авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:     | 1 || 3 |

«СПИСОК ОСНОВНЫХ ИСПОЛНИТЕЛЕЙ по Государственному контракту П1080 от 24 августа 2009 на выполнение поисковых научно- исследовательских работ для государственных нужд ...»

-- [ Страница 2 ] --

При дальнейшем снижении рН крови до 7,0 и продолжительности ацидоза 60 мин в трабеку лярных сосудах просвет умеренно спавшийся, встречаются единичные артерии с нормальным про светом. Отмечается расслоение крови, агрегация форменных элементов, десквамация эндотелия в артериях. Стенка артерий сохраняет свою структу, с признаками отека. В трабекулярных венах просвет расширен, происходит расслоение крови, агрегация форменных элементов, тромбоз. Стенка сосудов отечна. Явления отека усиливаются, увеличивается поперечник капсулы и подкапсулярных трабекул. Соединительная ткань капсулы, подкапсулярных трабекул утолщена. Ядра фибробластов и гладкомышечных клеток слабо окрашены гематоксилин-эозином. Границы между лимфатически ми узелками и красной пульпой размыты, в большинстве узелков отсутствуют Т-зоны. Пульпарные артерии спазмированы. В красной пульпе венозные синусы полнокровны, отмечаются мелкоочаго вые кровоизлияния (фото 3.10). Единичные клетки соединительной ткани содержат гранулы глико гена. Аргирофильные волокна общих сосудистых влагалищных оболочек капсулы, подкапсулярных трабекул, лимфатических узелков теряют способность интенсивно импрегнироваться азотнокислым серебром, нечеткие, происходит их фрагменация.

Углубление степени ацидоза до рН 6,8 и ниже (экспозиция 120 – 180 мин) сопровождается следующими изменениями. Трабекулярные вены полнокровны, выявляются тромбы в просвете со судов, фиксированные нитями фибрина к субэндотелию, выражена десквамация эндотелия. Грани цы между красной пульпой и лимфоидными фолликулами размыты, нарастают явления делимфати зации. В основной массе узелков Т-зоны отсутствуют, они сохраняются только в единичных фол ликулах, пульпарные артерий спазмированы (фото 3.11).

Капсула, подкапсулярные трабекулы, общие сосудистые влагалищные оболочки находятся в состоянии выраженного отека. Толщина коллагеновых волокон этих образований увеличивается, и они неравномерно окрашиваются кислым фуксином. В наружной оболочке трабекулярных артерий, капсуле, подкапсулярных трабекулах и общих сосудистых влагалищных оболочках селезенки раз меры и количественные отношения содержания клеток изменяются незначительно, но отмечается бледное окрашивание ядер гематоксилином. Венозные синусы красной пульпы полнокровны, встречаются мелкоочаговые кровоизлияния. В лимфоцитах и клетках красной пульпы отмечаются единичные гранулы гликогена. В соединительной ткани гликоген отсутствует. Аргирофильные волокна селезенки плохо импрегнируются азотнокислым серебром, разрушены, находятся в состоя нии геля. В лимфатических узелках ретикулярная сеть разрушена.

Фото 3.9. Селезенка кошки. Трабекулярные артерия и вена в состоянии отека, заполнены эритроцитами, гликоген в стенке сосуда отсутствует при метаболическом ацидозе (рН крови 7,15 и продолжительность 45 мин). Ван-Гизон. Ув.: об. 8, ок. 7. Микрофотография.

Фото 3.10. Селезенка кошки. В лимфоидном фолликуле наблюдается очаговая делимфатиза ция, полнокровие красной пульпы при рН крови 7,2 и продолжительности ацидоза 30 мин. Ге матоксилин-эозин. Ув.: об. 8, ок. 7. Микрофотография.

Фото 3.11. Селезенка кошки. Разрушение лимфоидного фолликула при рН крови 6,8 и про должительности ацидоза 120 мин. Окоаска по Ван-Гизон. Ув. об. 10, ок. 7. Микрофотография.

Размеры лимфатических фолликулов по сравнению с контролем изменяются недостоверно, но в большинстве фолликулов уже отсутствуют Т-зоны, ретикулиновые волокна разорваны, грани цы фолликулов с красной пульпой становятся нечеткими, размытыми. В красной пульпе, а именно в области базальных мембран синусов появляются единичные, бледно окрашенные кислым фуксином коллагеновые волокна.

При рН 7,2 – 7,0 процентные отношения красной пульпы достоверно уменьшаются на 3,7%. на фоне статистически значимого увеличения объема соединительной ткани на 13,6% (фото 3.13) (рис. 12). Ацидоз при рН 7,2 и ниже вызывает деструктивные изменения в ткани селезенки, разрушение аргирофильного каркаса, нарастающую делимфатизацию лимфатических фолликулов до полного их разрушения при рН 6,5 (фото 3.14 – 3.16).

Рис. 12.

Процентное соотношение соединительной, лимфоидной тканей и красной пульпы селезенки кошки при лактат-ацидозе % ** рН 7,4 рН 7,2 – 7, ** соединительная лимфоидная ткань красная пульпа ткань Фото 3.13. Селезенка кошки. Увеличение объема соединительной ткани, гликоген отсут ствует при рН крови 7,05 и продолжительности ацидоза 45 мин. Кармин по Бесту. Ув. Об. 8, ок 7.

Микрофотография.

Фото 3.14. Селезенка кошки. Отсутствие гликогена и частичная делимфатизация лимфоид ного узелка при рН крови 7,0 и продолжительности ацидоза 30 мин. Кармин по Бесту. Ув.: об. 8, ок.

7. Микрофотография.

Фото 3.15. Селезенка кошки. Разрушение лимфоидного фолликула при рН крови 6,8 и про должительности ацидоза 120 мин. Г-э. Ув.: об. 8, ок. 7. Микрофотография.

Фото 3.16. Селезенка кошки. Капсула селеденкиолное разрушение лимфоидного узелка в ре зультате деструкции аргирофильного каркаса, гликоген в лимфоидных клетках отсутствует при рН крови рН 6,5 и продолжительности ацидоза 180 мин. Ван-Гизон. Ув.: об. 8, ок. 7. Микрофотография.

Фото 3.17. Селезенка кошки при метаболическом ацидоза (фибробдаст) (рН крови 7,2 и продолжи тельность 15 мин). Просветление матрикса митохондрий, расширение цистерн гранулярного эндо плазматического ретикулума фибробласта. Ув.: 20 000. Электронная микрофотография.

По данным электронной микроскопии ацидоз (при рН крови 7,2 и продолжительности мин) нарушает структуру не только плазматических мембран, свидетельством чего является поступ ление органоидов во внеклеточную среду, но также ведет к кариопикнозу, кариолизису. В цито плазме отмечается разрушение клеточных органоидов, крист, внутренней и наружной мембран ми тохондрий, изменение аппарата Гольджи, выражающееся в расширении цистерн гладкого и эндо плазматического ретикулума (фото 3.17).

Таким образом, метаболический ацидоз вызывает морфологические изменения соединитель нотканной стромы селезенки. Сдвиг рН крови до 7,2 – 7,0 приводит к увеличению поперечника капсулы, подкапсулярных трабекул, общих сосудистых влагалищных оболочек, отмечается отек, набухание и фрагментация коллагеновых, эластических, ретикулиновых волокон. Происходит увеличение объема коллагеновых волокон на фоне разрушения аргирофильного каркаса органа. Со судистая стенка, околососудистое пространство находятся в состоянии отека, отмечаются множе ственные кровоизлияния и тромбы в сосудах органа. В условиях прогрессирующего ацидоза нарас тают явления делимфатизации органа, до полного разрушения лимфоидных фолликулов. На суб клеточном уровне происходит разрушение цитоплазматической мембраны, деструкция ядра, по вреждение митохондрий и других органоидов с выход их в межклеточный матрикс, кровь.

3.3. Влияние метаболического ацидоза на морфологию лимфатических узлов.

Лимфатические узлы при метаболическом ацидозе визуально были исследованы в 12 регио нах и проведена их качественная морфологическая оценка. Морфометрические исследования и ста тистическая обработка данных были проведены в центральных, подчелюстных, илеоцекальных, брыжеечных лимфоузлах и сигмовидной кишки. В других регионах (лимфатические узлы шеи:

нижнечелюстные лимфатические узлы;

лимфатические узлы грудной клетки: околотрахеальные лимфатические узлы;

лимфатические узлы верхней конечности: подмышечные задние и латераль ные лимфатические узлы;

лимфатические узлы нижней конечности: подколенные, глубокие пахо вые лимфатические узлы;

лимфатические узлы брюшной полости: лимфатические узлы малого сальника, корня брыжейки, желудочные;

лимфатические узлы таза: общие подвздошные) был про веден качественный анализ морфологии лимфоузлов, который по визуальным данным существенно не отличался от лимфоузлов, подвергнутых морфометрическим исследованиям. Во всех лимфатиче ских узлах изучались основные морфологические структуры: величина коркового синуса, капсулы, промежуточных синусов коркового и мозгового вещества, подкапсулярных трабекул, количество лимфатических фолликулов с герминативными центрами, число клеток в центрах размножения в единице площади. Проведена качественная оценка содержания клеток в корковом и мозговом веще стве, описана миграция клеток в синусы узлов, состояние кровеносного русла органа.

Строма лимфатических узлов представлена капсулой и отходящими от нее капсулярными трабекулами, где располагаются основные кровеносные сосуды. В контрольных срезах наблюда ются четкие контуры между промежуточным, мозговым и корковым веществом. Отчетливо выра жено плато коркового вещества, которое полностью заполнено клеточными элементами. Ясно про слеживаются промежуточные синусы. Капсула на всем протяжении прилежит к корковому веще ству лимфоузла. Полученные морфологические параметры лимфатических узлов под влиянием аци доза (рН 7,2 - 7,0 и экспозиции 30 – 60 мин) для статистической обработки были объединены в од ну группу, другую экспериментальную группу составили лимфатические узлы при рН крови 6,8 – 6,5 и экспозиции ацидоза 120 – 180 мин.

Согласно контрольным данным толщина капсулы в центральных лимфатических узлах со ставляет 34,8 ± 1,99 мкм. Этот показатель достоверно возрастает почти на 76,3% - 148,2% по срав нению с контролем при разных значениях рН крови. Поперечник подкапсулярных трабекул в изученных центральных лимфатических узлах статистически значимо увеличивается на 32,2% при ацидозе (рН крови 7,2 – 7,0), в дальнейшем (рН крови 6,8 – 6,5) возрастает на 51,8%. Согласно кон трольным данным величина коркового синуса центральных лимфатических узлов составляет 50,5 ± 2,6 мкм, при рН 7,2 – 7,0 его размеры увеличивались достоверно на 73,4%, углубление лактат ацидоза до рН 6,8 – 6,5 приводит к еще большему возрастанию поперечного размера коркового си нуса на 87,3% по сравнению с контролем. Размеры промежуточных синусов коркового и мозгового вещества в контроле составляли соответственно 32,9 ± 2,7 мкм и 53,2 ± 3,2 (рис. 13). При снижении рН крови до 7,2 – 7,0 величина промежуточного синуса коркового вещества меняется недостоверно, а при дальнейшем углублении ацидоза до рН до 6,8 – 6,5 достоверно увеличивается по данным морфометрии почти на 83,6%. Промежуточный мозговой синус при рН крови 7,2 – 7,0 значимо уменьшается на 8,7%, а при дальнейшем нарастании ацидоза увеличивается на 40% (р 0,02). Зна чительным изменениям подвергается количество лимфоидных клеток в герминативных центрах центральных лимфатических узлов. В контроле (рН 7,4) число клеток на единицу площади состав ляло 197,0 ± 11,0, а при ацидозе (рН 7,2 – 7,0, экспозиция 30 – 60 мин) оно достоверно снижается на 19%. При этом наблюдается диффузная или очаговая делимфатизация зародышевых центров (фото 20). В тоже время клетки лимфоидного ряда обнаруживались в краевом синусе, капсуле лимфатиче ского узла. Коллагеновые волокна капсулы были утолщены, разрыхлены с элементами нарушения их целостности. Лимфоциты обнаруживались также и в промежуточных синусах, что приводит к сглаживанию границ между корковым и мозговым веществом (фото 3.18). При дальнейшем углуб лении ацидоза (рН крови 6,8 – 6,5) и его продолжительности явления делимфатизации нарастают как в центральных лимфатических узлах, так и в других группах лимфоузлов. По данным морфо метрии отмечается достоверное уменьшение клеточного состава на 23,9%.

Рис. Изменение параметров центральных лимфатических узлов кошки при лактат-ацидозе рН 7,4 рН 7,2 - 7,0 рН 6,8 - 6, ** ** ** ** ** 100 ** * ** * 50 * фолликулов трабекула (мкм) центре в ед. пл.

Количество Капсула (мкм) Подкапсулярная герминативным Промежуточный Промежуточный вещества (мкм) вещества (мкм) синус мозгового синус коркового Корковый синус фолликулов с герменативном Количество Количество центром клеток в (мкм) Фото 3.18. Центральный лимфатический узел кошки. Отек и расслоение волокон капсулы, подкапсулярной трабекулы при сдвиге рН крови 7,2 и продолжительности ацидоза 30 минут. Ге матоксилин-эозин. Ув.: об. 8, ок. 7. Микрофотография.

Фото 3.19. Центральный лимфатический узел кошки. Переполнение клеточными элементами промежуточного мозгового синуса при рН крови 7,0 и продолжительности ацидоза 60 минут. Ван Гизон. Ув.: об. 8, ок. 7. Микрофотография.

Фото 3.20. Центральный лимфатический узел кошки. Отек капсулы, делимфатизация корко вого вещества при рН крови 6,8 и продолжительности ацидоза 120 мин. Гематоксилин-эозин. Ув.:

об. 8, ок. 7. Микрофотография.

Морфологические параметры подчелюстных лимфатических узлов изменяются при ацидозе следующим образом. Величина капсулы статистически значимо возрастает при сдвиге рН крови в кислую сторону до 7,2 – 7,0 и продолжительности ацидоза 30 – 60 мин более чем в два раза. Даль нейшее углубление ацидоза приводит к еще большему увеличению поперечника капсулы лимфо узлов. Диаметр подкапсулярной трабекулы в первой экспериментальной группе достоверно больше на 23,%, чем в контроле. Во второй экспериментальной группе отмечается увеличение поперечника подкапсулярных трабекул на 40,6%. Согласно контрольным данным величина коркового синуса в контроле составляет 58,2 ± 4,2мкм. При снижении рН крови до 7,2 – 7,0 его размер достоверно возрастает на 37,1%, а при дальнейшем углублении ацидоза и удлинении экспозиции до 120 – мин – на 68,0%. Промежуточный синус коркового вещества при снижении рН крови до 7,2 – 7, достоверно расширяется на 67,8%, во второй экспериментальной группе - на 88,8% (р 0,001).

Промежуточный синус мозгового вещества претерпевает следующие изменения – при сдвиге рН крови до 7,2 – 7,0 и продолжительности ацидоза 30 – 60 мин он уменьшается на 16,5% (р 0,01), и возрастает на 43,4% при дальнейшем углублении ацидоза. Значительным изменениям подвергалось количество клеток в герминативных центрах лимфатических узлов. В подчелюстных лимфоузлах в контроле число клеток на единицу площади составляет 190,7 ± 10, при ацидозе (рН крови 7,2 – 7,0 и экспозиции 30 – 60 мин) оно достоверно снижается на 16%, и во второй экспериментальной группе на 31,8%. При этом отмечается миграция лимфоидных клеток в капсулу, подкапсулярные трабеку лы, корковый синус, промежуточные синусы коркового и мозгового вещества лимфоузлов (рис. 14).

Рис. 14.

Параметры подчелюстных лимфоузлов кошки при лактат-ацидозе 200 рН 7,4 рН 7,2 - 7,0 рН 6,8 - 6, ** 150 ** ** ** ** ** ** ** ** * * * фолликулов трабекула (мкм) центре в ед. пл.

Количество Капсула (мкм) Подкапсулярная герминативным Промежуточный вещества (мкм) Промежуточный вещества (мкм) синус мозгового синус коркового фолликулов с Корковый синус герменативном Количество Количество центром клеток в (мкм) Морфология лимфатических узлов сигмовидной кишки при метаболическом ацидозе раз личной глубины и продолжительности меняется следующим образом. Величина капсулы достовер но возрастает на 36,1% в первой экспериментальной группе, и более чем в 2,5 раза (р0,001) при углублении ацидоза (рН 6,8 – 6,5 и экспозиции ацидоза 120 – 180 мин). Поперечник подкапсуляр ных трабекул претерпевает менее выраженные изменения – в первой опытной группе он изменяется недостоверно, во второй возрастает на 15,4%. Корковый синус в контроле (рН 7,4) составляет в изученных лимфатических узлах сигмовидной кишки 47,1 ± 2,4мкм. При метаболическом ацидозе (рН 7,2 – 7,0 и продолжительность 30 – 60 мин) данный параметр возрастал на 88,2% (р0,001), при дальнейшем нарастании ацидоза (в группе со сдвигом рН крови до 6,8 – 6,5) статистически досто верно увеличивается на 47,7%. Промежуточный синус коркового вещества увеличивается на 86,3% с высокой степенью достоверности в первой экспериментальной группе. Он заполнен лимфоцитами, которые мигрируют из лимфоидных фолликулов коркового вещества лимфоузла. Дальнейший сдвиг рН крови сопровождается менее выраженными изменениями данного параметра. Промежуточный синус мозгового вещества в первой группе изменяется лишь вероятно, однако при дальнейшем углублении ацидоза увеличивается на 69,9%. Количество клеток в обеих опытных группа досто верно уменьшается соответственно на 15,7% и 26,3% (рис. 15).

Рис. 15.

Параметры лимфатических узлов сигмовидной кишки кошки при лактат-ацидозе рН 7,4 рН 7,2 - 7,0 рН 6,8 - 6, * ** ** ** ** ** ** * * * фолликулов центре в ед. пл.

Количество Промежуточный Промежуточный Подкапсулярная герминативным синус мозгового герменативном Капсула (мкм) вещества (мкм) вещества (мкм) трабекула (мкм) синус коркового Корковый синус фолликулов с Количество Количество центром клеток в (мкм) Изменения в различных регионах лимфатических узлов при лактат-ацидозе имеют общие закономерности. В илеоцекальных лимфатических узлах по данным морфометрии при экспери ментальном лактат-ацидозе происходит увеличение поперечника капсулы и подкапсулярных тра бекул, достоверно возрастают размеры синусов лимфоузлов, особенно коркового и в меньшей степени промежуточнх синусов коркового и мозгового вещества. Коллагеновые волокна капсулы утолщены, разрыхлены с элементами нарушения их целостности (рис. 16). Значительным измене ниям подвергается количество лимфоидных клеток в герминативных центрах лимфоузлов. При этом наблюдается диффузная или очаговая делимфатизация зародышевых центров (фото 3.21, 3.22). В тоже время клетки лимфоидного ряда обнаруживаются в краевом синусе, капсуле лимфа тического узла, а также и в промежуточных синусах, что приводит к сглаживанию границ между корковым и мозговым веществом.

При смещении рН до 6,8 и ниже изменения в промежуточных синусах нарастают. Наблюда ется их расширение, отек, они заполняются лимфоцитами, которые мигрируют из мякотных тяжей и коркового вещества лимфоузла. Особенно это выражено в структурах промежуточных мозговых си нусов. Отмечается сглаживание границ между корковым и мозговым веществом. В некоторых пре паратах лимфоузлов происходит стирание границ между мякотными тяжами и промежуточными синусами мозгового вещества. При этом величина промежуточных синусов коркового и мозгового вещества достоверно увеличивается соответственно на 45,9% и 160,04%. С углублением степени ацидоза нарастают явления делимфатизации лимфатических узлов. Уменьшается количество кле точных элементов в герминативных центрах лимфоузлов, корковом плато, мякотных тяжах мозго вого вещества. Однако, явления делимфатизации, согласно морфометрической обработке, в илео цекальных лимфозулах выражены меньше, чем в других группах лимфоузлов, описанных выше.

Фото 3.21. Илеоцекальный лимфатический узел кошки. Корковое вещество лимфоузла, диф фузная делимфатизация, расширение и опустошение мозговых синусов при рН крови 6,8 и продол жительности ацидоза 120 мин. Ван-Гизон. Ув.: об. 8, ок. 7. Микрофотография.

Фото 3.22. Илеоцекальный лимфатический узел кошки. Корковое вещество лимфоузла. Опу стошение мантии лимфоузла, расширение мозговых синусов, делимфатизация мякотных тяжей и лимфоидных фолликулов при рН крови 6,8 и продолжительности ацидоза 120 мин. Гематоксилин эозин. Ув.: об.8, ок. 7. Микрофотография.

В первой экспериментальной группе, где величина рН крови колеблется от 7,2 до 7,0, отме чается незначительное снижение количества клеточных элементов в герминативных центрах, а при углублении ацидоза (рН крови 6,8 – 6,5) достоверное уменьшение их на 14,0% (рис. 16).

Рис. 16.

Параметры илеоцекальных лимфатических узлов кошки при лактат-ацидозе 160 рН 7,4 рН 7,2 - 7,0 рН 6,8 - 6,5 ** ** 100 ** * ** 80 ** ** ** ** фолликулов трабекула (мкм) центре в ед. пл.

Капсула (мкм) Количество Подкапсулярная герминативным Промежуточный Промежуточный вещества (мкм) вещества (мкм) синус мозгового синус коркового Корковый синус фолликулов с герменативном Количество Количество центром клеток в (мкм) Брыжеечные лимфатические узлы при ацидозе меняются следующим образом. Как и в дру гих изученных группах, в брыжеечных лимфоузлах наибольшим изменениям подвергается попе речник капсулы, который статистически значимо возрастает с углублением ацидоза соответственно на 26,7% и 59,7%. Величина подкапсулярных трабекул в первой опытной группе (рН крови 7,2 – 7,0) достоверно увеличивается на 14,1%, а во второй (рН крови 6,8 – 6,5) на 61,5%. В то же время корковый синус меняется недостоверно. Промежуточный синус коркового вещества при сдвиге рН крови до 7,2 – 7,0 и экспозиции ацидоза 30 – 60 мин достоверно возрастатет на 37,5%, однако даль нейшее снижение рН крови сопровождается недостоверными изменениями данного параметра. То же можно наблюдать со стороны промежуточного синуса мозгового вещества – в первой опытной группе он статистически значимо увеличивается на 40,0%, в дальнейшем претерпевает недостовер ные изменения. В брыжеечных лимфатических узлах более чем в других группах изученных лимфоузлах, выражены явления делимфатизации (рис. 17). Количество клеточных элементов до стоверно снижается в обеих экспериментальных группах соответственно на 21,7% и 26,3% (фото 3.23, 3.24).

Количество фолликулов с герминативными центрами в различных опытах (215 лимфоузлов) колебалось в гистологических срезах окрашенных гематоксилин-эозином от 21 до 38. Значитель ным изменениям подвергалось количество лимфоидных клеток в герминативных центрах различ ных групп лимфатических узлов. При этом наблюдается диффузная, или очаговая делимфатизация зародышевых центров. В тоже время клетки лимфоидного ряда обнаруживались в краевом синусе, капсуле лимфатического узла. Коллагеновые волокна капсулы были утолщены, разрыхлены с эле ментами нарушения их целостности. Лимфоциты часто заполняли промежуточные синусы, что приводило к сглаживанию границ между корковым и мозговым веществом.

Фото 3.23. Брыжеечный лимфоузел кошки. Диффузная Делимфатизация лимфоидных фол ликулов и мозгового вещества лимфоузла при рН крови 7,0 и продолжительности ацидоза 60 мин.

Гемотоксилин-эозин Ув.: об. 8, ок 7. Микрофотография.

Фото 3.24. Лимфатический узел желудка кошки. Выражены явления делимфатизации мозго вого вещества, расширение промежуточных мозговых синусов. Тромбоз артериол мозгового веще ства, отек сосудистой стенки при рН крови 6,8.

При дальнейшем углублении ацидоза (рН крови 6,8 – 6,5) и различной продолжительности явления делимфатизации нарастают как в центральных лимфатических узлах, так и в других груп пах лимфоузлов.

Рис. 17.

Параметры брыжеечных лимфатических узлов кошки при лактат-ацидозе 160 рН 7,4 рН 7,2 - 7,0 рН 6,8 - 6,5 ** ** 80 * * * * * * фолликулов трабекула (мкм) центре в ед. пл.

Количество Капсула (мкм) Подкапсулярная герминативным Промежуточный Промежуточный вещества (мкм) вещества (мкм) синус мозгового синус коркового Корковый синус фолликулов с герменативном Количество Количество центром клеток в (мкм) При снижении рН до 6,8 – 6,5 размеры капсулы и деструктивные явления в ней нарастали, увеличилась делимфатизация герминативных центров. Следует отметить, что ацидоз приводил к выраженным структурным нарушениям ретикулинового каркаса лимфоузлов.

Строма коркового и мозгового вещества лимфатических узлов образована из ретикулярных волокон, которые импрегнируются серебром и хорошо контрастируются при окраске по Футу. Рети кулярные волокна и клетки образуют соединительнотканную сеть, расположенную во всех структу рах лимфатического узла, лимфатических фолликулах и проникают в В-зону, осуществляя функцию каркаса, удерживая лимфоидные клетки. Ретикулярная ткань хорошо выражена по ходу кровенос ных сосудов. Молочнокислый ацидоз различной глубины и продолжительности оказывает выра женное влияние на структуру и пространственную ориентацию аргирофильных волокон. При рН 7,2 и продолжительности ацидоза 30 мин ретикулярная ткань сохраняет свою специфичность, окру жает лимфатический фолликул, отдельные волокна пронизывают герминативный центр (фото 3.25) Однако уже при таком сдвиге рН в кислую сторону, наблюдается очаговая делимфатизация заро дышевой области лимфоидного фолликула. Можно предположить, что наиболее тонкие волокна подвергаются разрыхлению и распаду, что и создает возможность для миграции лимфоцитов (фото 3.26). Увеличение продолжительности ацидоза сопровождается утолщением ретикулиновых воло кон и увеличением степени делимфатизации светлого центра. Более выраженные изменения в рети кулярной ткани наблюдаются при сдвиге рН до 7,0 и экспозиции 60 мин, возникает разрыв отдель ных волокон, они становятся менее компактными. В лимфатических фолликулах аргирофильные структуры практически исчезают, степень очаговой делимфатизации возрастает, но целостность лимфоидного фолликула сохраняется. Значительное повреждение аргирофильной субстанции лимфатического узла возникает при рН 6,8 и продолжительности ацидоза 120 мин. Ретикулиновые волокна набухают и утолщаются, отек, возникающий при сдвиге рН в кислую сторону, ведет к раз рыхлению аргирофильной стромы узла, нарушению циркулярной направленности волокон.

Фото 3.25. Брыжеечный лимфоузел кошки. Отек, фрагментация, расслоение ретикулярных волокон. Отдельные волокна проникают в лимфоизный фолликул при рН крови 7,2 и продолжи тельности ацидоза 30 мин. Импрегнация серебром по Футу. Ув.: об. 8, ок. 7. Микрофотография.

Фото 3.26. Илеоцекальный лимфатический узел кошки. Разрывы, деструкция ретикулиновых волокон в лимфоидных фолликулах при рН крови 7,0 и продолжительности ацидоза 60 мин. Импре гнация серебром по Футу. Ув.: об. 40, ок. 7. Микрофотография.

При сдвиге рН до 6,5 и экспозиции ацидоза 180 мин наблюдается распад ретикулинового каркаса, волокна соединительной ткани резко набухают и теряют способность удерживать клеточ ные элементы.

Таким образом, молочнокислый ацидоз существенным образом нарушает структуру ретику линового каркаса, как лимфоидных фолликулов, так и в целом лимфатического узла, оказывает вы раженное влияние на сосудистую систему лимфатического узла и агрегатное состояние крови.

Сдвиг рН до 7,2 сопровождается возникновением агрегатов в сосудах различного калибра. При рН 7,0 в результате диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови появляются нити фиб рина, которые фиксируют образующиеся тромбы к субэндотелиальной мембране стенки сосудов в области десквамированного эндотелия. Значения рН изменяются не только в крови, но и в лимфе, которая содержит фибриноген. Поэтому в лимфатических сосудах и синусах также образуется фиб рин и нарушается лимфоток. При рН 7,2 – 7,0 наблюдается мозаичность кислотно-основного состо яния крови в различных регионах сердечно-сосудистой системы, которая исчезает при более выра женном ацидозе, что отражается на процессах фибринообразования в различных региональных лимфатических узлах. Сладжы эритроцитов и тромбы образуются в сосудах паренхимы органа, трабекул и капсулы. Тромбообразованию в сосудистом русле лимфатического узла способствуют тромбопластические соединения, высвобождающиеся при повреждении эндотелия. Процесс тром бообразования усиливается по мере сдвига рН в кислую сторону. При рН 6,8 и продолжительности ацидоза 120 мин формируются тромбы, которые прикрепляются к стенке артерий. По мере нарас тания ацидоза увеличивается отек сосудистых стенок и околососудистого пространства и паренхи мы лимфатических узлов. Ацидоз вызывает целый комплекс структурных изменений в различных образованиях лимфоидной ткани, относящихся к неспецифическим морфологическим изменениям.

Лимфатические узлы различных регионов имеют морфологические отличия связанные как с их размером, так и со структурной организацией входящих в них компонентов. Основным опор ным аппаратом во всех лимфатических узлах являются коллагеновые волокна, обеспечивающие форму и прочность органа. В капсуле лимфатических узлов различных регионов преобладают кол лагеновые волокна, и лишь внутренняя ее поверхность содержит волокна эластина и гладкомышеч ные клетки, обеспечивающие возможность изменения объема и формы органа. У желудочных лим фоузлов капсула более толстая по сравнению с центральными и илеоцекальными узлами, преобла дающим компонентом является корковое вещество и паракортикальная зона. Брыжеечные лимфоуз лы кроме коллагеновых и эластических волокон содержат ретикулиновые волокна, имеющие парал лельную ориентацию по ходу капсулы. Более толстые ретикулиновые волокна проникают в корко вое вещество из капсулы и анастомозируют с аналогичными волокнами мякотных тяжей мозгового вещества, а также с лимфоидными клетками. Лимфоидная ткань имеет одинаковую структурную организацию. Основными клеточными элементами мантии лимфатических узелков являются малые лимфоциты, они же заполняют и корковое вещество. В центральных лимфатических узлах малые лимфоциты составляют меньшее количество.

Экспериментальный ацидоз различной глубины (рН 7,2 – 6,5) приводит к неспецифическим морфологическим изменениям в лимфатических узлах различных регионов. Прослеживается утол щение капсулы и капсулярных трабекул, набухание цитоплазмы ретикулярных клеток, фиброци тов, фибробластов, значительное набухание коллагеновых волокон, капсулы, трабекул брыжеечных и подключичных лимфоузлов (фото 67, 68). При увеличении глубины и продолжительности ацидо за явления отека и набухания увеличиваются. Отмечается исчезновение границ коркового и мозго вого вещества, в мякотных тяжах мозгового вещества происходит сглаживание границ, расширение мозговых синусов, миграция лимфоцитов в мозговые синусы. В корковом веществе количество клеток также снижается. При углублении ацидоза до 7,0 и ниже отмечается отек, фрагментация и деструкция соединительнотканных структур лимфоузла. Толщина капсулы в некоторых лимфоузлах увеличивается до 100 – 150 мкм, подкапсулярных трабекул до 45 – 52 мкм, коллагеновые волокна находятся в состоянии отека и набухания. На гистологических срезах, окрашенных по Футу, выяв ляются признаки нарушения целостности аргирофильного каркаса лимфоузла, разрывы и отек рети кулиновых и эластических волокон (фото 69, 70), при этом структура лимфатических фолликулов изменяется, нарастает делимфатизация герминативных центров, миграция лимфоцитов в синусы, капсулу лимфоузла.

Таким образом в наших опытах отмечено, что сдвиг рН в кислую сторону при лактат ацидозе приводит не только к развитию ДВС-синдрома, но и к выраженным изменениям морфоло гии тимуса, селезенки, лимфатических узлов и иммунных образований желудочно-кишечного трак та. Нарушение структурной организации иммунной системы ведет к морфологической блокаде ор ганов иммунной системы и развитию иммунодифицитных состояний.

Глава 4. Влияние метаболического ацидоза на морфологию органов пищеварения Метаболические сдвиги в организме возникают как в норме при интенсивных физических нагрузках, в результате превышения кислородного запроса над его максимальным потреблением, так и при многих патологических состояниях. Это приводит к активации гемостатических меха низмов, в которых принимают участие многие факторы. Одной из ведущих причин является нарушение кислотно-основного состояния организма. Анализ патологических состояний, при ко торых с высокой степенью вероятности развивается ДВС-синдром и может быть обусловлен нарушением кислотно-основного баланса и развитием некомпенсированного ацидоза сводится к следующим заболеваниям:

1. Акушерская патология 2. Врожденные «синие» пороки сердца 3. Сепсис 4. Шок различного происхождения 5. Массивные поражения тканей 6. Отравления и интоксикации 7. Гипоксия 8. Хирургическая травма 9. Ожоги и многие другие состояния Лактат-ацидоз оказывает непосредственное влияние на гемокоагуляционный и сосудисто тромбоцитарный гемостаз. В сосудистом русле по мере сдвига рН в кислую сторону, появляются признаки морфологического эквивалента ДВС-синдрома, выражающиееся в образовании сладжей, тромбов и нарушении микроциркуляции. Все это приводит к гипоксии тканей и более выражен ному смещению внутриклеточного уровня рН в кислую сторону. Поэтому в этой главе была по ставлена задача – изучить морфологию органов пищеварения (печени, поджелудочной железы, желудочно-кишечного тракта и иммунных образований) при различной глубине и экспозиции ацидоза.

Опыты были проведены на интактных животных (кошки). Под тиопенталовым наркозом посредством внутривенного введения 3% молочной кислоты вызывали в различных сериях экспе риментов сдвиг рН до 7,2, 7,0, 6,8, 6,5 соответственно продолжительностью 30, 60, 120, 180 минут.

После забора тканей животных забивали посредством передозировки тиопенталового наркоза.

Ткани органов пищеварения фиксировали в 10% нейтральном формалине. Кусочки тканей погру жали в парафин или целоидин для приготовления и окраски гистологических срезов. Для элек тронной микроскопии брали кусочки ткани размером 1/1/5 мм, фиксировали ex tempore в 4% за буференном растворе глютаральдегида в течение 4 часов, после промывки производили дополни тельную фиксацию в 1% растворе четырехокиси осмия в течение 4 часов. Обезвоживание произ водят в этиловом спирте. Заливку осуществляют в Эпон 812. Срезы готовили на шведском уль трамикротоме ЛКВ (III модель) с помощью стеклянных ножей. Анализ ультраструктур и фотогра фирование производили на микроскопе IEM-7А (Япония) при увеличении от 6000 до 30 000 раз.

4.1. Влияние лактат-ацидоза на морфологию печени Влияние лактат-ацидоза на морфологию печени было проведено на 42 кошках. Ацидоз со здавался внутривенной инъекцией 3% раствора молочной кислоты на 0,85% хлориде натрия у наркотизированных животных. На протяжении 3-5 минут рН артериальной крови (из бедренной артерии) введением лактата сдвигали до 7,2;

7,0;

6,8;

6,5 и поддерживали на этом уровне 30, 60, 120, 180 мин медленной инъекции кислоты (3-5 капель в мин) под контролем рН-метра ЛПУ-340.

Для гистологических и гистохимических исследований кусочки ткани 5/5/10 мм ex tempore фик сировали в 10% нейтральном формальдегиде. Для электронномикроскопических исследований ку сочки тканей 1/1/5 мм фиксировались в 4% растворе глутаральдегида. В дальнейшем ткани дово дились до срезов по общепринятым методам, гистологические препараты окрашивались, прово дилась морфометрия и математическая обработка материала. Животные забивались передозиров кой наркоза.

На вскрытии печень имеет выраженный дольчатый рисунок, поверхность окрашена равно мерно в темно-красный цвет, сосудистый рисунок четкий, сосуды полнокровны, в просвете – кровь. На разрезе печень – темно-красного цвета, из сосудов вытекает жидкая кровь.

При микроскопическом исследовании (рН 7,2) просвет печеночных артерий не спавшийся, наблюдается расслоение крови, агрегация форменных элементов, стенки сосудов в состоянии оте ка. В венах – полнокровие, расслоение крови на жидкую часть и форменные элементы, венозная стенка в состоянии отека. Центральные вены долек печени полнокровны. Структура печеночных долек сохранена. Пространства Диссе умеренно расширены, синусные капилляры полнокровны.

Рисунок печеночных балок сохранен. Основная масса печеночных клеток имеет ядра округлой и овоидной формы, хорошо окрашивается гематоксилином (фото 4.1). На большей поверхности сре за гликоген отсутствует, встречаются единичные гепатоциты, содержащие гранулы гликогена (фо то 4.2). Встречаются единичные капли жира в гепатоцитах печеночных долек (фото 4.3).

Ретикулиновые волокна стенки сосудов и в междольковых перегородках неравномерно им прегнируются азотнокислым серебром, разорваны и фрагментированы, а отдельные волокна нахо дятся в состоянии геля.

Эластические волокна в соединительнотканных перегородках и стенках печеночных вен слабо окрашиваются фукселином Вейгерта, имеются явления фрагментации.

При сдвиге рН до 7,0 – 6,5;

на протяжении соответственно 60 – 180 минут наблюдается аг регация форменных элементов, тромбы, отек сосудистой стенки, десквамация эндотелиоцитов.

В центральных венах печеночных долек мелкоочаговый некроз, некробиоз гепатоцитов.

Отмечаются очаговые нарушения структуры балок, пространства Диссе расширены (рис. 4.1, 4.4).

Встречаются единичные вакуолизированные гепатоциты с зернистой дистрофией. Ядра клеток преимущественно шаровидной формы, неравномерно окрашиваются гематоксилином. По перифе рии печеночных долек структура балок не изменена. Отмечается неравномерная очаговая элими нация гликогена. Гранулы гликогена в основном содержатся вокруг печеночных сосудов.

Фото 4.1. Печень. Контакты между клетками сглажены. Диапедез эритроцитов в пространства Диссе. Жировая инфильтрация клеток при рН крови 7,0 и экспозиции ацидоза 60 мин. Окраска гематоксилин-эозином. Ув.: ок.7;

об.40.

Фото 4.2. Печень. Снижение количества гликогена в клетках органа при рН крови 7, и экспозиции ацидоза 60 мин. Окраска по Бесту. Ув.: ок.7;

об. 8.

Междольковая соединительная ткань фрагментирована. В печеночных артериях внутренняя эластическая мембрана охватывает периметр всего сосуда. В стенке печеночных вен эластическая мембрана слабо окрашивается фукселином Вейгерта.

Электронномикроскопические исследования печени проводили при рН 7,2 и 7,0 и экспози ции ацидоза 30 минут. При метаболическом лактат-ацидозе обнаружены грубые нарушения в большинстве структур клеток печени. Исследование ядра гепатоцитов выявляют многочисленные участки расслоения и микронадрывов ядерной мембраны. Отмечается маргинация хроматина, не равномерное его распределение по всему срезу. Хроматин образует крупные глыбки, которые рас полагаются как непосредственно под ядерной мембраной, так и на всей площади среза ядра.

В цитоплазме резко уменьшается количество гликогена. Зерна гликогена становятся более прозрачными, имеют низкую плотность (фото 4.5).

Митохондрии круглой и овоидной формы. Кристы деформированы, их контуры плохо про сматриваются, в некоторых органоидах они полностью разрушены. При уровне рН крови 7,2 и экспозиции 30 минут, митохондрии, как правило, сохраняют свою целостность. При сдвиге рН до 7,0 на протяжении 30 минут наблюдается разрушение внутренней и наружной мембран митохон дрий. Подобного рода морфологического нарушения приводят к блокированию в клетке аэробного фосфорилирования АТФ, так как снижается градиент потенциала Н-ионов в матриксе и межмем бранном пространстве, которые в норме обеспечивают необходимый отрицательный заряд, рав ный – 220 mV. Согласно теории Митчелла прекращается движение протонов через F0 F1АТФ синтетазу и синтез АТФ. Учитывая, что многие митохондрии при рН 7,2 и даже 7,0 сохраняют своою цельность, аэробное образование АТФ сохраняется, хотя и на более низком уровне. Таким образом, содержимое митохондрий гепатоцитов находится в состоянии гомогенизации и может расцениваться как дистрофия различной степени (фото 4.5, 4.6).

Состояние других органоидов так же подвергалось выраженным изменениям. Было выяв лено выраженное расширение шероховатого и гладкого эндоплазматического ретикулума. В цито плазме появиляются свободные рибосомы. Перестройки в ядре, снижение гликогена, изменение структуры митохондрий, строения шероховатого эндоплазматического ретикулума, ответственно го за белково-синтетические функции нарушает функционирование клеток, ведет к дистрофиче ским процессам.

Сдвиг рН в кислую сторону до 7,0, нередко сопровождается нарушением структурной це лостности цитоплазматической мембраны. Фрагменты мембран и содержимое цитоплазмы посту пает во внеклеточное пространство. Нами ранее было показано, что органоиды клетки и постлизо сомальный супернатант обладают преимущественно тромбопластической активностью.

Более мелкие компоненты клетки могут поступать через стенки кровеносных и лимфатиче ских капилляров в кровь и лимфу. Это приводит к дальнейшему повышению гиперкоагулемии, вызванному лактат-ацидозом и развитию ДВС-синдрома.

Выраженные нарушения обнаруживаются не только в мембранном и синтетическом аппа рате гепатоцитов, но в синусоидах долек печени. Снижение рН до 7,0 приводит к разрыхлению, утолщению и разрывам эндотелиоцитов синусоидов. В результате отека просветы синусоидов расширяются. Структурные образования пространства Диссе размыты, отдельные микроворсинки разрушены (фото 4.6). На электронных фотографиях также отмечается изменение структуры лизо сом, что ведет к поступлению лизосомальных ферментов в окружающую среду. В клетках обна руживаются аутофагосомы, жировые включения различного размера.

Фото 4.5. Печень кошки через 30 минут после «переживания» органа при метаболическом ацидозе (рН крови 7,2). Отдельные митохондрии имеют нарушение структуры матрикса. Наружная мембрана митохондрий не нарушена, структура крист в большинстве случаев сохранена.

Наблюдается деструкция цитоплазмы, в которой присутствуют две аутофагосомы. Электронная микроскопия. Ув.: 20 000.

Фото 4.6. Печень кошки через 60 минут после «переживания» органа при метаболиче ском ацидозе (рН крови 7,0). Матрикс митохондрий просветлен. В цитоплазме две ауто фагосомы. Электронная микроскопия. Ув. 25 000.

Таким образом, лактат-ацидоз, вызванный внутривенной инъекцией молочной кислоты, сопро вождается структурными изменениями клеточных элементов. Эти изменения могут сопровож даться нарушением аэробного фосфорилирования, синтетических процессов, стимуляцией про цессов гемостаза и приводить к развитию ДВС-синдрома и тромбозу.

4.2. Влияние лактат-ацидоза на морфологию поджелудочной железы На вскрытии животных поджелудочная железа плоская, непостоянных очертаний, длиной около 10-12см, шириной 1-2 см, имеет дольки, связанные рыхлой соединительной тканью. Железа расположена в начальной петле двенадцатиперстной кишки. Она изогнута почти под прямым уг лом, одна половина лежит у большой кривизны желудка, свободный конец касается селезенки, другая половина находится в сальнике двенадцатиперстной кишки. Основной проток образуется в результате слияния более мелких протоков и впадает в двенадцатиперстную кишку примерно в см от ее начала.

При ацидозе рисунок долек сохранен, наблюдается умеренный отек железы и междолько вой соединительнотканных прослоек, сосудистый рисунок хорошо выражен, отмечается полно кровие вен.

На разрезе поджелудочная железа бледно-розового цвета, из сосудов вытекает жидкая кровь, из протоков выделяется прозрачная жидкость.

Исследование влияния лактат-ацидоза на морфологию поджелудочной железы проводилось так же, как и в предыдущих опытах. Ацидоз создавался внутривенной инъекцией молочной кисло ты, биоптаты железы брали при сдвиге уровня рН до 7,2;

7,0;

6,8;

6,5 и продолжительности соот ветственно 30;

60;

120;

180 мин.

Поджелудочная железа является одним из центральных органов пищеварения, а также вы полняет эндокринную функцию. Она участвует во взаимодействии висцеральных систем и в мета болических процессах в организме.

Патология поджелудочной железы может приводить к активации процессов свертывания крови и фибринолиза, что прежде всего связано с поступлением в кровоток протеаз, особенно трипсина, который непосредственно может активировать V, VIII, X факторы. Все это может вести к появлению в кровотоке микротромбозов, снижению концентрации фибриногена и количества тромбоцитов, характерных для ДВС-синдрома.

Как было показано в третьей главе, сдвиг рН в кислую сторону сопровождается образова нием сладжей эритроцитов и тромбов в сосудах различных органов, в том числе и в поджелудоч ной железе.

Ацидоз различной глубины и продолжительности оказывает выраженное влияние на стро мальные и паренхиматозные структуры железы. Лактат-ацидоз изменяет строение основных мор фологических образований поджелудочной железы: капсулы, соединительнотканных перегородок, ацинусов, островков Лангерганса, протоков.

Эти изменения возникают при сдвиге рН артериальной крови до 7,2 и продолжительности ацидоза 30 мин. При этом наблюдается умеренный отек, выражающийся в расширении межкле точных щелей, утолщении аргирофильного каркаса органа (фото 4.7). Структура ацинусов сохра нена, однако, в результате отека расстояние между клетками ацинусов значительно увеличивается (фото 4.8). Сдвиг рН до 7,2 сопровождается резко выраженным полнокровием сосудов разного диаметра с явлениями стаза в микроциркуляторном русле. В стенках сосудов повсеместно наблю дается периваскулярный отек. Ацидоз в течение 60 мин приводит к отеку островков Лангерганса, расширению междольковых пространств, а так же изменению структуры ядер, выражающееся в более бледном окрашивании гематоксилином (фото 4.9). Более выраженный отек паренхимы же лезы наступает при рН 7,0 и экспозиции ацидоза 60 мин (фото 4.10). Такой сдвиг рН наряду с об щим отеком приводит к дальнейшему увеличению междольковых пространств. Эти явления нарастают при снижении уровня рН до 6,8 и 6,5 при экспозиции ацидоза соответственно до 120 и 180 мин (фото 4.11).

При некомпенсированном лактат-ацидозе (рН 6,8;

экспозиция 120 мин) вызывает утолще ние и деструкцию ретикулиновых волокон островков Лангерганса, в результате отека появляются пустые пространства, не заполненные клеточными элементами. Увеличение продолжительности ацидоза до 180 мин и его глубины до рН 6,5 ведет к нарушению структуры ацинусов, разрушению клеточных элементов, фрагментации соединительнотканных волокон, при этом в большей степени страдают аргирофильные волокна.

Фото 4.7. Поджелудочная железа. Отек соединительнотканной стромы Расширение межклеточных пространств концевого отдела ацинуса, отек паренхимы органа при рН крови 7,2 и экспозиции ацидоза 30 мин. Окраска по Футу. Ув.: ок.7;

об.8.

Фото 4.8. Поджелудочная железа. Расширение межклеточных пространств и отек паренхимы органа при рН крови 7,15 и экспозиции ацидоза 42 мин.

Окраска гематоксилин-эозином. Ув.: ок.7;

об. Фото 4.9. Поджелудочная железа. Островок Лангерганса.

Отек паренхимы и расширение междольковых щелей при рН крови 6, и экспозиции ацидоза 68 мин. Окраска Ван-Гизон. Ув.: ок.7;

об.8.

Фото 4.10. Поджелудочная железа. Отек паренхимы, деструкция аргирофильных волокон соединительнотканного остова при рН крови 7,05 и экспозиции ацидоза 65 мин. Окраска по Футу. Ув.: ок.7;

об. Фото 4.11. Поджелудочная железа. Разрушение аргирофильных волокон концевых отделов ацинусов поджелудочной железы при рН крови 6, и экспозиции ацидоза 120 мин. Окраска по Футу. Ув.: ок.7;

об. Таким образом, лактат-ацидоз вызывает выраженные изменения в структурной организа ции поджелудочной железы, они выражаются не только в возникновении ДВС-синдрома и его морфологического эквивалента, но также сопровождаются отеком паренхимы, деструкцией со единительнотканного матрикса, а при сдвигах рН до 6,5 приводят к разрушению клеточных эле ментов органа.

4.3. Морфология желудочно-кишечного тракта при лактат-ацидозе Желудочно-кишечный тракт является наиболее уязвимым звеном при патологических состоя ниях, сопровождающихся метаболическим ацидозом. В большей степени страдает желудок, где наблюдаются реодинамические и метаболические расстройства желудочной стенки. Это связано с наличием внутриполостной кислой среды. Нарушения тканей желудка сопровождаются развитием ДВС-синдрома и кровотечениями (Шутеу и др., 1981).

Исследование морфологии желудка при лактат-ацидозе осуществлялось по методам, по дробно описанным в предыдущих главах. Желудочная микроциркуляция наиболее чувствительна к действию ацидоза. В развитии ДВС-синдрома основную роль играют два фактора: сдвиг рН в кислую сторону, сопровождающийся вначале гиперкоагулемией, а затем коагулопатией потребле ния;

и нарушение структуры цитоплазматических мембран, органоидов клеток, с последующим выходом их в тканевую жидкость и поступлением в кровь и лимфу.

Гистологическое исследование свидетельствует о том, что на протяжении первых 30 минут ацидоза (рН 7,2) прослеживается неравномерное наполнение кровеносных сосудов собственной пластинки слизистой, подслизистой и мышечной оболочки, расслаивание крови, появление агрега тов форменных элементов, десквамация эндотелия единичных кровеносных сосудов. На первых же минутах ацидоза в стадии гиперкоагулемии дегранулируются тучные клетки, особенно в непо средственной близости от кровеносных сосудов, содержание гепарина в сосудистом русле повы шается. В это же время прослеживается элиминация гликогена из клеток, особенно это выражено в мышечной оболочке.

При рН крови от 7,2 до 7,0 и экспозиции ацидоза до 30-60 минут развивается отек рыхлой соединительной ткани в подслизистой, а затем и в мышечной оболочке, наблюдается миграция неинкапсулированных лимфоцитов, расширение межклеточных щелей слизистой оболочки.

В собственной и мышечной пластинке слизистой морфологические признаки отека менее выражены, но в базальном слое собственной пластинки слизистой отмечается фрагментация, раз рывы аргирофильных волокон и мелкоочаговое нарушение ацинарного рисунка железистых кле ток слизистой (фото 4.12).

Границы лимфатических узелков собственной пластинки слизистой нечеткие, размытые. В лимфатических узелках отмечается расширение межклеточных щелей.

При сдвигах рН от 7,0 до 6,5 и увеличении экспозиции ацидоза до 60-180 минут отек в рыхлой соединительной ткани подслизистой оболочки нарастает. Снижается способность ядер фибробластов и гладкомышечных клеток окрашиваться гематоксилином. Понижается способность эластических и аргирофильных волокон окрашиваться соответственно фукселином Вейгерта, им прегнироваться азотнокислым серебром. По ходу волокон отмечаются разрывы и фрагментации. В базальном слое собственной пластинки слизистой, мышечной пластинки слизистой и в мышечной оболочке выявляется на фоне отека увеличение объема коллагеновых волокон, мелкоочаговый некроз, некробиоз ядер клеток (фото 4.14, 4.15).

Фото 4.12. Желудок кошки. Сладжи эритроцитов и тромбоз сосудов слизистой оболочки стенки желудка при рН крови 7,2 и продолжительности ацидоза 30 мин. Гематоксилин-эозин.

Ув.: об. 8, ок.7. Микрофотография.

Фото 4.13. Желудок кошки. Тромбоз и кровоизлияние в подслизистом слое стенки желудка при рН крови 6,8 и продолжительности ацидоза 45 мин. Ван-Гизон. Ув.: об. 40, ок.8. Микрофо тография.


Фото 4.14. Желудок. Аргирофильный каркас мышечной оболочки желудка при рН крови 7,15 и экспозиции ацидоза 60 мин.

Отек и набухание волокон. Окраска по Футу. Ув.: ок.7;

об. Фото 4.15. Желудок. Деструкция и отек аргирофильного каркаса слизистой оболочки при рН крови 7,15 и экспозиции ацидоза 60 мин.

Окраска по Футу. Ув.: ок.7;

об. Фото 4.16. Желудок. Утолщение аргирофильных волокон в мышечной пластинке слизистой желудка при рН крови 6,75 и экспозиции ацидоза 55 мин. Окраска по Футу. Ув.: ок.7;

об. Фото 4.17. Желудок. Аргирофильный каркас мышечной оболочки при рН крови 6,5 и экспозиции ацидоза 50 мин. Окраска по Футу. Ув.: ок.7;

об. Полученные данные позволяют сделать заключение о том, что через 120-180 минут после создания в сосудистом русле лактат-ацидоза (рН крови 6,8-6,5) на фоне диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови нарастают деструктивно-дистрофические изменения в со единительнотканной строме и паренхиме органа.

Это проявляется в разрывах, фрагментации и конгломерации аргирофильных волокон, не равномерном окрашивании и пикнозе ядер фибробластов и гладкомышечных клеток. Мелкие оча ги некроза, некробиоза мышечных и железистых клеток сливаются и становятся генерализован ными. В базальном слое собственной пластинки слизистой, мышечной пластинке слизистой и в мышечной оболочке выявляется на фоне отека увеличение объема коллагеновых волокон, мелко очаговый некроз, некробиоз ядер клеток.

В лимфатических узлах отек приводит к деструкции аргирофильного каркаса, увеличению межклеточных щелей, очаговой делимфатизации лимфатических узелков.

Полученные данные позволяют сделать заключение о том, что даже незначительный сдвиг кислотно-основного равновесия крови является пусковым моментом для развития в желудке мас сивных изменений, которые усиливаются по мере сдвига рН в кислую сторону.

Стенка желудка состоит из четырех оболочек: слизистой оболочки, состоящей из эпители альной выстилки, собственной пластинки и мышечной пластинки, подслизистой основы мышеч ной оболочки, мышечной оболочки и серозной оболочки или адвентиции.

Электронно-микроскопическим исследованиям были подвергнуты клеточные морфологи ческие структуры слизистой оболочки желудка, как в норме, так и при декомпенсированном лак тат-ацидозе (рН 7,2;

7,0 и экспозиции ацидоза 30 мин).

На электронной фотографии париетальной клетки, сделанной при нормальном уровне рН (7,4), хорошо видны шероховатый эндоплазматический ретикулум, содержащий большое количе ство рибосом и пластинчатый комплекс Гольджи. Хроматин в ядре равномерно распределен, от четливо видно ядрышко, на всем протяжении двухслойной кариолеммы равномерно расположены ядерные поры. В клетке содержатся электронно-плотные гранулы гликогена и небольшие по раз меру секреторные пузырьки, участки соседних клеток плотно прилегают друг к другу (фото 4.16, 4.17).

На электронных фотографиях париетальных (обкладочных) клеток характерно наличие разветвленного канальца, который идет от апикальной части клетки, через него выделяется секрет в просвет железы желудка. Иногда встречаются межклеточные выводящие канальцы, располо женные между париетальными клетками. Характерной особенностью внутриклеточного канальца являются многочисленные ворсинки, выступающие в его просвет. Внутриклеточный каналец мо жет занимать значительное место в цитоплазме, митохондрии окружают каналец плотным коль цом. При рН 7,2 и экспозиции ацидоза 30 минут микроворсинки значительно расширены. Боль шинство митохондрий увеличены, их матрикс просветлен, структура крист, как правило, сохране на. В некоторых митохондриях нарушена внутренняя и наружная мембраны. Рядом расположены слизистые шеечные клетки с характерными слизистыми глобулами в апикальной части цитоплаз мы, на их поверхности имеются короткие микроворсинки. Каналы эндоплазматического ретику лума как в париетальных, так и в слизистых клетках расширены и деформированы, в отдельных участках рибосомы отсутствуют.

На фото 4.18 отображен участок париетальной клетки при рН 7,2 и экспозиции ацидоза мин. Структура двухслойной цитоплазматической мембраны сохранена, митохондрии прижаты к периферии протоплазмы, отчетливо видны кристы на фоне просветленного матрикса. Ворсинки канальца хорошо выражены и имеют целостную структуру. Единичные каналы цитоплазматиче ского ретикулума окружены рибосомами. В межклеточном пространстве проходит секреторный каналец, окруженный соединительнотканными структурами. Выявляются значительные увеличе ния межклеточных щелей в результате отека.

Фото 4.18. Желудок кошки. Париетальная клетка фундальной железы же лудка (крови 7,2;

экспозиция 30 мин). Просветление матрикса, разрушение крист в отдельных митохондриях. Секреторный каналец находится в меж клеточном пространстве. Ув.: 20 000. Электронная микроскопия.

Сдвиг рН до 7,0 и экспозиции ацидоза 30 минут сопровождается выраженным отеком цито плазмы. Это приводит к нарушению организационной структуры клетки. Митохондрии хаотично разбросаны по всей площади клетки. Хотя внутриклеточный каналец сохраняет свою структуру строение микроворсинок нарушено, они теряют свою обычную форму, их обломки беспорядочно локализуются по содержимому париетальной клетки (фото 4.19). В некоторых париетальных клет ках возникают плотные органоиды и аутофагосомы, которые имеют грушеобразную форму, лока лизуясь ближе к периферии клетки. Митохондрии имеют различную электронную плотность, не которые из них разрушены. При рН 7,0 и экспозиции лактат-ацидоза 30 минут наступают грубые нарушения в структуре ядра. Они выражаются в пикнозе, уменьшении объема вследствие выделе ния ядерного сока, хроматин превращается в единую гомогенную массу неопределенной формы.

Ядро образует складки, деформируется, ядерная оболочка утолщена, утрачивает обычное специ фическое строение двухслойная мембрана.

Главные (зимогенные) клетки фундального отдела желудка выполняют пепсинообразую щую функцию. Они хорошо изучены у человека при различных патологических состояниях, так как легко удается получить кусочки слизистой при биопсии.

На приведенной электронной микрофотографии виден участок цитоплазмы главной (зимо генной) клетки фундальной железы желудка при рН 7,2 и экспозиции ацидоза 30 мин многочис ленные митохондрии, заполняющие клетку имеют нарушенную структуру крист, в матриксе орга ноидов обнаруживаются электронно-плотные скопления ионов кальция (фото 4.20). Подобные из менения наблюдались и в париетальной клетке при рН 7,0, но при этом деструкция митохондрий была более выраженной, а в цитоплазме выявлены участки аутолиза.

Фото 4.19. Желудок кошки. Обкладочная клетка собственной железы же лудка через 30 мин после «переживания» органа при метаболическом ацидо зе (рН крови 7,0). Конгломерация хроматина в ядре, разрушение в отдель ных местах ядерной оболочки, нарушение внутриклеточных микроворсинок.

Просветление матрикса, повреждение наружных мембран отдельных мито хондрий. Ув.: 20 000. Электронная микроскопия.

Фото 4.20. Желудок кошки через 30 минут ацидоза (рН 7,2). Участок слизи стой шеечной клетки, содержит множество гранул, сочетающихся с резко расширенными цистернами гранулярного эндоплазматического ретикулума.

Ув.: 20 000. Электронная микроскопия.

Цистерны гранулярного эндоплазматического ретикулума расширены. Видны единичные секреторные пузырьки. Межклеточные контакты резко расширены и заполнены множественными коллагеновыми волокнами (фото 4.21).

В эпителиальной выстилке желез желудка около 7 вариантов эндокринных клеток, описа ние которых не входит в задачи нашего исследования. Наряду с секреторными клетками в слизи стой оболочке встречаются фибробласты (фото 43). Электронная микроскопия такой клетки сви детельствует о том, что она наиболее подвержена влиянию ацидоза (рН 7,2 и экспозиция 30 мин).

В ядре клетки наблюдается деформация ядерной поверхности, агрегация и маргинация хроматина.

Мембрана имеет размытые контуры. Единичные митохондрии неопределенной формы, многие из них поглощены лизосомами, образуя аутофагосомы. Фибробласт окружен проколлагеновыми и коллагеновыми волокнами. Ядро соседней клетки также имеет размытую двойную мембрану. В результате отека, деструкции цитозоля и разрыва цитоплазматической мембраны содержимое кле ток обнаруживается в тканевой жидкости.

Одним из основных проявлений, вызываемых лактат-ацидозом, является отек различных морфологических компонентов сосудов, соединительнотканных структур околососудистого про странства, межклеточных пространств, клеток и их органоидов. Это ведет к нарушению структур ной организации органа на различных уровнях.

Желудочно-кишечный тракт в значительной степени подвержен действию лактат-ацидоза.

Это выражается в изменении всех основных структурных образований. Метаболический ацидоз вызывает отек всех оболочек различных отделов пищеварительной трубки.

Нами производился качественный и количественный анализ степени изменения соедини тельно-тканных образований, мышечной и слизистой оболочек. Выборочные исследования изме нений в тканях различных слоев пищевода, желудка, двенадцатиперстной, подвздошной, тощей, слепой и ободочной кишок показали, что изменения, возникающие под влиянием лактат-ацидоза, не подвергаются статистическому анализу. Это связано, во-первых, с тем, что у всех изучаемых животных общая толщина различных отделов, а так же их слоев варьирует в широких пределах.

Во-вторых, отек практически пропорционально охватывает все тканевые структуры, включая клетки и их органоиды.

Процентное соотношение соединительной и мышечной ткани в стенке пищевода в контро ле (рН 7,4) составляет соответственно 6,08 и 93,92%. В опыте при различных уровнях рН и экс позициях ацидоза (рН 7,2-6,5;

продолжительность ацидоза 30-180 мин) процентное содержание соединительной ткани колебалось от 6,41 (рН 6,8) до 22,07% (рН 7,2), а объем мышечной ткани от 77,93 (рН 7,2) до 93,59 % (рН 6,8) (табл. 4).


Таблица 4.

Изменение процентного соотношения соединительной и мышечной ткани в мышечной пластинке слизистой оболочки пищевода Уровень рН Соединительная ткань (%) Мышечная ткань (%) n = 7,4 11,48 88, 7,2 22,07 77, 7,0 12,98 87, 6,8 6,41 93, 6,5 19,45 80, Анализ процентного соотношения всех слоев пищевода, так же свидетельствует о большой вариабельности данных (табл. 5). По средним данным, при разных уровнях рН крови можно отме тить, что толщина различных слоев располагается в следующей последовательности по мере ее уменьшения: внутренний мышечный слой – 17,24 - 41,54%;

слизистая – 15,30 - 34,74%;

наружный мышечный слой – 9,88-18,82%;

мышечная пластинка слизистой – 9,45 - 14,79%;

подслизистая ос нова – 4,80 - 14,52%;

адвентиция – 4,97 - 9,35%.

Таблица 5.

Процентное соотношение слоев стенки пищевода при метаболическом ацидозе у кошек Контрольные Опытные животные животные Исследуемые рН 7,4 рН 7,2 рН 7,0 рН 6,8 рН 6, параметры n = 10 n = 10 n = 10 n = 10 n = Слизистая (%) 34,74 26,65 24,39 15,30 31, Мышечная пластинка 14,26 9,45 14,79 11,04 10, слизистой (%) Подслизистая основа 14,52 9,12 6,19 9,26 4, (%) Внутренний мышеч- 17,24 39,12 34,13 41,54 27, ный слой (%) Наружный мышечный 9,88 10,69 12,72 12,35 18, слой (%) Адвентиция (%) 9,35 4,97 7,78 8,36 7, Аналогичная картина наблюдается и при определении процентных соотношений различ ных слоев желудка. Несмотря на большой разброс данных в контроле и в опытных образцах (рН 7,2 - 6,5 и продолжительность ацидоза 30 -180 мин) общая закономерность изменения толщины различных слоев стенки желудка отчетливо просматривается. По степени уменьшения толщины различных слоев их можно расположить в следующем порядке: слизистая – 47,93 -29,40%;

внут ренний мышечный слой – 37,40 - 28,69%;

наружный мышечный слой 13,60-5,0%;

подслизистая основа 13,50 - 9,39%;

мышечная пластинка слизистой 6,40 - 2,56% (табл. 6).

Таблица 6.

Процентное соотношение слоев стенки желудка при метаболическом ацидозе у кошек Контрольные Опытные животные животные Исследуемые рН 7,4 рН 7,2 рН 7,0 рН 6,8 рН 6, параметры n = 10 n = 10 n = 10 n = 10 n = Слизистая (%) 47,93 46,50 37,74 30,60 29, Мышечная пластинка 2,56 3,20 1,59 6,30 6, слизистой (%) Подслизистая основа (%) 9,39 10,00 10,30 13,50 13, Внутренний мышечный 28,69 35,30 34,50 36,00 37, слой (%) Наружный мышечный 6,40 5,00 13,49 13,60 13, слой (%) В двенадцатиперстной кишке в контроле и в опыте на фоне возрастающего отека паренхи мы и соединительнотканных структур сохраняется примерно такая же закономерность. Процент ное соотношение различных оболочек стенки кишки располагается следующим образом: эпите лий – 37,74 - 47,93%;

внутренний мышечный слой – 24,59 - 34,50%;

подслизистая основа – 8,85 17,20%;

наружный мышечный слой – 6,40 - 13,49%;

адвентиция – 2,38 - 7,16%;

мышечная пла стинка слизистой – 1,36 - 2,56% (табл. 7).

Таблица 7.

Процентное соотношение оболочек двенадцатиперстной кишки при метаболическом ацидозе у кошек Контроль- Опытные животные ные Исследуемые животные параметры рН 7,4 рН 7,2 рН 7,0 рН 6,8 рН 6, n = 10 n = 10 n = 10 n = 10 n = Эпителий (%) 47,93 47,08 37,74 46,3 44, Мышечная пластинка сли- 2,56 1,36 1,59 2,13 1, зистой (%) Подслизистая основа (%) 9,39 8,85 10,30 8,90 17, Внутренний мышечный 28,69 28,17 34,50 27,08 24, слой (%) Наружный мышечный слой 6,40 7,37 13,49 12,24 9, (%) Адвентиция (%) 5,03 7,16 2,38 3,34 2, Морфометрический анализ стенки кишечника также не дает статистически достоверных данных по мере сдвига уровня рН в кислую сторону и увеличения экспозиции ацидоза. Законо мерные изменения можно наблюдать лишь при сравнении различных слоев кишечной стенки, как в подвздошном отделе тонкого кишечника, так и в слепой кишке. Эти данные приведены в табли цах (табл. 8, 9).

Таблица 8.

Процентное соотношение оболочек подвздошной кишки при метаболическом ацидозе у кошек Контрольные Опытные животные животные Исследуемые рН 7,4 рН 7,2 рН 7,0 рН 6,8 рН 6, параметры n = 10 n = 10 n = 10 n = 10 n = Слизистая (%) 53,59 54,22 51,20 62,49 49, Мышечная пластинка сли- 1,72 1,64 0,53 1,60 0, зистой (%) Подслизистая основа (%) 9,39 20,89 7,37 12,02 8, Внутренний мышечный 27,04 28,51 26,17 17,47 29, слой (%) Наружный мышечный 4,42 12,80 6,94 4,77 6, слой (%) Наружная соединтель- 3,85 5,81 2,89 1,65 4, нотканная оболочка(%) Таблица 9.

Процентное соотношение оболочек двенадцатиперстной кишки при метаболическом ацидозе у кошек Котрольные Опытные животные Исследуемые животные параметры рН 7,4 рН 7,2 рН 7,0 рН 6,8 рН 6, n = 10 n = 10 n = 10 n = 10 n = Слизистая (%) 10,44 17,56 14,30 45,75 14, Мышечная пластинка сли- 2,32 0,82 0,86 3,36 1, зистой (%) Подслизистая основа (%) 67,12 55,42 66,79 15,76 54, Внутренний мышечный 9,20 8,74 10,11 25,97 22, слой (%) Наружный мышечный 3,20 6,52 4,65 6,12 6, слой (%) Наружная соединитель- 7,73 1,60 3,29 3,04 1, нотканная оболочка(%) Качественный анализ различных отделов пищеварительного тракта позволяет выявить об щие закономерности. В просвете сосудов при лактат-ацидозе (рН 7,2) преобладают сладжи эрит роцитов. По мере углубления ацидоза и увеличения его продолжительности они сменяются тром бами, встречающимися в сосудах различного диаметра, и составляют от 80 до 100% случаев. Со судистая стенка артерий и вен утолщена, в некоторых местах наблюдается десквамация эндоте лиоцитов. Соединительнотканные структуры разрыхлены, имеются деструкция и разрывы колла геновых и ретикулиновых волокон. Отчетливо выражен околососудистый отек и дезинтеграция соединительнотканных структур. Клеточные элементы слизистой оболочки, мышечного слоя так же находятся в состоянии отека.

Детальное электронно-микроскопическое исследование слизистой желудка показывает, что по мере нарастания ацидоза в клетку поступает значительное количество воды, что сопровождает ся набуханием митохондрий, разрушением крист, разрывами внутренней и наружной мембран ор ганоидов. В клетках происходит образование различных включений: аутофагосом и жировых ка пель. Клеточное ядро претерпевает сложные изменения от отека до маргинации и агрегации хро матина с последующим кариопикнозом. В отдельных клетках происходит дезинтеграция содер жимого протоплазмы, разрывы цитоплазматических мембран с выходом органоидов во внекле точную жидкость и возможным поступлением наиболее мелких субклеточных структур и их об ломков в кровь и лимфу.

4.4. Влияние лактат-ацидоза на иммунные образования желудочно-кишечного тракта В стенке желудочно-кишечного тракта содержится большое количество лимфоидных обра зований, они составляют в среднем 15% от общего количества морфологических структур. Одна ко, они неравномерно расположены по ходу желудочно-кишечного тракта, что зависит прежде всего от функциональной роли различных отделов пищеварительных органов.

Лимфоидная ткань имеет свои особенности. Значительная часть ее расположена в виде скопления лимфоцитов без герминативных центров в слизистом, подслизистом и других слоях стенки. В лимфоидных образованиях постоянными спутниками иммунных клеток являются арги рофильные клетки, которые имеют отростки, образующие ретикулярную сеть, несущую опорную функцию для клеток лимфатической системы. Большое место в стенке пищеварительного тракта занимают инкапсулированные образования, имеющие герминативные центры. Центры размноже ния во многом сходны с фолликулами (узелками) лимфатических узлов. В пищеводе лимфоидные фолликулы практически не встречаются.

Строение лимфоидных образований желудочно-кишечного тракта у человека и животных подробно описано в многочисленных работах М.Р.Сапина и обобщено в монографиях (М.Р.Сапин, 1987;

М.Р.Сапин, Л.Е.Этинген, 1996).

В задачу наших исследований входит выяснение вопроса о влиянии лактат-ацидоза на мор фологические структуры желудочно-кишечного тракта, объединенные под общим понятием им мунные (лимфоидные) органы.

Основное внимание в наших наблюдениях было уделено характеру делимфатизации неин капсулированных и инкапсулированных образований (Пейеровых бляшек) в пищеводе, желудке, двенадцатиперстной кишке, тонком и толстом кишечнике под воздействием лактат-ацидоза раз личной глубины (рН 7,2 - 6,5) и продолжительности воздействия (30 - 180 мин).

Количественный состав свободно расположенных лимфоидных клеток на фоне развиваю щегося ацидоза в слизистой оболочке и подслизистом слое трудно поддается статистической оценке, так как при ацидозе наблюдается выраженный отек всех морфологических компонентов стенки желудочно-кишечного тракта. Поэтому уменьшение количественного содержания лимфо цитов в поле зрения микроскопа можно объяснить не только их миграцией, но и расширением межклеточных щелей, в результате отека, а также хаотическим передвижением иммунных клеток по ходу пищеварительной трубки в связи с нарушением аргирофильного каркаса.

Иначе обстоит дело с инкапсулированными лимфоидными образованиями. В этом случае с помощью использования сетки Г.Г.Автандилова и окулярмикрометра можно дать точную матема тическую оценку степени делимфатизации герминативных центров и получить достоверные дан ные, варьирующие в зависимости от глубины и экспозиции ацидоза.

В пищеводе, чаще в его дистальной части, встречаются единичные лимфоидные узелки.

Количественный анализ содержания лимфоцитов и других клеток на единицу площади зародыше вого центра показывает, что в контроле (уровень рН 7,4 - 7,36) их число составляет 227,5±2,29. По мере сдвига рН в кислую сторону до 7,2-7,0 и 6,8-6,5 и экспозиции ацидоза 30-60 мин и 120- мин соответственно, количество клеток в герминативном центре на единицу площади достоверно снижается до 213,8±2,82 (Р 0,001) (табл. 10).

Таблица 10.

Морфологические параметры лимфоидных образований пищевода при метаболическом лактат ацидозе у кошек (M+m) Контрольные Опытные животные Исследуемые параметры животные рН 7,4-7,36 рН 7,2-7,0 рН 6,8-6, n=10 n=10 n= Количество клеток в герми нативном центре на ед.пл. 227,5 ± 2,29 218,7 ± 2,75 213,8 ± 2, р 0,03 р 0, В желудке количество лимфоцитов в герминативном центре лимфоидных фолликулов у контрольных животных (уровень рН 7,4-7,36) составило 260,3±3,00 клеток на единицу площади.

При достижении уровня рН 7,2-7,0 их количество достоверно снижается до 242,3±2,39, а при дальнейшем усугублении экспериментального лактат-ацидоза до уровня рН 6,8-6,5 и удлинении его экспозиции до 120-180 мин интенсивность делимфатизации также нарастает и содержание лимфоцитов на единицу площади равно 229,7±2,06 (Р 0,001) (табл. 11).

Таблица 11.

Морфологические параметры лимфоидных образований желудка при метаболическом лактат ацидозе у кошек (M+m) Контрольные жи- Опытные животные Исследуемые параметры вотные рН 7,4-7,36 рН 7,2-7,0 рН 6,8-6, n=10 n=10 n= Количество клеток в герми нативном центре на ед.пл. 260,3 ± 3,00 242,3 ± 2,39 229,7 ± 2, р 0,001 р 0, Лимфоидные образования двенадцатиперстной кишки подвергаются делимфатизации, сте пень которой также зависит от глубины и продолжительности ацидоза. Содержание лимфоцитов в герминативном центре при рН 7,2-7,0 уровне снижается на 20 клеток по сравнению с контролем, а при рН 6,8-6,5 – на 32 клетки (табл. 12).

Таблица 12.

Морфологические параметры лимфоидных образований двенадцатиперстной кишки при метабо лическом лактат-ацидозе у кошек (M+m) Контрольные жи- Опытные животные Исследуемые параметры вотные рН 7,4-7,36 n=10 рН 7,2-7,0 рН 6,8-6,5 n= n= Количество клеток в гермина тивном центре на ед.пл. 247,0± 2,17 227,5 ± 0,94 215,6 ± 2, р 0,001 р 0, В подвздошной кишке содержание лимфоцитов в герминативном центре при рН 6,8-6,5 и экспозиции ацидоза 120-180 мин по сравнению с контролем снизилось на 46 клеток на единицу площади (р 0,01), уменьшение количества клеток при рН 7,2-7,0 было менее выраженным и со ставило 14 клеток по сравнению с контролем (табл.13).

Таблица 13.

Морфологические параметры лимфоидных образований подвздошной кишки при метаболическом лактат-ацидозе у кошек (M+m) Контрольные животные Опытные животные Исследуемые параметры рН 7,4-7,36 n=10 рН 7,2-7,0 n=10 рН 6,8-6,5 n= Количество клеток в гер минативном центре на 290,7 ± 3,10 276,2 ± 2,90 264,9 ± 2, ед.пл. р 0,01 р 0, Примерно такая же степень делимфатизации при лактат-ацидозе наблюдалась и в тощей кишке (табл. 14).

Таблица 14.

Морфологические параметры лимфоидных образований тощей кишки при метаболическом лак тат-ацидозе у кошек (M+m) Контрольные жи- Опытные животные Исследуемые параметры вотные рН 7,4-7,36 рН 7,2-7,0 рН 6,8-6, n=10 n=10 n= Количество клеток в гермина тивном центре на ед.пл. 246,6 ± 2,30 224,1 ± 1,98 214,6 ± 2, р 0,001 р 0, Влияние лактат-ацидоза (рН 7,2-6,5 и продолжительностью 30-180 мин) на степень делим фатизации в лимфоидных узелках толстого кишечника исследовалось в двух отделах: слепой и ободочной кишках. Эти данные приведены в таблицах 15 и 16. по мере сдвига рН крови в кислую сторону и удлинению продолжительности ацидоза степень делимфатизации нарастала. При рН 7,2-7,0 делимфатизация была хотя и незначительной, но достоверной (р0,01), а при рН 6,5-6,8 ко личество клеток в герминативных центрах уменьшалось с 314,8 до 284,4±4,40 (Р 0,004). Та же закономерность характерна и для оценки степени делимфатизации в ободочной кишке, но со зна чительно большей долей достоверности (Р 0,001).

Таблица 15.

Морфологические параметры лимфоидных образований слепой кишки при метаболическом лак тат-ацидозе у кошек (M+m) Контрольные жи- Опытные животные Исследуемые параметры вотные рН 7,4-7,36 рН 7,2-7,0 n=10 рН 6,8-6, n=10 n= Количество клеток в герми нативном центре на ед.пл. 314,8 ± 2,60 304,3 ± 3,20 284,4 ± 4,40 р р 0,001 0, Таблица 16.

Морфологические параметры лимфоидных образований ободочной кишки при метаболическом лактат-ацидозе у кошек (M+m) Контрольные жи- Опытные животные Исследуемые параметры вотные рН 7,4-7,36 n=10 рН 7,2-7,0 n=10 рН 6,8-6,5 n= Количество клеток в герми нативном центре на ед.пл. 309,0 ± 4,40 291,3 ± 4,60 273,7 ± 3, р 0,001 р 0, Таким образом, молочно-кислый ацидоз вызывает закономерные процессы миграции лим фоидных клеток из зародышевых центров различных отделов желудочно-кишечного тракта.

Более ранний анализ перестроек в соединительнотканных структурах стенок пищевари тельного тракта свидетельствует о том, что по мере сдвига уровня рН в кислую сторону, протека ют деструктивно-дистрофические процессы в коллагеновых, эластических и ретикулиновых во локнах. Они выражаются в отеке, набухании, разрывах волокнистых образований, а в крайних случаях их агрегации и конгломерации. Особенно страдают тонкие аргирофильные отростки рети кулярных клеток, являющихся основой для создания аргирофильного каркаса лимфоидных узел ков. Нарушение опорной функции иммунных образований желудочно-кишечного тракта может служить причиной миграции и делимфатизации герминативных центров. В отдельных опытах наблюдается практически полный распад зародышевых центров кишечника. Эти процессы, несо мненно оказывают влияние на иммунную защиту органов пищеварения.

Глава 5. Механизмы развития морфологического эквивалента ДВС – синдрома.

Для изучения морфологической картины сопутствующей коагулолитическим нарушениям в форме ДВС-синдрома исследовали гистологические, гистохимические и электоронномикроско пические изменения в крови, сосудистых стенках, межклеточном матриксе, клетках различных органов и субклеточных структурах. В этом аспекте были изучены сосуды и ткани тимуса, селе зенки, лимфатических узлов, сердца, печени, почек, легких, кишечника.

Было установлено, что при ацидозе различной глубины (от рН 7,2 до рН 6,5) и продолжи тельности (от 30 до 180 мин) всегда обнаруживались признаки нарушения микроциркуляции (микротромбозы и микрокровоизлияния), а в крупных сосудах сладжи эритроцитов и тромбы, фиксированные к субэндотелию (фото 5.1 – 5.12). Ацидоз приводит к изменению субклеточных и клеточных структур, компоненты которых попадают в межклеточную среду, лимфу, кровь.

Сдвиг рН крови до 7,2 продолжительностью 30 мин сопровождается полнокровием сосу дов органов, отеком сосудистой стенки и околососудистого пространства, лимфостазом, агрегаци ей форменных элементов крови. При оптической микроскопии наблюдаются явления застоя крови различной степени выраженности, начиная с эритроцитов, накопленных в капиллярах и кончая образованием тромбов и микротромбозов в различных участках сосудистой сети (фото 5.1, 5.4, 5.8, 5.9, 5.11). Морфологические изменения при сдвиге рН до 7,2 приводят не только к изменению агрегатного состояния крови, но и вызывают нарушение структуры эндотелия сосудов. При элек тронной микроскопии наблюдается деформация поверхности эндотелиоцитов, образуются выро сты из цитоплазматической мембраны, которые отрываются в виде небольших везикул и попада ют в кровоток. Ацидоз ведет к нарушению структурной целостности клетки. Наиболее разнооб разные изменения отмечаются в митохондриях.

Сдвиг рН крови до 7,0 продолжительностью 60 мин приводит к стазу микроциркуляции, тромбозам в общей циркуляции (фото 5.2, 5.3, 5.5, 5.6, 5.12). В сосудистом русле нарастают явле ния диссеминированного внутрисосудистого свертывания, усиливаются тромботические и гемор рагические явления. При рН 7,0 и ниже повреждение клеток эндотелия при сдвиге рН в кислую сторону, приводит к выходу во внеклеточную среду, а затем в кровь и лимфу, ферментов, органо идов (цитоплазматических включений, лизосом, митохондрий и их разрушенных компонентов), обладающих, прежде всего, прокоагулянтной активностью.

При рН 6,8 – 6,5 (120 – 180 мин) происходит повреждение межклеточного вещества, клеток крови и лимфы. ДВС нарушает процессы микроциркуляции в различных органах (легкие, почки, печень, сердце, тимус, селезенку, лимфатические узлы, желудочно-кишечный тракт).

Таким образом, ацидоз сопровождается не только гемостатическими сдвигами крови, но также приводит к развитию морфологического эквивалента ДВС-синдрома. Между процессами тромбирования сосудов различных органов меются существенные различия, которые могут быть связаны как с особенностями тканей этих органов, так и со степенью нарушения их структуры при ацидозе, а также величиной рН крови.

Сосуды и ткани различных органов содержат соединения с прокоагулянтной, антикоагу лянтной и фибринолитической активностью. Повреждения, вызываемые различными факторами, могут привести к нарушению сосудистой стенки и структуры клеточных элементов органов.

Ацидоз, возникающий при различных патологических состояниях, ведет к нарушению структурной организации не только сосудов, но и клеток органов и субклеточных образований.

При рН 7,2-7,0 наблюдается полнокровие сосудов, отек сосудистой стенки и околососуди стого пространства, застой крови различной степени выраженности, микротромбозы и микрокро воизлияния. При более низком рН в отдельных сосудах выявляется десквамация эндотелия и нарушение структуры эндотелиоцитов, обнажение субэндотелия. Эти явления наблюдаются в поджелудочной железе (фото 5.6) и печени (фото 5.7).

Сдвиг рН в общей циркуляции до 7,2 по данным электронной микроскопии вызывает де формацию поверхности эндотелиоцитов, образуются выросты из цитоплазматической мембраны, микровезикулы, которые могут отрываться от поверхности клеток и попадать в просвет сосуда.

Учитывая наличие в мембранах эндотелия фосфолипидов с различной прокоагулянтной активно стью, можно сделать предположение об их важной роли в развитии гиперкоагулемии при лактат ацидозе (фото 5.8, 5.9). При рН 7,0 и продолжительности ацидоза 30 мин мембраны отдельных эн дотелиоцитов полностью разрушаются, количество микровезикул резко возрастает, содержимое клеток поступает в капиллярное русло (фото 5.10).



Pages:     | 1 || 3 |
 





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.