авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 7 |
-- [ Страница 1 ] --

ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА 5

ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА

УДК 616 001.17 008.9 092.9:546.172.6

Т.В. Звягинцева, А.В. Кривошапка, Е.В. Желнин

Харьковский национальный медицинский университет

РОЛЬ МЕТАБОЛИТОВ ОКСИДА АЗОТА В МЕХАНИЗМАХ РАЗВИТИЯ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ОЖОГА

Показано, что течение экспериментального термического ожога у крыс характеризу ется длительным повышением метаболитов оксида азота в очаге и периферической крови с одновременным резким снижением количества SH групп. Под влиянием ранозаживляющих лекарственных средств с разным механизмом действия проис ходит восстановление концентрации метаболитов оксида азота как в очаге, так и в периферической крови, SH групп в очаге. Изучаемые лекарственные средства оказы вают протекторное действие на SH группы крови.

Ключевые слова: оксид азота, SH группы, термический ожог.

Известно, что ожог сопровождается качестве прогностического критерия при активацией образования свободных радика лучевых повреждениях кожи [11], для диа лов кислорода и оксида азота (NO), с кото гностики и оценки активности заболеваний рыми связывают формирование вторичного ЦНС [12].

иммунодефицитного состояния [1]. Вместе Целью исследования было определение с тем роль NO в механизме развития ожо концентрации NO и SH групп в очаге и пери говой травмы не вполне ясна. Оксид азота ферической крови в динамике развития рассматривают как важный фактор иммуно экспериментального ожога и при лечении ра логической реактивности, точнее неспеци нозаживляющими лекарственными средст фического иммунитета, необходимый для вами с разными механизмами действия.

осуществления регуляторных цитопротек Материал и методы. Эксперименты по торных процессов на уровне органелл клет моделированию ожогов выполнены на ки и всего организма [2] и участвующий в 100 крысах популяции WAG массой 200– антимикробной защите [3]. Недостаточная 250 г. На выстриженном участке задней продукция NO сопряжена с развитием нару части бедра под барбамиловым наркозом вы шений в сердечно сосудистой и других сис зывали термический ожог [13]. Животных темах организма. В то же время избыточная разделили на три группы, по 30 в каждой.

продукция NO активирует процессы пере Первая группа – экспериментальные живот кисного окисления липидов, другие меха ные с термическим ожогом без лечения (кон низмы тканевого повреждения [4, 5].

троль). Животным 2 й группы на область Под влиянием NO окисляются тиолы с ожога наносили метилурациловую мазь, образованием нитрозотиолов [6–9], что животным 3 й – мазь тиотриазолина. Наб сказывается на содержании SH групп в людения за процессами заживления ожо крови [10], а следовательно, приводит к говых ран проводили на 3, 7, 14, 21 и 28 е снижению их протекторной активности. сутки. В эти сроки исследовали содержание Кроме того, определение SH групп при метаболитов NO и SH групп в ткани и пери ожогах может иметь и прогностическую ферической крови крыс. Исследование про ценность – известно об их использовании в водили также на интактных животных.

© Т.В. Звягинцева, А.В. Кривошапка, Е.В. Желнин, ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА Содержание суммарных метаболитов 3 и сутки содержание метаболитов NO до NO определяли по методу L.C.Green с соавт. стигло максимума, превышая норму в 2,2 ра в модификации В.А. Метельской и Н.Г. Гу за, на 7 е сутки – в 2 раза, на 14 е и 21 е сут мановой [14]. Содержание SH групп в сыво ки их содержание превышало аналогичный ротке крови определяли по методу С.Е. Се показатель интактных животных на 79 и верина [15]. Полученные данные обрабаты 39 % соответственно. В очаге увеличение со вали статистически с использованием держания метаболитов NO было ещё более t критерия Стьюдента с поправкой Бонфе выраженным и длительным на протяжении рони [16]. всего времени наблюдения по сравнению с Результаты и их обсуждение. Содержа интактными животными. Так, на 3 и сутки ние метаболитов NO в сыворотке крови содержание метаболитов NO превышало нор интактных животных составило (32,71± му в 2 раза, на 7 е сутки – в 2,9 раза, достигая 2,65) мкмоль/л (рис. 1), в коже – (19,9± максимальных значений, на 14 е сутки – в 2,19) мкмоль/л (рис. 2). 1,9 раза, на 21 е – в 1,7 раза, на 28 е сутки – в 1,4 раза (рис. 2).

мкмоль/л 1 У животных 2 й группы (лечение метил # # урациловой мазью) содержание метаболи # тов NO в крови животных было повышено # # # ** # лишь на протяжении первой недели экспе * * # римента, к 14 м суткам снижалось до нор * * ** мы, оставаясь таковым до конца экспери Ин мента (рис. 1). При этом на протяжении 3– 21 суток содержание NO было достоверно ниже, чем в группе без лечения. В коже под действием метилурациловой мази, как и в крови, содержание NO было повышено 3и 7е 14 е 21 е 28 е лишь в течение первой недели наблюдения.

Сутки Снижение показателей до нормы происхо Рис. 1. Содержание метаболитов NO в сыворот дило на 14 е сутки, оставаясь в пределах фи ке крови животных с термическим ожогом без лечения и при использовании ранозаживляю зиологических показателей до конца наб щих лекарственных средств: людения. При этом на протяжении 7–28 су Ин – интактные;

1 – 1 я группа (без лечения);

ток содержание NO было достоверно ниже, 2 – 2 я группа (метилурациловая мазь);

3 – чем в группе без лечения.

3 я группа (мазь тиотриазолина). р0,05;

* до Уровень метаболитов NO в крови живот стоверность относительно контрольной группы животных;

# – относительно интактной ных 3 й группы, получавших лечение мкмоль/л мазью тиотриазолина, так же как и в крови животных 2 й группы, было повышенным # только в течение первой недели в сравнении 1 23 с интактными животными (рис. 1). При # ### *# этом в течение трёх недель наблюдения уро # * # вень NO был достоверно ниже, чем в группе # без лечения: на 3 и сутки на 21 %, на 7 е – ** ** Ин на 26 %, на 14 е – на 34 %, на 21 е – на 20 %.

** В очаге содержание NO под влиянием мази тиотриазолина (как и метилурациловой) было увеличено только на протяжении 1 й 3и 7е 14 е 21 е 28 е недели эксперимента по сравнению с его со Сутки держанием у интактных животных (рис. 2).

Рис. 2. Содержание метаболитов NO в коже жи На протяжении 7–28 суток изучаемый по вотных с термическим ожогом без лечения и при казатель был достоверно ниже, чем в группе использовании ранозаживляющих лекарствен без лечения.

ных средств. 1–3 – те же, что и на рис. Течение экспериментального ожога со У животных с термическим ожогом провождается длительным и значительным (контроль) содержание метаболитов NO в повышением содержания метаболитов NO в сыворотке крови было увеличено на протя периферической крови и особенно в очаге жении первых трёх недель наблюдения по (не менее 28 суток). Применение лекарст сравнению с интактными животными. На венных средств, стимулирующих заживле ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА ние, с разным механизмом действия приво 7 е – в 1,6 раза, на 14 е – в 1,4 раза, на 21 е – в дит к быстрому (к 14 м суткам) снижению 1,3 раза.

NO до нормы как в очаге, так и в крови, что У животных 2 й и 3 й групп под влия сопровождается более благоприятным тече нием лечения содержание SH групп в пери нием раневого процесса и выраженным уме ферической крови на протяжении первых ньшением площади ожоговой раны у жи трёх недель наблюдения оставалось в преде вотных этих групп. лах физиологических колебаний, а к концу Содержание SH групп в сыворотке кро эксперимента даже повысилось: во 2 й груп ви интактных животных составило (5,26± пе на 18 %, в 3 й – на 27 % относительно 0,5) мкмоль/л (рис. 3), в коже – (6,63± интактных животных (рис. 3). При этом на 0,66) мкмоль/л (рис. 4). протяжении 7–28 суток содержание SH групп было достоверно выше, чем в группе мкмоль/л без лечения. Содержание SH групп в очаге # # в течение 3–21 суток было достоверно ниже * * * показателей интактной группы, лишь к Ин * ** ** 28 м суткам достигая физиологических зна #3 # * чений (рис. 4). Так, у животных 2 й группы # # на 3 и сутки содержание SH групп было # ниже нормы на 29 %, на 7 е – на 28 %, на 14 е – на 13 %, на 21 е – на 12 %. У живот ных 3 й группы на 3 и сутки содержание SH групп было ниже нормы на 33 %, на 7 е – на 32 %, на 14 е – на 21 %, на 21 е – на 18 %.

3и 7е 14 е 21 е 28 е Сутки Таким образом, изменения SH групп в очаге при ожоговой травме носили более тя Рис. 3. Содержание SH групп в сыворотке крови животных с термическим ожогом без лечения и жёлый характер, чем в крови, отражая тя при использовании ранозаживляющих лекарст жёлые метаболические нарушения в ране.

венных средств. 1–3 – те же, что и на рис. Местное применение ранозаживляющих мкмоль/л препаратов подтверждает эту закономер ность. Восстановление количества SH групп Ин до нормы в коже очага под влиянием метил # # урациловой мази и мази тиотриазолина про ### # ## # исходит только к 28 м суткам эксперимен *# 1 # та, в то время как в крови их содержание не # уменьшается. Выраженное и длительное снижение сульфгидрильных групп в ожого вой ране свидетельствует о разрушении бел ков, аминокислот, пуриновых и пиримиди новых оснований, РНК, ДНК [17], об изме 3и 7е 14 е 21 е 28 е нении синтеза и свойств структурных бел Сутки ков [18].

Рис. 3. Содержание SH групп в коже животных Более полные и конкретные данные о про с термическим ожогом без лечения и при исполь цессах самостоятельного заживления ожо зовании ранозаживляющих лекарственных средств. 1–3 – те же, что и на рис. 1 говой раны и под влиянием фармакотерапев Исследование уровня SH групп в перифе тических средств дадут гистологические и рической крови животных 1 й группы с ес иммуноморфологические исследования.

тественным течением патологического про цесса показало его стабильное понижение в Выводы течение всего времени исследования отно Роль метаболитов оксида азота в меха сительно интактной группы (рис. 3). Наи низмах развития экспериментальной ожо меньшие показатели были зарегистрирова говой раны подтверждается длительным по ны на 7 е сутки, когда содержание SH групп вышением их содержания в очаге (28 е сут было ниже нормы почти в два раза. Содержа ки) и периферической крови (14 е сутки) с ние SH групп в очаге оставалось сниженным одновременным резким снижением количе в течение первых трёх недель исследования ства SH групп;

ускоренным восстановле относительно интактной группы. Так, на нием концентрации метаболитов оксида 3 и сутки оно было ниже нормы в 1,8 раза, на азота (к 14 м суткам) как в очаге, так и в пе ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА риферической крови, SH групп в очаге (к вами с разным механизмом действия, что 28 м суткам) при их протекции в крови ра сопровождается позитивной динамикой за нозаживляющими лекарственными средст живления.

Список литературы 1. Гула Н. М. Протизапальний вплив N стеароїлетаноламіну на експериментальну опікову травму в щурів / Н. М. Гула, А. А. Чумак, А. Г. Бердишев [та ін.] // Укр. біохім. журн. – 2009. – Т. 81, № 2. – С. 107–116.

2. Каминская Л. Ю. Влияние донатора NO нитрозотиола глутатиона на уровень окислов азота и малонового диальдегида в крови крыс / Л. Ю. Каминская, А. А. Жлоба, Л. А. Александрова [и др.] // Артериальная гипертензия. – 2005. – Т. 11, № 1. – С. 5–9.

3. Сомова Л. М. Оксид азота как медиатор воспаления / Л. М. Сомова, Н. Г. Плехова // Вестник ДВО РАН. – 2006. – № 2. – С. 77–80.

4. Till G. O. Lipid peroxidation and acute lung injury after thermal injury to skin. Evidence of a role for hydroxyl radical / G. O. Till, J. R. Hatherill, W. W. Tourtellotte [et al.] // Am. J. Pathol. – 1985. – Vol. 119 – Р. 376–84.

5. Haycock J. W. Oxidative damage to protein and alterations to antioxidant levels in human cutaneous thermal injury / J. W. Haycock, D. R. Ralston, B. Morris [et al.] // Burns. – 1997. – Vol.

23. – P. 533–40.

6. Ванин А. Ф. Динитрозильные комплексы железа и S нитрозотиолы – две возможные формы стабилизации и транспорта оксида азота в биосистемах / А. Ф. Ванин // Биохимия. – 1998. – № 63 (7). – С. 924–38.

7. Волин М. С. Механизмы передачи сигнала оксидант – оксид азота в сосудистой ткани / М. С. Волин, К. А. Дэвидсон, П. М. Камински [и др.] // Биохимия. – 1998. – № 63 (7). – С. 958–65.

8. Liu Z. S Transnitrosation reactions are involved in the metabolic fate and biological actions of nitric oxide / Z. Liu, M. A. Rudd, J. E. Freedman [et al.] // Pharmacol. Experiment. Ther. – 1998. – Vol. 284 (2). – P. 526–34.

9. Mallis R. J. Oxidative modification of H ras: S thiolation and S nitrosilation of reactive cys teines / R. J. Mallis, J. E. Buss, J. A. Thomas // Biochem. J. – 2001. – Vol. 355. – P. 145–53.

10. Коган А. Х. Свободнорадикальные перекисные механизмы патогенеза ишемии и ИМ и их фармакологическая регуляция / А. Х. Коган, А. Н. Кудрин, Л. В. Кактурский [и др.] // Патофи зиология. – 1992. – № 2. – С. 5–15.

11. Пат. 98010227 Україна, МПК G 01 № 33/50, G 01 № 33/68. Спосіб прогнозування перебігу променевих ушкоджень шкіри в експерименті / Звягінцева Т. В. – № 29145А;

заявл. 15.01.98;

опубл. 16.10.00, Бюл. № 5 (II ч.).

12. Солопов В. Н. Роль серосодержащих соединений в патогенезе и лечении хронических неспе цифических заболеваний легких / В. Н. Солопов, И. И. Резников, А. Г. Чучалин // Клин. мед. – 1988. – № 6. – С. 60–63.

13. Яковлева Л. В. Фармакологическое изучение новой ранозаживляющей мази «Пролидок сид» / Л. В. Яковлева, С. С. Кальф Калиф, О. В. Ткачева // Провизор. – 1999. – № 1. – С. 44–45.

14. Метельская В. А. Скрининг метод определения уровня метаболитов оксида азота / В. А. Ме тельская, Н. Г. Гуманова // Клин. лаб. диагностика. – 2005. – № 6. – С 15–18.

15. Определение числа сульфгидрильных групп с реактивом Эллмана. Практикум по биохимии / под ред. С. Е. Северина, Т. А. Соловьевой. – М.: Изд во МГУ, 1989. – С. 160–161.

16. Гланц С. Медико биологическая статистика / С. Гланц. – М.: Практика, 1998. – 459 с.

17. Кислородозависимые процессы в облученном организме / В. А. Барабой, П. В. Белошицкий, А. Н. Красюк [и др.] // Фізіол. журн. – 1994. – Т. 40, № 3–4. – С. 116–128.

18. Африканова Л. А. Острая лучевая травма кожи / Л. А. Африканова. – М.: Медицина, 1979. – 190 с.

Т.В. Звягінцева, О.В. Кривошапка, Є.В. Желнін РОЛЬ МЕТАБОЛІТІВ ОКСИДУ АЗОТУ В МЕХАНІЗМАХ РОЗВИТКУ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ОПІКУ Показано, що перебіг експериментального термічного опіку у щурів характеризувався три валим підвищенням метаболітів оксиду азоту у вогнищі і периферичній крові з одночасним різ ким зниженням кількості SH груп. Під впливом ранозагоювальних лікарських засобів з різним механізмом дії відбувалося відновлення концентрації метаболітів оксиду азоту як у вогнищі, так і в периферичній крові, SH груп у вогнищі. Досліджувані лікарські засоби чинили протек торну дію на SH групи крові.

Ключові слова: оксид азоту, SH групи, термічний опік.

ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА T.V. Zvyagintseva, A.V. Kryvoshapka, E.V. Zhelnin ROLE OF NITRIC OXIDE METABOLITES IN THE MECHANISMS OF EXPERIMENTAL BURN It is shown that experimental thermal burns in rats were characterized by prolonged increase of nitric oxide metabolites in the wound and peripheral blood with a simultaneous sharp decline in the SH groups number. Under the influence of wound healing drugs with different mechanisms of action the studied parameters were restored: the concentration of metabolites in the wound, and peripheral blood, SH groups in the wound. Studied drugs have provided a protective action on blood SH groups.

Key words: nitric oxide, SH groups, thermal burn.

Поступила 22.12. ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА УДК 616 076. Г.А. Ковалёв Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков ЦИТОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА В ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ МЕДИЦИНЕ Изучены возможности и перспективы применения цитологической диагностики в экспериментальной медицине. Показано, что цитологический метод является надёжным, достаточно простым и экономически привлекательным методом морфо логического анализа и может быть использован в качестве современного метода диа гностики в экспериментальных медицинских исследованиях.

Ключевые слова: клеточный материал, цитологический метод, морфологический анализ.

Одним из реальных путей улучшения Целью данной работы было оценить воз состояния здоровья населения является усо можности и перспективы применения цито вершенствование существующих и разработ логического метода диагностики в экспери ка новых терапевтических подходов и мето ментальных медицинских исследованиях.

дов лечения, что, в свою очередь, предпола Материал и методы. Проводился анализ гает выполнение широкого массива исследо литературных источников научных библио ваний in vivo. В связи с этим особую роль тек, медицинских баз данных сети Internet приобретает экспериментальная медицина. (PubMed, ScienceDirect).

Существенным фактором при планиро Результаты и их обсуждение. В Украине вании и проведении экспериментальных клиническая цитология является разделом работ является их стоимость, особенно в клинической лабораторной диагностики, условиях непростой экономической ситуа по видимому, в силу того, что традиционно ции в Украине. В связи с этим перед экспе исследование клеточного состава входит в риментатором встаёт проблема подбора на комплекс клинических лабораторных ана дёжных и недорогих методов диагностики, лизов (кровь, костный мозг, экссудаты, от которые не предполагают умерщвления деляемое различных органов и др.). Для того лабораторных животных. чтобы овладеть специальностью «клиниче Цитологическое исследование является ская лабораторная диагностика», не обяза признанным полноценным методом морфо тельно быть врачом, достаточно иметь био логического анализа, основанным на изуче логическое образование, а программы обу нии и оценке клеточного материала, полу чения специалистов с базовым высшим ченного из патологического очага различ медицинским или биологическим образова ными способами [1–3]. Поскольку проведе нием, по большому счёту, мало чем различа ние цитологических исследований не тре ются [6]. На сегодняшний день любое науч бует специальных условий, дорогостоящих ное подразделение медико биологического реактивов и оборудования, внедрение цито профиля имеет возможность заполучить логического метода не предполагает боль специалистов по клинической лаборатор ших материальных затрат [4, 5]. Однако, не ной диагностике, в частности по цитологи смотря на повсеместное внедрение цитодиа ческой диагностике.

гностики в клиническую практику, её при Выполнение цитологических исследова менение в экспериментальной медицине ний начинают с обработки полученного био нельзя назвать широким, в чём нетрудно материала, приготовления препаратов и их убедиться, просмотрев экспериментальные окраски, после чего проводят микроско работы, опубликованные в научных жур пию, дают трактовку цитологической кар налах. тины и формулируют диагностическое за © Г.А. Ковалёв, ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА ключение. Каждый из указанных этапов ва отпечатков («щипковые» биопсии), даже из жен и требует пристального внимания, по труднодоступных участков.

скольку от этого зависит точность и инфор По цели, методической основе, объекту мативность всего исследования. Так, при исследования, методам окраски ядра, цито неправильном взятии материала элементы плазмы и других структурных элементов из патологического очага могут отсутство клетки цитологическое исследование сход вать, при небрежном приготовлении препа но с гистологическим. Однако для цитоло ратов – не попасть на стекло или распреде гического исследования, в отличие от гис литься слишком густо;

сохранность клеточ тологического, требуется значительно ме ных элементов напрямую зависит от усло ньшее количество биоматериала, из ко вий хранения и транспортировки биомате торого можно достаточно быстро пригото риала, а также времени, прошедшего с мо вить цитологический препарат, как прави мента забора до фиксации и окраски препа ло, без длительной предварительной обра ратов. На этапе просмотра препарата клетки ботки и без специальной аппаратуры. Та могут быть «пропущены» или неправильно ким образом, морфологическое заключение интерпретированы, особенно при дефектах может быть получено значительно раньше, фиксации и окраски. что порой имеет решающее значение для Область применения цитологического оценки динамики процессов сано и патоге метода диагностики лимитирована возмож неза, следовательно, вносит существенный ностями забора биоматериала для исследо вклад в прогнозирование результатов экспе вания. Способы получения биоматериала риментальных исследований и позволяет хорошо известны [2–5], условно их можно избежать лишних материальных затрат.

разделить на эксфолиативный, пункцион Например, можно выяснить целесообраз ный и мазков отпечатков (таблица). ность увеличения сроков наблюдения за ла Способы получения и характер материала для цитологического исследования Выбор способа взятия материала опреде бораторными животными при разработке у ляется характером патологического процес них экспериментальных моделей заболева са, его локализацией, возможностью прове ний человека, продолжения лечения или дения инструментальных исследований. В изменения дозировки и кратности введения этой связи существенную помощь оказы того или иного препарата.

вает современная эндоскопическая техни Микроскопия качественно приготов ка, которая позволяет получить промывные ленного цитологического препарата даёт воды с достаточным для цитологических ис возможность получить значительное коли следований клеточным составом, прицель чество информации: фон препарата, коли но взять биоматериал для мазков и мазков чество и взаимоотношение клеток, их раз ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА мер, форма, границы;

состояние цитоплаз роль в стандартизации этапов цитологиче мы даёт информацию об особенностях окра ских исследований играет внедрение обору шивания различных участков, наличии дования, где процесс приготовления цито включений и их характере;

количестве, раз логического препарата полностью автома мерах и форме ядер и ядрышек, состоянии тизирован. На протяжении последних де кариолеммы и ядерного хроматина. Оцени сятилетий активно разрабатывались техно вая микроскопические признаки, характер логии, позволяющие не только полностью ные для общепатологических процессов, автоматизировать процесс приготовления можно изучать реакцию тканей на те или препарата, но и выполнять его первичный иные экспериментальные воздействия, на «машинный» скрининг, в результате кото пример, исследовать особенности протека рого автоматически отмечаются участки ния фаз воспаления или регенерации в раз препарата, «заслуживающие внимания»

личных модельных системах. Помимо тра цитолога (например, ThinPrep Imaging Sys диционного подсчёта количества тех или tem). Использование подобных систем осво иных морфологических объектов в препара бождает сотрудников от рутинной работы, те (с дальнейшим вычислением соответст значительно сокращает время, необходимое вующих индексов), при цитологических ис для выполнения цитологических исследо следованиях можно в полной мере приме ваний, а главное – повышает информатив нять методы морфометрического анализа с ность и надёжность цитодиагностики [9].

последующей статистической обработкой. Безусловно, внедрение такого оборудования Таким образом, цитологический метод по увеличивает стоимость цитологических ис зволяет проводить как качественный, так и следований, однако в ситуации, когда пла количественный морфологический анализ. нируется большое количество исследова Критерием достоверности результатов цито ний, особенно в сжатые сроки, его примене логических исследований является их сопо ние может быть экономически выгодным.

ставление с результатами плановых гисто Интерпретировать цитологическую карти логических исследований. Такие парал ну необходимо с учётом данных других ме лельные исследования крайне важны и обо тодов исследования. Трудности с интерпре гащают как один, так и другой метод [7, 8]. тацией данных микроскопии могут быть Тем не менее цитологический метод диа разрешены в ходе консультаций с коллега гностики, как и любой другой, имеет свои ми, в эпоху Internet и телемедицинских тех ограничения. Они обусловлены прежде нологий существует реальная возможность всего влиянием субъективного фактора. С получить заключение ведущих специалис этой проблемой можно справиться путём тов в интересующей области, не покидая стандартизации всех этапов – от получения, своей лаборатории [10].

доставки и подготовки биоматериала до Исходя из сказанного, можно заклю формулировки заключения. На практике чить, что при должной организации всех такая стандартизация достигается неукос этапов исследования цитологическая диа нительным соблюдением соответствующих гностика является надёжным, достаточно протоколов, которые должны быть разрабо простым и экономически привлекательным таны, исходя из специфики эксперимен методом, который позволяет осуществлять тальной модели и условий эксперимента, и морфологический контроль за процессами утверждены на этапе планирования иссле сано и патогенеза в модельной системе в дования. Описание цитологической карти динамике. Цитологический метод можно ны должно проводиться по единой схеме – рассматривать как современный перспек обзорный осмотр на малом и лишь затем на тивный метод диагностики в эксперимен большом увеличении (иммерсия). Важную тальных медицинских исследованиях.

Список литературы 1. Ali S. Z. Fine needle aspiration cytology: a volume in foundations in diagnostic pathology / S. Z. Ali, M. K. Sidawy. – Churchill Livingstone, 2007. – 376 p.

2. Koss L. G. Koss’ diagnostic cytology and its histopathologic bases / L. G. Koss, M. R. Melamed. – Lippincott Williams & Wilkins, 2005. – 1856 p.

3. Морозова В. Т. Лимфатические узлы. Цитологическая диагностика / В. Т. Морозова, С. А. Лу говская. – М. : Триада, 2008. – 78 с.

4. Клиническая лабораторная аналитика: в 3 т. Т. 2: Частные аналитические технологии в кли нической лаборатории / [под ред. В. В. Меньшикова]. – М. : Лабинформ РАМЛД, 1999. – 352 с.

ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА 5. Bibbo M. Comprehensive cytopathology / M. Bibbo, D. Wilbur. – Elsevier Saunders, 2008. – 1120 p.

6. Береговая Е. Г. Состояние и проблемы образования в области клинической лабораторной диа гностики / Е. Г. Береговая, Е. И. Передерий // Лаб. диагностика. – 2009. – Т. 4, № 50. – С. 54–58.

7. Bardawil R. G. Colonic cytology. A retrospective study with histopathologic correlation / R. G. Bar dawil, F. G. D’Ambrosio, S. I. Hajdu // Acta Cytol. – 1990. – Vol. 34, № 5. – P. 620–626.

8. The role of liquid based cytology in the investigation of colorectal lesions: a cytohistopatho logical correlation and evaluation of diagnostic accuracy / K. Kontzoglou, K. Moulakakis, D. Alexiou [et al.] // Langenbecks Arch. Surg. – 2007. – № 392. – P. 189–195.

9. Comparison of ThinPrep and conventional preparations on fine needle aspiration cytology mate rial / P. Dey, U. Luthra, J. George [et al.] // Acta Cytol. – 2000. – Vol. 44, № 1. – P. 46 – 50.

10. Шабалова И. П. Информационные технологии в клинической цитологии / И. П. Шабалова, Т. В. Джангирова, К. Т. Касоян // Клин. лаб. диагностика. – 2010. – № 7. – С. 39–47.

Г.О. Ковальов ЦИТОЛОГІЧНА ДІАГНОСТИКА В ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНІЙ МЕДИЦИНІ Вивчено можливості і перспективи застосування цитологічної діагностики в експерименталь ній медицині. Показано, що цитологічний метод є надійним, достатньо простим і економічно привабливим методом морфологічного аналізу і може бути використаний як сучасний метод діа гностики в експериментальних медичних дослідженнях.

Ключові слова: клітинний матеріал, цитологічний метод, морфологічний аналіз.

G.A. Koval‘ov СYTOLOGIC DIAGNOSTICS IN EXPERIMENTAL MEDICINE Possibilities and prospects of application of cytodiagnosis in experimental medicine were studied.

It is shown, that a cytologic method is reliable, enough simple and economic attractive method of mor phological analysis. It can be used as a modern method of diagnostics in experimental medical researches.

Key words: cellular material, сytologic method, morphological analysis.

Поступила 24.11. ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА УДК 616.12 009.72:57.086. А.Г. Попандопуло, И.Г. Постолюк, А.М. Салахова ГУ «Институт неотложной и восстановительной хирургии им. В.К. Гусака НАМН Украины», г. Донецк ПАТОФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ МОНОКРОТАЛИН ИНДУЦИРОВАННОЙ ЛЁГОЧНОЙ ГИПЕРТЕНЗИИ Рассмотрено влияние мезенхимальных стволовых клеток на уровни давления в сис теме большого и малого кругов кровообращения, а также на процессы ремоделиро вания, протекающие в сердце и лёгких при монокроталин индуцированной лёгочной гипертензии в эксперименте. Показано положительное действие клеточной терапии при лечении заболеваний, сопровождающихся повышением давления в лёгочной артерии.

Ключевые слова: монокроталин, лёгочная гипертензия, стволовые клетки, лечение.

Проблема лёгочной гипертензии (ЛГ) до роятностью развития острой декомпенсации сегодняшнего дня остаётся нерешённой во в раннем послеоперационном периоде.

всём мире. Основным патофизиологиче В последние годы в мире большое внима ским механизмом развития ЛГ при заболе ние уделяется возможности применения ваниях различной этиологии считается дис стволовых клеток в лечении различных функция эндотелия [1, 2]. Дисбаланс био заболеваний и патологических состояний, логически активных субстанций запускает в том числе при ЛГ [9].

каскад реакций, приводящих в том числе к В связи с этим целью данного исследо преобладанию вазоконстрикторов над вазо вания было на модели монокроталин инду дилататорами, а с прогрессированием забо цированной ЛГ у крыс проанализировать левания вазоспазм закрепляется необрати изменение уровня давления в системах ма мыми изменениями со стороны сосудов лёг лого и большого кругов кровообращения ких [3]. под воздействием клеточной терапии.

Наиболее перспективными препаратами Материал и методы. Эксперименталь для лечения ЛГ считаются синтетический ная модель ЛГ была получена у самцов крыс простациклин и его аналоги (эпопростенол, породы Вистар с использованием монокро илопрост), антагонисты рецепторов эндоте талина. Сорока крысам основной группы лина 1 (бозентан) и ингибиторы фосфоди внутрибрюшинно ввели 60 мг/кг пирроли эстеразы 5 (силденафил) [3–7]. Однако их зидинового алкалоида монокроталина, эффективность не всегда достаточна. Имеют 20 крысам контрольной группы – инъекции ся ограничения, связанные с методикой при 0,9% ного физиологического раствора в со менения, а также ограничения в их исполь поставимом объёме. В результате метабо зовании с финансовой точки зрения. При лизма в печени под действием цитохрома некоторых формах ЛГ, например, развив Р450 монокроталин преобразуется в дегидро шейся на фоне врождённого порока сердца и монокроталин, оказывающий повреждаю находящейся в терминальной стадии своего щее действие на эндотелиоциты сосудов лёг развития, единственным спасительным ких [10]. До конца не известны механизмы методом лечения может стать трансплан действия активного метаболита монокрота тация комплекса «сердце лёгкие» [8], при лина. Некоторые учёные предполагают на менение которого по многим причинам так личие у него сродства к клеткам лёгочного же ограничено. Выполнение же коррекции эндотелия, другие считают, что его повреж дефекта на фоне необратимых изменений дающий эффект связан с коротким перио сосудов лёгких связано с крайне высокой ве дом полувыведения (1–2 с) и способностью © А.Г. Попандопуло, И.Г. Постолюк, А.М. Салахова, ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА оказать повреждающий эффект на близрас А.М. Лифшица. Отказ от прежних крите положенные клетки. При этом эндотелиаль риев гипертрофии – общего веса сердца и ное повреждение ведёт не к острой клеточ толщины стенок желудочков объяснили ной гибели, а скорее к функциональной аль следующим. Общая масса сердца пропор терации [11]. Несомненна роль воспаления ционально зависит от массы тела животно в прогрессировании монокроталин инду го. Также архитектоника миокарда в пра цированной болезни лёгких – отмечаются вом и левом желудочках существенно раз периваскулярное воспаление и активация нится, так что толщина их стенок не может тромбоцитарного звена гемостаза [11]. служить надёжным показателем гипертро Давление в лёгочной артерии измеряли фии. Толщина стенок желудочков изменя прямым катетерным методом. Крыс анесте ется при дилатации сердечных полостей и зировали фенобарбиталом в дозе 60 мг/кг и в связи с трупным окоченением. Провероч переводили на искусственную вентиляцию ные работы показали, что между толщиной лёгких с частотой 60–70 дыхательных дви стенок желудочков и их мышечной массой жений в минуту комнатным воздухом в корреляция является слабой [12].

объёме 0,83 мл/100 г массы тела животного. Результаты и их обсуждение. Введение При открытой грудной клетке измеряли крысам контрольной группы монокроталина систолическое давление в левом и правом привело к развитию у них ЛГ, что подтвер желудочках сердца. ждалось достоверным снижением системно Для подтверждения развития ЛГ через го систолического давления (Рс) с (116,5±2,5) один месяц после описанных манипуляций до (102,5±2,0) мм рт. ст. (р0,05). В то же и после проведения сравнительного анализа время уровень лёгочного систолического величин давления в правом и левом желу давления (Рл) повышался с (31,6±1,0) до дочках сердца из эксперимента было выве (51,5±1,0) мм рт. ст. (р0,05). При этом со дено 20 крыс основной группы и все крысы отношение Р л/Р с в контрольной группе контрольной группы. Морфометрические составило 0,27, в основной – 0,50.

показатели сердца и лёгких оценивали ме Интересен тот факт, что через месяц пос тодом отдельного взвешивания в обеих ле введения животным с подтверждённой ЛГ группах. Двадцать крыс основной группы, мезенхимальных стволовых клеток Рл сни продолживших участие в эксперименте, по жалось до (40,05±1,5) мм рт. ст., а Рс состав лучили внутривенные инъекции суспензии ляло (110,5±2,0) мм рт. ст., Рл/Рс – 0, мезенхимальных стволовых клеток в дозе (р0,05), что можно расценивать как по 1 млн/кг массы тела, ещё через месяц их вы ложительное влияние клеточной терапии на вели из эксперимента и провели измерения. течение монокроталин индуцированной ЛГ.

Мезенхимальные стволовые клетки выде Общеизвестным является тот факт, что ляли из костного мозга самцов крыс породы при воздействии избыточного давления на Вистар при культивировании в питательной сердечную мышцу последняя гипертро среде DMEM/F12, 20 % ЭТС. фируется. Масса правого желудочка и пра Функциональную нагрузку лёгких и вого предсердия возрастает под влиянием отдельных частей сердца оценивали по повышенного давления в системе малого методу Мюллера–Ильиной в модификации круга кровообращения (таблица).

Масса лёгких и сердца экспериментальных животных (n=20), (М±m) # Примечания: 1. p0,05;

* достоверно по сравнению с контрольной группой;

по сравнению с основной группой до лечения.

2. Мс – масса сердца: Мт – масса тела.

ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА Как видим, в группе животных с моно чена тенденция к уменьшению массы право кроталин индуцированной ЛГ до проведе го предсердия до (0,048±0,010) г, снижение ния терапии масса правого желудочка со индекса массы сердца до 1,97±0,19, а также ставила (0,398±0,038) г против (0,256± возрастание массы левого желудочка до 0,010) г в контрольной группе (р0,05);

мас (0,520±0,026) г. Однако при этом различия са правого предсердия – соответственно данных показателей в сравнении с группой (0,059±0,013) и (0,028±0,006) г (р0,05). с монокроталин индуцированной ЛГ до про Различия также обнаружены и в массе ле ведения клеточной терапии оказались не вого желудочка: (0,466±0,021) и (0,572± достоверными (р0,05). Вероятно, это свя 0,032) г соответственно в основной и конт зано с недостаточным сроком, прошедшим рольной группах (р0,05). Достоверных со дня использования стволовых клеток. В отличий не было в массе левого предсер то же время уже через один месяц отмечено дия – (0,031±0,005) и (0,020±0,003) г в со достоверное снижение массы правого желу ответствующих группах эксперименталь дочка и лёгких до (0,292±0,016) и (3,02± ных животных (р0,05). В то же время до 0,11) г соответственно (р0,05).

стоверно возросли по сравнению с контроль Таким образом, показано положительное ной группой индекс массы сердца и масса влияние клеточной терапии на динамику лёгких при развитии монокроталин инду течения лёгочной гипертензии в экспери цированной ЛГ – в 1,8 и 1,3 раза соответст менте. Метод клеточной терапии можно счи венно (р0,05). тать перспективным, однако требуется даль Что касается влияния мезенхимальных нейшее изучение роли и механизмов дейст стволовых клеток на процессы ремодели вия мезенхимальных стволовых клеток в рования, то через месяц после применения лечении заболеваний, сопровождающихся клеточной терапии у животных с ЛГ отме повышением давления в лёгочной артерии.

Список литературы 1. Naeije R. Pathophysiology of pulmonary arterial hypertension / R. Naeije, P. Dorfmoller // ER monograph 27. Pulmonary vascular pathology: a clinical update. – 2004. – Vol. 9. – P. 121–204.

2. Cиренко Ю. Н. Лёгочная гипертензия / Ю. Н. Сиренко // Артериальная гипертензия. – 2009. – № 2/3.

3. Diagnosis and management of pulmonary artery hypertension: ACCP evidence based clinical prac tice guideline / L. R. Rubin, D. C. McCrory, V. V. MCLaughlin [et al.] // Chest. – 2004. – Vol. 126, № 1. – P. 1S–92S.

4. Long term treatment of primary pulmonary hypertension with aerosolized iloprost, a prostacyc lin analogue / M. M. Hoeper, M. Schwarze, S. Ehlerding [et al.] // N. Engl. J. Med. – 2000. – Vol. 342, № 25. – P. 1866–1870.

5. Long term treatment of pulmonary hypertension with aerosolized iloprost / S. Machherndl, M. Kneussl, R. Baumgartner [et al.] // Eur. Respir. J. – 2001. – Vol. 17, № 1. – P. 8–13.

6. Effects of the dual endothelin receptor antagonist bosentan in patients with pulmonary hyper tension: a randomized / R. N. Channick, G. Simonneau, O. Sitbon [et al.] // Lancet. – 2001. – Vol. 358, № 9288. – P. 367–374.

7. Abrams D. Sildenafil as a selective pulmonary vasodilatator in childhood primary pulmonary hypertension / D. Abrams, I. Schulze Neick, A. G. Magee // Heart. – 2000. – Vol. 84, № 2. – P. 84–86.

8. Pediatric lung transplantation for pulmonary hypertension and congenital heart disease / T. L. Spray, G. B. Mallory, C. E. Canter [et al.] // Ann. Thorac. Surg. – 1992. – Vol. 54, № 2. – P. 216–223.

9. Transplantation of endothelial progenitor cells into the lung to alleviate pulmonary hyperten sion in dogs / M. Takahashi, T. Nakamura, T. Toba [et al.] // Tissue Eng. – 2004. – Vol. 10, № 5–6. – P. 771–779.

10. Roth R. A. Lung vascular injury from monocrotaline pyrrole, a putative hepatic metabolite / R. A. Roth, J. F. Reindel // Adv. Exp. Biol. – 1991. – Vol. 283. – Р. 477–487.

11. Mechanisms and pathology of monocrotaline pulmonary toxicity / D. W. Wilson, H. J. Segall, L. C. Pan [et al.] // Critical Reviews in Toxycology. – 1992. – Vol. 22, № 5–6. – P. 307–325.

12. Автандилов Г. Г. Морфометрия в патологии / Г. Г. Автандилов. – М. : Медицина, 1973. – 248 с.

ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА А.Г. Попандопуло, І.Г. Постолюк, Г.М. Салахова ПАТОФІЗІОЛОГІЧНЕ ОБҐРУНТУВАННЯ МОЖЛИВОСТІ ВИКОРИСТАННЯ МЕЗЕНХІМАЛЬНИХ СТОВБУРОВИХ КЛІТИН ДЛЯ ЛІКУВАННЯ МОНОКРОТАЛІН ІНДУКОВАНОЇ ЛЕГЕНЕВОЇ ГІПЕРТЕНЗІЇ Розглянуто вплив мезенхімальних стовбурових клітин на рівні тиску в системі великого та малого кіл кровообігу, а також на процеси ремоделювання, які мають місце в серці і легенях при монокроталін індукованій легеневій гіпертензії в експерименті. Показана позитивна дія клі тинної терапії при лікуванні захворювань, що супроводжуються підвищенням тиску в легеневій артерії.

Ключові слова: монокроталін, легенева гіпертензія, стовбурові клітини, лікування.

A.G. Popandopulo, I.G. Postoliuk, A.M. Salakhova PATHOPHYSIOLOGICAL SUBSTANTIATION OF THE POSSIBILITY OF USING MESENCHYMAL STEM CELLS TO TREAT MONOCROTALINE INDUCED PULMONARY HYPERTENSION The article examines the influence of mesenchymal stem cells on the pressure levels in the pulmo nary and systemic circulation, as well as the remodelling processes occurring in the heart and lungs during monocrotaline induced pulmonary hypertension in the experiment. It is shown that cell the rapy reduces pulmonary artery pressure in cases involving pulmonary hypertension.

Key words: monocrotaline, pulmonary hypertension, stem cells, treatment.

Поступила 14.12. ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА УДК 616.858 089.843 031:611.814.7 032:611.018. В.А. Пятикоп Харьковский национальный медицинский университет СТЕРЕОТАКСИЧЕСКАЯ КРИОТАЛАМОТОМИЯ И ВВЕДЕНИЕ НЕЙРОДИФФЕРЕНЦИРОВАННЫХ СТРОМАЛЬНЫХ АУТОКЛЕТОК У БОЛЬНЫХ ПАРКИНСОНИЗМОМ Большинство наблюдаемых нами больных паркинсонизмом находятся в стадии раз вития заболевания, при которой возможно достижение их социально трудовой адаптации с применением современных нейрохирургических методов лечения.

Эффективность стереотаксической криодеструкции VLTh и Sth в лечении больных паркинсонизмом с течением времени снижается. Применение нейроиндуциро ванных стромальных аутоклеток приводит к постепенному нарастанию положи тельного эффекта у этих больных в виде нормализации мышечного тонуса и регресса тремора.

Ключевые слова: криодеструкция, нейротрансплантация, индукция, дофамин.

По мнению большинства исследовате хости во рту, развития глаукомы, наруше лей, изучающих проблемы патогенеза и ле ния памяти, спутанности сознания;

повы чения больных паркинсонизмом, полного шение дозы агонистов дофаминовых рецеп излечения достичь невозможно [1]. По на торов может привести к развитию гипотен шему мнению, облегчение для этих больных зии, тошноты, галлюцинаций, эритроме можно обеспечить созданием соответствую лалгии [2].

щих внешних и внутренних условий, кото В связи с возможностью развития ука рые могли бы максимально способствовать занных осложнений и побочных эффектов, их социальной и профессиональной адапта а также в связи с постепенным снижением ции. Внешние факторы – это особенности эффективности от медикаментозной тера условий быта и работы, которые должны со пии были предложены нейрохирургические ответствовать реальным возможностям методы лечения паркинсонизма, которые больного. В большой мере это зависит от по также имеют разностороннюю направлен ведения окружающих близких и коллег. К ность. Одни операции носят деструктивный внутренним факторам мы прежде всего характер, что приводит к прерыванию пато относим способы коррекции дисфункции логически функционирующих паллидота дофаминергических структур в организме ламических и таламокортикальных связей больного. Как указывают авторы [1–3], кон при паркинсонизме, нормализации мышеч сервативная терапия больных паркинсониз ного тонуса и регрессу тремора [3]. Другие мом в основном направлена на поиск и при оперативные вмешательства преследуют менение средств, замедляющих течение цель стимуляции определённых внутримоз заболевания. К таким средствам они отно говых структур [4]. Имеются сторонники сят препараты леводопы (заместительная комбинации этих методов [5, 6]. Однако все терапия), препараты, влияющие на метабо методы носят симптоматический характер, лизм леводопы, антихолинергические пре и сроки их эффективности исчисляются не параты и агонисты дофаминовых рецепто сколькими годами.

ров. Однако на фоне постоянного повышения В последнее десятилетие в литературе дозы дофасодержащих средств у больных появился ряд сообщений об эффективном возникают осложнения в виде дискинезий и применении клеточной терапии у больных двигательных флуктуаций;

длительный паркинсонизмом [7], касающихся в основ приём антихолинергических средств может ном двух видов клеток – эмбриональных вызвать ряд побочных эффектов в виде су нервных и стволовых. Одним из источников © В.А. Пятикоп, ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА получения стволовых клеток является стро С учётом приведённых шкал и согласно ма костного мозга больного паркинсониз критериям А. Hughes(1992) диагностика мом [8, 9]. В основе метода нейротрансплан паркинсонизма возможна:

• при появлении и наличии в течение го тации лежит патогенетический механизм лечения больных паркинсонизмом, направ да двух из трёх основных симптомов;

• при одностороннем дебюте этих симп ленный на восстановление функции дофа минпродуцирующих структур. Однако томов (или существенной их асимметрии в вопросы выбора оптимального вида клеточ начале болезни);

• при наличии существенной реакции на ной терапии, способа получения и диффе ренцировки клеток, количества клеток и терапию препаратами леводопы.

способа их введения в настоящее время Все наблюдаемые больные были раз остаются нерешёнными. делены на две группы: 1 я (43 чел.) – кото Цель данной работы – сравнительное рым проводили стереотаксическую крио изучение эффективности криодеструкции деструкцию вентролатеральной группы подкорковых узлов и введения аутоклеток ядер таламуса (VLTh) и субталамической стромы костного мозга (КСКМ), индуциро области (Sth) (43);

2 я (19 чел.) – которым ванных в нейробласты, у больных паркин стереотаксически вводили КСКМ, индуци сонизмом. рованные в нейробласты, в субталамиче Материал и методы. Под нашим наблю скую область супранигрально.

дением находилось 62 больных паркинсо Данные о распределении больных по низмом (41 мужчина и 21 женщина). Сред степени тяжести заболевания приведены в ний возраст больных – (58,5±15,5) лет, про табл. 1.

должительность заболевания – (7,6±3,4) го Таблица 1. Распределение больных да. Для установки клинического диагноза по степени тяжести паркинсонизма использовали шкалы Хена и Яра в модифи согласно шкале Хена и Яра кации Lindvall et al. (1989).

Степень тяжести паркинсонизма в бал лах по шкале Хена и Яра:

0 – симптомы отсутствуют;

1,0 – односторонние проявления синд рома;

1,5 – односторонние проявления в соче тании с вовлечением аксиальной мускула туры;

2,0 – двусторонние проявления без посту ральной неустойчивости;

Данные о распределении больных в за 2,5 – двусторонние проявления, посту висимости от темпа прогрессирования забо ральная неустойчивость, которую больной левания приведены в табл. 2.

способен преодолевать;

Таблица 2. Распределение больных 3,0 – то же, но эпизодически нуждается в зависимости от темпа прогрессирования в посторонней помощи;

паркинсонизма по В.Н. Штоку 4,0 – тяжёлое ограничение подвижнос ти, но в «хорошие» дни (или часы) может стоять или ходить без поддержки;

5,0 – прикован к постели.

Для полноты достоверности клиниче ского диагноза учитывали темп прогресси рования паркинсонизма. По В.Н. Штоку, И.А. Ивановой Смоленской, О.С. Левину (2002) выделяют следующие варианты тем па прогрессирования заболевания:

• быстрый, при котором смена стадий Полученные нами ранее положительные результаты экспериментальных исследова происходит в течение двух или менее лет;

• умеренный, при котором смена стадий ний применения КСКМ, индуцированных в нейробласты, на модели паркинсонизма происходит в течение трёх – пяти лет;

• медленный, со сменой стадий в течение позволили провести клиническое внедрение этого метода [10].

более пяти лет.

ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА Аутологичные КСКМ получали из под Результаты криодеструкции подкорко вздошной кости больного и культивировали вых узлов и введения нейроиндуцирован по методу [10]. ных стромальных клеток у больных пар Всем больным паркинсонизмом суспен кинсонизмом в различные сроки после опе зии КСКМ, индуцированных в нейроблас ративного лечения приведены в табл. 3.

ты, вводили интрацеребрально в количестве Таблица 3. Распределение больных 1106 клеток в 1,0 мл физиологического раст по шкале Хена и Яра в ближайший после вора. На 7 е сутки после операции внут операционный период после стереотакси ривенно вводили неиндуцированные строма ческой криодеструкции VL Th и Sth льные клетки в количестве 800 тыс. – 1 млн.

и введения КСКМ, индуцированных Одиннадцати больным спустя 3 и 6 месяцев в нейробласты, сразу после операции после стереотаксической операции КСКМ, и через 3 года индуцированные в нейробласты, вводили эндолюмбально в количестве до 210 6 в объёме 2–3 мл физиологического раствора.

Результаты и их обсуждение. Получен ные результаты свидетельствуют о том, что более 2/3 больных обеих групп имеют сте пень тяжести паркинсонизма, соответст вующую 2,5–3,0 баллов по шкале Хена и Яра, а при анализе темпа развития заболе вания отмечается преобладание умеренного темпа (66,9 и 58,8 % больных соответствен но 1 й и 2 й групп). Анализ исходных кли нических данных показал, что большинство обследуемых больных паркинсонизмом на ходится на той стадии заболевания, когда ещё можно в какой то степени достичь их социально трудовой адаптации. Критерием эффективности криодеструкции подкорко вых узлов и введения КСКМ, индуцирован ных в нейробласты, у больных являлась динамика клинических проявлений, кото рую оценивали по классификации Э.И. Кан деля (1981):


• хороший результат – тяжесть состоя ния соответствует 3 й стадии, и больной принимает поддерживающую дозу противо паркинсонических средств (ППС);

Из представленных данных видно, что • значительное улучшение – тяжесть со эффективность стереотаксической крио стояния соответствует 2 й стадии, и больной деструкции подкорковых узлов с течением принимает половину первоначальной дозы времени постепенно снижается (с 30,2 до ППС;

88,2 % в течение трёх лет), а от введения • небольшое улучшение – тяжесть со КСКМ значительно растёт. Первое явление стояния соответствует 1 й стадии, но боль можно объяснить, во первых, прогрессиро ной принимает прежнее количество ППС;

ванием заболевания, во вторых, незначи • без изменений;

тельным объёмом криодеструкции подкор • ухудшение.

ковых ядер, что приводит к относительно Анализ результатов стереотаксической раннему восстановлению патологических криодеструкции у больных 1 й группы по корково подкорковых связей. Второе явле казал, что первые положительные резуль ние, по видимому, связано с началом функ таты появлялись непосредственно во время ционирования введённых нейроиндуциро стереотаксической операции у 85 % из них.

ванных стромальных клеток, а также с Это проявлялось значительным снижением результатами стимулирующего действия тремора в конечностях, уменьшением ри введённых клеток на собственные резервы гидности мышц, а зачастую и полной норма организма больного.

лизацией мышечного тонуса.

ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА С целью интраоперационного функциона Таким образом, изменение биоэлектри льного контроля было проведено электроэн ческой активности подкорковых образова цефалографическое (ЭЭГ) и электросубкорти ний после гидродеструкции и после введе кографическое (ЭсКоГ) мониторирование во ния КСКМ, индуцированных в нейроблас время стереотаксических операций введения ты, может свидетельствовать об улучшении КСКМ, индуцированных в нейробласты. функциональной активности экстрапира мидной системы, уменьшении ингибирую Клиническое наблюдение.

Больной С., 58 лет, диагноз: болезнь щего влияния базальных ганглиев и облег Паркинсона, дрожательно ригидная фор чении дофаминергической трансмиссии.

ма. Болеет 8 лет, постоянно принимает про Послеоперационный период протекал без тивопаркинсонические препараты (наком, осложнений. Больной выписан на 10 е сутки мадопар, циклодол). Эффект от консерва после операции. В дальнейшем у больного тивного лечения резко снизился. 12.09.05 отмечали постепенное, в течение четырёх больному проведена стереотаксическая опе месяцев уменьшение тремора, практически рация гидродеструкции вентролатераль до полного его исчезновения, и нормализа ного ядра зрительного бугра слева и введе цию мышечного тонуса в правых конечнос ния аутологичных КСКМ, индуцированных тях. Кроме того, больной отметил значите в нейробласты, в левую субталамическую льное снижение тремора и уменьшение ри область. На протяжении всей операции гидности в левых конечностях, облегчение проводилось параллельное ЭЭГ и ЭсКоГ мо ходьбы.

ниторирование с помощью ЭЭГ комплекса DX NT32. ЭЭГ регистрировали с лобных Выводы отведений, где была выявлена актив 1. Большинство наблюдаемых больных ность, которая не изменялась на протяже паркинсонизмом по тяжести (2,5–3,0 по Хе нии всей операции, что свидетельствовало ну и Яру) и темпу развития заболевания об интактности образований внутренней (умеренный тип по В.Н. Штоку с соавт.) капсулы. ЭсКоГ регистрировали с области находились в той стадии развития паркин вентролатерального ядра зрительного бугра сонизма, при которой возможно достиже до и после гидродеструкции. До гидродест ние их социально трудовой адаптации с рукции регистрировались в основном высо применением современных нейрохирурги коамплитудная и активность, а также ческих методов лечения.

высокочастотная низкоамплитудная актив 2. Эффективность стереотаксической ность;

после гидродеструкции отмечалось криодеструкции VLTh и Sth в лечении боль снижение и подобных волн. Из субтала ных паркинсонизмом с течением времени мической области регистрировали ЭсКоГ в снижается.

виде медленных и высокоамплитудных ост 3. Применение нейроиндуцированных рых волн;

после введения КСКМ, индуци стромальных аутоклеток приводит к посте рованных в нейробласты, регистрировали пенному нарастанию положительного эф ЭсКоГ в виде и подобной активности фекта у больных паркинсонизмом в виде более низкой амплитуды, островолновая нормализации мышечного тонуса и регресса активность не регистрировалась. тремора.

Список литературы 1. Экстрапирамидные расстройства: руководство по диагностике и лечению / [под ред. В. Н. Што ка, И. А. Ивановой–Смоленской, О. С. Левина]. – М. : МЕДпресс–информ, 2002. – 606 с.

2. Гринберг М. С. Нейрохирургия / М. С. Гринберг. – М.: МЕДпресс информ., 2010. – 1007 с.

3. Кандель Э. И. Функциональная и стереотаксическая нейрохирургия / Э. И. Кандель. – М. :

Медицина, 1981. – 368 с.

4. Томский А. А. Хроническая электростимуляция субталамического ядра в лечении болезни Паркинсона / А. А. Томский, В. А. Шабалов // Вопр. нейрохирургии. – 2004. – № 3. – С. 40–44.

5. Аничков А. Сочетанные стереотаксические операции в лечении паркинсонизма / А. Анич ков, А. Холявин, Л. Мелючева : Матер. IV съезда нейрохирургов России. – М., 2006. – С. 447–448.

6. Хірургічне лікування паркінсонізму у хворих з раннім дебютом захворювання / О. О. Ла поногов, К. Р. Костюк, Ю. М. Медведєв, А. О. Попов // Укр. нейрохірург. журн. – 2006. – № 1. – С. 85–86.

7. Биология стволовых клеток и клеточные технологии / под ред. акад. М. А. Пальцева: в 2 т. – М.:, Медицина, Шико, 2009. – 726 с.

ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА 8. Drucker Colin R. Cell transplantation for Parkinson’s disease present status / R. Drucker Colin, L. Verdugo Diaz // Cell Mol. Nemobiol. – 2004. – Vol. 24, № 3. – P. 301–316.

9. Potential use of marrou stromal cells as therapeutic vectors for diseases of the central nervous system / D. J. Prockop, S. A. Azizi, D. G. Phinney [et al.] // Prog. Brain Res. 2000. – Vol. 128. – P. 293–297.

10. Динамика изменений уровня дофамина в головном мозге и крови крыс с моделью паркин сонизма после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты / В. А. Пятикоп, Е. А. Щегельская, Т. В. Горбач [и др.] // Пробл. криобиологии. – 2005. – Т. 15, № 3. – С. 452–454.

В.О. П’ятикоп СТЕРЕОТАКСИЧНА КРІОТАЛАМОТОМІЯ І ВВЕДЕННЯ НЕЙРОДИФЕРЕНЦІЙОВАНИХ СТРОМАЛЬНЫХ АУТОКЛІТИН У ХВОРИХ НА ПАРКІНСОНІЗМ Більшість хворих на паркінсонізм знаходяться у тій стадії розвитку захворювання, при якій можна досягти їх соціально трудової адаптації з використанням нейрохірургічних методів ліку вання. Ефективність стереотаксичної кріодеструкції VLTh і Sth в лікуванні хворих на паркін сонізм з часом знижується. Використання нейроіндукованих стромальних аутоклітин приводить до поступового наростання позитивного ефекту у хворих у вигляді нормалізації м’язового тонусу і регресу тремору.

Ключові слова: кріодеструкція, нейротрансплантація, індукція, дофамін.

V.А. Pyatikop STEREOTAXIC CRYOTHALAMOTOMY AND INJECTION OF NEUROINDUCED STROMAL AUTOCELLS IN PARKINSON DISEASE PATIENS Medical treatment of patients with Parkinson is amed at the search and application of methods relieving the current of Parkinson disease. The neurotransplantation is pathogenetic method of treat ment of patients, which is directed at resetting the functions of dophaminergic structures. The main source of the stem cells is bone marrow stromal cells. Effectivness of stereotaxic cryothalamotomy decreases during some period of time. Application of the neuroinduced stromal autocells results in positive effects of resetting the muscle tone and tremor regress.

Key words: cryodestruction, neyrotransplantation, induction, dophamine.

Поступила 30.03. ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА УДК 612 821.8:547. О.Г. Берченко, Н.А. Кириллова ГУ «Институт неврологии, психиатрии и наркологии АМН Украины», г. Харьков НЕЙРОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ ТРАНСФОРМАЦИИ ФОБИЙ В АГРЕССИВНОЕ ПОВЕДЕНИЕ У КРЫС В УСЛОВИЯХ АЛКОГОЛИЗАЦИИ И МОДИФИКАЦИЙ МИКРОСОЦИУМА В экспериментах на крысах, предрасположенных к фобии, показана инициирующая роль социально биологических факторов: алкоголизации и изменений микросоциу ма, в гипоталамо амигдалярных и гиппокампальных механизмах трансформации фобий в агрессию. Экспериментально обосновано применение метода транскраниаль ной анодной микрополяризации мозга для купирования агрессии.

Ключевые слова: фобии, агрессии, лимбико неокортикальные механизмы, алкоголизация, микросоциум.

Реакции страха и тревоги, как врождён Одним из методов предупреждения и ку ные проявления защитного поведения, пирования эмоциональных расстройств, сигнализируют организму об опасности, мо как показал наш многолетний опыт, явля билизуют механизмы адаптации, побуж ется воздействие слабым постоянным током дают к поиску адекватных программ пове на структуры эмоционального мозга. Эф дения в ситуациях, угрожающих жизни. В фекты этих воздействий обусловлены изме этом состоит суть их адаптивного значения нениями уровня поляризации мембран нерв [1–3]. Длительное действие психосоциаль ной клетки, что является основой восста ных стрессов вызывает запредельную про новления гальванического гомеостаза эмо дукцию избыточного страха и тревоги в циогенной системы мозга.


оценке микросоциума, приводит к поломке Целью данной работы явилось изучение системы защитного поведения, стойкой фи нейрофизиологических механизмов фобий, ксации фобии в механизмах эмоциональной их трансформации в социальную агрессию памяти. В возникновении фобий существен в условиях алкоголизации и купирования ное значение имеют индивидуальные врож методом транскраниальной анодной микро дённые особенности эмоционального реаги поляризации мозга (ТКАМПМ).

рования с доминированием отрицательных Материал и методы. Исследования про эмоциональных реакций страха и тревоги ведены на 30 лабораторных крысах самцах в структурно функциональной организа половозрелого возраста с наследственной ции эмоционального поведения [4]. Комп предрасположенностью к фобии. Живот лекс таких факторов, как психосоциальный ных отбирали с помощью теста «Open field»

стресс, фиксация опыта неудач в механиз и этологических тестов оценки тревожно мах эмоциональной памяти, генетически фобических состояний [6, 7].

обусловленное превалирование эмоций Согласно данным теста «Open field страха и тревоги в системе эмоционального рассчитывали индексы активности (ИА) N реагирования, приводит к формированию ИА =, t1 + t новых форм адаптивного поведения, на правленных на избегание ситуаций, прово где N – количество пересеченных квадратов цирующих страх. Одним из путей такого за 3 мин;

«избегаемого поведения» является приём t1 – латентный период первого пересече психоактивных веществ и алкоголя [5], ния квадрата;

которые могут усугубить имеющиеся эмо t2 – латентный период выхода в центр.

циональные нарушения, особенно в период По поведенческим признакам: ориенти их отмены, с экзальтацией агрессивных и ровочно исследовательские реакции, эмо аутоагрессивных реакций. циональные реакции (пассивно и активно © О.Г. Берченко, Н.А. Кириллова, ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА оборонительные), груминг (положитель активности мозга с построением коррело ный, отрицательный), вокализация, вегета грамм между биопотенциалами соматосен тивные проявления, и по индексу активно сорной коры и структурами лимбической сти выявлены крысы, предрасположенные системы мозга с учётом коэффициента кор к фобии. Для этих крыс было характерно реляции r=0,7.

угнетение ориентировочно исследователь Положительные эмоциональные реак ских реакций, превалирование поведения ции крыс исследовали методом самостиму пассивно оборонительного типа с вокали ляции положительных эмоциогенных зон зацией и выраженными дефекациями в тес заднего вентролатерального гипоталамуса те «Open field», низкий индекс активности по методу J. Olds и P. Milner [11].

(от 0,1 до 2 баллов);

латентный период пер Результаты и их обсуждение. Электро вого перемещения в открытом поле состав графическая активность мозга предраспо лял (120,0±30,1) с. По данным многопара ложенных к фобии животных (1 я группа) метрического метода оценки эмоциональ характеризовалась десинхронизацией био ных состояний [7], уровень тревожно фоби потенциалов в новой коре с доминирова ческого состояния составлял (10,2±0,9) бал нием бета колебаний и проявлениями тета ла, проявления страха и тревоги были мак пароксизмов в гиппокампе и миндалевид симально выражены в тесте спуска с высоты ном комплексе. В гипоталамусе отмечалась («Step down»);

латентный период спуска с депрессия биопотенциалов с преобладанием высоты колебался в пределах от 20 до 180 с, низкоамплитудной мономорфной активнос а латентный период выхода из домика у всех ти (рис 1).

животных превышал максимально допус Активность системы положительного тимое время и составлял более 180 с. эмоционального подкрепления имела инди У крыс 1 й опытной группы (n=10) ис видуальные различия в реализации реакции следовали лимбико неокортикальные меха самостимуляции заднего вентролатерально низмы формирования фобии. Крыс 2 й го гипоталамуса. У одних регистрировалась опытной группы (n=21) подвергали хрони высокая частота самостимуляции положи ческой алкоголизации в течение 3 месяцев: тельных эмоциогенных зон заднего вент первые 2 недели крысы в состоянии голод ролатерального гипоталамуса, достигающая ной мотивации получали 15% ный этанол, в среднем (337,7±4,5) нажатий за 5 мин, что, в последующие сроки алкоголизации кон вероятно, было обусловлено компенсацией центрацию этанола повышали до 25 % (доза дефицита положительных эмоций. У дру составляла от 1,2 до 1,4 г/кг массы живот гих частота самостимуляции из этой же ного). Крысам 3 й опытной группы (n=7) области гипоталамуса была низкой и состав проводили 5 сеансов ТКАМПМ в течение ляла (182,0±20,5) нажатий за 5 мин, что одного часа [8]. свидетельствовало о торможении механиз Моделирование незнакомых микросо мов активности положительного эмоцио циальных ситуаций для животных с фобией нального подкрепления.

осуществляли в течение 8–10 дней, поме В условиях новой обстановочной аффе щая опытных крыс вместе с чужаком агрес рентации при взаимодействии с эмоцио сором на новую территорию или чужака нально спокойными крысами предрасполо агрессора в группу крыс с фобией [9]. женные к фобии животные демонстриро Опытным крысам под кетаминовым вали беспокойство, беспомощность, усили наркозом вживляли нихромовые электроды вались вертикальные стойки или прояв в стеклянной изоляции в структуры лимби ления «избегаемого поведения»: отстране ческой системы мозга: гиппокамп, гипота ние от контакта с незнакомцами.

ламус, миндалевидный комплекс, новую В состоянии лишения этанола у крыс, кору. Стереотаксические координаты ис длительно получавших его (2 я группа), следуемых структур рассчитывали по кар отмечалось оживление двигательных и веге там Е. Фифковой и Д. Маршалла [10]. тативных реакций, латентный период пере Электрическую активность структур лим сечения первого квадрата в тесте «Open field»

бико неокортикальной системы мозга ре составлял в среднем (8,9±0,2) с, коэффици гистрировали биполярным способом на эле ент активности увеличился до 1,8 (рис. 2). У ктроэнцефалографе EEG8S с введением большинства крыс в «открытом поле» пе ЭЭГ сигналов в персональный компьютер. риодически состояние двигательного тормо Проводили визуальный, спектральный и жения сменялось активацией, наблюдались корреляционный анализы электрической вертикальные стойки, выраженное ориен ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА тировочно исследовательское поведение, зация биопотенциалов с обогащением коле у других – глубокое торможение двигатель баниями бета диапазона в новой коре и ной активности, причём выраженные про гипоталамусе, возникновением регулярных явления страха его усиливали. острых разрядов в гипоталамусе и минда А Б В Г Д Е Рис. 1. Динамика ЭЭГ крысы в условиях направленных воздействий:

А – фон;

Б, В – после лишения этанола и агрессивных взаимодействий;

Г, Д – после ТКАМПМ;

Е – после ТКАМПМ и самостимуляции;

1 – неокортекс, 2 – гиппокамп, 3 – гипоталамус, 4 – миндалевидный комплекс;

калибровочный сигнал 100 мкВ/с левидном комплексе с последующим разви тием генерализованной гиперсинхронной активности (см. рис. 1).

Индекс активности Анализ спектральной мощности биопо тенциалов мозга этих крыс выявил услож нение структуры корреляционных взаимо отношений между новой корой и структу рами лимбической системы мозга, в сравне нии с фоном, с образованием фокусов актив ности в диапазоне тета в новой коре и альфа в гипоталамусе (рис. 3).

Взаимодействие крыс в состоянии лише ния этанола с чужаком агрессором в услови Воздействия ях новой обстановки приводило к агрессив ным столкновениям и дракам, что сопро Рис. 2. Индексы активности крыс в тесте вождалось вокализацией, уринацией, дефе «Open field»:

кацией. Проявления защитно оборонитель Р1 – фон, Р2 – после алкоголизации, Р3 – лише ние этанола, Р4 – после первого, Р5 – второго, ных реакций агрессии защиты и агрессии Р6 – третьего, Р7 – шестого, Р8 – восьмого взаи нападения наблюдались со второго опыт модействия с агрессивным самцом ного дня взаимодействия с чужаком агрес Анализ ЭЭГ (в состоянии лишения эта сором. При этом перенапряжение в системе нола) животных с фобией и алкоголизацией эмоционального реагирования, вызванное выявил напряжённое функционирование алкогольной интоксикацией и агрессив неокортекса и структур лимбической систе ными действиями между опытными живот мы мозга. Регистрировалась десинхрони ными, приводило в отставленном периоде к ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА возникновению агрессивных столкновений. эмоциогенных структур лимбической систе По видимому, закрепление индивидуаль мы мозга. На ЭЭГ наблюдалось развитие аль ного опыта агрессии осуществлялось по фа пароксизмальной активности в новой механизмам эмоционального резонанса и коре и структурах лимбической системы научения агрессивным действиям. мозга с формированием фокусов активности:

А Б В Г Рис. 3. Корреляционные связи между структурами мозга:

А – фон;

Б – лишение этанола;

В – лишение этанола и агрессивные взаимодействия;

Г – после ТКАМПМ, NC – неокортекс, Hip – гиппокамп, Hpt – гипоталамус, Amigd – миндалевидный комплекс;

,,, – биопотенциалы мозга;

– положительные, отрицательные связи Исследования активности опытных жи новая кора – гиппокамп, гиппокамп – мин вотных в тесте «Open field» после агрессив далевидный комплекс (см. рис. 1).

ных действий показали усиление ориенти Выявлено смещение акцентов в структу ровочно исследовательского поведения, по ре корреляционных плеяд с гипоталамуса, вышение двигательной активности и реак ведущего при алкоголизации, на миндале ций отрицательного груминга (который за видный комплекс. Заслуживает внимания частую имел навязчивый характер), сниже снижение влияния новой коры и гипота ние латентного периода первого пересе ламуса и усиление взаимодействий между чения квадрата на площадке «открытого по эмоциогенными структурами гипоталаму ля» (см. рис. 2). Значения частоты реакции са, гиппокампа и миндалевидного комплек самостимуляции положительных эмоцио са. Прослеживается формирование фокусов генных зон заднего вентролатерального ги взаимосвязей в диапазоне бета частот в поталамуса у крыс после реакций агрессии гипоталамусе и миндалевидном комплексе, защиты и агрессии нападения составляли тета – в гиппокампе (рис. 3).

(245,5±20,1) нажатий за 5 мин, то есть ги Таким образом, данные электрофизио поталамические механизмы системы поло логических и математических исследова жительного эмоционального подкрепления ний свидетельствуют о перестройке инте направлены на сдерживание агрессии, гративной деятельности мозга у крыс с фо сохранение генетически детерминирован бией в условиях изменений микросоциума ного эмоционального гомеостаза [2]. и алкоголизации с формированием новых Агрессивные воздействия вызывали у форм защитного поведения агрессивной на алкоголизированных крыс с фобией напря правленности. Следует подчеркнуть, что за жённое функционирование неокортекса и пуск агрессивных реакций обеспечивается ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА не только модификацией микросоциума, но ных эмоциогенных зон заднего вентролате и изменением в оценочном (эмоциональ рального гипоталамуса, привела к прост ном) аппарате, что вызвано алкогольной ранственно временным перестройкам ней интоксикацией и реальной целенаправлен родинамики мозга с восстановлением про ной угрозой повреждения, исходящей от аг цессов электрогенеза мозга. Отмечается воз рессора. никновение положительных и особенно рез Сеансы ТКАМПМ у этих крыс (3 я груп кое усиление обратных корреляционных па) вызывали снижение уровня агрессии, отношений с формированием функциональ усиление эмоций положительного знака. ных фокусов альфа диапазона в миндале Крысы во время сеанса находились в расслаб видном комплексе, дельта диапазона в гип ленном, комфортном состоянии, иногда покампе и бета диапазона в новой коре. Вы засыпали. После сеансов ТКАМПМ животн явлено активное включение гипоталамуса ые характеризовались умеренной двига в структуру корреляционных плеяд с вос тельной активностью, высоким уровнем становлением взаимосвязей с миндалевид ориентировочно исследовательского поведе ным комплексом. Интеграция пространст ния;

коэффициент активности (по данным венно временных отношений между струк теста «Open field») достигал 11,0 (см. рис. 2). турами лимбической системы мозга и новой На ЭЭГ происходило разбиение эпох ги коры вследствие активации механизмов по персинхронной активности участками де ложительного эмоционального подкрепле синхронизации. В гиппокампе, а иногда в ния, очевидно, является церебральным ме гипоталамусе отмечались вспышки высоко ханизмом сдерживания агрессивных прояв амплитудных одиночных и групп альфа и лений в поведении крыс.

тета пароксизмов (см. рис. 1), которые отра Полученные данные свидетельствуют о жают активацию адаптивных механизмов том, что у наследственно предрасположен пароксизмального мозга и являются элект ных к фобии крыс влияние таких факторов, рографическим проявлением перехода де как алкоголизация и изменения микросо ятельности мозга на новый уровень функ циума, вызывает трансформацию фобии в ционирования [12]. агрессивное поведение, которое можно ку Выявлена перестройка под влиянием пировать воздействиями, направленными на ТКАМПМ структуры корреляционных плеяд активацию мозга, в частности системы по с формированием доминирующей системы зитивного эмоционального подкрепления.

взаимодействий в диапазоне альфа и бета Выводы частот между неокортексом, гиппокампом и 1. Систематическое влияние комплекса миндалевидным комплексом. Сформирован таких социально биологических факторов, ный новый паттерн взаимоотношений меж как алкоголизация и изменения микросо ду структурами мозга свидетельствует о по циума путём включения агрессивного самца вышении общей возбудимости мозга вслед в группу, приводит у животных, предраспо ствие активации под влиянием ТКАМПМ ложенных к фобии, к формированию инди активирующих механизмов неспецифиче видуального опыта агрессии: реакций защи ских таламокортикальной и ретикулокор ты и нападения. Пусковую роль в трансфор тикальной систем мозга (рис. 3). Формиро мации эмоциональных реакций выполняют вание сильных корреляционных отношений гиппокамп и миндалевидный комплекс.

в диапазоне тета частот между миндале 2. Применение транскраниальной анод видным комплексом и гиппокампом, по ви ной микрополяризации мозга оказывает мо димому, можно рассматривать как отра дулирующее влияние на механизмы регу жение механизмов активации следовых про ляции общей и эмоциональной активности цессов, направленных на закрепление эн мозга (активирует неспецифические меха грамм нового функционального состояния. низмы обеспечения функционального сос Активация системы позитивного эмо тояния мозга), избирательно влияет на эмо ционального подкрепления, которую осу циогенную лимбико неокортикальную сис ществляли после сеансов ТКАМПМ по тему с активацией положительно эмоцио средством самостимуляции положитель генного вентролатерального гипоталамуса.

Список литературы 1. Анохин П. К. Узловые вопросы теории функциональных систем / П. К. Анохин. – М. :

Наука, 1980.

ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА 2. Симонов П. В. Эмоциональный мозг / П. В. Симонов. – М. : Наука, 1986. – 215 с.

3. Воробьева Т. М. Роль эмоциогенных структур мозга в механизмах формирования фобий и их возможной трансформации в агрессивное поведение у крыс / Т. М. Воробьева, Д. А. Бевзюк, Н. А. Кириллова // Психическое здоровье. – М., 2009. – № 4. – С. 46–51.

4. Мішиєв В. Д. Специфічні фобії: типологія, клініка / В. Д. Мішиєв, А. І. Герасименко // Журн. психиатр. и мед. психологии. – 2009. – № 1 (21). – С. 126–132.

5. Табачников С. И. Фобии: клиника, диагностика, лечение, профилактика / С. И. Табачни ков, В. С. Первый. – Днепропетровск : АРТ ПРЕСС, 2005. – 348 с.

6. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологиче ских веществ. – М. : Ремедиум, 2000. – 360 с.

7. Многопараметровый метод комплексной оценки тревожно фобических состояний у крыс / В. И. Родина, Н. А. Крупина, Г. Н. Крыжановский, Н. Б. Окнина // Журн. высш. нервн. деятель ности. – 1993. – Т. 43, № 5. – С. 1006–1017.

8. Воробьева Т. М. Нейрофизиологические механизмы транскраниальной микрополяризации в норме и при моделировании эмоциональных нарушений / Т. М. Воробьева, В. М. Шеверева // Физиология человека. – 1990. – Т. 16, № 3. – С. 40–42.

9. Берченко О. Г. Экспериментальная модель социофобии, лимбико неокортикальные меха низмы формирования / О. Г. Берченко // Психическое здоровье. – М., 2009. – № 4. – С. 42–45.

10. Буреш Я. Электрофизиологические методы исследования / Я. Буреш, М. Петрань, И. Захар. – М. : Изд во иностр. лит ры, 1962. – 466 с.

11. Оlds J. Positive reinforcement produced by electrical stimulation of septal area and other re gions of rat brain / J. Olds, P. Milner // J. Comp. Physiology and Psychology. – 1954. – № 47. – P. 41.

12. Марута Н. А. Системно биологический подход к проблеме пароксизмальных состояний при невротических расстройствах / Н. А. Марута, Т. М. Воробьева, С. П. Колядко // Укр. вісник психоневрології. – 2000. – Т. 8, вип. 3. – С. 64–67.

О.Г. Берченко, Н.О. Кіріллова НЕЙРОФІЗІОЛОГІЧНІ МЕХАНІЗМИ ТРАНСФОРМАЦІЇ ФОБІЙ В АГРЕСИВНУ ПОВЕДІНКУ У ЩУРІВ ЗА УМОВ АЛКОГОЛІЗАЦІЇ ТА МОДИФІКАЦІЙ МІКРОСОЦІУМУ В експериментах на щурах, схильних до фобії, показана ініціююча роль соціально біологічних факторів: алкоголізації та змін мікросоціуму, в гіпоталамо амігдалярних і гіпокампальних меха нізмах трансформації фобій в агресію. Експериментально обґрунтовано застосування методу транскраніальної анодної мікрополяризації мозку для купірування агресії.

Ключові слова: фобії, агресії, лімбіко неокортикальні механізми, алкоголізація, мікросоціум.

O.G. Berchenko, N.A. Kirillova NEUROPHYSIOLOGICAL MECHANISMS OF PHOBIA TRANSFORMATIONS INTO AGGRESSION BEHAVIOR IN RATS IN THE CONDITIONS OF ALCOHOLIZATION AND MICROSOCIALS MODIFICATION In experiments on rats, with heridarity to phobias, it was shown the initiation role of social and biological factors: alcoholization and changes of micro social surroundings, in the hypothalamo amygdale and hippocampus mechanisms of transformation of phobias into aggression. It was dedi cated by experimentally that the using of the method of transcranial anodes micropolarization of brain for treating of aggression.

Key words: phobias, aggressions, limbic neocortical mechanisms, alcoholization, microsocials.

Поступила 09.03. ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА І КЛІНІЧНА МЕДИЦИНА. 2011. № 2 (51) ТЕОРЕТИЧНА І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА УДК 612.13:612.461.23.01:612.014. С.С. Островська Дніпропетровська державна медична академія ВПЛИВ ІОНІЗУЮЧОГО ВИПРОМІНЮВАННЯ І СОЛЕЙ ВАЖКИХ МЕТАЛІВ НА ВИЖИВАННЯ І СТАН НИРОК ЩУРІВ ПРИ МОДЕЛЮВАННІ НИРКОВОЇ ІШЕМІЇ На щурах самцях моделювали ниркову ішемію шляхом стиснення лівої нирки. Вив чали виживання тварин і стан нирок за допомогою морфологічних методів без впливу радіації, після опромінення в різних дозах, з ішемізацією нирки і опроміненням в дозі 0,5 Гр, а також при навантаженні тварин солями кадмію або свинцю окремо та при застосуванні дози 0,5 Гр з ішемізованою ниркою. Показано, що загибель щурів і альтеративні процеси в нирці змінюються в залежності від дози опромінення і тер мінів спостереження.

Ключові слова: нирки, ішемія, іонізуюче випромінювання, кадмій, свинець, сполучені ефекти.



Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 7 |
 





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.