авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 6 |

«Учебно-методическое обеспечение для подготовки кадров по программам высшего профессионального образования для тематического направления ННС «Нанобиотехнологии» _ ...»

-- [ Страница 3 ] --

4. Антигензависимая клеточная цитотоксичность NK и эозинофилов;

5. Сосудистые и гладкомышечные реакции, инициируемые комплексом антиген-антитело с привлечением тучных клеток и базофилов (гиперчув ствительность немедленного типа ГНТ);

6. Реликтовые свойства антител (собственная протеазная и нуклеазная активность антител).

Комплексы антиген-антитело должны расщепляться до мелких метаболи тов. Для этого антитела в составе комплексов антиген-антитело фиксируют компоненты комплемента и активируют его. Комплексы антиген/антитело/ компоненты комплемента фиксируются на эритроцитах рецепторами для компонентов комплемента, и эритроциты уносят их в синусоиды селезен ки и печени, где их фагоцитируют и расщепляют макрофаги. Кроме того, комплексы с антителами IgG1 и IgG3 через рецептор FcRII на макрофагах и нейтрофилах будут связаны и фагоцитированы (расщеплены) до мелких метаболитов.

К Т-лимфоцитзависимым эффекторным механизмам иммунитета относят:

убийство клеток-мишеней цитотоксическими CD8+ Т-лимфоцитами;

иммунное воспаление тканей, называемое гиперчувствительностью за медленного типа (ГЗТ), которое организуют CD4+ Т-лимфоциты (субпопуля ции Th1), а клетками-исполнителями являются активированные макрофаги;

иммунное воспаление тканей, вызываемое токсичными продуктами эозинофилов, активированных лимфоцитами Th2 (IL-5). Такое воспаление характерно для аллергических заболеваний, встречается при отторжении трансплантатов чужеродных органов.

3.5.2. Механизмы реакций гиперчувствительности Изучение реакций повышенной чувствительности (гиперчувствитель ности) является предметом аллергологии. В соответствии с классификацией Кумбуса и Джелла выделяют четыре типа гиперчувствительности. Гипер чувствительность I, II и III типов зависит от взаимодействия с гуморальны ми антителами. Гиперчувствительность IV типа основана на распознавании антигена Т-лимфоцитами и названа гиперчувствительностью замедленного типа (А. Рабсон с соавт., 2006).

Все реакции гиперчувствительности (аллергии), обусловленные антите лами, распадаются на два основных типа анафилаксии, развивающиеся при попадании антигена у всех особей и реакции атопии, которые проявляются только у некоторых индивидуумов, имеющих соответствующую предраспо ложенность. Среди атопий различают аллергическую астму, аллергические рениты, атопические дерматиты (экземы).

ОСНОВЫ ИММУНОЛОГИИ Под аллергией понимают специфически извращенную реактивность ор ганизма, возникающую в результате предшествующего контакта с чужерод ным агентом (аллергеном). Аллергены – вещества белковой или небелковой природы, способные вызвать состояние сенсибилизации. Аллергической реакцией называют ответ сенсебиллизированного организма на повторное введение данного аллергена. Аллергены разделяют на экзогенные, то есть попадающие в организм из вне, и эндогенные, возникающие в организме под влиянием повреждающих факторов или при комплексации собственных тка ней с неантигенными чужеродными веществами (Р.В. Петров, 1987).

Среди экзогенных веществ выделяют 2 группы аллергенов: 1) инфек ционные (бактериальные, вирусные, грибковые), которые вызывают аллер гические реакции замедленного и немедленного типа;

2) неинфекционные – растительного (пыльца) и животного происхождения (клетки различных тканей), пылевые, лекарственные (антибиотики) и пищевые (молоко, яйца, мед).

В 1962 г Gell и Coombs предложили классификацию, включающую четы ре типа аллергических реакций по характеру тканевого повреждения:

1. Анафилактические и атопические реакции. В этом случае реакция между антителом и аллергеном (без участия комплемента), происходящая на поверхности клеток – базофилов крови или тканевых макрофагах, ведет к их дегрануляции и высвобождению медиаторов (гистамина, серотонина), уровень которых в крови резко повышается. В зависимости от распростра ненности реакции этого типа могут быть подразделены на генерализованные (анафилактический шок, лихорадочные состояния) и локализованные (брон хиальная астма, крапивница, атопический дерматит).

2. Цитологические или цитотоксические реакции, при которых антитела, циркулирующие в крови, соединяются с антигеном или гаптеном, фикси рованным на клетке. Участие комплемента в этих реакциях ведет к лизи су клеток. Примером могут быть реакции при переливаниях крови (резус несовместимость), аутоиммунные заболевания (гемолитические анемии), некоторые лекарственные аллергии, когда гаптен – лекарственный препарат фиксируется на клетках крови и вызывает осложнения типа анемии, лейко пении, тромбоцитопении.

3. Тканевые повреждения, вызванные комплексом, образованным анти геном с преципитирующими антигенами. Эти комплексы оседают вокруг кровеносных сосудов мелкого калибра, повреждают их эндотелий, вызывая местные тромбозы. При избытке антигена могут образовываться раствори мые комплексы, обусловливающие токсическое поражение сосудистой стен ки. Это вид реакции наблюдается при введении сывороточных аллергенов или лекарственных аллергенов (например, сывороточная болезнь, феномен Артюса).

Скоркина М.Ю., Погребняк Т.А.

4. Гиперчувствительность замедленного типа (ГЗТ) характеризуется раз витием клеточного воспалительного инфильтрата через 10-12 ч после вве дения аллергена. Этот вид развития аллергических реакций наблюдается при инфекционных заболеваниях, воздействии растительных, промышлен ных и лекарственных аллергенов. Пример, туберкулиновая аллергия, кон тактный дерматит. При ГЗТ главную роль играют сенсебиллизированные Т-лимфоциты. Получая информацию об аллергене от макрофагов, они во влекают в очаг аллергической реакции новое количество Т-лимфоцитов, вы деляя вещества, притягивающие макрофаги, осуществляют распознавание специфических детерминант аллергена, конъюгированного с собственны ми белками организма, и выполняют функцию киллеров по отношению к клеткам-мишеням. Антитела в развитии аллергии замедленного типа суще ственной роли не играют. Она формируется в основном лимфоцитами, но благодаря лимфокинам в реакцию включаются и другие клеточные элементы – макрофаги, моноциты, эозинофилы и т.д.

Эта классификация аллергических реакций условна, так как все типы тка невых повреждений могут возникать или одновременно, или следовать друг за другом.

А.Д. Адо (1978) предлагает выделять истинные и ложные аллергические реакции. К ложным он относит реакции, которые по внешним признакам на поминают аллергический шок – феномен Артюса, но по механизму не связа ны со взаимодействием антиген-антитело. К истинным аллергическим реак циям отнесены реакции, в основе которых лежит специфическая иммунная реакция между аллергеном и антителами (химерические реакции) или сен сибилизированными лимфоцитами (китергические реакции). Однозначно, нет четкой зависимости между видом аллергии и характером аллергической реакции.

В развитии аллергических реакций немедленного и замедленного типов выделяют 3 стадии:

1. Иммунологическая – соединение аллергена с сенсибилизированными лимфоцитами или антителами. Эта стадия специфична. Взаимодействие ал лергена со специфическим антигеном может происходить в крови и на по верхности клетки. При этом образуется комплекс аллерген-антитело, кото рый изменяет клеточную мембрану тканевых базофилов, вызывает их акти вацию. Взаимодействие антигена с рецепторами сенсибилизированных лим фоцитов ведет к пролиферации их и изменению соотношения циклических нуклеотидов, активации различных протеолитических ферментов;

2. Патохимическая стадия – результат активации указанных выше клеточ ных элементов, вследствие которой повышается секреция, и выделяются в окружающую среду гранулы, содержащие медиаторы аллергии – гистамин, ОСНОВЫ ИММУНОЛОГИИ серотонин, брадикинин. Сенсибилизированные лимфоциты и макрофаги вы деляют различные лимфокины.

3. Патофизиологическая – результат действия биологически активных ве ществ на ткани. Характеризуется расстройством кровообращения, спазмом гладкой мускулатуры бронхов, кишок, изменением проницаемости капилляров, отечностью, зудом, изменением состава сыворотки крови, свертыванием крови.

Биологический смысл аллергии заключается в запуске ее как одной из форм защиты организма против определенных видов антигенов, отличаю щихся особенностью вызывать реакции клеточного типа и продукции осо бого вида антител. Отличительной особенностью аллергических реакций является высокая скорость развития.

Гиперчувствительность немедленного типа. Первичный контакт орга низмов с такими антигенами как сывороточные белки другого вида животно го, приводит к развитию сенсибилизации. Сенсибилизированные животные реагируют резко повышенной чувствительностью к антигенам. Крайняя сте пень такой гиперчувствительности в виде анафилактического шока проявля ется после внутривенного введения второй дозы антигена. Состояние сенси билизации развивается при введении чрезвычайно малого количества чуже родных антигенов. Инъекция, создающая состояние гиперчувствительности называется сенсибилизирующей. Реакция анафилаксии иммунологически специфична – шок вызывается только тем антигеном, к которому установи лась сенсибилизация. Инъекция, сопровождающаяся развитием анафилакти ческого шока, называется разрешающей. Состояние гиперчувствительности развивается через 7-14 дней после первичного введения антигена. Сохра няться это состояние может годы и месяцы.

А.М. Безредка в 1907 г обнаружил феномен десенсибилизации. Он со стоит в том, что организм, перенесший анафилактический шок в тяжелой или легкой форме, на несколько дней утрачивает гиперчувствительность к данному антигену и следующее его введение не сопровождается анафилак тическим шоком.

Механизм развития анафилактического шока связан с циркуляцией в крови антител адсорбируются на клетках тела. Повторные введения антигена приво дят к взаимодействию антигена с антителами не поверхности клеток. В резуль тате высвобождается большое количество гистамина и других биологически активных веществ. Картина анафилактического шока складывается из общего и местного действия этих веществ. Если сенсибилизированному животному ввести соответствующий антиген не внутривенно, а внутрикожно, то разви вается местная анафилаксия или феномен Артюса. На месте инъекции через 30-60 мин развивается отек и резкая гиперимия. В течение последующих не скольких часов отечность нарастает, воспалительный очаг уплотняется, кожа приобретает черно-красную окраску. При гистологическом исследовании об Скоркина М.Ю., Погребняк Т.А.

наруживается острое эскудативно-геморрагическое воспаление. Основной клеточный инфильтрат – полиморфно-ядерные лейкоциты. При малой дозе антигена через несколько часов начинается обратное развитие процесса, при массивной дозе местные явления нарастают. В более поздние сроки очаг мо жет подвергнуться некрозу с последующим рубцеванием (Л. Йегер, 1990).

Для реализации анафилоксии необходимы условия:

1) антитела должны обладать цитофильностью;

2) должны существовать специальные клетки, выбрасывающие такие ве щества, под влиянием которых на поверхности клеток образуется комплекс антиген-антитело;

3) введенный в кровь антиген должен иметь возможность достичь по верхности этих клеток.

Пассивный перенос реакции гиперчувствительности немедленного типа возможен на животных другого вида. На этом основано явление обратной анафилаксии. Если морской свинке ввести -глобулины другого вида живот ного, то цитофильные молекулы адсорбируются на соответствующих клет ках. Последующее введение антител (через 4-5ч) против данного антигена вызывает анафилактическую реакцию. Обратная анафилаксия развивается когда в качестве антигена используются чужеродные -глобулины.

Специальными клетками, выделяющими медиаторы данного типа гипер чувствительности, являются базофилы и тучные клетки, которые рассеяны в соединительной ткани фактически всех органов. Тучные клетки и базофилы активируются следующими сигналами:

1. Гомотипной реакцией (комплексом IgE с антигеном);

2. Активированными компонентами комплемента – анафилотоксинами С5а-С4а-С3а;

3. Медиаторами, выделяемыми активированными нейтрофилами;

4. Нейротрансматтерами (норадреналин).

Реакция антиген-антитело на поверхности данных клеток ведет к их разрушению и при этом в ткани выделяется гистамин, гепарин, серотонин, брадикинин и липопротеидная субстанция (SRS-A). Действие гистамина на сосудистые, мышечные и секреторные клетки связано с наличием на их по верхности специальных рецепторов Г1, представленного на клетках гладкой мускулатуры и кровеносных сосудов, и Г2, который опосредует действие ги стамина в отношении желудочной секреции и сердечного ритма. Вазоактив ные эффекты гистамина состоят в следующем: эндотелиальные клетки пре терпевают констрикцию, и плазма выходит из сосуда в ткани;

гистамин сти мулирует синтез в клетках эндотелия простациклина и радикала окиси азота, которые вызывают расслабление гладких мышц сосудистой стенки и, следо вательно, вазодилатацию. Если процесс происходит в коже, то клинические симптомы связаны с появлением пузырей и покраснением (крапивница). В ОСНОВЫ ИММУНОЛОГИИ случае аллергической патологии симптомы снимают при помощи препара тов, блокирующих рецепторы Г1 для гистамина. Если гистамина выделяется слишком много, то он вызывает сокращения гладких мышц кишечника (пе ристальтику) и бронхов (бронхоспазм). Но эти эффекты кратковременны, так как гистамин быстро распадается во внеклеточной среде.

У морских свинок главным «шоковым» органом при анафилаксии явля ются легкие, у человека – легкие, гортань и сосудистая система. Основными медиаторами служат гистамины и SRS-A. У мышей и крыс – «шоковые» ор ганы – кишечник, сосуды;

у кроликов – легочные артерии;

у собак – печеноч ные вены. Их определяющие медиаторы – гистамин и серотонин.

Гиперчувствительность замедленного типа. Впервые ГЗТ была описана в 1890 г. Р. Кохом у больных туберкулезом при подкожном введении тубер кулина.

Механизмы ГЗТ:

1) этот тип повышенной чувствительности не связан с циркулирующими в крови антителами;

2) ГЗТ не может быть перенесена другому животному пассивно (с помо щью введения сыворотки от сенсибилизированного организма);

3) кожные реакции, выявляющие повышенную чувствительность при ГЗТ, не характеризуются немедленностью (они развиваются в течение мно гих часов не раннее 6-8 ч, расцвет через 24-48 ч);

4) местные проявления при ГЗТ и реакция немедленного типа различают ся по гистологической картине. При ГЗТ реакция развивается в виде плотной инфильтрации, имеющей длительное течение, клеточную основу инфильтра та составляют мононуклеары – лимфоциты, моноциты, макрофаги. Моно нуклеарная инфильтрация особенно резко выражена вокруг малых кровенос ных сосудов. При ГЗТ характерно развитие лимфопении;

5) как и другие иммунологические реакции ГЗТ характеризуется специ фичностью.

Реакции ГЗТ являются защитной формой реагирования организма и обе спечивают клеточный антиинфекционный иммунитет, в отличие от гумо рального, опосредуемого антителами. Реакции ГЗТ являются ведущим ме ханизмом трансплантационного иммунитета, приводящего к отторжению чужеродных органов и тканей.

Рецепторы лимфоцитов-эффекторов способны комплементарно взаимо действовать с сенсибилизирующим антигеном. При взаимодействии с анти геном выделяются гуморальные факторы – медиаторы клеточного иммуни тета. Одной из основных функций медиаторов является вовлечение макрофа гов в процесс разрушения антигена, против которого сенсибилизированные лимфоциты. Для иммунной активации макрофага необходимы два воздей ствия на него со стороны лимфоцитов:

Скоркина М.Ю., Погребняк Т.А.

1. Контактное – молекула CD40L на Th1-лимфоците вступает в связь с молекулой CD40 на макрофаге;

2. Цитокиновое – IFN-, продуцируемый Th1, Tk, NK связывает рецеп тор на макрофаге.

Макрофаг, активированный взаимодействием с Th1, приобретает следую щие признаки и функциональные способности (Р.М. Хаитов с соавт., 2000):

1) на макрофаге увеличивается число иммунорецепторов FcR, которы ми он связывает комплексы антиген-антитело и фагоцитирует их;

2) IFN- в макрофагах индуцирует биосинтез ферментов, генерирующих радикалы активных форм кислорода, которые окисляют фагоцитированный антиген;

3) в макрофагах под воздействием IFN-, TNF- (фактор некроза опухо лей) повышается активность NO-синтетезы, продуцирующей радикал NO., который окисляет фагоцитированный материал;

4) в макрофагах индуцируется синтез липидных медиаторов воспаления – PAF (фактор активирующий тромбоциты), простогландинов и лейкотриенов;

5) макрофаг синтезирует тканевый фактор коагуляции, ускоряющий про цесс коагуляции. В начавшемся процессе коагуляции активируется сыворо точный тромбин – протеаза, которая стимулирует клетки эндотелия сосудов и нейтрофилы к синтезу PAF, что еще больше способствует прогрессирова нию воспаления;

6) IFN-индуцирует синтез и экспрессию молекул МНС-II на макрофагах;

7) активированные макрофаги продуцируют свои цитокины и среди них факторы роста, которые изменяют состояние прилегающих к очагу тканей. В защитном режиме возникает очаг воспаления по типу ГЗТ, а в патологическом режиме цитокины из активированных макрофагов вызывают фиброзное пере рождение тканей в результате пролиферации фибробластов и повышенной продукции ими коллагенов. Пролиферацию фибробластов стимулирует вы рабатываемый макрофагами тромбоцитарный фактор роста, а синтез коллаге на стимулирует вырабатываемый макрофагами трансформирующий фактор роста. Кроме того, факторы роста, вырабатываемые макрофагами, вызывают миграцию и пролиферацию клеток эндотелия, что приводит к образованию дополнительных кровеносных сосудов – к ангиогенезу. Если такой воспали тельный процесс затягивается и распространяется, то наступает замещение функциональной паренхимы органа на фиброзную ткань, т.е. фиброз;

8) активированные макрофаги отличаются большими размерами, содер жат повышенное количество лизосом, имеют усиленную фагоцитарную и микробоцидную активность. Повышенная активность этих макрофагов не специфична, она распространяется не только на агент, вызывающий реак цию, но и на другие агенты микробного или иного происхождения.

ОСНОВЫ ИММУНОЛОГИИ Таким образом, существуют два компонента реакции – специфический (рас познавание агента лимфоцитами) и неспецифический (рекрутирование макро фагов), обеспечивающих элиминацию и разрушение причинного агента.

Свежий очаг ГЗТ в коже представляет собой следующее. Цитокины акти вированных макрофагов создают очаг воспаления в виде плотных на ощупь узелков разного размера. Плотность очага обусловлена выпотом из сосудов фибриногена и полимеризацией его в фибрин. В первые 6-8 ч среди клеток, присутствующих в очаге воспаления, преобладают нейтрофилы, затем макро фаги и Th1. Плотность свежих клеток в очаге ГЗТ не велика. Существенно, что среди Т-лимфоцитов в очаге доля антигенспецифичных клеток составля ет 1/500-1/5000. такие соотношения характерны для нормального иммунного ответа: на месте любого иммунного воспаления большинство лимфоцитов представлено антигеннеспецифичной «толпой», «сбежавшейся» в очаг по «зову» хемокинов и молекул адгезии и по инициативе антигенспецифичных лимфоцитов. Активированные макрофаги продуцируют интерлейкин-12 – главного «промотора» дифференцировки Th1.

Если макрофаг по каким-либо причинам не в состоянии расщепить вне дрившийся в ткани антиген, то процесс иммунного ответа по типу ГЗТ затя гивается и формируются гранулемы. Образование гранулем характерно для инфекций, вызванных, например, Mycobacterium tuberculossis: при легочной форме туберкулеза гранулемы образуются в легких. В центре гарнулемы фиброзная ткань, по периферии – макрофагальный инфильтрат, возможен и синцитий из макрофагов. Гранулемы могут размягчатся, наблюдается не кроз. По мере накопления нерасщепленного груза на макрофагах возможен летальный исход (табл. 7).

Таблица Особенности реакций гиперчувствительности (Р.В. Петров, 1987) Скоркина М.Ю., Погребняк Т.А.

Первая гуморальная форма ответа (ГНТ) связана с В иммунной системой, вторая (ГЗТ) – с Т клеточной системой. В-система определяет иммунитет при большинстве бактериальных инфекций, антитоксический иммунитет, анафилаксию, аллергии немедленного типа, ряд аутоиммунных заболеваний.

Т-система – иммунитет при большинстве вирусных инфекций, некоторых бактериальных инфекциях, аллергии замедленного типа, трансплантацион ный иммунитет, противоопухолевый иммунитет, некоторые виды иммунопа тологии и старения.

Контрольные упражнения, вопросы по содержанию 1. Перечислите антителозависимые эффекторные механизмы иммунитета.

2. Назовите антителонезависимые эффекторные механизмы иммунитета.

3. Дайте определение понятию аллергия.

4. Классификация аллергий, ее формы.

5. Дайте определение анафилаксии и сенсебилизации.

6. Охарактеризуйте механизм реакций гиперчувствительности замедлен ного типа.

7. Охарактеризуйте механизм реакций гиперчувствительности немедлен ного типа.

ЧАСТЬ 2:

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИЗУЧЕНИЮ ДИСЦИПЛИНЫ Скоркина М.Ю., Погребняк Т.А.

ВВЕДЕНИЕ Дисциплина «Основы иммунологии» рассчитана на 90 часов, из которых 24 часа приходится на лекции и 12 – на лабораторно-практические и семи нарские занятия. На самостоятельную работу студентов предусмотрено часа.

Иммунология – это наука, изучающая механизмы ответной реакции орга низма на генетически чужеродную информацию. Соответственно, основное содержание учебного курса «Основы иммунологии» составляют современ ные научные данные и классические экспериментальные работы по поста новке иммуноанализов, установления механизмов формирования иммунных реакций в процессе онтогенеза. В ходе изучения курса студенты знакомятся с задачами и методами иммунологии, дифференциальными подходами к оцен ке функциональной активности Т- и В-систем иммунитета, интегральной оценкой иммунной устойчивости функционирования биосистем.

Материал лекционного курса построен в соответствии с уровнями орга низации живой материи. В нем на молекулярном уровне изучается строение молекул иммуноглобулинов, антигенраспознающие рецепторы В-клеток и Т-клеточные рецепторы, молекул главного комплекса гистосовместимости, антигены, цитокины, адгезины. На клеточном уровне рассматриваются клет ки лимфоидного комплекса, клеточные кооперации и их роль в иммунном ответе;

на органном уровне – гистологическая организация лимфоидного комплекса. На организменном уровне рассматриваются вопросы нейрогор мональной регуляции иммуногенеза, влияния факторов внешней среды на иммунный ответ. Этот комплекс теоретических знаний о механизмах орга низации иммунной защиты необходим бакалаврам для системного планиро вания и разработки экспериментальных исследований в области нанобиотех нологий по биодиагностике, биосовместимости, созданию лекарственных средств на основе наночастиц и их адресной доставке. При изложении лек ционного материала в теме «Трансплантационный иммунитет», и «Лимфо цитарный иммунный ответ» изучаются механизмы и проявления иммуно логических реакций, которые могут возникать при исследовании биосовме стимости наноматериалов и наноструктур. Приобретенные студентами тео ретические знания позволят им в дальнейшем грамотно выстраивать схемы экспериментов по проведению тестов на биосовместимость при вживлении наноимплантатов.

В лабораторный практикум курса включены работы, которые позволяют показать междисциплинарную значимость фундаментальных знаний ранее изученных курсов («Генетика», «Основы микробиологии», «Биология клет ки») для более полного освоения учебного материала и, на его основе, фор ОСНОВЫ ИММУНОЛОГИИ мирования комплексного подхода к выбору темы научно-исследовательской работы. Выполнение лабораторных и практических работ включает в себя элементы научного исследования, направленные на развитие системного мышления, освоения научной организации планирования и выполнения экс периментальных работы. В частности, четкое определение её целей и задач, выбор адекватных им методов, анализ и интерпретация полученных резуль татов, формирование выводов и практических предложений.

Лабораторное занятие с использованием прибора «Зондовая нанолабора тория ИнтеграВита» позволяет студентам отработать навыки и умения рабо ты с ним, определить активированные лимфоциты крови по их размерным классам – поверхности клетки и её морфологическим особенностям. Сам процесс выполнения работы и её результаты объективно расширяют пред ставления студентов о наноуровне живых систем и современных научных возможностях наносистемной техники и методах нанобиодиагностики в пла нировании и выполнении исследований по актуальным направлениям нано биотехнологий, связанных с интегральной оценкой функциональной актив ности систем иммунитета.

Блок семинарских занятий направлен на более детальное изучение базовых механизмов реализации иммунных реакций и формирования адаптивного иммунитета в условиях воздействия агрессивной среды на биосистемы различного уровня.

По результатам обучения рекомендовано проведение экзамена.

Скоркина М.Ю., Погребняк Т.А.

1. ЦЕЛЬ ОБУЧЕНИЯ - получение в процессе обучения знаний алгоритмов и методов основ им мунологии, атомно-силовой микроскопии - сформировать готовность студентов к оценке функциональной актив ности Т- и В-систем иммунитета и интегральной оценке функционирования живой системы в целом на основе применения методов клинической диагно стики и дифференциальных подходов к оценке.

2. ПРИОБРЕТАЕМЫЕ КОМПЕТЕНЦИИ Готовность:

осваивать базовые концепции структурно-функциональной организа ции иммунной системы в профессиональной деятельности;

к выполнению экспериментальных исследований по изучению моле кулярных механизмов организации и функционирования иммунитета;

к анализу и выявлению сущности научных проблем, самостоятельно му углублению и расширению общетеоретической, биологической и методи ческой базы в профессиональной деятельности;

использовать на практике методы, умения и навыки по дифференци альной оценке функциональной активности Т- и В-систем иммунитета и ин тегральной оценке функционирования иммунной системы;

творчески применять полученные на основе междисциплинарных свя зей знания, навыки и умения по иммунологии в практической деятельности;

к правильному использованию профессиональной лексики по биоло гическому и биофизическому профилю;

работать с информацией на основе полученных знаний и умений в об ласти клеточных технологий и нанобиотехнологий в условиях развития нау ки и техники.

Приобретаемые навыки:

использования теоретических и прикладных аспектов иммунологии для ознакомления с защитными свойствами биологических объектов, про цессами, протекающими на клеточном, субклеточном и организменном уровнях;

самостоятельной работы с литературой (в частности, англоязычной);

решения теоретических и практических типовых и системных задач, связан ных с профессиональной деятельностью;

логического творческого и системного мышления;

ОСНОВЫ ИММУНОЛОГИИ работы с лабораторной техникой;

выполнения заданий с привлечением дополнительного материала (в том числе поиск по базам данных в интернете).

3. РЕКОМЕНДУЕМЫЕ ВИДЫ УЧЕБНОЙ РАБОТЫ 4. СОДЕРЖАНИЕ УЧЕБНОЙ ДИСЦИПЛИНЫ 4.1 Примерный тематический план учебной дисциплины (дневная форма обучения) Скоркина М.Ю., Погребняк Т.А.

4.2 Содержание лекционного курса Раздел 1. Введение в дисциплину «Основы иммунологии»

1.1. Иммунология – наука молекулярного уровня Предмет, задачи, место и роль иммунологии в современной науке. Основ ные достижения иммунологии. Ее связь с молекулярной биологией, генети кой, биохимией, биофизикой, биотехнологией, физиологией и математиче ским моделированием процессов. Основные этапы и направления развития современной иммунологии. Принципы организации и функционирования иммунной системы.

Литература:

1. Воробьев, А.А. Взгляды на развитие иммунологии в первой половине XXI века / А.А. Воробьев // Вестник РАМН. – 1999. – № 10. – С. 48-52.

Раздел 2. Молекулярная иммунология 2. 2. Строение молекул антител и антигенов.

Биологические свойства и функции антител. Молекулярная характери стика антител: легкие и тяжелые цепи, вариабельные и константные области.

Изотипы, аллотипы и идиотипы. Общая характеристика и классификация антигенов. Структура антигенной специфичности. Гаптены и гаптеноспеци фичность. Коньюгированные антигены, носители. Виды антигенной специ фичности. Адъюванты. Антигены тимсусзависимые и тимсуснезависимые.

Феномены взаимодействия антиген – антитело: агглютинация, преципита ция, лизис, цитотоксичность, опсонизация. Физико-химические процессы, лежащие в основе взаимодействия антиген – антитело. Специфичность ре акции антиген – антитело.

Литература:

1. Вершигора, А.Е. Основы иммунологии / А.Е. Вершигора. – Киев: Вища школа, 1980. – 504 с.

2. Галактионов, В.Г. Иммунология/ В.Г. Галактионов. – М.: Нива России, 2000. – 488 с.

3. Кульберг, А.Я. Молекулярная иммунология / А.Я. Кульберг. – М.: Выс шая школа, 1985. – 287 с.

4. Петров, Р.В. Иммунология / Р.В. Петров. – М.: Медицина, 1987. – 416 с.

5. Рабсон, А. Основы медицинской иммунологии / А. Рабсон, А. Ройт, П.

Делвз. – М.: Мир, 2006. – 320 с.

6. Хаитов, Р.М. Иммунология / Р.М. Хаитов, Г.А. Игнатьева, И.Г. Сидорович. – М.: Медицина, 2000. – 432 с.

ОСНОВЫ ИММУНОЛОГИИ Раздел 3. Клеточная иммунология 3.1. Врожденный иммунитет Система естественной резистентности. Фагоциты, фагоцитоз. Система комплемента, пути ее активации. Белки острой фазы воспаления. Эндоген ные пептиды-антибиотики. Натуральные киллеры.

Литература:

1. Ложкина, А.Н. Система комплемента как связующее звено между им муногенезом, гемостазом и неспецифической резистентностью организма / А.Н. Ложкина, Б.И. Кузник, Н.Н. Цыбников // Иммуногенез, гемостаз и не специфическая резистентность организма. – М.: Медицина, 1989. – С. 126 158.

2. Симбирцев, А.С. Толл-белки: специфические рецепторы неспецифи ческого иммунитета / А.С. Симбирцев // Иммунология. – 2005. – Т. 26. № 6.

– С. 368-377.

3. Хаитов, Р.М. Иммунология / Р.М. Хаитов, Г.А. Игнатьева, И.Г. Сидорович. – М.: Медицина, 2000. – 432 с.

3.2. Анатомия иммунной системы Общий план строения лимфоидной системы. Тимус и его центральная роль в иммунитете. Основные гормоны тимуса. Костный мозг. Сумка Фабри циуса. Лимфатические узлы. Селезенка. Кровь. Клетки иммунной системы.

Т-лимфоциты и их субпопуляции. В-лимфоциты и их субпопуляции.

Литература:

Арцимович, Н.Г. Иммунология эмбриогенеза / Н.Г. Арцимович. – М.:

МГУ, 1987. – 92 с.

Козлов, В.А. Супрессивная функция макрофагов в процессе иммуно генеза / В.А. Козлов // Клеточные факторы регуляции иммуногенеза / Под ред. В.А. Труфакина. – Новосибирск: Наука, Сиб. отд-е, 1985. – С. 88-95.

Комиссаренко, С.В. Механизмы реализации иммунологического рас познавания // Стволовые и иммунокомпетентные клетки в норме и при опу холевом росте. Сб. научн. тр. / отв. ред. З.А. Бутенко. – Киев: Наукова думка, 1981. – С. 148-159.

Сапин, М.Р. Принципы организации и закономерности строения орга нов иммунной системы человека / М.Р. Сапин // Архив анатомии. – 1987. – Т.

92. № 2. – С. 5-16.

Хаитов, Р.М. Иммунология / Р.М. Хаитов, Г.А. Игнатьева, И.Г. Сидорович. – М.: Медицина, 2000. – 432 с.

Скоркина М.Ю., Погребняк Т.А.

3.3. Трансплантационный иммунитет Главный комплекс гистосовместимости, его строение и функциональная роль. Антигенные специфичности, контролируемы регионами НLA их стро ение. Определение понятия «трансплантационный иммунитет». Аутотран сплантация. Сингенная, аллогенная и ксенотрансплантация. Иммунологиче ская природа отторжения. Механизм деструкции трансплантата. Клеточные феномены трансплантационного иммунитета: усиление роста транспланта та, аллогенная ингибиция, цитопатогенное действие лимфоцитов.

Литература:

1. Зарецкая, Ю.М. Клиническая иммуногенетика / Ю.М. Зарецкая. – М.:

Медицина, 1983. – 208 с.

2. Клиническая иммунология и аллергология в 3-х томах/ Под ред. Л. Йе гера. – М.: Медицина, 1990. – Т. 2. – С.507 – 546.

3. Кузник, Б.И. Современные представления о системе иммуногенеза и неспецифической резистентности организма / Б.И. Кузник, Н.В. Васильев // Иммуногенез, гемостаз и неспецифическая резистентность организма / Б.И.

Кузник, Н.В. Васильев, Н.Н. Цыбник. – М.: Медицина, 1989. – С. 12-40.

4. Рабсон, А. Основы медицинской иммунологии / А. Рабсон, А. Ройт, П.

Делвз. – М.: мир, 2006. – 320 с.

5. Петров, Р.В. Контроль и регуляция иммунного ответа / Р.В. Петров, Р.М.

Хаитов, В.И. Манько, А.А. Михайлова. – Л.: Медицина, 1981. – 312 с.

6. Хаитов, Р.М. Иммунология / Р.М. Хаитов, Г.А. Игнатьева, И.Г. Сидоро вич. – М.: Медицина, 2000. – 432 с.

3.4. Лимфоцитарный иммунный ответ Специфические факторы защиты. Клеточный и гуморальный иммунитет.

Взаимодействие клеток в иммунном ответе. Трехклеточная система взаи модействия. Двойное распознавание. Роль макрофагов в иммунном ответе.

Основные этапы иммунного ответа. Реализация и понятие об иммунологиче ской памяти. Регуляция иммунопоэза. Связь иммунной, эндокринной и нерв ной систем в поддержании гомеостаза. Иммунологическая толерантность и иммуносупрессия.

Литература:

Гилберто, М. Клеточное взаимодействие / М. Гилберто, Оливеро Кастро, Джордж А. Дос Рейс // Межклеточное взаимодействие / Под ред.

У.К. де Мелло. –М.: Медицина, 1980. – С. 201-222.

Клиническая иммуногенетика и аллергология / Под ред. Л. Йегера в 3-х томах. –М.: Медицина, 1990. – Т. 1. – С. 68-92.

ОСНОВЫ ИММУНОЛОГИИ Козлов, В.А. Стволовая кроветворная клетка и иммунный ответ / В.А.

Козлов, И.Н. Журавкин, И.Г. Цырлова. – Новосибирск: Наука, 1982. – 222 с.

Комиссаренко, С.В. Механизмы реализации иммунологического рас познавания // Стволовые и иммунокомпетентные клетки в норме и при опу холевом росте. Сб. научн. тр. / отв. ред. З.А. Бутенко. – Киев: Наукова думка, 1981. – С. 148-159.

Кузник, Б.И. Современные представления о системе иммуногенеза и неспецифической резистентности организма / Б.И. Кузник, Н.В. Васильев // Иммуногенез, гемостаз и неспецифическая резистентность организма / Б.И.

Кузник, Н.В. Васильев, Н.Н. Цыбник. – М.: Медицина, 1989. – С. 12-40.

Ломакин, М.С. Медиаторы системы иммунологического надзора / М.С. Ломакин, Г. Бочко // Иммунология. – 1987. – № 3. – С. 17-22.

Ляшенко, В.А. Механизмы активации иммунокомпетентных клеток / В.А. Ляшенко, В.А. Дроженников, И.И. Молотковская. – М.: Медицина, 1988. – 240 с.

Нестренко, В.Г. Аутологичные идиотип-антиидиотипические взаимо действия и регуляция иммунного ответа / В.Г. Нестеренко // Иммунология.

– 1982. – № 2. – С. 5-15.

Нестеренко, В.Г. Регуляторные клетки и сетевые взаимодействия в им мунной системе // Клеточные факторы регуляции иммуногенеза / под ред.

В.А. Труфакина. – Новосибирск: Сиб. отд-е, 1985. – С. 71-87.

Петров, Р.В. Искусственные полиэлектролиты – новые биологически активные соединения, влияющие на иммуногенез /Р.В. Петров, Р.М. Хаитов // Медицинский реферативный журнал. – 1977. – № 7. – С. 18-27.

Петров, Р.В. Миграция стволовых клеток, Т- и В-лимфоцитов у высо ко- низкореагирующих на эритроциты барана линий мышей / Р.В. Петров, Р.М. Хаитов, А.А. Батырбеков // Журнал микробиологии. – 1976. - № 9. – С.

51-54.

Петров, Р.В. Контроль и регуляция иммунного ответа / Р.В. Петров, Р.М. Хаитов, В.И. Манько, А.А. Михайлова. – Л.: Медицина, 1981. – 312 с.

Рабсон, А. Основы медицинской иммунологии / А. Рабсон, А. Ройт, П.

Делвз. – М.: Мир, 2006. – 320 с.

Jacobs-Helber, S.M. Tumor necrosis factor-alpha expressed constitutively in erythroid cells or induced by erythropoietin has negative and stimulatory roles in normal erythropoiesis and erythroluekemia / S.M. Jacobs-Helber, K.H. Roh, D.

Bailey // Blood. – 2003. – V. 101. № 2. – P. 524-531.

Sennicov, S.V. Cytokine gene expression on erythroid cells / S.V. Sennikov, L.V. Eremina, D.M. Samarin // Eur. Cytokine Netw. – 1996. – V. 7. № 4. – P. 771 774.

Скоркина М.Ю., Погребняк Т.А.

Sennicov, S.V. Cytokine-synthesizing activity of erythroid cells / S.V. Sen nikov, L.V. Eremina, T.V. Injelevskaya // Rus. J. Immunol. – 2001. – V. 6. № 2. – P.

193-202.

3.5. Эффекторные механизмы иммунитета Антигензависимые и антителозависимые эффекторные механизмы имму нитета. Механизм реакции гиперчувствительности немедленного и замед ленного типов. Аллергия и иммунитет. Виды аллергии, анафилаксия. Пере нос клеточного иммунитета. Сенсибилизация и десенсибилизация.

Литература:

Клиническая иммуногенетика и аллергология / Под ред. Л. Йегера в 3-х томах. – М.: Медицина, 1990. – Т. 1. – С. 68-92.

4.3. Темы практических занятий № Тема практического занятия Кол-во часов Определение титра «естественных»

1 антибактериальных антител.

4.4 Темы лабораторных занятий № Тема лабораторной работы Кол-во часов Определение фагоцитарной активности лейкоцитов 1 периферической крови.

2 Определение активированных лимфоцитов крови. 3 Пересадка донорской кожи у амфибий. 4.5 Темы семинарских занятий № Тема семинара Кол-во часов 1 Методы иммунологических исследований. 2 Аллергические реакции организма. ОСНОВЫ ИММУНОЛОГИИ 5. УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ ДИСЦИПЛИНЫ 5.1 Рекомендуемая литература Основная литература:

Галактионов, В.Г. Иммунология /В.Г. Галактионов. – М.: Нива России, 2000. – 488 с.

Маянский, А.Н. Лекции по иммунологии / А.Н. Маянский. – Нижний Новгород: Изд-во НГМА, 2003. – 272 с.

Меньшиков, И.В. Основы иммунологии. Лабораторный практикум / И.В. Меньшиков, Л.В. Бедулева. – Ижевск: Изд. дом «Удмуртский универси тет», 2001. – 136 с.

Петров, Р.В. Иммунология / Р.В. Петров. – М.: Медицина, 1982. – с.

Скоркина, М.Ю. Основы иммунологии: учебное пособие/ М.Ю. Скор кина. – Белгород: Изд-во БелГУ, 2007. – 144 с.

Хаитов, Р.М. Иммунология / Р.М. Хаитов, Г.А. Игнатьева, И.Г. Сидоро вич. – М.: Медицина, 2000. – 432 с.

Дополнительная литература:

Арцимович, Н.Г. Иммунология эмбриогенеза / Н.Г. Арцимович. – М.:

МГУ, 1987. – 92 с.

Вершигора, А.Е. Основы иммунологии/ А.Е. Вершигора. – Киев: Вища школа, 1980. – 504 с.

Кульберг, А.Я. Молекулярная иммунология / А.Я. Кульберг. – М.: Выс шая школа, 1985. – 287 с.

Зарецкая, Ю.К. Клиническая иммуногенетика / Ю.К. Зарецкая. – М.:

Медицина, 1983. – 207 с.

Иммунологические методы / Под ред. Х. Фримеля. – М.: Мир, 1979. – 518 с.

Клиническая иммуногенетика и аллергология / под ред. Л. Йегера в 3-х томах. – М.: Медицина, 1990. – Т. 1. – С. 68-92.

Рабсон, А. Основы медицинской иммунологии / А. Рабсон, А. Ройт, П.

Делвз. – М.: мир, 2006. – 320 с.

Хаитов, Р.М. Экологическая иммунология / Р.М. Хаитов. – М.:

ВНИРО, 1995. – 220 с.

Чертков, И.Л. Клеточные основы кроветворения / И.Л. Чертков, А.Я.

Фриденштейн. – М.: Медицина, 1981. – 270 с.

Скоркина М.Ю., Погребняк Т.А.

5.2 Средства обеспечения освоения дисциплины 1. Программные пакеты: Windows XP, Internet Explorer, Microsoft Ofce, ВидеоТест-МастерМорфология, Nova;

2. Дидактические материалы для реализации программы контроля зна ний по дисциплине:

1) тестовые вопросы к разделам теоретического курса;

2) вопросы к практическим занятиям, семинарам и лабораторным работам;

3) материалы для проведения контрольных работ по разделам дисци плины;

4) типовые задачи и задания для проведения коллоквиума;

5) разработанные темы курсовых работ и рефератов;

6) вопросы для подготовки к курсовому экзамену;

7) вопросы, выносимые на итоговую государственную аттестацию.

3. Перечень основной графической информации, которая может быть ис пользована как преподавателем для наглядного изложения учебных материа лов дисциплины, так и студентами в процессе самоподготовки:

• схемы-плакаты – строения центральных и периферических органов иммунной системы, модель тримолекулярного рецептора Т-хелперов, схема строения молекул иммуноглобулинов, рисунок классификация антигенов, рисунок сетевых взаимодействий цитокинов, генетическая карта основных областей генов главного комплекса гистосовместимости, схема строения мо лекул МНС классов I и II по данным рентгеноструктурного анализа, схема развития иммунологических реакций при трансплантации и механизм их усиления;

они могут быть использованы в любой форме учебной деятель ности преподавателем и бакалаврами;

• слайды, используемые в лекционном курсе и лабораторном практикуме.

5.3. Материально-техническое обеспечение дисциплины Лаборатория физиологии клеток крови, анализатор визиуализации изо бражений и цитометрии «ВидеоТест», зондовая нанолаборатория, наноми кроскоп «Интегра Вита».

ОСНОВЫ ИММУНОЛОГИИ 6. МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ОРГАНИЗАЦИИ ОБУЧЕНИЯ «Основы иммунологии» рекомендуются к изучению в 6 семестре бакалав риата, что позволяет преподавателю опираться на те знания, которые были получены студентами ранее в ходе изучения дисциплин, отнесенных к бло ку естественных наук – «Физика» (3-4 семестры), «Биология» (2 семестр), «Химия» (1-2 семестр), «Клеточная биология» (5 семестр). В совокупности содержание этих дисциплины направлено на формирование целостного по нимания сущности живой материи и физико-химических процессов, опре деляющих проявления её свойств и признаков. Именно эти базовые знания нужны для более глубокого понимания иммунных механизмов, поскольку они определяют современные проблемы в области разработки нанобиомате риалов, нанолекарств и способов их адресной доставки, возможности транс плантации, биотестирования и мн. д.

Формирование общенаучных и инструментальных компетенций в процессе изучения курса «Основы иммунологии» открывает перед бакалаврами реаль ные возможности для осознанного выбора профильно-специализированных курсов и области их приложения в будущей профессиональной деятельности.

Студенты должны иметь свободный подступ к учебным и рабочим про граммам, заблаговременно ознакомиться с темами рефератов и курсовых ра бот, вопросами для самостоятельной работы и самоконтроля за ходом усвое ния знаний дисциплины. Данная информация должна быть представлена в любой форме – печатной или электронной.

Традиционные формы самостоятельной работы – конспектирование ста тей, первоисточников, написание рефератов и курсовых работ, могут быть значительно расширены. Наличие специализированных лабораторий по зволяет преподавателю планировать выполнение студентами лабораторно практических работ в учебных аудиториях под его руководством в рамках самостоятельной работы. Так, по изучаемой дисциплине из-за ограниченно сти аудиторных часов на самостоятельное выполнение выносятся практиче ские работы по темам – «Гистологическое строение органов иммуногенеза», «Подсчет числа лейкоцитов в камере Горяева. Определение лейкоформулы крови»;

теоретические вопросы темы «Главный комплекс гистосовмести мости, его роль при трансплантации тканей». Аудиторная самостоятельная работа позволяет студентам отрабатывать необходимые для эксперименталь ного исследования навыки и умения, проводить самооценку уровня усвоения знаний учебного курса, под руководством преподавателя в ходе самоподго товки и консультирования более глубоко рассматривать наиболее трудные для восприятия разделы курса.

Скоркина М.Ю., Погребняк Т.А.

Для выявления степени усвоения учебных материалов изучаемой дисци плины студентами может проводиться тестирование, решение проблемных задач и заданий.

Экзамен рекомендуется проводить в зачетную неделю.

При более углубленном изучении отдельных вопросов предмета студен там рекомендуется конспектирование научных статей, первоисточников, для этого они должны владеть навыками работы в библиотеке с каталогами и указателями. Поэтому студентов надо научить работать с научной лите ратурой, дав необходимую информацию по правильному составлению би блиографической карточки первоисточника. В частности, что первоначально обязательно записывается автор, затем название статьи или книги, выходные данные, согласно ГОСТу.

Пример:

Фалиер, Дж. М. Молекулярная биология клетки / Дж. М. Фалиер, Д.

Шилдс. – М.: Бином-Пресс, 2004. – 272 с.

Далее идет краткий конспект статьи или отдельных глав книги. Конспек тирование предполагает обозначение основных идей и направлений, изло женных в первоисточнике, при этом совершенно ненужно дословно перепи сывать авторский вариант текста. При дословном конспектировании текста обязательно необходимо указывать страницы, с которых сделан конспект.

В процессе освоения дисциплины предполагается подготовка студентами реферата (по предложенным темам). Объем реферата не должен превышать 10-15 страниц машинописного текста, объем курсовой работы – 20-25 стра ниц. Написание рефератов и курсовых работ позволит студентам системати зировать материал в данной области знаний, сформировать навыки подготов ки научных отчетов и статей, позволит выработать умения логично излагать собственные умозаключения и делать обоснованные выводы.

Для ознакомления студентов с требованиями к оформлению реферата можно провести консультацию в часы аудиторной подготовки.

7. ПЕРЕЧЕНЬ ЗАДАНИЙ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ ОСНОВЫ ИММУНОЛОГИИ 8. ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ 1. Возникновение и развитие иммунологии. Исторические этапы разви тия иммунологии.

2. Основоположники научной иммунологии – Л. Пастер, Э. Беринг, Р. Кох.

Роль И. Мечникова, П. Эрлиха, Н.Н. Чистовича, К. Ландштейнера в разработ ке неинфекционной иммунологии.

3. Открытие иммунологической толерантности (П. Медавар, М. Гашек).

Роль российских ученых в развитии иммунологии (И.И. Мечников, Н.Ф. Го малея, А.А. Максимов, С. Метальников, Л.Л. Зильбер, П.Н. Косяков, А.А.

Адо, Р.В. Петров и др.).

4. История изучения тимуса. Иммунобиотехнология получения и приме нения различных гормонов и фракций тимуса.

5. Синтетические антигены (полиаминокислоты).

6. Изоантигены человека тромбоцитов, белков плазмы.

7. Система Н-2 и НLА: наследование, распределение в тканях, функция.

8. История открытия и изучения антител.

9. Генетический контроль структуры иммуноглобулинов.

10. Синтез антител in vitro и гибридомы.

11. Определение концентрации иммуноглобулинов в сыворотке и в секре тах методом радиальной иммунодиффузии.

12. Получение моноспецифических антисывороток против иммуноглобу линов разных классов. Иммуносорбция и иммуносорбенты.

13. Виды иммунитета у различных представителей животного мира: кон ституционный (врожденный) и приобретенный (активный и пассивный).

14. Аллергические антитела – реагины и IgE.

15. Роль ГТЗ в инфекционных процессах, трансплантационном и проти воопухолевом иммунитете. Виды аллергии, анафилаксия.

16. Сенсибилизация и десенсибилизация.

17. Главный комплекс гистосовместимости и болезни человека.

18. История становления трансплантационной иммунологии А. Каррель, П. Медовар.

19. Чистолинейные животные. Генетические законы совместимости тка ней.

20. Околоплодные оболочки и жидкости в регуляции иммунологических отношений мать – плацента – плод.

21. Профилактика антирезусной сенсибилизации.

22. Специфическая иммунокоррекция и профилактика иммуноде фицитов.

23. Становление антигенной структуры тканей в ходе эмбриогенеза.

Скоркина М.Ю., Погребняк Т.А.

24. Старение. Иммуногенетические основы старения. Причины и меха низмы нарушения иммунитета в старости.

9. ВОПРОСЫ ДЛЯ ЭКЗАМЕНА – Иммунология как наука, предмет, задачи, перспективы развития.

– Методы исследования в иммунологии. Клонирование клеток и генов.

Метод нокаута генов.

– Методы иммуноанализа, их сущность и разновидности (конкурентный ИФА, ингибиторный ИФА, Сэндвич-ИФА, иммунометрические анализы).

– Принципы организации и функционирования иммунной системы.

Основные этапы иммунного ответа.

– Антитела, их структура и свойства. Изотипы, аллотипы и идиотипы иммуноглобулинов.

– Гены иммуноглобулинов.

– Феномены взаимодействия антиегн-антитело.

– Антигены, их структура и классификация.

– Адъюванты.

– Центральные органы иммунной системы, их строение и роль в имму нитете.

– Периферические органы иммунной системы их строение и роль в им мунитете.

– Клетки иммунной системы: В-лимфоциты, их субпопуляции, строение рецепторного аппарата, антигенная активация BCR.

– Дифференцировка В-лимфоцитов.

– Клетки иммунной системы: Т-лимфоциты, их субпопуляции, строение рецепторного аппарата.

– Активация Т-лимфоцитов.

– Строение и функции главного комплекса гистосовместимости.

– Механизмы образования антигенов с молекулами главного комплекса гистосовместимости.

– Система комплемента, альтернативный и классический пути актива ции.

– Фагоцитоз, основные стадии процесса.

– Эндогенные пептиды-антибиотики.

– Система натуральных киллеров, ее функциональное значение.

– TLR-рецепторы неспецифического иммунитета.

– Лимфоцитарный иммунный ответ. Клеточные кооперации. Молекулы межклеточной адгезии, семейства цитокинов.

– Взаимодействия Т- и В-лимфоцитов, двойное распознавание.


ОСНОВЫ ИММУНОЛОГИИ – Иммунологическая память.

– Биологические эффекты цитокинов.

– Общая характеристика и классификация цитокинов.

– Супрессия иммунного ответа. Иммунологическая толерантность.

– Эффекторные механизмы иммунитета.

– Механизмы реакций гиперчувствительности немедленного и замед ленного типа.

– Аллергия, ее формы, биологический смысл.

– Регуляция иммунитета. Идиотип-антиидиотипические взаимодей ствия.

– Трансплантационный иммунитет. Виды трансплантации.

– Генетические законы трансплантации.

– Иммунологическая природа отторжения. Механизм деструкции транс плантата.

10. ПРИМЕРНЫЕ ТЕМЫ РЕФЕРАТОВ 1. Роль российских ученых в развитии иммунологии.

2. Нобелевские лауреаты по иммунологии.

3. Создание и применение вакцины, стимуляция иммунитета при инфек циях.

4. История изучения тимуса.

5. Иммунобиотехнология получения и применения различных гормонов и фракций тимуса.

6. Синтетические антигены (полиаминокислоты).

7. Система Н-2 и НLА: наследование, распределение в тканях, функция.

8. История открытия и изучения антител.

9. Миелоидные белки.

10. Генетический контроль структуры иммуноглобулинов.

11. Синтез антител in vitro и гибридомы.

12. Иммунодиффузионный анализ, иммуноэлектрофорез.

13. Определение концентрации иммуноглобулинов в сыворотке и в секре тах методом радиальной иммунодиффузии.

14. Получение моноспецифических антисывороток против иммуноглобу линов разных классов.

15. Иммуносорбция и иммуносорбенты.

16. Виды иммунитета у различных представителей животного мира: кон ституционный (врожденный) и приобретенный (активный и пассивный).

17. Аллергические антитела – реагины и IgE.

18. Виды аллергии, анафилаксия.

Скоркина М.Ю., Погребняк Т.А.

19. Главный комплекс гистосовместимости и болезни человека.

20. История становления трансплантационной иммунологии А. Каррель, П. Медовар.

21. Чистолинейные животные. Генетические законы совместимости тканей.

Специфическая иммунокоррекция и профилактика иммунодефицитов.

11. ПРИМЕРНЫЕ ТЕМЫ ДЛЯ НАПИСАНИЯ КУРСОВЫХ РАБОТ 1. Определение активированных лейкоцитов крови больных сахарным диабетом.

2. Изучение лекйкоцитарного профиля крови у больных псориазом.

3. Изменение биометрических индексов лейкоцитов крыс при экстремальных воздействиях.

4. Экспериментальные модели феноменов отторжения биоактивных имплантатов и нанопокрытий, используемых для костных протезов.

5. Показатели состояния иммунитета при кожных заболеваниях различной этиологии.

6. Исследование активности кислых гидролаз сыворотки крови как показателя активации иммунокомпетентных клеток.

12. ТРЕБОВАНИЯ К ОФОРМЛЕНИЮ РЕФЕРАТА (КУРСОВОЙ РАБОТЫ) 1. Техническое оформление реферата должно соответствовать требова ниям, предъявляемым к печатным работам. Курсовая работа, как правило, включает введение, основную часть, заключение, список использованных источников, приложения.

2. Текст работы должен быть напечатан на компьютере через полуторный ин тервал интервала на одной стороне стандартного листа белой_ бумаги фор мата А-4 (210x297). Шрифт текста должен быть четким. Размер шрифта 14.

Межстрочный интервал полуторный. Страницы должны иметь поля: левое - 25-30 мм, правое - 10 мм, верхнее -20 мм, нижнее 25мм. Абзацный отступ должен быть 1,5. Заголовки отделяются от текста сверху двумя, снизу одним интервалом. Текст на иностранном языке может быть целиком впечатан или вписан от руки. Курсовая работа должна быть сброшюрована в твердую об ложку.

3. Все страницы реферата, включая иллюстрации и приложения, нумеру ются по порядку от титульного листа до последней страницы без пропусков, повторений. Первой страницей является титульный лист, номер страницы на нем не ставится. На последующих страницах порядковый номер печатается в ОСНОВЫ ИММУНОЛОГИИ середине или сбоку верхнего края страницы. После титульного листа следует содержание, в котором последовательно приводится название глав и парагра фов, указываются номера страниц, на которых они начинаются.

4. Введение. Во введении должна быть показана актуальность темы в условиях современного общественного развития, обоснована необходи мость ее разработки применительно к выбранному объекту исследования, приведены цели и задачи, методы исследования.

5. Основная часть. Текст основной части подразделяют на отдельные части: разделы, подразделы, пункты.

Иллюстрации (кроме таблиц) обозначаются словом «Рис.» и нумеруются последовательно арабскими цифрами в пределах раздела.

Номер схем, графиков должен состоять из номера раздела и порядкового но мера иллюстрации, разделенного точкой, например: Рис. 2.1. (первый рисунок второго раздела).

Номер рисунка с поясняющей подписью помещают ниже самого рисунка.

Если в реферате приведена одна иллюстрация, то ее не номеруют и слово «Рис.» не пишут.

Качество рисунков, схем должно быть высоким, они должны быть выпол нены черной тушью или черными чернилами или на компьютере на белой не прозрачной бумаге.

Таблицы нумеруют последовательно арабскими цифрами в пределах раз дела. В правом верхнем углу таблицы под соответствующим заголовком по мещают надпись «Таблица» с указанием номера этой таблицы, состоящего из номера раздела и порядкового номера таблицы, например: «Таблица 2.З.».

Таблицу размещают после первого упоминания о ней в тексте таким об разом, чтобы читать ее можно было без поворота работы или с поворотом по часовой стрелке. Ссылка на таблицу по ходу текста выполняется так: в табл.

2.3. приводятся данные о…………, при повторной ссылке – см. табл. 2.3.

Примечание к таблице размещается непосредственно под ней.

Формулы должны быть вписаны в текст от руки тщательно и разборчиво, черными чернилами (тушью).

Выше и ниже каждой формулы должно быть оставлено не менее одной сво бодной строки. Размеры знаков для формулы рекомендуются следующие: про писные буквы и цифры - 7-8 мм, строчные - 4 мм, показатели степени и индек сы не менее 2 мм.

6. При оформлении курсовой работы и реферата используются литератур ные источники. Фрагмент содержания источника или научного исследования, используемого при выполнении работы, может быть дан в виде цитаты, которая должна полностью соответствовать подлиннику. Цитата обяза тельно заключается в кавычки. Данные источники могут быть изложены сво Скоркина М.Ю., Погребняк Т.А.

ими словами, однако, при этом также необходимо делать ссылку.

В зависимости от назначения ссылки на источники и на литературу могут быть трех видов: ссылки на цитируемые источники и литературу;

ссылки на упоминаемые источники и литературу без их цитирования;

рекомендуемые, когда автор проекта отсылает читателя к тем источникам, в которых с большей полнотой раскрываются определенные положения или факты.

Возможны два основных варианта ссылок. Первый заключается в постра ничном приведении ссылок. В этом случае цитата или упоминание источника снабжается цифрой (звездочкой и т.д.), а соответствующая ссылка с обозначе нием источника приводится внизу страницы под тем же номером (звездочкой).

Для оформления курсовой работы более предпочтителен второй вариант, предполагающий использование затекстовых ссылок. В этом случае после упоминания источника ставятся квадратные скобки с указанием номера лите ратурного источника по списку литературы или номера источника и номера страницы, на которой приведен цитируемый материал. Например: [7, С. 4-5].

7. Список литературных источников (библиографический список) приво дится в конце работы. Список содержит перечень источников, используемых при выполнении работы.

Материал в списке литературы рекомендуется располагать в алфавитном порядке, раздельно в русском и латинском алфавите. Библиографическое опи сание включает следующие элементы: заголовок описания – фамилия и инициа лы автора или авторов;

название, область выходных данных – место издания, издательство, дата издания, сведения об объеме издания, в соответствии с ГО СТом.

СЛОВАРЬ ТЕРМИНОВ Авидность (функциональная аффинность) – прочность связывания двух молекул (например, антигена и антител), определяемая валентностью взаимодействия.

Агглютинация – агрегация частиц, например эритроцитов или бактерий, вызываемая антителами.

Адъювант – любое вещество, неспецифически усиливающее иммунный ответ на антиген.

Аллель – вариант полиморфного гена в данном генетическом локусе.

Аллельное исключение – феномен, состоящий в том, что после про дуктивной перестройки одного из аллелей гена антигенного рецептора перестройка другого унаследованного аллеля подавляется, благодаря чему каждый лимфоцит экспрессирует только одну специфичность антигенного рецептора.

ОСНОВЫ ИММУНОЛОГИИ Аллотип – аллельный вариант антигена, который присутствует не у всех особей данного вида и поэтому может обладать иммуногенностью для осо бей этого вида, имеющих иной аллельный вариант.

Анафилаксия – реакция гиперчувствительности, вызываемая антителами IgE или дегрануляцией тучных клеток под влиянием анафилатоксинов. При водит к развитию анафилактического шока, обусловленного расширением сосудов и сокращением гладкой мускулатуры, часто с летальным исходом.

Анафилатоксины – продукты расщепления компонентов комплемента (СЗа, С4а или С5а), способные непосредственно индуцировать дегрануля цию тучных клеток.

Анергия – потенциально обратимое состояние специфической имму нологической толерантности, при котором лимфоциты утрачивают способ ность отвечать на антиген.

Антиидиотип, несущий «внутренний образ» антигена – эпитоп антии диотипа, структурно и функционально имитирующий антиген по характери стикам связывания с идиотипом.

Антителозависимая клеточная цитотоксичность (АЗКЦ) - цитотокси ческая реакция, опосредованная взаимодействием клеток-мишеней, покры тых антителами, с эффекторными клетками, несущими Fс-рецепторы (NK клетками, макрофагами или нейтрофилами).


Апоптоз – форма апрограммированной клеточной гибели, характеризую щаяся расщеплением ДНК эндонуклеазами.

Аффинность (внутренняя аффинность). Прочность связывания (кон станта аффинности) рецептора (например, антигенсвязывающего участка молекулы антител) с лигандом (например, эпитопом антигена).

Белки острой фазы воспаления – сывороточные белки, продуцируемые в основном клетками печени;

концентрация этих белков изменяется (возрас тает или снижается, в зависимости от белка) в начальной фазе воспалитель ной реакции.

-глобулины – фракция ывороточных белков, состоящая из иммуногло булинов и обладающая наибольшей подвижностью (скоростью перемещения к катоду) при электрофорезе.

Гаплотип – комплекс аллельных вариантов генов, присутствующих в данной генетической области.

Гаптен – низкомолекулярное соединение, распознаваемое ранее синте зированными антителами, но само по себе не иммуногенное. В составе ком плекса с молекулой-носителем приобретает свойства эпитопа, распознавае мого хелперными Т-клетками.

Гены ТАР – кодируют белки, переносящие антигенные пептиды из цито плазмы в просвет эндоплазматического ретикулума, где эти пептиды образу ют комплекс с молекулами МНС класса I.

Скоркина М.Ю., Погребняк Т.А.

Гипервариабельные участки – аминокислотные последовательности в молекулах иммуноглобулинов и в вариабельной области Т-клеточных рецеп торов, обладающие наибольшим разнообразием и формирующие основную структуру участков связывания антигена или комплекса пептид-молекула МНС.

Гиперчувствительность замедленного типа (ГЗТ) – реакция гиперчув ствительности, развивающаяся в течение 48-72 ч как результат секреции ци токинов сенсибилизированными Т-клетками.

Главный комплекс гистосовместимости, МНС – комплекс (область) ге нов, продукты которых (молекулы МНС) презентируют антигены Т-клеткам.

Молекулы МНС класса I присутствуют практически на всех содержащих ядро клетках;

у человека их кодируют гены НLА-А, НLА-В и НLА-С. Моле кулы МНС класса II экспрессируют антигенпрезентирующие клетки (макро фаги, В-клетки и дендритные клетки).

Гуморальный – относящийся к внеклеточным жидкостям организма, на пример к плазме лимфе. Термин гуморальный иммунитет означает иммун ный ответ, опосредованный антителами.

Идиотипы антител – уникальные детерминанты на поверхности молеку лы иммуноглобулина, локализованные в области антигенсвязующих частей молекулы иммуноглобулина или ассоциированных с этой областью. Идио тип антитела - отражение специфичности антитела по антигену.

Идиотипическая сеть – регуляторная сеть, в основе функции которой лежит взаимодействие идиотипов и антиидиотипов, присутствующих на ан тителах и Т-клеточных рецепторах.

Изотипы иммуноглобулина – структура константной области присут ствующая у всех нормальных особей и характеризующая класс или подкласс антител.

Иммунный комплекс – комплекс, образующийся в результате связывания антител с антигеном,. Может содержать также компоненты комплемента.

Иммуноген – любое вещество, способное вызывать иммунный ответ. Все иммуногены представляют собой антигены, но не все антигены являются иммуногенами (см. Гаптен).

Корецептор – белок клеточной поверхности, усиливающий взаимодей ствие антигенного рецептора с антигеном и принимающий участие в переда че сигнала внутрь клетки;

CD4 и CD8 корецепторы Th и Tk соответственно;

CD19 корецептор В-клеток.

Лектины – белки и гликопротеины, способные к специфическому связы ванию с углеводами. Выделяют из семян растений, присутствуют у большин ства живых организмов. Обладают избирательной митогенной активностью в отношении субпопуляций лимфоцитов.

ОСНОВЫ ИММУНОЛОГИИ Митоген – вещество, неспецифически индуцирующее пролиферацию лимфоцитов.

Молекулы, ассоциированные с патогенными микроорганизмами (РАМР) - разнообразные молекулы поверхности микробных клеток, такие как липополисахариды, пептидогликаны, липотейхоевые кислоты и манна ны, экспрессируемые патогенными микроорганизмами в виде повторяющих ся мотивов, но отсутствующие в тканях организма-хозяина. Клетки иммун ной системы обладают рецепторами, распознающими РАМР, и благодаря этому отличают их от антигенов собственного организма.

Моноклональные антитела - однородные антитела, продуцируемые В-клетками одного клона и поэтому характеризующиеся идентичными анти генсвязывающими участками и изотипом.

Опсонизация – связывание с антигеном опсонинов, стимулирующих фа гоцитоз.

Опсонины – различные агенты, например антитела или СЗЬ, которые стимулируют фагоцитоз, способствуя адгезии антигена к фагоцитам.

Отрицательная селекция – делеция (посредством апоптоза) Т-клеток, присутствующих в тимусе и распознающих собственные пептиды, презен тированные собственными молекулами МНС. Представляет собой механизм, препятствующий образованию аутоиммунных Т-клеток. Дифференцирую щиеся В-клетки также предположительно подвергаются отрицательной се лекции под влиянием собственных антигенов, присутствующих в высокой концентрации в костном мозге.

Паратоп – антигенсвязывющий центр молекулы иммуноглобулина.

Перфорин – белок, продуцируемый цитотоксическими Т-клетками и NК клетками;

полимеризуется, подобно компоненту комплемента С9, с образо ванием поры в мембране клетки-мишени и тем самым вызывает ее гибель.

Положительная селекция – отбор развивающихся в тимусе Т-клеток, способных распознавать собственные молекулы МНС, для предотвращения апоптоза этих Т-клеток.

Процессинг антигена – многоэтапная переработка антигена в антиген презентирующих клетках, сопровождающаяся его разрушением и презента цией в комплексе с белками МНС.

Реакция трансплантат против хозяина (РТПХ) – реакция, возникаю щая при взаимодействии Т-клеток, присутствующих в трансплантате, с клет ками реципиента.

Рестрикция по МНС – генетические ограничения функции Т-клеток в индукции, межклеточной кооперации, эффекторных механизмов иммунного ответа, проявляющиеся в способности распознавать антигены в комплексе только с собственными МНС. Разные субпопуляции имеют различные эле Скоркина М.Ю., Погребняк Т.А.

менты ограничения (рестрикции). Th – молекулы МНС II, Тk – MHC I. Ре стрикция формируется в тимусе.

Селектины – поверхностные рецепторы нейтрофилов и моноцитов, отве чающие за адгезивные свойства, обеспечивающие качание фагоцитов перед их твердым прикреплением к эндотелиальным клеткам.

Соматическое гипермутирование – повышение частоты точковых му таций в генах вариабельной области иммуноглобулинов после антигенной стимуляции. Один из механизмов увеличения разнообразия антител и повы шения их аффинности.

С-реактивный белок – острофазный белок, способный связываться с по верхностью микроорганизмов и тем самым стимулировать активацию ком племента по классическому пути. Выполняет также функцию опсонина при фагоцитозе.

Суперсемейство иммуноглобулинов – семейство белков, в молекулах которых присутствуют домены иммуноглобулинового типа;

эти домены, содержащие примерно 110 кислотных остатков, характеризуются тем, что пептидная цепь свернута в них с образованием двух -складчатых слоев. К белкам данного суперсемейства относятся иммуноглобулины, Т-клеточные рецепторы и молекулы МНС.

Т-зависимый антиген – антиген, вызывающий образование антител при участии Т-клеток.

Тимоцит – Т-клетка в процессе ее дифференцировки в тимусе.

Т-независимый антиген – антиген, способный индуцировать продук цию антител в отсутствии Т-клеток.

Толеранстность – ареактивность организма на собственные антигены.

Формируется в эмбриональный период по механизму клональной делеции (для Т-клеток) или клональной анергии (для В-клеток).

Хемокины – семейство структурно родственных цитокинов, избиратель но индуцирующих хемотаксис и активацию лимфоцитов. Играют важную роль в развитии лимфоидных органов, распределении лимфоцитов в лим фоидных органах, возникновении иммунного ответа по Тh1- или Тh2-типу, ангиогенезе и заживлении ран.

Хемотаксис – миграция клеток по градиенту концентрации хемоаттрак тантов.

Центры размножения – особые области в лимфоузлах и селезенке, где происходит созревание В-клеток и образование клеток памяти.

Цитокины – низкомолекулярные белки, стимулирующие или ингиби рующие дифференцировку, пролиферацию или функции клеток иммунной системы.

ОСНОВЫ ИММУНОЛОГИИ Эндотоксин – липополисахарид клеточной стенки грамотрицательных бактерий, обладающий патогенными свойствами.

Эпитоп – структурный элемент антигена, распознаваемый антигенным рецептором, антигенная детерминанта.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ BCR – B-cell receptor – рецептор В-лимфоцита для антигена CSF – colony-stimulating factor – колониестимулирующий фактор CD – cluster of differentiations antigens – антигены кластеров дифференци ровки клеток CR – complement receptor –рецептор для компонентов комлемента DC – dendritic cells – дендритные клетки FDC –follicular dendritic cells – фолликулярные дендритные клетки HLA – human leukocyte antigens – антигены лейкоцитов человека IFN – interferon – интерферон Ig – immunoglobulin – иммуноглобулины Ig – полипептид, в составе рецептора В-лимфоцитов для антигена (BCR) Ig – полипептид, входящий в состав рецептора В-лимфоцитов для ан тигена (BCR) IL – inter-leukin – интерлейкин ITAM – immunoreceptor-tyrosin-based activation motif – последовательно сти остатков аминокислот, включающие тирозин, в молекулах иммунорецеп торов GM-CSF – granulocitarno-monocitarno cell-stem factor – гранулоцитарно моноцитарный фактор роста клеток LFA-1, 2, 3 – leukocyte function-associated antigen – антигены лейкоцитов, ассоциированные с функциями MHC – major histocompatibility complex – главный комплекс гистосовме стимости NK – normal killer – нормальные киллеры NOD-белки – nucleotide binding oligamerization –нуклеотидные последо вательности олигомеров PAMP – pathogen-associated molecular patterns – паттерны патогенов RAG – recombination-activatihg genes – гены, активирующие рекомбина цию ДНК. Гены RAG-1, RAG-2 кодируют гетеродимерные эндонуклеазы TAPA-1 – target of antiproliferative antibody – мишень для натипролифера тивных анител SCGF – stem-cell growth factor – фактор роста тучных клеток TCR – T-cell receptor – рецептор Т-лимфоцитов для антигена Скоркина М.Ю., Погребняк Т.А.

TGF – transforming grows factor – трансформирующий фактор роста TLR – Toll-like receptor – толл-рецептор, рецептор неспецифического им мунитета Tk – Т-киллер Ts – Т-супрессор Th – Т-хелпер TNF – tumor necrosisfactor – фактор некроза опухолей VDJ – рекомбинация-перестройка ДНК иммуноглобулинов или TCR ва риабельной области (V – variable), области дополнительного разнообразия (D – diversity) и связующей области (J – joining) VJ-рекомбинация – перестройка ДНК генов иммуноглобулинов или генов TCR областей V и J.

СКК – стволовая кроветворная клетках.

ЧАСТЬ 3.

УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКИЕ МАТЕРИАЛЫ ДЛЯ ПРАКТИЧЕСКИХ ЗАНЯТИЙ, СЕМИНАРОВ, ЛАБОРАТОРНЫХ РАБОТ Скоркина М.Ю., Погребняк Т.А.

ВВЕДЕНИЕ Практикум по «Основам иммунологии» рассчитан на 10 аудиторных ча сов. Его основная цель – развитие умений по овладению эксперименталь ными методами классической иммунологии. Студентам предлагается выпол нить лабораторные работы, экспериментально подтверждающие основные теоретические положения в развитии реакций врожденного и приобретен ного иммунитетов. В теме «Врожденный иммунитет» планируется выполне ние работы по определению фагоцитарной активности макрофагов с целью экспериментального изучения основных этапов фагоцитоза. В теме «Анато мия иммунной системы» студентам предлагается 2 работы – по изучению гистологического строения органов иммуногенеза и подсчета числа лейко цитов камере Горяева. В процессе выполнения первой работы следует ис пользовать гистологические препараты и атласы. Обе работы вынесены на самостоятельное их аудиторное выполнение в присутствии преподавателя в соответствии с ниже рекомендуемыми учебно-методическими материалами.

Перед каждой лабораторной работой приведены краткие сведения по теме и подробно описаны ход работы и форма представления результатов.

Общий план практикума по «Основам иммунологии»

№ Тема Наименование лабораторной работы 1 Врожденный № 1. Определение фагоцитарной иммунитет активности лейкоцитов периферической крови 2 Анатомия № 2. Гистологическое строение органов иммунной системы иммуногенеза № 3. Подсчет числа лейкоцитов в камере Горяева. Определение лейкоформулы крови.

3 Лимфоцитарный № 4 Определение активированных иммунный ответ лимфоцитов крови 4 Трансплантацион- № 5 Пересадка донорской кожи ный иммунитет у амфибий УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКИЕ МАТЕРИАЛЫ ДЛЯ ЛАБОРАТОРНЫХ РАБОТ Лабораторная работа № 1. Определение фагоцитарной активности лейкоцитов периферической крови Цель работы: изучить основные этапы процесса фагоцитоза, оценить фа гоцитарный индекс, фагоцитарное число и фагоцитарную способность лей коцитов человека.

ОСНОВЫ ИММУНОЛОГИИ Общие сведения по теме Процесс фагоцитоза был открыт русским ученым И.И. Мечниковым. Он открыл два типа циркулирующих фагоцитов: полиморфноядерные нейтро филы, названные им микрофагами, и более крупные клетки – макрофаги.

Нейтрофилы, составляющие большую часть лейкоцитов крови, представля ют собой неделящиеся, короткоживущие клетки с сегментированным ядром.

В этих клетках присутствуют первичные азурофильные гранулы, содержа щие миелопероксидазу, дефензины, бактерицидный повышающий прони цаемость белок, катепсин G, и вторичные специфические гранулы, содер жащие лактоферин, лизоцим, щелочную фосфатазу и мембранносвязанный цитохром b558.

Макрофаги образуются из моноцитов крови, которые мигрируют в ткани, формируя там систему мононуклеарных фагоцитов. Макрофаги присутству ют повсеместно в соединительно ткани и вокруг базальной мембраны мел ких кровеносных сосудов, концентрируются в легких (альвеолярные макро фаги) и печени (клетки Купфера), выстилают синусы селезенки и мозгового слоя лимфоузлов. В отличие от нейтрофилов макрофаги относятся к долго живущим клеткам, имеют хорошо развитый эндоплазматический ретикулум и митохондрии. Нейтрофилы обеспечивают основную защиту от гноеродных бактерий, макрофаги выполняют фагоцитарную функцию против бактери альных клеток, вирусов и простейших, обитающих в клетках организма хозяина.

Показателями фагоцитарной активности этих клеток являются:

8. фагоцитарный индекс (ФИ) – процент фагоцитов, имеющих поглощен ные частицы от общего числа фагоцитов;

9. фагоцитарное число (ФЧ) – среднее число объектов фагоцитоза, погло щенных одним фагоцитом, 10. фагоцитарная способность – произведение числа фагоцитов соот ветствующего типа в 1 мкл крови на фагоцитарный индекс и фагоцитарное число.

Для оценки фагоцитарной активности нейтрофилов крови цельную кровь или лейковзвесь культивируют в присутствии объекта фагоцитоза – микроб ных, дрожжевых клеток, эритроцитов животных, частиц латекса и через определенное время готовят мазки, которые фиксируют и окрашивают по Романовскому-Гимзе.

Реактивы и оборудование: гепарин (20 ед/мл), латекс (или взвесь пекар ских дрожжей на забуференном физрастворе), водяная баня, сыворотка че ловека, этанол, краситель по Романовскому-Гимзе, центрифуга BBV3 Jouan, предметные стекла, микроскоп МИКМЕД-5, масло для иммерсии, камера Горяева.

Скоркина М.Ю., Погребняк Т.А.

Порядок выполнения работы 1. Получить лейковзвесь методом осмотического гемолиза. В качестве антикоагулянтов использовать гепарин (20 ед/мл), так как ЭДТА и цитрат связывают катионы Ca2+, Mg2+, необходимые для фагоцитоза. Лейкоциты от мыть. Можно использовать цельную кровь.

2. К 50 мл отмытой лейковзвеси или крови добавляют 50 мкл латекса или взвесь пекарских дрожжей на забуференном физрастворе, убитых нагрева нием на кипящей водяной бане в течение 30 мин. В качестве источника оп сонинов (иммунный фагоцитоз) к взвеси дрожжей предварительно добавить свежей сыворотки крови человека и инкубировать при 370 С в течение мин. Взвесь микробов отмыть и использовать в реакции. Соотношение объ ект фагоцитоза/фагоцит должно быть 5:1 – 50:1. Встряхнуть и инкубировать при 370 С в течение 1 часа.

3. Сделать мазки, зафиксировать их этанолом, окрасить по Романовскому Гимза. Микроскопировать при увеличении 90 под масляной иммерсией.

4. Подсчитать 100 фагоцитов. Определить фагоцитарное число, фагоци тарный индекс.

5. Для расчета фагоцитарной способности нейтрофилов рассчитайте об щее количество нейтрофилов в 1 мкл крови в камере Горяева. Рассчитать фагоцитарную способность нейтрофилов крови.

Содержание отчета Отчет по результатам работы представьте в виде таблицы.

Показатели фагоцитарной активности нейтрофилов крови Сделайте вывод относительно фагоцитарной активности нейтрофилов ис следуемой крови, сравнив полученные данные с величинами нормы. В норме фагоцитарный индекс составляет 40-80%, фагоцитарное число – 4-9.

Контрольные вопросы 7. Что представляют собой макрофаги?

8. Понятие о ретикулоэндотелиальной системе как о системе фагоцитоза.

9. Какие клетки входят в мононуклеарную фагоцитарную систему?

10. Что такое фагоцитоз?

ОСНОВЫ ИММУНОЛОГИИ 11. Какие индексы являются показателями фагоцитарной активности кле ток, как они рассчитываются?

Лабораторная работа № 2. Гистологическое строение органов иммуногенеза Цели работы: изучить гистологическое строение центральных и периферических органов иммуногенеза;

научиться определять на микроскопическом уровне тканевые компоненты органов иммуногенеза.

Общие сведения по теме К центральным органам иммунной системы относят тимус (вилочковую железу), сумку Фабрициуса, встречающуюся только у птиц, ее аналог у мле копитающих – красный костный мозг. К периферическим органам иммунной системы относят селезенку и лимфатические узлы.

Тимус состоит из нескольких долек, образуемых сетью эпителиальных клеток. В каждой дольке различают корковое и мозговое вещество. Сеть эпи телиальных клеток создает микроокружение необходимое для дифференци ровки Т-лимфоцитов. Эпителиальные клетки в глубине корковой зоны име ют дендритные отростки, несущие на поверхности молекулы МНС класса II.

Эти отростки соединены десмосомами, образуют сеть, через которую долж ны пройти лимфоциты из корковой зоны в мозговую. Лимфоциты корковой зоны на границе с мозговым веществом подвергаются апоптозу в результате положительной или отрицательной селекции. В мозговой зоне присутству ют интердигитальные дендритные клетки костномозгового происхождения.

Эпителиальные клетки в этой зоне экспрессируют на своей поверхности мо лекулы МНС классов I и II.

Особенность строения лимфоузлов состоит в анатомическом разделении областей созревания Т- и В-лимфоцитов. В корковом слое лимфоузла распо ложены фоликулярные скопления В-лимфоцитов. В нестимулируемом лим фоузле они имеют сферическую форму и называются первичными фоллику лами. После антигенной стимуляции лимфоузла его первичные фолликулы преобразуются во вторичные. Периферическая часть вторичного фолликула (мантия) представляет собой концентрический слой из плотно упакованных покоящихся малых В-лимфоцитов, несущих на поверхности IgM и IgD. Ман тия окружает бледно окрашенный центр размножения, содержащий круп ные пролиферирующие В-лимфобласты. Центры размножения значительно увеличиваются в размерах при вторичном гуморальном ответе, представляя собой структуры, где происходит созревание В-лимфоцитов и образование В-клеток памяти. Т-клетки в лимфоузле расположены в паракортикальной Скоркина М.Ю., Погребняк Т.А.

области. В процессе развития Т-клеточного ответа происходит пролифера ция клеток в паракортикальной области и образование лимфобластов.



Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 6 |
 





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.