авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |   ...   | 8 |

«РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК Отделение биологических наук Радиобиологическое общество Научный совет по радиобиологии МЕЖДУНАРОДНАЯ АССОЦИАЦИЯ АКАДЕМИЙ НАУК ...»

-- [ Страница 5 ] --

ОЦЕНКА УРОВНЯ ПОВРЕЖДЕНИЙ ДНК В ТИРОЦИТАХ ПОСЛЕ ХРОНИЧЕСКОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ НИЗКОИНТЕНСИВНОГО ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ Ермакова О.В., Раскоша О.В., Старобор Н.Н.

Институт биологии Коми НЦ УрО РАН, Сыктывкар, Россия, ermakova@ib.komisc.ru Хроническое воздействие низкоинтенсивного ионизирующего излучения сопровождается накоплением повреждений ДНК и изменением активности системы репарации, что может привести к возникновению мутаций и злокачественной трансформации клетки. Задачей нашего исследования явилось изучение уровня поврежденности генома клеток щитовидной железы белых беспородных мышей после низкоинтенсивного радиационного воздействия. Животных облучали при мощности дозы 150 мкГр/ч в течение 4, 5, 6 и 7 мес, накопленные дозы составили 31.6;

36.9;

44,5 и 52. сГр соответственно. Уровень повреждений ДНК оценивали с помощью «нейтральной»

версии метода гель-электрофореза лизированных единичных клеток (ДНК-комет), микроядерного теста и по частоте клеток гибнущих по механизму апоптоза. Метод ДНК комет обладает чувствительностью, необходимой для регистрации повреждений ДНК на уровне отдельной клетки, и может быть применен для оценки интегральной целостности генома. Результаты, полученные с применением этого метода, показали, что доза 31.6 сГр вызывает увеличение степени фрагментации ДНК в тироцитах по сравнению с контрольными необлученными животными. Уровень микронуклеированных тироцитов и апоптотически гибнущих клеток в этой группе также возрастает. С увеличением дозы через 6 и 7 мес хронического облучения выраженность поврежденности ДНК, так же как и уровень микроядер, в клетках щитовидной железы мышей приближается к контрольному уровню. Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что при хроническом низкоинтенсивном воздействии гамма-излучения в зависимости от длительности облучения и от накопленной дозы реализуются разные механизмы защиты клеток от облучения.

Работа частично поддержана грантом РФФИ № 09-04-90351.

ВЛИЯНИЕ МАЛЫХ ДОЗ ИОНИЗИРУЮЩЕЙ РАДИАЦИИ НА СОСТОЯНИЕ СИСТЕМЫ КРАСНОЙ КРОВИ Жаворонков Л.П., Семин Ю.А., Изместьева О.С., Катунцев В.П., Посадская В.М., Глушакова В.С., Осипов Ю.Ю., Лузянина А.А.

Медицинский радиологический научный центр РАМН (МРНЦ), Обнинск, Россия, olgaizmestieva@mail.ru В модельных опытах на лабораторных животных (крысы Вистар) реакцию организма на воздействие ионизирующей радиации в суммарной поглощенной дозе до 4, мГр оценивали по следующим тестам: а) устойчивость эритроцитов периферической крови методом кислотных эритрограмм;

б) клеточность костного мозга и его колониеобразующая способность по тесту экзогенных КОЕ-С;

в) состояние ферментативного комплекса антиокислительной системы эритроцитов по активности супероксиддисмутазы (СОД) и каталазы.

Фракционированное воздействие -излучения (4 раза по 4 часа с суточным интервалом, мощность дозы 5 мкГр/мин) на протяжении 15 дней наблюдения вызывало в качественном составе эритроцитов облученных животных значительное и нарастающее со временем физиологическое старение основной массы эритроцитов. На этом фоне регистрировалось повреждение механизмов, поддерживающих постоянство объема фракции зрелых эритроцитов в периферической крови: повышение колониеобразующей способности костного мозга, сочетающееся со снижением гемолитической стойкости молодых эритроцитов. Оценка активности основных компонентов ферментативного комплекса антиоксидантной системы дала дополнительные доказательства функциональной неполноценности в виде десинхронизации функции супероксиддисмутазы и каталазы эритроцитов: активность СОД в пострадиационном периоде падала в три раза. Выявленные нарушения в системе красной крови сохранялись на протяжении 2-х недель с момента окончания облучения, и реакция организма животных при низкодозовом режиме облучения отличалась от таковой при облучении в дозе 3,5 Гр, когда в указанные сроки компенсаторная активация эритропоэза приводила к омоложению основного состава эритроцитов. Полученные нами результаты дополняют ранее опубликованные сведения (Ягунов А.С. и др., 2006) о влиянии низкоинтенсивной радиации (мощность дозы ниже 10 мкГр/с) на эритропоэз и показывают, что при таком воздействии тормозится не только дифференцировка ядросодержащих клеток, но и происходит замедление процесса созревания уже безъядерных эритроцитов.

ВЛИЯНИЕ ПОЛЯ ИОНИЗИРУЮЩЕЙ РАДИАЦИИ МАЛОЙ МОЩНОСТИ НА СТРУКТУРНЫЕ ПЕРЕСТРОЙКИ МЕМБРАН ЭРИТРОЦИТОВ ЧЕЛОВЕКА ПРИ ИХ ВЗАИМОДЕЙСТВИИ С ЛИГАНДАМИ АДРЕНОРЕЦЕПТОРОВ Жирнов В. В.1, Войницкий В.М.2., Хижняк С.В.3, Лапоша Е.А.2, Грубская Л.В. Институт биоорганической химии и нефтехимии Национальной академии наук Украины, Киев;

vic@bpci.kiev.ua.

Национальный университет биоресурсов и природопользования Украины, Киев.

Киевский национальный университет имени Тараса Шевченко, Киев, Украина.

Ранее нами было показано, что реакции форменных элементов крови и сократительная активность сосудов кролика являются на 3-4 порядка более чувствительными к ионизирующей радиации, если регистрировать их в поле излучения, а не эффекты последействия, которые являются основным объектом изучения в современной радиобиологии [Жирнов В.В. и др., 2001 - 2009]. Было установлено, что большинство этих реакций на сверхмалые дозы в поле - и -излучения является обратимыми и не наблюдается развитие оксидативного стресса. На фоне такого облучения изменяются функциональные ответы клеток крови человека на лиганды мембранных сигнальных систем и дзета потенциал плазматических мембран, что косвенно указывает на модификацию их структурного состояния. В данной работе исследовано структурное состояние мембран эритроцитов в поле ионизирующей радиации (-излучение, 14С) малой мощности (1,5 мкГр/ч) при их взаимодействии с лигандами 1-адренорецепторов атенололом и добутамином. Установлено, что в поле ионизирующей радиации наблюдается уменьшение микровязкости липидной компоненты, конформационные изменения белковых молекул, нарушение белок-липидных взаимодействий в тенях эритроцитов, а также модификация изменений структурного состояния мембран эритроцитов, вызываемых лигандами 1-адренорецепторов (микровязкости общей липидной фазы и аннулярных липидов, конформационного состояния мембранных белков, пространственной организации белок-липидных комплексов). Влияние радиационного поля на структурные изменения организации мембран эритроцитов зависят от концентрации лигандов и проявляются только в случае нахождения мембран в поле излучения.

ИЗУЧЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ НЕСТАБИЛЬНОСТИ У ПОТОМСТВА МЫШЕЙ, ОБЛУЧЕННЫХ МАЛЫМИ ДОЗАМИ ПЛОТНОИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ IN VIVО Заичкина С.И., Розанова О.М., 1Смирнова Е.Н., 1Сорокина С.С., 1,2Дюкина А.Р., Романченко С.П., 1Вахрушева О.А., 1Пелешко В.Н.

Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино, Россия;

sv0723@yandex.ru Пущинский Государственный Университет, Пущино, Россия ГНЦ РФ Институт физики высоких энергий, Протвино, Россия Целью настоящей работы являлось изучение генетической нестабильности у потомства мышей, облученных малыми дозами плотноионизирующего излучения in vivо, с помощью микроядерного теста в костном мозге и по скорости роста перевиваемой асцитной карциномы Эрлиха. Облучение мышей линии SHK проводилось круглосуточно в поле излучения за верхней бетонной защитой Серпуховского ускорителя протонов с энергией 70 ГэВ в диапазонах доз 0.17-30 сГр (1 сГр/сут) и 0.5–16 сГр (0.43 сГр/сут).

Исследование генетической нестабильности проводили на мышах F1–F3 поколений от облученных самцов. Было показано, что у трех поколений мышей от облученных самцов при мощности 1 сГр/сут, спонтанный уровень цитогенетических нарушений не отличался от такового у самцов от необлученных родителей;

не было достоверного изменения в радиочувствительности, однако при облучении потомков по схеме АО, как и у родителей, наблюдалось его отсутствие. У самцов F1 и F2 поколений от самцов облученных дозами 0. и 16 сГр (0.43 сГр/сут), спонтанный уровень цитогенетических нарушений был таким же, как у самцов от необлученных родителей. У мышей от самцов облученных дозой 0.5 сГр, в F1 АО отсутствовал, как и у их отцов, но индуцировался во втором поколении. У мышей от самцов, облученных в дозе 16 сГр АО отсутствовал в F1 и F2 поколениях. Однако у потомков F1 и F2 родителей, облученных в дозе 16 сГр в присутствии иммунномодулятора дибазола, восстанавливалась способность к индукции АО. Исследование потомков облученных самцов не выявило изменений по скорости роста опухолей и выживаемости.

Таким образом, было показано, что изменение свойств потомков зависит от дозы и мощности дозы облучения, от обработки родителей иммунномодуляторами и сохраняется, по крайней мере, в трех поколениях. Исходя из этих данных, мы считаем, что для корректной оценки генетической нестабильности in vivo, индуцированной малыми дозами облучения, у потомков животных необходимо исследовать не только уровень спонтанных цитогенетических нарушений, но и генетические эффекты по другим критериям.

РАДИОБИОЛОГИЯ МУТАНТНЫХ ЛИНИЙ DROSOPHILA MELANOGASTER Зайнуллин В.Г.1,2, Юшкова Е.А.1, Каса О.А.1,2, Тырина Д.А. Институт биологии, Коми НЦ, УрО РАН, Сыктывкарский государственный Университет, Сыктывкар, Россия, vzainullin@ib.komisc.ru Простота культивирования, доступность коллекций мутантных линий, хорошая изученность делают дрозофилу удобным объектом в исследовании механизмов действия радиации малых доз и низкой интенсивности. В 1986, 1987 годах нами была проведена оценка уровня генетической изменчивости природных популяций дрозофилы, отловленных в зоне аварии на Чернобыльской атомной станции. Оказалось, что относительно низкие, для дрозофилы, дозы облучения приводят к достоверно значимым повышениям частот рецессивных и доминантных летальных мутаций. В объяснении полученных результатов предполагалась возможность индукции облучением в малых дозах, генетической нестабильности, на фоне которой и регистрировались изменения генотипа. Для анализа механизмов реакции организмов в ответ на облучение в дальнейших экспериментах были использованы мутантные по репарации, контролю клеточного цикла, апоптозу, различающиеся по паттерну мобильных генетических элементов линии дрозофилы.

Было показано, что эффект облучения в малых дозах и низкой интенсивности на выживаемость как имаго, так и отдельных стадий развития дрозофилы, частоту рецессивных и доминантных летальных мутаций, частоту нарушений ДНК в соматических клетках вариабелен и неоднозначен и зависит от генотипа и цитотипа клетки.

АДАПТИВНЫЙ ОТВЕТ НЕ СВЯЗАН С РЕПАРАТИВНОЙ СИСТЕМОЙ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА.

Засухина Г.Д.

Институт общей генетики им. Н.И. Вавилова РАН, Москва, Россия, Zasukhina@vigg.ru Адаптивный ответ (АО) выражается в развитии резистентности к повреждающим дозам мутагенов в ответ на предварительное (3-4 часа) воздействие стрессовых факторов в малых дозах (гамма-радиация, алкилирующие мутагены, тепловой и окислительный стрессы и др.). АО аналогичен неспецифическому ответу клетки на воздействие вирусов, в результате чего образуется интерферон, который, как нами было показано ранее (Засухина Г.Д., 1973-2000), обладает антимутагенными свойствами. Поэтому можно предполагать, что вирусы также могут быть индукторами АО. Исследователи, изучающие АО, полагают, что адаптирующий фактор индуцирует репарацию ДНК, которая и обуславливает развитие устойчивости к повреждающим воздействиям (Ping-Kan Zhou et.al.,2001, Велегжанинов и др.2009 и др.) Так, отсутствие АО при гамма-облучении в клетках синдрома Дауна и атаксии телангиэктазии, дефектных по репарации ДНК (Хандогина, Акифьев и др.,1991), служило главным доказательством связи АО и репарации ДНК. Нами же была высказана гипотеза об отсутствии связи между АО и репарацией ДНК (Засухина и др.,1988-2009), которая нашла подтверждения в дальнейших исследованиях: 1) В некоторых репаративно-дефектных клетках АО формируется на уровне нормальных клеток (синдром Блюма, гомоцистинурия и др.), 2) Предварительная обработка клеток низкими концентрациями тяжелых металлов (CdCI2, NiSO4), индуцирующих нерепарабельные повреждения ДНК, делала клетки устойчивыми как к гамма радиации, так и к высоким концентрациям тяжелых металлов, 3) АО не регистрируется в лимфоцитах людей, проживающих в регионах с повышенным фоном радиации (Пелевина и др.,1994-2000 и др.) по критерию ХА или микроядерному тесту,как и по критерию возникновения разрывов ДНК ((Засухина и др.,1988-2000), несмотря на наличие в ряде случаев репарации ДНК. Однако прямое отсутствие активации генов репарации при воздействии малых доз (до10сГр) было показано в работе Fachin et.al. (2007), в которой продемонстрирована экспрессия ряда генов, но не генов репарации.

РЕДОКС СОСТОЯНИЕ ГЛУТАТИОНА В ПЛАЗМЕ КРОВИ ЖИВОТНЫХ И ЛЮДЕЙ КАК МАРКЕР РИСКА ПРИ ДЕЙСТВИИ РАДИАЦИИ В МАЛЫХ ДОЗАХ.

Иваненко Г.Ф., Бурлакова Е.Б.

Институт биохимической физики им. Н.М.Эмануэля РАН, Москва, Россия, galiv@sky.chph.ras.ru Важная роль в определении устойчивости организма к действию радиации принадлежит природным жиро-и водорастворимым антиоксидантам (АО). Нами установлено, что ионизирующая радиация (ИР) в малых дозах приводит к повышению уровня восстановленного глутатиона(GSH) в плазме крови у отдельных индивидов (детей, рожденных от облученных матерей, и участников ликвидации аварии), получивших суммарные дозы от 0,01cЗв до 150сЗв. Индивиды “контрольной” группы имеют практически одинаковые (525мкмоль/л) уровни GSH и витамина Е в плазме.

Прогноз отдаленных последствий действия радиации в малых дозах указывает на увеличение цитогенетических нарушений у людей, проживающих на загрязненных радионуклидами территориях. Между цитогенетическими показателями (ИРХ-индексом разрыва хроматид в лимфоцитах) и высоким уровнем GSH (биомаркером вреда) в плазме крови наблюдается прямая связь при дозах меньше 25сЗв. Дефицит уровня GSH в плазме создает благоприятные условия для окислительной модификации SH-групп с увеличением дозы радиации (25сЗв150сЗв). Наблюдается обратная зависимость между уровнем GSH в плазме и ИРХ в лимфоцитах крови. Известно, что GSH глутатион принимает участие в восстановлении витамина Е. Дети с высоким уровнем GSH в плазме и низким уровнем витамина Е, и наоборот, формируют группу риска. Возможно, что –токоферол, имеющий высокое сродство к перекисным радикалам, при низких дозах радиации расходуется больше, чем GSH. И глутатион, и витамин Е, накапливаясь в организме, при действии никоинтенсивной ИР проявляют прооксидантные свойства. В модельных экспериментах на животных, нами обнаружено двукратное снижение GSH в плазме при облучении мышей линии C57/Bl в дозе 40сГр и двукратное увеличению GSH при облучении мышей линии F1(CBAC57/Bl) в дозе 1,2 сГр. При развитии карциноидной опухоли уровень GSH (172±8мкмоль/л) в плазме мышей линии F1, в три раза выше, чем в контроле (56±6мкмоль/л). Повышение уровня указанных маркеров может означать увеличение вероятности возникновения злокачественной опухоли у животных и человека в отдаленные сроки после действия ИР в малой дозе.

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РЕАКЦИИ РАЗЛИЧНЫХ ЗОН КОРЫ ГОЛОВНОГО МОЗГА КРЫС ПРИ ДЕЙСТВИИ РАДИАЦИИ В МАЛОЙ ДОЗЕ Ильичева В.Н.

Воронежская государственная медицинская академия Н.Н. Бурденко, Воронеж, Россия, moja-muza @yandex.ru Несмотря на условия жесткого соблюдения правил техники безопасности, использовании ядерной энергии, иногда сопровождается риском облучения персонала и населения, особенно в неконтролируемых аварийных условиях. В проблеме радиационной безопасности вопросы, связанные с психофизиологической оценкой работы операторов в штатных и аварийных условиях, занимают одно из важных мест, что обусловливает необходимость изучения влияния ионизирующих излучений на функции центральной нервной системы (ЦНС). Исходными показателями, определяющими работоспособность людей, следует, по-видимому, считать их физическое и психическое состояние.

В представленной работе приводятся результаты исследования после облучения в дозе 0,5 Зв. на древнюю, старую и новую зоны коры головного мозга. Эксперименту подвергались крысы – самцы весом 170 – 200 г. Идентификация активности дегидрогиназ проводилась по стандартным методикам. Величину активности ферментов определяли по величине оптической плотности с помощью программы « Видео – Тест - Морфо», разработанной ООО ИСТА Видео – Тест (город Санкт – Петербург). Количественные данные обрабатывались статистически с помощью пакета программ – статистика.

Наблюдая динамику изменений в различных отделах коры можно проследить некоторую закономерность. В течение 5 часов после воздействия во всех зонах коры увеличивается активность лактатдегидрогиназы (ЛДГ) и глюкозо – 6 – фосфатдегидрогиназы (Г – 6 – ФДГ) при снижении сукцинатдегидрогиназы (СДГ).

Причем в более старых филогенетическом отношении зонах коры (старая и древняя) эти процессы более сглажены, чем в новой коре. К первым суткам наблюдается «спад» всех изучаемых ферментов, более выраженный в новой коре, далее идет значительное увеличение активности анаэробных ферментов (третьи сутки) и стабилизация процессов к 7 суткам (преобладание СДГ над Г – 6 – ФДГ и ЛДГ).

Таким образом, можно говорить о тенденции к более ранней компенсаторной реакции в древних отделах коры и отсроченной – в новых.

К ВОПРОСУ О МЕХАНИЗМАХ ДЕЙСТВИЯ МАЛЫХ ДОЗ ИОНИЗИРУЮЩИХ ИЗЛУЧЕНИЙ.

Комова О.В., Мельникова Л.А., Насонова Е.А., Фадеева Т.А., Шмакова Н.Л.

Объединенный институт ядерных исследований, Дубна, Россия, komova@jinr.ru В работе представлены результаты изучения цитогенетических нарушений хромосомного аппарата клеток карциномы молочной железы и лимфоцитов крови человека при действии малых доз ионизирующих излучений, а также процессов, лежащих в основе таких нарушений. Различными цитогенетическими методами было установлено, что при дозах свыше 30 сГр выход повреждений линейно зависит от дозы, что находится в полном соответствии с общепринятой концепцией классической радиобиологии. В области меньших доз эта зависимость имеет сложный нелинейный характер. На начальном участке дозовой кривой выявлена аномально высокая радиочувствительность клеток, после которого следует участок повышенной радиорезистентности, где выход хромосомных аберраций имеет, фактически, обратную зависимость от дозы. Было также установлено, что в области гиперчувствительности основным типом повреждений хромосом в G0- лимфоцитах человека являются аберрации хроматидного типа.

Многочисленные литературные данные указывают на существенную роль эндогенных активных форм кислорода (АФК), в частности, митохондриального происхождения, в эффектах малых доз радиации. В связи с этим мы предприняли попытку оценить вклад этих радикалов в наблюдаемое нами явление гиперчувствительности-повышенной радиорезистентности (ГЧ/ПРР), используя модификаторы, воздействующие на АФК и митохондриальную дыхательную цепь, а также на активацию одного из сигнальных цитопротекторных каскадов, приводящих к активации ERK-протеинкиназы.

Было установлено, что 1) АФК являются основными медиаторами в индукции ГЧ в области малых доз радиации;

2) эти АФК генерируются в дыхательной цепи митохондрий;

3) активация ERK-протеинкиназы ответственна за индукцию радиорезистентности и необходима, очевидно, для защиты клетки от окислительного стресса, обусловленного повышением уровня эндогенных АФК при действии малых доз гамма-излучения.

ПРЯМЫЕ И ЗАДЕРЖАННЫЕ ЭФФЕКТЫ НИЗКИХ ДОЗ БЕТА - ИЗЛУЧЕНИЯ В КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК МЛЕКОПИТАЮЩИХ Коневега Л.В., Гильяно Н.Я., Носкин Л.А.

Петербургский институт ядерной физики им.Б.П.Константинова, Гатчина, Россия.

konevega@omrb.pnpi.spb.ru Известно, что индуцированная ионизирующим излучением (ИИ) нестабильность генома проявляется не только в популяции облученных клеток, но и в их потомстве.

Репарация повреждений ДНК играет существенную роль в процессе выживания потомков облученных клеток. Считается, что окислительный стресс также принимает участие в этом процессе. Показано, что (ИИ) индуцирует свободнорадикальную патологию, которая определяется не только продуктами радиолиза воды, но и вторичными радикалами, продуцируемыми в клетке энзиматически, такими как оксид азота (NO) и супероксид (2) и их производными. Целью данной работы было исследование влияния низких доз бета излучения на изменение внутриклеточного баланса свободных радикалов и изучение динамики этого процесса в потомках облученных клеток. Работа выполнялась на двух линиях клеток человека: эндотелиоциты, линия ECV 304 и клетки карциномы, линия HeLa G-63. На проточном цитометре проводилась прижизненная оценка внутриклеточного уровня свободных радикалов с использованием флюоресцентных индикаторов:

супероксида – дигидроэтидина;

NO – DAF 2 DA. Проведен сравнительный анализ изменения уровней NO и 2 после обработки клеток агентами, индуцирующими их (3Н генерацию -частицы) и ингибирующими этот процесс: L-NAME, аминогуанидин(AG). Показано дозо-зависимое увеличение уровня NO и снижение уровня 2 сразу после инкубации клеток с источниками бета-частиц (3Н-тимидин и 3Н2О). При этом изменение уровня NO и супероксида зависело от сроков фиксации. Так, уровень супероксида через 3 часа после облучения клеток HeLa возвращается к контрольному значению, но через 24 часа и в течение последующих 5-ти клеточных генераций он был существенно выше контрольного. Увеличенная продукция 2 в потомках облученных клеток свидетельствует о том, что окислительный стресс является отдаленным последствием действия ИИ. Динамика изменения внутриклеточного уровня NO и после ингибирования активности NO-синтазы AG и L-NAME показала снижение внутриклеточного уровня как NO, так и супероксида. Однако, через 7 часов после удаления ингибиторов из инкубационной среды уровень NO возвращался к контрольному значению, а уровень супероксида превышал контрольное значение, не только через 7, 12, 24 часа, но и в течение исследованных нами 5-ти клеточных генераций. Очевидно, что, нарушение свободно-радикального баланса в клетке происходит не только при активации, но и при ингибировании продукции свободных радикалов.

БИОЛОГИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ МЫШЕЙ ЛИНИИ AF И ИХ ПОТОМСТВА ПРИ ЭКСПОЗИЦИИ В ЗОНЕ ОТЧУЖДЕНИЯ ЧАЭС Конопля Е.Ф., Маленченко А. Ф., Сушко С. Н., Савин А. О., Кадукова Е. М.

Институт радиобиологии НАН Беларуси, Гомель, Республика Беларусь irb@mail.gomel.by Оценка биологического действия малых доз ионизирующего излучения имеет важное теоретическое и практическое значение. Это вызвано, прежде всего, тем, что после ряда серьезных аварийных ситуаций на ядерных установках от научного сообщества требуется оперативная оценка и точное предсказание последствий для населения, потерпевшего от аварийного облучения, для организации государственными органами адекватных противоаварийных мероприятий.

Дана комплексная оценка состояния мышей линии Af при их экспозиции в условиях зоны отчуждения ЧАЭС (р.т. Масаны) в течение 1–5 месяцев, а также их потомства, включая анализ частоты полихроматофильных эритроцитов (ПХЭ) красного костного мозга с микроядрами (МЯ), индукцию опухолей в легких и рост опухолей – асцитная карцинома Эрлиха (АКЭ) и др. Контролем служили животные аналогичного возраста, размещенные на виварии г. Минска.

Полученные в ходе исследований данные свидетельствует, что экспозиция лабораторных животных в зоне отчуждения ЧАЭС повышает процессы мутагенеза (микроядра в полихроматофильных эритроцитах красного костного мозга) и канцерогенеза (количество аденом легких на мышь), а также изменяет реакцию организма на стандартизированное действие химического канцерогена.

Исследования изменения противоопухолевой резистентности мышей линии Af при экспонировании в зоне отчуждения ЧАЭС в течение 5 месяцев отмечено снижение выживаемости мышей с опухолями, возникшими при подкожном введении асцитной аденокарциномы Эрлиха, по сравнению с аналогичным показателем мышей вивария. Рост опухоли в ранние сроки после прививки происходил более интенсивно у мышей, предварительно экспонированных в зоне отчуждения ЧАЭС.

Работа сделана в рамках совместного трехстороннего межрегионального конкурса в приграничных Гомельской, Брянской и Черниговской областях на проведение фундаментальных исследований по научным проблемам последствий Чернобыльской катастрофы «БРФФИ – РФФИ – ГФФИУ - 2009»

БИОЛОГИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ В РАДИОЧУВСТВИТЕЛЬНЫХ СИСТЕМАХ ОРГАНИЗМА КРЫС-САМЦОВ, ЭКСПОНИРОВАННЫХ ДЛИТЕЛЬНОЕ ВРЕМЯ В ЗОНЕ ОТЧУЖДЕНИЯ ЧАЭС В РЯДУ ПОКОЛЕНИЙ Конопля Е.Ф., Горох Г.А., Федосенко О.Л., Гунькова Н.В., Якушев Д.Л., Верещако Г.Г.

Институт радиобиологии НАН Беларуси, Гомель, Беларусь, irb@mail.gomel.by Изучали морфофункциональное состояние кроветворной, репродуктивной и эндокринной систем крыс-самцов в ряду поколений после их длительного пребывания в зоне отчуждения ЧАЭС (р.т. Масаны, ПГРЭЗ).

У животных (F0), которые, начиная с неполовозрелого возраста (2 мес), находились в зоне отчуждения ЧАЭС двухмесячное пребывания в условиях радиоактивного загрязнения вызывало отклонения некоторых показателей крови и репродуктивной системы. Было отмечено снижение содержания тироксина и повышение уровня тестостерона в сыворотке крови. Потомство I поколения (F1), полученное в условиях вивария от животных F0, которые 4 мес содержались в р.т. Масаны характеризуется умеренными изменениями в эндокринной (тенденция к снижению тироксина, низкая концентрация кортикостерона) и репродуктивной системах.

Наиболее значительные изменения морфофункционального состояния животных наблюдаются во II поколении животных (F2, получено от I поколения), которые находились в условиях радиоактивного загрязнения. После 2 месячного пребывания этих животных в ПГРЭЗ у них выявляется повышенное количество лейкоцитов, нейтрофилов, лимфоцитов и, особенно, моноцитов при снижении количества эритроцитов и содержания гемоглобина. В этот же срок отмечено истощение функции щитовидной железы и коркового слоя надпочечников, при повышении относительной массы семенников и их придатков и снижении числа сперматоцитов и сперматозоидов в ткани семенника. К концу пребывания животных F2 в зоне отчуждения (4 мес) у них сохраняются некоторые изменения показателей клеток белой и красной крови, массовые индексы семенников и эпидидимисов превышают контрольные показатели в среднем на 25%, в тестикулярной ткани увеличено число сперматогенных клеток (сперматогоний и сперматид), а содержание кортикостерона и тестостерона уменьшено на 52% и 45,8%.

Выявленные нарушения в морфофункциональном состоянии исследуемых систем указывают на неблагоприятный прогноз в отношении состояния животных ряд поколений, содержавшихся длительное время в условиях радиоактивного загрязнения.

ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ НА ПРОСТЕЙШИЕ ОРГАНИЗМЫ НА ПРИМЕРЕ СВЕТЯЩИХСЯ БАКТЕРИЙ Кудряшева Н.С., Рожко Т.В., Александрова М.А., Васюнькина Е.В.

Институт биофизики СО РАН, Красноярск, Россия, n_qdr@yahoo.com Сибирский Федеральный Университет, Красноярск, Россия, Морские светящиеся бактерии и их ферментативные реакции уже несколько десятилетий используются в качестве биотестовых систем для мониторинга токсичности различных сред. В этих системах в качестве тестовой физиологической функции используется интенсивность их свечения. Светящиеся бактерии являются удобными объектами для изучения механизмов воздействия радиации на организмы.

Исследовано хроническое воздействие на бактерии и их ферментативные реакции альфа-излучающих нуклидов (Am-241, U-235+238) и бета-излучающего нуклида – трития.

Выявлен рост свечения до 400% на начальном этапе воздействия Am-241 (радионуклида высокой уд. активности) и ингибирование свечения – на конечном этапе. Эффект проявлялся при низких концентрациях (10-11М, 100 Бк/л). Эффект урана (радионуклида низкой уд. активности) был сходен с эффектами стабильных тяжелых металлов (Eu, Fe):

наблюдалось только ингибирование свечения при более высоких концентрациях металлов (10-7М). Т.о., радиационная токсичность, в отличие от химической, проявляется при низких концентрациях металлов и характеризуется эффективной активаций на начальном этапе воздействия.

Присутствие трития увеличивало свечение бактерий и их ферментативных реакций при всех исследуемых активностях растворов.

Т.к. в качестве вторичных продуктов радиоактивного распада в водных средах могут образовываться перекисные соединения, рассмотрена их роль при изменении свечения бактерий в растворах радионуклидов. С помощью люминольного метода показано, что содержание перекисей в растворах Am-241 превышает фоновое, а в растворах урана и трития – нет. Выявлены сходства в кинетике свечения в присутствии перекиси водорода и Am-241 – наличие периодов активации и ингибирования свечения бактерий и их ферментативных реакций. Т.о., перекисные соединения, вероятно, вносят вклад в воздействие америция на свечение бактерий. Отсутствие перекисей в тритий-содержащих растворах указывает на то, что вклад в активацию свечения бактерий могут вносить и другие процессы, увеличивающие ионизацию среды.

ПОВРЕЖДЕННОСТЬ ГЕНОМА И ПРОДУКЦИЯ АКТИВНЫХ ФОРМ КИСЛОРОДА В ПОКОЛЕНИЯХ ОБЛУЧЕННЫХ КЛЕТОК ЛИНИИ СНО-К Лизунова Е.Ю., Воробьева Н.Ю., Гурьев Д.В.*, Зуборева О.В., Анчишкина Н.А, Осипов А.Н.

Институт химической физики им. Н.Н. Семенова РАН, Москва, Россия;

charlik_dog@mail.ru *Институт биологии Коми научного Центра Уральского отделении РАН, Сыктывкар Целью настоящей работы было изучение отдаленных последствий радиационного воздействия в поколениях облученных клеток яичника китайского хомяка линии СНО-К1.

Было показано, что в поколениях клеток, облученных в дозе 1 Гр, наблюдаются следующие эффекты: на 7-21-е сутки (9-31-е поколения) – увеличение поврежденности генома, обусловленной одно- и двунитевыми разрывами ДНК, внутриклеточной продукции активных форм кислорода, а также чувствительности клеток к дополнительному воздействию (облучение, перекись водорода);

на 23-28-е сутки (30- поколения) – «нормализация» изученных показателей до контрольных значений;

причем, в этих (30-42) поколениях потомки облученных клеток становятся более устойчивыми к дополнительному облучению.

Повышенная продукция активных форм кислорода в потомках облученных клеток свидетельствует о том, что в индукции радиационно индуцированной нестабильности важную роль играет дисфункция митохондрий. Можно высказать два предположения о причинах «нормализации» изученных показателей до контрольных значений в 30-42-м пострадиационных поколениях клеток. Это может быть переход нестабильности генома в скрытое (латентное) состояние, либо это – завершение селекционного процесса элиминации клеток с нестабильным геномом, чувствительных к оксидативному стрессу. На основании полученных результатов была выдвинута гипотеза о том, что нестабильность генома может создавать условия для функционирования селективного механизма, обеспечивающего формирование радиорезистентных клеточных клонов путем элиминации клеток с нестабильным геномом, чувствительных к оксидативному стрессу. Работа выполнялась при поддержке гранта РФФИ № 07-04 01009-а.

УЛЬТРАСТРУКТУРА ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ В ОТДАЛЕННЫЙ ПЕРИОД ПОСЛЕ ОБЩЕГО И ЧАСТИЧНОГО ОБЛУЧЕНИЯ КРЫС В МАЛОЙ ДОЗЕ Лукашова О.П.

Институт медицинской радиологии им. С.П.Григорьева Академии медицинских наук Украины, Харьков, Украина, imr@online.kharkiv.com.

Известно, что у лиц, пострадавших вследствие аварии на ЧАЭС, выявляется гипотиреоз, сохраняющийся в течение длительного времени, что подтверждается экспериментальными исследованиями уровня гормонов щитовидной железы (ЩЖ) и ее морфологического состояния. Поскольку ЩЖ достаточно устойчива к действию радиации, его причину следует искать в поражении органов высшей эндокринной регуляции, находящихся в головном мозге.

В связи с этим и было предпринято настоящее исследование, в котором изучали структурно-функциональное состояние ЩЖ через 6 месяцев после частичного фракционированного стандартного рентгеновского облучения крыс линии Вистар в суммарной дозе 0,75 Гр с помощью общепринятых методов электронной микроскопии в следующих сериях: 1 - общее облучение;

2 - облучение только головы;

3 - облучение только тела;

4 - интактные животные соответствующего возраста.

Установлено, что после общего облучения среди фолликулов ЩЖ, нормального строения, обнаруживаются формы, образованные тиреоцитами (ТЦ), имеющими значительные изменения ультраструктуры, которые свидетельствуют о снижении их функциональной активности. Характерным для последних является темное ядро часто искаженной формы с расширенным перинуклеарным пространством и вакуолизированная цитоплазма, придающая ТЦ «ажурный» вид. Выявляются также разрушенные фолликулы с фрагментами клеток в коллоиде, поля «ажурных» ТЦ. Подобные же нарушения наблюдаются при облучении только головы экспериментальных животных, тогда как при облучении только тела ультраструктура ЩЖ соответствует возрастной норме.

Таким образом, проведенные исследования показали, что нарушения структурно функционального состояния ТЦ не являются результатом прямого действия радиации на ЩЖ. Очевидно, облучение головы может повреждать какие-то участки головного мозга, ответственные за эндокринную регуляцию. Обсуждается возможное участие в описанных процессах таких органов, как гипофиз, гипоталамус и эпифиз.

ВЛИЯНИЕ МАЛЫХ ДОЗ РАДИАЦИИ НА ПОВЕРХНОСТНУЮ АРХИТЕКТОНИКУ ЭРИТРОЦИТОВ Лунева О.Г.*, Гендель Л.Я. ** *МГУ им. М.В. Ломоносова, Биологический факультет, Москва, Россия, oluneva@yandex.ru;

**Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН, Москва, Россия, lgendel@yandex.ru С использованием метода сканирующей электронной микроскопии изучено влияние на морфологию эритроцитов из крови мышей трех доз (1,2;

1,8 и 5,4 сГр) однократного -облучения животных. В случае доз 1,2 и 1,8 сГр не выявлено существенных изменений соотношений морфологических форм в опытных и контрольных образцах.

Значительное уменьшение содержания дискоцитов и соответствующее увеличение содержания эхиноцитов обнаружены в эритроцитах, выделенных из крови животных, облученных в дозе 5,4 сГр. Переход части эритроцитов из нормальной дискоидной формы в эхиноциты, по-видимому, отражает индуцируемые действием радиации структурные перестройки эритроцитарной мембраны.

Обнаруженные трансформации поверхностной архитектоники и формы эритроцитов могут быть связаны с нарушениями соотношений площадей наружнего и внутреннего монослоев липидного бислоя эритроцитарной мембраны. Определенный вклад в наблюдаемые трансформации могут так же вносить изменения цитоскелета эритроцитов. Из полученных данных следует, что малые дозы радиации способны модифицировать нормальную форму эритроцитов и нарушать, тем самым, функциональную активность этих клеток.

ЭКОЛОГО-ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ТРАВЯНИСТЫХ РАСТЕНИЙ В ЗОНЕ ВОСТОЧНО-УРАЛЬСКОГО РАДИОАКТИВНОГО СЛЕДА Позолотина В.Н., Антонова Е.В., Каримуллина Е.М.

Институт экологии растений и животных УрО РАН, Екатеринбург, Россия pozolotina@ipae.uran.ru Территория Восточно-Уральского радиоактивного следа (ВУРСа), образовавшегося в 1957 г. в результате аварии на предприятии «Маяк», представляет собой уникальный природный полигон, на котором популяции растений подвергаются действию ионизирующих излучений более 50 лет. Дозовые нагрузки снизились со временем, но и сейчас в головной части ВУРСа поглощенные дозы для растений превышают фоновый уровень на 3 порядка величин (Позолотина и др., 2008). Наиболее важным условием стабильного существования ценопопуляций как в пространстве, так и во времени считается полноценное воспроизводство, этот процесс очень чувствителен, поэтому семенное потомство растений является удобным объектом для изучения влияния хронического облучения. В работе приведены данные рекогносцировочных исследований по оценке жизнеспособности, мутабильности и радиоустойчивости семенного потомства 12 видов растений, широко распространенных в головной части ВУРСа. Детально с использованием комплекса экологических и генетических подходов изучены три модельных вида: одуванчик лекарственный, подорожник большой, звездчатка злаковая.

Экологическая характеристика свидетельствует о расширении диапазона межгодовой и индивидуальной изменчивости показателей жизнеспособности семенного потомства в ценопопуляциях, подверженных облучению. В выборках из зоны ВУРСа повышены частоты встречаемости морфологических аномалий. Оценка радиоустойчивости показала, что форма кривой доза-эффект часто уклоняется от классической S-образной.

Стабильного эффекта радиоадаптации не выявлено.

Изменчивость аллозимной структуры ценопопуляций позволяет судить о генетических изменениях. Так, у одуванчика в ценопопуляциях ВУРСа обнаружена высокая доля редких морф для большинства ферментов, и в целом разнообразие ферментных систем было выше, чем в фоновых выборках. У звездчатки в ценопопуляциях ВУРСа отмечены признаки дизруптивного отбора по локусам Fdh и Pgi-2. В ценопопуляциях подорожника определенной связи частот аллелей с уровнем радиоактивного загрязнения не прослеживается.

ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ МАЛЫХ ДОЗ И МОЩНОСТЕЙ ДОЗ ПРИ -ОБЛУЧЕНИИ ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА IN VITRO Севанькаев А.В., Хвостунов И.К., Потетня В.И.

Учреждение Российской Академии Медицинских Наук Медицинский Радиологический Научный Центр, Обнинск, Россия 726727@mrrc.obninsk.ru Изучены закономерности выхода аберраций хромосом в культуре лимфоцитов крови человека при воздействии низких доз (30-500 мГр) и мощностей доз (0.5, 5 и 50 мГр/мин) -излучения Со. Исследование выполнено на образцах периферической крови донора женского пола в возрасте 42 лет. Применялся стандартный метафазный метод анализа аберраций хромосом с культивированием лимфоцитов в течение 48 ч и окраской препаратов по Гимза. На каждую точку дозовых кривых анализировали преимущественно по 2000 метафаз, в контроле - 4000 метафаз. Всего было проанализировано 57 500 метафаз. Облучение образцов крови in vitro проводили при комнатной температуре на -установке «Луч-1» с источником 60Co. Мощности дозы (МД) 0.5 и 5 мГр/мин получали ослаблением пучка -квантов слоем свинца в барьерной геометрии. МД в точках размещения образцов измеряли клиническим дозиметром 27012 с ионизационной камерой VA-K-253 и термолюминесцентными дозиметрами TLD-100 (LiF) в условиях электронного равновесия и рассчитывали методом Монте Карло для оценки действующего -спектра. Результаты определения МД тремя методами совпадали в пределах взаимной погрешности, не превышая 13% при всех дозах.

Обнаружено, что низкие дозы (менее 200 мГр) –облучения Co индуцируют сравнительно больше аберраций хромосом, чем ожидается при экстраполяции линейно квадратичной зависимости из области высоких доз (более 500 мГр). Выявленный эффект слабо зависит от мощности дозы в диапазоне 0.5 – 50 мГр/мин. В области низких доз обнаружен нелинейный эффект, проявляющийся в наличии на дозовой зависимости выхода аберраций плато в диапазоне доз 50-250 мГр, аналогично нашим результатам года. В настоящей работе эффект плато выявлен и для существенно меньших мощностей дозы, чем ранее.

«ЭФФЕКТ СВИДЕТЕЛЯ» У МЫШЕЙ С РАЗЛИЧНЫМ УРОВНЕМ ГЕНЕТИЧЕСКИ ДЕТЕРМИНИРОВАННОЙ РАДИОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ В СВЯЗИ С ОСТРЫМ И ХРОНИЧЕСКИМ ВОЗДЕЙСТВИЕМ - И -ИЗЛУЧЕНИЙ ОТ ГОРЯЧИХ ЧАСТИЦ ЯДЕРНОГО ТОПЛИВА 4-ГО ЭНЕРГОБЛОКА ЧАЭС Сенюк О.Ф., ЖидковА.В,Чемерский Г.Ф., Ковалев В.А, Круль Н.И.

Институт проблем безопасности атомных электростанций Национальной академии наук Украины, Чернобыль, Украина, olga.seniuk@yahoo.com.

Известно, что определенная часть клеток, подвергнутых воздействию ионизирующих излучений (ИИ), в частности - и -видов (ОК), может вызывать «лучевые» поражения («эффект свидетеля», ЭфСв) в необлученных клетках-соседях (НОК) как минимум двумя независимыми способами – посредством продуцируемых в среду жизнедеятельности ОК активных форм кислорода и азота, цитокинов, клеточных токсинов, и – через тесные межклеточные контакты.

Цель работы — сравнительное изучение ЭфСв у клеток разных видов, полученных от мышей с различным уровнем генетически детерминированной радио-чувствительности (Balb/c – ЛД 50/30 5,85 Зв, и C57Bl/6 – ЛД 50/30 6,7Зв), которые были подвергнуты острому и хроническому воздействию смешанных - и - излучений от высокодиспергированных горячих частиц (ГЧ) ядерного топлива 4-го энергоблока ЧАЭС (137Сs - 97 % и 3 % - другие радионуклиды).

Самок мышей в возрасте от 4 до 6 месяцев экспонировали на равномерно расположенных под клетками ГЧ с достижением общей дозы облучения ~ 5 Зв за 16 часов и ~ 1,5 мл Зв за 1,5 года. Изучали способность разных видов клеток (крови, селезенки, печени, глии мозга и костного мозга), полученных от облученных мышей, вызывать увеличение уровней однонитевых разрывов ДНК (ОНР ДНК) в таких же клетках необлученных животных при помощи внесения флюоресцентного красителя пикогрин в момент раскручивания двойной спирали ДНК для определения скорости ее расщепления (Fluoroskan Tecan, Austria). Влияние ОК на НОК изучали, помещая НОК на три часа в среду культивирования ОК. Во всех случаях выявили разновыраженный эффект увеличения количества ОНР ДНК в НОК после их выдержки в культуральной среде ОК.

Эффект был менее выражен и быстрее исчезал после острой экспозиции у клеток, полученных от более радиорезистентных мышей (C57Bl/6). Одновременно у среды культивирования НОК была выявлена тенденция к снижению уровня ОНР ДНК в ОК.

ОБ ОДНОЙ ОСОБЕННОСТИ РАСПРЕДЕЛЕНИЙ ИНДИВИДУУМОВ ПО ЧАСТОТЕ ЛИМФОЦИТОВ С МИКРОЯДРАМИ Серебряный1 А.М., Аклеев2А.В., Алещенко1А.В., Антощина3 М.М., Кудряшова4О.В., Рябченко3 Н.И., Семенова1 Л.П., Пелевина4 И.И.

Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН, Москва. Россия.

Уральский научно-практический центр радиационной медицины. Челябинск. Россия.

Медицинский радиологический научный центр РАМН, Обнинск. Россия.

Институт химической физики им. Н.Н. Семенова РАН, Москва. Россия.

amserebr@sky.chph.ras.ru С помощью микроядерного теста в сочетании с цитокинетическим блоком цитохалазином В измерена спонтанная частота лимфоцитов периферической крови с микроядрами (МЯ) у 76 жителей Москвы, 35 жителей Обнинска и 122 жителей Челябинской области. Проанализирован характер распределения индивидуумов по спонтанной частоте лимфоцитов с МЯ. Установлено, что распределение в массивах жителей Москвы и Челябинской области можно признать лог-нормальным, но нельзя признать ни пуассоновским, ни биномиальным, ни нормальным. Распределение жителей г. Обнинска также можно признать лог-нормальным (2 тест, р=0.62). Одновременно его можно признать и нормальным, но со значительно меньшим уровнем значимости, равным 0.13. Распределение индивидуумов в едином массиве всех обследованных в этой работе следует признать лог-нормальным с уровнем значимости – 0.86 и его нельзя признать ни нормальным, ни пуассоновским, ни биномиальным. Лог-нормальный характер распределения по спонтанной частоте лимфоцитов с МЯ наблюдался нами и раньше, при обследовании 473 детей из различных детских садов г. Москвы. Сделан вывод, что такое распределение индивидуумов по спонтанной частоте лимфоцитов с МЯ является закономерностью, присущей этому показателю поврежденности генома. Напротив, распределение индивидуумов по индуцированной облучением частоте лимфоцитов с МЯ принципиально отличается от спонтанного и в большинстве случаев его можно признать нормальным. Авторы полагают, что характер распределения указывает, что появление у индивидуума нестабильности генома в каком либо одном лимфоците, увеличивает вероятность появления нестабильности в других лимфоцитах. Предполагается, что поврежденная стволовая клетка обменивается информацией с неповрежденными (эффект свидетеля). Возможна также передача повреждения дочерним клеткам при делении стволовых клеток.

ВЛИЯНИЕ МАЛЫХ ДОЗ РАДИАЦИИ НИЗКОЙ ИНТЕНСИВНОСТИ НА СИСТЕМУ ГЕМОСТАЗА Старосельская А.Н., Романовская В.Н., Жаворонков Л.П.

Медицинский радиологический научный центр РАМН, Обнинск, Россия В последнее время большое внимание уделяется изучению малых доз радиации, так как известно, что ионизирующее излучение является одним из индукторов оксидантного стресса, при воздействии которого генерируются свободные радикалы, ведущие к нарушению гомеостаза.

Целью исследования явилось изучение влияния малых доз радиации низкой интенсивности (2,4 мГр и 4,8 мГр) на состояние системы гемостаза.

Опыты проведены на 40 крысах Вистар массой 140-180 г, которых подвергали внешнему -облучению на установке «Эксперимент» панорамного типа с источником Сs 137.

Животных облучали по 4,5 часа в день (при дозе 2,4 мГр - 2 дня, а при дозе 4,8 мГр – дня). Кровь для исследования брали из брюшной аорты под нембуталовым наркозом ( мг/кг), стабилизируя ее 3,8 % раствором лимоннокислого натрия в отношении 1:9. Все использованные методы определения показателей системы гемостаза выполняли в соответствии с описанием В.П. Балуды и соавт. (1980).

Установлено, что дозы 2,4 мГр и 4,8 мГр вызывают нарушение образования протромбиназы (второй фазы свертывания крови). Протромбиновое время составляло соответственно 19,7±0,3 с и 20,1 ± 0,6 с по сравнению с контролем 16,8+0,1 с (р 0,05).

Тромбиновое время было укорочено 14,3±0,2 с и 13,8±0,4 с по отношению к контролю 14,9±0,1 с ( р 0,05). Наблюдалось потребление фибриногена 1,27±0,04 г/л и 1,26±0,06 г/л в сравнении с контролем 1,38±0,01 г/л (р 0,05) и укорочение времени фибринолиза.

Активированное частичное тромбопластиновое время при дозе 2,4 мГр находилось в пределах нормы, а при дозе 4,8 мГр наблюдалось его укорочение 29,0±0,6 с по отношению к контролю 31,9±0,6 с (р 0,05), что свидетельствует об активации процесса свертывания.

АДФ-индуцированная агрегация тромбоцитов была снижена. При поглощенной дозе 4, мГр выявлено незначительное повышение продуктов деградации фибриногена.

Таким образом в системе гемостаза после воздействия даже малых поглощенных доз -облучения выявлены сдвиги, характерные для хронического ДВС-синдрома, который может вызывать микроциркуляторные нарушения и способствовать развитию склеротических изменений органов-мишеней.

МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ФОРМИРОВАНИЯ ОТДАЛЕННЫХ ПОСЛЕДСТВИЙ ОБЛУЧЕНИЯ (КЛИНИКО-ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ) Талько В.В., Коваленко А.Н., Минченко Ж.Н., Овсянникова Л.М., Дереввянко Л.П., Атаманюк Н.П., Островская С.С., Дмитрук С.Н., Диденко Н.В.

ГУ ”Научный центр радиационной медицины АМН Украины”, Киев, Украина, talko1950@gmail.com Результаты 23-летнего наблюдения за состоянием липидно-липопротеинового метаболизма, окислительного-антиокислительного гомеостаза у лиц, облученных в широком диапазоне доз вследствие аварии на ЧАЭС, а также данные экспериментального исследования подтверждают положение относительно ведущей роли активации перекисного окисления липидов (ПОЛ) в патогенезе реакций организма на действие стрессорных факторов. Патогенетические механизмы, которые запускаются непосредственно в острый период облучения, продолжают свою функцию при поддержке комплекса негативных факторов (экологических, психоэмоциальных и др.) на фоне снижения резервных возможностей регуляторных систем организма. Активация ПОЛ, обусловленная, состоянием хронического стресса, истощение антиоксидантной защиты способствуют утяжелению патологических процессов, обусловленных непосредственно радиационным фактором. Развитие дезадаптоза в отдаленном периоде после облучения реализуется в патологии сердечно-сосудистой, пищеварительной, эндокринной системы, ускорении возрастной инволюции, сокращении продолжительности жизни.

Как в клинических, так и в экспериментальных исследованиях выявлены закономерности формирования отдаленных последствий облучения в регуляторных системах организма (эндокринной, иммунной), а также сердечно-сосудистой и женской репродуктивной системе путем изучения липидно-липопротеинового метаболизма, окислительного-антиокислительного гомеостаза с учетом иммуно-фенотипических особенностей и гормонального статуса организма, а также морфологии и ультраструктуры органов эндокринной и сердечно-сосудистой системы (в эксперименте).

Выявление закономерностей изменений окислительного гомеостаза и состояния антиоксидантной системы позволяет выбрать патогенетически обусловленную тактику применения соответствующих антиоксидантных способов профилактики и терапии.

Учитывая, что активация ПОЛ является необходимым звеном механизма повреждающего действия, использование препаратов, способных противостоять стрессорной активации ПОЛ, является способом профилактики и терапии стрессорных поражений радиационной и нерадиационной природы.

АДАПТИРУЮЩИЙ ЭФФЕКТ ПРОЛОНГИРОВАННОГО ОБЛУЧЕНИЯ В ЭКСПЕРИМЕНТАХ С TRADESCANTIA (КЛОН 02) Хомиченко А.А. 1, Зайнуллин В.Г. 1, Институт биологии, Коми НЦ УрО РАН, Сыктывкарский государственный Университет, Сыктывкар, Россия Одним из последствий облучения в малых дозах является индукция механизмов, приводящих к адаптации. Для выявления характера состояний, индуцируемых пролонгированным облучением в малых дозах, был проведен эксперимент с использованием острого провокационного облучения. Срезы соцветий Tradescantia (клон 02) были облучены в дозах от 0.4 до 23 сГр (Ra-226), время облучения 20 час.

Дополнительное, провокационного облучения в дозе- 150 сГр (Со-60) проводили через час после прекращения пролонгированного облучения. В эксперименте использовали соцветия возрастом 3-4 мес.

В ряде вариантов наблюдали образование большого числа цветков, непригодных для учета количества волосков тычиночных нитей и частоты розовых соматических мутаций - основных показателей данной тест-системы. К ним относились цветки с полным отсутствием пигмента, остановившиеся на ранней стадии развития или отцветшие еще до раскрытия чашелистиков.


Эффект развивался на второй-третьей неделе после острого облучения и выглядел как поражение соцветий. Важно отметить, что он не наблюдался в экспериментах с молодыми соцветиями (возраст до 1 мес.) Поражение развивалось при предоблучении соцветий в минимальных дозах - 0.4 и 1.0 сГр, и при облучении в дозах от 7.0 сГр и выше. Количественно оно отражалось в снижении числа учтенных волосков. Так, предоблучение в дозе 1.0 сГр вызывало снижение их количества в 3.38 раза. Наблюдаемый эффект полностью отсутствовал при предварительном облучениии в дозах 2.3 и 4.86 сГр. Другим показателем, отражающим характер наблюдаемого эффекта, является снижение уровня варьирования числа учтенных волосков для отдельных соцветий. Для вариантов с облучением в дозах 2.3 и 4.86 сГр он достигал минимальных значений – 56.44% и 33.43 %, соответственно, и максимальных значений при предоблучении в дозах 1.0 сГр и 7.0 сГр – 143.15% и 154.28 %. В этих же вариантах (1.0 и 7.0 сГр) в наибольшей мере снижалась частота розовых соматических мутаций в волосках тычиночных нитей, что, возможно, связано с элиминацией части мутантных событий.

Полученные результаты свидетельствует о снижении репаративного потенциала старых соцветий при пролонгированном облучении в малых дозах, и об инициации механизмов индуцированной устойчивости при предоблучении в дозах 2.3 и 4.86 сГр.

СОДЕРЖАНИЕ ГИББЕРЕЛЛОВОЙ КИСЛОТЫ А3 В СОЦВЕТИЯХ TRADESCANTIA (КЛОН 02) ПОСЛЕ ОСТРОГО ОБЛУЧЕНИЯ В ДОЗЕ 6 СГР.

Хомиченко А.А. 1, Скоробогатова И.В. Институт биологии, Коми НЦ УрО РАН, Российский Государственный Аграрный Университет, Москва, Россия Гиббереллины – фитогормоны, которые участвуют в процессах роста и морфогенеза растений, их репродуктивном развитии и дифференциации побега и многих других процессах. Они играют ведущую роль в организации клеточной полярности и стержневого роста, в прохождение отдельных стадий клеточного цикла и целом ряде других процессов. Гибберелловая кислота А3, являясь мутагеном, проявляет себя как эффективный радиопротектор, что указывает на роль этого гормона в механизмах, обеспечивающих генетический гомеостаз [Виленский Е.Р., 1987;

Араратян Л.А., 1989;

Francis D., Sorrell, D.A., 2001].

Для нас было крайне интересным изучить динамику содержания гибберелловой кислоты после острого облучения Tradescantia (клон 02). Соцветия традесканции облучали в дозе 6 сГр, источник Со-60, время облучения – 3 сек. В течение второго часа после облучения нами наблюдался значительный рост содержания гиббереллина - с 20.61 до 95.06 нг/г сырого веса. Содержание гибберелловой кислоты А3 достигало максимума в пробе, собранной в течение 3 ч, – 130.36 нг/г сырого веса, увеличиваясь более чем в 6. раза. Далее уровень гиббереловой кислоты снижался до 53.74 нг/г сырого веса (4 ч) и 34.64 нг/г (5 ч).

Изменения в содержании гиббереллина А3 свидетельствует, что облучение затрагивает ключевые механизмы регуляции клеточного метаболизма, это может являться одним из ведущих моментов в формировании различных эффектов облучения в малых дозах. Характер механизмов, контролируемых гиббереллином, подразумевает возможность как роста, так и снижения его содержания при облучении растений в малых дозах. Значительный рост содержания гормона, по нашему мнению, связан с его ролью в регуляции синтеза дезокси- и рибонуклеиновых кислот, процессах ядерного транспорта и перестройках структуры хроматина, индуцируемых облучением в малых дозах.

ОТДАЛЕННЫЕ ЭФФЕКТЫ МАЛЫХ ДОЗ -ОБЛУЧЕНИЯ НА ЩИТОВИДНУЮ ЖЕЛЕЗУ Черкасова Ю.Б., Логачева В.В., *Афанасьев Р.В.

ВПО «Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко Росздрава», Воронеж, Россия, z.vorontsova@mail.ru * ГНИИИ Военной медицины МО РФ, Москва, Россия В эксперименте на 90 белых беспородных половозрелых крысах-самцах, спустя месяцев после однократного и фракционированного (пятикратного) воздействия излучения в дозах 10, 20, 50, 100 сГр мощностью 50 сГр/ч, изучено функциональное состояние щитовидной железы по морфологическим эквивалентам: высоте тироидного эпителия;

степени йодирования аминокислот коллоида, для оценки гормонообразования;

активности фермента щелочная фосфатаза перифолликулярного микроциркуляторного русла, коррелирующая с активностью транспорта «капилляр-тироидный эпителий»;

тканевым базофилам межфолликулярной стромы, участвующим в регуляции тканевого гомеостаза на местном уровне. Независимо от кратности облучения, проницаемость эндотелия капилляров достоверно снижалась по резко убывающей функции в обратной зависимости от дозы, морфофункциональные типы тканевых базофилов перераспределялись в пользу активных дегранулированных форм соответственно дозовой нагрузке с высвобождением гепарина. Гормонообразование активизировалось с возрастанием высоты тироидного эпителия в прямой линейной зависимости от дозы однократного -облучения. Фракционированность воздействия отразилась в скачкообразном усилении гормонообразования на фоне высокого фолликулярного эпителия. Таким образом, спустя 12 месяцев после -облучения наблюдалось снижение ферментативной активности, обеспечивающей транспорт субстрата для гормонообразования. Видимо, мобилизация резервных возможностей гипертрофированного тироидного эпителия сохраняла высокий статус гормонообразования.

Экспериментальная модель спустя 12 месяцев после однократного и фракционированного -облучения выявила четкую зависимость «доза – эффект».

Кратность -облучения не изменяла направленность эффектов, но повлияла на их выраженность.

ОСОБЕННОСТИ РЕГУЛЯЦИИ ОКИСЛИТЕЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ ПРИ ДЕЙСТВИИ РАДИАЦИИ В МАЛЫХ ДОЗАХ Шишкина Л.Н., Климович М.А., Козлов М.В., Кушнирева Е.В., Хрустова Н.В.

Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН, Москва, Россия, Shishkina@sky.chph.ras.ru Важность окислительных процессов в регуляции метаболизма обусловлена участием липидов в реакциях окисления при физиологических температурах на стадиях зарождения радикалов и продолжения цепи. Ранее было сформулировано положение о роли физико-химической системы регуляции процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в репарации клеточных мембран после острого облучения животных. Обратная зависимость показателей этой системы регуляции от дозы облучения и ее мощности, а также неодинаковая чувствительность и способность к восстановлению ее параметров к действию повреждающих факторов обусловливают возрастание роли мембран как координатора регуляции клеточного метаболизма при воздействии радиации в малых дозах.

Обобщены результаты исследования влияния - и рентгеновского (РИ) излучений в малых дозах с разной мощностью дозы на формирование биологических последствий воздействия радиации в зависимости от обеспеченности тканей мышей антиоксидантами (АО). Показано, что одним из наиболее чувствительных показателей системы регуляции ПОЛ в селезенке мышей является способность липидов к образованию пероксидов и состав липидов, а в эритроцитах крови – состав липидов. Выявлена высокая биологическая эффективность РИ переменной мощности в дозах менее 1 мГр. Несмотря на гетерогенность ответа показателей системы регуляции ПОЛ в тканях мышей на уровне отдельных особей, обнаружены достоверные изменения количественного соотношения и минорных, и основных фракций фосфолипидов во всех исследованных тканях (печень, селезенка, эритроциты крови, головной мозг) в среднем для группы. Масштаб нарушения взаимосвязей между различными тесно скоординированными в норме показателями системы регуляции ПОЛ на органном уровне зависит от обеспеченности его липидов АО и интенсивности ПОЛ.

Сформулирован новый подход к оценке биологических последствий воздействия радиации в малых дозах для групп животных с разным АО статусом по изменению масштаба и направленности взаимосвязей между скоординированными в норме показателями физико-химической системы регуляции ПОЛ.

ВЛИЯНИЕ МАЛЫХ ДОЗ ОБЛУЧЕНИЯ НА ФОРМИРОВАНИЕ ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИХ ПОВРЕЖДЕНИЙ В КУЛЬТУРЕ ЛИМФОЦИТОВ ЧЕЛОВЕКА Шкарупа В.Н., Демина Э.А., Демченко Е.Н.

Институт экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии, Киев, Украина, Shkarupa_vlad@bigmir.net Целью работы было изучение корреляции дозовых зависимостей цитогенетических эффектов -облучения в диапазоне доз 0,1-1 Гр в культуре лимфоцитов периферической крови человека по критериям: митотический индекс (МИ), частота аберраций хромосом (ЧА) и характер их поклеточного распределения – с учетом индивидуальной радиочувствительности (ИРЧ), выявленной в G2-тесте.

Выявлена достоверная прямая корреляция между значениями МИ и спонтанным уровнем ЧА. Наименьший МИ регистрировали при повышенном уровне показателей спонтанного мутагенеза и ИРЧ, наибольший – при нулевом спонтанном уровне ЧА у радиорезистентного донора. Стимулирующее влияние -облучения на значение МИ проявляется в диапазоне доз от 0,1 Гр до 0,3 Гр, с образованием „плато” в интервале 0,2 0,3 Гр;

с дальнейшим снижением МИ (начиная с дозы 0,5 Гр) до значений ниже контрольного. В диапазоне доз 0,1-0,3 Гр на кривых доза-эффект для ЧА наблюдается „плато”. При анализе поклеточного распределения аберраций, точка выхода из „плато” (0,3 Гр) выявилась критической – в 3 из 4 случаев наблюдается достоверное отклонение от закона Пуассона: значительное превышение (до 10 раз) клеток с максимальным числом аберраций по сравнению с ожидаемым теоретическим. При соответствии Пуассоновскому распределению „плато” для ЧА имеет наименее выраженный характер, а достоверных изменений МИ в этом диапазоне доз не наблюдается.

Таким образом, МИ может использоваться в качестве дополнительного критерия предварительной экспресс-оценки функциональной активности лимфоцитов и спонтанного мутагенеза. При малых дозах облучения возможно отклонение поклеточного распределения аберраций от Пуассоновского, характеризующееся превышением клеток с максимальным числом аберраций от теоретически ожидаемого. Комплексный анализ зависимостей доза-эффект для выхода и поклеточного распределения аберраций хромосом в лимфоцитах человека, их митотической активности, а также с учётом ИРЧ обследуемых позволяет повысить информативность цитогенетической дозиметрии.


ОЦЕНКА ЭФФЕКТОВ ДЕЙСТВИЯ Г-ИЗЛУЧЕНИЯ В МАЛЫХ ДОЗАХ У МУТАНТОВ ПО РЕПАРАЦИИ И МЕЙОТИЧЕСКОЙ РЕКОМБИНАЦИИ DROSOPHILA MELANOGASTER Юшкова Е.А., Зайнуллин В.Г.

Институт биологии Коми НЦ УрО РАН, Сыктывкар, Россия, ushkova@ib.komisc.ru Гены rad54+, mei-41+ и mus210+ относятся к группе генов дрозофилы, контролирующие устойчивость организмов к действию факторов радиационной природы.

Их мутации вызывают повышенную радиочувствительность развивающихся особей, обусловленную нарушениями репарации в соматических клетках.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что облучение в малых дозах (от 2.7 до 8.1 сГр при мощности экспозиционной дозы 0.39 мГр/ч) приводит к достоверному увеличению уровня индукции доминантных летальных мутаций у мутантных по генам rad54+ и mei-41+ линий. При этом в исследованиях эффективности низкоинтенсивного г излучения (от 2.7 до 14.7 сГр) методом «ДНК-комет» было обнаружено, что изменение числа клеток с двунитевыми разрывами ДНК носит немонотонный характер, т.е. имеются дозы облучения, при которых частота выхода цитогенетических повреждений принципиально различается. Выявлено, что облучение в дозе 2.7 сГр приводит к достоверно значимому уровню повреждений ДНК в клетках нервных ганглиев личинок линии дикого типа Canton –S, тогда как у мутантных линий такое увеличение обнаруживается при облучении в больших дозах и зависит от исследуемого генотипа.

Неоднозначность наблюдаемых эффектов облучения в области низких доз объясняется принадлежностью исследуемых генов к разным путям репарации. Ген mei- контролирует в клеточном цикле переход G2/M и репарацию двунитевых разрывов по механизму отжига однонитевой ДНК. Rad54 отвечает за восстановление двунитевых разрывов ДНК по типу межхромосомной рекомбинации и контролирует переход фаз S/G митотического цикла. В то время как продукт гена mus210 участвует в эксцизионной репарации нуклеотидов.

СЕКЦИЯ VI. РАДИАЦИОННАЯ ЗАЩИТА И МОДИФИКАЦИЯ ЭФФЕКТОВ РАДИАЦИИ.

РАДИОПРОТЕКТОРНОЕ ДЕЙСТВИЕ ГЕПАРИНА, ИНТЕРЛЕЙКИНА-1, ЦИСТАМИНА И ПРЕПАРАТА Б-190 НА СИСТЕМУ ГЕМОПОЭЗА Аксенова Н.В.

Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова, Санкт-Петербург, Россия nataaks@mail.ru Проблемы современной радиобиологии неразрывно связаны с разработкой препаратов радиопротекторного действия. В основе радиозащитного действия этих препаратов лежит их способность защищать кроветворную систему или ускорять восстановление гемопоэза после облучения. Целью данного исследования явилась оценка эффективности радиозащитного действия гепарина, интерлейкина-1, цистамина и препарата Б-190 в отношении клеток системы кроветворения.

Эксперименты выполнены на 950 мышах-самцах линий (CBA x C57Bl) F1 и BALB.

Животных подвергали рентгеновскому облучению в дозах СД70-100/30. Препараты вводили внутрибрюшинно: гепарин в дозе 250 ЕД/кг за 2 сут до облучения, интерлейкин 1 в дозе 50 мкг/кг за 24 ч до облучения, цистамин в дозе 225 мг/кг за 20-30 мин до облучения, препарат Б-190 в дозе 50 мг/кг за 10-15 мин до облучения. Защитное действие радиопротекторов в отношении системы кроветворения оценивали в методиках эндогенного и экзогенного колониеобразования (Till и McCulloh, 1961) по числу селезеночных колоний на 9 сут после облучения.

В ходе проведенных исследований было установлено, что все изученные радиопротекторы оказывают позитивное влияние на систему кроветворения облученных мышей. Так, гепарин вызывал увеличение числа КОЕс на селезенках мышей в среднем на 10-20%. Интерлейкин-1 стимулировал митотическую активность кроветворных клеток, что проявлялось в увеличении количества КОЕс в 1,5-2 раза. Наибольший радиопротекторный эффект на систему гемопоэза оказывал цистамин, применение которого позволяло сохранить в 3 раза больше кроветворных клеток по сравнению с контролем. Препарат Б-190 также обладал защитным действием, предотвращая от гибели на 20-40% кроветворных клеток больше, чем в контроле.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что в механизмах действия современных радиопротекторов существенное значение имеет их защитное влияние на систему кроветворения.

ОЦЕНКА РАДИОЗАЩИТНОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ ИНТЕРЛЕЙКИНА- ПРИ ЕГО ВВЕДЕНИИ ЗДОРОВЫМ ЛЮДЯМ И ПОСЛЕДУЮЩЕМ ОБЛУЧЕНИИ ПРОБ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ IN VITRO Алексанин С.С., Калинина Н.М. Тимошевский А.А. Всероссийский центр экстренной и радиационной медицины им. А.М.Никифорова МЧС России, Санкт-Петербург, Россия ММА им И.М. Сеченова, Москва, Россия, tialexandr@yandex.ru В настоящее время накоплено значительное число сведений, подтверждающих высокую радиопротекторную и терапевтическую эффективность интерлейкина-1 (ИЛ 1) при радиационных поражениях. Однако в доступной литературе отсутствуют сведения о переносимости ИЛ-1 и влиянии этого препарата на объективный статус, гематологические, биохимические и иммунологические показатели здоровых людей, а также о его радиозащитной эффективности в отношении человека.

В нашей работе использовался созданный в Российской Федерации и разрешенный к клиническому применению фармакопейный препарат «Беталейкин», представляющий собой точную копию эндогенного ИЛ-1 человека. «Беталейкин», предварительно разведенный в 200 мл физиологического раствора, вводили внутривенно капельно в дозе нг/кг в течение 3-х часов.

На первом этапе исследований установлено, введение интерлейкина-1 хорошо переносится людьми и, несмотря на кратковременное повышение температуры тела до субфебрильных цифр, не оказывает отрицательного влияния на самочувствие и объективный статус людей, а также на биохимические показатели крови. Гемо- и иммуностимулирующее действие препарата у людей проявляется развитием умеренно выраженного нейтрофильного лейкоцитоза, повышением функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов, увеличением количества клеток, синтезирующих и продуцирующих провоспалительные цитокины.

На втором этапе, после введения испытуемым препарата за 24 часа до облучения проб периферической крови (в дозе 4 Гр) in vitro установлено, что ИЛ-1 отменяет радиационно-индуцированное снижение абсолютного числа CD4+, CD8+ и CD20+ лимфоцитов, уменьшает пострадиационное ингибирование щелочной фосфатазы в нейтрофилах, нормализует адгезивные свойства гранулоцитов и их миграционную способность, снижает выраженность пострадиационных нарушений в цитокиновой сети.

В работе обсуждаются перспективы по внедрению препарата «Беталейкин» в качестве медицинского средства профилактики и терапии лучевых поражений, формирующихся при радиационных авариях и катастрофах.

РАДИОЗАЩИТНЫЕ СВОЙСТВА ИНОЗИН-5’-МОНОФОСФАТА.

Асадуллина Н.Р.1, Усачева А.М.1, Гудков С.В.1,2, Брусков В.И.1, Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино, Россия Пущинский государственный университет, Пущино, Россия micronelly@rambler.ru В настоящее время актуальной задачей является разработка способов защиты генома и клеток млекопитающих от повреждений, вызванных ионизирующей радиацией.

Показано, что при внутрибрюшинном введении инозин-5’-монофосфата (ИМФ) как за мин до, так и через 15 мин после воздействия рентгеновского излучения в дозе 7 Гр, ИМФ влияет на выживаемость животных и содержание форменных элементов в периферической крови самцов мышей Kv:SHK. Особенно эффективным оказалось введение ИМФ после воздействия рентгеновского излучения. При введении ИМФ после облучения в концентрации ~45 мкг/г, оставались живыми в течение 30 дней приблизительно 60 % животных при 100% гибели в контроле. При этом ИМФ уменьшает тяжесть радиационной лейко- и тромбопении, увеличивая количество форменых элементов крови у облученных животных. Эффективность защиты ИМФ от цитотоксических повреждений, таких как образование микроядер (МЯ) в полихроматофильных (ПХЭ) эритроцитах красного костного мозга мышей исследовано с помощью метода микроядерного теста. ИМФ при внутрибрюшинном введении его после воздействия рентгеновского излучения в дозе 1,5 Гр приводит к значительному уменьшению количества ПХЭ с МЯ в костном мозге мышей. Таким образом, показано, что ИМФ в существенной мере модулирует эффекты радиации при введении его облученным животным, увеличивая выживаемость, снижая тяжесть радиационной лейко и тромбопении, увеличивая количество гранулоцитов в периферической крови облученных животных, а так же защищает клетки костного мозга мышей от цитогенетических повреждений вызванных воздействием рентгеновского излучения.

Работа поддержана грантами Российского фонда фундаментальных исследований (10-10-04-00949-а;

04-00800-а) и Президента Российской Федерации для поддержки молодых российских ученых (МК-108.2010.4).

ОПТИМИЗАЦИЯ ВЗАИМОВЛИЯНИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ, ИСПОЛЬЗУЕМЫХ ПРИ ОКАЗАНИИ МЕДИЦИНСКОЙ ПОМОЩИ БОЛЬНЫМ С ОСТРОЙ ЛУЧЕВОЙ БОЛЕЗНЬЮ.

Бушманов А.Ю., Назаров В.Б., Шапошникова А.А.

Федеральный медикобиолофизический центр им. А.И.Бурназяна ФМБА России, Москва Научно-производственный центр «Фармзащита» ФМБА России, Химки, Россия По данным ВОЗ и МАГАТЭ в индустриально развитых странах, вследствие нарушения технологии, неисправности аппаратуры или ошибок персонала в год может быть до 10-12 случаев повышенного облучения от различных источников ионизирующего излучения, из них в 1-2 случаях может развиться лучевая болезнь Существующая в настоящее время система оказания медицинской помощи персоналу при техногенных авариях на предприятиях атомной энергетики и атомной промышленности предусматривает этапность оказания медицинской помощи. При этом уже на первом этапе может быть одновременно использовано до 5 лекарственных средств.

Это может оказывать существенное влияние на действие лекарственных средств, применяемых на втором этапе. Так по данным ВОЗ, при одновременном приеме двух препаратов вероятность развития взаимодействия колеблется от 0,03 до 0,05 при одновременном приеме десяти препаратов - более 0, Проанализировав, существующий в настоящее время стандарт медицинской помощи больным с острой лучевой болезнью, утвержденный приказом Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации №524 от 6.07.2006, были обнаружены нерациональные комбинации лекарственных средств, например, такие как: Амоксициллин с Ко-тримоксазолом (проявляют антагонизм), Амикацин с Цефепимом (фармацевтически несовместимы), совместное применение Амикацина с ванкомицином приводит к увеличению риска нефротоксического действия.

Полученные данные по лекарственному взаимодействию позволят свести к минимуму количество нежелательных эффектов от одновременного применения большого числа лекарственных препаратов, применяемых в терапии ОЛБ. Таким образом повысить качество оказания медицинской помощи больным с ОЛБ.

К МЕХАНИЗМУ ДЕЙСТВИЯ РАДИОПРОТЕКТОРА ЭКСТРЕННОГО ДЕЙСТВИЯ ПРЕПАРАТА Б-190 ПРИ ЕГО ПРИМЕНЕНИИ ПОСЛЕ ОБЛУЧЕНИЯ.

ПОТЕНЦИРУЮЩИЙ ЭФФЕКТ ЧАСТИЧНОГО ЭКРАНИРОВАНИЯ ОБЛАСТИ ЖИВОТА И КВЕРЦЕТИНА НА ПРОЯВЛЕНИЕ ПРОТИВОЛУЧЕВОЙ АКТИВНОСТИ РАДИОПРОТЕКТОРА Васин М.В.*, Ушаков И.Б. *, Ковтун В.Ю. ** * Государственный научно-исследовательский испытательный институт военной медицины МО РФ, Москва, vas-mizail@yandex.ru ** Федеральное государственное унитарное предприятие Научно-производственный центр «Фармзащита» ФМБА России, Химки, Россия Отечественный радиопротектор экстренного действия препарат Б-190, проявляющий выраженные противолучевые свойства при его применении до облучения, также оказывает умеренные противолучевые свойства после облучения (Л.А. Илъин, 1994). В опытах на крысах в условиях частичного экранирования живота (в области печени) при общем гамма-облучении в сверхсмертельной дозе 11 Гр и применении препарата Б-190 после облучения нами обнаружен выраженный противолучевой эффект до 87,5% при 31,3 % выживаемости животных в контрольной группе с экранированием и отсутствии эффекта от одного препарата, применяемого после облучения. В опытах на мышах-гибридах F1(CBA•C57Bl6) выявлено, что профилактическое применение -облучения кверцетина (за 30-60 мин до животных) существенно усиливало противолучевой эффект препарата Б-190 в случае применения радиопротектора в ранние сроки (до 30 мин) после -облучения в несмертельных дозах (6,7 Гр). Данный эффект нашел свое проявление в ускорении процессов пострадиационного восстановления системы кроветворения, что было зарегистрировано по ускорению восстановления массы селезенки и усилению в ней процессов эндогенного колониеобразования, а также более низкой выраженности лейкопении при развитии острой лучевой болезни. При однократном профилактическом применении одного кверцетина за 30-60 мин до облучения животных не было выявлено его противолучевого действия. Кверцетин в данном варианте применения также не оказывал влияния на противолучевые свойства препарата Б-190 при применении радиопротектора до облучения.

РАДИОПРОТЕКТОРНЫЙ ЭФФЕКТ ПРЕПАРАТА Б-190 ПРИ ЕГО КОМБИНАЦИИ С ИНТЕРЛЕЙКИНОМ-1 И ЛАКОЦИНОМ Власенко Т.Н.1, Аксенова Н.В.2, Зацепин В.В.2, Назаров В.Б.1, Гребенюк А.Н. 1– Научно-производственный центр «Фармзащита», Химки Московской области, 2– Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова, Санкт-Петербург, Россия vlasenko_t_n@mail.ru В условиях радиационных аварий и катастроф люди могут подвергаться сверхнормативному воздействию ионизирующих излучений. Для защиты сотрудников аварийно-спасательных формирований разработаны эффективные медикаментозные препараты: радиопротектор Б-190, средство ранней терапии интерлейкин-1 (ИЛ-1) и средство профилактики первичной реакции на облучение лакоцин. Однако данных об эффективности комбинации этих средств для защиты от острого облучения нет. В связи с этим, целью исследования была оценка радиопротекторной эффективности препарата Б 190 при его последовательном применении с лакоцином и интерлейкином-1.

Экспериментальные исследования выполнены на 450 мышах и 30 крысах.

Животных облучали на установке РУМ-17. Лакоцин вводили перорально в дозе 500 мг/кг за 30 мин до облучения, препарат Б-190 – внутрибрюшинно в дозе 50 мг/кг за 15 мин до облучения, интерлейкин-1 – внутрибрюшинно в дозе 50 мкг/кг через 15 мин после облучения. Оценку радиозащитного эффекта комбинации препаратов проводили по критериям выживаемости, а также по их влиянию на состояние костномозгового кроветворения и динамику количества клеток периферической крови после облучения.

Установлено, что последовательное применение лакоцина, Б-190 и ИЛ- позволяет увеличить выживаемость облученных в дозах СД50-100/30 мышей на 30-50%, не оказывая влияния на среднюю продолжительность жизни погибших животных.

Комбинация препаратов предотвращала постлучевые изменения костномозгового кроветворения у мышей в большей степени, чем Б-190 или ИЛ-1. Последовательное применение лакоцина, Б-190 и ИЛ-1 уменьшало выраженность ранней постлучевой лейко- и нейтрофилопении, ускоряло восстановление абсолютного числа клеток в периферической крови, предотвращало снижение активности щелочной фосфатазы и миелопероксидазы, поддерживало более высокий уровень гликогена в нейтрофилах.

Полученные результаты свидетельствуют о перспективности дальнейшего изучения комплексной схемы профилактики и ранней терапии радиационных поражений, включающей использование лакоцина, препарата Б-190 и интерлейкина-1.

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ИЗОЛИРОВАННОГО И СОВМЕСТНОГО ПРИМЕНЕНИЯ ПРЕПАРАТА Б-190 И ИНТЕРЛЕЙКИНА- ДЛЯ ЗАЩИТЫ МЫШЕЙ ПРИ ОСТРОМ ОБЛУЧЕНИИ Власенко Т.Н.

Научно-производственный центр «Фармзащита», Химки, Россия vlasenko_t_n@mail.ru Ранее было показано, что применение препарата Б-190 до облучения позволяет эффективно защитить лабораторных животных от лучевой гибели. Препараты интерлейкина-1 наибольшую активность проявляют при их использовании сразу после радиационного воздействия. Однако сведений об эффективности совместного применения Б-190 и интерлейкина-1 пока нет. В связи с этим, целью настоящей работы явилась сравнительная оценка изолированного и совместного применения препарата Б-190 и интерлейкина-1 для защиты мелких лабораторных животных от облучения.

Эксперименты выполнены на 426 мышах-самцах. Животных подвергали гамма- и рентгеновскому облучению. Препарат Б-190 вводили однократно внутрибрюшинно в дозе 50 мг/кг за 15 мин до, а интерлейкин-1 в дозе 50 мкг/кг – через 15 мин после облучения.

Эффективность изучаемых препаратов и их комплексного применения оценивали по критериям выживаемости, состоянию костномозгового кроветворения и динамике количества клеток периферической крови облученных животных.

В результате проведенных исследований установлено, что Б-190 увеличивает выживаемость облученных в дозах СД50-100/30 мышей на 10-30%, интерлейкин-1 – на 10-20%, а их последовательное совместное применение – на 40-60%. Число колоний, выросших на селезенках мышей к 9 сут после облучения, при применении Б-190 было в 3,1-3,5 раза больше, а при использовании интерлейкина-1 – в 2,5-3,1 раза больше, чем в контроле. Последовательное введение Б-190 и интерлейкина-1 приводило к увеличению количества колоний в 4-5 раз. Кроме того, совместное применение изученных препаратов позволяло снизить выраженность ранней постлучевой лейко-, лимфо- и нейтрофилопении, ускорить восстановление абсолютного содержания клеток в периферической крови более эффективно, чем только Б-190 или интерлейкин-1.

Таким образом, при последовательном применении Б-190 и интерлейкина-1 в условиях острого облучения радиозащитный эффект проявляется в большей степени, чем при изолированном использовании данных препаратов, что свидетельствует о перспективности комплексной профилактики и терапии лучевых поражений.

ЗАЩИТА ЧЕЛОВЕКА ОТ ПОСЛЕДСТВИЙ ХРОНИЧЕСКОГО ОБЛУЧЕНИЯ МАЛЫМИ ДОЗАМИ ПРОНИКАЮЩЕЙ РАДИАЦИИ Горовой Л.Ф.1, Сенюк О.Ф.2.

Институт клеточной биологии и генетической инженерии НАН Украины, Киев, Украина, gorovoj@iicb.kiev.ua Институт проблем безопасности атомных электростанций НАН Украины, Чернобыль, Украина В настоящее время на радиационно загрязненных территориях Украины, России и Белорусии проживают миллионы человек. В зоне отчуждения ЧАЭС и на предприятиях ядерного цикла в радиационно опасных условиях работают сотни тысяч человек. В будущем при проведении работ по преобразованию объекта "Укрытие" в безопасную систему радиационную нагрузку получат десятки тысяч человек. Население не имеет никакой защиты от последствий радиационного воздействия. Персонал лишь частично защищен от радиоаэрозолей. Несмотря на чрезвычайную актуальность проблемы в наших странах нет средств для защиты людей от последствий хронического облучения в малых дозах. В условиях хронического облучения необходимо обеспечить: максимально низкий уровень свободных радикалов и продуктов их реакций в организме;

постоянную очистку организма от инкорпорированных радионуклидов;

и обеспечить поддержку нормального статуса иммунной системы организма.

Для решения этой комплексной задачи по защите человека от хронического низкодозного облучения предлагается препарат, состоящий из комплекса биологически активных биополимеров - хитина, глюканов и меланинов грибного происхождения. Хитин обладает мощными радиосорбирующими свойствами. Грибные глюканы являются эффективными иммунокорректорами. Меланины - это самые сильные природные антиоксиданты. Такой препарат, названный "Микотон", состоит на 70% из хитина, 20% глюканов и 10% - меланинов. Он прошел всесторонные медико-биологические исследования на модельных системах in vitro, на модельных животных и в клинических условиях. Сорбционные способности препарата детально изучены в РНЦ "Курчатовский институт" на широком спектре радионуклидов. Препарат показал хорошие детоксикационные, иммуномодулирующие, радиопротекторные и антиинфекционные свойства. Он нетоксичен даже в больших дозах, не имеет противопоказаний и эффектов последействия при длительном употреблении. Препарат "Микотон" зарегистрирован Минздравом Украины в качестве биологически активной пищевой добавки и может использоваться для радиационной защиты населения.



Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |   ...   | 8 |
 





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.