировки, участвует в поддержании генетической стабильности клеток. Белок NPM регулирует клеточный рост, пролиферацию и его содержание быстро увеличивается в ответ на митогенные стимулы, что сопровождается сверхэкспрессией гена в пролиферирующих и раковых клетках. При гиперпродукции NPM более чем на 70% ингибируется транскрипционная активность гена Р53, увеличивается содержание в клетках Myc, что приводит к развитию нестабильности генома при усилении пролиферативной активности клеток. Мутации в генах семейства Ras ингибируют процессы распада белка Myc. С другой стороны, умеренное усиление экспрессии гена NPM, например, в ответ на стрессорное воздействие, вызывает образование комплексов NPM/Hdm2 и ARF/Hdm2, способствующих освобождению Р53 от Hdm2, что приводит к увеличению внутриклеточного содержания белка Р53 и активации процессов защиты генома от действия генотоксических факторов. В данной работе рассматривается транскрипционная активность и вероятность появления мутаций в генах NPM, Р53, N Ras у лиц, подвергавшихся радиационному воздействию.

Показано, что в отдаленный период после воздействия радиации в области кодонов 246 – 250 экзона 7 гена р53 и кодона 12 гена N-Ras мутации среди пациентов встречаются чаще, чем в контрольной группе. Эти мутации возникают в незначительном числе клеток, находящихся, вероятно, в состоянии радиационно-индуцированной нестабильности генома. Установлено, что у этих лиц транскрипционная активность гена Р53 снижена по сравнению с контрольным уровнем, а для гена NPM соответствует верхней границе индивидуальных значений в группе «доноры». Обсуждается значение выявленных изменений для развития отдаленных последствий действия радиации.

ПОЛИМОРФИЗМ ПРОСТЫХ ПОВТОРОВ В ДНК ТКАНЕЙ ПОТОМКОВ МЫШЕЙ РАЗНОГО ПОЛА ОТ ОБЛУЧЕННЫХ РОДИТЕЛЕЙ Фоменко Л.А., Ломаева М.Г., Антипова В.Н., Безлепкин В.Г.

Институт теоретической и экспериментальной биологии РАН, Пушино, Россия, ludfom@rambler.ru В работах отечественных и зарубежных авторов показана возможность передачи нестабильности генома (НСГ) от родителей, подвергшихся действию ионизирующей радиации или других генотоксических факторов их потомкам. В наших работах также показано повышение полиморфизма простых повторов ДНК в соматических тканях, увеличение частоты микроядер в эритроцитах костного мозга у потомков облученных родителей самцов или самок, что можно рассматривать как доказательство трансгенерационной передачи НСГ от облученных родителей их потомкам. Обычно анализ индуцированной трансгенерационной НСГ проводится в результате обследования общей выборки потомства. Здесь мы представляем результаты, свидетельствующие о различиях в уровне полиморфизма микросателлитных (МКС) повторов ДНК постмитотических тканей: головного мозга, периферической крови, легких и пролиферирующих тканей: селезенки и эпителия кончика хвоста у потомков разного пола, рожденных от облученных до спаривания самцов или самок. В зкспериментах были использованы 2–месячные мыши BALB/c. Сравнивали братско- сестринские группы потомков, рожденные одними и теми же необлученными родителями и после облучения одного из родителей. Методом полимеразо-цепной реакции с произвольным праймером (AP-PCR) выявлено:

1. тканеспецифическое изменение полиморфизма МКС-повторов ДНК соматических тканей у потомков разного пола, рожденных от облученных самцов или самок.

2. уровень полиморфизма ДНК достоверно повышался у потомков самок, облученных в дозе 200 сГр. У потомков самцов, облученных в такой же дозе, изменение уровня полиморфизма было недостоверным.

3. для тканей самок-потомков матерей, облученных в дозе 200сГр, зарегистрирован более высокий уровень полиморфизма ДНК (кроме крови) по сравнению с тканями самцов потомков этих матерей.

4. повышение полиморфизма ДНК в соматических тканях у потомков облученных самок в дозе 200сГр более четко выражено в постмитотических тканях по сравнению с пролиферирующими тканями.

Работа частично финансировалось проектом Программы ФНМ-07 Президиума РАН.

РОЛЬ КИНАЗЫ JNK, ДЕАЦЕТИЛАЗЫ SIRT И ТРАНСКРИПЦИОННОГО ФАКТОРА FOXO В РАДИАЦИОННО-ИНДУЦИРОВАННОМ СТАРЕНИИ, ГОРМЕЗИСЕ И АДАПТИВНОМ ОТВЕТЕ У DROSOPHILA MELANOGASTER Шапошников М.В., Москалев А.А.

Институт биологии Коми НЦ УрО РАН, Сыктывкар, Россия, shaposhnikov@ib.komisc.ru Ионизирующие излучения в малых дозах индуцируют широкий спектр радиобиологических эффектов: гормезис, адаптивный ответ или гиперрадиочувствительность. Ранее нами было установлено, что эффекты малых доз могут наблюдаться не только на клеточных культурах, но и на уровне целого организма Drosophila melanogaster, по таким интегральным показателям как продолжительность жизни и длительность предимагинального развития.

Известно, что на организменном уровне баланс между процессами роста и размножения, с одной стороны, и стрессоустойчивостью и долгожительством, с другой обеспечивает транскрипционный фактор FOXO. Активность FOXO находится под контролем стресс-активируемой деацетилазы SIRT1, а также митоген-активируемой протеинкиназы JNK.

Цель настоящей работы заключается в экспериментальной проверке предположения о ключевой роли механизмов стрессоустойчивости клетки (транскрипционного фактора FOXO, деацетилазы SIRT и киназы JNK) в радиационно индуцированном гормезисе и адаптивном ответе на уровне целого организма на модельном объекте Drosophila melanogaster с использованием таких показателей приспособленности как длительность личиночной стадии развития и продолжительность жизни.

Работа поддержана грантом РФФИ (№ 08-04-00456-а) и программой фундаментальных исследований Президиума РАН.

АНАЛИЗ ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ВОЗДУШНО-ВОДНЫХ РАСТЕНИЙ ВОДОЕМОВ ЧЕРНОБЫЛЬСКОЙ ЗОНЫ ОТЧУЖДЕНИЯ Шевцова Н. Л.

Институт гидробиологии НАНУ, Киев, Украина;

shevtsovanl@rambler.ru Представлены результаты цитогенетического мониторинга за 2008–2009 гг воздушно-водных растений литоральной зоны замкнутых и слабопроточных водоемов лево и правобережной части поймы реки Припять в пределах Чернобыльской зоны отчуждения.

Наиболее высокие показатели уровня хромосомных повреждений отмечены у растений из водоемов левобережной части поймы р. Припять – озер Глубокое и Далекое, которые являются одними из самых “грязных” водоемов на территории украинской части зоны отчуждения. В растениях из этих водоемов уровень хромосомных повреждений почти в – 6 раз превышает уровень спонтанного мутагенеза, характерного для гидробионтов.

Построены дозовые зависимости количества цитогенетических повреждений в апикальных клетках корневых меристем для следующих видов воздушно-водных растений: порядка мятликовоцветные семейства злаковых – тростника Phragmites australis (Cav.) Trin Ex Steud и манника Gyiceria maxima (C. Hartm.);

порядка рогозоцветные – семейств: ежеголовниковые Sparganium electrum L, и рогозовые Typha angustifolia L. Тростник обыкновенный является концентратором первого порядка, как по 90Sr, так и по137Cs (Гудков, 2001, 2006), потому не удивительно, что максимальные величины ЧАА – до 12 %, отмечены в клетках корневых меристем именно этого вида. Для этого же вида нами отмечены низкие показатели семенной продуктивности, высокая степень поражения растений паразитирующими организмами и морфологические аномалии репродуктивных органов. Спектр хромосомных аберраций в меристемных клетках тростника и манника из водоемов левобережной части поймы р.

Припять отличает практически равноценное распределение аберрантных клеток с мостами, фрагментами и множественными аберрациями. Отмечены высокие показатели среднего количества аберраций на одну аберрантную клетку для всех исследуемых видов растений из водоемов левобережной части.

Таким образом, хроническое облучение в малых дозах, которому подвергаются воздушно-водные растения литорали водоемов Чернобыльской зоны отчуждения, вызывает длительную генетическую нестабильность, которая реализуется на фенотипическом и репродуктивном уровне.

СЕКЦИЯ III. РАДИАЦИОННАЯ ИММУНОЛОГИЯ И ГЕМАТОЛОГИЯ.

ВЛИЯНИЕ -РАДИАЦИИ НА СТРУКТУРНОЕ СОСТОЯНИЕ МЕМБРАН КЛЕТОК КРОВИ ЧЕЛОВЕКА В ЭКСПЕРИМЕНТАХ IN VITRO Аткарская М.В., Андреев С.Г., Фаткуллина Л.Д., Бурлакова Е.Б.

Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН, Москва;

4017088@mail.ru До настоящего времени нет единого представления о механизмах ответных реакций клетки на действие радиации. Ранее считалось, что основной мишенью действия облучения на клетки является ДНК. Однако в последние годы стало очевидным, что объектами повреждающего действия радиации являются также и мембраны клеток.

Целью данной работы явилось исследование структурных изменений мембран клеток крови человека и параметров ПОЛ при -облучении в разных дозах, в том числе малых, в опытах in vitro. Облучение пробирок с кровью проводили в 5 различных дозах Cs: 1;

10;

50;

100 и 200 сГр - на базе реактора МИФИ. Малые дозы были получены при большой мощности дозы, т.е. при небольшом времени облучения. До настоящего времени аналогичные эксперименты проводились в диапазоне доз на порядок выше, либо при малых дозах с малой мощностью (длительное время облучения). Были исследованы такие показатели как степень гемолиза эритроцитов и содержание ТБК-активных продуктов, отражающие процессы ПОЛ, и структурные характеристики (микровязкость) мембран лимфоцитов и эритроцитов (методом ЭПР спиновых зондов). Основные изменения полученных показателей наблюдаются уже при облучении крови в дозе 1 сГр: повышение степени гемолиза и снижение количества МДА эритроцитов, изменение микровязкости липидов мембран эритроцитов и лейкоцитов, Обнаружены разные закономерности изменения параметров для различных интервалов облучения: от 1 до 50 сГр, и начиная с 50 до 200 сГр. В диапазоне малых доз изменения носят более выраженный характер практически по всем изученным показателям. Найдено, что эритроциты проявляют большую резистентность к действию радиации по сравнению с лейкоцитами, что проявляется в меньших колебаниях параметров окислительного стресса в опытных образцах по сравнению с контролем. Следовательно, мембраны могут выступать в качестве мишеней радиационно-индуцированного эффекта на фоне усиления окислительного стресса. Полученные нами результаты дают возможность оценить комплекс физико-химических изменений мембран клеток крови в качестве биологического маркера при воздействии радиации на организм.

ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ПЕПТИДНЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ДИКЕТОПИПЕРАЗИНОВ НА СТВОЛОВЫЕ КРОВЕТВОРНЫЕ КЛЕТКИ НОРМАЛЬНОГО ОРГАНИЗМА И ОБЛУЧЁННЫЕ IN VITRO КЛЕТКИ КОСТНОГО МОЗГА Дейгин В.И.*, Саенко А.С.**, Семин Ю.А.**, Шевченко А.С.**, Изместьева О.С.** ** Медицинский Радиологический Научный Центр РАМН, Обнинск, Россия;

* ООО «Пептос Фарма», Москва, Россия * Институт биоорганической химии им. М. М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова, РАН, Москва, Россия;

ashevchenko87@mail.ru Проведены структурно-функциональные исследования 47 новых пептидомиметиков – производных дикетопиперазинов, в модели клонирования стволовых кроветворных клеток костного мозга в селезёнках облучённых мышей. Все тестируемые соединения синтезированы в центре пептидных препаратов «Пептос Фарма» (г. Москва).

Биологическую активность исследовали в двух экспериментальных моделях: 1 – определяли активность соединений по отношению к костному мозгу интактных мышей;

– изучали радиомодифицирующие свойства в отношении облучённых in vitro КОЕ-С костного мозга. Животные получали препараты внутрибрюшинно, перорально, подкожно или внутривенно в диапазоне доз 10-10000 мкг/кг для определения диапазона эффективных доз;

при необходимости препараты вводили в различное время.

Показано, что 39 % соединений статистически достоверно стимулируют колониеобразование интактным костным мозгом, 19 % из них оказывают ингибирующее влияние на пул КОЕ-С-8, а 42 % – инертны в отношении колониеобразования. Выявлено, что препараты, стимулирующие КОЕ-С-8 у интактных доноров, не демонстрируют радиомодифицирующий эффект. Активацию колониеобразования облучённым костным мозгом вызывали только те производные дикетопиперазинов, которые были инертны в отношении КОЕ-С-8 нормальных доноров. Получены первые данные о взаимосвязи структуры нового класса пептидомиметиков с их биологической активностью in vivo. В докладе обсуждаются подходы к синтезу и исследованию влияния тонкой химической структуры на биологические свойства полученных веществ.

ПОСТРАДИАЦИОННОЕ ВОССТАНОВЛЕНИЕ СУТОЧНЫХ РИТМОВ КРОВЕТВОРНОЙ И ИММУННОЙ СИСТЕМ КРЫС С РАЗЛИЧНОЙ РЕАКЦИЕЙ НА СТРЕСС Кузьменко Е.В.

Институт медицинской радиологии им. С.П. Григорьева АМН Украины, Харьков, Украина, imr@online.kharkiv.com.

В данной экспериментальной работе был проведен анализ суточных ритмов кроветворной и иммунной систем после облучения крыс в дозе 6,0 Гр в зависимости от индивидуальной реакции животных на стрессорное тест-воздействие.

За две недели до облучения животных подвергали стресс-воздействию 3-х часовой иммобилизацией. Реактивность животных оценивали по величине коэффициента отношения содержания лимфоцитов к нейтрофилам (л/н), выражаемого в процентах для каждого животного до и после стресса. Исходное значение коэффициента л/н до иммобилизации в среднем по выборке составляло 2,30 ± 0,09. По изменению коэффициента л/н через 3 часа после иммобилизации крыс разделили на:

гиперреактивных и гипореактивных. Среднее значение данного коэффициента у гиперреактивных (группы І, ІІ) и гипореактивных (группы ІІІ, ІV) животных, составляло 0,47 ± 0,01 и 1,02 ± 0,08 (Р 0,01) соответственно. Для определения влияния времени облучения на пострадиационное восстановление суточных ритмов кроветворения и иммунитета, животных с разной реактивностью облучали в дозе 6, 0 Гр на рентгеновском аппарате РУМ-17 в двух временных точках (8:00 и 20:00 ч.) Исследование проводили на 3, 7, 14, 21 и 30-е сутки после облучения.

Изменение циркадных ритмов кроветворной и иммунной систем в ответ на лучевое воздействие достоверно различались по интенсивности у гипер- и гипореактивных животных, начиная с 3-х суток наблюдения. Отличия иммунного ответа у животных разных типов реагирования заключалась во времени восстановления суточных ритмов.

Полное восстановление суточных ритмов кроветворной и иммунной систем наблюдалось только для гипореактивных животных, облученных в 20:00 (группа IV).

Полученные результаты исследования дают возможность предположить, что гиперреактивные животные отличаются более высокой радиочувствительностью по сравнению с гипореактивными. Что следует учитывать в оценке индивидуальной радиочувствительности.

КЛИНИКО-ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ПАРАЛЛЕЛИ МЕЖДУ ИММУНОЛОГИЧЕСКИМИ НАБЛЮДЕНИЯМИ ЗА ОБЛУЧЕННЫМИ ЖИВОТНЫМИ И ЗА ЛЮДЬМИ, ПОСТРАДАВШИМИ ПРИ КАТАСТРОФЕ НА ЧАЭС.

Мальцев В.Н.

Федеральный медицинский биофизический центр им.А.И. Бурназяна, ФМБА России, Москва Москва, Россия. а1931192@ mail.ru.

Наблюдения, проведенные на людях, пострадавших в результате аварии на ЧАЭС, подтвердили многие закономерности, отмеченные ранее в экспериментах на животных. Как в эксперименте на обезьянах, так и в наблюдениях на людях, отмечено три волны увеличения С-реактивного белка (СРБ): в период первичных реакций на облучение (1-2 сут), в разгар болезни и в восстановительный период.

Общими являются закономерности снижения лимфоцитов в облученном организме.

Отмечено совпадение экспериментальных и клинических данных о колебаниях содержания комплемента в ранние сроки после воздействия излучения.

Это служит доказательством участия комплемента в клинических проявлениях первичной реакции на облучение, которая напоминает анафилактический шок.

Механизм участия комплемента в гибели клетки реализуется путем активации комплекса антиген-антитело на клеточной стенке, поврежденной излучением.

Сходные результаты отмечены при определении титров нормальных антител в сыворотке крови: у экспериментальных животных через 2-3 недели после облучения, у людей - через 3-4 недели после катастрофы.

В эксперименте и клинике всегда наблюдалось увеличение сапрофитных микробов и антибиотикоустойчивых штаммов на коже в разгар острой лучевой болезни. В клинических наблюдениях эти изменения были менее выражены в связи с массивной антибиотикотерапией и пребыванием людей в асептических палатах.

Исходя из проведенных исследований можно сделать вывод, что определение СРБ, комплемента, нормальных антител, можно использовать в качестве показателей при прогнозировании и оценки тяжести течения острой лучевой болезни. Состояние микрофлоры кожи можно учитывать для оценки эффективности санитарно-гигиенических мероприятий в асептических палатах.

ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТОВ, ПОЛУЧЕННЫХ ИЗ МИЦЕЛИЯ И ПЛОДОВЫХ ТЕЛ PLEUROTUS OSTREATUS, НА ПОСТРАДИАЦИОННЫЕ НАРУШЕНИЯ ИММУНИТЕТА У ЖИВОТНЫХ Милевич Т.И., 1 Конопля Е.Ф., 2Герасименя В.П., 2Захаров С.В., Путырский Л.А., 3Путырский Ю.Л ГНУ «Институт радиобиологии НАН Беларуси», Гомель, Беларусь, irb@mail.gomel.by, ООО «Инбиофарм», Москва, Россия, НИИ онкологии и медицинской радиологии им. Н.Н. Александрова МЗ Беларуси, Минск, Беларусь Препараты вешенки в зависимости от дозы стимулируют гуморальный иммунный ответ. Иммунопозитивный эффект препарата I, представляющий собой спиртовой экстракт из мицелия и плодовых тел базидиального гриба Pleurotus ostreatus (вешенка), у мышей – самок СВА регистрируется уже в дозе 25 мг/кг, обеспечивающей увеличение относительного и общего количества антителопродуцентов в селезенке иммунизированных животных. Увеличение дозы экстракта до 100 мг/кг приводит к пятикратному увеличению числа антителообразующих клеток (АОК) в селезенке, при этом уровень ГА в сыворотке крови мышей остается прежним, что свидетельствует о нарастании пролиферации спленоцитов еще не способных секретировать IgM. Несколько иную картину наблюдали при введении животным препарата II, полученного в результате лиофильной сушки мицелия и плодовых тел вешенки при 370C и размельченного до стадии мелкодисперсного порошка. Максимальный ответ поликлональной пролиферации В-лимфоцитов и дифференцировки их до уровня АОК удается обеспечить в случае увеличения дозы препарата II до 150 мг/кг. При этом относительное и общее содержание антителопродуктов возрастало, соответственно, в 3 и 3,5 раза на фоне адекватного прироста титра гемагглютининов в 1,8 раза.

Установлено, что препарат I в случае введения его после облучения в дозе 2 Гр позволяет не только поднять гуморальную составляющую иммунного статуса облученных животных до уровня интактного иммунизированного контроля, но и в дозах 50 и 100 мг/кг его превысить. Введенный в дозе 150 мг/кг препарат II уменьшает иммуносупрессивный эффект облучения, но еще полностью не восстанавливает регистрируемые параметры В клеточного иммунного ответа. При увеличении дозы препарата до 500 мг/кг постлучевая иммуносупрессия полностью отменяется.

Полученные экспериментальные результаты позволяют рассматривать препараты вешенки как потенциальные иммунофармакологические средства.

ВОЗДЕЙСТВИЕ ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ НА ТКАНИ ТИМУСА Никитина И.А., Грицук А.И.

Гомельский государственный медицинский университет, Гомель, Беларусь Изменения в иммунной системе, вызванные ионизирующим излучением, имеют сложный комплексный характер, связанный со структурно-функциональными нарушениями в тимоцитах и клетках окружающего их эпителиального ретикулума.

Данный аспект проблемы остается малоизученным. В связи с чем, целью исследований было оценить влияние однократного ионизирующего облучения в дозе 1 Гр. на состояние интегрального метаболического показателя – скорости потребления кислорода тканями тимуса и морфологию тимоцитов белых крыс состояние. Показатели тканевого дыхания изучали на установке Record 4 (ИТЭБ РАН, Пущино, РФ), а морфологические характеристики тимоцитов – на атомно-силовом микроскопе «НТ-206» («Микро-Тест Машина», РБ),.

Установлено, что если в контроле скорость дыхания тимоцитов на эндогенных субстратах (Vэнд) составляет 6,5;

5,2-8,0 нмоль О2 / мин *1 мг белка (медиана;

верхний–нижний квартили), то на 3-сутки после облучения этот показатель снижается более чем на треть и остается таковым вплоть до 10 суток. Изменение морфологии тимоцитов на третьи сутки после облучения проявляются в виде уменьшения диаметра тимоцитов, их высоты (более чем в два раза), объема и общей площади поверхности и появления неровностей. Спустя 10 суток после радиационного воздействия многие изучаемые морфологические параметры тимоцитов приближаются к контрольным значениям. Объем клеток, остается достоверно ниже контрольных величин, хотя и незначительно возрастает. Таким образом, на 3 и 10 сутки после облучения в тканях тимуса крыс происходят структурно метаболические изменения в виде уменьшения интегрального метаболического показателя – скорости потребления кислорода на эндогенных субстратах и изменения объема, диаметра, высоты и общей площади поверхности тимоцитов.

ПОВЫШЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ СИНГЕННЫХ КЛЕТОК ЭМБРИОНАЛЬНОЙ ПЕЧЕНИ В РЕГЕНЕРАЦИИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ЛЕТАЛЬНО ОБЛУЧЕННЫХ МЫШЕЙ В РЕЗУЛЬТАТЕ КОНТАКТНОГО ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ЭТИХ КЛЕТОК И МУЛЬТИПОТЕНТНЫХ СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТОК ТИМУСА Никольский И.С., Никольская В.В., Тарануха Л.И., Галицкая С.Н., Никольская Е.И, Зубов Д.А., Лисица Н.А., Семенова Я.-М., Федорчук А.Г., Сорокин Г.К.

Институт генетической и регенеративной медицины АМН Украины Киев, Украина, nikolskayav@mail.ru На следующий после облучения в 9 Гр день мышам СВА вводили сингенные клетки эмбриональной печени 14-го дня гестации (КЭП) или эти же клетки, преинкубированные in vitro с растущими в виде колоний мультипотентными стромальными клетками тимуса (МСК), в количестве 0,510 клеток. Иммунную систему исследовали через 30 дней после облучения.

Радиозащитное действие КЭП отчетливо проявлялось по увеличению выживаемости животных, которая у леченных животных была почти в 2 раза выше.

КЭП, преинкубированные с МСК тимуса оказывали значительно более выраженное радиозащитное действие, регистрируемое по выживаемости животных, восстановлению массы тела, тимуса, селезенки и клеточности лимфоидных органов. Нормализация гуморального иммунного ответа под влиянием введенных КЭП наблюдалась лишь частичная, а трансплантация КЭП, преинкубированных с МСК тимуса, приводила практически к полному восстановлению антителогенеза.

Представленные данные свидетельствуют, что в результате контактного взаимодействия с МСК тимуса КЭП приобретают повышенную радиозащитную, регенеративную и иммунобиологическую активность.

ВЛИЯНИЕ -ЛУЧЕЙ НА ЕСТЕСТВЕННУЮ УСТОЙЧИВОСТЬ И ВЫРАБОТКУ АНТИТЕЛ ПРОТИВ СТАФИЛОКОККОВ, САЛЬМОНЕЛЛ И ЭШЕРИХИЙ У ЦЫПЛЯТ, ВАКЦИНИРОВАННЫХ ПРОТИВ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ Ониани М.Р. 1, Начкебия Д. В.2, Берая Д. М.2, Хуташвили Х. Г.1, Буджиашвили Х. Д. Грузинский НИИ радиологии и экологии, Тбилиси, Грузия;

Грузинский государственный аграрный университет, Тбилиси, Грузия magatooniani@yahoo.com Сформировали 4 группы цыплят двухмесячного возраста, по 12 голов в каждой: 1) необлученные и невакцинированные;

2) облученные и невакцинированные;

3) вакци нированные и необлученные;

4) облученные и вакцинированные. Реакцией агглютинации определили у цыплят титр антител против стафилококков, сальмонелл и эшерихий, он не превышал разведение 1:2;

затем во второй и четвертой группе облучали цыплят -лучами дозой 0,2 грей в течение 4 часов, а цыплят третьей и четвертой группы иммунизировали вакциной из штамма Ла-Сота. Все три группы – staphylococcus aureus №209, salmonella choleraesius 020, E. Coli 08 реагирует в сыворотке крови, полученной от цыплят второй, третьей и четвертой группы реакцией агглютинации, причем титр выше в четвертой группе – со стафилококками 1:32, сальмонеллами 1:128, эшерихиями 1:32. Также во второй группе цыплят – облученных и невакцинированных - со стафилококками 1:16, сальмонеллами 1:64, эшерихиями 1:16. Сравнительно ниже титр в третьей группе - у вакцинированных и необлученных - со стафилококками 1:16, сальмонеллами 1:16, эшерихиями 1:8.

Полученные результаты свидетельствуют, что -лучи способны активировать защитные силы организма, а вместе с вакциной (штамм Ла-Сота) титр антител значительно увеличивается, он распространяется и на возбудителей бактериальных инфекций.

ВЛИЯНИЕ -ЛУЧЕЙ НА ТИТР АНТИТЕЛ У ЦЫПЛЯТ, ИММУНИЗИРОВАННЫХ ПРОТИВ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ Ониани М.Р. 1, Начкебия Д. В. Грузинский НИИ радиологии и экологии, Тбилиси, Грузия;

Грузинский государственный аграрный университет, Тбилиси, Грузия magatooniani@yahoo.com Цыплят предварительно обрабатывали малыми дозами -лучей (0,2 грей).

Облучали 28 дневных цыплят Сs-137, облучение продолжалось 4 часа, затем реакцией задержки гемагглютинами определяли в сыворотке крови титр антител. Выяснилось, что у облученных и вакцинированных вакциной Ла-Сота цыплят титр антител в два раза больше, нежели только у вакцинированных. Были сформированы 4 группы цыплят: 1) невакцинированные и необлученные;

2) облученные и невакцинированные;

3) вакцинированные и необлученные;

4) облученные и вакцинированные. Предварительно определили иммунный фон во всех группах и он не превышал титр 1 : 2. Всего для опыта было взято 48 цыплят.

Самый высокий титр антител в 4 группе, где у облученных и вакцинированных цыплят титр антител дважды превышает титр вакцинированных и необлученных цыплят группы. В 3 группе титр антител был в пределах 1:256 – 1:512, в четвертой этот показатель в пределах 1:512 – 1:1024, что указывает на то, что -лучи усиливают естественную резистентность цыплят и, соответственно, увеличивают титр антител.

Затем, точно также обработали 120 дневных цыплят (группы цыплят и количество такое же) и через 21 день заразили вирулентным штаммом «Т» Ньюкаслской болезни для проверки напряженности иммунитета. Наблюдали в течение 10 дней. Оказалось, что лучи и без вакцинации достаточно эффективны, так как во второй группе из облученных цыплят выжили 5, из 12 вакцинированных и облученных цыплят все, а из необлученных и вакцинированных цыплят третьей группы выжили 11.

Таким образом, -лучи в малых дозах (стимулирующая доза) повышает естественную резистентность организма и сохранность цыплят при контрольном заражении вирулентным штаммом «Т» Ньюкаслской болезни.

РЕАКЦИЯ СИСТЕМЫ ИММУНИТЕТА ЧЕЛОВЕКА НА ДЕЙСТВИЕ ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ В МАЛЫХ ДОЗАХ Шальнова Г.А., Уланова А. М, Мальцев В.Н.

Федеральный медицинский биофизический центр им. А.И. Бурназяна, ФМБА России, Москва Москва, Россия. а1931192@ mail.ru.

Литературные данные, проанализированные нами, о действии излучения в малых дозах на систему иммунитета человека касаются трех групп людей.

1). У участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС (ликвидаторы) (0,1-0,5 Гр) установлено снижение переваривающей способности фагоцитов, бактерицидной активности сыворотки крови и комплемента (альтернативный путь активации). Содержание лимфоцитов колеблется, при этом наблюдается изменение удельного веса отдельных фракций, увеличение коэффициента СД4/СД8. Концентрация иммуноглобулинов крови снижается, а затем увеличивается. Данные о заболеваемости ликвидаторов инфекциями крайне противоречивы.


2). Нарушение иммунологических показателей выявлено у населения, проживающего радионуклидами (15-40 Кu/км2). Отмечено колебание на территориях, загрязненных фагоцитарной реакции, с увеличением ее активности в отдаленные сроки, снижение лизоцима, увеличение и в дальнейшем снижение концентрации IgG и IgM в сыворотке крови, появление патологических субстанций (Р- и С-реактвного белка), увеличение NК киллеров на фоне снижения СД8+ лифоцитов по сравнению с «чистыми» населенными пунктами. Среди населения зафиксировано повышение случаев инфекционной заболеваемости вирусной и бактериальной природы (хронические тонзиллиты, бронхо легочные инфекции, вирусные гепатиты, и др.), а так же аллергозов.

3). У рентгенологов за 10 лет работы суммарная доза воздействия излучения составила 0,005-0,05 Гр. У них имело место активация фагоцитоза, бактерицидной активности сыворотки, комплемента и лизоцима в сыворотке крови, на фоне снижения содержания В- и Т-лимфоцитов (хелперов и супрессоров), а так же титров нормальных антител на фоне увеличения содержания противотканевых антител. Максимальные изменения показателей зарегистрированы через 5 лет. Через 10 лет наметилась тенденция к их нормализации.

Можно сделать вывод, что изменения показателей иммунитета после воздействия на людей излучения в малых дозах слабо выражены, отличались нестабильностью и волнообразностью течения. В некоторых случаях отмечен «гормезисный» эффект.

СЕКЦИЯ IV. МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ДЕЙСТВИЯ РАДИАЦИИ ЛИПИДНЫЙ ОБМЕН И КОНЦЕНТРАЦИЯ ГОРМОНОВ ОТДЕЛЬНЫХ СТРУКТУР ГОЛОВНОГО МОЗГА У ЛИЦ С ИЗБЫТОЧНОЙ МАССОЙ ТЕЛА И ОЖИРЕНИЕМ, ПОСТРАДАВШИХ ВСЛЕДСТВИЕ АВАРИИ НА ЧАЭС Атаманюк Н.П., Деревянко Л.П., Талько В.В., Коваленко А.Н., Каминский А.В., Янина А.Н., Дмитрук С.Н., Диденко Н.В.

ГУ ”Научный центр радиационной медицины АМН Украины“, Киев, Украина, talko1950@gmail.com;

yanina_tt@mail.ru У лиц, пострадавших вследствие аварии на ЧАЭС, ранее было установлено существенное увеличение частоты развития ожирения по сравнению с лицами, непричастными к аварии.

Цель настоящей работы: изучить липидный обмен и концентрацию гормонов отдельных структур головного мозга у лиц с избыточной массой тела и ожирением, пострадавших вследствие аварии на ЧАЭС. Объектом исследования были ликвидаторы 19861987 гг., а также эвакуированные из 30-км зоны лица с избыточной массой тела и ожирением. Группой сравнения были лица с избыточной массой тела и ожирением, непричастные к аварии. Изучена концентрация атерогенных липидов, а также гормонов гипоталамуса и гипофиза (альфа-меланоцитстимулирующего гормона – -MСГ, серотонина, мелатонина) у 326 обследованных лиц. Показатели липидного обмена определяли в сыворотке крови пациентов ферментативными методами с использованием реагентов фирмы „Biosystems” (Испания). Концентрацию гормонов определяли методами радиоиммунологического анализа с использованием наборов фирм „EURO DIAGNOSTICA” (Швеция) и „BIOSOURCE” (Бельгия).Установлено, что у лиц с избыточной массой тела и ожирением, пострадавших вследствие аварии на ЧАЭС, наблюдаются изменения жирового обмена проатерогенного характера (достоверное увеличение концентрации триглицеридов, холестерина, ХС-ЛПНП и ХС-ЛПОНП относительно показателей в группах сравнения). Изменения липидного состава в сыворотке крови пострадавших лиц достоверно зависели от массы тела (r=0,64;

р0,05).

Достоверных отличий в концентрации серотонина между группами сравнения не наблюдалось. У пострадавших лиц отмечалось нарушение механизмов энергетической адаптации, что проявлялось отсутствием увеличения секреции -MСГ, необходимого для сдерживания накопления массы тела. В то же время у лиц групп сравнения сохранялась физиологическая защитная реакция пропорциональное увеличение концентрации MСГ в 2–2,5 раза, как ответ на увеличение массы тела ЭФФЕКТ ДЛИТЕЛЬНОГО ВЛИЯНИЯ ГАММА-ИЗЛУЧЕНИЯ УРОВНЯ И СПЕКТРА, ИМЕВШИЕ МЕСТО В СЛУЧАЕ ЧЕРНОБЫЛЬСКОЙ АВАРИИ, НА КЛЕТКИ ЧЕЛОВЕКА Беляева Н. В.

ГУ «Научный центр радиационной медицины НАМН Украины», Киев Исследования радиобиологических реакций, выполняемые на клеточных культурах in vitro, вносят вклад в понимание молекулярно-клеточных механизмов развития биологического ответа на облучение. Цитогенетические радиационно-индуцированные последствия рассматриваются в контексте Проведено экспериментальное рисков для здоровья человека.

сравнительное исследование хронического действия -излучения уровня и спектра, имевшие место в случае Чернобыльской аварии, на клетки человека за определенный временной период посредством аккумуляционных клеточных моделей с использованием линии иммортализованных нормальных hTERT-BJ1 фибробластов и линии опухолевых клеток HeLa. Получены экспериментальные доказательства непрерывного круглосуточного влияния -излучения «Чернобыльского спектра» при мощности доз до 1,0 Гр/год и кумулятивных дозах от 14 мЗв до 1,2 Зв на клетки человека в виде биологического эффекта, механизм которого определяется растянутым во времени формированием поглощенной дозы и параллельно восстановительными процессами, развивающимися соответственно клеточному генотипу. Кривые, отражающие восстановление жизнеспособности hTERT-BJ1 и HeLa клеток в зависимости от времени или дозы, имели S-образную форму с выходом, носящим экспоненциальный характер, на уровень значений в контролях. Начальная точка формирования цитогенетического эффекта в культурах клеток исследованных линий соответствовала второму удвоению.

Кривые «доза – время – эффект» по образованию микроядер (МЯ) были неправильной М образной формы и обладали внешним сходством. Начальный, относительно прямолинейный участок в диапазоне доз 0,014-0,602 мЗв (для hTERT-BJ1 клеток) и 0,015 0,404 мЗв (для клеток HeLa) характеризовался статистически достоверной количественной взаимосвязью указанных параметров (коэффициент корреляции 0,81-0,96 и 0,75-0,96, соответственно;

p 0,05). Последующий участок отражал ослабление цитогенетического эффекта, клетки обеих линий приобрели определенную радиорезистентность. К концу наблюдения показатели МЯ/1000ДК (количество МЯ на 1000 двуядерных клеток) в культурах hTERT-BJ1 и HeLa клеток не достигли исходных значений и достоверно (p 0,0001) превышали уровень в интанктных контролях.

ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЙ СТАТУС ПОСТРАДАВШИХ В ПЕРИОДЕ ОТДАЛЕННЫХ ПОСЛЕДСТВИЙ ОСТРОЙ ЛУЧЕВОЙ БОЛЕЗНИ ОТ ВНЕШНЕГО ГАММА-БЕТА-ОБЛУЧЕНИЯ Галстян И.А., Суворова Л.А., Надежина Н.М., Козлова М.Г., Нугис В.Ю.

Федеральный медицинский биофизический центр им. А.И.Бурназяна ФМБА России, Москва, Россия, igalstyan@rambler.ru Изучено состояние периферической крови в периоде отдаленных последствий ОЛБ от внешнего гамма-бета-облучения и связь выявленных изменений с перенесенным лучевым воздействием или присоединяющимися с течением времени различными соматическими заболеваниями.

Использованы результаты многолетнего гематологического обследования больных, пострадавших во время различных аварий с внешним гамма-бета-облучением.

Статистическая обработка материалов проводилась при помощи пакета статистических программ BIOSTAT.

В отдаленные сроки ОЛБ (от 1,5 до более 20 лет после облучения) средние групповые уровни эритроцитов, лейкоцитов, нейтрофилов и лимфоцитов в крови находятся в пределах границ физиологической нормы. Несмотря на нормальный средний (групповой) уровень почти всех показателей крови в отдаленном периоде ОЛБ при индивидуальном анализе функционального состояния гемопоэза у части пациентов отмечаются преходящие и длительные (в течение многих лет) цитопении. Средний уровень тромбоцитов при гамма-бета-воздействии в отдаленном периоде находится на нижней границе нормы, присущей практически здоровому человеку. Однако изучение динамики морфологического состава периферической крови показало, что с годами средний уровень тромбоцитов повышается и к 20 годам после перенесенной ОЛБ достигает нормальных величин. Кроме того, тромбоцитопения выявляется у 56% больных с последствиями местных лучевых поражений в виде поздних лучевых язв. Значительное количество тромбоцитопений (36 %) было обнаружено при заболеваниях печени (персистирующие гепатиты), которые в отдаленном периоде, как правило, являлись следствием острого посттрансфузионного гепатита, перенесенного в развернутой стадии ОЛБ. Из 114 больных, перенесших ОЛБ вследствие гамма-бета облучения, у 2 больных в периоде отдаленных последствий развился хронический миелолейкоз, еще у одного эритремия.

РЕЗУЛЬТАТЫ ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКОГО НАБЛЮДЕНИЯ В ОТДАЛЕННЫЕ СРОКИ ПОСЛЕ ОБЛУЧЕНИЯ ГРУППЫ ЛИКВИДАТОРОВ С ОЛБ РАЗЛИЧНОЙ СТЕПЕНИ ТЯЖЕСТИ Голуб Е.В.1, Севанькаев А.В.1, Нугис В.Ю. Медицинский радиологический научный центр РАМН, Обнинск, РФ, mrrc@mrrc.obninsk.ru Федеральный медицинский биофизический центр им. А.И. Бурназяна ФМБА России, Москва, Россия, fmbc-fmba@bk.ru Цитогенетическое обследование группы ликвидаторов (9 человек) с диагнозом ОЛБ различной степени тяжести было начато спустя 10 лет после аварии на ЧАЭС. На протяжении последующих 13 лет после облучения наблюдали изменение частоты нестабильных и стабильных (аномальные моноцентрики, наблюдаемые при стандартной окраске и транслокации, выявленные FISH-методом) аберраций хромосом. Общая частота нестабильных аберраций достоверно (р0,05) превышала контрольные показатели практически в каждый год наблюдения. Отмечалась индивидуальная вариабельность частоты дицентриков и центрических колец, диапазон которой зависел от степени тяжести ОЛБ. У всех ликвидаторов обнаружено статистически значимое (р0,05) снижение этих маркеров радиационного воздействия в наблюдаемый период после облучения. Причем скорость их снижения практически не зависела от степени тяжести ОЛБ. Следует отметить повышенный уровень хроматидных аберраций и индивидуальные особенности динамики их частоты: у одних ликвидаторов их уровень снижался, у других, наоборот, повышался независимо от степени тяжести ОЛБ, что может отражать возрастное снижение иммунитета и функции репарационной системы клеток, повышение восприимчивости к инфекционным заболеваниям. Анализ частоты стабильных аберраций хромосом (аномальные моноцентрики и транслокации) свидетельствовал о достоверно (р0,05) повышенном их уровне на протяжении всего периода наблюдения. Отмечается определенная зависимость диапазона вариабельности частоты аномальных моноцентриков и транслокаций от степени тяжести ОЛБ ликвидаторов. Практически у всех многократно обследованных ликвидаторов отмечалась тенденция к постепенному повышению частоты аномальных моноцентриков. Частота транслокаций при этом варьировала в пределах ошибки, на одном (повышенном) уровне. Диапазон вариабельности частоты нестабильных и стабильных аберраций у некоторых ликвидаторов отличался от средне-группового уровня ликвидаторов с аналогичной степенью тяжести ОЛБ.


ФАКТОРЫ И МЕХАНИЗМЫ СТАРЕНИЯ ХРУСТАЛИКА Деев А.И.

РГМУ им. Н.И. Пирогова, Москва, Россия, adeyev@mail.ru Хрусталик, являясь самым примитивным органом нашего тела, обладает рядом уникальных черт, таких как прозрачность, отсутствие ядер и многих органоидов в основной массе его клеток, отсутствие иннервации и кровоснабжения. Возраст белков, из которых состоит сердцевина хрусталика, равен примерно возрасту человека.

Удивительным представляется тот факт, что белки хрусталика сохраняются в нём, мало изменяясь на протяжении нескольких десятилетий. Возможность неинвазивного мониторинга прозрачности хрусталика позволяет следить за темпом его старения у человека и оценивать роль различных факторов, ускоряющих или замедляющих старение.

На основании собственных исследований и данных литературы рассмотрены физико-химические аспекты помутнения хрусталика и развития катаракты при старении и облучении организма. Предполагается, что одним из пусковых механизмов катарактогенеза является истощение антиокислительного потенциала хрусталика и развитие окислительного стресса, что проявляется на ранних этапах катарактогенеза в колебаниях уровня глутатиона и накоплении в хрусталике продуктов свободнорадикального окисления. Вслед за этим происходит снижение количества отрицательных зарядов (рК около 7.2) на основных белках хрусталиковых волокон, что интерпретируется как нарушение фосфорилирования белков внутри волокон хрусталика, обусловленное дискоординацией каскадных систем регуляции. Снижение растворимости белков ведет к сорбции незаряженных белков на мембранах клеток, приводящее к нарушению регулярной укладки хрусталиковых мембран, что рассматривается в качестве основной причины помутнения хрусталика при катаракте. Обсуждаются биофизические методы ранней диагностики начала катарактогенеза, а также меры профилактики и задержки развития катаракты.

СТРАТЕГИЯ ПЕРВИЧНОЙ ПРОФИЛАКТИКИ РАДИОГЕННОГО РАКА, АРГУМЕНТИРОВАННАЯ ДАННЫМИ ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ Демина Э.А.

Институт экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р.Е.Кавецкого Национальной академии наук Украины;

Киев, Украина edjomina@ukr.net Современной точкой зрения на этиологию и патогенез радиогенного рака является доминирующая канцерогенная опасность действия малых доз облучения. Снижение их эффекта на генетическом уровне играет решающую роль в осуществлении первичной профилактики возникновения рака радиационного генеза. Эта проблема остается актуальной в связи с минимизацией последствий Чернобыльской катастрофы, а также использованием ионизирующей радиации в промышленности и медицинских целях. До настоящего времени отсутствует целостное представление о путях предотвращения развития радиогенного рака.

В работе дается аргументированное представление о стратегии профилактики радиогенного рака на основе целенаправленно выполненных цитогенетических исследований. Поскольку согласно канонам доказательной медицины, именно первичная профилактика направлена на предотвращение возникновения заболевания, предлагаемая стратегия ее проведения включает: а) использование нетоксичных радиопротекторов, к которым следует отнести применяемый в медицинской практике препарат инозин (рибоксин);

показано, что инозин снижает уровень аберраций хромосом в лимфоцитах крови человека, индуцированных в диапазоне действия малых доз (до 0,5 Гр) – до значений спонтанного уровня;

б) оценка индивидуальной радиационной чувствительности (ИРЧ) человека дает возможность определять индивидуальный риск развития радиогенных патологических состояний;

с этой целью рекомендовано использовать цитогенетический G2-тест для выявления лиц с повышенной ИРЧ;

в) учет дополнительного воздействия комутагенов, которые могут усиливать эффекты, в том числе цитогенетические, сочетанного действия малых доз радиации и химических мутагенов.

При осуществлении предлагаемой стратегии, безусловно, необходимо учитывать совокупность факторов окружающей среды и образа жизни населения.

ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА HFE И ХРОМОСОМНЫЕ АБЕРРАЦИИ У ЖИТЕЛЬНИЦ ЗАГРЯЗНЁННЫХ РАДИОНУКЛИДАМИ РАЙОНОВ Иванова Т.И., Крикунова Л.И., Сыченкова Н.И., Вербинская Н.И., Замулаева И.А., Рябченко Н.И.

Медицинский радиологический научный центр РАМН, Обнинск, РФ, ivanovati@mrrc.obninsk.ru Наследственные нарушения метаболизма железа, приводящие к его избыточному содержанию, в большинстве случаев ассоциированы с сайтами C187G и G845А в гене HFE, который является одним из основных регуляторов гомеостаза железа в организме.

Оксидативный стресс, вызванный повышенным содержанием железа, приводит к геномной нестабильности, ускорению эстроген-зависимого канцерогенеза (Wyllie S, Liehr JG, 1997). С помощью метафазного анализа аберраций хромосом и генотипирования методом ПЦР/ПДРФ (полимеразная цепная реакция с последующим определением длин фрагментов рестрикции) была проанализирована связь полиморфизма гена HFE с частотой хромосомных аберраций в лимфоцитах 278 жительниц двух районов РФ, в разной степени загрязненных радионуклидами в результате аварии на ЧАЭС (г. Узловая, Cs – 171 кБк/м2 и Клинцовский район - 322 кБк/м2). В средний уровень загрязнения по результате данной работы была сформирована группа контроля, составившая жительниц сходного возраста, проживающих в г. Обнинске. Статистически значимых различий по частотам генотипов в локусах HFE, а также по средней частоте хромосомных аберраций между здоровыми женщинами и больными миомами не обнаружено ни в одном из трёх обследованных регионов. Хотя доля лиц с повышенной частотой аберраций (5%) в каждом регионе выше у больных миомами. Средняя частота аберраций, а также доля лиц с повышенной частотой аберраций (5%) выше у лиц, населяющих территории с большей плотностью радиоактивного загрязнения. На уровне тенденции показано, что во всех трёх регионах средняя частота аберраций для гетерозигот C187G гена HFE ниже, чем для гомозигот дикого типа. Высокая частота хромосомных аберраций (5%) ассоциирована с генотипом СС в сайте C187G гена HFE. Гетерозиготный генотип CG в сайте C187G гена HFE показал отрицательную ассоциацию с высокой частотой хромосомных аберраций. Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ и Правительства Калужской области (грант № 09-04-97551).

РАЗРАБОТКА ДЕМОНСТРАЦИОННОЙ МОДЕЛИ КОМПЬЮТЕРНОЙ ПРОГРАММЫ СТАТИСТИЧЕСКОГО АНАЛИЗА КЛИНИЧЕСКИХ ДАННЫХ «ГОСПИТАЛЬНОГО РЕГИСТРА ИНСУЛЬТОВ» ФМБЦ ИМ.А.И. БУРНАЗЯНА ФМБА РОССИИ Игнатов А.А., Коровкина Э.П., Шевченко Н.С., Бирюков А.П., Белевитин А.П.

Федеральный медицинский биофизический центр им. А.И.Бурназяна ФМБА России, Москва, Россия;

korovkina.elwira@yandex.ru Цель работы: Разработка базы данных и компьютерной программы статистического анализа клинических данных «Госпитального регистра инсультов»

ФМБЦ им. А.И. Бурназяна ФМБА России.

При разработке базы данных использована программа «Госпитальный регистр инсульта» (М.,2006), разработанная в НИИ инсульта РГМУ.

Результаты. В 2009 году на основе анкетных данных пациентов (работников предприятий, подведомственных ФМБА России) ряда МСЧ разработана общая база данных и демонстрационная модель компьютерной программы (Stat.mdb -на платформе Microsoft Access 2003) статистического анализа заболеваемости (смертности) инсультом (995 чел, из них-500 чел. мужского пола, 495-женского). Когорта была разбита по возрастным группам, типам инсультов и патогенетическим подтипам ишемического инсульта с учетом всех критериев, представленных в анкетах (факторы риска, методы исследования, смертность, терапия и т.д.). Программа предусматривает статистическую обработку анкетных данных по каждой МСЧ и суммарно по всем МСЧ.

Показано, что смертность от всех типов инсультов зависит от возраста (в возрастной группе 40-45лет составляет 5,26%, а в возрасте 65-70 лет- 11,4%).Среди изученных факторов риска (мерц.аритмия, курение, сах.диабет, повышение уровня холестерина, артериальная гипертензия) наибольшее влияние на заболеваемость оказывает,по-видимому, артериальная гипертензия, наблюдавшаяся у 90,4% пациентов).

Смертность по типам инсультов: ишемический-9,4%, кровоизлияние-25,6%, субарахноидальное-25,7%, неопредел.-26,6%, от всех типов-13,1%.

Заключение. Разрабатываемая компьютерная программа данных «Госпитального регистра инсультов» ФМБЦ им. А.И. Бурназяна может быть использована для стандартизации подходов к ведению больных с церебральным инсультом в зависимости от типа, тяжести, а также для организации контроля над качеством диагностической и лечебной помощи больным с острыми нарушениями мозгового кровообращения на госпитальном этапе.

СОСТОЯНИЕ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ И КОЖНЫХ ПОКРОВОВ У ЖИТЕЛЕЙ УРАНОВЫХ ПРОВИНЦИЙ КЫРГЫЗСТАНА Исупова А.А., Тухватшин Р.Р, Кыргызско-Российский Славянский университет, Бишкек, Кыргызская Республика, rtuhvatshin@rambler.ru Впервые установлено, что постоянная напряженная работа отдельных звеньев системы иммунитета у жителей, проживающих в геохимической горной провинции, загрязненной радионуклидами и у бывших шахтеров урановых предприятий истощала приспособительные резервы иммунной системы организма и способствовала развитию (обострению) различных заболеваний, в том числе - кожных.

Показано, что у обследуемых лиц, проживающих в урановых геохимических провинциях, часто наблюдались воспалительные, сосудисто-атрофические изменения кожи с развитием кожных заболеваний;

установлено изменение структуры микробного пейзажа кожи в сторону роста колоний патогенных микробов, вызываемого снижением резистентности кожных барьеров и иммунологической реактивности организма.

Выявлены особенности патогенеза развития (и/или обострение) кожных заболеваний: возрастание количества цитотоксических лимфоцитов крови угнетает функции активирования Т- и В-лимфоцитов, что приводит к уменьшению выработки иммуноглобулинов, а также снижению количества и функциональной активности системы мононуклеарных фагоцитов и представлению антигена Т-лимфоцитам;

снижению функциональной активности нейтрофилов - хронизации заболеваний кожных покровов у жителей пгт Каджисай и бывших шахтеров уранового предприятия.

РАДИОБИОЛОГИЧЕСКИЙ РЕПОЗИТОРИЙ БИОМАТЕРИАЛА ЧЕЛОВЕКА ЮУрИБФ: ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В НАСТОЯЩИХ И БУДУЩИХ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЯХ Кириллова Е.Н., Захарова М.Л.1, Ревина В.С.1, Другова Е.Д1., Павлова О.С.1, Урядницкая Т.И.1, Соколова С.Н.1, Муксинова К.Н.1, Фоунтос Б.Н2., Лоффредо К.А Южно-Уральский институт биофизики ФМБА, Озерск, Россия, Департамент энергетики США, 3Управление онкологии и биостатистики, Джорджтаунский университет, США, kirillova@subi.su Созданный в конце 1998 г. в ЮУрИБФ ФМБА и постоянно пополняемый биоматериалом Радиобиологический репозиторий тканей человека (РРТЧ) является уникальным исследовательским ресурсом в изучении эффектов пролонгированного радиационного воздействия, связанного с производственной деятельностью работников атомного производства. Работа в РРТЧ осуществляется при финансовой поддержке Министерства энергетики США и Федерального медико-биологического агентства в рамках договора о международном сотрудничестве. Цель создания РРТЧ – сбор и хранение биологического материала людей, подвергшихся облучению в процессе производственной деятельности, для изучения эффектов длительного внутреннего и/или внешнего облучения на разных уровнях организации организма, включая молекулярный и клеточный, с применением самых различных технологий. Использование биологического материала расширит возможности исследователей разных стран получить недостающие знания об эффектах длительного облучения в разных дозах. РРТЧ состоит из следующих биорепозиториев:

1/аутопсийного материала, представленного образами опухолевых и неопухолевых тканей разных органов (940 случаев). Образцы хранятся в формалине, парафиновых блоках и в срезах тканей на стеклах;

2/операционных/биопсийных опухолевых и неопухолевых тканей, взятых при оперативных вмешательствах и/или диагностической биопсии человек;

3/крови и ее компонентов;

суспензии лейкоцитов, лимфоцитов, В-лимфоцитов, эритроцитов, плазмы и сыворотки, ДНК крови работников ПО «Маяк» (4100) и их потомков (хранение при 80 o,–150o С);

4/других тканей, представленных образцами буккальных эпителиоцитов, клеток костного мозга и лимфоидной, костной ткани, клеток и супернатанта индуцированной мокроты, слюны и др (2240 случаев.).

Исследователи разных стран получают образцы биоматериала по заявке.

Биоматериал успешно используется для решения различных вопросов радиобиологии, радиационной цитогенетики, иммуногенетики, радиационной медицины, геронтологии.

ОЦЕНКА СОСТОЯНИЯ БРОНХОЛЕГОЧНОГО ИММУНИТЕТА У РАБОТНИКОВ ПО «МАЯК», ПОДВЕРГАВШИХСЯ ПРОЛОНГИРОВАННОМУ СОЧЕТАННОМУ РАДИАЦИОННОМУ ВОЗДЕЙСТВИЮ Кириллова Е.Н., Павлова О.С1., Ослина Д.С1.,,Другова Е.Д1, Рыжов В.П.2.

Южно-Уральский институт биофизики ФМБА, Центральная медико-санитарная часть № 71 ФМБА, Озерск, Россия;

kirillova@subi.su У работников плутониевого и радиохимических заводов и у ликвидаторов аварии на ЧАЭС ( Кошурникова Н.А. и др., 1998, Чикина и др., 2004) отмечен повышенный риск опухолевых заболеваний бронхолегочной системы. Основной причиной накопления плутония в организме работников ПО «Маяк» было поступление радиоактивных веществ ингаляционным путем в результате перехода с загрязненных поверхностей в воздух рабочих помещений и в органы дыхания. При работе с плутонием профессионалы подвергались и внешнему облучению. Получение и исследование образцов индуцированной мокроты – простой, неинвазивный метод, который может быть одним из этапов в схеме диагностических мероприятий. Целью работы было изучить состояние врожденного локального иммунитета (фагоцитоз, бактерицидная активность нейтрофилов –НСТ-тест), оценить уровень регуляторных белков в супернатанте мокроты, а также определить экспрессию мембранных белков Т-лимфоцитов в крови. Образцы индуцированной мокроты у профессионалов атомного производства и у людей, не работавших на основных заводах, были собраны с помощью ультразвукового небулайзера. Средний возраст обследованных работников предприятия составлял 72,8±0,9, в контроле 69,8±0,7. При дифференциальном подсчете количества клеток мокроты не выявлено различий у лиц сравниваемых групп, различий показателей врожденного иммунитета (фагоцитоз, батерицидная активность) также не найдено. При исследовании уровня регуляторных белков разного механизма действия в супернатанте мокроты отмечено снижение концентрации иммуносупрессирующего фактора роста (TGF-1), а также IL-12+р40 с увеличением дозы от плутония на легкое и положительная корреляция sICAM и стимулирующего иммунопоэз эпидермального фактора роста(EGF) и накопленной дозой внешнего облучения. С повышением содержания плутония в организме увеличивалось количество цитотоксических Т-лимфоцитов в крови профессионалов производства, изменялась экспрессия мембранных рецепторов Т регуляторных лимфоцитов. Повышение активности адаптивного Т-клеточного иммунитета свидетельствует о напряженности иммунных процессов в отдалённом периоде у лиц, подвергавшихся сочетанному облучению ПРОТЕИНОВЫЙ СТАТУС У РАБОТНИКОВ АТОМНОГО ПРОИЗВОДСТВА В ОТДАЛЕННОМ ПЕРИОДЕ ВНЕШНЕГО И ВНУТРЕННЕГО ОБЛУЧЕНИЯ Кириллова Е.Н., Захарова М.Л, Другова Е.Д., Урядницкая Т.И.

Южно-Уральский институт биофизики ФМБА, Озерск, Россия;

kirillova@subi.su Увеличение продолжительности активной жизни человека является одной из важнейших задач здравоохранения и профилактической медицины. Особенностью адаптационных перестроек при длительном действии повреждающих факторов, в том числе радиации, является снижение резервных возможностей организма, нарушение регуляции за счет изменения синтеза белков, что приводит к нарушению функции клеток и развитию заболеваний. Цель исследования – оценить уровень сывороточных регуляторных белков, участвующих в поддержании иммунного гомеостаза в отдаленном периоде профессионального сочетанного радиационного воздействия (внешнее - и внутреннее облучение в разных дозах) и определить связь изменения уровня белков с действием радиации. Количественную оценку концентрации белков в сыворотке крови персонала ПО «Маяк осуществляли методом иммуноферментного анализа (ИФА) с помощью тест систем «R&D Systems» (Англия), «Biosourse» (США), «Bender Medsystems» (Австрия), «Цитокин» Россия на приборе Multiscan модификации EX (Финляндия). Исследован уровень 30 регуляторных белков, разного механизма действия: про- и противовоспалительные цитокины и их рецепторы – IL-1, Il-1Ra, TNF-, TNF-RI и II, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-15, IFN-, IFN-, молекулы клеточной адгезии – sICAM, sCD27, маркеры апоптоза – sAPO-1/Fas, sFas-L, Bcl-2, p53, Caspase 8, ростовые факторы – EGF, FGF,G-CSF, HGF, TGF-,TGF-1, VEGF, TPA-cyk, MMP-9, NSE. В результате скрининга биомаркеров показано, что уровень ростовых факторов – EGF, TGF-1, HGF, FGF, TPAcyk, VEGF и цитокина TNF- у профессионалов производства (возраст ~ 70 лет) в отдаленном периоде пролонгированного облучения статистически значимо отличались от показателей в контрольной группе. Полученные данные свидетельствуют о зависимости выявленных изменений уровня изученных протеиновых биомаркеров от вида и дозы облучения.

Для расширения мероприятий по сохранению здоровья и профессионального долголетия персонала атомной отрасли рекомендуется формировать группы повышенного риска нарушения иммунного гомеостаза, в которые включать лиц, имеющих достоверные нарушения уровня сывороточных и мембранных белковых маркеров, что позволит прогнозировать развитие тяжелой соматической патологии и расширит возможности профилактических и лечебных мероприятий.

РАДИОБИОЛОГИЧЕСКАЯ БАЗА РАДИАЦИОННОЙ ЭПИДЕМИОЛОГИИ:

НЕОБХОДИМОСТЬ И ОСТОРОЖНОСТЬ Котеров А.Н., Бирюков А.П.

Федеральный медицинский биофизический центр им. А.И. Бурназяна ФМБА России, Москва, Россия, govorilga@inbox.ru Сфера деятельности радиационной эпидемиологии — как правило, оценка частоты стохастических эффектов облучения. Принято считать, что расчет рисков и радиационная безопасность основываются преимущественно на этом предмете.



Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 8 |
 





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.