авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:     | 1 || 3 | 4 |

«Иркутский государственный университет путей сообщения А.И. Илларионов, Е.А. Илларионова, И.П. Сыроватский ОПТИЧЕСКИЕ ОБРАЗЦЫ СРАВНЕНИЯ В СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОМ ...»

-- [ Страница 2 ] --

Таблица 2. Результаты спектрофотометрического определения ацикловира в таблетках по 0,2 г по образцам сравнения Метрологические характеристики № се (n=10, P=95%) Образцы сравнения рии Х Sх S S Е% Sr Х феррицианид калия 99,98 0,8312 0,9117 0,2885 0,6520 0,652 0, ацикловир 99,37 1,0480 1,0237 0,3240 0,7321 0,737 0, феррицианид калия 102,00 0,9924 0,9962 0,3153 125 0,699 0, ацикловир 101,44 0,9896 0,9948 0,3148 0,7115 0,701 0, феррицианид калия 98,94 0,7513 0,8667 0,2743 0,6199 0,627 0, ацикловир 98,79 1,0644 1,0317 0,3265 0,7378 0,747 0, Из представленных в таблицах данных следует, что при спектрофо тометрическом определении ацикловира в лекарственных формах по об разцу сравнения лекарственного вещества и по оптическому образцу срав нения получены близкие результаты. Относительная ошибка определения не превышает 0,75 %.

2.4. Спектрофотометрическое определение пиразидола С целью разработки унифицированной методики спектрофотометри ческого определения пиразидола в субстанции и лекарственных формах [46] были изучены спектры поглощения растворов пиразидола в интервале рН 1,1-13,0 в спектральной области от 220 до 400 нм (рис. 2.7).

УФ-спектр поглощения 0,002 % раствора пиразидола А 1, 1, 0, 0, 1,6 12, 0, 0, 6, нм 220 230 240 250 260 270 280 290 номер кривой соответствует значению Н Рис. 2. Из рис. 2.7 видно, что спектр поглощения пиразидола характеризу ется двумя максимумами поглощения. При рН 12,1 максимумы поглоще ния находятся в области 232 и 289 нм. Снижение рН до 1,6 сопровождается гипсохромным смещением максимумов поглощения в области 228 и нм, что обусловлено образованием ионизированной формы пиразидола.

Спектр поглощения спиртового раствора пиразидола (рН 6,5) характеризу ется двумя полосами поглощения с максимумами поглощения в области 230 и 276 нм. Влияние pH на интенсивность поглощения раствора пирази дола представлено в табл. 2.17.

Таблица 2. Влияние рН на интенсивность поглощения растворов пиразидола рН 1,6 2,7 3,7 4,1 5,2 6,3 7,7 8,7 10,5 11,5 12,1 13, А 0,300 0,298 0,297 0,297 0,270 0,270 0,270 0,270 0,270 0,285 0,293 0, Из представленных в табл. 2.17 результатов видно, что интенсив ность поглощения незначительно изменяется для растворов пиразидола с рН 1-4, практически не меняется для растворов пиразидола с рН 5-10 и увеличивается для растворов с рН 11.

Исследования показали, что при хранении растворов пиразидола бо лее трех суток происходит изменение рН хранящихся растворов, что со провождается изменением их оптических характеристик. Наиболее суще ственные изменения происходят с растворами пиразидола с рН 8,7-10,5.

Для этих растворов наблюдается снижение рН до 7,0-7,8, что обусловлива ет смещение максимума поглощения на 12 нм в коротковолновую область спектра. Наиболее стабильны растворы пиразидола с рН 1,6-6,5 и 11,5 12,1. При хранении таких растворов более трех суток не наблюдается из менений спектральных полос поглощения, но происходит незначительное снижение интенсивности поглощения. Раствор пиразидола в спирте (рН 6,5) также стабилен в течение трех суток. На основании полученных экс периментальных данных можно сделать вывод, что при рН 1,6 (раствори тель 0,1М раствор хлористоводородной кислоты), рН 6,5 (растворитель этиловый спирт) и рН 12,1 (растворитель 0,1М раствор гидроксида натрия) растворы пиразидола более устойчивы. Поэтому оптимальными растворителями для пиразидола являются 0,1М раствор хлористоводород ной кислоты, этиловый спирт и 0,1М раствор гидроксида натрия.

Используя метод наименьших квадратов, были получены уравнения градуировочных графиков для растворов пиразидола (n=10 и P=0,95):

А=(0,2910,011)С, SA=0,006 (для этилового спирта (95%)) и А=(0,2740,010)С, SA=0,005 (для 0,1М раствора хлористоводородной кис лоты), где А – оптическая плотность раствора пиразидола, С – его концен трация, мкг/мл.

Аналитическая длина волны пиразидола (276 нм) входит в интервал, оптимальный для фенолфталеина и бензойной кислоты (табл. 1.2). Раство ры пиразидола, фенолфталеина и бензойной кислоты стабильны в 0,1М растворе хлористоводородной кислоты и этиловом спирте. Поэтому были разработаны методики количественного определения пиразидола в суб станции и таблетках с использованием в качестве оптических образцов сравнения фенолфталеина либо бензойной кислоты в двух растворителях – 0,1М растворе хлористоводородной кислоты и этиловом спирте [46].

Так как удельные показатели поглощения пиразидола и образцов сравнения фенолфталеина и бензойной кислоты не совпадают, то в форму лу количественного определения пиразидола в субстанции и таблетках ввели коэффициент пересчета. Для определения удельных показателей по глощения нами были использованы образцы сравнения пиразидола, полу ченные ОАО «Усолье-Сибирский химфармкомбинат» путем многократной перекристаллизации промышленных серий препарата и очистки углем ак тивированным, и оптические образцы сравнения фенолфталеин и бензой ная кислота квалификации хч. В табл. 2.18 – 2.21 представлены результаты определения коэффициентов пересчета для спектрофотометрического определения пиразидола, полученные путем проведения десяти независи мых определений.

Таблица 2. Результаты определения коэффициента пересчета для спектрофотометрического определения пиразидола по оптическому образцу сравнения бензойной кислоте (0,1M HCl) Метрологические 1% 1% Е1см ос Е1см вос аос Аос авос Авос Кпер характеристики (n=10, Р=95%) 0,0519 0,5482 264,07 0,1012 0,6216 76,78 0,2908 К =0, 0,0499 0,5295 265,28 0,1004 0,6108 76,08 0,2868 S =0, 0,0498 0,5340 268,07 0,0991 0,6091 76,83 0,2866 S=0, S х =0, 0,0500 0,5406 270,30 0,0984 0,6126 77,82 0, Х =0, 0,0500 0,5380 269,27 0,0981 0,6091 77,61 0, 0,0505 0,5287 261,73 0,1003 0,6060 75,56 0,2887 Е%=0, 0,0500 0,5331 266,82 0,0985 0,6055 76,84 0,2880 Sr=0, 0,0510 0,5421 265,74 0,0988 0,6055 76,61 0, 0,0511 0,5436 265,95 0,1000 0,6144 76,80 0, 0,0521 0,5482 263,05 0,0998 0,6126 76,73 0, Таблица 2. Результаты определения коэффициента пересчета для спектрофотометрического определения пиразидола по оптическому образцу сравнения бензойной кислоте (этиловый спирт) Метрологические 1% 1% Е1см ос Е1см вос аос Аос авос Авос Кпер характеристики (n=10, Р=95%) 0,0497 0,5735 288,77 0,1002 0,4672 58,28 0,2018 К =0, S2=0, 0,0485 0,5834 300,72 0,1018 0,4976 61,10 0, 0,0519 0,6055 291,67 0,1009 0,4841 59,97 0,2056 S=0, S х =0, 0,0508 0,5867 288,73 0,0987 0,4660 59,02 0, Х =0, 0,0510 0,5670 277,94 0,1004 0,4572 56,95 0, 0,0494 0,5622 284,51 0,0999 0,4675 58,53 0,2057 Е%=0, 0,0500 0,5850 292,79 0,1002 0,4763 59,45 0,2030 Sr=0, 0,0517 0,6055 292,79 0,0972 0,4620 59,41 0, 0,0521 0,6073 291,41 0,0986 0,4660 59,08 0, 0,0521 0,6055 290,55 0,0998 0,4675 58,55 0, Таблица 2. Результаты определения коэффициента пересчета для спектрофотометрического определения пиразидола по оптическому образцу сравнения фенолфталеину (0,1M HCl) Метрологические 1% 1% Е1см ос Е1см вос аос Аос авос Авос Кпер характеристики (n=10, Р=95%) 0,0501 0,5272 263,07 0,0517 0,5100 123,31 0,4687 К =0, S2=0, 0,0492 0,5143 261,33 0,0514 0,5086 123,81 0, 0,0502 0,5272 262,81 0,0513 0,5086 124,05 0,4720 S=0, S х =0, 0,0510 0,5295 259,56 0,0519 0,5050 121,63 0, Х =0, 0,0494 0,5340 270,24 0,0493 0,4970 126,14 0, 0,0492 0,5400 274,67 0,0487 0,5020 128,98 0,4696 Е%=0, 0,0500 0,5380 269,27 0,0500 0,5100 127,63 0,4740 Sr=0, 0,0499 0,5319 266,48 0,0503 0,5040 125,25 0, 0,0506 0,5214 257,61 0,0503 0,4908 121,97 0, 0,0498 0,5223 262,20 0,0505 0,4989 123,49 0, Таблица 2. Результаты определения коэффициента пересчета для спектрофотометрического определения пиразидола по оптическому образцу сравнения фенолфталеину (этиловый спирт) Метрологические 1% 1% Е1см ос Е1см вос аос Аос авос Авос Кпер характеристики (n=10, Р=95%) 0,0513 0,6308 307,41 0,1002 0,5935 148,08 0,4817 К =0, 0,0505 0,5986 296,34 0,1011 0,5817 143,84 0,4854 S =0, 0,0500 0,5969 298,45 0,0991 0,5735 144,68 0,4848 S=0, S х =0, 0,0515 0,6198 300,87 0,1004 0,5850 145,67 0, Х =0, 0,0502 0,5986 298,11 0,1006 0,5784 143,74 0, 0,0515 0,6271 304,42 0,0988 0,5834 147,62 0,4849 Е%=0, 0,0512 0,6251 305,22 0,0992 0,5850 147,43 0,4830 Sr=0, 0,0497 0,6021 302,87 0,1006 0,5850 145,45 0, 0,0499 0,6038 302,51 0,1002 0,5800 144,71 0, 0,0506 0,6053 299,36 0,1024 0,5867 143,24 0, Результаты количественного определения субстанции пиразидола представлены в табл. 2.22 – 2.23.

Таблица 2. Результаты спектрофотометрического определения пиразидола по оптическим образцам сравнения (0,1М HCl) Метрологические характеристики № се (n=10, P=95%) Образцы сравнения рии Х Sх S S Е% Sr Х бензойная кислота 99,86 0,2443 0,4942 0,1563 0,3532 0,354 0, 010100 фенолфталеин 100,05 0,1969 0,4438 0,1403 0,3171 0,317 0, пиразидол 99,80 0,3261 0,571 0,1806 0,4081 0,409 0, бензойная кислота 99,88 0,3361 0,5798 0,1833 0,4144 0,415 0, фенолфталеин 100,03 0,2321 0,4818 0,1524 0,3443 0,344 0, пиразидол 99,71 0,3023 0,5498 0,1739 0,3929 0,394 0, бензойная кислота 99,99 0,2278 0,4773 0,1509 0,3411 0,341 0, фенолфталеин 100,16 0,2553 0,5053 0,1598 0,3611 0,361 0, пиразидол 99,69 0,3853 0,6208 0,1963 0,4436 0,445 0, Таблица 2. Результаты спектрофотометрического определения пиразидола по оптическим образцам сравнения (этиловый спирт) Метрологические характеристики № се (n=10, P=95%) Образцы сравнения рии Х Sх S S Е% Sr Х бензойная кислота 100,12 0,3176 0,5635 0,1782 0,4027 0,402 0, 010100 фенолфталеин 99,89 0,1543 0,3929 0,1242 0,2808 0,281 0, пиразидол 99,93 0,2217 0,4709 0,1489 0,3365 0,337 0, бензойная кислота 99,94 0,2154 0,4641 0,1468 0,3317 0,332 0, фенолфталеин 100,00 0,2153 0,464 0,1467 0,3316 0,332 0, пиразидол 99,87 0,4314 0,6568 0,2077 0,4694 0,470 0, бензойная кислота 100,13 0,1944 0,4409 0,1394 0,3151 0,315 0, фенолфталеин 99,92 0,1598 0,3998 0,1264 0,2857 0,286 0, пиразидол 99,92 0,1703 0,4127 0,1305 0,2949 0,295 0, Анализ приведенных результатов показывает, что при спектрофото метрическом определении пиразидола по оптическим образцам сравнения фенолфталеину, бензойной кислоте и по РСО пиразидола получены сопо ставимые результаты. Относительная погрешность определения не превы шает 0,47%. Методика спектрофотометрического определения с использо ванием оптического образца сравнения характеризуется хорошей воспро изводимостью (Sr не превышает 0,007).

Авторами разработаны методики количественного определения пи разидола в таблетках по 0,025 г [46]. Результаты спектрофотометрического определения пиразидола в таблетках по оптическим образцам сравнения фенолфталеину, бензойной кислоте и по образцу сравнения лекарственно го вещества представлены в табл. 2.24 – 2.25.

Таблица 2. Результаты спектрофотометрического определения пиразидола в таблетках по 0,025 г по оптическим образцам сравнения (0,1М HCl) Метрологические характеристики № се (n=10, P=95%) Образцы сравнения рии Х Sх S S Е% Sr Х бензойная кислота 100,77 1,8267 1,3516 0,4274 0,9659 0,959 0, 010200 фенолфталеин 100,53 1,6031 1,2661 0,4004 0,9049 0,900 0, пиразидол 100,85 1,2872 1,1346 0,3588 0,8108 0,804 0, бензойная кислота 100,28 2,3831 1,5437 0,4882 1,1033 1,100 0, фенолфталеин 100,93 1,7050 1,3057 0,4129 0,9332 0,925 0, пиразидол 101,42 1,6137 1,2703 0,4017 0,9079 0,895 0, бензойная кислота 100,63 2,7299 1,6523 0,5225 1,1808 1,173 0, 030200 фенолфталеин 100,43 2,3481 1,5324 0,4846 1,0951 1,090 0, пиразидол 100,93 2,0909 1,4460 0,4573 1,0334 1,024 0, Таблица 2. Результаты спектрофотометрического определения пиразидола в таблетках по 0,025 г по оптическим образцам сравнения (этиловый спирт) Метрологические характеристики № се- (n=10, P=95%) Образцы сравнения рии Х Sх S S Е% Sr Х бензойная кислота 100,21 0,9963 0,9981 0,3156 0,7133 0,712 0, 010200 фенолфталеин 101,01 1,6104 1,2690 0,4013 0,9069 0,898 0, пиразидол 101,29 1,8080 1,3446 0,4252 0,9610 0,949 0, бензойная кислота 100,26 2,6732 1,6350 0,5170 1,1685 1,165 0, фенолфталеин 101,03 1,8055 1,3437 0,4249 0,9603 0,950 0, пиразидол 101,48 1,7329 1,3164 0,4163 0,9408 0,927 0, бензойная кислота 100,10 2,1423 1,4636 0,4628 1,0460 1,045 0, 030200 фенолфталеин 100,38 1,9717 1,4042 0,4440 1,0035 1,000 0, пиразидол 101,17 0,9988 0,9994 0,3160 0,7142 0,706 0, Из представленных данных следует, что при спектрофотометриче ском определении пиразидола в лекарственных формах по образцу срав нения лекарственного вещества и по оптическому образцу сравнения по лучены близкие результаты. Относительная ошибка определения не пре вышает 1,02%.

2.5. Спектрофотометрическое определение пентоксифиллина Спектры поглощения пентоксифиллина (рис. 2.8) характеризуются одной полосой поглощения с максимумом на длине волны 274±1 нм. По лоса поглощения пентоксифиллина во многом сходна с полосой поглоще ния теофиллина. Исследование зависимости оптических характеристик пентоксифиллина от рН в течение трех суток показало, что в течение пер вых суток существенных изменений с растворами не происходит, а в даль нейшем наблюдается снижение интенсивности поглощения. На рис. 2. представлены результаты изучения стабильности растворов пентоксифил лина с рН 1,1;

6,0;

13,0. Из представленных данных видно, что наиболее устойчивы растворы пентоксифиллина с рН 1,1 и с рН 13,0. В связи с этим, оптимальным растворителем для спектрофотометрического определения пентоксифиллина является 0,1М раствор хлористоводородной кислоты (рН 1,1) либо 0,1М раствор гидроксида натрия (рН 13,0).

Методом наименьших квадратов определены уравнения градуиро вочных графиков для спектрофотометрического определения пентокси филлина (n=10, P=95%): А=(0,0390±0,0013)С, SA=0,019 – для 0,1М раство ра хлористоводородной кислоты, А=(0,040±0,0014)С, SA=0,005 – для 0,1М раствора гидроксида натрия (А оптическая плотность растворов, С концентрация растворов, мкг/мл).

Аналитическая длина волны пентоксифиллина (274 нм) входит в ин тервал, оптимальный для бензойной кислоты, фенолфталеина, хромата ка лия и гуанина (табл. 1.2). Пентоксифиллин, бензойная кислота Спектр 0,001% раствора пентоксифиллина 0, А 0, 1,1;

6,0;

9, 0, 0, 13, 0, нм 220 240 260 280 номер кривой соответствует значению рН Рис. 2. Зависимость оптической плотности растворов пентоксифиллина от времени хранения 0, А рН 1. рН 13, рН 6, 0, время, ч 0 0,5 1 6 12 24 Рис. 2. и фенолфталеин (рис. 2.8, 1.10, 1.12) имеют сходные спектры поглощения и общий оптимальный растворитель (0,1М раствор хлористоводородной кислоты). Это дает основание предполагать, что бензойная кислота и фе нолфталеин являются оптимальными оптическими образцами сравнения для спектрофотометрического определения пентоксифиллина при исполь зовании в качестве растворителя 0,1М раствора хлористоводородной кис лоты. При спектрофотометрическом определении пентоксифиллина с ис пользованием в качестве растворителя 0,1М раствора гидроксида натрия (рН 13,0) оптимальными оптическими образцами сравнения являются хро мат калия и гуанин.

Разработанные оптимальные условия спектрофотометрического определения ксантинола никотината, теофиллина, эуфиллина и пентокси филлина были использованы для количественного определения субстан ций и готовых лекарственных форм данных препаратов.

Для разработки методики спектрофотометрического определения пентоксифиллина по бензойной кислоте, фенолфталеину, хромату калия либо гуанину необходимо было определить коэффициенты пересчета. Рас чет коэффициентов пересчета проводили по формуле (11). Для определе ния удельного показателя поглощения образца сравнения лекарственного вещества пентоксифиллина использовали промышленную серию пен токсифиллина, дополнительно очищенную путём перекристаллизации из этилового спирта. Результаты определения коэффициентов пересчета пу тём проведения десяти независимых экспериментов представлены в табл.

2.26 2.29.

Таблица 2. Результаты определения коэффициента пересчета для спектрофотометрического определения пентоксифиллина по оптическому образцу сравнения хромату калия Метрологические 1% 1% Е Е аос Аос авос Авос Кпер характеристики 1см ос 1см вос (n=10, Р=95%) 0,0978 0,3655 373,72 0,1145 0,4260 186,03 0,4978 К =0, S2=0, 0,0977 0,3645 373,08 0,0982 0,3595 183,04 0, 0,1024 0,3820 373,05 0,1018 0,3799 186,59 0,5002 S=0, S х =0, 0,0968 0,3565 368,29 0,1050 0,3840 182,86 0, Х =0, 0,1000 0,3655 365,50 0,1012 0,3757 185,62 0, 0,0986 0,3696 374,85 0,1025 0,3820 186,34 0,4971 Е%=0, 0,0992 0,3716 374,60 0,1040 0,3872 186,15 0,4969 Sr=0, 0,0988 0,3716 376,11 0,1021 0,3809 186,53 0, 0,0979 0,3625 370,28 0,1015 0,3799 187,14 0, 0,0970 0,3605 371,65 0,0985 0,3595 182,49 0, Таблица 2. Результаты определения коэффициента пересчета для спектрофотометрического определения пентоксифиллина по оптическому образцу сравнения гуанину Метрологические 1% 1% Е1см ос Е1см вос аос Аос авос Авос Кпер характеристики (n=10, Р=95%) 0,0700 0,5200 371,43 0,0500 0,5302 1060,40 2,8549 К =2, 0,0707 0,5243 370,79 0,0503 0,5376 1068,79 2,8824 S =0, 0,0699 0,5171 369,89 0,0501 0,5331 1064,07 2,8768 S=0, S х =0, 0,0697 0,5143 368,94 0,0495 0,5214 1053,33 2, Х =0, 0,0709 0,5243 369,75 0,0510 0,5391 1057,06 2, 0,0702 0,5186 369,37 0,0499 0,5287 1059,52 2,8684 Е%=0, 0,0693 0,5100 367,97 0,0515 0,5406 1049,71 2,8527 Sr=0, 0,0698 0,5186 371,49 0,0516 0,5436 1053,49 2, 0,0707 0,5214 368,74 0,0490 0,5171 1055,31 2, 0,0713 0,5302 371,81 0,0502 0,5331 1061,95 2, Таблица 2. Результаты определения коэффициента пересчета для спектрофотометрического определения пентоксифиллина по оптическому образцу сравнения бензойной кислоте Метрологические 1% 1% Е Е аос Аос авос Авос Кпер характеристики 1см ос 1см вос (n=10, Р=95%) 0,0970 0,7077 364,79 0,1243 0,7747 77,91 0,2136 К =0, S2=0, 0,0990 0,7212 364,24 0,1122 0,6990 77,87 0, 0,0980 0,7122 363,37 0,1086 0,6778 78,02 0,2147 S=0, S х =0, 0,0989 0,7212 364,61 0,1146 0,7077 77,19 0, Х =0, 0,0986 0,7282 369,27 0,1140 0,7144 78,33 0, 0,0994 0,7282 366,30 0,1100 0,6882 78,20 0,2135 Е%=0, 0,0988 0,7235 366,14 0,1129 0,7033 77,87 0,2127 Sr=0, 0,0990 0,7305 368,94 0,1250 0,7773 77,73 0, 0,1005 0,7328 364,58 0,1135 0,7011 77,21 0, 0,0997 0,7282 365,20 0,1100 0,6799 77,26 0, Таблица 2. Результаты определения коэффициента пересчета для спектрофотометрического определения пентоксифиллина по оптическому образцу сравнения фенолфталеину Метрологические 1% 1% Е1см ос Е1см вос аос Аос авос Авос Кпер характеристики (n=10, Р=95%) 0,0970 0,7077 364,79 0,0701 0,7328 130,67 0,3582 К =0, S2=0, 0,0998 0,7212 361,32 0,0764 0,7959 130,22 0, 0,0981 0,7122 363,00 0,0632 0,6576 130,06 0,3583 S=0, S х =0, 0,0989 0,7212 364,61 0,0633 0,6615 130,63 0, Х =0, 0,1001 0,7282 363,74 0,0675 0,7055 130,65 0, 0,0994 0,7282 366,30 0,0653 0,6819 130,53 0,3564 Е%=0, 0,0988 0,7235 366,14 0,0652 0,6819 130,73 0,3571 Sr=0, 0,0982 0,7235 368,38 0,0697 0,7353 131,87 0, 0,0978 0,7212 368,71 0,0758 0,7953 131,15 0, 0,0981 0,7190 366,46 0,0639 0,6596 129,03 0, Результаты количественного определения пентоксифиллина пред ставлены в табл. 2.30 2.31.

Таблица 2. Результаты спектрофотометрического определения пентоксифиллина по образцам сравнения в 0,1М NaOH Метрологические характеристики № се (n=10, P=95%) Образцы сравнения рии Х Sх S S Е% Sr Х хромат калия 99,73 0,3550 0,5958 0,1884 0,4258 0,427 0, 070103 гуанину 99,99 0,287 0,5359 0,1695 0,3830 0,383 0, пентоксифиллин 100,07 0,0988 0,3143 0,0994 0,2246 0,224 0, хромат калия 99,75 0,4605 0,6786 0,2146 0,4850 0,486 0, 180503 гуанин 99,78 0,2301 0,4797 0,1517 0,3428 0,344 0, пентоксифиллин 100,05 0,2547 0,5047 0,1596 0,3607 0,361 0, хромат калия 99,67 0,2899 0,5384 0,1703 0,3848 0,386 0, 240903 гуанин 100,03 0,1737 0,4169 0,1318 0,2979 0,298 0, пентоксифиллин 99,88 0,1601 0,4002 0,1265 0,2860 0,286 0, Таблица 2. Результаты спектрофотометрического определения пентоксифиллина по образцам сравнения в 0,1М НСl Метрологические характеристики № се (n=10, P=95%) Образцы сравнения рии Х Sх S S Е% Sr Х бензойная кислота 99,94 0,2311 0,4807 0,1520 0,3436 0,344 0, 070103 фенолфталеин 99,80 0,2489 0,4989 0,1578 0,3566 0,357 0, пентоксифиллин 99,78 0,3480 0,5899 0,1865 0,4216 0,423 0, бензойная кислота 99,83 0,1478 0,3845 0,1216 0,2748 0,275 0, 180503 фенолфталеин 99,81 0,3063 0,5534 0,1750 0,3955 0,396 0, пентоксифиллин 99,76 0,2247 0,4740 0,1499 0,3388 0,340 0, бензойная кислота 100,00 0,1834 0,4282 0,1354 0,3060 0,306 0, 240903 фенолфталеин 99,82 0,2384 0,4883 0,1544 0,3489 0,350 0, пентоксифиллин 99,74 0,1285 0,3584 0,1134 0,2562 0,257 0, Авторами разработаны методики количественного определения пен токсифиллина в таблетках по 0,1 г и в 2% растворе для инъекций. Ре зультаты спектрофотометрического определения пентоксифиллина в 2% растворе для инъекций и в таблетках по оптическим образцам сравнения хромату калия, гуанину, бензойной кислоте, фенолфталеину и по образцу сравнения лекарственного вещества представлены в табл. 2.32 – 2.35.

Таблица 2. Результаты спектрофотометрического определения пентоксифиллина в 2% растворе для инъекций по оптическим образцам сравнения в 0,1М NaOH Метрологические характеристики № се (n=10, P=95%) Образцы сравнения рии Х Sх S S Е% Sr Х хромат калия 96,52 1,0939 1,0459 0,3307 0,7475 0,774 0, 070203 гуанину 96,75 0,5238 0,7237 0,2289 0,5172 0,535 0, пентоксифиллин 96,82 0,6765 0,8225 0,2601 0,5878 0,607 0, хромат калия 96,22 1,1794 1,0860 0,3434 0,7761 0,806 0, 100803 гуанин 96,41 0,5626 0,7501 0,2372 0,5361 0,556 0, пентоксифиллин 96,82 0,7579 0,8706 0,2753 0,6222 0,643 0, хромат калия 96,17 1,4019 1,1840 0,3744 0,8462 0,880 0, 010104 гуанин 96,81 0,3096 0,5564 0,1760 0,3977 0,411 0, пентоксифиллин 97,28 1,6257 1,2750 0,4032 0,9112 0,937 0, Таблица 2. Результаты спектрофотометрического определения пентоксифиллина в 2% растворе для инъекций по оптическим образцам сравнения в 0,1М HCl Метрологические характеристики № се (n=10, P=95%) Образцы сравнения рии Х Sх S S Е% Sr Х бензойная кислота 95,30 0,7891 0,8883 0,2809 0,6348 0,666 0, 070203 фенолфталеин 96,54 0,4354 0,6599 0,2087 0,4716 0,489 0, пентоксифиллин 96,04 0,8226 0,9069 0,2868 0,6482 0,675 0, бензойная кислота 95,40 0,6647 0,8153 0,2578 0,5827 0,611 0, 100803 фенолфталеин 96,52 0,3782 0,6150 0,1945 0,4395 0,455 0, пентоксифиллин 96,59 0,4153 0,6445 0,2038 0,4606 0,477 0, бензойная кислота 95,63 0,8522 0,9232 0,2919 0,6598 0,690 0, 010104 фенолфталеин 96,61 0,5634 0,7506 0,2374 0,5364 0,555 0, пентоксифиллин 96,53 0,3814 0,6176 0,1953 0,4413 0,457 0, Таблица 2. Результаты спектрофотометрического определения пентоксифиллина в таблетках по 0,1 г по оптическим образцам сравнения в 0,1М NaOH Метрологические характеристики № се- (n=10, P=95%) Образцы сравнения рии Х Sх S S Е% Sr Х хромат калия 99,46 1,1392 1,0674 0,3375 0,7628 0,767 0, 050403 гуанину 99,46 0,8480 0,9209 0,2912 0,6581 0,662 0, пентоксифиллин 99,23 2,8566 1,6901 0,5345 1,2079 1,217 0, хромат калия 99,92 1,1335 1,0647 0,3367 0,7609 0,761 0, 060503 гуанин 100,02 1,0332 1,0165 0,3214 0,7264 0,726 0, пентоксифиллин 99,79 2,9125 1,7066 0,5397 1,2197 1,222 0, хромат калия 99,07 1,1303 1,0631 0,3362 0,7598 0,767 0, 080803 гуанин 99,25 0,8171 0,9039 0,2858 0,6460 0,651 0, пентоксифиллин 99,08 2,0606 1,4355 0,4539 1,0259 1,035 0, Таблица 2. Результаты спектрофотометрического определения пентоксифиллина в таблетках по 0,1 г по оптическим образцам сравнения в 0,1М HCl Метрологические характеристики № се (n=10, P=95%) Образцы сравнения рии Х Sх S S Е% Sr Х бензойная кислота 99,98 1,0779 1,0382 0,3283 0,7420 0,742 0, 050403 фенолфталеин 99,88 0,8169 0,9038 0,2858 0,6460 0,647 0, пентоксифиллин 99,50 0,6388 0,7993 0,2528 0,5712 0,574 0, бензойная кислота 100,66 1,2293 1,1087 0,3506 0,7924 0,787 0, 060503 фенолфталеин 100,33 0,5994 0,7742 0,2448 0,5533 0,551 0, пентоксифиллин 100,28 0,9375 0,9683 0,3062 0,6920 0,690 0, бензойная кислота 99,62 0,8655 0,9303 0,2942 0,6649 0,667 0, 080803 фенолфталеин 99,43 1,0634 1,0312 0,3261 0,7370 0,741 0, пентоксифиллин 99,34 0,9251 0,9618 0,3042 0,6874 0,692 0, Из представленных в таблицах данных следует, что при спектрофо тометрическом определении пентоксифиллина в лекарственных формах по образцу сравнения лекарственного вещества и по оптическому образцу сравнения получены близкие результаты. Относительная ошибка опреде ления не превышает 1,22 %. Сравнительная оценка разработанных мето дик с методиками НД показала преимущества методик спектрофотометри ческого определения по оптическим образцам сравнения: доступность, экспрессность, высокая воспроизводимость, отсутствие высокотоксичных реактивов.

ГЛАВА СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ ПРОИЗВОДНЫХ ПУРИНА N-ГЛИКОЗИДНОЙ СТРУКТУРЫ 3.1. Спектрофотометрическое определение аденозина С целью разработки унифицированной методики УФ спектрофотометрического определения аденозина были изучены спек тральные характеристики его растворов в интервале рН 1,1-13,0. Спектры поглощения приведены на рис. 3.1. Как видно из рис. 3.1, спектр поглоще ния аденозина характеризуется одной полосой поглощения с максимумом на длине волны 258±1нм при рН 1,1-4,0, на длине волны 260±1нм при рН 5,0-7,0 и на длине волны 259±1нм при pH 8,0-13,0. Следует отметить, что при переходе от рН 1,1 к рН 13,0 наблюдается гиперхромный эффект ин тенсивности поглощения. Как следует из приведенных графиков, измене ние рН оказывает существенное влияние на спектры поглощения исследу емого соединения. Это объясняется тем, что аденозин обладает слабыми основными свойствами. Следовательно, он может находиться в ионизи рованной и неионизированной формах, которые имеют отличия в элек тронном строении [89].

Исходя из значения константы ионизации исследуемого вещества, были рассчитаны оптимальные области рН для определения аденозина по уравнению рН=рКа±3 [16]. В таблице 3.1 приведены значения констант ионизации аденозина и оптимальные значения рН для его количественного определения.

Как следует из табл. 3.1, аденозин является слабой кислотой и сла бым основанием. Для анализа этого соединения спектрофотометрическим методом необходимо создавать кислую или щелочную среду. В аналити ческих целях более рациональным является использование кислоты в каче стве растворителя.

В кислой среде аденозин лучше растворяется за счет проявления слабых основных свойств. Солевая форма аденозина более стабильна. В связи с этим целесообразно для унификации спектрофотометрического определения аденозина в качестве растворителя выбрать 0,1М раствор хлористоводородной кислоты.

УФ спектр 0,0005% раствора аденозина А 0, 0, 11,0;

13, 0, 1,1;

2,0;

3, 0, 5,2;

6,1;

7, 0, 0, 0, 0, нм 220 230 240 250 260 270 280 290 номер кривой соответствует значению рН Рис. 3. Таблица 3. Константы ионизации и оптимальные области рН для спектрофотометрического определения аденозина рКа Исследуемое веще- Оптимальная область Присоединение Отщепление прото ство рН протона на Аденозин 3,5 12,5 6,5рН9, Методом наименьших квадратов определены уравнения градуиро вочных графиков для спектрофотометрического определения аденозина (n=10, Р=95%): А=(0,121±0,001)С, SА=0,005 (А оптическая плотность вещества, С его концентрация, мкг/мл).

Аналитическая длина волны аденозина (258 нм) входит в интервал, оптимальный для аденина и дихромата калия (табл. 1.2) Поэтому данные оптические образцы сравнения были выбраны для спектрофотометриче ского определения аденозина.

Разработанные условия спектрофотометрического анализа аденозина были использованы для его количественного определения в субстанциях и готовых лекарственных формах (растворов для инъекций и таблеток) [40, 61, 62, 63, 64].

Удельные показатели поглощения исследуемого вещества и оптиче ских образцов сравнения не совпадают, поэтому в формулу расчета коли чественного содержания необходимо ввести коэффициент пересчета, кото рый рассчитывается по формуле (11).

Для определения удельных показателей поглощения были использо ваны химически чистые аденозин, аденин, дихромат калия, полученные из лаборатории Института государственного контроля качества лекарствен ных средств.

В таблице 3.2 представлены удельные показатели поглощения иссле дуемых веществ, полученные путем проведения десяти независимых опре делений. Значения коэффициентов пересчета для спектрофотометрическо го определения аденозина по оптическим образцам сравнения составило по аденину 1,749, по дихромату калия 0,264.

Было на основании проведенных определений коэффициентов пере счета для трех приборов СФ-46 (табл. 3.3) показано, что относительная ошибка определения этого показателя на разных приборах не превышает 0,9%.

Результаты проведенных экспериментов на пяти сериях аденозина по определению количественного содержания данных веществ представлены в табл. 3.4.

Из приведенных экспериментальных данных следует, что при спек трофотометрическом определении аденозина можно использовать как РСО испытуемых препаратов, так и оптические образцы сравнения, так как во всех случаях получены сопоставимые результаты.

Таблица 3. Результаты определения удельных показателей поглощения исследуемых веществ в 0,1M растворе хлористоводородной кислоты Е1см при 249 нм % № опыта Аденозин Аденин Дихромат калия 550,0 950,3 146, 549,0 977,0 146, 547,0 988,8 146, 544,0 946,7 145, 553,4 921,2 144, 548,3 971,9 146, 548,0 960,1 145, 552,5 959,1 142, 548,2 958,9 142, 547,0 142, 10 962, 548, Среднее.значение 959,6 144, Таблица 3. Определение коэффициентов пересчета исследуемых препаратов по оптическим образцам сравнения на трех приборах СФ- и расчет приборной ошибки Условный номер аденозин прибора Кпер по аденину Кпер по дихромату калия (n=10, P=95%) (n=10, Р=95%) 1 1,749 0, 2 1,762 0, 3 1,737 0, метрологическая К =1,749 К =0, обработка результа- S=0,022 S=0, тов S х =0,007 S х =0, Х =0,016 Х =0, Е%=0,9 Е%=0, Sr=0,013 Sr=0, Относительная ошибка спектрофотометрического определения ис следуемых препаратов находится в пределах 0,5 1,0 %. Разработанные методики [71] по точности и продолжительности анализа не уступают ме тодикам, которые рекомендованы НД.

Таблица 3. Результаты спектрофотометрического определения аденозина по образцам сравнения Метрологические характеристики № се (n=7, P=95%) Образцы сравнения рии Х Sх S Е% Sr Х дихромат калия 100,3 1,01 0,38 0,98 0,93 0, 130191 аденин 100,5 1,01 0,38 0,93 0,93 0, аденозин 100,5 1,09 0,41 1,01 1,00 0, дихромат калия 96,6 1,14 0,43 1,05 1,05 0, 151291 аденин 99,9 1,03 0,39 0,96 0,96 0, аденозин 99,8 1,14 0,43 1,05 1,05 0, дихромат калия 100,3 0,53 0,20 0,49 0,49 0, 161291 аденин 98,7 0,53 0,20 0,49 0,50 0, аденозин 99,1 0,56 0,31 0,76 0,77 0, дихромат калия 99,3 0,56 0,21 0,50 0,50 0, 141191 аденин 98,0 0,42 0,16 0,39 0,40 0, аденозин 98,6 0,42 0,16 0,39 0,40 0, дихромат калия 100,5 0,58 0,22 0,54 0,54 0, 111091 аденин 98,3 0,58 0,22 0,54 0,55 0, аденозин 99,1 0,61 0,23 0,56 0,57 0, 3.2. Спектрофотометрическое определение фосфадена Для разработки унифицированной методики УФ спектрофотометрического определения фосфадена были исследованы спектральные характеристики его растворов в интервале рН 1,1-13,0.

Спектр поглощения приведен на рис. 3.2. Видно, что спектр поглощения фосфадена характеризуется одной полосой поглощения с максимумом на длине волны 258±1нм при рН 1,1-6,0 и на длине волны 262±1нм при рН 7,0-13,0. Следует отметить, что при переходе от рН 1,1 к рН 13,0 наблюда ется батохромный сдвиг максимума поглощения, интенсивность поглоще ния при этом практически не изменяется. Как следует из приведенного ри сунка, изменение рН оказывает существенное влияние на спектр поглоще ния исследуемого соединения. Это объясняется тем, что фосфаден облада ет слабыми основными свойствами. Следовательно, он может находиться в ионизированной и неионизированной формах, которые имеют отличия в электронном строении [89].

УФ спектр 0,0005% раствора фосфадена А 0, 0, 0, 7;

0, 0, 0, 0, нм 220 230 240 250 260 270 280 290 номер кривой соответствует значению рН Рис. 3. Исходя из значения константы ионизации исследуемого вещества, были рассчитаны оптимальные области рН для определения фосфадена по уравнению рН=рКа±3 [16]. В таблице 3.5 приведены значения констант ионизации фосфадена и оптимальные значения рН для его количественно го определения.

Как следует из табл. 3.5, фосфаден является слабой кислотой и слабым основанием. Для анализа этого соединения спектрофотометрическим ме тодом необходимо создавать кислую или щелочную среду. В аналитиче ских целях более рациональным является использование кислоты в каче стве растворителя.

В кислой среде фосфаден лучше растворяется за счет проявления слабых основных свойств. Солевая форма фосфадена более стабильна. По этому целесообразно для унификации спектрофотометрического опре деления фосфадена в качестве растворителя выбрать 0,1М раствор хлори стоводородной кислоты.

Таблица 3. Константы ионизации и оптимальные области рН для спектрофотометрического определения фосфадена рКа Исследуемое веще- Оптимальная об Присоединение Отщепление прото ство ласть рН протона на Фосфаден 6,2 3,2рН9, Методом наименьших квадратов нами определены уравнения граду ировочных графиков (n=10, Р=95%): А=(0,082±0,001)С, SА=0,006 – для фосфадена (А оптическая плотность вещества, С его концентрация, мкг/мл).

Аналитическая длина волны фосфадена (258 нм) входит в интервал, оптимальный для аденина и дихромата калия (табл. 1.2). Поэтому вышена званные оптические образцы сравнения были выбраны для спектрофото метрического определения данного органического соединения.

Разработанные условия спектрофотометрического анализа фосфаде на были использованы для количественного определения фосфадена в ле карственных формах.

Удельные показатели поглощения исследуемого вещества и оптиче ских образцов сравнения не совпадают, поэтому в формулу расчета коли чественного содержания фосфадена вводят коэффициент пересчета, рас считанный по формуле (11).

Для определения удельных показателей поглощения были использо ваны химически чистые фосфаден, аденин, дихромат калия, полученные из лаборатории Института государственного контроля качества лекарствен ных средств. В таблице 3.6 представлены удельные показатели поглоще ния исследуемых веществ, полученные путем проведения десяти неза висимых определений.

Значения коэффициентов пересчета для спектрофотометрического определения фосфадена по оптическим образцам сравнения следующие:

по аденину – 1,749, по дихромату калия – 0,344.

Авторы провели расчет коэффициентов пересчета для трех прибо ров СФ-46 (табл. 3.7). Относительная ошибка определения этого показате ля на разных приборах не превышает 0,9%.

Таблица 3. Результаты определения удельных показателей поглощения исследуемых веществ в 0,1M растворе хлористоводородной кислоты Е1см при 249 нм % № опыта Фосфаден Аденин Дихромат калия 420,6 950,3 146, 418,1 977,0 146, 418,8 988,8 146, 418,2 946,7 145, 422,6 921,2 144, 421,9 971,9 146, 7 421,9 960,1 145, 8 422,8 959,1 142, 958,9 142, 9 420, 142, 10 421,3 962, Среднее значение 420,7 959,6 144, Результаты проведенных экспериментов на пяти сериях фосфадена по определению количественного содержания данного вещества представ лены в табл. 3.8. Из приведенных экспериментальных данных следует, что при спектрофотометрическом определении фосфадена можно исполь зовать как РСО испытуемых препаратов, так и оптические образцы срав нения, так как во всех случаях получены сопоставимые результаты. Отно сительная ошибка спектрофотометрического определения исследуемых препаратов находится в пределах 0,5 1,0 %. Разработанные методики по точности и продолжительности анализа не уступают методикам, рекомен дованным НД.

Таблица 3. Определение коэффициентов пересчета исследуемых препаратов по оптическим образцам сравнения на трех приборах СФ-46 и расчет приборной ошибки Условный номер прибора Кпер по аденину Кпер по дихромату калия (n=10, P=95%) (n=10, P=95%) 1 1,749 0, 2 1,762 0, 3 1,737 0, метрологическая обработка К =1,749 К =0, результатов S=0,022 S=0, S х =0,007 S х =0, Х =0,016 Х =0, Е%=0,9 Е%=0, Sr=0,013 Sr=0, Таблица 3. Результаты спектрофотометрического определения фосфадена по образцам сравнения Метрологические характеристики № се (n=7, P=95%) Образцы сравнения рии Х Sх S Е% Sr Х дихромат калия 99,6 1,11 0,42 1,03 1,03 0, 291291 аденин 100,1 1,11 0,42 1,03 1,03 0, фосфаден 99,8 1,14 0,38 1,05 1,05 0, дихромат калия 100,4 1,11 0,42 1,03 1,03 0, 120891 аденин 100,7 1,17 0,44 1,08 1,07 0, фосфаден 100,6 1,14 0,43 1,05 1,04 0, дихромат калия 99,5 0,50 0,19 0,47 0,47 0, 271291 аденин 100,7 0,50 0,19 0,46 0,46 0, фосфаден 100,6 0,48 0,18 0,44 0,44 0, дихромат калия 100,3 1,14 0,43 1,05 1,05 0, 281291 аденин 99,5 1,14 0,43 1,05 1,06 0, фосфаден 99,8 1,33 0,50 1,23 1,23 0, дихромат калия 100,1 1,09 0,41 1,00 1,00 0, 301291 аденин 99,6 1,17 0,44 1,08 1,08 0, фосфаден 99,5 1,03 0,41 1,00 1,00 0, Результаты спектрофотометрического определения фосфадена в таб летках по 0,05 г представлены в таблице 3.9.

Таблица 3. Спектрофотометрическое определение фосфадена в таблетках по 0,05 г № се- Результаты количественного определения рии по НД по разработанной методике Ах ах, г х, г Ах ах, г Авос авос,г х, г допустимые пределы содержания 030491 0,449 0,10050 0,0512 0,419 0,24835 0,32 0,13895 0,0525 0,045-0, 0,452 0,09950 0,0520 0,411 0,25035 0, 0,459 0,10020 0,0524 0,412 0,25100 0, 0,447 0,10025 0,0510 0,414 0,25270 0, 0,457 0,10010 0,0521 0,412 0,24995 0, 0,452 0,10015 0,0515 0,410 0,25030 0, 0,457 0,09890 0,0528 0,415 0,25095 0, Результаты спектрофотометрического определения фосфадена в рас творе для инъекций представлены в табл. 3.10.

Таблица 3. Спектрофотометрическое определение фосфадена в 2% растворе для инъекций № серии Результаты количественного определения по НД по разработанной методике Ах х, г Ах Авос авос,г х, г допустимые пределы содержания 361291 0,431 0,0198 0,431 0,414 0,14415 0,0206 0,019-0, 0,443 0,0204 0,435 0, 0,425 0,0195 0,445 0, 0,426 0,0196 0,440 0, 0,434 0,0200 0,442 0, 0,429 0,0197 0,423 0, 0,427 0,0196 0,421 0, 200391 0,442 0,0203 0,431 0,420 0,14815 0, 0,446 0,0205 0,440 0, 0,445 0,0205 0,433 0, 0,438 0,0201 0,437 0, 0,448 0,0206 0,427 0, 0,446 0,0205 0,425 0, 0,444 0,0204 0,423 0, Из представленных в таблицах 3.9-3.10 данных следует, что при анализе фосфадена в лекарственных формах по НД и по оптическим об разцам сравнения [71] получены сопоставимые результаты. Это свиде тельствует о возможности использования дихромата калия в качестве оптического образца сравнения для спектрофотометрического опреде ления фосфадена. Применение данного образца сравнения при спектро фотометрическом анализе исследуемого вещества позволяет получать хо рошо воспроизводимые результаты.

3.3. Спектрофотометрическое определение рибоксина Для разработки унифицированной методики УФ спектрофотометрического определения рибоксина исследованы спек тральные характеристики его растворов в интервале рН 1,1-13,0. Спектр поглощения приведен на рис. 3.3. Видно, что спектр поглощения рибокси на характеризуется одной полосой поглощения с максимумом на длине волны 249±1 нм при рН 1,1-8,0 и на длине волны 253±1 нм при pH 11,0 13,0. При переходе от рН 1,1 к рН 13,0 наблюдается батохромный сдвиг максимума поглощения с одновременным гиперхромным эффектом. Из менение рН оказывает существенное влияние на спектр поглощения ис следуемого соединения. Это объясняется тем, что рибоксин обладает сла быми кислотными свойствами. Следовательно, он может находиться в ионизированной и неионизированной формах, которые имеют отличия в электронном строении [89].

Исходя из значения константы ионизации исследуемого вещества, рассчитаны оптимальные области рН для определения рибоксина по урав нению рН=рКа±3 [16]. В таблице приведены значения константы иониза ции рибоксина и оптимальные значения рН для их количественного опре деления.

УФ спектр 0,0005% раствора рибоксина А 0, 0, 0, 11,2;

13, 6, 0,4 1,1;

3, 0, 0, 0, нм 220 230 240 250 260 270 280 290 номер кривой соответствует значению рН Рис. 3. Как следует из табл. 3.11, рибоксин является слабой кислотой и сла бым основанием. Для анализа этого соединения спектрофотометрическим методом необходимо создавать кислую или щелочную среду. В аналити ческих целях более рациональным является использование кислоты в каче стве растворителя.

Рибоксин обладает кислотными свойствами и способен к ионизации за счет гидроксила азотистого основания, приближенного по свойствам к фенольному. В кислой среде ионизация рибоксина подавляется. Выбор растворителя кислого характера для рибоксина удобен и тем, что кислота будет использоваться для определения растворения таблеток рибоксина.

Поэтому целесообразно для унификации спектрофотометрического определения рибоксина в качестве растворителя выбрать 0,1М раствор хлористоводородной кислоты.

Таблица 3. Константы ионизации и оптимальные области рН для спектрофотометрического определения рибоксина рКа Исследуемое веще- Оптимальная область Присоединение Отщепление прото ство рН протона на Рибоксин 1,2 8,8 4,2рН5, Методом наименьших квадратов определены уравнения градуиро вочных графиков для спектрофотометрического определения рибоксина (n=10, Р=95%): А=(0,1040±0,0012)С, SА=0,007 (А оптическая плотность, С концентрация, мкг/мл).

Аналитическая длина волны рибоксина (249 нм) входит в интервал, оптимальный для гуанина и дихромата калия. Поэтому данные оптические образцы сравнения были выбраны для спектрофотометрического опреде ления рибоксина.

Разработанные условия спектрофотометрического анализа рибокси на были использованы для количественного определения рибоксина в ле карственных формах.

Удельные показатели поглощения рибоксина и оптических образцов сравнения не совпадают, поэтому в формулу расчета его количественного содержания вводят коэффициент пересчета, рассчитываемый по формуле (11).

Для определения удельных показателей поглощения были использо ваны химически чистые рибоксин, гуанин, дихромат калия, полученные из лаборатории Института государственного контроля качества лекарствен ных средств.

В таблице 3.12 представлены удельные показатели поглощения ис следуемых веществ, полученные путем проведения десяти независимых определений. Было проведено определение коэффициентов пересчета для трех приборов СФ-46 (табл. 3.13) и показано, что относительная ошибка определения этого показателя на разных приборах не превышает 0,9%.

Значения коэффициентов пересчета для спектрофотометрического определения рибоксина по оптическим образцам сравнения следующие:

по гуанину – 1,479, по дихромату калия – 0,360.

Результаты проведенных экспериментов на пяти сериях рибоксина по определению количественного содержания данных веществ представлены в табл. 3.14.

Таблица 3. Результаты определения удельных показателей поглощения исследуемых веществ в 0,1M растворе хлористоводородной кислоты Е1см при 249 нм % № опыта Рибоксин Гуанин Дихромат калия 423,0 576,9 141, 409,4 575,6 136, 420,9 632,9 149, 403,0 584,2 147, 405,9 552,9 145, 347,0 590,4 137, 7 389,0 589,2 144, 8 364,4 591,1 140, 398,6 593,2 142, 10 409,8 588,4 145, Среднее значение 397,1 587,5 143, Таблица 3. Определение коэффициентов пересчета исследуемых препаратов по оптическим образцам сравнения на трех приборах СФ-46 и расчет приборной ошибки Условный номер прибора рибоксин Кпер по гуанину Кпер по дихромату калия (n=10, P=95%) (n=10, P=95%) 1 1,479 0, 2 1,485 0, 3 1,473 0, метрологическая обработка ре- К =1,479 К =0, зультатов S=0,009 S=0, S х =0,003 S х =0, Х =0,007 Х =0, Е%=0,5 Е%=0, Sr=0,006 Sr=0, Из приведенных экспериментальных данных следует, что при спек трофотометрическом определении рибоксина можно использовать как РСО испытуемого препарата, так и оптические образцы сравнения, так как во всех случаях получены сопоставимые результаты.

Относительная ошибка спектрофотометрического определения исследуе мого препарата находится в пределах 0,5 1,0 %. Разработанные методи ки анализа рибоксина по оптическим образцам сравнения по точности и продолжительности анализа не уступают методикам, которые рекомендо ваны НД.

Таблица 3. Результаты спектрофотометрического определения рибоксина по образцам сравнения Метрологические характеристики Образцы срав- (n=7, P=95%) № серии нения Х Sх S Е% Sr Х дихромат калия 100,4 0,37 0,14 0,34 0,34 0, 001EEO3 гуанин 99,8 0,37 0,14 0,34 0,34 0, рибоксин 100,1 0,45 0,17 0,42 0,42 0, дихромат калия 98,6 0,45 0,17 0,42 0,43 0, 4761290 гуанин 98,6 0,45 0,17 0,42 0,43 0, рибоксин 98,6 0,45 0,17 0,42 0,43 0, дихромат калия 99,9 1,40 0,53 1,30 1,30 0, 4781290 гуанин 99,0 1,19 0,46 1,10 1,11 0, рибоксин 99,3 1,14 0,43 1,05 1,06 0, дихромат калия 98,5 0,45 0,17 0,42 0,43 0, 0.901ДЕ08 гуанин 98,7 0,37 0,14 0,34 0,34 0, рибоксин 98,7 0,37 0,14 0,34 0,34 0, дихромат калия 98,5 0,98 0,37 0,91 0,92 0, 4721290 гуанин 99,2 0,98 0,37 0,91 0,92 0, рибоксин 99,5 0,98 0,37 0,91 0,91 0, Результаты количественного определения рибоксина в таблетках по НД и оптическим образцам сравнения представлены в таблицах 3.15-3.16.

Таблица 3. Спектрофотометрическое определение по НД рибоксина в таблетках по 0,2 г, покрытых оболочкой Результаты количественного определения по НД № серии Ах Допустимые пределы Аос аос, г Х, г содержания 44.06.90 0,452 0,456 0,05150 0,2042 0,190-0, 0,462 0, 0,448 0, 0,460 0, 0,411 0, 0,439 0, 0, Таблица 3. Спектрофотометрическое определение по дихромату калия рибоксина в таблетках по 0,2 г, покрытых оболочкой Результаты количественного определения по дихромату калия № серии Ах Допустимые пределы Авос авос, г Х, г содержания 44.06.90 0,402 0,430 0,14760 0,1987 0,190-0, 0,412 0, 0,398 0, 0,410 0, 0,391 0, 0,394 0, 0,406 0, Результаты спектрофотометрического определения рибоксина в рас творе для инъекций по НД и оптическим образцам сравнения представлены в табл. 3.17.

Таблица 3. Спектрофотометрическое определение рибоксина в 2% растворе для инъекций № се- Результаты количественного определения рии по НД по разработанной методике Ах Аос ах, г х, г Ах Авос авос,г х, г допустимые пределы содержания 120391 0,405 0,378 0,0449 0,0192 0,407 0,429 0,15000 0,0205 0,019-0, 0,408 0,0194 0,398 0, 0,412 0,0196 0,403 0, 0,411 0,0195 0,405 0, 0,407 0,0193 0,397 0, Авторы провели сравнительную оценку определения количествен ного содержания рибоксина в таблетках и растворах для инъекций по оригинальным методикам и методикам, рекомендуемым НД. Из представ ленных в таблицах 3.15-3.17 данных следует, что при анализе рибокси на в лекарственных формах по НД и по разработанным методикам полу чены сопоставимые результаты. Это свидетельствует о возможности ис пользования дихромата калия в качестве оптического образца сравне ния для спектрофотометрического определения исследуемых объектов.

Применение данного образца сравнения при спектрофотометрическом анализе исследуемого вещества позволяет получать хорошо воспроизво димые результаты.

Методики количественного определения рибоксина спектрофотомет рическим методом с использованием оптического образца сравнения дихро мата калия внедрены на Львовском химико-фармацевтическом комбинате и защищены Патентом РФ на изобретение [71].

ГЛАВА СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ ГРУППЫ ХЛОРАМФЕНИКОЛА И ПРОИЗВОДНЫХ АМИДОВ СУЛЬФАНИЛОВОЙ КИСЛОТЫ 4.1. Спектрофотометрическое определение левомицетина и синтомицина Для разработки методики УФ-спектрофотометрического определе ния левомицетина и синтомицина в субстанциях и лекарственных формах были изучены спектральные характеристики их растворов в интервале pH от 1,1 до 13,0 [29]. Спектры поглощения приведены на рис. 4.1 – 4.2.

Как следует из приведенных рисунков, спектры поглощения раство ров левомицетина и синтомицина характеризуются одной полосой погло щения и имеют максимум светопоглощения при pH 1,1-5,3 при длине вол ны 278 нм и минимум светопоглощения при длине волны 240 нм, а при pH 8,0-13,0 наблюдается незначительный батохромный сдвиг максимума поглощения (280 нм) и гипсохромный сдвиг минимума поглощения ( нм).

В табл. 4.1 приведены исследованные лекарственные вещества и ха рактеристики их спектров поглощения в интервале pH 1,1-13,0. Видно, что переход от pH 13,0 к pH 1,1 вызывает уменьшение интенсивности погло щения растворов левомицетина и синтомицина. Это объясняется тем, что левомицетин и синтомицин обладают кислотными свойствами. Так как данные вещества могут находиться в ионизированной и неионизированной формах, то они имеют отличия в электронном строении [89]. Поэтому при спектрофотометрическом определении левомицетина и синтомицина име ет значение правильный выбор растворителя.

В связи с этим при выборе растворителя исходили из следующих со ображений. Левомицетин и синтомицин, обладая кислотными свойствами, лучше растворяются в растворе с pH 13,0, солевые формы данных препа ратов более стабильны, поэтому в качестве растворителя для левомицетина и синтомицина был выбран 0,1М раствор гидроксида натрия (pH 13,0).

УФ-спектры поглощения 0,001% раствора левомицетина Е 1% 1см 150 1, 100 5,, нм 200 220 240 260 280 300 320 340 номер диаграммы соответствует значению рН Рис. 4. Таблица 4. Характеристики полос поглощения левомицетина и синтомицина Растворитель 0,1М раствор хлористо- 0,1М раствор Исследу- Вода (pH 5.3) водородной кислоты (pH 1,1) гидроксида натрия (pH 13,0) емое вещество maх, min, max, min, max, min, 1% 1% 1% 1% 1% 1% Е1см Е1см Е1см Е1см Е1см Е1см нм нм нм нм нм нм Лево 278 289,1 240 100,2 280 290,8 235 82,7 278 288,8 240 99, мицетин Синтоми 278 289,3 240 100,5 280 291,3 235 83,1 278 289,2 240 99, цин Аналитическая длина волны в выбранных условиях для левомицети на и синтомицина соответствует 280 нм.

Как было показано выше, спектрофотометрический метод является наиболее оптимальным для количественного определения левомицетина и синтомицина. Применение этого метода для анализа субстанций лево мицетина и синтомицина ограничено в связи с отсутствием государствен ных стандартных образцов для данных препаратов. Использование же для расчета содержания действующего вещества в спектрофотометрии значе ний удельного показателя поглощения не всегда дает правильные резуль таты.

Поэтому был разработан способ определения левомицетина и синтомици на, основанный на использовании оптических образцов сравнения. Исхо дя из того, что аналитическая длина волны левомицетина и синтомицина УФ-спектры поглощения 0,001% раствора синтомицина Е 1% 1см 150 1, 100 5,, нм 200 220 240 260 280 300 320 340 номер диаграммы соответствует значению рН Рис.


4. при pH 13,0 соответствует 280 нм, оптимальным оптическим образцом сравнения для их спектрофотометрического определения является хромат калия, имеющий оптимальную область поглощения от 264 до 286 нм (таб лица 1.2). Анализ результатов, представленных на рис. 4.1, позволяет сде лать вывод, что при длине волны 280 нм погрешность измерения оптиче ской плотности хромата калия не превышает 0,8%, что укладывается в по грешность, допустимую для спектрофотометрического анализа лекар ственных средств. Оптимальным растворителем для хромата калия, лево мицетина и синтомицина является 0,1М раствор гидроксида натрия, что позволяет проводить работу с определяемым веществом и оптическим об разцом сравнения параллельно и измерять оптическую плотность раство ров относительно одного раствора сравнения.

Методом наименьших квадратов были рассчитаны уравнения граду ировочных графиков левомицетина и синтомицина при оптимальных условиях: A=(0,031 0,001)C при SA=0,012 (для левомицетина) и A=(0, 0,001)C при SA=0,012 (для синтомицина), где A оптическая плотность вещества, С его концентрация, мкг/мл.

Используя оптимальные условия спектрофотометрического опреде ления левомицетина и синтомицина, была разработана унифицированная методика их количественного определения с использованием оптического образца сравнения хромата калия [1, 36, 41], которая защищена Патентом РФ на изобретение [72]. С целью установления коэффициента пересчета для левомицетина и синтомицина по хромату калия были определены удельные показатели поглощения рабочих стандартных образцов лево мицетина, синтомицина и хромата калия квалификации хч при длине вол ны 280 нм.

В табл. 4.2 и 4.3 представлены удельные показатели поглощения ис следуемых веществ, полученные при проведении десяти независимых ис следований, и значения коэффициента пересчета для определения лево мицетина и синтомицина.

На основании расчетов коэффициентов пересчета для трех спектро фотометров (табл. 4.4) показано, что различия в значениях коэффициентов наблюдаются незначительные, ошибка анализа не превышает 0,32%.

Результаты количественного определения содержания левомицетина и синтомицина в субстанциях по оптическому образцу сравнения хромату калия и по образцу сравнения препарата представлены в табл. 4.5 и 4.6.

Таблица 4. Результаты определения коэффициента пересчета для спектрофотометрического анализа левомицетина по оптическому образцу сравнения хромата калия Метрологические характе авос, аос, г Аос Авос Еос Евос Кпер ристики г (n=10, Р=95%) 0,0501 0,1497 0,5860 0,5390 292,415 180,027 0,616 К =0, S2=0, 0,0502 0,1499 0,5830 0,5380 290,339 179,453 0, 0,0503 0,1503 0,5840 0,5340 290,258 177,645 0,612 S=0, S х =0, 0,0502 0,1504 0,5830 0,5390 290,339 179,189 0, К =0, 0,0503 0,1503 0,5820 0,5360 289,264 178,310 0, 0,0500 0,1503 0,5850 0,5360 292,500 178,310 0,610 Е%=0, 0,0503 0,1502 0,5800 0,5340 288,270 177,763 0,617 Sr=0, 0,0503 0,1502 0,5860 0,5410 291,252 180,093 0, 0,0500 0,1504 0,5780 0,5340 289,000 177,527 0, 0,0503 0,1503 0,5850 0,5360 290,755 178,310 0, Таблица 4. Результаты определения коэффициента пересчета для спектрофотометрического анализа синтомицина по оптическому образцу сравнения хромата калия Метрологические харак аос, г авос, г Аос Авос Еос Евос Кпер теристики (n=10, Р=95%) 0,0503 0,1501 0,5860 0,5390 291,252 179,547 0,616 К =0, S2=0, 0,0503 0,1501 0,5870 0,5350 291,750 178,215 0, 0,0504 0,1498 0,5860 0,5380 290,675 179,573 0,618 S=0, S х =0, 0,0502 0,1500 0,5880 0,5390 292,829 179,667 0, К =0, 0,0501 0,1503 0,5820 0,5380 290,419 178,975 0, 0,0504 0,1499 0,5850 0,5360 290,179 178,786 0,616 Е%=0, 0,0501 0,1501 0,5800 0,5370 289,421 178,881 0,618 Sr=0, 0,0498 0,1503 0,5830 0,5380 292,671 178,975 0, 0,0501 0,1503 0,5880 0,5440 293,413 180,971 0, 0,0500 0,1503 0,5800 0,5340 290,000 177,645 0, Таблица 4. Определение коэффициента пересчета левомицетина и синтомицина по оптическому образцу сравнения хромату калия на двух приборах СФ-26 и приборе СФ- Левомицетин Синтомицин Наименование Кпер Метрологические Кпер Метрологические ха прибора (n=10) характеристики (n=10) рактеристики К = 0, 1. СФ-26 0,6151 0,6153 К = 0, S2=0,0000009 S2=0, S= 0,00030 S = 0, 2. СФ-26 0,6148 0, s x = 0,00017 s x = 0, К= 0,0007 К= 0, Е% = 0, 3. СФ-46 0,6154 0, Е%= 0, Sr=0, Sr=0, Таблица 4. Результаты спектрофотометрического определения субстанции левомицетина по образцам сравнения Метрологические характеристики Образцы (n=7, P=95%) № серии сравнения S2 Х Sх S Е,% Sr Х,% Хромат калия 99,75 0,5607 0,7488 0,2830 0,69 0,70 0, Левомицетин 99,70 0,5918 0,7693 0,2908 0,71 0,71 0, Хромат калия 99,87 1,2612 1,1230 0,4245 1,04 1,04 0, Левомицетин 99,95 1,1093 1,0533 0,3981 0,98 0,98 0, Хромат калия 99,94 0,5223 0,7227 0,2732 0,67 0,67 0, Левомицетин 99,94 0,5047 0,7104 0,2685 0,66 0,66 0, Хромат калия 99,90 0,7753 0,8805 0,3328 0,82 0,82 0, Левомицетин 99,87 0,8394 0,9162 0,3463 0,85 0,85 0, Хромат калия 99,94 0,7953 0,8918 0,3371 0,83 0,83 0, Левомицетин 100,00 0,5190 0,7204 0,2723 0,67 0,67 0, Таблица 4. Результаты спектрофотометрического определения субстанции синтомицина по образцам сравнения Метрологические характеристики Образцы (n=7, P=95%) № серии сравнения Х Sх S S Е,% Sr Х,% Хромат калия 99,93 0,4942 0,7030 0,2657 0,65 0,65 0, Синтомицин 99,93 0,7076 0,8412 0,3179 0,78 0,78 0, Хромат калия 99,96 0,8528 0,9235 0,3490 0,86 0,86 0, Синтомицин 99,99 0,8846 0,9405 0,3555 0,87 0,87 0, Хромат калия 99,83 0,4763 0,6902 0,2609 0,64 0,64 0, Синтомицин 99,85 1,1936 1,0925 0,4129 1,01 1,01 0, Хромат калия 99,96 0,8429 0,9181 0,3470 0,85 0,85 0, Синтомицин 99,93 0,8122 0,9012 0,3406 0,84 0,84 0, Хромат калия 99,71 0,9256 0,9621 0,3636 0,89 0,89 0, Синтомицин 99,74 0,9780 0,9890 0,3738 0,92 0,92 0, Авторами была проведена сравнительная оценка методик анализа левомицетина спектрофотометрическим методом по удельному показате лю поглощения, по образцу сравнения препарата, по оптическому образцу сравнения и нитритометрическим методом с внешним индикатором (в со ответствии с НД). Сравнительную оценку методов количественного опре деления проводили в соответствии с рекомендациями литературы [14, 17, 21, 23, 123]. Результаты сравнительной оценки правильности и воспроиз водимости методов количественного определения левомицетина представ лены в табл. 4.7. Из таблицы видно, что спектрофотометрический метод с использованием образцов сравнения дает правильные результаты (tвыч tтабл).

Таблица 4. Сравнительная оценка методик количественного определения субстанции левомицетина (n=7, t(P,f) (табл.)=2,45, Р=95%;

F(P,f 1,f2 )(табл.)=8,47, Р=99%) Критерий Критерий Продолжитель Число Фишера Стьюдента 2 s % s Метод ность анализа, операций мин F выч F таб tвыч t таб 99,04 0,8145 0,9025 1,453 8,47 2,81 2,45 50 Нитритометрия Спекрофотометрия по 96,86 1,1872 1,0896 2,117 8,47 7,62 2,45 12 удельному показателю поглощения Спекрофотометрия по 99,70 0,5918 0,7693 1,055 8,47 1,03 2,45 17 образцу сравнения препарата Спекрофотометрия по 99,75 0,5607 0,7488 - 8,47 0,88 2,45 17 хромату калия Результаты опытов, полученные нитритометрическим методом и спектрофотометрическим методом по удельному показателю поглощения, отягощены систематической ошибкой (tвычtтабл). По воспроизводимости все методы не отличаются, но спектрофотометрический метод более экс прессен и менее трудоемок.

Из представленных в табл. 4.5 – 4.6 данных следует, что при спек трофотометрическом определении левомицетина и синтомицина по хро мату калия и по образцам сравнения препаратов получены сопоставимые результаты. Относительная погрешность определения находится в преде лах 0,33 1,03%.

На основании полученных результатов можно сделать вывод, что разработанная методика с использованием оптического образца сравнения хромата калия позволяет получать хорошо воспроизводимые результаты, не трудоемка, не токсична, время анализа составляет не более 20 минут, методика экономична, не требует дорогостоящих реактивов.

4.2. Спектрофотометрическое определение левомицетина и синтомицина в лекарственных формах Объектами исследования были таблетки левомицетина по 0,25 г и 0, г;

3% спиртовой раствор левомицетина;

глазные капли левомицетина 0,25%;

суппозитории вагинальные с синтомицином по 0,25 г.

При разработке методик количественного определения левомицети на и синтомицина в лекарственных формах использовали оптимальные условия, найденные для спектрофотометрического анализа индивидуаль ных лекарственных веществ левомицетина и синтомицина. Расчет содер жания лекарственных веществ в таблетках, растворах и суппозиториях проводили по оптическому образцу сравнения хромату калия.

Результаты спектрофотометрического определения левомицетина в таблетках представлены в табл. 4.8.

Таблица 4. Результаты спектрофотометрического определения левомицетина в таблетках по 0,25 г и 0,5 г по образцам сравнения Метрологические характеристики Образцы (n=7, P=95%) № серии сравнения Х Sх S S Е,% Sr Х Хромат калия 0,250 0,00001 0,00320 0,0012 0,003 1,19 0, (0,25 г) Левомицетин 0,251 0,00002 0,00459 0,0017 0,004 1,69 0, Хромат калия 0,246 0,00002 0,00417 0,0016 0,004 1,57 0, (0,25 г) Левомицетин 0,248 0,00001 0,00173 0,0006 0,002 0,65 0, Хромат калия 0,248 0,00002 0,00422 0,0016 0,004 1,57 0, (0,25 г) Левомицетин 0,250 0,00002 0,00432 0,0016 0,004 1,60 0, Хромат калия 0,250 0,00003 0,00521 0,0020 0,005 1,93 0, (0,25 г) Левомицетин 0,251 0,00001 0,00245 0,0009 0,002 0,90 0, Хромат калия 0,254 0,00001 0,00192 0,0007 0,002 0,70 0, (0,25 г) Левомицетин 0,254 0,00002 0,00431 0,0016 0,004 1,57 0, Хромат калия 0,499 0,00002 0,00468 0,0018 0,004 0,87 0, (0,5 г) Левомицетин 0,501 0,00003 0,00525 0,0020 0,005 0,97 0, Хромат калия 0,500 0,0001 0,0081 0,0031 0,008 1,50 0, (0,5 г) Левомицетин 0,502 0,0001 0,0074 0,0028 0,007 1,37 0, Хромат калия 0,496 0,0001 0,0074 0,0028 0,007 1,37 0, (0,5 г) Левомицетин 0,498 0,0001 0,0076 0,0029 0,007 1,42 0, Хромат калия 0,502 0,00003 0,00591 0,0022 0,006 1,09 0, (0,5 г) Левомицетин 0,503 0,00004 0,00631 0,0024 0,006 1,16 0, Хромат калия 0,502 0,0001 0,0077 0,0029 0,007 1,41 0, (0,5 г) Левомицетин 0,501 0,0001 0,0084 0,0032 0,008 1,55 0, Результаты спектрофотометрического определения левомицетина в глазных каплях представлены в табл. 4.9.


Таблица 4. Результаты спектрофотометрического определения левомицетина в 0,25% глазных каплях по образцам сравнения Метрологические характеристики Образцы (n=7, P=95%) № серии сравнения Х Sх S S Е,% Sr Х Хромат калия 0,250 0,00002 0,00418 0,0016 0,004 1,55 0, Левомицетин 0,249 0,00002 0,00497 0,0019 0,005 1,84 0, Хромат калия 0,249 0,00001 0,00299 0,0011 0,003 1,11 0, Левомицетин 0,250 0,00002 0,00438 0,0017 0,004 1,62 0, Хромат калия 0,249 0,00002 0,00431 0,0016 0,004 1,60 0, Левомицетин 0,249 0,00001 0,00377 0,0014 0,004 1,40 0, Хромат калия 0,249 0,00003 0,00507 0,0019 0,005 1,88 0, Левомицетин 0,249 0,00003 0,00555 0,0021 0,005 2,06 0, Хромат калия 0,250 0,00002 0,00411 0,0016 0,004 1,52 0, Левомицетин 0,251 0,00002 0,00424 0,0016 0,004 1,56 0, Результаты спектрофотометрического определения левомицетина в спиртовом растворе представлены в табл. 4.10.

Таблица 4. Результаты спектрофотометрического определения левомицетина в 3% спиртовом растворе по образцам сравнения Метрологические характеристики Образцы (n=7, P=95%) № серии сравнения Х Sх S S Е,% Sr Х Хромат калия 2,970 0,00154 0,03923 0,0148 0,036 1,22 0, Левомицетин 2,983 0,00158 0,03973 0,0150 0,037 1,23 0, Хромат калия 2,970 0,00175 0,04188 0,0158 0,039 1,31 0, Левомицетин 2,994 0,00230 0,04799 0,0181 0,044 1,48 0, Хромат калия 2,990 0,00172 0,04145 0,0157 0,038 1,28 0, Левомицетин 2,993 0,00053 0,02309 0,0087 0,021 0,71 0, Хромат калия 3,010 0,00069 0,02630 0,0099 0,024 0,81 0, Левомицетин 3,005 0,00136 0,03695 0,014 0,034 1,14 0, Хромат калия 3,000 0,00117 0,03422 0,0129 0,032 1,06 0, Левомицетин 3,012 0,00073 0,02697 0,0102 0,025 0,83 0, Результаты спектрофотометрического определения синтомицина в суппозиториях представлены в табл. 4.11.

Анализ результатов, представленных в табл. 4.8 – 4.11, показал, что разработанная методика с использованием оптического образца сравнения хромата калия характеризуется хорошей воспроизводимостью, получены сопоставимые результаты по разработанной методике и по методике с ис пользованием образца сравнения препарата. Вышесказанное позволяет предложить хромат калия в качестве оптического образца сравнения для спектрофотометрического определения левомицетина и синтомицина в Таблица 4. Результаты спектрофотометрического определения синтомицина в суппозиториях 0,25 г по образцам сравнения Метрологические характеристики Образцы (n=7, P=95%) № серии сравнения Х Sх S S Е,% Sr Х Хромат калия 0,249 0,000007 0,0026 0,001 0,002 0,95 0, Синтомицин 0,249 0,000009 0,0029 0,0011 0,003 1,08 0, Хромат калия 0,248 0,000006 0,0024 0,0009 0,002 0,90 0, Синтомицин 0,249 0,000008 0,0028 0,0011 0,003 1,04 0, Хромат калия 0,248 0,000008 0,0028 0,0011 0,003 1,07 0, Синтомицин 0,248 0,000005 0,0022 0,0008 0,002 0,83 0, Хромат калия 0,250 0,00001 0,0032 0,0012 0,003 1,20 0, Синтомицин 0,250 0,000007 0,0027 0,0010 0,003 1,01 0, Хромат калия 0,249 0,000006 0,0025 0,0009 0,002 0,92 0, Синтомицин 0,249 0,000019 0,0043 0,0016 0,004 1,61 0, лекарственных формах. Относительная погрешность количественного определения данных препаратов не превышает 1,93%.

4.3. Спектрофотометрическое определение стрептоцида С целью разработки унифицированной методики спектрофотомет рического определения стрептоцида, стрептоцида растворимого, норсуль фазола, сульфадимезина, фталазола были исследованы спектры поглоще ния их растворов в интервале рН 1,1 13,0 в спектральной области от до 400 нм.

Спектр поглощения раствора стрептоцида (n аминобензолсульамида) в области рН 1,68 – 12,87 характеризуется одной полосой поглощения (рис. 4.3). При рН 1,68 стрептоцид имеет максимум поглощения при длине волны 260±1 нм. Дальнейшее увеличение рН до 12,87 приводит к постепенному гипсохромному сдвигу максимума погло щения до 250±1 нм за счет таутомерных превращений по сульфамидной группе. По мере увеличения рН повышается интенсивность поглощения растворов (рис. 4.3).

Хранение растворов стрептоцида в течение трех суток показало, что за этот промежуток времени незначительно изменяется рН растворов, наблюдается постепенное смещение максимумов поглощения на 1-2 нм и уменьшение интенсивности поглощения (рис. 4.4). Наиболее стабильны растворы стрептоцида при рН 1,68 – 2,98 и при рН 11,74 – 12,87, поэтому в качестве оптимальных растворителей для спектрофотометрического определения стрептоцида можно предложить 0,1М раствор хлористоводо родной кислоты (pH 1,68) либо 0,1М раствор гидроксида натрия (рН 12,87). В области низких значений рН происходит протонизация по азоту аминогруппы стрептоцида, а при pH 9,0 – 13,0 таутомерия по сульфа мидной группе.

Из представленных в таблице 1.2 данных видно, что аналитической длиной волны для количественного определения стрептоцида является нм, которая входит в интервал, оптимальный для оптических образцов сравнения дихромата калия и феррицианида калия, а оптимальным раство рителем для определяемого вещества и оптических образцов сравнения яв ляется 0,1М раствор хлористоводородной кислоты.

Уф спектр поглощения 0,001% раствора стрептоцида А 9, 0, 0,8 11,7 10, 0, 0,6 12, 0, 0, 0,3 2, 0, 1, 0,1,нм 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310 номер кривой соответствует значению рН Рис. 4. Разработанные условия спектрофотометрического анализа стрепто цида были использованы для количественного определения его в субстан ции и таблетках [48].

Так как удельные показатели поглощения исследуемого вещества и оптических образцов сравнения не совпадают, в формулу расчета содер жания вещества необходимо ввести коэффициент пересчета, который рас считывают по формуле (11). Для определения удельных показателей по глощения были использованы образцы сравнения стрептоцида, получен ные ОАО «Усолье-Сибирский химфармкомбинат» путем перекристалли зации промышленных серий препарата и очистки углем активированным, и оптические образцы сравнения квалификации ч или хч.

Зависимость оптической плотности растворов стрептоцида от времени хранения А рН 9, рН 2, 0, рН 2, 0, 0, 0, рН 1, время, ч 0 0,5 4 8 12 24 36 Рис. 4. Авторами были разработаны методики и проведено количественное определение стрептоцида (по формуле (16)) по образцу сравнения лекар ственного вещества и по оптическому образцу сравнения.

В табл. 4.12 – 4.13 представлены результаты определения коэффици ентов пересчета для спектрофотометрического определения стрептоцида по формуле (16) по оптическим образцам сравнения феррицианиду калия и дихромату калия, полученные при проведении десяти независимых опре делений.

Таблица 4. Результаты определения коэффициента пересчета для спектрофотометрического анализа стрептоцида по оптическому образцу сравнения феррицианиду калия Метрологические 1% 1% Е1см ос Е1см вос аос Аос авос Авос Кпер характеристики (n=10, Р=95%) К =0, 0,1502 0,5058 84,19 0,1447 0,5735 39,63 0, S2=0, 0,1500 0,4921 82,02 0,1447 0,5638 38,96 0, 0,1499 0,4949 82,54 0,1365 0,5361 39,27 0,476 S=0, S х =0, 0,1495 0,4895 81,86 0,1404 0,5452 38,83 0, К =0, 0,1499 0,4881 81,40 0,1340 0,5302 39,57 0, 0,1485 0,4908 82,63 0,1395 0,5452 39,08 0,473 Е%=1, 0,1488 0,4868 81,79 0,1443 0,5575 38,63 0,472 Sr=0, 0,1459 0,4908 84,10 0,1450 0,5560 38,34 0, 0,1500 0,4855 80,92 0,1448 0,5544 38,29 0, 0,1503 0,4841 80,52 0,1451 0,5560 38,32 0, Таблица 4. Результаты определения коэффициента пересчета для спектрофотометрического анализа стрептоцида по оптическому образцу сравнения дихромату калия Метрологические 1% 1% Е1см ос Е1см вос аос Аос авос Авос Кпер характеристики (n=10, Р=95%) К =1, 0,1494 0,4908 82,13 0,1482 0,4134 139,47 1, S2=0, 0,1499 0,5100 85,06 0,1510 0,4318 142,98 1, 0,1495 0,4935 82,53 0,1470 0,4067 138,33 1,6763 S=0, S х =0, 0,1500 0,4976 82,93 0,1580 0,4389 138,89 1, К=0, 0,1504 0,5086 84,54 0,1510 0,4295 142,22 1, 0,1482 0,5003 84,40 0,1507 0,4271 141,71 1,6791 Е%=0, 0,1532 0,5045 82,33 0,1585 0,4377 138,08 1,6772 Sr=0, 0,1525 0,4989 81,79 0,1589 0,4401 138,48 1, 0,1499 0,4989 83,21 0,1593 0,4449 139,64 1, 0,1514 0,4989 82,38 0,1587 0,4377 137,90 1, Результаты количественного определения содержания стрептоцида в субстанции и таблетках по оптическим образцам сравнения феррицианиду калия и дихромату калия и по образцу сравнения препарата представлены в табл. 4.14 и 4.15.

Таблица 4. Результаты спектрофотометрического определения стрептоцида по образцам сравнения Метрологические характеристики Образцы (n=10, P=95%) № серии сравнения S2 Х Sх S Е% Sr Х Дихромат калия 99,92 0,3592 0,5994 0,1895 0,43 0,43 0, 010202 Феррицианид калия 99,90 0,2803 0,5295 0,167 0,38 0,38 0, Стрептоцид 99,84 0,2830 0,5320 0,1682 0,38 0,38 0, Дихромат калия 99,87 0,4158 0,6448 0,2039 0,47 0,46 0, 020302 Феррицианид калия 100,02 0,1933 0,4397 0,1390 0,31 0,31 0, Стрептоцид 99,66 0,2055 0,4534 0,1434 0,32 0,33 0, Дихромат калия 100,04 0,2621 0,5120 0,1619 0,37 0,37 0, 030402 Феррицианид калия 99,56 0,2241 0,4733 0,1496 0,34 0,34 0, Стрептоцид 99,86 0,2069 0,4549 0,1459 0,33 0,33 0, Таблица 4. Результаты спектрофотометрического определения стрептоцида в таблетках по 0,5 г по образцам сравнения Метрологические характеристики Образцы (n=10, P=95%) № серии сравнения Х Sх S S Е% Sr Х Дихромат калия 0,502 0,00003 0,0057 0,0018 0,004 0,82 0, 080803 Феррицианид калия 0,508 0,00007 0,0083 0,0026 0,006 1,18 0, Стрептоцид 0,494 0,00005 0,0072 0,0023 0,005 1,03 0, Дихромат калия 0,503 0,00004 0,0059 0,0018 0,004 0,84 0, 090903 Феррицианид калия 0,509 0,00008 0,0089 0,0028 0,006 1,26 0, Стрептоцид 0,493 0,00007 0,0085 0,0027 0,006 1,23 0, Дихромат калия 0,503 0,00004 0,0062 0,0019 0,004 0,88 0, 100903 Феррицианид калия 0,509 0,00007 0,0084 0,0026 0,006 1,18 0, Стрептоцид 0,492 0,00009 0,0098 0,0031 0,007 1,43 0, Из представленных в табл. 4.14 – 4.15 экспериментальных данных следует, что при спектрофотометрическом определении стрептоцида мож но использовать как образец сравнения лекарственного вещества, так и оп тические образцы сравнения. Результаты, полученные по различным опти ческим образцам сравнения и по РСО, являются сопоставимыми. Относи тельное стандартное отклонение не превышает 0,02.

4.4. Спектрофотометрическое определение стрептоцида растворимого Спектр поглощения растворов стрептоцида растворимого (n сульфамидобензоламинометансульфанат натрия) в интервале рН 1,5 – 12,84 также характеризуется одной полосой поглощения (рис. 4.5). При рН 1,5 – 6,23 в спектре поглощения стрептоцида растворимого наблюдается максимум при длине волны 269 нм. Батохромный сдвиг максимума по глощения стрептоцида растворимого на 9 нм по сравнению со спектром стрептоцида объясняется появлением в его структуре остатка формальде гидгидросульфита натрия. Дальнейшее увеличение рН до 12,84 приводит к гипсохромному сдвигу максимума поглощения стрептоцида растворимого до 260 нм, что объясняется таутомерией по сульфамидной группе. Интен сивность поглощения растворов стрептоцида растворимого при рН 1,5 – 3,04 повышается, а дальнейшее увеличение рН до 12,84 приводит к уменьшению интенсивности поглощения (рис. 4.5).

Изучение стабильности растворов стрептоцида растворимого пока зало, что наиболее устойчивы они при рН 3,04 – 6,23. При рН 11,93 – 12, растворы стрептоцида растворимого (табл. 4.16) нестабильны, постепен ный гидролиз препарата приводит к гипсохромному сдвигу максимума по глощения, который к концу третьих суток сдвиг составляет 10-11нм. При рН 1,5 – 2,28 наблюдается смещение максимума поглощения в коротко волновую область спектра, к концу третьих суток сдвиг составляет 2 нм. Наиболее стабилен раствор стрептоцида растворимого в этиловом спирте (pH 7,1) в связи с подавлением реакции гидролиза. На основании вышеизложенного можно сделать вывод, что оптимальным растворителем для спектрофотометрического определения стрептоцида растворимого яв ляется этиловый спирт (рН 7,1).

УФ спектр поглощения 0,001% раствора стрептоцида растворимого А 0, 3, 0, 0,7 6, 0, 1, 0, 0, 11, 0, 12, 0,,нм 0,1 10, 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310 номер кривой сооответствует значению рН Рис. 4. Аналитическая длина волны для количественного определения стрептоцида растворимого (269 нм) входит в интервал, оптимальный для оптических образцов сравнения бензойной кислоты и фенолфталеина (табл. 1.2).

Оптимальным растворителем для спектрофотометрического опреде ления стрептоцида растворимого по бензойной кислоте либо по фенолфта леину является этиловый спирт.

Таблица 4. Изменение оптических характеристик растворов стрептоцида растворимого при хранении Оптические характеристики рН 1-е сутки 2-е сутки 3-и сутки max, нм А max, нм А max, нм А 1,5 269±1 0,74 264±1 0,94 264±1 0, 2,28 269±1 0,74 267±1 0,50 267±1 0, 3,04 269±1 0,79 268±1 0,72 269±1 0, 4,1 269±1 0,73 269±1 0,74 269±1 0, 6,23 269±1 0,76 269±1 0,74 269±1 0, 9,44 269±1 0,72 269±1 0,73 269±1 0, 10,53 266±1 0,71 266±1 0,67 266±1 0, 11,93 262±1 0,73 251±1 0,5 252±1 0, 12,84 260±1 0,65 250±1 0,55 250±1 0, 7,1 269±1 075 269±1 074 269±1 0, Разработанные условия спектрофотометрического анализа стрепто цида растворимого были использованы для его количественного определе ния в субстанции [48].

Так как удельные показатели поглощения стрептоцида растворимого и оптических образцов сравнения не совпадают, в формулу расчета содер жания вещества необходимо ввести коэффициент пересчета, который рас считывают по формуле (11). Для определения удельных показателей по глощения были использованы образцы сравнения стрептоцида раствори мого, полученные ОАО «Усолье-Сибирский химфармкомбинат» путем пе рекристаллизации промышленных серий препаратов и очистки углем ак тивированным, и оптические образцы сравнения квалификации ч или хч.

Авторы разработали методики и провели количественное определе ние стрептоцида растворимого (используя формулу (16)) по образцу срав нения лекарственного вещества и по оптическим образцам сравнения.

В табл. 4.17 – 4.18 представлены результаты определения ко эффициентов пересчета для спектрофотометрического определения стреп тоцида растворимого, полученные при проведении десяти независимых определений.

Результаты количественного определения содержания стрептоцида растворимого в субстанции по оптическим образцам сравнения бензойной кислоте и фенолфталеину и по образцу сравнения препарата представлены в табл. 4.19.

Таблица 4. Результаты определения коэффициента пересчета для спектрофотометрического анализа стрептоцида растворимого по оптическому образцу сравнения фенолфталеину Метрологические 1% 1% Е Е аос Аос авос Авос Кпер характеристики 1см ос 1см вос (n=10, Р=95%) К =0, 0,0503 0,4451 442,45 0,0503 0,5100 126,74 0, S2=0, 0,0503 0,4473 444,63 0,0506 0,5186 128,11 0, 0,0508 0,4510 443,90 0,0504 0,5171 128,25 0,2889 S=0, S х =0, 0,0499 0,4413 442,18 0,0510 0,5200 127,45 0, К=0, 0,0500 0,4437 443,70 0,0499 0,5045 126,38 0, 0,0510 0,4522 443,33 0,0489 0,4989 127,53 0,2877 Е%=0, 0,0507 0,4498 443,59 0,0502 0,5157 128,41 0,2895 Sг==0, 0,0505 0,4486 444,16 0,0495 0,5114 129,14 0, 0,0504 0,4437 440,18 0,0515 0,5214 126,55 0, 0,0503 0,4425 439,86 0,0499 0,5129 128,48 0, Таблица 4. Результаты определения коэффициента пересчета для спектрофотометрического анализа стрептоцида растворимого по оптическому образцу сравнения бензойной кислоте Метрологические 1% 1% Е1см ос Е1см вос аос Аос авос Авос Кпер характеристики (n=10, Р=95%) К =0, 0,0503 0,4449 442,25 0,1042 0,5017 60,18 0, S2=0, 0,0503 0,4461 443,44 0,1025 0,4976 60,68 0, 0,0508 0,4510 443,90 0,1065 0,5100 59,86 0,1348 S=0, S х =0, 0,0505 0,4473 442,87 0,1059 0,5031 59,38 0, К=0, 0,0495 0,4401 444,55 0,1021 0,4949 60,59 0, 0,0510 0,4498 440,98 0,1098 0,5145 58,57 0,1328 Е%=0, 0,0507 0,4510 444,77 0,1040 0,5058 60,79 0,1367 Sг=0, 0,0505 0,4473 442,87 0,1039 0,4962 59,70 0, 0,0510 0,4522 443,33 0,1099 0,5200 59,14 0, 0,0503 0,4486 445,92 0,0998 0,4908 61,47 0, Из представленных в табл. 4.19 экспериментальных данных следует, что при спектрофотометрическом определении стрептоцида растворимого можно использовать как образец сравнения лекарственного вещества, так и оптические образцы сравнения. Результаты, полученные по различным оп тическим образцам сравнения и по РСО, являются сопоставимыми. Отно сительное стандартное отклонение не превышает 0,007.

Таблица 4. Результаты спектрофотометрического определения стрептоцида растворимого по образцам сравнения Метрологические характеристики Образцы (n=10, P=95%) № серии сравнения Х Sх S S Е% Sr Х Бензойная кислота 99,86 0,4525 0,6726 0,2127 0,48 0,48 0, Фенолфталеин 99,99 0,2802 0,5293 0,1673 0,38 0,38 0, 010202 Стрептоцид 99,76 0,1611 0,4013 0,1269 0,29 0,29 0, растворимый Бензойная кислота 100,06 0,32631 0,5712 0,1806 0,41 0,41 0, Фенолфталеин 100,03 0,2086 0,4567 0,1444 0,33 0,33 0, 020302 Стрептоцид 99,94 0,2536 0,5036 0,1592 0,36 0,36 0, растворимый Бензойная кислота 99,66 0,3342 0,5781 0,1828 0,41 0,41 0, Фенолфталеин 99,80 0,2217 0,4708 0,1488 0,34 0,34 0, 030402 Стрептоцид 99,75 0,1828 0,4276 0,1352 0,31 0,31 0, растворимый 4.5. Спектрофотометрическое определение сульгина Спектр поглощения сульгина (n-аминобензолсульфонилгуанидина) при pH 3,0 – 13,0 характеризуется одной полосой поглощения с максиму мом при 260±1 нм (рис. 4.6). При уменьшении рН до 1,1 происходит гип сохромный сдвиг максимума поглощения до 220 нм.

Изучение стабильности раствора сульгина в течение двух суток пока зало, что наиболее устойчива солевая форма препарата при рН 13,0 (рис.

4.7), поэтому оптимальным растворителем для спектрофотометрического определения сульгина является 0,1М раствор гидроксида натрия (рН 13,0).

Сульгин, имеющий аналитическую длину волны при 260 нм (рН 13,0), может быть определен по оптическому образцу сравнения феррици аниду калия, имеющего максимум поглощения при длине волны 261±1 нм (рН 13,0) (табл. 1.2).

Разработанные условия спектрофотометрического анализа сульгина были использованы для его количественного определения в субстанции и таблетках [48].

В связи несовпадением удельных показателей поглощения исследу емого вещества и оптического образца сравнения в формулу расчета со держания вещества вводят коэффициент пересчета (11). Для определе ния удельных показателей поглощения нами были использованы образцы сравнения сульгина, полученные ОАО «Усолье-Сибирский химфармком бинат» путем перекристаллизации промышленных серий препаратов и очистки углем активированным, и оптические образцы сравнения квали фикации ч или хч.

УФ спектр поглощения 0,001% раствора сульгина А 0, 5, 0, 3,0 0, 1, 0,,нм 220 230 240 250 260 270 280 290 номер кривой соответствует значению рН Рис. 4. Зависимость оптической плотности растворов сульгина от времени хранения А 0, рН 13, 0, рН 5, 0, 0, рН 3, 0, 0 0,5 4 8 12 24 36 48 время, ч Рис. 4. Авторами были разработаны методики и проведено количественное определение сульгина (по формуле (16)) по образцу сравнения лекарствен ного вещества и по оптическому образцу сравнения.

В табл. 4.20 представлены результаты определения коэффициента пересчета для спектрофотометрического определения сульгина по оптиче скому образцу сравнения феррицианиду калия, полученные при проведе нии десяти независимых определений.



Pages:     | 1 || 3 | 4 |
 





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.