авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 |

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РФ ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «ОРЕНБУРГСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ИНСТИТУТ МЕНЕДЖМЕНТА» ...»

-- [ Страница 4 ] --

Т а б л и ц а 1 – Основные адипокины, продуцируемые жировой тканью Адипокины Метаболические эффекты 1 Ангиотензиноген, ангиотензин II Повышение артериального давления, ангиогенез Лептин Повышение аппетита, инсулинорезистентность Адипонектин Улучшает чувствительность к инсулину, антиатеро генный эффект Интерлейкины Воспаление, иммунный ответ, дифференцировка клеток   Окончание таблицы 1 Ингибитор активатора Уменьшение фибринолиза, повышение ИР плазминогена- Инсулиноподобный фактор роста- Апоптоз, рост и пролиферация клеток Простагландины Воспаление, гемостаз, фертильность Свободные жирные кислоты Инсулинорезистентность, липолиз, атеросклероз (СЖК) Фактор некроза опухоли- Повышение ИР, апоптоз клеток, атеросклероз Висфатин Инсулиноподобное действие Резистин Повышает ИР Атерогенный эффект Апелин Кардиоваскулярный эффект Гипоталамический контроль Эндоканнабиноиды Повышают липогенез, увеличивают потребление пищи Адипонутрин Регулирует активность ТГ-липазы адипоцитов Белок, связывающий СЖК (FABP) Транспорт СЖК К тому же было обнаружено, что жировая ткань экспрессирует ряд ре цепторов, позволяющих ей peaгировать на афферентные сигналы из эндок ринных органов и центральной нервной системы. Содержащиеся в жировой ткани нервные, стромальные и иммунные клетки также обладают определен ной секреторной активностью. Многие гормоны – катехоламины, инсулин, кортикостероиды, андрогены и др.– в свою очередь оказывают влияние как на функцию адипоцитов, так и на эффекты адипокинов. Таким образом, по мимо депонирования энергии, жировая ткань через адипокины обладает спо собностью взаимодействовать с различными органами и системами, включая и ЦНС, и тем самым участвовать в регуляции множества разнообразных функций организма, а через взаимодействие с нейроэндокринной системой в адаптации организма к различным внешним воздействиям, таким как голод, стресс, переедание. Неблагоприятные метаболические последствия, разви вающиеся как при избытке, так и при недостатке жировой ткани, подтвер ждают важность ее секреторной активности для нормального функциониро вания организма. К настоящему времени накоплена обширная информация о каузальной связи между ожирением и сердечнососудистыми, онкологиче скими и эндокринными заболеваниями, например с сахарным диабетом.

Эндокринные дизрапторы-стойкие органические загрязнители В последние 30 лет уделяется повышенное внимание анализу группы стойких органических загрязнителей (СОЗ), которые воздействуют на среду обитания на чрезвычайно низком уровне (нижний предел обнаружения – 10-8 10-13%). Многие из них были известны уже давно и широко использовались в промышленности и сельском хозяйстве большинства стран. Эти соединения относятся к классу хлорорганических соединений и обладают рядом специ фических признаков:

  1. биоконцентрирование (или биоаккумуляция) – за счет того, что рас творимость в воде низкая и высокая в жирах и липидах;

2. глобальная распространенность за счет способности переноситься на большие расстояния;

3. чрезвычайная стойкость к физическим, химическим и биологическим изменениям;

4. способность оказывать токсическое воздействие на организмы в крайне малых дозах.

В настоящее время UNEP (United Nations Environmental Project) особо выделяет группу из 12 соединений и групп соединений, на которые следует обращать первоочередное внимание при экологических исследованиях. Эта так называемая «грязная дюжина» включает в себя следующие вещества: по лихлорированные бифенилы (ПХБ), полихлорированные дибензо-п диоксины (ПХДД), полихлорированные дибензофураны (ПХДФ), алдрин, диэлдрин, дихлор-дифенил-трихлорэтан (ДДТ), эндрин, хлордан, гексахлор бензол (ГХБ), мирекс, токсафен и гептахлор. Этот список был составлен в ре зультате большого количества международных консультаций и форумов.

Главным итогом этой работы стало принятие и подписание 23 мая 2002 года в Стокгольме Глобальной международной конвенции о запрещении СОЗ, к которой присоединилась и Россия. Среди СОЗов ПХБ являются одними из самых распространенных. Они массово производились и использовались, на чиная с 1929 года. С тех пор и до прекращения их промышленного выпуска в 1986 году в мире было произведено около 2 миллионов тонн ПХБ. Характер и динамика распределения ПХБ в окружающей среде во многом определяют ся их физическими свойствами, такими как химическая инертность, доста точно высокая плотность паров и способность сорбироваться на частицах.

Несмотря на постепенное сокращение применения ПХБ в хозяйственной дея тельности, они продолжают загрязнять окружающую среду, и в настоящее время эти токсичные продукты, распространившиеся по всему Земному ша ру, присутствуют в организме каждого из нас. По мере включения ПХБ в биологические пищевые цепи происходит прогрессивная потеря низкохлори рованных компонентов благодаря их селективной биотрансформации. По этому в организмах человека и животных накапливаются наиболее опасные высокохлорированные ПХБ.

По данным Всемирной организации здравоохранения, основными пу тями поступления ПХБ в окружающую среду являются следующие:

1. испарения из пластификаторов;

2. выделение при сжигании бытовых и промышленных отходов, а так же при возгорании трансформаторов, конденсаторов и другого про мышленного оборудования, в котором используются ПХБ;

3. утечки с другими промышленными отходами;

вывоз ПХБ на свалки и поля аэрации;

4. другие неконтролируемые пути.

  Загрязнение окружаю ющей среды происходит главным о образом по пер вым трем каналам. Однак неожиданным открытием было обнаружение в ко офисных помещениях выс соких концентраций ПББ (см. рис. 2), где использу ются разные виды оргтех хники (компьютеры, принтеры, ска анеры и др.) со сроком службы до 8 лет за афиксированы большие концентраци дека-ПББ.

ии Р и с у н о к 2 – Содерж жание бромированных бифенилов в пыли жилых и офисных помещений (в нг/г пыли) Таким образом, соврременные научные данные свидетел льствуют о том, что ожирение представляе собой последствие неблагоприят ет тного воздейст вия на организм экотоксикантов, нарушающих эндокринну функцию, в ую важнейшие периоды разви ития. Более того, воздействие этих химикатов, по х всей видимости, играет кл лючевую роль в развитии метаболич ческих и сердеч но-сосудистых заболевани связанных с ожирением.

ий, В настоящее время к ожирению проявляется значительны интерес, что ый связано с значительным ро остом данной патологии в течение последних трех десятилетий как у детей, т и у взрослых. Фактически, ожир так рение представ ляет собой наиболее расп пространенное метаболическое расс стройство в за падных индустриальных с странах, достигая масштабов эпидеммии, вовлекаю щей также развивающиеся страны. Более того, ожирение явл я ляется главным фактором риска в развитии инсулинорезистентности, что счи итается главным связующим звеном между ожирением и соответствующими м у метаболически ми заболеваниями, которы снижают качество и длительность жизни, а также ые ь увеличивают затраты на медицинские услуги.

Так как ожирение сввязано с сидячим образом жизни и неадекватными диетическими предпочтениями, ожирение объяснялось длител льным положи тельным энергетическим б балансом. Однако в настоящее врем эта идея ста мя   вится под сомнение, так как было показано влияние ряда социальных, эконо мических и экологических факторов на физическое развитие и рост человека, причем было показано, что ожирение является одним из многих болезней развития. В частности, ожирение может вызываться воздействием токсичных химических веществ в критические периоды жизни. Эти соединения вмеши ваются в биологические процессы в жировой ткани организма и взаимодей ствуют с рецепторами гормонов. Они имитируют или же, наоборот, являются антагонистами действия эндогенных гормонов, и таким образом нарушая программирование эндокринных сигнальных путей в критические периоды раннего развития. Новорожденные и дети могут быть рассмотрены как наи более восприимчивая к воздействию токсикантов популяция. В связи с этим, стоит подчеркнуть, что жировая ткань является важной эндокринной тканью, секретирующей гормоны, вызывающие ожирение и диабет 2-го типа.

Воздействие эндокринных дизрапторов в ходе развития может вызы вать аномалии систем гомеостатического контроля, необходимые для под держания нормального веса тела на протяжении всей жизни. К тому же, по следние данные показывают, что токсиканты могут нарушать механизмы, участвующие в гомеостазе веса, с последующим набором веса за счет увели чивающегося объема жировой ткани. Более того, было показано, что липо фильные экотоксиканты, в том числе органические поллютанты или загряз нители, пестициды, полихлорированные бифенилы и полибромированные дифенилэфиры, способны накапливаться в жировой ткани после воздействия.

С другой стороны, увеличение массы жировой ткани приводит к увеличению липофильных токсикантов, которые могут изменять регуляцию экспрессии генов цитохрома Р450 в белой жировой ткани.

Существует мнение, что экотоксиканты не только способны модулиро вать экспрессию генов, но также оказывать эпигенетический эффект, нару шая метаболический статус человека ненаследуемым образом.

С момента открытия способности синтезировать гормоны, жировая ткань играет центральную роль в сложной системе метаболизма, регуляции голода, иммунного ответа и фертильности. Фактически, адипоцит продуци рует гормоны жировой ткани: лептин и адипонектин, играющие ключевую роль в регуляции энергетического баланса, в то время как адипоцитокины (резистин, хемерин, висфатин, ИЛ-6, ингибитор активатора плазминогена-1, ретинол-связывающий белок 4, ФНО и ангиотензин) также являются имму номодулирующими агентами;

так или иначе эти соединения участвуют в раз витии метаболического синдрома. Последняя, но не менее значимая функция жировой ткани заключается в том, что здесь эстрадиол образуется под дейст вием ароматазы из тестостерона. Активность жировых клеток находится под контролем как гормональных (инсулин, кортизол), так и нервных сигналов (вагус), а дифференцировка ткани также зависит от генов и факторов транс крипции (PPAR), а также прочих сигналов, про- и анти-дифференцировки, которая осуществляется локальной продукцией факторов роста, цитокинов, а   также циркулирующими гормонами (инсулин, инсулиноподобный фактор роста-1, гормон роста, тиреоидные гормоны, глюкокортикоиды).

Недавно было установлено, что химические соединения являются од ним из факторов окружающей среды, которые могут влиять на развитие не только ожирения но и сопутствующих заболеваний.

В 2010 году FDA официально признало вред бисфенола А для здоровья человека. В частности, бисфенол А из-за структурной схожести с гормоном эстрогеном оказывает негативное влияние на мозг и репродуктивную систе му, а также служит причиной ряда онкологических заболеваний. Он опасен тем, что при нагреве или при длительном хранении еды в посуде, бисфенол А переходит из пластика в еду. Он опасен даже в очень малых количествах.

17 октября 2008 года Канада была первой страной запретившая дет скую посуду, в пластике которой содержится бисфенол А. Однако сегодня, в 95% детских бутылочек в состав пластмассы до сих пор входит бисфенол А.

Р и с у н о к 3 – Строение бисфенола А Таким образом, бисфенол А является одним из химических соедине ний, которое мы случайно потребляем в критические ранние периоды жизни, определяет развитие ожирения и гиперлипидемии. Более того, было показа но, что бисфенол А нарушает транспорт глюкозы в адипоцитах, а в экологи ческих концентрациях ингибирует выделение ключевого адипокина – адипо нектина, предохраняющего человека от метаболического синдрома. По всей видимости, адипонектин играет ключевую роль, т. к. он повышает чувстви тельность к инсулину и снижает воспаление в жировой ткани. Как следствие, любой фактор и бисфенол А в частности, подавляющий выделение адипо нектина приводит к инсулинорезистентности и повышенной восприимчиво сти к ожирению с сопутствующих заболеваний.

Также сообщалось об имеющейся связи между различными метаболи тами фталата и развитием ожирения. Подобные неблагоприятные воздейст вия на здоровье, по всей видимости, связаны с взаимодействием этих соеди нений с рецепторами, активируемыми пролифераторами пероксисом (PPAR ), являющимися представителями суперсемейства ядерных рецепторов.

Также существует предположение, что трибутилтин является экотоксикан том с обесогенным действием, т. е. ведет к накоплению жировой ткани.

  Интересен факт, что воздействие эндокринных дисрапторов в критиче ские периоды развития может приводить к неблагоприятным эффектам, ко торые не проявляются до определенного периода жизни, включая ожирение и диабет.

При детальном рассмотрении оказалось, что пренатальное воздействие дихлородифенил-дихлорэтилена способствует развитию ожирения у женщин, а сниженные темпы роста в раннем периоде жизни связаны с инсулинорези стенстностью.

Заключение Ожирение обладает ярко выраженным влиянием на качество жизни.

Однако детерминанты пандемии ожирения многочисленны и до конца не из вестны.

Гидрофобные экологические загрязнители запасаются в белой жировой ткани и могут модулировать активность ключевых факторов транскрипции, контролирующих процессы дифференцировки, метаболизм и секреторную активность адипоцитов.

Таким образом. СОЗ могут действовать как лиганды арилгидрокарбо нового рецептора, эстрогеновых и андрогеновых рецепторов. Модулируя процессы дифференцировки клеток белой жировой ткани, ее метаболизм и основные функции, СОЗ могут оказывать существенное влияние на развитие заболеваний, обусловленных или сопутствующих ожирению, в частности са харного диабета.

Также при быстрой потере веса за счет увеличения концентрации СОЗ как в плазме, так и в самой жировой ткани, происходит индукция транскрип ционного аппарата адипоцитов и повторный набор веса. Этот эффект хорошо известен в практике, как «уо-уо» эффект.

Предложенная концепция о механизме повреждающего действия СОЗ, основанная на аккумуляции их в динамических депо белой и бурой жировой ткани, модуляции этими компонентами фенотипа адипоцитов, заслуживает дальнейшего изучения и развития.

  2.3 Лекция на тему: «Нарушения липидного обмена: приборное обеспечение исследований в области профилактики и коррекции»

Лектор: Н. В. Шарапова, кандидат биологических наук, доцент кафедры «Химия и фармацевтическая химия»

Оренбургской государственной медицинской академии План лекции 1. Лабораторная диагностика нарушений липидного обмена 1.1. Методика оценки свободнорадикального окисления липидов в сы воротке крови 1.1.1. Методика оценки свободнорадикального окисления липидов в цельной сыворотке крови 1.1.2. Исследование хемилюминесценции суммарной фракции апо-В ЛП (ЛПНП и ЛПОНП) сыворотки крови 1.2. Методика оценки обеспеченности витаминами-антиоксидантами 1.2.1. Определение массовой концентрации витамина А в сыворотке крови на анализаторе биожидкости «ФЛУОРАТ-02 АБЛФ»

1.2.2. Определение массовой концентрации витамина Е в сыворотке крови на анализаторе биожидкости «ФЛУОРАТ-02 АБЛФ»

1.2.3. Определение содержания витамина С в моче 1.3. Методика оценки ферментативной защиты по изменению активно сти ферментов супероксиддисмутазы и каталазы 1.4. Методы определения липидного обмена 1.4.1. Определение общего холестерина в сыворотке крови энзиматиче ским колориметрическим методом 1.4.2. Определение концентрации триглицеридов в сыворотке крови эн зиматическим колориметрическим методом 1.4.3. Определение концентрации холестерина липопротеинов высокой плотности в сыворотке крови прямым методом 1.4.4. Определение концентрации холестерина липопротеинов очень низкой плотности и холестерина липопротеинов низкой плотности в сыво ротке крови 2. Техническое оснащение биохимических методов исследования в клинико-диагностических лабораториях 3. Профилактика и коррекция нарушений липидного обмена 1. Лабораторная диагностика нарушений липидного обмена Исследования обмена липидов и липопротеинов (ЛП), холестерина (ХС), в отличие от других диагностических тестов, имеют социальное значе ние, так как требуют неотложных мероприятий по профилактике сердечно сосудистых заболеваний. Проблема коронарного атеросклероза показала чет кую клиническую значимость каждого биохимического показателя как фак   тора риска ишемической болезни сердца. В настоящее время подходы к оценке нарушений липидного и липопротеинового обмена изменились. В ча стности, одной из главных причин, приводящих к задержке холестерина в ор ганизме, считается перекисная модификация липопротеинов. Высоко атеро генные перекисно-модифицированные ЛП образуются из нативных ЛП в ре зультате их пероксидации. В среде обитания человека присутствуют вещест ва, обладающие выраженным прооксидативным действием, среди которых основная доля приходится на переходные металлы или d-элементы (Со(II), Мn(VII), Zn(II), Cr(III), Cr(VI), Ni(II)). Таким образом, поллютанты – проок сиданты окружающей среды опосредованно влияют на содержание холесте рина и распределение его между липопротеиновыми фракциями в организме человека, приводящими, в итоге, к нарушениям липидного обмена.

Нарушения липидного обмена проявляются изменениями основных ли пидных параметров в крови. Поэтому определение липидов – это первый, важный и необходимый шаг, позволяющий в дальнейшем нормализовать ли пидный спектр крови, а значит, в той или иной мере управлять течением ате росклероза и, как следствие, снизить риск смерти от связанных с ним сердеч но-сосудистых заболеваний.

1.1. Методика оценки свободнорадикального окисления липидов в сыворотке крови Для оценки интенсивности процессов свободнорадикального окисле ния липидов у обследованных лиц применяется спонтанная и железоиндуци рованная хемилюминесценция цельной сыворотки крови (Фархутдинов Р. Р., 2002).

1.1.1. Методика оценки свободнорадикального окисления липидов в цельной сыворотке крови Для исследования хемилюминесценции цельной сыворотки крови не обходимо забрать венозную кровь без ЭДТА и без гепарина. Выдержать минут, после чего центрифугировать при 1500 об/мин в течение 15 минут.

Полученную сыворотку развести фосфатным буфером рН=7,45. Состав бу фера: 2,72 г KH2PO4, 7,82 г КСl на 1 литр дистиллированной воды. Величину рН полученного раствора, в соответствие с методикой, довести до 7,45 ед.

титрованием насыщенным раствором КОН.

Определение спонтанной и железоиндуцированной хемилюминесцен ции проводят отобрав 0,5 мл полученной сыворотки крови разведенной в мл фосфатного буфера. Пробу поместить в кюветную камеру прибора «Хе милюминометр-3» (Р.Р. Фахрутдинов, 2002). В пробу для инициирования свечения ввести 1 мл 25 мМ раствора сернокислого железа.

При оценке наблюдаемой вспышки хемилюминесценции выделить не сколько основных параметров:

h – высоту быстрой вспышки, зависящую от содержания в изучаемой системе гидроперекисей липидов;

  Н – высоту медленной вспышки, отражающую способность липидов к перекисному окислению, максимальную интенсивность ПОЛ после введения Fe2+;

S – светосумму медленной вспышки, определяемую как площадь под кривой от начала медленной вспышки до достижения ею максимального зна чения, оценивающую число боковых цепей разветвления, т. е. сколько на ион Fe2+ приходится образовавшихся перекисных радикалов (RОО);

tg – тангенс угла наклона медленной вспышки, определяет скорость окисления липидов;

– латентный период (в с) от момента введения железа (II) до достижения концентрации Fe2+ критической величины, латентный пе риод зависит от соотношения в системе про- и антиоксидантов.

Критерии оценки.

Нормальные показатели:

Спонтанная светимость 0,27 – 0,37 у.е., Вспышка 0,77 – 0,87 у.е., Светосумма 2,70 – 3,10 у.е., Максимальная светимость 0,85 – 1,10 у.е., Наклон 0,24 – 0,32 у.е.

1.1.2. Исследование хемилюминесценции суммарной фракции апо_В ЛП (ЛПНП и ЛПОНП) сыворотки крови Для исследования хемилюминесценции цельной сыворотки крови не обходимо забрать венозную кровь без ЭДТА и без гепарина. Выдержать минут, после чего центрифугировать при 1500 об/мин в течение 15 минут.

Суммарную фракцию апо-В ЛП (ЛПНП и ЛПОНП) сыворотки крови выде лить осаждением в присутствии гепарина и хлорида кальция двухвалентного.

Для выделения фракции апо-В ЛП к 2 мл 15 мМ раствора CaCl2 добавить 0, мл сыворотки крови и 0,04 мл 1% раствора кристаллического гепарина. Об разовавшуюся суспензию инкубировать 5 минут при комнатной температуре.

После инкубирования пробы центрифугировать пять минут при 2000g. Надо садочную жидкость удалять. Осадок представляет собой суммарную фрак цию липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) и липопротеинов очень низ кой плотности (ЛПОНП). К осадку добавить 0,85% раствор хлорида натрия и гомогенизировать до образования суспензии апо-В ЛП.

Полученную суспензию в смеси с фосфатным буфером (1:8 мл) помес тить в кювету хемилюминесцентной установки. Для инициирования свечения в пробу ввести 1 мл 25 мМ раствора сернокислого железа.

При оценке наблюдаемой вспышки хемилюминесценции выделить ос новные параметры:

h – высоту быстрой вспышки, зависящую от содержания в изучаемой системе гидроперекисей липидов;

Н – высоту медленной вспышки, отражающую способность липидов к перекисному окислению, максимальную интенсивность ПОЛ после введения Fe2+;

  S – светосумму медленной вспышки, определяемую как площадь под кривой от начала медленной вспышки до достижения ею максимального зна чения, оценивающую число боковых цепей разветвления, т. е. сколько на ион Fe2+ приходится образовавшихся перекисных радикалов (RОО);

tg – тангенс угла наклона медленной вспышки, определяет скорость окисления липидов;

– латентный период (в с) от момента введения железа (II) до достижения концентрации Fe2+ критической величины, латентный пе риод зависит от соотношения в системе про- и антиоксидантов.

Нормальные показатели:

Спонтанная светимость 0,21 – 0,35 у.е., Вспышка 0,36 – 0, 50 у.е., Светосумма 1,70 -2,70 у.е., Максимальная светимость 0,69 – 1,00 у.е., Наклон 0,18 – 0,32 у.е.

1.2. Методика оценки обеспеченности витаминами-антиоксидантами Обеспеченность витаминами – антиоксидантами оценивается по кон центрации витамина А и свободных токоферолов в сыворотке крови флуори метрическим методом на анализаторе биожидкостей «ФЛУОРАТ-02 АБЛФ»

фирмы «Люмекс» (Россия). Обеспеченность витамином С в моче оценивали титриметрическим методом (по Тильмансу).

1.2.1. Определение массовой концентрации витамина А в сыворотке крови на анализаторе биожидкости «ФЛУОРАТ-02 АБЛФ»

В две центрифужные пробирки помещается по 1 см3 дистиллированной воды и 1 см3 этанола. В первую поместить 1 см3 исследуемой сыворотки кро ви (образец № 2). Во вторую – 1 см3 дистиллированной воды (образец № 1).

Встряхивать (аппарат типа «Vortex») 30 сeкунд. Добавить 5 см3 гексана и встряхивать в течение 1 минуты. После встряхивания пробы центрифугиро вать 10 минут при 1 500 об/мин. Четко отделившийся гексановый слой ис пользовать для флуориметрического определения.

Массовую концентрацию витамина А (Х, мкг/см3) в сыворотке крови вычисляют по формуле:

, C ИЗМ V Э Q X= VC где Сизм – концентрация витамина А в экстракте (мкг/см3);

Vэ – объем экстракта, см3;

Vc – объем сыворотки крови, взятой для анализа, см3;

Q – коэффициент, учитывающий разбавление экстракта.

Критерии оценки обеспеченности витамином А: 0,3–0,7 мкг/см   1.2.2. Определение массовой концентрации витамина Е в сыворотке крови на анализаторе биожидкости «ФЛУОРАТ-02 АБЛФ»

В две центрифужные пробирки помещается по 1 см3 дистиллированной воды и 1 см3 этанола. В первую поместить 1 см3 дистиллированной воды (об разец № 2). Во вторую – исследуемой сыворотки крови 1 см3 (образец № 1).

Встряхивать (аппарат типа «Vortex») 30 сeкунд. Добавить 5 см3 гексана и встряхивать в течение 1 минуты. После встряхивания пробы центрифугиро вать 10 минут при 1500 об/мин. Четко отделившийся гексановый слой ис пользовать для флуориметрического определения.

Массовую концентрацию витамина Е (Х, мкг/см3) в сыворотке крови вычисляют по формуле:

X = C ИЗМ V Э Q, V C где Сизм – концентрация витамина Е в экстракте (мкг/см3);

Vэ – объем экстракта, см3;

Vc – объем сыворотки крови, взятой для анализа, см3;

Q – коэффициент, учитывающий разбавление экстракта.

Коэффициент разбавления равен Vк, Q= V раз где Vк – объем разбавленного экстракта, см3;

V разб. – объем исходного экстракта, взятый для разбавления, см3.

Нормальные показатели обеспеченности витамином Е: 8–12 мкг/см 1.2.3. Определение содержания витамина С в моче Определение количества аскорбиновой кислоты в моче дает представ ление об обеспеченности этим витамином в организма.

Суточная экскреция витамина С с мочой здорового человека составляет 20–30 мг (или 113,55–170,33 мк моль/ сутки). Это количество снижается при острых и хронических инфекционных заболеваниях, особенно у детей.

Для определения обеспеченности витамином С в две конические колбы необходимо отмерить по 10 мл мочи, 10 мл дистиллированной воды и 1 мл (20 капель) 10%-го раствора соляной кислоты. Содержимое каждой колбочки перемешать и оттитровать 0,001 н раствором 2,6-дихлорфенолиндо-фенолята натрия до появления розовой окраски, не исчезающей в течение 30 секунд.

  Количество витамина С в моче рассчитывается по формуле:

0,088 А В, Х= Б где Х – количество аскорбиновой кислоты в моче (в мг/сутки);

0,088 – коэффициент, отражающий количество аскорбиновой кислоты, эквивалентное 1 мл 0,001 н раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия (в мг);

А – средняя арифметическая результатов титрования 0,001 н раствором краски Тиль манса двух проб мочи (в мл);

В – среднее суточное количество мочи (для мужчин – 1 500 мл, для женщин – 1 мл);

Б – объем мочи, взятый для титрования (в мл).

С мочой у здорового человека экскретируется 20–30 м г витамина С и ли 1 13,55–170,33 мкмоль/сут.

1.3. Методика оценки ферментативной защиты по изменению ак тивности ферментов супероксиддисмутазы и каталазы Венозную кровь для определения антиоксидантных ферментов необхо димо собрать в пробирки с антикоагулянтом, в качестве которого использо вать ЭДТА (этилендиаминтетрауксусная кислоту) в количестве 1 мг/мл.

Для определения активности антиоксидантных ферментов необходимо получить эритроцитарную массу путем трехкратного отмывания крови охла жденным (5°С) физиологическим раствором. Отделение эритроцитарной массы проводится центрифугированием при 3000 об/мин. в течение 10 ми нут. Из полученной эритроцитарной массы готовится на дистиллированной воде раствор гемолизата (1:100). Для полного гемолиза материал необходимо подвергнуть холодовому гемолизу.

В полученном гемолизате эритроцитов активность СОД определить с помощью наборов «Randox»(Великобритания).

Нормальные показатели активности СОД 176,00–196,00 U/г. Hb.

Для определения активности каталазы исходный гемолизат развести 0,067М Na, K-фосфатным буфером (1:100). Определение активности катала зы провести кинетическим спектрофотометрическим методом прямой реги страцией разложения субстрата фермента – перекиси водорода (H. Zuck, 1963). За единицу активности каталазы принимают такое количество фер мента, которое вызывает падение оптической плотности с 0,45 до 0,4 за секунд.

Состав рабочего буфера: 0,067М фосфатный буфер рН 7,2, 0,01М пере кись водорода. Активность выражают в единицах активности на 1 мг гемогло бина. Все измерения выполняются на спектрофотометре Genesys 5 (США), по зволяющим снимать оптическую плотность в кинетическом режиме.

Нормальные показатели активности каталазы 400–475 U/г. Hb.

  1.4. Методы определения липидного обмена 1.4.1. Определение общего холестерина в сыворотке крови энзима тическим колориметрическим методом В основе используемого метода лежит поэтапное ферментативное окис лении ЭХС. Ферментативное определение протекает в несколько стадий. На первой стадии в результате ферментативного гидролиза эфиров холестерина (с участием холестеролэстразы) идет образование холестерина и высших жирных карбоновых кислот:

Эфиры холестерина + Н2О – холестеролэстераза холестерин + ЖК На второй стадии образовавшийся холестерин окислятся растворенным в реакционной смеси кислородом воздуха в присутствии оксидазы ХС с об разованием холест-4-ен-3-ен-она и Н2О2:

Холестерин + О2 – холестеролоксидаза холест-4-ен-3-ен-он + Н2О Определение продуктов реакции (Н2О2) в процессе её протекания про ходит по реакции Н2О2 с 4-Аминоантипирином в присутствии пероксидазы с образованием хинониминового красителя (N. Rifai, E. Iannotti, De Angelij K.,1998).

2Н2О2 + 4-ААР+ фенол – пероксидаза хинониминовый краси тель + 4Н2О Концентрация хинонимина, определяемая фотометрически, пропорцио нальна концентрации холестерина в пробе (C. Allain, L. Poon, C. Chan, W. Richmond, 1974;

F. Meiattini, L. Prencip, F. Bardelli, G. Giannini, P. Tarli, 1978;

С. В. Колоскова, А. Л. Лобачев, И. В. Лобачева, 2004).

В качестве исследуемого материала необходимо использовать сыво ротку крови без следов гемолиза. Сыворотку крови в количестве 0,02 мл до бавить к 2 мл рабочего реагента содержащего PIPES 35 ммоль/л, хлористый натрий 0,5 ммоль/л, фенол 28 ммоль/л, холестерол эстеразу 0,1 Ед/мл, пе роксидазу 0,8 Ед/мл, 4-Аминоантипирин (4-ААР) 0,5 ммоль/л, перемешать и инкубировать не менее 15 минут при температуре 20–250С. Калибровочная проба необходимо приготовить аналогичным образом, т. е. к 2 мл рабочего реагента добавить 0,02 мл калибратора. Контрольная проба не содержит сы воротки или калибратора, к 2 мл реагента нужно добавить 0,02 мл дистилли рованной воды. Оптическую плотность опытной и калибровочной проб про тив контрольной пробы измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 500 нм.

Для расчета содержания холестерина в исследуемом образце необхо димо использовать формулу:

.

Е пробы С = 5, Е калибратора   Для интерпретации полученных результатов анализа необходимо ис пользовать рекомендации ВОЗ.

Критерии оценки: нормальные показатели – до 5,17 ммоль/л (200 мг/100 мл), пограничные показатели – от 5,17–6,50 ммоль/л (200 до мг/100 мл), патологические показатели – свыше 6,50 ммоль/л (250 мг/100 мл) (C. Allain, L. Poon, C. Chan, W. Richmond, 1974;

F. Meiattini, L. Prencip, F. Bardelli, G. Giannini, P. Tarli, 1978).

1.4.2. Определение концентрации триглицеридов в сыворотке крови энзиматическим колориметрическим методом Ферментативное определение триацилглицеридов протекает в несколь ко стадий. На первой стадии триглицериды гидролизуются до глицерина и жирных кислот с помощью специально подобранных липаз:

Триглицериды + Н2О – липаза глицерин + жирные кислоты На второй стадии под действием глицерокиназы происходит фосфори лирование глицерина:

Глицерин + АТФ –глицерокиназа глицерол – 3 фосфат + АДФ На конечной стадии процесса образуется окрашенное соединение хи нонимин. Концентрация хинонимина, определяемая фотометрически, про порциональна концентрации триглицеридов в пробе (S.G. Klotzsch, J.R.

McNamara, 1990;

H.K. Naito, J.A. David, 1984).

Глицерол – 3 фосфат + О2 – ГФО дигидроксиацетон фосфат + 2Н2О Н2О2 + 4-ААР + 4 – хлорфенол – пероксидаза хинонимин + 4Н2О В качестве исследуемого материала необходимо использовать сыво ротку крови без следов гемолиза. 200 мкл свежей сыворотки крови добавить к рабочему реагенту, объемом 2 мл.

Рабочий реагент содержит PIPES 45 ммоль/л, хлорид магния 5 ммоль/л, 4-хлорфенол 6 ммоль/л, липазу 100 Ед/мл, глицерокиназу 1,5 Ед/мл, гли церол-3-фосфатоксидазу 4 Ед/мл, пероксидазу 0,8 Ед/мл, 4 Аминоантипирин (4-ААР) 0,75 ммоль/л, АТФ 0,9 ммоль/л;

с рН = 7,0.

Калибровочная и контрольная пробы готовятся прибавлением 200 мкл калибратора или дистиллированной воды к 2 мл рабочего реагента. Пробы необходимо перемешать и инкубировать при температуре 370С в течение минут. Оптическую плотность опытной и калибровочной проб против кон трольной пробы измеряют в кюветах с толщиной поглощающего слоя 1см при длине волны 500 нм. Расчет содержания триглицеридов в исследуемом Е пробы образце проводили по формуле: СТГ = 2.29, моль/л Екалибратор Результаты анализа интерпретировать в соответствии с величинами, рекомендованными ВОЗ.

Критерии оценки: нормальные показатели – 0,15–1,71 ммоль/л или 13– 160 мг/100 мл, группа риска – 1,71–2,29 ммоль/л или 160 – 200 мг/100 мл, па тологические показатели 2,29 ммоль/л или 200 мг/100 мл (G. Bucolo, H. Da   vid, 1973;

P. Fossati, L. Prencipe, 1982;

S.G. Klotzsch, J.R. McNamara, 1990;

N.W. Tietz, 1991).

1.4.3. Определение концентрации холестерина липопротеинов вы сокой плотности в сыворотке крови прямым методом Измерения концентрации ЛПВП необходимо проводить с использова нием термостатируемой кюветы при постоянной температуре 370С. Сыво ротку в количестве 6 мкл нужно добавить к рабочему реагенту объемом мкл. Калибровочную пробу готовят прибавлением 6 мкл калибратора к мкл реагента. Рабочий реагент должен содержать: буфер Гуда 35 ммоль/л, холестеролэстеразу 0,8 Ед/мл, холестеролоксидазу 0,5 Ед/мл, 4 аминоантипирин (4-ААР) 0,5 ммоль/л.

Пробы необходимо перемешать, кювету поместить в фотометр и инку бировать в течение 5 минут при температуре 370С. По окончании инкубации определить адсорбцию А1 при 500 нм против дистиллированной воды. Далее добавить к исследуемым образцам и калибратору 250 мкл реагента, содер жащего 35 ммоль/л буфера Гуда, пероксидазу 1 Ед/мл и 2,4,6-трибромо-3 гидроксибензойную кислоту (ТВНВ) 0,42 г/л. Через 5 минут измерить ад сорбцию А2.

Расчет содержания холестерина ЛПВП в исследуемом образце прово А2 А1пробы дят в соответствии с формулой: С = 1,29, (ммоль/л) А2 А1 калибратор Принцип метода заключается в том, что под действием полимера и де тергента холестерин из липопротеинов высокой плотности (но не из липо протеинов низкой плотности, очень низкой плотности и хиломикрон) образца переходит в растворенное состояние. с участием сопряженных реакций, опи санных ниже (G.R. Warnick, N. Rifai, 2001).

Эфиры холестерина + Н2О – холестеролэстераза холестерин + ЖК Холестерин + О2 – холестеролоксидаза холест-4-ен-3-ен-он + Н2О 2Н2О2 +4-ААР+ ТВНВ+ пероксидаза хинониминовый краси тель + 4Н2О Критерии оценки: нормальные показатели для мужчин 1,42 ммоль/л (55 мг/100 мл), для женщин 1,68 ммоль/л (65 мг/100 мл), группа риска – мужчины – 0,9 – 1,42 ммоль/л (35 – 55 мг/100 мл), женщины – 1,16 – 1, ммоль/л (45 – 65 мг/100 мл), патология – мужчины 0,9 ммоль/л (36 мг/ мл), женщины 1,16 ммоль/л (45 мг/100 мл).

1.4.4. Определение концентрации холестерина липопротеинов очень низкой плотности и холестерина липопротеинов низкой плотно сти в сыворотке крови Уровень ЛПОНП рассчитывается по формуле:

ХС ЛПОНП (ммоль/л) = Триглицериды / 2,   Уровень холестерина липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) рас считывается исходя из уровня общего холестерина, триглицеридов и ХС ЛПВП. по формуле Фридвальда: ХС ЛПНП (ммоль/л) = ОХ – Триглицериды/ 2,2 – ХС ЛПВП Критерии оценки: нормальные показатели для ЛПНП 3,9 ммоль/л (150 мг/100 мл), патология 4,9 ммоль/л (190 мг/100 мл) (G. Assmann, 1993).

Отражением дислипопротеинемии может служить коэффициент атеро генности. Коэффициент атерогенности, иначе индекс атерогенности, являет ся характеристикой атерогенной направленности липидного спектра. Индекс атерогенности рассчитывается как отношение содержания ХС в ЛПНП и ЛПОНП к его содержанию в ЛПВП (А.Н. Климов, 1977).

ХС общий – ХС ЛПВП Индекс атерогенности ХС ЛПВП Критерии оценки ИА: в норме этот показатель колеблется в пределах 1,98 – 2,51, при величине ИА=3 имеется умеренная вероятность развития ИБС, при величине более 3 – высокая вероятность ИБС.

2. Техническое оснащение биохимических методов исследования в клинико-диагностических лабораториях Прошло уже более полутора столетий с тех пор, как лабораторная ме дицина обрела самостоятельность, и исследования проб биожидкостей паци ентов выполняют не сами лечащие врачи, а их коллеги – специалисты клини ческих лабораторий. К этому привел научно-технический прогресс, обога тивший медицину таким обширным арсеналом методов и средств изучения клеточных, биологических и химических компонентов внутренней среды че ловека, что лабораторную диагностику пришлось выделить в отдельную спе циальность.

В то же время достижения фундаментальных наук – физики, химии, биологии – наряду с усложнением способов исследования биожидкостей соз дали основу для миниатюризации процессов анализа (для проведения анали зов непосредственно на местах) при сохранении надежности и информатив ности их результатов.

Любое лабораторное исследование заключается в воздействии на пробу биожидкости такими физическими, химическими или биологическими фак торами, которые позволяют найти в этой пробе искомый компонент, выявить его наличие или измерить количество. Успешное проведение клинического лабораторного анализа состоит в адекватном подборе тех факторов, которые способны специфично воздействовать на искомый компонент, преобразуя его в такую форму, в которой его можно отчетливо зарегистрировать даже в весьма малом объеме исследуемой биожидкости.

В настоящее время выполнение практически всех биохимических и других видов лабораторных исследований становится возможным на авто анализаторах.

  Анализаторы – это автоматизированные высокоточные системы для широкого спектра лабораторий, выполняющих исследования в области кли нической биохимии.

Р и с у н о к 1 – Анализатор биохимический автоматический BS- Во всём мире на сегодняшний день работает более 6 000 анализаторов серии BS (см. рис. 1). BS-300 разработан в 2003 году и прошел испытание и успешно работает во многих российских лабораториях.

Особенности прибора:

Возможность загрузки и программирования большого количества тес тов и виртуальных дисков реагентов и проб (использование легко сменяемых дисков, заполнить которые можно заранее или в процессе работы), контроль рабочих параметров анализатора, моментальная сигнализация об отклонени ях в работе системы – все это позволяет работать анализатору в автономном режиме, освобождая время оператору для решения других задач. Встроенная система охлаждения позволяет увеличить стабильность и сорок годности реагента на борту прибора. Система охлаждения имеет независимое питание от остальных систем анализатора и может работать 24 часа в сутки.

Широкие возможности по настройке прибора позволяют каждой лабо ратории выбрать удобный для персонала режим работы.

Фотометрирование всех реакционных ячеек три раза за каждый рабо чий цикл прибора (каждые 4 секунды, с последующим усреднением 3-х со седних результатов) позволяет не только получать высоконадёжные резуль таты, но и отслеживать и регистрировать ход всех реакций.

  Р и с у н о к 2 – Автоматический биохимический анализатор Metrolab 2300 GL Metrolab 2300 GL это открытая система для любых методик и реактивов (см. рис. 2). Анализатор характеризует высокая производительность: до тестов/час. Одновременный анализ позволяет проводить до 48 тестов. Непре рывная загрузка включает 48 проб. Разведение проб производится автоматиче ски. Измерение проводится на 9 длинах волн, в диапазоне 340–750 нм.

Предусмотрен полный контроль качества (графики Levy Jennings, пра вила Westgaard), импорт/экспорт данных, методов и файла истории, имеется автоматическая процедура резервного копирования.

Р и с у н о к 3 – Биохимический полуавтоматический анализатор Clima MC- Высокопроизводительный 15-канальный полуавтоматический биохи мический анализатор Clima-15 предназначен для проведения высокоточных биохимических и иммунотурбидиметрических исследований (см. рис. 3).

  С помощью анализатора Clima-15 можно одновременно проводить: из мерение 15 проб по одному параметру (режим «batch»);

измерение разных проб по различным параметрам (режим «random»);

измерение одной пробы по 15 параметрам (режим «profile»).

Открытая система позволяет использовать реагенты различных произ водителей.

Производительность анализатора составляет до 600 тестов/час (измере ние по конечной точке), или до 300 тестов/час (в режиме кинетика).

Анализатор удобен в использовании. Удобная клавиатура и большой графический жидкокристаллический дисплей, на который производится вывод параметров, результатов, подсказок существенно облегчают работу лаборанта.

Анализатор имеет встроенный термопринтер (110 мм). Что позволяет осуще ствлять распечатку методик, результатов анализа, статистических данных. В памяти анализатора одновременно может быть сохранено до 60 методик.

Анализатор не исключает возможности программирования и управле ние принтером, также возможно управление скоростью смешивания проб и реагентов.

Р и с у н о к 4 – Биохимический анализатор Stat Fax Анализатор Stat Fax 3300 (см. рис. 4) характеризует высокая произво дительность.

Для удобства работы предоставляется русифицированная версия про граммного обеспечения прибора. Большой LCD дисплей и встроенный прин тер. Встроенная проточная кювета позволяет сокращать расход используемо го реагента. Температурный контроль проточной кюветы 37°С.

Анализатор Stat Fax 3300 это открытая система для любых методик и реактивов. Характеризуется широким спектром методов расчета и измере ния: абсорбция (Absorbance), калибровка по стандарту (Standard Mode), бланк   по каждой пробе (Differential samples), калибровка по фактору (Factor Mode), многоточечная калибровка (Multi Standard Mode) (до 7 стандартов), многото чечная калибровка % Abs (Multi Standard % Abs) (до 7 стандартов), кинетика (Kinetic Mode) (последовательно или группами (Batch)) по стандарту (Stan dard) или фактору (Factor), по фиксированному времени (Fixed Time Kinetic) по стандарту (Standard) или фактору (Factor).

Р и с у н о к 5 – Биохимический автоматический анализатор ACCENT ACCENT 200 – полностью автоматический биохимический анализатор с прямой фотометрией и производительностью 200 анализов в час (до анализов в час с ISE) (см. рис. 5). В приборе реализованы последние дости жения в области автоматизации биохимического анализа, используются но вейшие материалы и технологии. Анализатор управляется с внешнего ком пьютера при помощи программы, работающей в операционной среде Win dows XP. Программа полностью русифицирована и адаптирована к россий ским требованиям.

Р и с у н о к 6. – Биохимический автоматический анализатор ACCENT ACCENT 300 – полностью автоматический биохимический анализатор с прямой фотометрией и производительностью 300 анализов в час (до 480 ана лизов в час с ISE) (см. рис. 6).

  Р и с у н о к 7 – Vitalit 1000 – автоматический анализатор для биохимического и иммунотурбидиметрического анализа Анализатор характеризует высокая производительность – до 120 тестов в час (в режиме кинетика) и до 200 тестов в час (по «конечной точке») (см.

рис. 7).

Используемые методы:

• Измерение «по конечной точке» – моно- или бихроматическое.

• Измерение кинетическим методом.

• Измерение дифференциальным методом (с двумя реагентами или холостой пробой).

• Измерение псевдокинетическим (двухточечным) методом по стан дарту.

• Многоточечная калибровка до 8 стандартов.

• Иммунотурбидиметрическое измерение с расчетом значений по не линейной калибровочной кривой.

Возможности прибора позволяют работать в разных режимах:

• «от теста к тесту» в усовершенствованном режиме BATCH MODE, с оптимизацией времени проведения цикла анализов, • «по пациентам» в режиме «срочного анализа».

Разработчиками предусмотрена также возможность проведения «сроч ного анализа» нескольких компонентов, возможность дозагрузки проб и реа гентов без прерывания программы.

Предусмотрена автодиагностика системы управления. Есть возмож ность подключения внешнего принтера. Имеется удобный интерфейс для со единения с внешним компьютером для передачи информации в базу данных.

Кроме того анализатор имеет встроенный принтер, позволяющий про водить печать результатов анализа при проведении теста (по каждому тесту), результатов анализа после окончания цикла работы (по каждому пациенту или по каждому тесту), также возможна печать запрограммированных мето дик, калибровочных графиков, графиков кинетических измерений, результа тов контроля качества и графиков Леви-Дженнингса.

Простое управление прибором осуществляется с помощью пяти кла виш по указаниям программы. Для программирования методик анализа раз   работчиками предоставлены 64 свободных канала. Существует возможность добавления проб в «рабочий лист» без остановки цикла анализов.

Контроль качества измерений проводится на трех уровнях с демонст рацией графиков Леви-Дженнингса на экране прибора.

Сервисное обслуживание анализатора проводится сертифицированны ми сервис-инженерами, прошедшими специальное обучение в компании производителе.

Р и с у н о к 8 – COBAS INTEGRA Cobas Integra 800 – это идеальное средство для более продуктивной ор ганизации и выполнения ежедневных лабораторных исследований, которое помогает оптимизировать работу лаборатории и избежать ручного труда (см.

рис. 8).

Cobas Integra 800 гарантирует постоянство качества результатов. Уни кальная концепция реагентов объединена с автоматическими системными контрольными механизмами, такими как проверка интегральности пипетиро вания. Высокая производительность (до 855 фотометрических тестов/час) по зволяет использовать анализатор в крупных лабораториях.

На борту анализатора одномоментно могут находится до 72 тестов.

Реактивы на борту анализатора остаются стабильными до до 6 месяцев.

  Р и с у н о к 9 – Roche/Hitachi в новом анализаторе cobas c 311 продолжили традиции качества Автоматический биохимический анализатор произвольного доступа (Random Access) (рис. 9). Предназначен для лабораторий, выполняющих 50– 200 образцов в день. Меню клинической химии представляет на выбор более 100 тестов. Жидкие, готовые к использованию реагенты в упаковках cobas c pack легко устанавливаются на борт анализатора. Каждая кассета содержит все необходимые для анализа реагенты, что упрощает хранение и логистику.

Объемы упаковок обеспечивают экономное использование при определении как рутинных, так и специфических параметров. Высокая стабильность ка либровки значительно уменьшает расход реагентов. 73% тестов требуют ме нее 5 мкл образца, что удобно для педиатрических образцов.

Арсенал современных анализаторов и технических средств для прове дения биохимических исследований разнообразен: стекло и посуда, вакуум ные системы забора крови – Вакуэт, разнообразные дозирующие устройства, обычные и программируемые фотометры, высокопроизводительные биохи мические анализаторы.

Появление новых методов анализа, новых совершенных технологий способствует ежегодному обновлению на рынке лабораторного оборудова ния, постоянному изменению условий работы на нем известных фирм, появ лению новых компаний, слиянию их между собой, быстрому решению слож ных научно-технических проблем, не имеющих равных себе по сложности в других областях приборостроения.

Автоматизация выполнения лабораторных исследований изменила вы пуск наборов реагентов для клинической лабораторной диагностики (см.

приложение 1). В России начат серийный выпуск наборов реагентов. Все вы   пускаемые в настоящее время наборы реагентов, стандартные, контрольные, калибровочные образцы стандартизированы и зарегистрированы в Минздра ве РФ. Данные наборы перед регистрацией проходят серьезные испытания в ведущих лабораториях и медицинских центрах страны. Такая стандартизация позволяет получать в разных лабораториях сопоставимые результаты иссле дований. Наборы контролируются системой Государственного контроля ка чества, в случаях несоответствия которой они могут быть сняты с производ ства. Лаборатории при наличии дефектов в работе наборов могут предъяв лять рекламации фирме-изготовителю и требовать замены их на качествен ную продукцию.

3. Профилактика и коррекция нарушений липидного обмена Применение антиоксидантов уменьшает риск развития и прогрессиро вания атеросклероза, несколько снижает высокий уровень липопероксидов в крови больных хроническими формами ИБС, артериальной гипертонии. Од нако для достижения эффекта их применение должно быть достаточно дол гим (месяцы), в связи с чем, указанные средства представляют интерес толь ко в качестве профилактических мер.

Определенными антиоксидантными свойствами обладает аскорбиновая кислота. Она способна восстанавливать окисленные -токоферольные ради калы, возвращая -токоферолу его антиоксидантные свойства, а также непо средственно связывать супероксидионы и активные радикалы. Однако ее ан тиоксидантная активность невелика и проявляется лишь в малых концентра циях. В высоких концентрациях она выступает как прооксидант. Указанные свойства аскорбиновой кислоты позволяют использовать ее преимуществен но как профилактическое средство.

В последние годы довольно активно стали использоваться в качестве пищевых добавок или в составе витаминных комплексов ионы металлов с пе ременной валентностью (селен, марганец, медь, цинк), которые входят в со став активных центров ряда природных антиоксидантных ферментов (супер оксиддисмутаз) и потому способны существенно увеличивать их активность.

Особую значимость использование таких препаратов приобретает в географи ческих зонах с низким содержанием указанных элементов в воде и пище.


К другим природным антиоксидантным соединениям относятся флаво ноиды, в большом количестве содержащиеся в виноградных косточках, яго дах черники, листьях гинкго билобы, сухом красном вине. Флавоноиды тор мозят свободнорадикальные процессы на уровне инициации, взаимодействуя с активными радикалами. Однако в настоящее время доказана их эффектив ность только in vitro, убедительных данных о доминирующей антиоксидант ной активности флавоноидов in vivo пока не получено.

Определенную антиоксидантную активность имеют SH-содержащие аминокислоты (цистеин, цистин, метионин), при этом SH-группы выступают как конкурирующие с другими субстратами объекты окисления, не дающие свободных радикалов и фактически гасящие цепную реакцию свободноради   кального окисления. SH-содержащие соединения способны пролонгировать продолжительность «жизни» молекулы NO. Однако терапевтическое примене ние соединений, содержащих SH-группы (глютатион, тиоловая кислота, N-ацетилцистеин), ограничивается из-за невысокой их проницаемости через цитоплазматические мембраны, где они могут являться защитниками от внут риклеточного оксидативного стресса, а также из-за способности активировать перекисные реакции во внеклеточной среде.

Умеренной антиоксидантной активностью обладают женские половые гормоны (эстрадиол, эстрагон, эстриол), чем, вероятно, обусловлена нерас пространенность атеросклероза у женщин в детородном возрасте. Описана опосредованная антиоксидантная активность у мелатонина. Однако клиниче ское использование гормональных средств в качестве антиоксидантов пред ставляется весьма проблематичным.

В последние годы предпринимаются небезуспешные попытки клиниче ского использования коэнзима Q (убихинона) – одного из самых распростра ненных соединений в клетках бактерий и животных, сходного по химической структуре с -токоферолом. Однако возможности, которыми обладает коэн зим Q, и целесообразность его применения служат в настоящее время пред метом изучения.

Большой интерес представляют в клиническом плане синтетические антиоксиданты или препараты, обладающие антиоксидантной активностью:

«Комплевит», «Селмивит».

Вместе с тем, медикаментозные средства коррекции и профилактики состояний, сопровождающихся нарушениями липидного обмена, не являют ся универсальными мерами по предотвращению описанных нарушений.

Одним из немедикаментозных факторов, повышающих адаптационные возможности организма, является адаптация к периодической нормобари ческой гипоксии.

Адаптация к гипоксии проводится в нормобарическом режиме на уста новке «Горный воздух» (Оренбург, ОрГМА, Клиника адаптационной тера пии). Дыхание газовогипоксической смесью (ГГС) проводится в циклично – фракционированном ритме в среднем от 2 до 5 минут, затем следует дыхание атмосферным воздухом от 2 до 5 минут (один цикл). Число циклов варьирует от 2 до 10 в течение одного сеанса. Суммарное время дыхания ГГС в течение одного сеанса составляет 15–40 мин., при общей продолжительности сеанса от 15 до 60 мин. Количество содержащегося в ГГС кислорода варьирует от 18% до 10%. Продолжительность курса лечения составляет от 16 до 21 сеан са, 6 раз в неделю.

Ф.З. Меерсон (1981) на основе экспериментальных исследований лабо раторий по адаптации к гипоксии, физическим нагрузкам, холоду, сложным ситуациям среды, а также анализа литературы сформулировал общую кон цепцию механизма индивидуальной адаптации. Согласно этой концепции, нарушение гомеостаза, вызванное каким-либо воздействием со стороны внешней среды, активирует системы ответственные за адаптацию.

  В результате возникают две цепи явлений: во-первых, мобилизация функциональной системы, которая доминирует в адаптации к данному кон кретному фактору, в частности, к недостатку кислорода, и, во-вторых, со вершенно неспецифическая, возникающая при действии любого сильного раздражителя, стандартная активация стресс-реагирующих систем.

В дальнейшем, в клетках доминирующей функциональной системы, специфически ответственной за адаптацию, увеличение физиологической функции, через вызываемые ею метаболические изменения, активирует гене тический аппарат. Возникает активация синтеза нуклеиновых кислот и бел ков, образующих ключевые структуры клеток, лимитирующих функцию. В итоге избирательного роста этих ключевых структур формируется так назы ваемый естественный структурный след, который приводит к увеличению функциональной мощности системы, ответственной за адаптацию, и делает возможным превращение срочной адаптации, возникающей непосредственно после начала действия раздражителя и может реализоваться лишь на основе готовых, ранее сформировавшихся биологических механизмов, в устойчивую долговременную.

Основу такой устойчивой адаптации составляют, по меньшей мере, пять структурно-закрепленных комплексов, образующих единый системный структурный след.

Первый комплекс формируется в системе захвата и транспорта кисло рода, который отвечает регуляторно-детерминированной или непосредствен ной гиперфункцией на его дефицит в окружающей среде.

В первые же дни после начала действия гипоксии формирование сис темного структурного следа проявляется активацией синтеза РНК и белка в легких, сердце, костном мозге, сосудах коронарного русла, а также в симпа тических нейронах, иннервирующих сердце. Итогом такой активации синтеза является прямой рост органов, ответственных за захват и транспорт кислоро да, а именно: увеличение дыхательной поверхности и количества альвеол в легких, умеренная гипертрофия и увеличение функциональных возможно стей сердца, увеличение в 1,5–2 раза емкости крови, гипертрофия нейронов дыхательного центра и дыхательных мышц. Параллельно развиваются изме нения нервной регуляции сердца: наблюдается гипертрофия симпатических нейронов звездчатых узлов, увеличение содержания норадреналина в надпо чечниках при одновременном сбалансированном увеличении активности фосфодиэстеразы в сердце. Эти изменения, увеличивая мощность и экономи зируя функцию аппарата дыхания и кровообращения, а вместе с тем возмож ность его адренергической мобилизации, не только однозначно повышают резистентность к самой гипоксии, но обладают хорошо известным эмпириче ски и доказанным экспериментально перекрестным эффектом.

Второй комплекс изменений, развивающийся в процессе адаптации, ха рактеризуется целой системой сдвигов на внешнем уровне нейроэндокринной регуляции, что выражается активацией синтеза белка и РНК в головном мозге, особенно в коре и в области вегетативных центров продолговатого мозга.

  Одновременно в мозгу происходит накопление серотонина, при неко тором снижении содержания норадреналина, а в надпочечниках – много кратное увеличение содержание опиоидных пептидов и, прежде всего, бета эндорфина. В крови при этом одновременно отмечается снижение содержа ния серотонина и гистамина. Как и следовало ожидать, тот широкий ком плекс устойчивых изменений нейроэндокринной регуляции приводит к по следствиям, которые далеко выходят за пределы повышения устойчивости к гипоксии. Они проявляются ускорением выработки условных рефлексов и особенно их сохранением.

Помимо этого, индуцированные адаптацией регуляторные изменения ограничивают стресс-реакцию и защищают сердце, желудок, печень от стрессовых повреждений. Эта защита реализуется в достаточно генерализо ванной форме и проявляется, в частности, полным предупреждением или резким ограничением стрессорной ферментемии.

Таким образом, адаптация к периодической гипоксии вызывает ком плекс изменений в центральных регуляторных механизмах, способных эф фективно ограничивать стресс-реакции, обозначенные как центральные стресс-лимитирующие системы.

Третий комплекс изменений при адаптации к периодической гипоксии выражается определенными, достаточно стабильными сдвигами регуляции водно-солевого обмена и миогенного тонуса резистивных сосудов. Эти сдви ги с одной стороны приводят к потере организмом избытка воды и ионов хлористого натрия, а с другой стороны тормозят развитие гипертонии.

Четвертый комплекс изменений, индуцируемых адаптацией к гипок сии, реализуется в системе иммунитета. Адаптивные изменения в иммунной системе являются причиной определенных модулирующих защитных эффек тов адаптации.

Наконец, пятый адаптационный комплекс состоит в том, что адапта ция к гипоксии, парадоксальным образом действует подобно химическим индукторам микросомальной системы окисления в печени, что выражается в увеличении содержания цитохромов Р450 и В5, а также увеличении N демитилазной активности. Эти факты означают, что дезинтоксикационные возможности печени при адаптации к гипоксии должны возрастать, и хорошо согласуются с данными о том, что эта адаптация предупреждает нарушения условно-рефлекторной деятельности и повреждения ткани при действии се роводородсодержащего газового конденсата.

Помимо этих перечисленных компонентов системного структурного следа в периферических тканях происходит комплекс сдвигов, затрагиваю щих локальные механизмы регуляции обменных процессов. К таким сдвигам относятся изменения систем регуляции интенсивности перекисного окисле ния липидов. Так, под влиянием адаптации к периодической гипоксии отме чается повышение активности супероксиддисмутазы и каталазы. Другой, весьма важный спектр адаптивных изменений на уровне локальных механиз мов регуляции характеризуется сдвигами в рецепторном аппарате сердца.

  Наблюдаемое при этом снижение активности аденилатциклазы при увеличе нии плотности М-холинорецепторов может играть роль в известном увели чении резистентности сердца адаптированных животных к адренотоксиче ским повреждениям. Наконец, под влиянием, адаптации к гипоксии в клетках происходит накопление так называемых стресс-белков, способных предот вращать денатурацию белков и таким образом защищать клеточные структу ры от повреждения.

Все эти изменения в локальных механизмах регуляции метаболизма и функции, представляющих по сути локальные стресс-лимитирующие систе мы определяют наряду с повышением мощности центральных стресс лимитирующих систем, высокую степень перекрестного защитного эффекта адаптации, и обозначены, как «феномен адаптационной стабилизации струк тур» («ФАСС»).


Весь перечисленный выше комплекс сдвигов, возникающий в организ ме под влиянием адаптации к периодической гипоксии, и ее разветвленный системный структурный след, лежащий в основе широкого спектра защит ных эффектов, послужило для использования данного метода в клинике для лечения целого ряда заболеваний неинфекционной природы у человека.

Метод адаптации к периодической гипоксии имеет ряд существенных преимуществ перед другими видами гипоксии (гипоксия в условиях высоко горья и среднегорья, постоянная гипоксия). Эти преимущества, помимо чис то организационных и экономических, а также возможности постоянного и индивидуального дозированного воздействий гипоксии, заключается еще и в том, что за каждым сеансом адаптации к сниженному парциальному давле нию кислорода, следует неизбежная реоксигенация, которая, как известно, вызывает активацию свободнорадикального окисления липидов, и как след ствие вышеописанный эффект, связанный с повышением мощности антиок сидантных систем.

При адаптации к постоянной гипоксии, активации этих ферментов не только не происходит, но и напротив, отмечается снижение их активности по принципу атрофии от бездеятельности. В итоге, эффективность терапевтиче ского и профилактического воздействия адаптации к постоянной гипоксии оказывалась недостаточной в ситуациях, требующих напряжения антиокис лительных систем организма, например, в условиях реоксигенации после острой гипоксии.

В настоящее время метод адаптации к периодической гипоксии в усло виях барокамеры и установки «Горный воздух» апробированы и используют ся с целью повышения выносливости у здоровых людей и профилактики факторов риска ИБС, для лечения дерматозов и некоторых форм экзем, брон хиальной астмы и др. Такое широкое внедрение метода в клиническую прак тику является результатом реализации теоретической концепции в терапии неинфекционных заболеваний.

Анализ литературных данных о влиянии металлов переменной валент ности на органы и клетки человека и экспериментальных животных, которые   приведены выше, и оценка изменений, которые происходят в организме при адаптации к периодической гипоксии позволяют предположить, что данный метод может оказать влияние на процессы формирования долговременной адаптации организма, в частности к периодической гипоксии при вдыхании гипоксических смесей.

Основанием для такого предположения могут служить факты, свиде тельствующие о том, что воздействие на организм d-элементов приводит к значительному снижению мощности как центральных стресс-лимитирующих систем, так и локальных. Одновременно с этим в тканях отмечается сниже ние активности антиоксидантных ферментов и активация перекисного окис ления липидов, о чем уже говорилось выше.

Адаптация к гипоксии, как было показано выше, напротив, активирует как центральные, так и локальные стресс-лимитирующие механизмы, что и делает возможным ее использование с целью ограничения повреждений внутренних органов, наблюдаемых при хроническом влиянии d-металлов.

Этот эффект основан на положительном перекрестном защитном эффекте адаптации, когда приспособление к действию определенного фактора – ги поксии повышает резистентность организма к повреждающим воздействиям совершенно других факторов. В результате адаптации к гипоксии повышает ся устойчивость не только к ней самой, но и к другим воздействиям: физиче ской нагрузке, стрессу, интоксикациям, т. е. происходит повышение «мощно сти» и внутренних механизмов саморегуляции. Но тем не менее она может привести и к снижению такой устойчивости «отрицательный перекрёстный эффект».

  Приложение Реагенты для клинической лабораторной диагностики Фирма Название Наименование Метод производитель 1 2 3 Общий Cholesterol liquid энзиматический колоримет- Рош диагностика холестерин рический Холестерин-11 / энзиматический колоримет- Витал диагностика 21/ 31 рический Fluid Stable Холестерин-12 / энзиматический колоримет- Витал диагностика 22/ 32 рический CHOL-60 LQ энзиматический колоримет- Кормей Русланд рический (Cholesterol FS) метод Триндера, фермента- ДиаСис Германия тивный, конечная точка минут (Cholesterol FS) метод Триндера, фермента- ДиаСис Германия тивный, конечная точка минут Триацил- Триглицериды-2/ энзиматический колоримет- Витал диагностика глицериды 12/ 22 рический TG-60 LQ энзиматический колоримет- Кормей Русланд рический Triglycerides энзиматический колоримет- Рош диагностика рический Triglycerides FS метод Триндера, фермента- ДиаСис Германия тивный, конечная точка минут Triglycerides FS метод Триндера, фермента- ДиаСис Германия тивный, конечная точка минут Липопро- HDL – Cholesterol метод прямого иммуноинги- Рош диагностика теины direct бирования, без осаждения, высокой конечная точка плотности HDL-Холестерин- энзиматический, с осаждени- Витал диагностика 04 ем HDL-Холестерин- энзиматический метод с им- Витал диагностика 05 муноингибированием, без осаждения HDL-DIRECT прямого иммуноингибирова- Кормей Русланд ния, без осаждения, конечная точка HDL энзиматический, с осаждени- Кормей Русланд ем (HDL-C Immuno метод прямого иммуноинги- ДиаСис Германия FS) бирования, без осаждения, конечная точка       Окончание приложения Окончание таблицы 1 2 3 Липопроте- LDL-Холестерин- энзиматический метод с се- Витал диагностика ины низкой 06 лективной защитой, без оса плотности ждения LDL-DIRECT энзиматический метод с се- Кормей Русланд лективной защитой, без оса ждения LDL энзиматический, с осаждени- Кормей Русланд ем LDL – Cholesterol метод прямой селективный, Рош диагностика direct без осаждения, конечная точ ка (LDL-C Select FS) метод прямой селективный, ДиаСис Германия без осаждения, конечная точ ка   2.4 Лекция на тему: «Научно-методическое обеспечение исследований и разработок методов профилактики и ограничения раннего ожирения»

Лекторы: С. И. Красиков, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой медицинской и фармацевтиче ской химии Оренбургской государственной медицинской академии Е. Н. Лебедева, кандидат биологических наук, доцент кафедры биологической химии Оренбургской государственной медицинской академии, ведущий научный сотрудник НОЦ Оренбургского государственного института менеджмента План лекции 1. Современные представления об ожирении 2. Методы количественной оценки степени ожирения 2.1. Расчетные методы 2.2. Аппаратное определение состава тела 3. Методы биохимической диагностики при ожирении 4. Методы медикаментозного и немедикаментозного лечения ожирения «Я видел нескольких человек, умерших от голода, и сотни тысяч – от переедания».

Б. Франклин 1. Современные представления об ожирении В последние десятилетия наибольшее распространение получило одно из таких опасных человеческих заболеваний, как ожирение. Под ожирением следует понимать хроническое заболевание обмена веществ, проявляющееся избыточным развитием жировой ткани, прогрессирующее при естественном течении, имеющее определенный круг осложнений и обладающее высокой вероятностью рецидива после окончания курса лечения. Его развитию пред шествует наличие избыточной массы тела. Это еще не ожирение, но «пред болезнь», состояние, свидетельствующее о скрытых нарушениях обменных процессов в организме.

По данным ВОЗ число лиц с избыточной массой тела (ИМТ) и ожире нием весьма велико. Достаточно сказать, что избыточной массой тела в 1995 г. страдало 200 млн. человек, а через 5 лет их число возросло до млн. человек. В настоящее время более половины взрослых людей Европы в возрасте 35–65 лет страдают избыточным весом. В США 20% взрослых муж чин и 28% женщин имеют ожирение, и еще около трети населения – избы   точный вес. В России в 90-х годах ожирение отмечалось более чем у полови ны людей, старше 40 лет.

В некоторых странах число лиц с избыточной массой тела превышает 50% от числа всех жителей.

Серьезное беспокойство вызывает распространение ожирения среди детей и подростков. Так, частота избыточной массы тела среди детей около 10 лет в большинстве стран Европы составляет 10–20%, а в Греции, Италии, на Мальте превышает 30%. Ожидается, что в ближайшие два десятилетия число больных с ИМТ увеличится в 2 раза.

В связи с приведенными сведениями ожирение было признано ВОЗ но вой неинфекционной эпидемией XXI века.

Помимо несоответствия существующим эстетическим нормам, люди с ожирением нередко подвергаются дискриминации в социальных отношениях и при найме на работу. Это, в свою очередь, может приводить к чувству изо ляции и депрессии, требующих подчас психологической или даже психиат рической помощи. В повседневной жизни ожирение ограничивает возможно сти пациентов в выборе одежды, в доступе сидений в общественных местах, возможности прогулок и подъема по лестницам, поддержании гигиены, в сексуальной сфере и т. д.

Однако далеко не все из нас до конца осознают, что, прежде всего, ожирение – тяжелейшее заболевание, развивающееся в человеческом орга низме как следствие взаимодействия генетических, метаболических, пове денческих и психологических факторов. Главной причиной ожирения до не давнего времени считали избыток энергии, потребляемой с пищей, а также недостаточный ее расход, проявляющийся в форме отложения липидов в жи ровой ткани. Но в настоящее время получены новые данные о многообраз ных молекулярных механизмах развития и протекания этой патологии.

В основе накопления массы жира лежит не только энергетический дис баланс (преобладание энергии потребления над энергией расхода), как пола гали ранее, но и дисбаланс нутриентов, и прежде всего – жира. Ожирение прогрессирует, когда масса съеденного жира превосходит возможности орга низма по его окислению. Кроме того, в настоящее время установлена эндок ринная функция жировой ткани. Установлено, что жировые клетки секрети руют гормоны, цитокины, факторы роста и увеличение массы жировой ткани приводит к существенным эндокринным сдвигам в организме.

Следовательно, ожирение – эндокринное заболевание, требующее серьезного внимания и лечения (см. рис. 1).

  Р и с у н о к 1 – Энергетический баланс и пути терапевтических воздействий при ожирении (по С. А. Бутровой, 2001) Если посмотреть на физиологические аспекты накопления массы тела с точки зрения потребления и расхода энергии, то, конечно, единственным энергетическим материалом является пища. Если же ее поступает много, а расходуется недостаточно, то при соответствующих факторах: наследствен ности, типе питания, избыточная масса тела, а то и ожирение, проявятся дос таточно быстро. Установлено, что возможности утилизации жиров и углево дов существенно различаются. Емкость депо углеводов в организме лимити рована и составляет 70 г в печени и 120 г – в виде гликогена в мышцах. В от личие от углеводов, жира может накапливаться в организме до нескольких десятков килограммов.

Критерии ожирения различны для мужчин и женщин, данные пред ставлены в таблице 1.

Т а б л и ц а 1 – Критерии ожирения для мужчин и женщин Содержание жира в организме, % Категория Мужчины Женщины Норма 12–20 20– Промежуточная 21–25 31– Ожирение 25 До последнего времени определение жира в организме являлось слож ной лабораторной задачей. Чтобы оценить степень ожирения, исследователи предлагали десятки различных подходов, включающих как простейшие из мерения, так и самые современные и дорогостоящие методы. Краткая харак теристика этих методов приводится ниже.

  2. Методы количественной оценки ожирения 2.1. Расчетные методы Формула Брока:

Идеальный вес = рост в см – 100 (при росте до 165 см ) Идеальный вес = рост в см – 105 (при росте 166–175 см) Идеальный вес = рост в см – 110 (при росте более 175 см) При астеническом типе телосложения полученое значение уменьшают на 10%, при гиперстеническом увеличивают на 10%.

Окружность талии:

У женщин окружность талии должна быть в норме не более 88 см, но лучше – менее 80 см, у мужчины – не более 102 см, но лучше – менее 94 см.

Индекс массы тела:

Индекс массы тела раcчитывается как масса тела (кг), деленная на рост (м), возведенный в квадрат:

ИМТ= вес (кг) / рост (м2) Весо-росто-объемный показатель Бернгардта (применяется у муж чин):

Рост (см) х Окружность грудной клетки на уровне сосков (см) На сегодняшний день не существует методов определения содержания жира в организме, пригодных для индивидуумов с сильным развитием мы шечной массы. Все существующие методики рассчитаны (за исключением гидростатического взвешивания) на определённые группы населения (на пример, на юношей и девушек, пожилых мужчин и женщин спортсменов во обще, студентов обоего пола и т. д.). Поэтому лучшим, на что можно наде яться (за исключением возможного доступа к подводному взвешиванию со всей нужной для этого аппаратурой и техническим персоналом), будет более или менее точная интерполяция.

Показатели содержания жира в организме молодых мужчин Наилучшей методикой подсчета является методика, разработанная Зу ти и Голдингом из Кентского Госуниверситета. Методика разрабатывалась на основе антропометрических данных взрослых мужчин (в возрасте от 25 до лет). Но эта методика не применима для юношей до 25 лет.:

% жира = 8,7075 + 0,489309 (окружность талии, в см) + 0, (складка кожи на груди, в мм) – 6,35853 (диаметр правого запястья, в см).

Эта техника подсчета имеет стандартную погрешность, равную плюс минус 2,29 %. Очень простой методикой, не требующей использования крон циркулей для замера складок кожи, является следующая техника, примени мая к мужчинам студенческого возраста. Мышечный вес тела = 92,42 + 1, (вес обнаженного тела, в фунтах) – 4,15 (обхват талии в области пупка, в дюймах).

Затем подсчитывайте процент содержания жира следующим образом:

% жира = вес тела – вес тела без жира х 100 / вес тела.

Существует еще одна методика, применяемая опять же для студентов.

  Плотность тела = 1,1043 – 0,001327 (складка кожи на бедре, в см) – 0,001131 (подлопаточная складка кожи, в мм).

Затем высчитывается процент жира следующим образом:

% жира = 100 (4,570 / плотность тела – 4,142).

Последние две методики имеют погрешность плюс-минус 4% и более приемлемы для молодых людей.

Содержание жировой ткани у женщин и методика ее подсчета У женщин жир откладывается в теле более неравномерно, чем у муж чин, и поэтому необходимо использовать не только различные участки для замера складок кожи и проведения антропометрических замеров, но и боль шее их количество. Это делает процедуру подсчетов искомого процента не сколько более сложной.

Вес тела без жира, в кг = 8,987 + 0,732 (вес в кг) + 3,786 (диаметр запя стья, в см) – 0,157 (окружность живота, в см) -0,249 (окружность бедер, в см) + 0, 434 (окружность предплечья, в см).

Затем подсчитывается процент жира следующим образом:

Процент жира в теле = вес тела – вес тела без жира / вес тела.

Как и в случае с подсчетом данного процента для мужчин, стандартная погрешность равна около плюс-минус 4%, а если женщина, пользующаяся данным уравнением, имеет мышечную массу более развитую, нежели обыч но это бывает у женщин, то следует вычесть все 4% из полученного резуль тата.

Однако, несмотря на широкий выбор, наиболее успешным оказалось определение так называемого индекса массы тела (ИМТ), параметра, пред ложенного еще более полутора веков назад.

Таблица 2 – Методика определения риска на основе определения ин декса массы тела Риск развития других ИМТ, кг/м Классификация патологических процессов Сниженный вес Низкий, но риск сопутствующих 18, заболеваний увеличен Нормальный вес 18,5-24,9 Средний Избыточный вес 25,0-29,9 Слабо увеличенный Ожирение 30, Класс I 30,0-34,9 Умеренный Класс II 35,0-39,9 Высокий Класс III 40,0 Очень высокий Использование методов количественной оценки необходимо для опре деления состояния массы тела пациента, наличия ожирения, степени риска развития сердечно-сосудистых заболеваний, преждевременной смерти (см.

табл. 2).

  2.2. Аппаратное определение состава тела 1. Аппаратная диагностика:

а) биоимпедансметр для анализа внутренних сред организма (процент ное соотношение воды, мышечной и жировой ткани) 2. определение местоположения различных видов жира в организме.

а) компьютерная томография DEXA позволяет очень точно измерить соотношение различных масс тела, а также определить с точностью до грам ма жировую массу организма в целом и в каждой из обследуемых зон. Полу ченная таким образом информация очень важна для определения нарушений, вызывающих каждый отдельный тип ожирения. Она позволяет определить метаболический тип ожирения: («женский» или «мужской»), определить или уточнить наличие нарушений обмена веществ и, следовательно, потенциаль ных рисков, связанных с избытком жировой ткани, в особенности риска со судистых заболеваний.

Р и с у н о к 2 – Принцип действия компьютерного сканера DEXA   б) термография Р и с у н о к 3 – Термография – метод оценки распределения жировой ткани Термографический снимок показывает распределение подкожных жи ровых отложений. Чем ниже температура поверхности тела (темные тона), тем толще слой жира на этом участке (см. рис. 3). Отложение жира преиму щественно на ягодицах называется «женским» типом ожирения, на животе и пояснице – «мужским». Считается, что ожирение по мужскому типу более опасно с точки зрения развития метаболического синдрома, но легче подда ется избавлению от лишних килограммов в) Мультиспиральный сканер трехмерного изображения.

Благодаря мультиспиральному сканеру можно точно измерить массу глубокого и поверхностного брюшного жира, а также отобразить на экране в трех измерениях глубокий брюшной жир. Измерение жировой ткани и ее ви зуализацию можно осуществить несколько раз для наблюдения за измене ниями в процессе потери веса.

  Р и с у н о к 4 – Визуализация жировых отложений методом 3D сканирования 3. Методы биохимической диагностики при ожирении Иммуноферментный анализ (ИФА) – лабораторное исследование, ос нованное на высокой избирательности и специфичности иммунологических реакций «антиген-антитело». В настоящее время метод ИФА используется для определения широкого класса веществ: в том числе и гормонов жировой ткани.

  Принципы реакции ИФА Р и с у н о к 5 – Схем хода типичной реакции ИФА ма   Оборудование для проведения биохимической диагностики Анализатор AU400 (Olympus, Япония) Полностью автоматизированный биохимический анализатор. Исполь зуется несколько методик измерения: фотометрия, турбидиметрия, нефело метрия, а также определяются высокоточные электролиты с помощью ионо селективных электродов. Прибор предназначен для биохимического анализа крови и мочи, определения специфических белков. В арсенале AU400 – воз можность определения более 100 аналитов.

Анализатор Elecsys 2010 (Roche Diagnostics GmbH, Швейцария) Полностью автоматизированная система для иммунохимического ана лиза, основанного на передовой технологии электрохемилюминесценции.

Многоуровневая функция самопроверки гарантирует максимальную надеж ность. Меню тестов включает более 60 позиций, в том числе исследования гормонов,в том числе гормонов жировой ткани.

Architect i 2000 sr (Abbot Laboratories S.A., США)   Автоматическая модульная иммунохимическая система с хемилюми нисцентной технологией Chemiflex, обеспечивающая превосходное качество анализов с минимальными затратами на их проведение и максимальной про изводительностью. Анализатор позволяет единовременно загрузить до образцов на модуль, осуществлять загрузку приоритетных тестов без преры вания работы системы. Анализ образцов может проводиться в любом задан ном порядке. Первый результат может быть получен уже через 28 минут, ка ждый последующий через 18 секунд. Производительность прибора до тестов в час на один модуль.



Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 |
 





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.