авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:     | 1 |   ...   | 6 | 7 || 9 | 10 |   ...   | 12 |

«IV Всероссийский симпозиум с международным участием ‡ ‚ ‡‚ ‡‡„ Сборник тезисов симпозиума 21-22 апреля 2010 Санкт-Петербург ...»

-- [ Страница 8 ] --

При лечении патологии челюстно-лицевой области (Тулупова И.Г. 1988) у больных положительные результаты были зарегистрированы у 22 больных, отрицатель ные у 3. Первичное заживление ран наблюдалось у 25 человек (96,1%). У 1 больного про изошло нагноение гематомы, трансплантат пришлось удалить. По характеру поражения нижней челюсти все пациенты распределялись следующим образом: оскольчатые пере ломы – 4;

микрогнатия – 5;

фиброзная дисплазия – 2;

дефекты и ложные суставы – 11. В 1 клетОчные технОлОгии, тканевая инЖенерия целом исследования показали, что ДКТ могут с успехом использоваться в качестве цен ного пластического материала при восстановительных операциях на нижней челюсти.

Они устойчивы к инфекции и стимулируют репаративные процессы.

Столь же успешным оказалось применение ДКТ у 140 больных с повреждени ем нижней стенки глазницы (Абсава К.А. с соавт. 2006) и при пластике дефекта пере дней стенки верхнечелюстной пазухи у 23 больных (Трошкова Г.Б. 1983).

Таким образом, подводя итоги клинического применения ДКТ в различных областях восстановительной хирургии, нельзя не отметить единодушия специалистов разного профиля в отношении высокой оценки данного вида костно-пластического материала. Их наблюдения свидетельствуют о безусловной целесообразности и поль зе таких трансплантатов, способных повысить эффективность и улучшить результаты лечения больных в травматологии и ортопедии взрослых и детей, нейрохирургии, че люстно-лицевой хирургии, офтальмологии и оториноларингологии. Сотрудниками тка невого банка института получено: 2 патента РФ и 21 авторское свидетельство на способ клинического применения ДКТ в травматологии – ортопедии и в других областях вос становительной хирургии.

вЛиЯние метоДики СоеДинениЯ композиЦионноГо препарата, СоДерЖаЩеГо ГиДрокСиапатит, коЛЛаГен и коСтнЫЙ морФоГенетиЧеСкиЙ беЛок-2, С ДеминераЛизованнЫм коСтнЫм импЛантатом на оСтеоГенез торгашин а.н., 1родионова С.С., 2Семихин а.С., 2Лунин в.Г., 2карягина а.С., подурец к.м., 4Семенова Л.а., 1Лекишвили м.в.

ФГУ Центральный научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии им. Н.Н. Приорова, 2Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи, 3Российский научный центр «Курчатовский институт», Научно-исследовательский институт ревматологии РАМН.

As one of perspective methods of improvement osteogenesis considering use of the composite materials containing human recombinant bone morphogenetic protein-2 (rhBMP-2) which concerns family of proteins of the beta growth transforming factor бета (TGF-). The method of reception of the bone-plastic material representing DBA, connected to a rhBMP- – containing composite in vitro is preferable.

В качестве одного из перспективных методов улучшения остеогенеза рассмат ривается использование композиционных материалов, содержащих рекомбинантный костный морфогенетический белок-2 человека (rhBMP-2), который относится к семейс тву белков трансформирующего фактора роста бета (TGF-). Одной из многочисленных функций rhBMP-2 является усиление пролиферации и дифференцировки клеток ос теобластического ряда и, таким образом, стимуляция костеобразования. В ряде зару бежных работ отмечена зависимость остеогенеза в зоне имплантации от типа носителя морфогенетического белка. В России подобных исследований до настоящего времени не проводилось.

1 клетОчные технОлОгии, тканевая инЖенерия Одним из самых широкоприменяемых костнопластических материалов явля ется деминерализованный костный матрикс (ДКМ), который был использован в качестве носителя композиционного препарата (гель), состоящего из синтетического гидроксиа патита, коллагена и rhBMP-2.

Целью исследования являлась сравнительная оценка двух методов соедине ния ДКМ с композиционным препаратом: предварительно, в лабораторных условиях (метод 1) и непосредственно во время операции перед имплантацией ДКМ (метод 2).

материалы и методы. Исследование проводилось на 20 самках белых нели нейных крыс, весом 130-150 г., в средней трети большеберцовой кости которых при по мощи бора выполнялся костный дефект длинной 5 мм, шириной 2 мм, глубиной 1-2 мм объемом 15-20 мм3. Все крысы были разделены на 2 группы. В одной из них в дефект замещался ДКМ с композиционным материалом, внесенным по методу 1, во второй – по методу 2. Лиофилизированный ДКМ был получен из тканевого банка ЦИТО. Выделение и очистка полученного генно-инженерным способом rhBMP-2 и получение гидроксиа патит-коллагенового композиционного препарата с введенным в него rhBMP-2 проводи лось в ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи РАМН.

результаты. Перестройка имплантата и образование новой кости оценивалось рентгенологически (рефракционная интроскопия на Курчатовском источнике синхрот ронного излучения) и морфологически. Для определения достоверности различий меж ду группами использовались методы статистического анализа: t-критерий Стьюдента и непараметрический U-тест по Манну и Уитни.

На 90-е сутки в обеих группах животных отмечена хорошая костная регенера ция и закрытие остеотомического дефекта новообразованной костной тканью. Не выявле но статистически значимых различий в группах таких рентгенологических признаков как периостальная реакция, эндостальный склероз, восстановление костномозгового канала, наличие кортикального слоя над областью дефекта, однородность костной ткани в проек ции дефекта. Но во второй группе отмечена тенденция к увеличению частоты гетеротопи ческих оссификатов, и, кроме того, перестройка трансплантата проходила неравномерно.

заключение. При соединении ДКМ с композиционным препаратом непосредс твенно в процессе операции повышается риск выхода rhBMP-2 в окружающие костный дефект мягкие ткани и наблюдается неравномерность перестройки имплантата. Метод по лучения костно-пластического материала, представляющего собой ДКМ, соединенный с rhBMP-2-содержащим композитом в лабораторных условиях является предпочтительным.

воССтановЛение микроСоСуДиСтоГо руСЛа при транСпЛантаЦии кЛеток разЛиЧнЫХ тканеЙ тюменцева н.в., Юшков б.Г., Гафарова р.к.

Институт иммунологии и физиологии УрО РАН, г. Екатеринбург The method of hemopoetic cells transplantation was suggested for acceleration of reconstruction microcirculation of damaged tissues structures. The investigations made prove that angiogenic effect of bone marrow depends from count of hemopoietic stem cells and inde pendent from endotheliocytes and mast cells.

1 клетОчные технОлОгии, тканевая инЖенерия Цель. Исследовать восстановление микроциркуляторного русла после введе ния в ишемизированную зону стволовых клеток.

материалы и методы. Экспериментальные исследования выполнены на белых беспородных крысах. Ишемию задней конечности получали путем перевязки и дальней шей перерезки бедренной артерии крыс. Животных разделяли на три группы в зависи мости от вида вводимых клеток. Восстановление микроциркуляции осуществляли путем введения в зону ишемии клеток костного мозга, селезенки и легкого через 10 дней пос ле перерезки артерии, а спустя 12 дней определяли количество вновь образованных ка пилляров. Контролем во всех случаях служила интактная мышца и контралатеральная конечность с перевязанной артерией, в которую вводили физиологический раствор. Для выявления эндотелиальных клеток срезы толщиной 5 мкм окрашивали на щелочную фос фатазу по методу Гомори. Подсчет количества капилляров в мышце производили в 20 слу чайных полях зрения площадью 0,017 мм2 каждый с последующим пересчетом на 1мм2.

результаты. В ишемизированную конечность животных вводили одинаковое количество – 107 клеток костного мозга, селезенки, легкого. При этом исходили из того факта, что все эти ткани отличаются по концентрации стволовых кроветворных клеток.

Так, в костном мозге 1-3 стволовых клеток приходится на 104 кариоцитов, в селезенке уже на 105, а в периферической крови – основном источнике гемопоэтических стволовых кле ток в легких – на 106. Через 12 дней после инъекций клеток различных тканей плотность капилляров во всех случаях достоверно меньше, по сравнению с интактной мышцей. В случае трансплантации миелокариоцитов и клеток селезенки количество сосудов до стоверно увеличивается, по сравнению с мышцей, в которую вводили физиологический раствор. В то же время при введении клеток легкого такого эффекта не наблюдается.

Эффективность восстановления микроциркуляторного русла в ишемизирован ной конечности в целом совпадает с содержанием в тканях стволовых гемопоэтических клеток: после введения взвеси клеток костного мозга – 62,4±10,2 капилляров на 1 мм2;

селезенки – 57±10,3 капилляров на 1 мм2;

легкого – 39,4±5,7 капилляров на 1 мм2).

Ткани костного мозга и легкого, использованные для получения взвеси трансплантируемых клеток, по нашим данным, не отличаются по количеству сосудов (2,22±0,12 и 2,1±0,19 на 0,01 мм2 соответственно), в то время как в селезенке число сосу дов значительно меньше – 0,18±0,01 на 0,01 мм2. Следовательно, можно предположить, что в сосудах костного мозга и легкого содержится одинаковое количество клеток пред шественников-эндотелиоцитов. Однако при трансплантации взвеси клеток легкого, по сравнению с костным мозгом, капилляров образуется меньше. А значит, вряд ли клетки, влияющие на ангиогенез, находятся в сосудах.

Ангиогенез может быть активирован ангиогенными факторами, выделяемыми трансплантируемыми клетками и, прежде всего, тучными. Согласно нашим исследова ниям наибольшее количество тучных клеток содержится в костном мозге 379000 на клеток, меньше в легких – 149000 на 107 клеток, и минимальное количество в селезенке – 48000 на 107 клеток. В то же время при введении в мышцы клеток костного мозга и селезенки образуется практически одинаковое количество капилляров, а значит, тучные клетки оказывают незначительную роль на процесс ангиогенеза.

Таким образом, проведенные исследования больше согласуются с утверж дением, что процесс ангиогенеза связан в основном с дифференцировкой истинных стволовых кроветворных клеток в эндотелиоциты, либо эндотелиальные клетки и кро ветворные клетки имеют общего предшественника.

1 клетОчные технОлОгии, тканевая инЖенерия меХанизмЫ реакЦии СтромаЛЬнЫХ СтвоЛовЫХ кЛеток и мононукЛеаров крови ЧеЛовека на биоСовмеСтимЫе материаЛЫ Хлусов и.а., 2Шаркеев Ю.п., 3пичугин в.Ф., 2Легостаева е.в., 4зайцев к.в., 1, рязанцева н.в., 1,5Чечина о.е., 1Сазонова е.в., 1биктасова а.к., 1Хлусова м.Ю.

1, Сибирский Государственный Медицинский Университет, 2Институт физики прочности и материаловедения СО РАН, 3НОЦ «Биосовместимые материалы и биоинженерия» при ТПУ и СибГМУ, 4Томский филиал Российского научного центра «Восстановительная травматология и ортопедия» им. академика Г.А. Илизарова Росмедтехнологий, НОЦ молекулярной медицины СибГМУ Росздрава, г. Томск Aim of investigation – research of in vitro cytokine secretion, processes of apoptosis and production of oxygen active forms (OAF) in cell cultures, topography and some param eters of artificial microterritories facilitating MMSC differentiation in osteogenous direction upon contact with implants coated by calcium-phosphate (CP) coatings. It was determined that cells regulating processes of acceptance/rejection of implants with different roughness were, first of all, blood mononuclear leukocytes. Upon contact with artificial surface, multipotent mesenchymal stromal cells actively show osteoblastic phenotype in the presence of structural functional units (osteogenous microterritories).

Для биоинженерии тканей актуален вопрос о топографии и размерах ниш для мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК). При использовании медицинских изделий развивается воспалительная реакция, активность и исход которой модулируется не только местными стромальными элементами, но и циркулирующими во фракции мононуклеаров крови иммунными клетками.

Цель исследования. Изучение in vitro секреции цитокинов, процессов апоп тоза и продукции активных форм кислорода (АФК) в клеточных культурах, топографии и некоторых параметров искусственных микротерриторий, способствующих дифферен цировке ММСК в остеогенном направлении при контакте с имплантатами с кальций фосфатными (КФ) покрытиями.

материалы и методы. Применяли подложки из наноструктурного титана (диаметр 12 мм, толщина 1 мм), несущие двусторонние КФ покрытия, на которые нано сили культуру пренатальных фибробластоподобных клеток легкого (источник ММСК) или мононуклеаров периферической крови человека, полученных центрифугированием на градиенте плотности 1,077 г/см3 Ficoll-Paque. Концентрацию TNF, IL-2, IL-4 в супер натантах определяли с помощью наборов для ИФА. Морфологию окрашенных клеток на поверхности имплантатов исследовали с помощью РЭМ и оптической микроскопии в отраженном свете.

результаты. Согласно секреторной активности культуры клеток (остеокаль цин, щелочная фосфатаза), ММСК, напрямую взаимодействующие с КФ дисками, полу чают преимущество в проявлении остеобластоподобной функциональной активности, по сравнению с культурой клеток на пластике. КФ шероховатые поверхности стимули руют формирование 3D-культуры фибробластоидных клеток человека. Клетки, пози тивно окрашивающиеся на кислую фосфатазу, располагаются на сферолитах, клетки, 1 клетОчные технОлОгии, тканевая инЖенерия воспринимающие щелочную фосфатазу (ЩФ, маркер остеобластов), заселяют углубле ния («ниши») искусственной поверхности. При этом «ниша» для индукции остеогенной дифференцировки ММСК человека является, по-видимому, структурно-функциональ ным понятием, выражающимся соотношением площади окраски клеток на ЩФ к пло щади занимаемой ею территории.

Тестируемые материалы обладают хорошей биосовместимостью на клеточном уровне, поскольку не вызывают увеличения апоптоза мононуклеаров крови и концен траций внутриклеточных АФК. Секреторная активность культуры фибробластоподоб ных клеток не зависела от шероховатости (Ra) КФ покрытий. В то же время, выявлена тесная связь Ra с секрецией мононуклеарами крови TNF (r= -0,80;

p=0,01;

n=9), Il- (r=0,69;

p=0,04;

n=9) и IL-4 (r=0,83;

p=0,006;

n=9).

выводы. 1. Клетками, регулирующими процессы приживления/отторжения имплантатов с разной шероховатостью, являются, в первую очередь, мононуклеары крови.

2. При контакте с искусственной поверхностью ММСК активно проявляют ос теобластный фенотип при наличии структурно-функциональных единиц (остеогенных микротерриторий).

Исследование выполнено при поддержке ФЦП (госконтракт 02.512.11.2285 от 10.03.2009), гранта РФФИ № 09-04-00287а.

новЫе поДХоДЫ к проГнозу кЛиниЧеСкоЙ ЭФФективноСти инЖенерии коСтноЙ ткани у боЛЬнЫХ неСоверШеннЫм оСтеоГенезом С иСпоЛЬзованием куЛЬтурЫ мононукЛеаров крови на иСкуССтвеннЫХ поДЛоЖкаХ Хлусов и.а., Литвяков н.в., нечаев к.а., Дворниченко м.в., больбасов е.н., Саприна т.в.

Томский филиал Российского научного центра «Восстановительная травматология и ортопедия» им. академика Г.А. Илизарова Росмедтехнологий, г. Томск Aim of investigation – in vitro estimation of connection of morphofunctional and molecular-genetic parameters of blood mononuclear leukocytes culture with clinical variants of Osteogenesis Imperfecta (OI), terms of rehabilitation period (therapy clinical effect), oppor tunity of forecasting grade of inflammatory (osteolytic) answer. It was determined that changes of parameters of blood mononuclear leukocytes culture could be considered as possible mark ers and predictors of OI course and terms of rehabilitation period of patients. Material of im plant used for surgical treatment of patients with OI is only a trigger of mononuclear processes connected with correlation of osteolytic (CrossLaps) and osteoblastic (osteocalcin) processes typical for bone remodeling in every OI patient.

У больных с несовершенным остеогенезом (НО) применение интрамедулляр ного биоактивного остеосинтеза способствует кратковременной коррекции скелетных 1 клетОчные технОлОгии, тканевая инЖенерия деформаций. Вместе с тем, интрамедуллярное введение спиц с кальцийфосфатным пок рытием является экстремальным фактором, приводящим к истощению регуляторных механизмов ремоделирования патологически измененной костной ткани. Для коррек ции и прогнозирования остеопении перспективным является поиск новых технологи ческих решений.

Манипуляции in vitro с культурами стромальных стволовых клеток и лейкоци тами крови человека на искусственных композитных материалах показали прямое (кон тактное) и опосредованное через цитокины и хемокины взаимодействие биологических и искусственных структур. При этом клетками-мишенями («стражниками»), контроли рующими реакции приживления/отторжения имплантатов, являются, в первую очередь, мононуклеары крови.

Цель исследования. Оценка in vitro связи морфофункциональных и моле кулярно-генетических параметров культуры мононуклеаров крови с клиническими вариантами НО, сроками реабилитационного периода (клиническим эффектом тера пии), возможностью прогнозирования степени воспалительного (остеолитического) ответа.

материалы и методы. В работе в качестве скеффолдов для краткосрочно го культивирования мононуклеаров периферической крови больных НО, выделенных на градиенте плотности Ficoll-Paque, применялись титановые диски диаметром 10 мм с двусторонними композитными кальцийфосфатными и полимерными (тефлоновыми) покрытиями.

результаты показали, что в периферической крови больных НО циркулиру ет значительное количество клеток, проявляющих при культивировании на пластике в остеогенной среде фибробластоидную морфологию, окраску на кислую фосфатазу, выраженную активность в отношении образования CrossLaps по мере нарастания кли нической тяжести заболевания. В то же время, созревание мононуклеаров крови в на правлении остеобластов, зафиксированное по секреции костного изофермента ЩФ, убывает в прямой зависимости от увеличения тяжести НО. Материал имплантата явля ется только триггером молекулярных процессов, связанных с соотношением остеоли тических (CrossLaps) и остеобластических (остеокальцин) процессов, характерных для костного ремоделирования у каждого больного НО.

Изучение экспрессии системы RANTES-CCR5 на мононуклеарах крови при их контакте с композитными материалами in vitro показало, что экспрессия гена RANTES может оказаться эффективной в развитии методов прогнозирования степени воспалительного (остеолитического) ответа, тогда как экспрессия гена CCR5 – репара тивного ремоделирования костной ткани в ответ на применение различных импланта тов у больных НО.

выводы. Описанные изменения параметров культуры мононуклеарных кле ток крови могут рассматриваться как вероятные маркеры и предикторы течения НО и сроков реабилитационного периода пациентов.

Исследования выполнены при поддержке грантов РФФИ № 09-04-00287а и № 09-04-99105-р_офи.

1 клетОчные технОлОгии, тканевая инЖенерия оЦенка анаЛиза на коЛониеобразуЮЩие еДиниЦЫ при ХарактериСтике образЦа пуповинноЙ крови Хрупина а., Логачев а., иволгин Д.а., Смолянинов а.б.

Покровский Банк Стволовых Клеток, Санкт-Петербург Human cord blood provides a convenient alternative to bone marrow as a rich source of hematopoietic progenitor cells. CFC-assay was performed for mononuclear fraction of cord blood samples. CFC-assay was conducted by typing adult blood cells, which were recognized in formed colonies after 14 days of culturing in full methylcellulose medium Methocult (Stem Cell Technologies). It was revealed, that 99,2 % of samples analyzed contain CFU able to give rise to all lineage of blood. It was concluded, that there is enough amount of functionally active hematopoietic progenitor cells in cord blood samples, stored in Pokrovskiy Stem Cells Bank.

Пуповинная кровь является богатым и перспективным для клинического при менения источником гемопоэтических стволовых клеток. Пуповинная кровь наравне с костным мозгом применяется для трансплантации при лечении онкогематологических заболеваний. Однако для достижения терапевтического эффекта необходимо, чтобы об разец пуповинной крови содержал достаточное количество функционально активных гемопоэтических стволовых клеток, которые могут развиваться как в лимфоидном, так и в эритроидном и миелоидном направлениях – колониеобразующих единиц.

Содержание колониеобразующих единиц оценивалось в мононуклеарной фракции из образцов пуповинной крови, собранных во время родов до рождения пла центы. Мононуклеарная фракция выделялась автоматическим способом на клеточном сепараторе Sepax S-100 (Biosafe, Швейцария). Анализ на содержание колониеобразую щих единиц проводился путем типирования зрелых клеток крови, имеющихся в обра зовавшихся колониях через 14 суток культивирования в полной 1% метиллцеллюлозной среде MethoCult (Stem Cell Technologies), содержащей 30% фетальной бычьей сыворотки, 1% альбумина коровьей сыворотки, 3 U/mL эритропоэтина, 10-4 M 2-меркаптоэтанола, 2 mM L-глутамина, и следующие цитокины: фактор стволовых клеток, GM-CSF, IL-3, IL-6 и G-CSF. Исходное количество клеток составляло 0,5-2Ч104 в каждой чашке Петри.

Каждый анализ был продублирован.

Было выявлено, что 99,2% проанализированных образцов содержат колоние образующие единицы, способные давать клетки крови всех линий дифференцировки.

Среди образовавшихся колоний, в среднем, 28% составили BFU-E, 1%-CFU-E, 15% CFU-M, 4%-CFU-G, 38%-CFU-GM и 14%-CFU-GEMM. Общее среднее количество об разовавших колоний составило 162,4±9,5 (p0,001), что свидетельствует о наличии в достаточном количестве функционально активных гемопоэтических стволовых клеток в образцах пуповинной крови, хранящихся в «Покровском банке стволовых клеток».

Таким образом, все образцы пуповинной крови, заложенные на хранение в ПБСК, соответствуют международным требованиям.

1 клетОчные технОлОгии, тканевая инЖенерия ДеЙСтвие проЛином боГатоГо поЛипептиДа на проЛиФераЦиЮ муЛЬтипотентнЫХ мезенХимаЛЬнЫХ СтромаЛЬнЫХ кЛеток IN VITRO и иХ СоДерЖание в коСтном мозГе Чайлахян р.к., 1Герасимов Ю.в., 1Чайлахян м.р., 2Галоян а.а.

НИИЭМ им. Н.Ф.Гамалеи РАМН, Москва, Россия, Институт биохимии им. Г.Х. Бунятяна НАН РА, г. Ереван, Армения In the present study we carried out experiments in vivo and in vitro and investigated the effect of proline-rich-polypeptide (PRP) on the proliferation and content MMSCs in bone marrow. Various routes and doses of PRP administration of rats showed that the maximum increase (in 5-9 times) of MMSCs content in bone marrow can be observed on the 14th day at i.m.administration of 5 µg polypeptide. Proliferative activity of MMSCs in vitro was growing from 2 to 3 times depending on terms of cultivation.

Методы клеточных технологий находят все более широкое применение в кли нике при заместительной клеточной терапии, реконструктивных операциях на костной и хрящевой тканях и т.д. Аутогенные стволовые клетки стромы костного мозга или мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки (ММСК), после гемопоэтичес ких стволовых клеток (ГСК), являются наиболее перспективными для использования в медицинской практике. В организме все процессы жизнедеятельности стволовых клеток содержащихся в костном мозге, как и многих других клеточных популяций, контро лируются различными ростовыми факторами, которые могут, как активизировать про лиферацию, так и вовлекать покоящиеся клетки в пролиферацию и дифференцировку.

В клинике онкогематологии широкое распространение получил метод мобилизации в кровоток гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) путем введения больному ростового фактора G-CSF. В литературе отсутствуют данные о каких-либо ростовых факторах или иных веществах способных увеличивать содержание ММСК в костном мозге при его введении в организм, а сведения о влиянии ростовых факторов на пролиферативную активность клеток in vitro носят противоречивый характер.

В настоящей работе в опытах in vivo и in vitro изучали действие пролином богатого полипептида (ПБП), впервые выделенного А.А.Галояном и его сотрудниками из нейросекреторных гранул N. Supraopticus и N. Paravenricularis бычьего гипофиза, на пролиферативную активность и содержание ММСК в костном мозге.

Для изучения действия ПБП на содержание ММСК в костном мозге полипептид вводили крысам в 0,5 мл физиологического раствора в/в, в/м и в/ бр. Животные были раз делены на 4 группы по 3 крысы в каждой. 1-ой группе вводили 1 мкг ПБП, 2-й – 5 мкг, 3-й – 10 мкг, 4-й контрольной 0,5 мл физиологического раствора. Реакцию стромальной ткани косного мозга, независимо от способа введения изучали на 7 и 14 день. Изучение действия ПБП на пролиферативную активность проводили на культурах ММСК человека и морс кой свинки II-III пассажа. В 12 флаконов площадью дна 25 см2 засевали 3Ч104 клеток при культивировании в течение 4-х дней и 1Ч104 клеток при культивировании в течение 8 дней.

Все флаконы были разделены на 4 группы по 3 флакона в каждой. Во флаконы 1-й группы добавляли 1 мкг ПБП на флакон, 2-й – 5 мкг, 3-й -10 мкг, 4-я группа служила контролем.

1 клетОчные технОлОгии, тканевая инЖенерия Различные способы и дозы введения ПБП крысам показали, что наибольшее увеличение (в 5-9 раз) содержания ММСК в костном мозге крыс наблюдалось на 14 день в/м введения 5 мкг полипептида. Лишь доза в 10 мкг при в/в введении к 14 дню приво дит к близким по значениям увеличению (в 4 раза) содержания ММСК в костном мозге.

Данные исследований пролиферативной активности ММСК показали, что добавление ПБП при 4-х дневном культивировании приводит к двукратному, а при 8 дневном к трехкратному увеличению пролиферативной активности и это увеличение не зависит от концентрации полипептида.

Актуальность и своевременность полученных данных определяется в первую очередь возможным сокращением времени наращивания клеточной массы при кли ническом использовании. Известно, что на высоких пассажах увеличивается частота хромосомных аберраций возможно изменение фенотипа клеток, снижение их пролифе ративных и дифференцировочных потенций.

СозДание оСтеоинДуктивнЫХ материаЛов новоГо покоЛениЯ ДЛЯ реГенераЦии коСтноЙ ткани на оСнове рекомбинантнЫХ морФоГенетиЧеСкиХ беЛков СемеЙСтва вмр Чеканов а.в., 1Фадеева и.С., 2Лекишвили м.в., 1акатов в.С.

Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино, ФГУ ЦИТО Н.Н.Приорова, Москва Benefits in application of morphogenetic proteins of BMP family for increase in biocompatibility of materials used in traumatology and orthopedy are discussed. The results of study of osteoinductive activity of materials, which were developed by the authors using BMP 2, are presented.

Задача регенеративного восстановления костной ткани является основопола гающей для современной травматологии, ортопедии и челюстно-лицевой хирургии. В настоящее время в мире активно проводятся работы, направленные на создание осте оиндуктивных материалов нового поколения, основанных на применении морфогене тических белков кости семейства ВМР, в первую очередь ВМР-2. Белки семейства ВМР являются одним из ключевых факторов в ремоделировании и регенерации костной тка ни. Эти белки обладают мощным остеоиндукторным действием и способны стимулиро вать образование новой костной ткани путем дифференцировки мезенхимальных клеток в функционально активные остеобласты. Указанное свойство белков ВМР послужили основой для их применения в ткане-инженерных материалах с целью повышения их остеоиндуктивности. С 2002 года в США и Европе началось использование в клиничес кой практике первого материала на основе рекомбинантного человеческого белка BMP- под коммерческим названием «Infuse». К 2007 году было выполнено около 1 миллиона операций с применением этого материала. В настоящем докладе рассматриваются про блемы, связанные с применением белков ВМР при разработке новых остеоиндуктивных материалов.

1 клетОчные технОлОгии, тканевая инЖенерия В нашей лаборатории была разработана технология получения белка ВМР-2.

Кроме этого разрабатываются новые материалы, содержащие ВМР-2 в качестве остеоин дуктивного компонента. Полученные нами материалы обладают высокой остеоиндук тивностью, о чем свидетельствует образование нового коллагена и депозитов кальция при подкожный имплантации крысам на срок 1,5 месяца. Следующим шагом в работе является изучение регенерации костной ткани в моделях ортотопической имплантации крупным лабораторным животным, создание новых биополимерных материалов с ис пользованием в них ВМР-2. Для создания таких материалов особый интерес вызывает выявление тех областей медицины, в которых их применение будет востребовано и на иболее эффективно.

изуЧение вЛиЯниЯ кЛеток ито пеЧени на СтвоЛовЫе кЛетки Шафигуллина а.к., трондин а.а., Шайхутдинова а.р., калигин м.С., Газизов и.м., ризванов а.а., Гумерова а.а., киясов а.п.

ГОУ ВПО «Казанский Государственный Медицинский Университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Intercellular communication might be realized by paracrine secretion and direct cell-to-cell contacts. It is known that hepatic perisinusoidal cells (HPC) establish regional stem cells niche and determine their differentiation. At the same time HPC remain poorly character ized on molecular and cellular level.

The aim of project was to study interactions between rat hepatic perisinusoidal cells and various stem cells such as mononuclear cell fraction of human umbilical cord blood (UCB-MC) and rat bone-marrow derived multipotential mesenchymal stromal cells (BM-MMSC).

Materials and methods. Rat BM-MSC and HPC, human UCB-MC cells were de rived using standard techniques. To study HPC paracrine regulation we co-cultured UCB MC or BM-MMSC cells with HPC using Boyden chambers and conditioned HPC cells media.

Differentially labeled cells were co-cultured and their interactions were observed by phase contrast fluorescent microscopy and immunocytochemistry.

Results. During the first week of cultivation there was autofluorescence of vita min A because of fat-storing ability of PHC. BM-MMSC demonstrated high viability in all co-culture models. After 2 day incubation in conditioned media co-culture of BM-MMSC with HPC we observed changes in morphology of MMSC – they decreased in size and their sprouts became shorter. The expression of -Smooth Muscle Actin and desmin was similar to myofibroblast – an intermediate form of Ito cells culture in vitro. These changes could be due to paracrine stimulation by HPC. The most profound effect of HPC on UCB MC cells was observed in contact co-culture, thereby it is important for UCB-MC cells to create direct cell-to-cell contacts for maintaining their viability. We did not observe any cell fusion between HPC /UCB and HPC /BM-MMSC cells in co-cultures. In our further experiments we plan to study growth factors produced by HPC for hepatic differentiation of stem cells.

клетОчные технОлОгии, тканевая инЖенерия введение. Особый интерес среди многообразия клеток печени представляют перисинусоидальные клетки печени (клетки Ито). Благодаря секреции факторов роста и компонентов межклеточного матрикса они создают микроокружение гепатоцитов, а в ряде научных исследований была показана способность звездчатых клеток печени к формированию микроокружения для прогениторных клеток (в том числе, гемопоэти ческих) и влиять на их дифференцировку в гепатоциты. Межклеточные взаимодействия этих популяций клеток могут осуществляться путем паракринной секреции факторов роста или непосредственных межклеточных контактов, однако молекулярные и клеточ ные основы этих процессов остаются до конца неизученными.

Цель исследования. Изучение механизмов взаимодействия клеток Ито с ге мопоэтическими (ГСК) и мезенхимальными (ММСК) стволовыми клетками в условиях in vitro.

материалы и методы. Клетки Ито печени крыс выделены двумя различ ными ферментативными методами. Одновременно из костного мозга крыс получены стромальные ММСК. Мононуклеарная фракция ГСК выделена из пуповинной крови человека. Паракринные влияния клеток Ито были исследованы при культивировании ММСК и ГСК в среде, в которой росли клетки Ито, и при совместном культивировании клеток, разделённых полупроницаемой мембраной. Влияние межклеточных контактов было изучено при совместном ко-культивировании клеток. Для лучшей визуализации каждая популяция была мечена индивидуальной флуоресцентной меткой. Морфологию клеток оценивали методами фазово-контрастной и флуоресцентной микроскопии.

Фенотипические признаки культивируемых клеток изучали методами иммуноцитохи мического анализа.

результаты. В течение недели после выделения перисинусоидальных клеток нами отмечена способность их к аутофлюоресценции благодаря жиронакапливающей способности. Далее клетки перешли в промежуточную фазу своего роста и приобрели звёздчатую форму. На начальных этапах ко-культивирования клеток Ито с ММСК кост ного мозга крысы жизнеспособность ММСК сохранялась во всех вариантах культивиро вания. На вторые сутки при культивировании ММСК в культуральной среде клеток Ито происходило изменение морфологии ММСК – они уменьшались в размерах, отростки укорачивались. Экспрессия альфа-гладкомышечного актина и десмина в ММСК увели чивалась, что свидетельствовало об их фенотипическом сходстве с миофибробластами – промежуточной стадией роста активированных клеток Ито in vitro. Полученные нами данные свидетельствуют о влиянии паракринных факторов, выделяемых клетками Ито, на свойства ММСК в культуре.

На основании ко-культивирования кроветворных стволовых клеток с клетка ми Ито показано, что ГСК сохраняют жизнеспособность только при контактном ко-куль тивировании с клетками Ито. По данным флуоресцентного анализа смешанных культур феномен слияния клеток разных популяций выявлен не был.

выводы. Для сохранения жизнеспособности кроветворных стволовых клеток решающим фактором является наличие непосредственных межклеточных контактов с клетками Ито. Паракринная регуляция была отмечена только при культивировании ММСК в питательной среде, в которой росли клетки Ито. Изучение влияния конкрет ных факторов, вырабатываемых клетками Ито, на дифференцировку ГСК и ММСК в культуре клеток планируется провести в следующих исследованиях.

клетОчные технОлОгии, тканевая инЖенерия разработка биоДеГраДируемЫХ поЛимернЫХ матриЦ ДЛЯ куЛЬтивированиЯ и транСпЛантаЦии кЛеток коЖи ЧеЛовека Швед Ю.а., 1кухарева Л.в., 1блинова м.и., 1, билибин а.Ю., 1пинаев Г.п.

Институт цитологии РАН, 2Санкт-Петербургский Государственный Университет, Санкт-Петербург Presented project is aimed to work out materials and method of keratinocyte cultur ing for burns treatment by cell monolayer transplantation on resorbable film substrates.

In our study we used biodegradable polymers – poly (DL-lactide) (PLA). We modi fied surfaces of PLA substrates by coating with collagen e.

The effect of the improved surface by treating methods was estimated by means of scanning electron microscopy (SEM) different analytical chemistry methods. The cell affinity of the PLA matrix before and after the surface modification was also evaluated on cell mor phology and spreading of cultivated keratinocytes and actin cytoskeleton.

Восстановление поврежденного кожного покрова с помощью клеток эпидерми са – кератиноцитов, в настоящее время используется в медицинской практике. Однако, не смотря на клиническое использование, существуют недостатки этого метода. Один из таких недостатков является обработка клеток протеолитическими ферментами. Часть адгезионных рецепторов при этом повреждается. Перенос клеток вместе с матрицей поз волит исключить процедуру обработки клеток ферментами.

Целью данной работы является разработка биодеградируемых матриц, пред назначенных для культивирования и трансплантации клеток кожи человека.

Такой материал должен быть нетоксичен, биодеградируем и способствовать клеточной адгезии и пролиферации.

Этим требованиям отвечает полимер на основе молочной кислоты – поли (D,L-лактид). Однако, гидрофобный характер поверхности матриц, приготовленных на его основе, требует дополнительной модификации.

Модификацию матриц проводили путём нанесения на их поверхность бел ка внеклеточного матрикса – коллагена. На интактные и модифицировнные матрицах культивировали кератиноциты. С помощью методов сканирующей электронной, имму нофлюоресцентной и световой микроскопий оценивали количество клеток и степень их распластанности. Показано, что предложенные методы нанесения коллагена увеличива ют адгезию и пролиферацию клеток на поверхности.

клетОчные технОлОгии, тканевая инЖенерия оСобенноСти репаративнЫХ проЦеССов при иСпоЛЬзовании аутоГеннЫХ муЛЬтипотентнЫХ мезенХимаЛЬнЫХ СтромаЛЬнЫХ кЛеток на ДеминераЛизованном коСтном транСпЛантате при ЛеЧении ЛоЖнЫХ СуСтавов беДренноЙ и боЛЬШеберЦовоЙ коСтеЙ Щепкина е.а., кругляков п.в., Соломин Л.н., зарицкий а.Ю., тихилов р.м., полынцев Д.Г.

ФГУ «РоссНИИТО им. Р.Р. Вредена Росмедтехнологий», ООО «Транс-Технологии», ГОУ ВПО «СПбГМУ им. академика И.П. Павлова Росздрава», Санкт-Петербург In the limited clinical study of non-unions treatment bone grafting by demeneralized bone allogenic graft with and without autologous MMSC, and external fixation were used. The fixation period in base group (18,9±4,7 weeks (p5%) was nearly 1,7 times shorter then that in control group (32,85±2,03 weeks (p2,3%). When MSC were used, we could observe: presence of osteogenesis in the graft, accomplishing of consolidation through the graft, absence of sig nificant periosteal callosity. In remote time medullar cavity formation is observed threw out the region of grafting at period from 6 months till 4 years. In the control group graft was slowly re placed by bone tissue from the ends of bone fragments with periosteal callus formation, which was safe in remote time. No recanalization is observed in 4 years period. The demeneralized bone allogenic grafts, seeded with autologous MMSC, have osteoinductive and osteocondac tive abilities as well as ability of additional sites of osteogenesis formation.

На основе экспериментальных исследований (Кругляков П.В. и соавт. 2005), в которых было получено костеобразование в заселенном сингенными мультипотентны ми мезенхимальными стромальными клетками (ММСК) деминерализованном костном трансплантате при замещении костных дефектов, нами разработан способ лечения лож ных суставов (Патент РФ № 2309756). Целью клинического исследования являлось срав нение процессов костной репарации и результатов лечения ложных суставов бедренной и большеберцовой костей предложенным способом и при использовании деминерализо ванного костного трансплантата (контрольная группа).

Аутогеные ММСК (фенотип CD 34-;

CD 45-;

CD 44+;

CD 90+;

CD 105+;

CD 106+), выделенные из костного мозга пациента, заселяли на деминерализованные костные ал лотрансплантаты (ДКТ) с плотностью 7-10 млн на 1 смі. Подготовленные трансплантаты использовали для костной пластики после резекции ложного сустава и открытой адап тации фрагментов. Во всех случаях применяли чрескостный остеосинтез. Аппараты внешней фиксации демонтировали после проведения клинической пробы при рентге нологической картине консолидации. По предложенному методу оперировано 15 паци ентов. Сравнение процессов костной репарации и результатов лечение проведено в 2-х группах больных в возрасте от 25 до 59 лет с ложными суставами бедренной и боль шеберцовой костей: 10 пациентов лечились по предложенному методу, и у 10 больных произведена костная пластика деминерализованным костным трансплантатом без за селения ММСК. Рентгенографию и компьютерную томографию (КТ) выполняли раз в месяц.

20 клетОчные технОлОгии, тканевая инЖенерия Кроме разницы в сроках демонтажа аппарата внешней фиксации – в основной группе они соответствовали срокам сращения переломов (18,9±4,7 недель (p5%) и были в 1,7 раза меньше, чем в контрольной группе (32,85±2,03 недель (p2,3%), при анали зе данных рентгенологического исследования и компьютерной томографии в случаях применения трансплантатов, заселенных аутогенными ММСК, отмечены следующие особенности: сращение происходило преимущественно через костный трансплантат, в котором быстрее происходило образование компактной кости;

в трансплантате отмече но формирование очагов остеогенеза с последующим их слиянием;

отсутствовала вы раженная периостальная мозоль;

выявлено формирования костно-мозгового канала на всем протяжении костной мозоли и области костной пластики в сроки от 6 месяцев до лет;

плотность трансплантатов сохранялась более высокой, чем в прилежащих участках костных фрагментов в отдаленном периоде. В контрольной группе рентгено-томографи ческое исследование показало: постепенное замещение трансплантата костной тканью со стороны костных фрагментов;

отмечено формирование выраженного периостального компонента костной мозоли, которая сохраняется и в отдаленном периоде;

восстановле ния костно-мозгового канала не отмечено в сроке до 4-х лет.

Заселенный ММСК деминерализованный костный аллотрансплантат прояв ляет как остеоиндуктивные, так и остеокондуктивные свойства, в нем формируются самостоятельные очаги остеогенеза, трансформирующиеся в последующем в компакт ную кость;

быстрее, чем в контрольной группе происходит восстановление нормальной костной структуры.

вЛиЯние СпоСоба ввеДениЯ муЛЬтипотентнЫХ мезенХимаЛЬнЫХ СтромаЛЬнЫХ кЛеток на воССтановЛение СтруктурЫ меЖпозвоноЧноГо ДиСка Юхта м.С., волкова н.а., Гончарук е.и., Грищенко в.и.

Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков, Украина Therapeutic potential of multipotent mesenchymal stromal cells at the degenerative intervertebral disk damage depending on the method of their introduction was studied. It was histologically shown that cell introduction on a carrier is less traumatic than their injection into degenerative disk.

Цель исследования. Оценка терапевтического потенциала мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК) при дегенеративно-дистрофичес-ком повреждении межпозвонковых дисков (МПД) в зависимости от способа их введения.

материалы и методы. Исследование проведено на 60 взрослых крысах самцах массой 350–400 г. У всех животных моделировался физиологический изгиб позвоночника человека путем резекции хвоста на уровне СсXX-XI и фиксирования обра зовавшейся культи под кожу спины краниальнее люмбально-сакрального сочленения.

Животным первой группы на 60 день моделирования патологии инъекционно вводили 5Ч105 культивированных ММСК в объеме 0,1 мл непосредственно в поврежденный диск.

клетОчные технОлОгии, тканевая инЖенерия Животным второй группы вводили то же количество ММСК на коллагеновой губке, ко торую укладывали на поврежденный диск в сформированное из мягких тканей хвоста ложе. Контролем служили животные, которым моделировали дегенеративно-дистрофи ческое повреждение МПД без каких-либо последующих вмешательств. Терапевтический эффект оценивали на 30 сутки после введения ММСК при помощи гистологических ме тодов исследования. Манипуляции проводили в соответствии с «Общими принципами экспериментов на животных», одобренными II Национальным конгрессом по биоэтике (20.09.2004 г., Киев, Украина).

результаты. Микроскопически на 60 сут. моделирования патологии в краевых отделах фиброзного кольца (ФК) наблюдались расслоение и фрагментация пучков колла геновых волокон, обширные трещины и щели, снижение плотности фиброхондроцитов, их отсутствие на участках вокруг щелей. В пульпозном ядре плотность нотохордаль ных клеток тоже была снижена, обнаруживалось большое количество лизированных клеток. При этом у животных, которым ММСК были введены на коллагеновой губке, определялось частичное восстановление структуры МПД: ФК имело пластинчатую ор ганизацию без трещин и щелей с плотными пучками коллагеновых волокон, по ходу и внутри которых располагались фибробластоподобные вытянутые клетки с овоидными ядрами. При этом центральные участки ФК, по своей локализации соответствующие расположению трещин на гистологических препаратах животных при моделировании патологии, оставались бесклеточными. Ход пучков коллагеновых волокон нарушен не был, волокна располагались радиально. Со стороны пульпозного ядра и тел позвонков выраженных изменений найдено не было. В гистологических препаратах МПД живот ных, которым ММСК вводили инъекционным путем, также присутствовали признаки регенерации тканей диска. Но в большинстве случаев в месте введения суспензии клеток отсутствовала характерная для МПД пластинчатая структура ФК. Вместо этого кольцо было представлено фиброзной тканью. У животных контрольной группы характерная для МПД морфология сохранялась, но при этом сохранялись и признаки его дегене ративно-дистрофического повреждения: расслоение пластин коллагеновых волокон, сниженная плотность фиброхондроцитов в ФК, наличие участков полного отсутствия клеток в нем, фрагментация синцития и сниженная плотность нотохордальних клеток в пульпозном ядре.

Таким образом, спустя месяц после локального введения ММСК в дегенера тивно измененный МПД обнаруживаются достаточно четкие признаки восстановления его структуры. При этом оптимальным из исследованных нами способов введения сле дует считать менее травматичный способ введения на носителе. Вероятней всего, при инъекционном введении ММСК происходит существенное травматическое поврежде ние коллагеновых волокон ФК, что в свою очередь сказывается на дальнейшем ходе ре генерации его структуры.

20 кЛиниЧеСкие аСпектЫ тканевоЙ транСпЛантоЛоГии 20 клинические аспекты тканевОЙ трансплантОлОгии иСпоЛЬзование кортикаЛЬнЫХ аЛЛотранСпЛантатов при реконСтрукЦии паЛЬЦев киСти александров н.м., петров С.в., ручкина е.в.

ФГУ «Нижегородский НИИ травматологии и ортопедии Росмедтехнологий», г. Нижний Новгород The technology of use cortical allogenic grafts at the reconstruction of fingers by distraction of lengthening stump of a finger and moving osteocutaneous radial flap is described in this article.

Улучшение результатов реконструкции пальцев кисти сохраняет свою акту альность и на современном этапе развития хирургии.

Цель исследования. Изучить возможности применения кортикальных алло трансплантатов для улучшения результатов реконструкции пальцев кисти.

материалы и методы. В Нижегородском НИИТО разрабатываются 2 направ ления в использовании костных аллотрансплантатов при реконструкции пальцев:1) для стимуляции костеобразования при дистракционном удлинении культей пальцев, пястных костей, перемещении культей;

2) для уменьшения донорского изъяна при пластике лучевым кожно-костным лоскутом. В первом случае из кортикального ал лотрансплантата формировали стержень (размерами 0,5 на 10,0 см), который вводится интрамедулярно через дистрагированный дистальный и проксимальный фрагменты пястной кости с сохранением регенерата (Патент РФ № 2260394). При выполнении осе вого дистракционного перемещения дистального фрагмента пястной кости на первом этапе осуществляли -образную остеотомию пястной кости на протяжении диафиза и метафизов. После разведения костных фрагментов аллостержень также вводили ин трамедуллярно через фрагменты пястной кости с сохранением регенерата. При этом добивались хорошего контакта трансплантата с фрагментами пястной кости не только в области дистального и проксимального концов, но и боковых поверхностей (25 боль ных). Фрагменты пястной кости дополнительно фиксировали к трансплантату (Патент РФ № 2145812). Во втором случае с помощью аналогичного кортикального трансплан тата восполняли толщину костной основы пальца, восстановленного за счет переме щения фрагмента лучевой кости на сосудистой ножке (11 больных). Использование аллотрансплантата позволило осуществить забор фрагмента лучевой кости неболь шой толщины и минимизировать этим утрату ее прочностных свойств (Патент РФ № 2201161). Кроме того, с помощью кортикального аллотрансплантата также замещали дефект лучевой кости, что позволило сохранить его прочностные свойства и обеспе чить профилактику перелома лучевой кости в области забора трансплантата (Патент РФ №2210334).

результаты и обсуждение. Все пересаженные трансплантаты прижили. Во всех наблюдениях отмечены консолидация трансплантата с фрагментами пястных костей и лучевой кости, сохранение достигнутой длины костного остова пальца и вос становление схвата кисти. При пластике краевого дефекта лучевой кости переломов в донорской области не отмечали. Кортикальные аллотрансплантаты хорошо консолиди ровались с реципиентным ложем с последующей их полной перестройкой.

20 клинические аспекты тканевОЙ трансплантОлОгии коЛЛаГен, вЫДеЛеннЫЙ новЫм СпоСобом из кСенотканеЙ – компонент пЛЁноЧноГо покрЫтиЯ ДЛЯ ЛеЧениЯ оЖоГов и ран коЖи атясова м.Л., Денисов в.м., анфимов п.е., алейник Д.Я., бушуев Ю.и., зимин Ю.в., пылаева С.и., аминев а.в., куприянов в.а., поято т.в., Сивкова т.в., Стручков а.в.

ФГУ «Нижегородский НИИТО Росмедтехнологий», г. Нижний Новгород The new method of the collagen isolating from xenogeneic tissues was developed. Such collagen is used as the component of the wound film cover (WFC) that was created in our labora tory. Collagen layer consists DBM powder on its surface. It was experimentally established that WFC intensified regeneration in mechanical wounds and decrease time of their healing.

WFC was used for treatment 125 patients aged from 7 month to 67 years with burns (II-III degree), donor sites, trophic ulcers and also 5 patients with mechanical wounds. The positive outcomes were observed at all these cases. The wound epitelisation under WFC com pleted in 5±1 days sooner then, that in the control areas. Complications of the wound healing process were not observed in all patients.

Коллагенсодержащие раневые покрытия находят широкое применение при местном лечении ожогов и ран кожи (Lasovic G. et al. 2005). Известно, что деминерали зованный костный матрикс (ДКМ) способен активизировать репаративные процессы в кожной ране (Мовсарова З.М. 1998). Этим свойством обладает как аллогенный, так и ксеногенный ДКМ (Анфимов П.Е. с соавт. 2006).


В целях ускорения и упрощения выделения коллагена из биологических тка ней нами был разработан новый способ его получения из дермы и деминерализован ного костного матрикса (ДКМ) ксеногенного происхождения. Технологическая схема включает следующие операции: подготовку и измельчение ксенотканей, обработку 10% раствором щёлочи, промывку материала в проточной воде, растворение в уксусной кис лоте, осаждение из кислотного раствора ацетоном, промывку в дистиллированной воде и высушивание (Патент РФ № 2322249).

Коллаген использовали как компонент комплексного плёночного покрытия (КПП), формирующего внутренний по отношению к раневой поверхности слой, на кото рый наносили измельчённый ксеногенный ДКМ. Внешний слой КПП выполнен из ага ра. Для подавления раневой микрофлоры в покрытие введены антисептик и антибиотик (Патент РФ № 2136318).

В эксперименте in vivo (130 крыс) на модели стандартной полнослойной скаль пированной раны был установлен выраженный ранозаживляющий эффект, выражающий ся в сокращении сроков эпителизации ран, укрытых КПП в среднем на 10-15 суток по сравнению с контролем (заживление под струпом). Гистологическими исследованиями ус тановлено более раннее, чем в контроле, появление и созревание грануляционной ткани, увеличение продукции коллагена и более выраженное развитие эпидермальных регенера тов с базальным слоем. Эксперименты, проведённые на культуре фибробластов, выявили аттрактивное и пролиферативное воздействие частиц ДКМ на эти клетки. Было отмечено уменьшение количества микроорганизмов в инфицированных ранах, укрытых КПП.

клинические аспекты тканевОЙ трансплантОлОгии КПП применяли для лечения 125 пациентов в возрасте от 7 месяцев до 67 лет с ожогами II-III А, III Б степени на площади от 0,5 до 50% поверхности тела и донорскими ранами. При этом наблюдались уменьшение болевых ощущений и сокращение сроков полной эпителизации ран на 5±1 сутки. При укрытии КПП сетчатых аутотрансплан татов снижался риск их смещения, эпителизация в ячейках укрытых трансплантатов наступала на 7±0,3 суток раньше, чем в не укрытых. При наложении КПП на небольшие рубцово-трофические язвы (40 пациентов) наблюдалось их полное заживление за счёт прикраевой эпителизации. КПП применяли в амбулаторных условиях у 5 больных со скальпированными ранами. Во всех случаях отмечено сокращение сроков заживления ран. Осложнений течения раневого процесса не обнаружено.

опЫт ЛеЧениЯ обШирнЫХ ДеФектов ДЛиннЫХ коСтеЙ ниЖниХ конеЧноСтеЙ бабич м.и., брижань Л.к., артемьев в.а.

ФГУ «ГВКГ им. Н.Н.Бурденко Минобороны России», Москва The treatment of massive defects of lower extremity long tubular bones is a difficult and not completely solved problem of modern orthopedics. The main problems in the therapy of massive defects were the following: long-term maturation of regenerative tissue and no consolida tion of pseudarthrosis in the zone of bony fragment joining. The use of biocompositional material based on the synthetic hydroxyapatite allows accelerating the processes of distraction regenera tive tissue maturation and pseudarthrosis consolidation in the zone of fragment joining.

Лечение обширных дефектов длинных трубчатых костей нижних конечностей является трудной и до настоящего времени окончательно нерешенной проблемой совре менной ортопедии.

В отделении реконструктивной и восстановительной хирургии центра трав матологии и ортопедии ГВКГ им. Н.Н.Бурденко проводится лечение дефектов длинных трубчатых костей, образовавшихся в результате огнестрельных ранений, после резек ции кости на протяжении по поводу посттравматического (послеоперационного) остео миелита и злокачественных опухолей кости.

Проанализированы 42 случая лечения дефектов длинных трубчатых костей нижних конечностей. В 19 случаях имели место постогнестрельные дефекты (бедренной кости 6 случаев, костей голени 12 случаев и в 1 случае обширный дефект костей состав ляющих коленный сустав). В 23 случаях дефекты образовались в результате резекции кости по поводу хронического остеомиелита или злокачественной опухоли (бедренной кости 9 случаев, большеберцовой кости 12 случаев и в 2 случаях дефект костей состав ляющих коленный сустав). Протяженность дефектов составляла от 7 до 45 см.

В 22 случаях применена несвободная костная пластика по Илизарову с замещением дефекта кости регенератом и в 1 случае артродез коленного сустава в аппарате Илизарова.

Основными проблемами в лечении обширных дефектов являлись: длительные сроки созревания регенерата и несращение ложного сустава в зоне стыковки костных фрагментов после замещения дефекта.

клинические аспекты тканевОЙ трансплантОлОгии Во всех случаях выполнялась костная аутопластика трансплантатами из греб ней подвздошных костей с целью стимуляции остеогенеза и сращения ложных суставов.

В 7 случаях длительного созревания костного регенерата повторно выполнена костная аутопластика трансплантатами из гребней подвздошных костей в сочетании с пласти кой биокомпозиционным материалом на основе синтетического гидроксиаппатита под фирменным названием «КоллапАн». В 2 случаях обширных дефектов бедренной кос ти после формирования атрофического регенерата и ложного сустава зоны стыковки фрагментов выполнена повторная комбинированная ауто-, алло- и ксенопластика сво бодными трансплантатами малоберцовой кости, консервированными кортикальными аллоимплантатами, изготовленные в тканевом банке ЦИТО, и «КоллапАном».

Анализ рентгенограмм показал, что внедрение в практику «КоллапАна» поз волило ускорить процессы созревания дистракционного регенерата и сращения лож ных суставов в зоне стыковки фрагментов. Кроме того, во всех случаях применения «КоллапАна» отмечено отсутствие инфекционных осложнений и заживление ран пер вичным натяжением.

Таким образом, наш опыт лечения больных с обширными дефектами длинных трубчатых костей позволяет сделать следующие выводы: применение «КоллапАна» зна чительно стимулирует созревание дистракционного регенерата, позволяет добиться бо лее раннего сращения ложных суставов в зоне стыковки костных фрагментов и добиться первичного заживления раны.

новЫЙ пЛаСтиЧеСкиЙ материаЛ в практике ДетСкиХ оФтаЛЬмоЛоГов баракина о.Ю.

Морозовская детская городская клиническая больница, Москва Demineralized bone implants, developed and patented at the Federal State in stitution «N.N. Priorov Central Research Institute of Traumatology and Orthopedics of Rosmedtechnologies» are used with success as a plastic material for traumatic damages in child’s ophthalmosurgery.

There are the following stages in demineralized bone implant’s manufacturing: do nor material’s capture (bone fragments of the arch of skull);

mechanical clearing, blood and fat removal;

demineralization with hydrochloric acid’s solution in different time intervals;

lyophi lization and sterilization with a stream of fast electrons in a dose of absorption 20-25 kGy.

The offered plastic material has the following advantages: donor bones of the arch of skull are the most physiological material caused by general embryonic origin for defect’s replacement in this area of skeleton;

implants possess the area capable to replace even consid erable size of bone defects;

elasticity and plasticity of implants allow to give various forms to the material;

high degree of configuration with combination of low residual humidity allows to saturate the implants with solutions of antibiotics and hydrocortisone in necessary concentra tion that reduces the risk of postoperational complications;

implant’s replacement begins in 2-3 months after osteoplastic surgery.

The control over reorganisation of bone tissue is performed by CT. The results of child’s osteoplastic surgery are estimated highly – about 98% of recovery.

клинические аспекты тканевОЙ трансплантОлОгии Причины и проблемы детского травматизма в области органов зрения, к сожалению, всегда были и остаются быть актуальными. Многими причинами на рушения зрительных функций у детей являются травматические повреждения ор гана зрения, в частности, повреждения костей стенок орбиты, в результате которых происходит грубое нарушение зрительных функций, а для их восстановления час то возможна только пластика поврежденной стенки орбиты. В подобных случаях офтальмохирург стоит перед выбором пластического материала с набором необ ходимых характеристик, одной из которых является совместимость с организмом ребенка. Выбор материала является чрезвычайно важным и актуальным вопросом современной детской офтальмологии, в случаях необходимости проведения костно пластической операции.

Для восстановления дефектов костной ткани области орбиты, ряд авторов предлагает использовать биоинертные искусственные материалы, такие как титан или синтетические пластмассы. Однако их применение не всегда оправдано, особенно у детей младшего возраста. С возрастом у ребенка происходит рост лицевого черепа, а биоэнертные материалы через какое-то время требуют своего замещения на материа лы большего размера, что влечет за собой очень серьезный комплекс рисков для ребен ка. Нельзя забывать и то, что искусственные материалы небезразличны для организма человека – как чужеродная субстанция, они вызывают иммунологические реакции от торжения, которые могут бессимптомно протекать годами со всеми вытекающими пос ледствиями для пациента.

Методом выбора может быть использование у детей собственных костных тканей для пластики дефектов орбиты. Это понятно и технически возможно, где собс твенные ткани, взятые в асептических условиях, не предполагают возникновения им мунологических конфликтов, способствуют регенерации тканей и т.д. Однако подобная тактика лечения всегда сопровождается развитием выраженного болевого синдрома и риска целого комплекса осложнений в области забора тканей. Одновременно возрастают время операции и негативные последствия наркоза.


К недостаткам клиническиго использования донорского реберного хряща можно отнести трудность формирования формы и нужного размера имплантата для за мещения дефекта, а также его быстрая резорбция в области имплантации (1,5-2 года) часто без формирования регенерата и, соответственно, с необходимостью повторного хирургического вмешательства.

Вместе с тем, одним из наиболее эффективных пластических материалов, способных заместить любые дефекты костей лицевого черепа у детей, являются ДКИ – деминерализованные костные имплантаты, изготовленные из донорских костей сво да черепа по технологии, разработанной и запатентованной в ФГУ ЦИТО им. Н.Н.

Приорова (Горбунова Е.Д., Лекишвили М.В., Баракина О.Ю. 2006). При их изготовлении происходят следующие этапы: взятие донорского материала – костные фрагменты сво да черепа;

механическая очистка, удаление крови и жира;

деминерализация раствором соляной кислоты в разных временных промежутках;

лиофилизация и стерилизация по током быстрых электронов дозой поглощения 20-25 кГp.

Предложенный биологический пластический материал имеет следующие преимущества:

– для проведения костно-пластических операций у больных с дефектами кос тей черепа различной этиологии донорские кости свода черепа являются наиболее фи 21 клинические аспекты тканевОЙ трансплантОлОгии зиологичным материалом, обусловленным общим эмбриональным происхождением для замещения дефекта этой области скелета;

– имплантаты, изготовленные из донорских костей свода черепа, обладают площадью, способной полностью заместить даже значительные по величине костные дефекты черепа у больных единым блоком;

– эластичность регидратированных ДКИ позволяет придавать материалу различную конфигурацию, необходимую для пластики в конкретных клинических случаях;

– высокая степень деминерализации в сочетании с низкой остаточной влаж ностью материала позволяют насыщать его растворами антибиотиков и гидрокортизо на необходимой концентрации, легко моделировать и надежно фиксировать материал с краями костного дефекта во время проведения костно-пластической операции, а также снижать возможность послеоперационных осложнений;

– замещение имплантатов собственной костной тканью реципиентов начина ется со 2-3 месяца после проведения костно-пластическтй операции и за период от месяцев до 2-х лет с формированием регенерата органотопического строения.

С 1999 года данный пластический материал применяется у детей и подростков в ходе проведения хирургических операций, восполняя посттравматические дефекты нижней стенки орбиты на базе отделения микрохирургии глаза Морозовской ДГКБ г.

Москвы. Диагностику переломов и контроль за перестройкой аллоимплантатов осу ществляли методом компьютерной томографии через каждые 6 месяцев после прове дения реконструктивной операции. Результаты пластики у детей оцениваются высоко – это около 98% случаев выздоровления.

ЭФФективноСтЬ применениЯ аЛЛоГенноГо ДеминераЛизованноГо ГубЧатоГо веЩеСтва коСти «ЛиопЛаСт®» в ДетСкоЙ и взроСЛоЙ СтоматоЛоГии беланов Г.н., Гавеля е.Ю., волова Л.т., Шароватова а.Ю.

Самарский Государственный Медицинский Университет, г. Самара The clinical estimation of allogenic demineralized sponge «Lioplast®» efficiency have been carried out in the treatment of different forms of alveolitis and tooth-contained cysts in children’s and adults’ stomatology. In the patients’ treatment with new technology by using «Lioplast®» inflammatory reactions quickly stopped and bone tissue completely regenerated.

Children’s value constant teeth have teethed in the correct order of the dentition. We’ve got 100% positive results with using «Lioplast®» in contrast to «Alvogyl», «Collapan-L®», «Li Tap®» and «Kolapan®» who’ve given different complications.

Цель работы. Провести клиническую оценку эффективности ипользования деминерализованного губчатого вещества кости «Лиопласт®» при лечении различных патологических процессов во взрослой и детской стоматологии.

материалы и методы исследования. Первую группу составили 120 человек (82 женщины, 38 мужчин) в возрасте от 20 до 65 лет с различными формами альвеоли та. Все пациенты были разделены на 3 подгруппы: в КГ-1 вошли 25% пациентов. У них клинические аспекты тканевОЙ трансплантОлОгии лунку удаленного зуба заполняли препаратом «Альвожил®». КГ-2 составили 27,5% па циентов. В данной группе использовали препарат «Коллапан-Л®». В основную группу (ОГ) вошли 47,5% больных. Лечение проводилось по новому способу с использованием остеопластического материала «Лиопласт®», насыщенного с помощью низкочастотного ультразвука комбинированным антимикробным средством бутол (сочетание стрепто мицина с хенозолом).

Вторую группу составили 170 детей в возрасте от 4 до 17 лет с зубосодержа щими кистами. Всем детям была выполнена цистэктомия. Пациенты были разделены на несколько групп: у 43 зачаток постоянного зуба удален, у 127 зачаток сохранен;

из них остепластика была проведена у 65 больных с использованием 3 видов остеопластическо го материала: «Ли-Тар®», «Коллапан®», «Лиопласт®». У всех пациентов проводился ви зуальный осмотр и рентгенологический контроль. Проведена статистическая обработка количественных данных.

результаты. В ходе клинических исследований выявилено, что у пациентов с альвеолитами в КГ-1 и КГ-2 костная ткань в полном объеме не восстанавливалась, отмечалась атрофия альвеолярного отростка в области удаленных зубов. Это объяс няется тем, что «Альвожил®» не является остеокондуктивным препаратом, его дейс твие сводится только к снятию болевых и воспалительных явлений. «Коллапан-Л®»

активизирует механизм регенерации пораженной костной ткани, однако не купирует воспаление, что сводит к минимуму его остеопластические свойства. У пациентов в ОГ быстрее купировались воспалительные реакции лунки зуба, т.к. деминерализован ное губчатое вещество кости «Лиопласт ®» наряду с остеокондуктивными свойствами, обладает выраженным пролонгированным антимикробным действием. После транс плантации данного материала первые признаки регенерации кости появились в конце первого месяца. Костная ткань полностью восстанавливалась через 2,5-3,5 месяца пос ле остеопластики.

Отдаленные результаты лечения детей с зубосодержащими кистами без при менения остеопластики показал, что в 36% случаях наблюдается формирование оста точного дефекта альвеолярного отростка, снижение его высоты, ретенция и задержка прорезывания зубов. У пациентов с проведением пластики синтетическим гидрокси аппатитом в комбинации с ксеногенным коллагеном «Ли-Тар®» и «Колапан-Л®» в 17% и 100% случаях соответственно наблюдали осложнения воспалительного характера, секвестрацию зачатков, ретенцию зубов, нарушения положения постоянного зуба при прорезывании в зубной ряд, облитерацию каналов, патологию эмали. Новый способ ле чения зубосодержащих кист у детей применён у 34 больных. После удаления кисты, за чаток постоянного зуба оставляли в костной полости, заполняли ее деминерализованной губчатой аллокостью «Лиопласт®» с последующей репозицией зачатка. Предварительно костную полость и аллоимплантат обрабатывали раствором антибиотика широкого спектра действия с помощью низкочастотного ультразвука. У таких детей в 100% слу чаях получили положительный результат. У всех пациентов произошло прорезывание полноценных постоянных зубов в правильное положение в зубной ряд, костная ткань восстановилась в течение 2-4 месяцев, в раннем и позднем послеоперационных периодах воспалительных осложнений не выявлено.

Таким образом, клинические исследования показали высокую эффективность применения аллогенного губчатого вещества кости «Лиопласт®» во взрослой и детской стоматологии у пациентов с альвеолитами и зубосодеожащими кистами.

21 клинические аспекты тканевОЙ трансплантОлОгии вЫбор СпоСоба пЛаСтики поСттравматиЧеСкиХ коСтнЫХ ДеФектов при переЛомаХ прокСимаЛЬноГо отДеЛа боЛЬШеберЦовоЙ коСти блинов С.в., малышев е.е., павлов Д.в., королев С.б., малышев е.С.

ГОУ ВПО «НижГМА Росздрава», ФГУ «ННИИТО Росмедтехнологий», г. Нижний Новгород The study is based on the evaluation of 74 patients with proximal tibial fractures.

In 59 patients (78.7%) filling of traumatic bone defects was required. Structured (auto-, allo-, brephobone, osteomatrix on hydroxyapatite base) and injected bone substitute (Norian SRS) were used. Differentiated approach to the use of the mechanical characteristics of each mate rial allowed us to prevent significant secondary displacement of the bone fragments.

В период с 2007 по 2009 г. в Нижегородском НИИ травматологии и ортопедии были оперированы 74 пациента с переломами мыщелков большеберцовой кости;

среди них преобладали мужчины трудоспособного возраста. У 36 пациентов наблюдали пере ломы обоих мыщелков, у 35 – наружного, у 4 – внутреннего. По тяжести повреждения в соответствии с классификацией АО больные распределялись следующим образом: тип В 1.1 – диагностирован у одного больного;

тип В 3.2 – 4;

тип В 3.1 – 34;

тип С 1.1 – у одно го пациента;

тип С 1.2 – также у одного пациента;

тип С3.1 – 29;

тип С 3.3 – 5. Все пациен ты лечились оперативно различными методиками. Пластика травматических костных полостей была применена у 59 пациентов (78,7%). В качестве структурированных транс плантатов использовали ауто-, алло-, и брефокость, остеоматрикс на основе гидрокси апатита и их комбинации, а также жидкую инъекционную форму заменителя костной ткани «Norian SRS». Применение структурированных трансплантатов целесообразно при открытой репозиции переломов, когда есть возможность оценить истинные размеры дефекта и расположение отломков. При этом используется опорные свойства трансплан тата с целью стабилизации отломков и предупреждения их смещения. Инъекционная форма заменителя костной ткани «Norian SRS» вводится в полости после завершения остеосинтеза при импрессии задних отделов мыщелков. Целесообразным является ее применение при малоинвазивных операциях с транскутанным введением заполнителя костной полости.

Применение дифференцированного подхода к пластике посттравматических костных дефектов позволило нам во всех случаях добиться стабилизации костно-хря щевых фрагментов. Значительного вторичного смещения костно-хрящевых фрагментов в послеоперационном периоде нами не выявлено.

21 клинические аспекты тканевОЙ трансплантОлОгии опЫт применениЯ «коЛЛапана»

при ЛеЧении ДоброкаЧеСтвеннЫХ опуХоЛеЙ ЭпиметаФизарноЙ зонЫ ДиннЫХ коСтеЙ брижань Л.к., бабич м.и., артемьев в.а., Лапшин а.е.

ФГУ «ГВКГ им. Н.Н.Бурденко Минобороны России», Москва Biocompositional material based on the synthetic hydroxyapatite is widely used in modern surgery as the material for bony defect plasty of different localization. During the ther apy of benign tumors of epimetaphysis zone in long tubular bones the use of biocompositional material based on the synthetic hydroxyapatite in combination with bone autoplasty allows achieving more early recovery of bone structure and function compared with the cases of iso lated bone autoplasty and filling the massive bone defects during autogenous bone deficiency.

Биокомпозиционный материал на основе синтетического гидроксиаппатита широко используется в современной хирургии в качестве материала для пластики де фектов костей различной локализации.

В отделении реконструктивной и восстановительной хирургии центра травма тологии и ортопедии ГВКГ им. Н.Н.Бурденко по поводу доброкачественных опухолей и солитарных кист костей за последние 5 лет прооперировано 37 больных. Из них у 25 больных образования локализовались в эпиметафизарной зоне длинных трубчатых костей. Всем 25 больным выполнены экскохлеация кисты или удаление опухоли в виде частичной резекции без нарушения непрерывности кости.

В 15 случаях образовавшиеся дефекты кости заполнялись костными аутотран сплантатами из гребней подвздошных костей, причем в 2 случаях потребовался забор трансплантатов с двух сторон. В 10 случаях применена комбинированная костная ауто и ксенопластика с использованием аутотрансплантатов из гребней подвздошных костей и биокомпозиционного материала на основе синтетического гидроксиаппатита под фир менным названием «КоллапАн».

При рентгенологической оценке результатов лечения установлено, что в пер вой группе окончательная перестройка трансплантатов и восстановление структуры кости происходит в период от 8 до 19 месяцев, тогда как во второй группе – через 3- месяцев в зависимости от объема дефекта.

Проанализированный опыт пластики дефектов эпиметафизарных зон длин ных трубчатых костей после удаления доброкачественных опухолей и экскохлеации кист позволяет сделать седующие выводы: применение биокомпозиционного материа ла на основе синтетического гидроксиаппатита в сочетании с костной аутопластикой позволяет добиться более раннего восстановления структуры и функции кости, чем в случаях изолированной костной аутопластики;

позволяет заполнять объемные дефекты кости при дефиците аутокости.

21 клинические аспекты тканевОЙ трансплантОлОгии изменениЯ ГемоДинамики в крЫШе вертЛуЖноЙ впаДинЫ при туннеЛировании СпиЦеЙ и ввеДении кЛетоЧно-тканевоЙ СубСтанЦии бунов в.С., макушин в.Д., кононович н.а.

ФГУ «Российский научный центр «Восстановительной травматологии и ортопедии»

им. академика Г.А. Илизарова Росмедтехнологий», г. Курган Hemodynamic changes in the acetabular cap in tunneling by wire and injection of cellular tissue substance had been studied. It was found that tunneling promoted circulation im provement in the acetabular cap and preservation of transplanting substance cells viability.

Цель исследования. Изучить особенности гемодинамики в костной части крыши вертлужной впадины после туннелирования спицей и введения клеточно тканевой субстанции.

материалы и методы. В эксперименте на 15 собаках с помощью медуллографии изучали венозный отток, и с помощью реографии - изменения кровенаполнения и объёмной скорости кровотока в крыше вертлужной впадины. Об изменениях артериального притока судили на основании артериографии глубокой артерии бедра.

Исследования проводили до и после туннелирования спицей костной части крыши вертлужной впадины, введения в туннели клеточно-тканевой субстанции, получаемой с помощью пункции медуллярной полости диафиза большеберцовой кости этой же конечности.

результаты и обсуждения. Выявлено, что туннелирование приводит к улучшению оттока тканевой жидкости от медуллярных полостей костной части крыши вертлужной впадины. По туннелям тканевая жидкость поступает в параоссальные ткани, что увеличивает отток в вены, отводящие кровь от подвздошной и седалищной костей. На основании ангиографии, улучшение оттока тканевой жидкости приводило к увеличению притока крови по глубокой артерии бедра. По данным реографии изменения сопровождались увеличением кровенаполнения и объёмной скорости кровотока в костной части крыши вертлужной впадины. После введения тканевой субстанции в спицевые туннели усиление кровообращения сохранялось.

выводы. 1. Туннелирование спицей способствует улучшению кровообращения в костной части крыши вертлужной впадины.

2. В спицевых туннелях и параоссальных тканях усиливается обмен тканевой жидкости, что способствует сохранению жизнеспособности и функции клеток транс плантируемой тканевой субстанции.

21 клинические аспекты тканевОЙ трансплантОлОгии оСобенноСти репаративноЙ реГенераЦии коСтеЙ киСти при замеЩении поСтрезекЦионнЫХ ДеФектов пориСтоЙ ГиДрокСиапатитноЙ керамикоЙ варганов е.в.

МУЗ «Городская клиническая больница № 5», г. Челябинск The author reports that in 43 cases concerning patients with hand’s long bones defects underwent ostheoplastic operations with the use of hydroxilapathite ceramic and ex ternal bone fixators were achieved good cosmetic and functional results. The advantage of this method is that there is no bone grafting wound.

Целью исследования явилось изучение особенностей репаративной регенера ции костей кисти при замещении их пострезекционных дефектов гранулами пористой гидроксиапатитной керамики (ПГАК).

В отделении травматологии ГКБ №5 (городской центр хирургии кисти) в пе риод 2000-2009 гг. выполнено 43 оперативных вмешательства по замещению дефектов костей кисти, возникших после удаления опухолей и опухолеподобных заболеваний, по ристой гидроксиапатитной керамикой. Использовалась ПГАК, представляющая собой кристаллы, сформированные в виде гранул размером от 0,5 до 4,0 мм. Производитель – предприятие «ФИХИМЕД», г. Ставрополь (Патент РФ № 2100274). С целью запол нения 17 (39,5%) костных дефектов после удаления опухолей размером до 0,8 см при меняли гранулы от 1,2 до 1,5 мм. Заполнение 15 (34,9%) дефектов размером до 1,5 см после резекции костей и удаления опухоли осуществляли гранулами размером от 1,5 до 3,0 мм. Костную пластику с элементами контурного моделирования поверхности при дефектах более 1,5 см в 11 (25,6%) случаях выполняли составом ПГАК, состоящим из ј части мелкогранулированной фазы (гранулы по 0,5 мм) и ѕ крупноблочной структуры до 4,0 мм. Гранулы ПГАК порционно вводили на место костного дефекта, мягко уп лотняя, при этом формируя необходимую поверхность. Рана тщательно ушивалась на глухо. Обязательным этапом операции являлась фиксация оставшихся участков кости с сохранением длины имеющего дефект луча. При заполнении небольших (до 0,6-0,8 см) внутрикостных дефектов с сохранением кортикальной пластинки и отсутствии патоло гического перелома, иммобилизация в послеоперационном периоде проводилась гипсо вой повязкой на срок не более трех недель – 19 (41,9%) наблюдений. Во всех остальных 24 (58,1%) случаях проводили чрескостный остеосинтез аппаратами внешней фиксации (Илизарова, Обухова, Катаева). При необходимости, в течение 7-10 дней назначали ан тибактериальную терапию, в некоторых случаях в сочетании с сульфаниламидными препаратами. Швы снимали на 10-12 сутки после операции.

По итогам трехлетнего послеоперационного наблюдения заполнение кост ных дефектов малых размеров (до 0,8 см) гранулами ПГАК привело к интенсивному формированию нежнотрабекулярной структуры костного регенерата, равномерно рас пределенного по всей площади дефекта. Клиническое благополучие соответствовало рентгенологическому во всех случаях (100%). При заполнении костных дефектов сред него размера отмечено некоторое расхождение в показателях клинического (95,18±1,94) и рентгенологического (97,93±1,65) благополучия на исходе трехлетнего наблюдения 21 клинические аспекты тканевОЙ трансплантОлОгии (P0,05). При закрытии дефектов большого размера установлена закономерность, ха рактеризующаяся интенсивным формированием костного регенерата по периферии дефекта в ближайшем послеоперационном периоде, с последующим заполнением всей площади дефекта костно-тканевым регенератом. К исходу третьего года соотношение клинического и рентгенологического благополучия составило 86,42±2,36 – 92,28±1, (P0,05).

Результаты клинико-рентгенологической оценки последствий применения керамического гидроксилапатита при пластике дефектов костей кисти доказали вы раженные остеоиндуктивные свойства данного материала. ПГАК создает условия функционирования соединительнотканных, костно-тканевых клеточных элементов, со судистых структур сначала на границе с имплантационным материалом, а затем, после довательно, по всему объему заполненного дефекта.

СтимуЛЯЦиЯ проЦеССов репаративноЙ реГенераЦии препаратом коЛЛапан при провеДении аутопЛаСтиЧеСкиХ операЦиЙ в онкоЛоГии киСти варганов е.в.



Pages:     | 1 |   ...   | 6 | 7 || 9 | 10 |   ...   | 12 |
 





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.