авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:     | 1 |   ...   | 6 | 7 || 9 |

«Министерство здравоохранения Российской Федерации Министерство промышленности и торговли Российской Федерации Правительство Новосибирской области ...»

-- [ Страница 8 ] --

Прогностическая ценность применяемого теста зависит от чув ствительности и специфичности метода диагностики, а также от рас пространенности заболевания в исследуемой популяции. Выбор мар керов инфекционных заболеваний определяется, в первую очередь, их специфичностью для данного заболевания. Важны также и такие характеристики, как время появления в диагностически значимых концентрациях в крови и время, в течение которого их концентрация сохраняется повышенной.

В настоящее время для оценки иммунного статуса при инфекци онных заболеваниях широко используются методы серологической диагностики. Применяемые методы позволяют оценить уровень про гностических маркеров гуморального иммунитета, т.е. уровень им муноглобулинов классов М, G, A на различных стадиях развития ин фекции, либо определять непосредственно возбудитель [1].

Показано, что регистрацию результатов иммуноанализа можно осуществлять несколькими методами: по интенсивности флюорес ценции с использованием различных флюоресцентных меток, по интенсивности хемилюминесценции, с использованием конъюгатов проявляющих антител с пероксидазой после взаимодействия с хеми люминесцентными субстратами, а также с использованием MALDI масс-спектрометрии. Чувствительность инструментальных методов анализа зависит от типа применяемой метки (хемилюминесцентная – 10-19 М, радиоизотопная индикации – 10-18 М, флюоресцентная – 10- М, ферментативная – 10-9 – 10-12 М) и от способа детекции. Клиниче ские тесты, используемые в клинико-диагностических лабораториях, разнообразны и зависят от определяемого аналита. Обычно для любо го клинического теста существует несколько альтернативных вариан тов. Различная доступность, стоимость, безопасность являются фак торами, которые ограничивают широкое применение тех или иных методов обследования. Для каждого заболевания существует «золо той стандарт диагностики», с помощью которого можно установить наличие или отсутствие данного заболевания. Референс-методы не являются 100 % точными. С развитием знаний и технологий эталон ные стандарты могут быть заменены другими. При сравнении ново го, более точного метода со старым, стандартным будут выявляться дополнительные позитивные и негативные результаты.

Технология электрохемилюминесценции в лабораторных исследо ваниях (биосенсоры). В последние годы широкое применение нашли новые методы иммунного анализа, связанные с неизотопной инди кацией, автоматический или полуавтоматический анализ, позволяю щий измерять пикомольные (10-12) и атомолярные (10-18) количества исследуемого аналита. Метод электрохемилюминесценции (ЭХЛ) от носится к высокочувствительным и высокотехнологичным подходам в медицинских исследованиях. В основе теста ЭХЛ лежат три прин ципа: принцип конкурентности при исследовании малых количеств определяемого соединения, принцип сэндвича для выявления боль шинства анализируемых соединений и прицип мостикообразования для детекции антител в исследуемом образце. Отличительной особен ностью передовых технологий на основе ЭХЛ является, во-первых, использование стабильной неизотопной детекции, связанной с жид кими компонентами набора;

во-вторых, повышение чувствительно сти анализа в комбинации с коротким временем инкубации и высо ким качеством анализа;

в-третьих, измерение нескольких параметров с минимальными разведениями образцов и подготовкой их к анализу, и, наконец, использование стандартной платы при проведении анали за. Метод хемилюминесценции характеризуется очень высокой чув ствительностью и широким динамическим диапазоном.

Применение ультрачувствительных инструментальных приборов для измерения одиночных молекул вносит фундаментальный вклад в развитие новых путей характеристики физических и химических свойств биологических макромолекул. Одним из направлений яв ляется использование магнитных микрочастиц и полимерных син тетических магнитных материалов [2]. Магнитные микрочастицы позволили увеличить специфичность и чувствительность иммуно химического анализа белков, вирусов и бактерий. Использование магнитных частиц позволяет проводить скрининг и измерение аффи нитета многочисленных разных лиганд-рецепторных пар с высоким разрешением в одном эксперименте.

Наночастицы с флуоресцентной меткой показали высокую чув ствительность при проведении флуоресцентного иммуноанализа. Ин тенсивность флуоресценции наночастиц с флуоресцентной меткой в 1,8х105 сильнее, чем несвязанных хелатов при равной молярной кон центрации в растворе. Время флюоресценции хелатных наночастиц составляет 384 мкс, что достаточно для детекции флюоресцентного сигнала. Чувствительность флуоресцентных тестов с использовани ем наночастиц превышает на три порядка стандартные методы ИФА, содержащие в качестве метки пероксидазу. Иммунофоры, применяе мые в качестве меток, на наночастицах Ag/SiO2, Au/ SiO2, CdS/ SiO2, 2,2/-дипиридил-Ru2+-хелат/ SiO2, хелаты Eu3+- ковалентно связаны с атомами силикагеля наночастиц. Полученные модифицированные наночастицы с флуоресцентной меткой стабильны при хранении, промывке и при проведении модификации поверхности (при введе нии функциональных групп) и получении биоконъюгатов.

Развитие рекомбинантных технологий, привело к тому, что в на стоящее время можно получить штамм-продуцент практически лю бого белка. Стало возможным получение не только аналогов природ ных белков, но и белков с самыми разными заданными свойствами.

Создание штаммов-продуцентов позволило решить проблему на дежных и стабильных источников исходного сырья для наработки больших количеств изучаемых белков. Решение этих вопросов с одной стороны открыло новые возможности получения множества белков в препаративных количествах, с другой – способствовало возникновению и развитию новой ветви молекулярной биологии – протеомики. Число белков в человеческом организме оценивается свыше 300000. Масштабы в протеомике означают, что исследовате ли нуждаются в технологиях, которые способны разрешить и иден тифицировать белки гораздо быстрее, чем позволяет сочетание со временных методов, например, исследования на основе тандемной масс-спектрометрии. Для распознавания лишь небольшой части белков существуют антитела или других специальные молекулы.

На хорошем 2D геле можно различить не более 500-2000 различных белков (точек на геле).

Технология -IFN– анализа и -IFN– ELISPOT-анализа в диагно стике туберкулеза легких и ВИЧ-ассоциированного туберкулеза с применением рекомбинантных белков M. tuberculosis в - IFN –ана лизе определили перспективы внедрения новых тестов в диагности ке ряда инфекционных заболеваний [3]. Лабораторная диагностика туберкулеза включает в себя методы выявления инфекционной этио логии заболевания и методы определения патологических измене ний в органах, вызванных инфекционным процессом. Молекулярно биологические методы позволяют достаточно быстро с высокой специфичностью и чувствительностью проводить выявление и ти пирование микобактерий в различных клинических образцах. Чув ствительность технологии ПЦР составляет 10-100 клеток на пробу.

Однако существенным недостатком ПЦР-анализа является невоз можность оценить активность туберкулезного процесса. Раннее выявление легочного туберкулеза с надлежащей изоляцией и лече нием больных – весьма эффективный и пока единственный способ предупреждения заболевания. В мире диагностика туберкулеза ха рактеризуется постоянной тенденцией к росту и, например, в 2006 г.

стоимость проводимых диагностических исследований составила 900 млн. US$. При этом диагностика латентного туберкулеза среди здорового контингента в индустриально развитых странах составила 240 млн. US$. Скрининг туберкулезной инфекции для глобального контроля распространения различных форм туберкулезной инфек ции оценивается более чем в 30 млн. тестов, проводимых каждый год в мире. Выявление и лечение активного туберкулеза является ключевой задачей для обеспечения глобального контроля над забо леванием. Следует иметь в виду, что вновь инфицированный чело век может заболеть туберкулезом через несколько недель или ме сяцев, но у большей части инфицированных людей заболевание не развивается. Латентная туберкулезная инфекция – неконтагиозное бессимптомное состояние, и туберкулез может развиться лишь спу стя месяцы или годы. Следовательно, для организации адекватно го контроля над распространением туберкулеза, в первую очередь необходимо своевременно выявлять и лечить инфицированных, то есть делать это еще до того, как они станут заразными вследствие развития активного туберкулеза.

До настоящего времени кожный тест с туберкулином был и оста ется единственным методом диагностики латентного туберкулеза.

Этот тест известен с конца XIX в. Он позволяет оценить клеточный иммунитет по реакции гиперчувствительности замедленного типа в ответ на воздействие специфических белков возбудителя – тубер кулина (PPD). Туберкулин (PPD) содержит в своем составе более 200 антигенов, которые широко распространены среди микобакте рий. В результате положительный отклик на введение туберкулина наблюдается у лиц, в результате контакта с нетуберкулезными ми кобактериями или у вакцинированных вакциной BCG. За этим часто следует неоправданное назначение лечения. Кроме того, туберкули новый тест часто трудно интерпретировать из-за ошибок при приме нении туберкулина, и субъективного считывания результатов теста.

Тем не менее, основным недостатком кожного теста является его низ кая чувствительность при выявлении лиц с высоким риском развития активного туберкулеза: пациенты с иммуносупрессией (особенно с дефицитом клеточного иммунитета) и дети.

В последнее время были разработаны иммунодиагностические методы диагностики групп риска, основанные на количественной оценке клеточного иммунного ответа in vitro, которые лишены не достатков кожного теста и превосходят его по специфичности и чувствительности. Метод предназначен для оценки клеточного им мунного ответа на стимуляцию пептидными антигенами – микобак териальными белками. Для этого используют специфические анти гены M. tuberculosis: пептиды, ESAT-6, CFP10 и TB7.7 (p4) [4]. Эти антигены присутствуют у M. tuberculosis, но при этом отсутствуют у всех штаммов BCG и большинства нетуберкулезных микобакте рий. В крови людей, инфицированных микобактериями туберкулеза, обычно присутствуют лимфоциты, распознающие эти и другие ми кобактериальные антигены. Этот процесс распознавания включает образование и секрецию цитокина, интерферона-гамма (IFN-). Тест основан на количественном определении IFN-. Новые тесты имеет особую ценность для пациентов, получающих иммуносупрессивную терапию, пациентов с иммуносупрессией (хроническая почечная не достаточность, сахарный диабет, онкологические заболевания и т.д.), пациентов с коинфекцией ВИЧ и M. tuberculosis. Методология при менения ELISPOT-анализа позволяет детектировать и анализировать индивидуальные клетки (Lalvani A. et al., 1998), секретирующие бел ки in vitro, использована для характеристики хламидийной инфек ции, токсоплазмоза, ВИЧ, герпесной инвазии, а также ряда других болезней вирусной и бактериальной этиологии. Следует также иметь в виду, что новые тесты на туберкулез является непрямым методом выявления инфекции M. tuberculosis (включая заболевание) и предна значены для использования в совокупности с оценкой риска наличия инфекции, флюорографией и другими клиническими и лабораторны ми исследованиями.

Для оценки функционального состояния Т-клеток при микобакте риальных инфекциях используется продукция цитокинов и их уча стие в определенных типах иммунного ответа (Th1 или Th2). Акти вация клеток цельной крови позволяет определить такие параметры иммунного ответа, как цитокиновый статус, исследовать гетероген ные клеточные популяции, характеризовать фенотипические особен ности цитокин-продуцирующих клеток. Быстрый путь раннего выяв ления инфекции в крови с использованием рекомбинантных белков является альтернативным кожному тесту. Выявление уровня -IFN коррелирует со стадией и степенью туберкулезной инфекции, уров нем иммунного ответа и вероятностью прогрессирования активной формы туберкулеза. Приведенные результаты представляют собой иммунологические тесты выявления медиаторов иммунного ответа к M. tuberculosis с применением видоспецифических антигенов.

Молекулы главного комплекса гистосовместимости (МНС-моле кулы) являются клетками поверхностных гликопротеинов, которые играют активную роль в иммунных реакциях. Основной физиоло гической функцией МНС-молекул, расположенных на поверхности мембраны, является связывание пептидных фрагментов белковых молекул и представление их Т-лимфоцитам. МНС молекулы коди руются тремя классами генов. МНС-I и МНС-II классы генов непо средственно ассоциированы с иммунной реактивностью. Изучение антиген-специфических Т-клеток легко определяется с использовани ем тетрамерных пептид-МНС молекул, связанных со специфичным Т-клеточным рецептором для пептид-МНС комплекса. Увеличение авидности тетрамерных молекул позволяет с высокой чувствитель ностью и специфичностью идентифицировать популяцию антиген специфичных Т-клеток.

Высокая полиморфная природа МНС имеет функциональные по следствия и эволюционную селекцию и отражает критическую роль МНС-молекул в иммунном ответе. Наконец, еще одним из описанных свойств мультимерных комплексов, которое лежит в основе лечебной терапии и которые уже начали использовать в лечении вирусных ге патитов и ряда других инфекционных заболеваний, является способ доставки лекарственных препаратов в места воспаления (инфекции).

При этом использовалась способность комплексов повышать концен трацию антибиотиков в крови, облегчать их проникновение в ткани и тем самым повышать эффективность лечения. В конце 90-х гг. было проведено большое количество клинических исследований, в кото рых чаще всего сравнивалась эффективность методов иммунологи ческого мониторинга. Большинство исследований продемонстриро вало равную эффективность новых подходов.

Различие в представленных технологиях (ИФА и функциональный анализ) заключается в использовании в новом качестве стандартных белковых антигенов (природных, рекомбинантных или синтетиче ских пептидов), а также в спектре выявляемых маркеров. Новые те сты обладают высокой специфичностью и чувствительностью (более 90 %) и сравнимы с результатами молекулярно-биологических мето дов.

Специфическое иммунохимическое взаимодействие антиген антитело лежит в основе создания различных диагностических си стем. Использование методов инструментального контроля, в частно сти, атомно-силовой микроскопии (АСМ) открывает исключительные возможности в данной области, поскольку метод позволяет за относи тельно небольшое время – минуты – получить изображение поверх ности образца с разрешением порядка нескольких нанометров. Такие возможности АСМ позволяют развивать высокоэффективные методы детекции комплексов антиген-антитело [7]. К преимуществам АСМ также относится прямая визуализация объектов в режиме реального времени и отсутствие необходимости вводить метки в образец или фиксировать его. Метод АСМ использовался при исследовании ток синов в продуктах питания, а также некоторых вирусных инфекций.

Метод АСМ позволяет отчетливо визуализировать структурные дета ли белковых молекул с латеральным разрешением 7-8 нм.

Внедрение новых технологий диагностики, профилактики и ле чения заболеваний позволяет улучшить систему практического здра воохранения в стране. При этом особая роль принадлежит биотех нологии [5, 6]. Если мировой рынок биотехнологической продукции оценивается в 160 млрд. долл. США, то объем российского рын ка – 100 – 150 млрд. руб. (около 2.5 % от мирового). При этом объ ем производства биотехнологических продуктов в России – не более 15 млрд. руб. (менее 0.3 % от мирового). Для сравнения: доля США оценивается в 42 %, ЕС – 22 %, Китая – 10 %, Индии – 2 %. В состав биотехнологии входят генная, клеточная и экологическая инженерии.

Поскольку биотехнология используется в различных отраслях про мышленности и затрагивает многие сферы жизни человека, в мире принята следующая «цветовая» классификация биотехнологии:

«красная» биотехнология – биотехнология, связанная с обеспе чением здоровья человека и потенциальной коррекцией его генома, а также с производством биофармацевтических препаратов (протеи нов, ферментов, антител);

«зеленая» биотехнология – направлена на разработку и созда ние генетически модифицированных растений, устойчивых к биотическим и абиотическим стрессам, определяет современные методы ведения сельского хозяйства.

Биолюминесцентные белки, также как и флуоресцентные белки, широко используются в клеточной биологии и медицинских исследо ваниях и очень часто имеют существенные преимущества перед флуо ресцентными белками, так как не требуют внешних источников света.

В случае биолюминесцентных белков свет генерируется в результа те ферментативной реакции, протекающей непосредственно внутри клетки или целого организма. В настоящее время биолюминесцент ные белки (люциферазы) широко применяются в качестве репортеров в самых различных приложениях. Методы оценки белок-белковых взаимодействий для количественных измерений реактивности сыво роточных антител с антигенами на основе реакции иммунопреципита ции обладают более высокой специфичностью и чувствительностью, в сравнении с традиционными спектрофотометрическими и флуо ресцентными. Достоинством люциферазы в качестве репортерной метки является высокий квантовый выход, использование одноком понентного субстрата, широкий диапазон оптимальных условий. Это делает привлекательным использование ее в различных биолюминес центных тестах, включая протеомный анализ. Эффективность новых подходов связана с созданием функционально-активных конъюгатов на ее основе. Спектр инновационных технологий в медицине весьма разнообразен. Новые методологии, применяемые в диагностике ин фекционных заболеваний, могут эффективно дополнять друг друга, развивая, таким образом, систему доказательной медицины в диагно стике инфекционных заболеваний человека [8].

Список литературы:

1. P.D. Burbelo, K.H. Ching, E.R. Bush, B.L. Han, M.J. Iadarola Antibody proling technologies for studying humoral responses to infectious agents // Ex pert Review of Vaccines. Jun 2010. V. 9. No. 6. P. 567-578.

2. I.H. Khan, S. Mendoza, J. Yee, M. Deane, K. Venkateswaran, S.S. Zhou, P.A. Barry, N.W. Lerche, P.A. Luciw Simultaneous Detection of Antibodies to Six Nonhuman-Primate Viruses by Multiplex Microbead Immunoassay // Clini cal and Vaccine Immunology. January 2006. V. 13. No. 1. P. 45-52.

3. M. Plebanski, M. Katsara, Kuo-ching Sheng, S.D. Xiang, V. Apostolopou los Methods to measure T-cell responses // Expert Review of Vaccines. Jun 2010.

V. 9. No. 6. P 595-600.

4. P.R. Jungblut, U.E. Schaible et. al.: Mycobacterium tuberculosis operon en coding ESAT-6 and a novel low-molecular-mass culture ltrate protein (CFP10).

// Mol Microbiol. 1999. V. 33(6). P. 1103-1117.

5. Проект Стратегии развития биотехнологической отрасли промышлен ности в Российской Федерации до 2020 года. Москва. 2009. с. 85.

6. A.S. Mustafa: Biotechnology in the development of new vaccines and diag nostic reagents against tuberculosis. 2001. Curr Pharm Biotechnol. V. 2. P. 157 173.

7. В.А. Яковлева, А.А. Маныкин, Ф.В. Лисицин, Т.А. Конышева Исполь зование атомно–силовой микроскопии для исследования цитоморфологи ческих признаков папилломавирусной инфекции // Вопросы вирусологии.

2009. № 4.

8. Piia von Lode, Jaana Rosenberg, Kim Pettersson, and Harri Takalo. A Euro pium Chelate for Quantitative Point-of-Care Immunoassays Using Direct Surface Measurement // Anal. Chem.2003. V. 75. P. 3193-3201.

ОРТОПОКСВИРУСНЫЙ БЕЛОК, СВЯЗЫВАЮЩИЙ ФАКТОР НЕКРОЗА ОПУХОЛЕЙ, ЯВЛЯЕТСЯ ПЕРСПЕКТИВНЫМ ЛЕКАРСТВЕННЫМ СРЕДСТВОМ С.Н. Щелкунов, И.П. Гилева, Т.В. Трегубчак, Д.Д. Цырендоржиев, Е.А. Вязовая, Л.Б. Топоркова, А.А. Басова, Т.С. Непомнящих, С.В. Сенников, И.А. Орловская ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор», Кольцово, Новосибирская область, Россия;

ФГБУ НИИ клинической иммунологии СО РАМН, Новосибирск, Россия Аннотация. Рекомбинантный двухдоменный белок вируса натуральной оспы VARV-CrmB, связывающий TNF и хемокины, а также его укороченный вариант, свя зывающий только TNF, отменяют биологические эффекты TNF в различных им мунологических тестах in vitro и в экспериментальных моделях патологических процессов. TNF-связывающий белок ортопоксвирусов относится к биологически активным веществам, перспективным для разработки фармацевтических пре паратов для лечения воспалительных/аутоиммунных заболеваний, в патогенезе которых ведущую роль играет TNF (септический шок, ревматоидный артрит и др.).

Продуцент данного вирусного белка может быть использован в биотехнологии и фармацевтической промышленности.

TNF-BINDING ORTHOPOXVIRAL PROTEIN IS A PROSPECTIVE PHARMACEUTICAL DRUG S.N. Shchelkunov, I.P. Gileva, T.V. Tregubchak, D.D. Tsyrendorzhiev, E.A. Vyazovaya, L.B. Toporkova, A.A. Basova, T.S. Nepomnyashchikh, S.V. Sennikov, I.A. Orlovskaya State Research Center of Virology and Biotechnology VECTOR, Koltsovo, Novosibirsk region, Russia;

Institute of Clinical Immunology, Siberian Branch of the Russian Academy of Medical Sciences, Novosibirsk, Russia Abstract. Recombinant bidomain variola virus protein VARV-CrmB binding TNF and chemokines, and its shortened variant binding only TNF, cancel biological effects of TNF in several in vitro immunologic tests and experimental models of pathological processes. Orthopoxviral TNF binding protein is biologically active substance prospective for pharmaceutical drug development which is important for cure of inammatory/autoimmune diseases caused by high level of TNF (septic shock, rheumatoid arthritis, etc.). Producer of this viral protein can be used in biotechnology and pharmaceuticals industry.

В последнее десятилетие в научной литературе опубликовано много новых данных о создании и использовании в практической медицине различных препаратов, способных эффективно ингиби ровать синтез и процессинг цитокинов, играющих ключевую роль в патогенезе многих социально значимых заболеваний. В качестве действующего начала в этих препаратах чаще всего используются моноклональные антитела или рекомбинантные химерные белки, со стоящие из рецепторных и иммуноглобулиновых доменов. В резуль тате поисковых работ нами был выделен и охарактеризован новый тип цитокинового ингибитора, блокирующего действие фактора не кроза опухолей (TNF) – TNF-связывающий белок вируса натураль ной оспы (VARV-CrmB). Данный белок, синтезированный в культуре клеток насекомых в бакуловирусной экспрессионной системе, имеет размер 47 кДа [2]/ Влияние рекомбинантного VARV-CrmB на биологические эф фекты TNF исследовали в различных иммунологических тестах in vitro и в экспериментальных моделях патологических процессов. Из вестно, что TNF стимулирует экспрессию и продукцию различными клетками таких важных иммунорегуляторных цитокинов как IL-1 и IL-6 [7], в связи с чем была исследована возможность отмены этих биологических эффектов TNF с помощью VARV-CrmB. Установлено, что предварительная соинкубация hTNF и VARV-CrmB в различных концентрациях (100 нг/мл и 10 нг/мл) полностью отменяет эффек ты TNF на продукцию IL-1 и IL-6 в культуре человеческих моно нуклеарных клеток (МНК), концентрации цитокинов снижаются до уровня спонтанной продукции. Белок VARV-CrmB обладает большей по сравнению с полиAbTNF и моноAbTNF TNF-нейтрализующей спо собностью на продукцию IL-1 и IL-6 мононуклеарами. При изучении влияния VARV-CrmB на TNF-индуцированную генерацию активных метаболитов кислорода, отражающую активность окислительно метаболической функции мононуклеарных клеток, установлено, что тестируемый белок отменяет TNF-стимулированный хемилюминес центный ответ человеческих МНК в большей степени (в 4,5 раза), чем специфическое антитело против TNF [6].

Показано, что VARV-CrmB аналогично влияет и на функцио нальную активность мононуклеарных клеток периферической кро ви больных ревматоидным артритом. Установлено, что в результате предварительной совместной инкубации hTNF и белка VARV-CrmB в различных концентрациях (100 нг/мл, 50 нг/мл и 10 нг/мл) в культуре МНК периферической крови наблюдается неполная отмена эффектов TNF на продукцию IL-1 и IL-6, однако эти эффекты проявлялись бо лее выраженно и в меньших концентрациях, чем эффекты полиAbTNF в различных концентрациях (1000 нг/мл, 100 нг/мл, 50нг/мл). При ис следовании содержания цитокинов в кондиционной среде культуры МНК синовиальной жидкости больных ревматоидным артритом был показан нейтрализующий эффект VARV-CrmB на TNF-зависимое усиление продукции цитокинов при более низких концентрациях (100 нг/мл) по сравнению с полиAbTNF (1000 нг/мл). При изучении влияния VARV-CrmB на TNF-индуцированную генерацию активных метаболитов кислорода установлено, что тестируемый белок отме няет TNF-стимулированный хемилюминесцентный ответ МНК си новиальной жидкости больных ревматоидным артритом в большей степени, чем полиAbTNF. Таким образом, белок VARV-CrmB обла дает большей TNF-нейтрализующей способностью по сравнению с полиAbTNF как в тесте по отмене влияния TNF на продукцию цитоки нов, так и на TNF-индуцированную окислительно-метаболическую функцию мононуклеарных клеток периферической крови и синови альной жидкости больных ревматоидным артритом.

При исследовании влияния VARV-CrmB на TNF-опосредованное изменение функционального состояния дендритных клеток в процес се их созревания получены результаты, указывающие на нейтрали зующее действие исследуемого белка на TNF-индуцированное созре вание дендритных клеток.

В модели костномозгового гемопоэза мышей Balb/c показано, что совместное воздействие mTNF и VARV-CrmB приводит к отмене mTNF-индуцированного снижения количества эритроидных колоний и mTNF-индуцированного повышения количества гранулоцитарно макрофагальных колониеобразующих единиц. hTNF обладает способ ностью ингибировать рост как эритроидных, так и гранулоцитарно макрофагальных колоний, образуемых клетками костного мозга (ККМ) человека. Воздействие hTNF совместно с VARV-CrmB дозо зависимым образом восстанавливает hTNF-обусловленное снижение колониеобразующей способности гемопоэтических предшественни ков [4].

Предполагаемые противовоспалительные свойства VARV-CrmB исследовали в экспериментальных моделях септического шока, коллаген-индуцированного артрита (КИА) у мышей, динитрохлор бензол (ДНХБ)-индуцированного контактного дерматита.

Исследования in vivo показали, что VARV-CrmB оказывает вы раженный лечебный эффект на проявления LPS-индуцированного эндотоксического шока у SPF мышей линии Balb/C, достоверно увеличивая процент выживших животных. Введение VARV-CrmB предупреждает появление инфарктов в сердце, снижает степень на рушений кровообращения в сосудах брыжейки, а на более поздних сроках приводит к нормализации микроциркуляции и кровоснабже ния головного мозга и внутренних органов, предупреждает развитие острой почечной недостаточности [1].

На ранних сроках развития КИА воспалительная реакция сопровождается отеком лап с последующей деформацией суставов, которая приводит к нарушениям локомоторной функции мышей за счет деформации суставов и ограничения их подвижности. Все эти изменения связаны с разрастанием соединительной ткани в суставах в результате воспалительной инфильтрации и первичного повреждения хрящевой ткани. В первой серии экспериментов показано, что одно кратное введение мышам VARV-CrmB приводит к снижению сте пени активности артрита (определяемой по ширине правой задней лапы и тибиотарзального сустава), коллагенолитической активности сыворотки и содержания гликозаминогликанов на ранних сроках развития КИА, при этом улучшение клинического состояния имеет более продолжительный характер, чем при инъекции полиAbTNF.

Однако к концу срока наблюдения (21 сутки) во всех сравниваемых группах животных клинические проявления артрита практически не различались. Это указывает на необходимость оптимизации схемы (многократное введение) и доз введения исследуемого препарата с целью достижения максимального лечебного эффекта.

Введение мышам VARV-CrmB приводит к достоверному сниже нию окислительно-метаболической активности лейкоцитов, причем этот эффект является более выраженным по сравнению с эффектом от введения полиAbTNF. Введение VARV-CrmB и полиAbTNF приво дит к снижению численности нейтрофильных гранулоцитов и ГМ предшественников на ранних сроках развития КИА.

Таким образом, выполненные предварительные исследования де монстрируют высокую перспективность использования ортопоксви русного TNF-связывающего белка для терапии ревматоидного артрита.

TNF является главным звеном в запуске воспалительной реакции кожи в ответ на контакт с повреждающим агентом [9]. Введение ан тител к TNF существенно снижает повреждения кожи при дерматите и псориазе [10]. TNF-блокирующие свойства VARV-CrmB проде монстрированы при эпикутанных аппликациях mTNF и VARV-CrmB.

Эпикутанное воздействие VARV-CrmB нормализует повышенную миграционную и окислительно-метаболическую активность лейко цитов mTNF-обработанных мышей [5]. При эпикутанном воздей ствии VARV-CrmB оказывает корригирующие эффекты в отношении TNF-зависимых изменений колониеобразующей активности гемо поэтических предшественников.

Исследование противовоспалительного потенциала VARV-CrmB в модели контактного дерматита продемонстрировало, что апплика тивное воздействие VARV-CrmB достоверно снижает миграцию лей коцитов из кожного лоскута в афферентной фазе контактной реакции на динитрохлорбензол (ДНХБ);

этот эффект сравним с эффектом от внутрикожного введения полиAbTNF. Показано, что аппликативное воздействие VARV-CrmB достоверно снижает показатель «отека уха»

в эфферентной фазе контактной реакции на ДНХБ. Кроме того, при воздействии VARV-CrmB отмечалось более раннее отторжение стру па в очаге воспалительной реакции, что может свидетельствовать об ускорении процесса ранозаживления под влиянием VARV-CrmB. По лученные результаты демонстрируют TNF-блокирующие свойства VARV-CrmB, причем в ряде случаев исследуемый белок проявляет более выраженные эффекты по сравнению с полиAbTNF.

Белок VARV-CrmB (синтезированный в бакуловирусной системе имеет размер 47 кДа) является двухдоменным белком, у которого N-концевой домен обеспечивает связывание с TNF, а С-концевой – взаимодействие с рядом хемокинов [8]. Методами генетической ин женерии нами создан штамм бактерии E.coli, продуцирующий укоро ченный вариант двухдоменного белка VARV-CrmB, представляющего собой только TNF-связывающий домен. Данный белок, обозначен ный как VARV-TNF-BP, имеет размер 17 кДа.

Для того чтобы сравнить способность белков VARV-CrmB и VARV TNF-BP предотвращать взаимодействие TNF с его специфическими рецепторами эукариотических клеток, исследовали их способность нейтрализовать цитотоксическое действие TNF мыши на культуре клеток мышиных фибробластов L929. Полученные данные показали, что удаление хемокин-связывающего домена VARV-CrmB не приво дит к потере способности укороченного варианта VARV-TNF-BP ней трализовать цитотоксическое действие мышиного TNF in vitro.

Для более детального изучения TNF-нейтрализующего потенциа ла рекомбинантного укороченного белка VARV-TNF-BP по сравне нию с полноразмерным белком VARV-CrmB были проведены экспе рименты по изучению влияния указанных белков на эффективность ингибирования TNF-индуцированной окислительно-метаболической активности лейкоцитов крови мышей. Оказалось, что оба изученных рекомбинантных ортопоксвирусных белка после предварительной инкубации с TNF схожим образом дозо-зависимо ингибировали хе милюминесцентный ответ лейкоцитов крови мышей in vitro.

Таким образом, совокупность полученных данных позволяет рас сматривать рекомбинантный вирусный белок VARV-CrmB (47 кДа) и его укороченный вариант (17 кДа) как новые TNF-антагонисты, способные нейтрализовать TNF-индуцированную активацию окис лительно-метаболической, цитокин-продуцирующей и миграци онной функций эффекторных клеток [3]. На основе полученных рекомбинантных ортопоксвирусных TNF-связывающих белков це лесообразно осуществить разработку лекарственных средств для лечения воспалительных/аутоиммунных заболеваний, в патогенезе которых ведущую роль играет гиперпродукция TNF (септический шок, ревматоидный артрит и др.) Продуцент данного белка может быть использован в биотехнологии и фармацевтической промыш ленности.

Список литературы:

1. Гилева И.П., Малкова Е.М., Непомнящих Т.С., Виноградов И.В., Ле бедев Л.Р., Кочнева Г.В., Гражданцева А.А., Рябчикова Е.И., Щелкунов С.Н.

Изучение действия TNF-связывающего белка вируса натуральной оспы на развитие ЛПС-индуцированного эндотоксического шока // Цитокины и вос паление – 2006. – Т. 5. – № 1. – с. 44-48.

2. Гилева И.П., Непомнящих Т.С., Рязанкин И.А., Щелкунов С.Н. Реком бинантный TNF-связывающий белок вируса натуральной оспы как потен циальный TNF-антагонист нового поколения // Биохимия – 2009. – Т. 74. – вып. 12. – с. 1664-1671.

3. Орловская И.А., Цырендоржиев Д.Д., Топоркова Л.Б., Курилин В.В., Лопатникова Ю.А., Вязовая Е.А., Гилева И.П., Щелкунов С.Н., Сенников С.В. Биологические эффекты рекомбинантного белка вируса натуральной оспы, связывающего фактор некроза опухолей // Медицинская иммуноло гия – 2012. – Т. 14. – с. 33-42.

4. Топоркова Л.Б., Петухова А.А., Гилева И.П., Орловская И.А. Реком бинантный белок вируса натуральной оспы нейтрализует эффекты фактора некроза опухолей на модели костномозгового гемопоэза мышей BALB/с // Медицинская иммунология – 2010. – Т. 12. – с. 297-304.

5. Цырендоржиев Д.Д., Сенников С.В., Вязовая Е.А., Гилева И.П., Щел кунов С.Н., Рязанкин И.А., Лебедев Л.Р., Топоркова Л.Б., Курилин В.В., Пе тухова А.А., Орловская И.А. Влияние рекомбинантного TNF-связывающего белка вируса натуральной оспы на миграционную и окислительно метаболическую функцию лейкоцитов крови мышей при эпикутанной ап пликации фактора некроза опухолей // Бюлл. СО РАМН – 2011. – № 3. – с. 73-79.

6. Цырендоржиев Д.Д., Сенников С.В., Орловская И.А., Курилин В.В., Лопатникова Ю.А., Гилева И.П., Щелкунов С.Н., Рязанкин И.А., Басова А.А., Козлов В.А. Влияние TNF-связывающего белка вируса натуральной оспы на TNF-индуцированную окислительно-метаболическую активность и продукцию IL-1 И IL-6 мононуклеарными клетками здоровых доноров // Иммунология – 2011. – № 4. – с. 209-213.

7. Aggarwal B.B., Samanta A., Feldmann M. TNF-/Cytokine reference // N.Y. Academic Press. Edit. J.J. Oppenheim, M. Feldmann – 2001. – p. 413-434.

8. Alejo, A., Ruiz-Arguello, M.B., Ho, Y., Smith, V.P., Saraiva, M., Alcami, A.

A chemokine-binding domain in the tumor necrosis factor receptor from variola (smallpox) virus // Proc. Natl. Acad. Sci. USA – 2006. – V. 103. – p. 5995-6000.

9. Enk A.H., Katz S.I. Early molecular events in the induction phase of con tact sensitivity // Proc. Natl. Acad. Sci. USA – 1992. – V. 89. – p. 1398-1402.

10. Tobin A.M., Kirby B. TNF alpha inhibitors in the treatment of psoriasis and psoriatic arthritis // BioDrugs – 2005. – V. 19. – p. 47–57.

МС-АНАЛИЗ НАСЛЕДСТВЕННЫХ НАРУШЕНИЙ МЕТАБОЛИЗМА АМИНОКИСЛОТ И АЦИЛКАРНИТИНОВ А.А. Черноносов, И.В. Алексеева, М.Ф. Касакин, О.С. Фёдорова ИХБФМ СО РАН, г. Новосибирск Аннотация. Проведено определение концентрации аминокислот и ацилкар нитинов масс-спектрометрическим методом анализа у пациентов, имеющих в анамнезе нарушения физического и умственного развития. Возраст пациентов со ставил 29 дней – 7 лет. Были уточнены границы нормы некоторых параметров, что позволяет более точно диагностировать ряд наследственных заболеваний у детей, проживающих в Западно-Сибирском регионе.

MS-ANALYSIS OF INHERITED DISORDERS OF AMINO ACIDS AND ACYLCARNITINES A.A. Chernonosov, I.V. Alekseeva, M.F. Kasakin, O.S. Fedorova ICBFM SB RAS, Novosibirsk Abstract. The concentration of amino acids and acylcarnitines was determined by mass-spectrometric method of analysis for patients with a history of violations of physical and mental development. Age of patients was 29 days – 7 years. Normal ranges of some parameters were claried, allowing for more accurate diagnosis on a number of diseases in children living in the West Siberian.

Своевременное выявление нарушений метаболизма, преимущест венно наследственных, является важной задачей современной науки и медицины. В странах Европы и США для этих целей применяются высокотехнологичные методы анализа с использованием современ ного оборудования [1]. Как правило, проводится неонатальный скри нинг – анализ крови новорожденных на 40 различных заболеваний методом масс-спектрометрии [2,3] и выборочное генотипирование по полиморфизмам отдельных генов. В России с начала 90-х годов обязательным на всей территории было проведение скрининг-теста на фенилкетонурию и врожденный гипотиреоз (ВГ). С 2006 года к этим двум заболеваниям добавилась ещё диагностика и таких забо леваний, как адреногенитальный синдром, галактоземия и муковис цидоз. Расширение списка определяемых заболеваний невозможно без внедрения инновационных технологий и использования масс спектрометрического метода анализа. К сожалению, на сегодняшний день целый спектр врожденных нарушений метаболизма остается за рамками неонатального скрининга, применяемого в России. Такие заболевания зачастую проявляются не сразу. С возрастом у пациен тов наблюдаются нарушения и отставание в умственном и физиче ском развитии, причем врачи длительное время не могут установить верный диагноз из-за отсутствия необходимых методов анализа. Ис пользование масс-спектрометрии для выявления нарушений метабо лизма аминокислот и ацилкарнитинов у детей от года и старше дает возможность решить данную проблему.

В течение последних трех лет авторы проекта отрабатывали МС методику определения нарушений метаболизма аминокислот, орга нических кислот и ацилкарнитинов, основанную на использовании тандемной масс-спектрометрии.

Материалы и методы. В исследовании принял участие 321 паци ент (г. Новосибирск), имеющий в анамнезе нарушения физического и умственного развития. Возраст пациентов составил 29 дней – 7 лет, средний возраст 3 года, среди них мужского пола – 189 (59 %) чело век, женского – 131 (41 %) человек. Кровь пациентов наносилась на специальную бумагу и высушивалась. В сухих пятнах крови прово дили определение концентрации аминокислот, органических кислот и ацилкарнитинов методом масс-спектрометрии на приборе Agilent 6410 QQQ (Agilent Technologies).

Результаты. Анализ уровня аминокислот и ацилкарнитинов при определении наследственных заболеваний требует учета следующих обстоятельств: во-первых, использование в качестве маркеров забо левания только уровня концентрации аминокислот, жирных и орга нических кислот не всегда позволяет выявлять все случаи опреде ляемого заболевания. Например, при выявлении такого нарушения метаболизма, как фенилкетонурия, определение концентрации толь ко фенилаланина (Phe) дает возможность выявить почти в два раза меньше случаев заболевания, чем определение кроме основного до полнительного параметра – отношения концентрации фенилаланина к концентрации тирозина (Phe:Tyr). Следует отметить, что при по вышенном значении отношения Phe:Tyr концентрация фенилаланина в исследуемой выборке пациентов была в пределах нормы в 35 слу чаях. Во-вторых, необходимо проводить сравнительный и статисти ческий анализ результатов для определения границ нормы каждого параметра, поскольку границы нормы могут отличаться для жителей определенной страны или региона. Для этого нужно накапливать ста тистические данные по каждому заболеванию.

Анализ уровня свободных аминокислот фенилаланина (Phe), ти розина (Tyr), их соотношения (Phe:Tyr).

В случае фенилкетонурии для постановки диагноза используются 2 первичных параметра – концентрации фенилаланина и тирозина и (опосредованно) рассчитываемый параметр – отношение Phe:Tyr [4]. Было обнаружено, что резкое падение концентрации тирозина происходит при концентрации фенилаланина около 100 мкмоль/л и выше. С этих же значений начинается рост отношения Phe:Tyr. Мож но сделать вывод, что превышение данной границы нормы уровня фенилаланина свидетельствует о нарушении метаболизма. Основная часть нарушений начинается при значениях концентрации тирозина ниже 20 мкмоль/л. Такие нарушения вызваны высокой концентра цией фенилаланина. При понижении концентрации тирозина ниже 10 мкмоль/л практически во всех образцах отношение Phe:Tyr было выше 2. Такое повышение отношения Phe:Tyr уже вызвано, в основ ном, низкой концентрацией тирозина. Следовательно, можно сделать вывод, что границы нормы концентрации тирозина находятся в пре делах 20-205 мкмоль/л, а при определении концентрации тирозина ниже 10 мкмоль/л врачам необходимо быть особенно внимательны ми при постановке диагноза пациентам даже при наличии нормаль ных значений концентрации фенилаланина.

Анализ уровня свободной аминокислоты метионина (Met).

Определение гомоцистинурии или гиперметионинемии прово дится по одному параметру – уровню концентрации метионина [5,6].

В этом случае анализ проводится путем перестроения данных и их обработки по функции Гаусса. Обнаружено, что математическое ожидание концентрации метионина составляет 11,3 мкмоль/л, а сиг ма – 7,2 мкмоль/л. Используя правило «три сигма», было найдено, что максимальная концентрация метионина должна быть не выше 32,9 мкмоль/л.

Анализ уровня свободного карнитина (С0).

Определение нарушения транспорта карнитина проводится по одному параметру – уровню концентрации свободного карнитина [7]. Как и в случае Met, анализ проводили путем перестроения дан ных и их обработки по функции Гаусса. Найдено, что математиче ское ожидание концентрации метионина составляет 33,6 мкмоль/л, а сигма – 11,4 мкмоль/л. Используя правило «три сигма», было обна ружено, что минимальная концентрация свободного карнитина мо жет быть 0 мкмоль/л, а максимальная концентрация не превышает 67,7 мкмоль/л.

Отдельно хочется обратить внимание на тот факт, что при нор мальных значениях основных параметров (концентрации аминокис лот, жирных и органических кислот) дополнительные параметры – их соотношения – могут служить как единственными маркерами забо леваний, так и основанием для корректировки границ нормы основ ных параметров. Например, параметрами, характерными при заболе вании цитруллинемией, являются не только уровень концентрации цитруллина (Cit), но и отношение цитруллина к аргинину (Cit:Arg).

В нашем исследовании концентрации цитруллина и аргинина не вы ходили за пределы установленной в методе нормы, однако было об наружено, что отношение Cit:Arg в 45-ти случаях было выше нормы, причем в 18-ти случаях превышало норму более чем в 2 раза. Сравни тельный анализ концентраций цитруллина и аргинина и отношения Cit:Arg при различной сортировке результатов показал следующее.

При сортировке результатов по мере понижения концентрации ци труллина какой-либо зависимости изменения остальных параметров обнаружено не было. При сортировке результатов по мере пониже ния значения отношения Cit:Arg было показано, что рост отношения Cit:Arg зависит от концентрации аргинина. Более показательная кар тина была получена при сортировке результатов по мере увеличения концентрации аргинина. В этом случае наблюдается явная обратная зависимость отношения Cit:Arg от концентрации аргинина. Было установлено, что отношение Cit:Arg превышало норму в основном при концентрации аргинина ниже 2,5 мкмоль/л, что может служить основанием для изменения нижней границы нормы аргинина при вы явлении метаболических нарушений.

Иногда метаболические нарушения выявляются сразу по несколь ким параметрам, например, по уровню отдельных аминокислот и ор ганических кислот. Однако пока количество таких случаев невелико, чтобы делать какие-либо обобщения. Возможно, в будущем по мере накопления экспериментальных результатов и создания обширной базы данных можно будет проводить многопараметрические сравне ния и выявлять новые корреляции.

Работа поддержана грантом программы ФНМ СО РАН № ФНМ 2012-41.

Список литературы:

1. Chace D.H., Kalas T.A., Naylor E.W. The application of tandem mass spec trometry to neonatal screening for inherited disorders of intermediary metabo lism. //Annu. Rev. Genomics Hum. Genet. – 2002. – V. 3. – P. 17–45.

2. Chace D.H., Kalas T.A. A biochemical perspective on the use of tandem mass spectrometry for newborn screening and clinical testing // Clin. Biochem. – 2005. – V. 38. – № 4. – P. 296–309.

3. Millington D.S., Kodo N., Norwood D.L., Roe C.R. Tandem mass-spec trometry: a new method for acylcarnitine proling with potential for neonatal screening for inborn errors of metabolism. //J. Inherit. Metab. Dis. – 1990. V. – 13. P. – 321–324.

4. Chace D.H., Sherwin J.E., Hillman S.L., Lorey F., Cunningham G.C. Use of phenylalanine-to-tyrosine ratio determined by tandem mass spectrometry to improve newborn screening for phenylketonuria of early discharge specimens collected in the rst 24 hours. //Clin. Chem. – 1998. – V. 44. – P. 2405–2409.

5. Chace D.H., Hillman S.L., Millington D.S., Kahler S.G., Adam B.W., Levy H.L. Rapid diagnosis of homocystinuria and other hypermethioninemias from newborns’ blood spots by tandem mass spectrometry.// Clin. Chem. – 1996. – V. 42. – P. 349–355.

6. Mudd S.H. Hypermethioninemias of genetic and non-genetic origin: A review. //Am. J. Med. Genet. C Semin. Med. Genet. – 2011. – V. 157. – P. 3-32.

7. Meyburg J., Schulze A., Kohlmueller D., Linderkamp O., Mayatepek E.

Postnatal changes in neonatal acylcarnitine prole. //Pediatr. Res. – 2001. – V. 49. – P. 125–129.

Раздел VI. ИНФОРМАЦИОННЫЕ ТЕХНОЛОГИИ В МЕДИЦИНЕ РАЗРАБОТКА ПРОГРАММНО-АППАРАТНОГО КОМПЛЕКСА ДЛЯ БОС-ТРЕНИНГА БЕРЕМЕННОЙ ПРИ МОНИТОРИРОВАНИИ СОСТОЯНИЯ СИСТЕМЫ МАТЬ-ПЛОД А.А. Андреева, И.В. Толмачев, О.В. Жилякова Федеральное государственное бюджетное Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и перинатологии Сибирского отделения РАМН, Россия, Томск.

Аннотация. Разработана методика БОС-тренинга для беременных женщин, основная цель которой – управление параметрами вегетативной нервной системы с помощью дыхания. Исследовано влияние тренинга с биологической обратной связью на систему мать-плод. Установлено: изменение функционального состояния матери влияет на уровень симпатической регуляции сердечного ритма плода.

DEVELOPMENT OF SOFTWARE-HARDWARE COMPLEX FOR BIOFEEDBACK TRAINING OF PREGNANT WOMAN DURING MONITORING OF MOTHER-FETUS SYSTEM CONDITION A.A. Andreeva, I.V. Tolmachev, O.V. Jilyakova Scientic-research Institute of obstetrics, gynecology and Perinatology of the Siberian branch of the Russian Academy of medical Sciences, Russia, Tomsk.

Abstract. The technique of biofeedback training for the pregnant women was developed, which had main objective to control of parameters of vegetative nervous system by means of breath. Training inuence with biofeedback on system mother fetus was investigated. It is established: change of a functional condition of mother inuences level of sympathetic regulation of a heart rhythm of a fetus.

Физиологическое течение беременности это интеграция всех функ ций, в которых принимают участие нервные и гуморальные механиз мы регуляции. Одной из важнейших регуляторных систем организма является вегетативная нервная система, которая осуществляет коор динацию адаптационных процессов на системном, органном, ткане вом и клеточном уровнях. Сердечно-сосудистая система, являющаяся универсальным индикатором всех физиологических процессов, четко отражает состояние регуляторных механизмов и адаптивные возмож ности организма. В связи с этим, актуальной задачей современной медицины становится разработка методик коррекции состояния бере менной, основанных на обращении к естественным ресурсам челове ческого организма [6,5]. Одним из таких методов является управле ние с биологической обратной связью или БОС-тренинг. В его основе лежит способность человека к сознательному влиянию на функции организма, в обычных условиях не поддающиеся произвольному кон тролю. Эта методика позволяет получить ряд физиологических эффек тов, способствующих более благоприятному течению беременности и облегчающих роды [3].

Аппаратное исследование состояния вегетативной нервной систе мы является способом объективной оценки состояния здоровья. Пре имущество такого подхода – его универсальность. Любые изменения функционального состояния организма неизбежно сказываются на вегетативной нервной системе. При проведении БОС-тренинга ис пользовался анализ вариабельности сердечного ритма, включающий в себя измерение длительности RR-интервалов и представление ди намических рядов в виде кардиоинтервалограммы (КИГ). Комплекс программно-аппаратный для оценки функционального состояния си стемы «Мать – плацента – плод» представляет собой прибор, кото рый состоит из электронного блока, кардиографических электродов и проводных отведений. Комплекс подключают к IBM-совместимому персональному компьютеру с установленным пакетом программ.


Эффект БОС-тренинга оценивался внутрипроцедурно. Проводи лось сопоставление физиологических показателей в исходном фоно вом состоянии и на различных этапах одной реабилитационной про цедуры. Для этого применялcя:

• Анализ динамики регулируемого физиологического показателя (ЧСС матери), непосредственно используемого в формировании зри тельных и звуковых образов БОС;

• Анализ динамики неуправляемых физиологических показателей матери, характеризующих функциональное состояние различных си стем организма не участвующих в формировании БОС-образов как непосредственно в процессе процедуры, до и после нее: мода (Mo), вариационный размах (dX), амплитуда моды (AMo), индекс напряже ния (ИН), ЧСС [1].

• Анализ динамики физиологических показателей структуры сер дечного ритма плода в процессе тренинга матери: мода (Mo), вариа ционный размах (dX), амплитуда моды (AMo), индекс напряжения (ИН), ЧСС.

Методика проведения сеанса БОС-тренинга, основная цель кото рой состояла в том, чтобы научить беременных женщин навыкам са морегуляции, включала следующие блоки:

запись состояния матери и плода до тренинга;

проверка возможностей организма на изменение величины дыха тельной аритмии (этап 1);

отдых 1: направлен на увеличение ЧСС матери (этап 2);

отдых 2: направлен на уменьшение ЧСС матери (этап 3);

отдых 3: направлен на увеличение дыхательной аритмии матери и выработку навыков диафрагмально-релаксационного типа дыхания (этап 4);

запись состояния матери и плода после сеанса.

Методика реализована в программном комплексе BFB-Pregnancy, с помощью которого осуществлялась фильтрация, запись смешанно го сигнала электрокардиограммы матери и плода, и проводилось раз деление сигнала на материнскую и плодную составляющую. BFB Pregnancy состоит из двух частей:

• Программа БОС-тренинга для регистрации, накопления и об работки сигналов, полученных с абдоминальных электродов (про граммное приложение BFB-Pregnancy).

• База данных (БД) для хранения информации о пациентках.

Структура БД соответствует стандартной истории беременности и включает общие данные, анамнез, диагноз и исследования (про граммное приложение PregnancyDB).

С помощью программно-аппаратного комплекса BFB-Pregnancy на базе НИИ акушерства, гинекологии и перинатологии Сибирско го отделения Российской академии медицинских наук и родильного дома № 4 была обследована группа беременных женщин (10 человек).

Обследование проводилось при комфортных условиях: нормальное освещение и температура в помещении, спокойная обстановка, от сутствие отвлекающих и раздражающих факторов (разговор, шум, присутствие посторонних), в течение 18 минут.

Во время проведения сеансов БОС-тренинга выявлено:

• Статистически достоверные различия в показателях сердечного ритма, как матери (ЧСС, dX) так и плода (dX, AMo, ИН) на разных этапах, что свидетельствует о наличии эффекта БОС-тренинга.

• Положительная корреляция средней силы (R=0,60) между ин дексом напряжения матери и индексом напряжения плода. Свиде тельствует о том, что баланс вегетативной нервной системы матери влияет на уровень симпатической регуляции сердечного ритма плода.

Так при любом колебании состояния матери как в сторону повыше ния, так в сторону понижения, плод реагирует повышением тонуса симпатической системы.

• Положительная корреляция слабой силы (R=0,40) между ЧСС матери и ИН, АМо плода. Это говорит о том, что чем больше на пряжение регуляторных систем матери, тем выше становится тонус симпатической нервной системы плода.

• Значимая отрицательная корреляция слабой силы (R=-0,38) меж ду Мо матери и ИН, АМо плода. Увеличение влияния гуморального канала матери снижает тонус симпатической нервной системы плода.

Различия в ЧСС матери на разных этапах тренинга можно объ яснить тем, что женщины успешно справлялись с поставленной за дачей. На начальном этапе тренинга регистрировалась относительно высокая ЧСС, что может быть связано с состоянием стресса женщин в неизвестной обстановке. Наблюдалось повышение тонуса симпати ческой нервной системы. Контроль ЧСС возможен благодаря дыха тельной аритмии сердечного ритма, сопровождающейся изменением тонуса парасимпатической нервной системы на фазах вдох-выдох.

Вариационный размах (dX) – показатель, преимущественно связан ный с состоянием парасимпатического отдела вегетативной нервной системы, поэтому при правильном выполнении заданий тренинга па раметр dX изменяется на разных этапах сеанса.

В процессе тренинга женщины выполняли упражнения, что яв лялось для них незначительной нагрузкой, плод в процессе выпол нения сеанса реагировал изменением тонуса вегетативной нервной системы, о чем свидетельствует изменение показателя индекса на пряжения, наблюдалась большая вариабельность AMo над dX. Такие изменения характерны при увеличении тонуса симпатической части вегетативной нервной системы.

Заключение:

• Разработана методика, позволяющая оценивать функциональ ное состояние системы мать-плод в процессе тренинга с биологиче ской обратной связью.

• Выявлено, что при изменении уровня регуляции вегетативной системы матери, повышается тонус симпатической нервной системы плода.

Список литературы:

1. Баевский P.M., Прогнозирование состояний на грани нормы и патоло гии. М.: Медицина, 1979. 295 с.

2. Ким Е.В., Адаптивное биоуправление с обратной связью и возмож ности его использования в период беременности и при подготовке к родам // Российский вестник акушера-гинеколога. 2004. №2. 31-34.

3. Пат. на изобретение 2134542 РФ. МПК8 98121424/14. Способ под готовки беременной к родам // А.А. Сметенкин, В.Ю. Ледина. – Опубл.

20.08.1999.

4. Пат.на ПМ 79768 РФ. МПК8 A61B 5/04. Устройство для регистрации сердечного ритма плода с абдоминальных электродов // Я.С. Пеккер, К.С.

Бразовский, И.В. Толмачёв, Е.Ю. Киселёва, Л.А. Агаркова, Н.А. Габитова. – Опубл. 20.01.2009, бюл. № 2.

5. Пиви Б.С., Танец матери и ребенка: Тренинг БОС для беременности, схваток и изгнания // Биологическая обратная связь. 1999. № 4. С. 17-21.

6. Федотчев А. И., Особенности течения сеансов биоуправления с обрат ной связью по ЭЭГ при нормальном и отягощенном протекании беременно сти // Журнал высшей нервной деятельности. 2009. том 59, №4. С. 421- 7. Salvioli B., Fecal incontinence // Biofeedback. 2010. №34. С. 365-369.

УНИВЕРСАЛЬНАЯ МОДЕЛЬ ЛОКАЛЬНЫХ ЭПИДЕМИЙ, ВЫЗЫВАЕМЫХ ВОЗБУДИТЕЛЯМИ ОСОБО ОПАСНЫХ ИНФЕКЦИЙ Л.Ф. Низоленко, А.Г. Бачинский ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор», Кольцово, Новосибирск, Россия Аннотация. В ГНЦ ВБ «Вектор» разработана универсальная модель, описываю щая динамику локальных эпидемий, вызываемых возбудителями особо опасных инфекций, адаптированная к широкому кругу инфекций: натуральная оспа, Си бирская язва, чума, туляремия, геморрагические лихорадки Эбола, Марбург, Ласса, Крым-Конго. В ней задается спектр основных мер противодействия: профилак тическая и экстренная массовая вакцинация, вакцинация групп риска, карантин, поиск, изоляция/наблюдение и лечение больных, контактных и лиц, подозритель ных на заболевание. Интенсивность мер противодействия может ограничивать ся дефицитом ресурсов. Модель реализована в виде компьютерной программы с Web-интерфейсом, доступна по адресу: http://vector-epimod.ru/. Использование модели позволяет оценить ресурсы, требуемые для эффективной борьбы с эпи демиями.

AN UNIVERSAL MODEL OF LOCAL EPIDEMICS CAUSED BY HIGHLY DANGEROUS PATHOGENS L.Ph. Nizolenko, A.G. Bachinsky SRC VB “Vector”. Koltsovo, Novosibirsk, Russia Abstract. An universal model, describing the dynamics of epidemics (outbreaks) caused by highly dangerous pathogens designed in the SRC VB “Vector”. The model is adapted to a wide range of infections: Smallpox, Anthrax (pulmonary), Plague (pulmonary), Tularemia, Ebola, Marburg, Lassa and Crimean-Congo Haemorrhagic Fevers. A range of key countermeasures, including preventive and emergency mass vaccination, quarantine isolation and search / monitoring patients, contact and suspected for the disease persons is applied in the model. On depletion of the corresponding resources, the activities of the countermeasures can be weakened down to complete cessation. The simulation results allow estimating material and human resources required to eliminate the epidemic. The model is implemented as a computer program with a Web-interface and available at: http://vector-epimod.ru.

Математическое моделирование в эпидемиологии часто оказы вается единственной возможностью изучать ситуации, с которыми можно столкнуться в реальной жизни. Если модель верно отража ет развитие эпидемии (например последствия актов биологического терроризма), то можно получить критически важную информацию – оценить масштаб возникшей проблемы, имеющиеся возможности для ее решения и сформировать наиболее выгодные стратегии.

В ГНЦ ВБ «Вектор» разработана универсальная модель, описыва ющая динамику локальных (развивающихся в замкнутой популяции) эпидемий, вызываемых возбудителями особо опасных инфекций.

Основные положения модели базируются на концепции моделирова ния эпидемий, предложенной Б.В. Боевым [1]. В свою очередь, исто ками этой концепции стали работы Барояна и Рвачева [2-4]. Модель реализована в виде компьютерной программы с Web-интерфейсом, доступной по адресу: http://vector-epimod.ru/.

Модель относится к типу SEIRF, по обозначению подклассов, на которые разделяется популяция во время эпидемии:

S (Susceptible) – не инфицированные, чувствительные к инфек ции лица;

E (Exposed) – инфицированные лица в латентной стадии;

I (Infectious) – больные, находящиеся на разных стадиях заболе вания, способные заражать других;


R (Recovered) – поправившиеся;

F (Fatal) – умершие в результате заболевания.

Моделируются следующие процессы:

Формирование «инфекционной напряженности» за счет воз можного внешнего источника инфекции и/или инфекционности не изолированных больных.

Естественное снижение (повышение) активности внешнего ис точника инфекции.

Инфицирование чувствительных лиц в зависимости от инфек ционной напряженности и состояния их иммунитета.

Формирование класса контактных пропорционально числу вновь инфицированных чувствительных лиц.

Инфицирование контактных с повышенной по сравнению с остальными лицами скоростью.

Вероятностный переход из одной стадии развития заболевания в другую.

Выздоравливание. Обычно, поправившиеся люди «выпадают»

из эпидемии, однако, для некоторых инфекций они возвращаются в нее, попадая в класс лиц, обладающих частичным иммунитетом.

Смерть больных, преимущественно в финальной стадии. Смерт ность снижается, если выявленные больные подвергаются лечению.

Предполагается, что такая относительно простая структура, тем не менее, достаточна для описания основных особенностей развития эпидемий, учитывая то обстоятельство, что данные для адаптации более сложных структурированных моделей, как правило, отсут ствуют. Являясь детерминистической, модель (как и реализующая ее программа) рассчитана на то, чтобы описывать массовые вспышки и эпидемии, и не предназначена для описания единичных случаев передачи инфекции.

При моделировании выделяются 3 стадии развития заболеваний, различающихся по симптоматике, вероятности постановки правиль ного диагноза и уровню инфекционности больных. Обычно это:

инкубационный (неинфекционный период);

относительно короткий период продромы (лихорадки), во вре мя которого больной способен инфицировать окружающих, однако, основные симптомы еще не проявились и верный диагноз затруднен, если нет сведений о начале вспышки;

«финальная» стадия, во время которой вероятность передачи инфекции не изолированными больными высока, особенно, членам семьи и окружающим в неинфекционных отделениях больниц.

Универсальность модели состоит в том, что после несложной адаптации она может описывать вспышки любых заболеваний, при которых основными путями заражения являются инфицирование из внешнего источника или при случайных контактах между людьми независимо от пола, возраста и других социально-демографических особенностей.

В настоящий момент модель адаптирована к достаточно широкому кругу инфекций из ряда наиболее вероятных потенциальных агентов для использования в качестве оружия биотеррористических актов [5]: натуральная оспа, легочные формы Сибирская язвы и чумы, ту ляремия, геморрагические лихорадки Эбола, Марбург, Ласса, Крым Конго. В результате адаптации для каждой инфекции задается ряд параметров, таких как:

максимальная продолжительность каждой из стадий болезни;

продолжительность перехода из стадии в стадию;

среднее число контактных на одного инфицируемого;

продолжительность периода формирования поствакцинально го иммунитета;

доля инфекционной активности на разных стадиях заболева ния;

доля инфекционной активности иммунных по отношению к неиммунным и малосимптомных по отношению к больным тяжелой формой;

доля тяжелых форм среди неиммунных и иммунных больных;

инфицируемость иммунных по сравнению с неимунными;

доля инфицируемых контактных в сутки;

смертность неиммунных и имунных на разных стадиях забо левания;

снижение смертности у подвергаемых лечению;

продолжительность обсервации контактных (как правило, за висит от продолжительности латентного периода).

Значения этих и ряда других параметров характеризуют каждое конкретное заболевание. Например, для геморрагических лихора док «продрома» или предгеморрагическая стадия введена только для того, чтобы обеспечить смертность не ранее конца первой недели по сле появления симптомов – в финальной геморрагической стадии [6].

В случае же чумы основная смертность и инфекционная активность задаются в модели именно для второй стадии болезни, а «финальная»

стадия соответствует длительному периоду восстановления, во вре мя которого выздоравливающие, практически, уже не умирают и не могут инфицировать окружающих [7]. В случае лихорадки Марбург предпринят обходной маневр: доля иммунных лиц в популяции зада ется равной 100 %. Это сделано для того, чтобы учесть особенности заболевания, а именно, для вторично инфицированных наблюдается снижение риска инфицирования, примерно до 20 % [8] и смертности практически до нуля [9]). В то же время, для этой инфекции отсут ствуют эффективные средства профилактики, и, следовательно, не применяется такая мера противодействия как предварительная или экстренная вакцинация, то есть формирование коллективного имму нитета.

Адаптация проводилась на основе анализа открытых литератур ных источников, из сети Интернет, так что значения многих пара метров в достаточной мере условны из-за неоднозначности таких данных. Поэтому специалистам, работающим с моделью удаленно, предоставлена возможность редактировать все параметры моделиро вания в соответствии с их представлением о той или иной инфекции.

Также пользователи могут задавать параметры расчета эпидемий для новых инфекций, отсутствующих в круге моделируемых.

В модели предусматривается реализация трех режимов противо эпидемических мероприятий (ПЭМ), определяющих, в основном, скорость выявления и изоляции (наблюдения) инфицированных, кон тактных и лиц, подозрительных на заболевание, то есть тех, кто имеет первичные симптомы инфекции, но могут, в действительности, быть не инфицированными, с последующими необходимыми мерами про филактики и лечения:

1. «Мягкий» режим (ПЭМ1), при котором изолируются больные, самостоятельно обратившиеся к врачу. Этот режим реализуется, пока нет сведений о начавшейся эпидемии (вспышке), однако возникли некоторые подозрения, связанные, например, с заметно увеличив шимся числом одинаковых случаев.

2. «Умеренный» режим (ПЭМ2), при котором увеличивается ско рость изоляции больных, а также происходит изоляция (наблюдение) контактных и подозрительных лиц. Этот режим реализуется, когда подтвердились подозрения о начавшейся вспышке/эпидемии, но еще не прошла мобилизация резервов.

3. «Жесткий» режим (ПЭМ3), при котором еще увеличивается скорость изоляции больных, а также происходит активный поиск и изоляция (наблюдение) контактных и подозрительных лиц, включая подворный обход. Обычно, при реализации этого режима снимаются все ресурсные ограничения, т.к. предполагается мобилизация ресур сов из других регионов.

Кроме этих трех режимов для некоторых инфекций задается массовая вакцинация, характеризующаяся охватом и периодом ее проведения, вакцинация групп риска, в которые могут входить вы явленные контактные лица и лица, подозрительные на заболевание, а также карантин, характеризующийся степенью активности, сни жающей скорость инфицирования. Карантин снимается, если в те чение заданного времени не выявлено лиц, инфицированных или умерших от инфекции, при этом жесткий режим ПЭМ переводится в умеренный.

Все указанные меры противодействия реализуются, при наличии соответствующих ресурсов, к которым относятся: квалифицирован ный медперсонал, пункты вакцинации, а также места в госпиталях для изоляции/наблюдения больных, контактных и подозрительных на заболевание лиц, запасы профилактических и лекарственных средств.

При исчерпании ресурсов, уровни активности соответствующих мер противодействия (выявление и изоляция, вакцинация, лечение и пр.) могут быть снижены вплоть до полного прекращения.

Время действия и эффективность соответствующих уровней ПЭМ, объем и продолжительность вакцинации, а также запас ресур сов являются параметрами моделирования, которые могут использо ваться как «по умолчанию», так и редактироваться специалистами, работающими с моделью в соответствии с имеющимися у них дан ными.

Выбрав инфекцию и задав параметры, пользователь может произ вести следующие варианты расчетов:

1. Расчет динамики эпидемии с ее начала и до окончания заданно го расчетного периода.

2. Расчет динамики эпидемии с выбранного дня (в пределах пред варительно рассчитанного периода ее развития). Этот режим оказы вается полезным, если в процессе развития эпидемии происходят какие-то существенные изменения ситуации в популяции.

3. Расчет и сравнительный анализ четырех типичных сценариев развития эпидемии в регионе в случае массового заражения в реаль ных популяциях реальных субъектов Российской Федерации:

Оптимистического – контроль ресурсов отключен, меры про тиводействия реализуются в полном объеме в минимальные, по мне нию пользователя сроки.

Умеренно-оптимистического – включен контроль ресурсов, меры противодействия задаются к реализации в те же сроки.

Реального – включен контроль ресурсов, меры противодействия задаются к реализации с запаздыванием на 5 дней по сравнению с предыдущим сценарием.

Пессимистического – ограничение интенсивности мер проти водействия из-за серьезного дефицита ресурсов (все ресурсы, до ступные в предыдущих сценариях уменьшаются на 40 %) при еще большем запаздывании в сроках реализации ПЭМ (на 5 дней по срав нению с предыдущим сценарием).

По результатам расчетов пользователь может просмотреть/сохра нить как отдельные траектории, так и весь файл результатов, в кото ром приводится динамика отдельных показателей эпидемии:

День от начала эпидемии Численность не инфицированных лиц Численность больных в латентной стадии Численность больных в инфекционной стадии Численность выздоравливающих больных Инфицировано в сутки Изолировано больных в сутки Умерли в сутки Поправились в сутки Текущее число инфицированных Текущее число наблюдаемых контактных Текущее число изолированных Текущее число наблюдаемых подозрительных Инфицировано всего Умерли всего Поправились всего Изолировано больных всего Вакцинировано всего Кроме этого здесь же содержатся сведения о моментах начала реа лизации режимов ПЭМ, моментах наступления дефицита ресурсов, а также такие сводные характеристики эпидемии как «Суммарное число изолированных контактных», «Суммарное число изолирован ных подозрительных», «Человеко-дней изолированных контактных», «Человеко-дней изолированных подозрительных», «Человеко-дней изолированных больных», «Дней карантина». Эти сводные данные ха рактеризуют масштабы эпидемии.

Таким образом, использование модели позволяет анализировать эффективность противоэпидемических мероприятий, как по отдель ности, так и в комплексе, опираясь на имеющиеся ресурсы и воз можности их привлечения из других мест, оценивать и сравнивать уровень биологической безопасности регионов по отношению к мо делируемым инфекционным агентам, оптимизировать расходы бюд жета на поддержание требуемого уровня безопасности.

Работа частично поддержана грантами ФЦП «Национальная си стема химической и биологической безопасности РФ 2009-2014 гг.»

Список литературы:

1. Боев Б.В., Макаров В.В. Компьютерное моделирование и прогнозиро вание эпидемий птичьего гриппа.// Ветеринарная патология. – 2005. -№ 3. – C. 49-58.

2. Бароян О.В., Рвачев Л.А. Математика и эпидемиология.- М., «Знание»,1977. – C. 63.

3. Бароян О.В., Рвачев Л.А., Иванников Ю.Г. Моделирование и прогно зирование эпидемий гриппа для территории СССР. – М., ИЭМ. им. Н.Ф. Га малеи, 1977. – C. 546.

4. Бароян О.В., Рвачев Л.А. Прогнозирование эпидемий гриппа в услови ях СССР.// Вопросы вирусологии. -1978. – № 2. – C. 131-137.

5. Обеспечение биологической, химической и радиационной безопасно сти при террористических актах / Онищенко Г.Г., Шапошников А.А., Суббо тин В.Г. и др. «МП Гигиена». М., 2005. – 431 с.

6. Инфекционные болезни и эпидемиология: Учебник – 2-е изд. / В.И. По кровский, С.Г. Пак, Н.И. Брико, Б.К.Данилкин;

ГЭОТАР-Медиа. М., 2007. – 816 с.

7. Инструктивно-методические указания по диагностике, лечению и про филактике чумы/ Минздрав СССР. – 14.09.1976.

8. Borchert M., Mulangu S., Swanepoel R., et al. Serosurvey on household contacts of Marburg hemorrhagic fever patients. //Emerg Infect Dis. – 2006. – 12. – p. 433-439.

9. Марбургская геморрагическая лихорадка. Информационный бюлле тень ВОЗ, Декабрь 2011. URL – http://www.who.int/mediacentre/factsheets/ fs_marburg/ru/index.html.

СОДЕРЖАНИЕ Раздел I. ВЫСОКОТЕХНОЛОГИЧНАЯ МЕДИЦИНА КАК ЭЛЕМЕНТ ИННОВАЦИОННОЙ ЭКОНОМИКИ А.С. Исмаилов Унифицированная классификация хронических остеомиелитов трубчатых ко стей............................................................................................................................ С.Н. Лунева, А.Н. Накоскин, Л.А. Ваганова Перспективы применения аминокислотных комплексов кальция для восполне ния кальциевой недостаточности у крыс в посттравматическом периоде......... С.Н. Малков Клиническое и экспериментальное изучение краш-синдрома............................ А.Л. Матвеев, В.Э. Дубров, Т.Б. Минасов, А.В. Нехожин, О.Н. Степанов, Л.Ю. Романова Медико-экономические аспекты хирургической профилактики патологиче ских переломов проксимального отдела бедра у лиц старшего возраста........... Т.А. Мыльникова, И.А. Цыцорина, Л.С. Шалыгина Доступность и качество травматолого-ортопедической помощи детскому на селению в сибирском федеральном округе........................................................... Е.А. Назаров Некоторые экономические аспекты диагностики и лечения дегенеративно дистрофических заболеваний тазобедренного сустава у взрослых.................... М.Н. Назиров, О.М. Хусанбоев, Ж.А. Нуралиев Остеосинтез стержневыми аппаратами в лечение больных с переломами прок симального конца бедра.......................................................................................... М.Н. Назиров, О.М. Хусанбоев, Г.Н. Гарипов Внеочаговый остеосинтез перелома плечевой кости с применением репозици онного аппарата........................................................................................................ Л.Н. Петров, П.В. Майсеёнок Опыт лечения доброкачественных опухолей костей............................................ Н.Н. Пикалова, Е.А. Мовчан Внутренняя картина болезни и качество жизни – новые индикаторы эффектив ности заместительной терапии терминальной почечной недостаточности....... О.Д. Рымар, А.К. Пьянкова, В.Н. Максимов, С.В. Мустафина Ассоциация полиморфизма гена с(-1)т гена cd40 с предрасположенностью к семейным случаям аутоиммунных заболеваний щитовидной железы............... В.П. Самсонов Новые методы и устройства для дренирования лимфатических протоков при нагноительных заболеваниях легких.................................................................... В.П. Самсонов, К.В. Самсонов, А.К. Самсонов Разработка нового способа детоксикации биологических жидкостей............... В.С. Старых, Т.Л. Гусельникова, Р.Ф. Краснова, Л.В. Кравченко, Н.Д. Загриценко Новая технология перемещения тяжёлого больного в стационаре..................... А.С. Федоров, В.С. Старых Комплекс инновационных технологий в хирургическом лечении больных с вывихами акромиального конца ключицы............................................................ А.А. Черноносов, Г.И. Лифшиц, О.С. Фёдорова Применение масс-спектрометрического подхода в лечении тромбозов............ Л.С. Шалыгина, М.А. Садовой, Н.В. Мелихова Обоснование формирования регистра больных с нейрохирургической пато логией как элемента единого информационного пространства для повышения доступности и качества оказания высокотехнологичной медицинской помощи Раздел II. ВОПРОСЫ ВНЕДРЕНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ И ПРОДУКТОВ В ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗДРАВООХРАНЕНИЕ Ж.В. Гудинова, О.К. Козловская Проблемы внедрения медицинских инноваций в практику................................ Р.А. Казаков, В.В. Канн, Е.Г. Тоцкая Управление инновационной деятельностью в учреждениях здравоохранения Е.В. Мамонова, М.А. Садовой, В.И. Мамонов Модели функционирования государственно-частного партнерства и их ис пользование в области медицины и здравоохранения.......................................... М.А. Садовой, Е.В. Мамонова, И.Ю. Бедорева, А.Ф. Гусев, О.М. Рожнова Совершенствование научной и образовательной деятельности медицинской организации на основе изучения международного опыта и принципов иннова ционного менеджмента........................................................................................... Раздел III. ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ИННОВАЦИОННЫХ МЕДИЦИНСКИХ ПРОДУКТОВ И ТЕХНОЛОГИЙ, ВОПРОСЫ СЕРТИФИКАЦИИ, ФАРМАКО-ЭКОНОМИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ, ПРОВЕДЕНИЯ (КЛИНИЧЕСКИХ) МЕДИЦИНСКИХ ИСПЫТАНИЙ О.В. Зеленова Определение порога готовности платить – основа для принятия управленче ских решений в оценке медицинских технологий................................................ В.М. Чернышев, М.А. Садовой, О.В. Стрельченко, Е.В. Мамонова К вопросу об оптимизации использования ресурсов здравоохранения в сибир ском федеральном округе на основе инновационных управленческих техноло гий и совершенствования организации оказания медицинской помощи населе нию............................................................................................................................ Раздел IV. ИННОВАЦИОННЫЕ РЕГЕНЕРАТИВНЫЕ ТЕХНОЛОГИИ И НОВЫЕ МАТЕРИАЛЫ А.М. Аронов, И.В. Шемякина, О.В. Медведко Опыт создания керамических материалов для эндопротезов суставов и других медицинских изделий.............................................................................................. Т.И. Александров, И.А. Кирилова, С.И. Чорний, В.Т. Подорожная Использование композиционного костно-пластического материала «депро текс» в ортопедии (описание клинического случая)............................................ И.В. Бауэр, А.А. Ангельский Инновационная трибологическая пара в гибридном протезировании тазобе дренного сустава...................................................................................................... Е.А. Боробова, Е.В. Старостина, Д.В. Антонец Характеризация рекомбинантных плазмид – кандидатов ДНК – вакцины про тив меланомы........................................................................................................... И.Ю. Веретельникова, И.П. Ардашев, И.А. Кирилова Костная пластика при экспериментальном остеомиелите позвоночника.......... В.Н. Галашина, Н.С. Дымникова, А.П. Морыганов, А.В. Фролова, Г.И. Смыслов Перспективы использования модифицированного льно-волокна для высоко технологичных медицинских изделий................................................................... В.В. Гузеев, Е.А. Зеличенко, О.А. Гурова, А.С. Морозова, С.В. Коношенко, Я.Б. Ковальская Биоактивные материалы для регенеративной медицины..................................... И.А. Кирилова, В.Т. Подорожная, В.В. Павлов Теоретическое обоснование процесса прижизненной заготовки костной ткани в условиях федерального учреждения................................................................... А.А. Красильникова, М.А. Шестопалов, К.А. Брылев, О.П. Хрипко, В.Ю. Мар ченко, И.А. Кирилова, Л.В. Шестопалова Новый класс рентгеноконтрастных соединений на основе октаэдрических ме таллокластерных комплексов................................................................................ А.О. Лебедева, О.Б. Вайнер, Т.С. Годовикова, Ю.В. Афонин, А.Ю. Демьянова, М.В. Коробейников, А.С. Юношев, А.А. Карпенко, И.В. Попова, Е.А. Поку шалов, А.Е. Акулов, А.В. Ромащенко, С.М. Фоменко, А.М. Зайдман, П.П. Лак тионов Современные подходы к тканевой инженерии гиалинового хряща и сосудов:



Pages:     | 1 |   ...   | 6 | 7 || 9 |
 





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.