авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:     | 1 |   ...   | 13 | 14 || 16 | 17 |   ...   | 20 |

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ СИБИРСКОЕ ОТДЕЛЕНИЕ РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК НОВОСИБИРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ДЕПАРТАМЕНТ ПРИРОДНЫХ РЕСУРСОВ И ...»

-- [ Страница 15 ] --

Уменьшение индекса полярности объясняется изменением Значение индексов полярности микроокружения пирена вследствие выхода пирена из воды в микроокружения молекул пирена белковую микрофазу, содержащую гидрофобные области. Глобула (I1/I3) в исследованных средах БСА содержит больше гидрофобных областей, чем САЧ. Этим объясняется уменьшение индекса полярности при переходе от САЧ Среда I1/I к БСА. Установлено, что интенсивность флуоресценции возрастает вода 1,67 при переходе от водных растворов к растворам САЧ и БСА. Это САЧ 1,25 можно объяснить сорбцией молекул пирена белками и, как БСА 1,18 следствие, уменьшением вероятности безизлучательной потери энергии [5]. При этом интенсивность флуоресценции пирена в растворе БСА значительно превышает таковую в САЧ, что подтверждает наличие в глобулах макромолекул БСА большего числа гидрофобных областей, с которыми и стремится взаимодействовать гидрофобная молекула пирена.

Полученные результаты исследования взаимодействия экотоксикантов ПАУ с белковыми молекулами могут найти применение в медицине при изучении возможностей ранней диагностики рака, а также для эколого-аналитического определения ПАУ в таких биологических средах, как плазма крови.

Работа выполнена при финансовой поддержке гранта РФФИ 10-02-00159-а (2010-2011 гг.) Литература 1. В. Н. Майстренко, Н. А. Клюев. Эколого-аналитический мониторинг стойких органических загрязнителей. М.:БИНОМ. Лаб. знаний, 2004.

2. С. А. Куценко. Основы токсикологии //Российский биомедицинский журнал. – 2003. – Т. 4. – С. 119.

3. А. П. Демченко. Люминесценция и динамика структуры белков. Киев. Наук. Думка, 1988.

4. Г. Е. Добрецов. Флуоресцентные зонды в исследовании клеток, мембран и липопротеинов. Москва.

Наука, 1989.

5. А. М. Салецкий, А. Г. Мельников, А. Б. Правдин, В. И. Кочубей, Г. В. Мельников. Комплексо образование пирена и антрацена с плазмой крови человека //Журнал Прикладной Спектроскопии. – 2008. – Т. 75. – № 3. – С.379-382.

Научный руководитель – канд. хим. наук, доцент О. А. Дячук ОТДАЛЕННЫЕ ПОСЛЕДСТВИЯ КРАТКОВРЕМЕННОГО НИЗКОИНТЕНСИВНОГО ОБЛУЧЕНИЯ РАЧКОВ DAPHNIA MAGNA STRAUS О. В. Воробьева Московский государственный университет им. М. В. Ломоносова Институт проблем лазерных и информационных технологий РАН, г. Троицк, Московская обл.

Лазерные и светодиодные технологии находят широкое применение в биологии и медицине.

Низкоинтенсивное оптическое излучение, по данным ряда авторов, способно стимулировать биологические процессы в организме [1, 2]. Множество теорий, описывающих механизмы лазерной биостимуляции, не дают полного представления о механизме её терапевтического действия. В результате в области лазерной терапии подбор доз, режимов и способов облучения преимущественно происходит эмпирическим путем, что малоэффективно и зачастую не только не приводит к ожидаемым положительным результатам, но и нередко ведёт к развитию побочных эффектов. Облучение в режимах, не соответствующих оптимальным, не позволяет достичь терапевтического эффекта и может вызвать угнетение жизненно важных функций организма. Таким образом, определение параметров облучения, оказывающих стимулирующие действие, наряду с режимами, вызывающими отрицательные последствия для организма, является актуальной задачей.

Кроме того, до сих пор остается открытым вопрос о действии таких излучений на последующие поколения потомков облучаемого организма. Цель данного исследования - изучение отдаленного действия низкоинтенсивного излучения видимого диапазона на рачков в ряду поколений после кратковременного однократного облучения. Исследования проводились на культуре рачков Daphnia magna возраста 24 часов.

Рачки облучались однократно с помощью светодиодной матрицы (максимальная длина волны 650 нм, интенсивность излучения 0,91 мВт/см), время экспозиции 1 с и 0,1 с. Отдаленные последствия влияния облучения на жизнедеятельности дафний изучались путем наблюдения за исходной и дочерними генерациями облученных и контрольных особей в течение 21 суток для каждого поколения. Исследовались такие характеристики как смертность, плодовитость, правильность морфологического строения и продолжительность жизни потомства.

Во всех изученных поколениях выбранные экспозиции не оказывали достоверного влияния на выживаемость рачков. Результаты наблюдений за размножением дафний представлены в таблице.

Облучение не оказало влияния на сроки созревания, которое наступало на 7-9-е сутки эксперимента. За срок наблюдения 21 сутки во всех сериях появилось не меньше 6-ти пометов. Достоверные отличия от контроля были выявлены при экспозиции 1 с у исходно облученных особей (увеличение на 41 %) и в поколении F при экспозиции 0,1 с и 1 с (снижение на 22 % и 44 % соответственно). Отличительной особенностью облученных рачков во всех четырех изученных поколениях явилось рождение аномальных особей и особей, погибавших в течение нескольких часов после рождения. Аномалии были связаны с изменением строения плавательных антенн: чаще всего с редукцией щетинок на антеннах, реже - с одноветвистыми антеннами, изменением числа члеников или с отсутствием антенн. Аномальные особи и быстро погибающие особи встречались при обеих экспозициях. Примечательно, что наибольший процент аномальных особей был зафиксирован в первом помете поколения F1 у особей с экспозицией 0,1 с (19 %). В последующих пометах этого поколения доля таких особей не превышала 1 % и в общей сложности за 6 пометов составила 0,42 %.

В остальных случаях доля аномальных и быстро погибающих особей в генерациях не превышала 2,5 %, и общая доля таких особей в каждом из изученных поколений не превышала 1 %.





Влияние облучения с различной экспозицией на Daphnia magna в ряду поколений Выживаемость, Плодовитость, Аномалии и быстро погибающие, % от контроля % от контроля % от общего числа рожденной молоди Время, с Р F1 F2 F3 Р F1 F2 F3 Р F1 F2 F 0,1 95 100 83 100 115 105 78* 77 0,34/0,56 0,42/0,42 0,41/0 0/ 1 105 111 111 100 141* 112 56* 81 0,92/0,28 0/0.17 0,11/0,11 0/ 0 100 100 100 100 100 100 100 100 0 0 0 * – статистически достоверные результаты Результаты свидетельствуют о том, что излучение со спектром, отличающимся от обычного, вызывает изменение физиологических процессов, которые могут привести как к стимуляции, так и к снижению различных показателей жизнедеятельности. Даже однократное облучение рачков с экспозицией 0,1–1,0 с способно вызывать отдаленные последствия: колебания числа рачков в помёте, увеличение доли аномальных особей и особей, погибающих в течение суток после рождения.

Работа выполнена при поддержке РФФИ (грант 10-02-00672).

Литература 1. В. М. Чудновский, Г. Н. Леонова, С. А. Скопинов, А. Л. Дроздов. Биологические модели и физические механизмы лазерной терапии. Владивосток: Дальнаука, 2002.

2. Ю. Д. Владимиров, Г. И. Клебанов и др. Молекулярные и клеточные механизмы действия низкоинтенсивного лазерного излучения // Биофизика, 2004. – Т. 49. – № 2. – С. 339-50.

Научный руководитель – д-р биол. наук, проф. О. Ф. Филенко ЗАРАЖЕННОСТЬ ЕЛЬЦА (LEUCISCUS LEUCISCUS BAICALENSIS) НИЖНЕЙ ТОМИ МЕТАЦЕРКАРИЯМИ КОШАЧЬЕЙ ДВУУСТКИ И ИХ МОРФОМЕТРИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ Т. С. Макарова Томский государственный университет Западная Сибирь входит в зону самого крупного очага описторхоза в мире. Возбудитель описторхоза трематода Opisthorchis felineus (Rivolta, 1884) имеет сложный жизненный цикл с участием промежуточных и дополнительных хозяев. Роль дополнительных хозяев выполняют карповые рыбы, которые и служат основным источником заболевания. Многочисленные водоемы Томской области изобилуют карповыми рыбами. В бассейне нижней Томи наиболее многочисленным промысловым видом и объектом любительского лова является елец. Сотрудниками кафедры ихтиологии и гидробиологии Томского госуниверситета проводятся ежегодные мониторинговые исследования водоемов области. Выяснена роль ельца в эпидемиологии описторхоза. В мышцах ельца могут паразитировать личинки не менее 30 видов трематод.

Цель наших исследований – выяснить заражённость личинками трематод мышц ельца нижней Томи в 2009-2011 гг. и получить морфометрические показатели найденных метацеркарий.

У карповых рыб водоёмов Томской области чаще выявляется 6 видов трематод [1]. Наиболее опасные из них три – метацеркарии Opisthorchis felineus, Metorchis bilis, Pseudamphistomum truncatum. Метацеркарии двух последних видов встречаются не ежегодно и с минимальной экстенсивностью и интенсивностью.

Оставшиеся 3 вида регистрируются чаще: кошачья двуустка, Rhipidocotyle campanula и Paracoenogonimus ovatus, реже Metorchis xanthosomus. Метацеркарии этих видов для человека не опасны.

Основными определительными признаками метацеркарий считаются морфометрические показатели цист и личинок. Известно, что эти показатели подвержены модификационной изменчивости и часто зависят от района исследования, типа водоёма, вида дополнительного хозяина и др. Наиболее надёжным определительным признаком служат длина пищевода и развилок кишечника, который у M. bilis, P. truncatum приближен к ротовой присоске [2]. Однако этот признак не всегда виден и чаще регистрируется у живых метацеркарий.

В летние месяцы 2009 года нами было обследовано 50 экз. ельца из русла нижней Томи (окрестности г. Томска). Экстенсивность заражения личинками кошачьей двуустки составила 100 % с интенсивностью от 1 до 45 экз. в верхнем среднем участке ниже спинного плавника. Зараженность другими личинками, опасными для человека, была невысокой и составляла для M. bilis – 4,0 %, а P. truncatum – 1,5 %. В году обследовано 49 экз. ельца из русла нижней Томи (окрестности с. Кафтанчиково). Зараженность метацеркариями кошачьей двуустки составила 95,9 %, максимальная интенсивность заражения – 212 экз.

Инвазированность трематодами M. bilis – 1,1 %, а P. truncatum – 1,8 %. В 2011 году зараженность ельца русла нижней Томи была выше. Обследовано 70 экз. ельца (окрестности с. Кафтанчиково) и 20 экз. из р. Басандайка (правобережный приток Томи). Экстенсивность инвазии составляла 100 % и 70 % соответственно, максимальная интенсивность – 136 экз. Другие паразиты, опасные для человека, в 2011 г.

не встречены. Таким образом, полученные данные позволяют сделать вывод о крайне неблагополучном эпидемиологическом состоянии обследованных водоёмов.

Получены морфометрические показатели 15 цист и личинок кошачьей двуустки. Снимались следующие показатели: длина и ширина цисты, толщина оболочки цисты, длина и ширина тела личинки, длина и ширина ротовой и брюшной присосок. Результаты свидетельствуют о том, что размеры цист (0,170, до 0,250,33 мм), длина и ширина тела паразитов (0,44–1,360,15–0,30 мм) в основном соответствовали данным других исследователей [3;

4;

5]. Длина ротовой и брюшной присосок значительно варьировалась, встречались паразиты с меньшими и большими размерами (ротовая – 0,15–0,280,015–0,17 мм.;

брюшная 0,022–0,1380,07–0,012 мм).

Таким образом, размерные показатели не являются надёжными определительными признаками, и проблема диагностики вида требует дальнейших исследований с большой выборкой.

Литература 1. С. А. Беэр. Биология возбудителя описторхоза. М.: Товарищество научных изданий КМК, 2005.

2. Т. А. Бочарова. Возбудитель описторхоза и другие мышечные паразиты карповых рыб бассейна нижней Томи. Томск: Изд-во ТГУ, 2007.

3. Определитель паразитов пресноводных рыб. Л.: Изд-во Наука, 1987. – Т. 3. – 583 с.

4. С. М. Соусь, А. А. Ростовцев. Паразиты рыб Новосибирской области. Тюмень, 2006. – Ч. 1.

5. С. М. Соусь, А. А. Ростовцев. Паразиты рыб Новосибирской области. Тюмень, 2006. – Ч. 2.

Научный руководитель – канд. биол. наук, доцент Т. А. Бочарова АДАПТАЦИОННО-ЭКОЛОГИЧЕСКОЕ СТАФИЛОКОККОНОСИТЕЛЬСТВО СРЕДИ СТУДЕНТОВ-МЕДИКОВ Е. А. Железнова, Т. Л. Соловьева Читинская государственная медицинская академия Человек постоянно находится под воздействием ряда факторов окружающей среды, одним из которых являются микроорганизмы. Носительство золотистого стафилококка в нижних носовых ходах достаточно распространено в популяции человека и наблюдается у 70–90 % обследованных [3]. Стафилококк передается воздушно-капельным, либо, реже, контактно-бытовым путём. При этом стафилококковое бактерионосительство рассматривается, как правило, только в отношении S. aureus, а обнаруживаемые коагулазоотрицательные стафилококки (КОС) оцениваются как нормофлора. Но в последние годы различные штаммы КОС приобретают всё большее значение как возбудители гнойно-септических инфекций. Особую опасность представляют медицинские работники, как носители патогенных стафилококков. Именно с целью профилактики распространения стафилококка среди ослабленных пациентов чаще всего проводят обследование студентов-медиков перед прохождением практики в лечебно профилактических учреждениях [1, 3].

Целью настоящей работы является оценка результатов обследования на стафилококк среди студентов 2- курсов факультетов ЧГМА и анализ влияния госпитальной среды на формирование стафилококкового бактерионосительства. Обследовано 1527 человек возраста 18–25 лет. Материал из полости носа забирался стерильным ватным тампоном. Посев осуществлялся стандартными бактериологическими методами.

Степень роста оценивалась общепринятыми методами [2]. Идентификация выделенных культур проводилась с помощью Staphy-test 16, ПБДС производства г. Нижний Новгород. Чувствительность изолированных штаммов к антибиотикам определяли диско-диффузионным методом.

В полости носа стафилококки различных видов обнаруживали в 97,2 % случаев, как правило, регистрировали II-III степень обсемененности (65 %). В результате исследования 9,7 % обследованных оказались носителями золотистого стафилококка, причем, больше всего носителей выявлено среди студентов лечебного факультета (12 %). Отмечается явная тенденция к увеличению бактерионосителей среди студентов всех факультетов к 4 году обучения (до 14,9 % на лечебном;

до 10,9 % на педиатрическом и до 6, 7 % на стоматологическом). К 5 курсу частота выделения стафилококка снижается (12,8 %- на лечебном;

5,8 % - на педиатрическом и 1,6 % - на стоматологическом факультетах). Среди студентов 6 курса лечебного и педиатрического факультетов бактерионосителей не выявлено, что явилось результатом проведенной санации бактерионосителей и применением в дальнейшем соответствующих профилактических мер.

При анализе микрофлоры носовых ходов установлено, что она представлена преимущественно S. epidermidis (57,3 %) и другими КОС (7,7 %), в большинстве случаев с гемолитической активностью.

Бактерионосительство S. aureus наблюдали у 23,7 % обследованных.

На сегодняшний день наиболее значимой проблемой является самолечение и бесконтрольный приём антибиотиков, приводящий к формированию антибиотикорезистентных штаммов. Выделенные нами культуры стафилококков чаще проявляли резистентность к эритромицину (18,6 %) и тетрациклину (14,8 %).

Оксациллин-резистентность выявляли у 9,1 %, к ванкомицину все культуры были чувствительны. Но, тем не менее, возможность решения проблемы появления устойчивых к антибиотикам штаммов путём создания новых препаратов сомнительна, и поэтому для профилактики бактерионосительства рекомендуется принцип «бактериальной интерференции» (заселение представителями нормобиоты) и повышение иммунного статуса [4].

Литература 1. Д. Г. Дерябин. Стафилококки экология и патогенность. – Екатеринбург, УрО РАН, 2000.

2. Приказ МЗ СССР № 535 от 22.04.1985 г. МУ по применению унифицированных микробиоло гических (бактериологических) методов исследования унифицированных микробиологических (бактериологических) методов исследования в клинико-диагностических лабораториях.

3. С. В. Поспелова, Э. С. Горовиц Характеристики штаммов стафилококков, изолированных при обследовании на бактерионосительство. – Томск, сб. науч. трудов вып. 2, «Проблемы и перспективы современной науки», 2008. – С. 47-49.

4. Е. И. Ткаченко, Ю. П. Успенский Питание, микробиоценоз и интеллект человека. – СПб.: Спецлит, 2006.

Научный руководитель – ассистент каф. микробиологии с вирусологией и иммунологией Т. А. Черепанова СОДЕРЖАНИЕ ПРОДУКТОВ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ БЕЛКОВ (ПОБ) В ТКАНЯХ МОЛЛЮСКОВ UNIO PICTORUM Х. Е. Абделькадер Гханнам Астраханский государственный университет Свободнорадикальное окисление белков определяется как посттрансляционная ковалентная модификация, которая может быть важной для ряда физиологических процессов, таких как старение, тканевой и энергетический обмен. Патологическое действие усиления перекисных процессов связано с образованием межмолекулярных сшивок, что приводит к изменению физико-химического состояния клеточных мембран. Этот процесс является неспецифической реакцией на различные воздействия и характеризует адаптацию клетки к действию внешних факторов. Изменения интенсивности окислительной модификации белков отражают общую направленность свободнорадикальных процессов, происходящих во всем организме.

Известно, что окисление белков осуществляется за счёт образующихся активных форм кислорода (АФК) в присутствии донаторов электронов и металлов переменной валентности. Существует мнение, что в состоянии окислительного стресса атаке подвергаются в первую очередь не липиды, а белки мембран, что приводит к разрушению последних и лизису клетки.

Цель исследования – изучение перекисного окисления белков (ПОБ) в различных тканях моллюсков.

Материалы и методы исследования. В качестве тест-объектов при проведении исследования были использованы моллюски Unio pictorum. Моллюсков, предназначавшихся для исследований, отлавливали из естественных водоемов и доставляли в лабораторию, где после выдерживания в течение одной недели для адаптации к условиям аквариума приступали к экспериментам. Для оценки уровня окислительного стресса моллюски были разделены на две группы по размерно-весовым показателям: мелкие моллюски и моллюски среднего размера.

Для анализа использовали 0,1 мл гомогената тканей моллюсков. В пробы добавляли 1 мл 20 % трихлоруксусной кислоты для осаждения белка, затем 1 мл 0,1 М 2,4-динитрофенилгидразина, разведенного в 2 М HCl, для окрашивания продуктов ПОБ. Реакцию проводили в течение 1 ч при комнатной температуре, затем пробы центрифугировали при 200g в течение 10 мин. Осадок дважды промывали смесью этанол:этилацетат=1:1, подсушивали и растворяли в 3 мл 8 М мочевины с добавлением 1 капли 2 M HCl.

Продукты, образующиеся в результате перекисного окисления, количественно реагируют с 2,4 динитрофенилгидразинами с образованием 2,4-динитрофенилгидразонов. Продукты реакции регистрировали при = 270 нм (альдегидфенилгидразоны), = 363 и = 370 нм (кетодинитрофенилгидразоны), степень окисленной модификации белков выражали в единицах оптической плотности (ЕД опт. пл/1 мг белка).

Результаты исследования тканей моллюсков из контрольной группы показали, что содержание начальных и конечных продуктов ПОБ во всех исследованных тканях выше у моллюсков среднего размера, что вероятно связано с возрастными изменениями физиологических процессов у гидробионтов.

Содержание продуктов ПОБ в тканях моллюсков (Ед/мг белка) Вид ткани, нм Мелкие моллюски Моллюски средних размеров 270 0,1981±0,092 0,2231±0, Жабры 363 0,1764±0,084 0,1975±0, 370 0,0562±0,008 0,0778±0, Вид ткани, нм Мелкие моллюски Моллюски средних размеров 270 0,2619±0,096 0,3178±0, Печень 363 0,1231±0,063 0,1879±0, 370 0,1004±0,056 0,1469±0, 270 0,2120±0,089 0,3875±0, Гонады 363 0,1810±0,088 0,1898±0, 370 0,1087±0,057 0,1528±0, 270 0,2254±0,091 0,2509±0, Нога 363 0,1312±0,065 0,1524±0, 370 0,1135±0,051 0,1388±0, Таким образом, нами было установлено, что наибольшие различия между мелкими моллюсками и моллюсками среднего размера по содержанию продуктов ПОБ выявлены в тканях печени и гонад. В этих тканях с достоверностью р0,05 зафиксированы различия как между концентрацией начальных, так и между концентрацией конечных продуктов ПОБ, что позволяет предположить серьезные нарушения в метаболизме моллюсков и высокую напряженность функционирования антиоксидантных систем.

Литература 1. Т. И. Биргер. Метаболизм водных беспозвоночных в токсической среде. Киев: Наукова думка, 1979.

Научный руководитель – д-р. мед. наук, проф. О. В. Бойко ИЗУЧЕНИЕ АКТИВНОСТИ ПЕРОКСИДАЗЫ В ВОЗРАСТНОМ АСПЕКТЕ НА ПРИМЕРЕ ПЛОДОВОЙ МУШКИ DROSOPHILA MELANOGASTER Д. С. Сердюков Хакасский государственный университет им. Н. Ф. Катанова, г. Абакан В современном мире человек подвергается воздействию различных факторов среды: электромагнитных волн, ультрафиолета, продуктов питания и новых фармацевтических средств. Это провоцирует т. н. окислительный стресс, средством защиты от которого являются антиоксиданты различного рода [1, 5].

Наиболее важными и наименее изученными естественными антиокислителями являются ферменты, которые более эффективны по сравнению с классическими низкомолекулярными антиоксидантами [4]. Одним из таких ферментов является пероксидаза (КФ 1.11.1.7) [2].

Данная работа позволяет расширить представления о механизмах адаптации живых систем к воздействию факторов внутренней и внешней среды, а также разработать эффективную стратегию профилактики и лечения различных заболеваний.

Цель исследования – изучить динамику изменения активности пероксидазы Drosophila melanogaster в онтогенезе.

Материалом исследования являлась плодовая мушка Drosophila melanogaster, которая выступала в роли модельной системы по изучению динамики пероксидазной активности. Популяция выращивалась на стандартной питательной среде до необходимого количества особей, позволяющего проводить количественные измерения. Взрослые особи изучались на протяжении первых 14 суток жизни. Для анализа были выбраны имаго трёх возрастов: 1-, 7- и 14-суточные. Самки и самцы исследовались отдельно.

Активность пероксидазы определяли в свежеприготовленных гомогенатах (фосфатный буфер, рН = 7,0) синхронизированных особей при 25 °С по начальной скорости (за 1 минуту) окисления аскорбиновой кислоты перекисью водорода. Изменение динамики оптической плотности проводилось на спектрофотометре «UNICO модель 2800» при = 265 нм [3]. Каждый экспериментальный вариант включал три повторности.

Полученные данные по активности фермента суммированы в таблице.

Активность пероксидазы Drosophila melanogaster Активность пероксидазы, Е/л Возраст, сутки самки самцы 1 0,1741 ± 0,0297 0,1249 ± 0, 7 0,1588 ± 0,0242 0,0395 ± 0, 14 0,1031 ± 0,0122 0,0370 ± 0, Выводы. За исследованный возрастной период (14 суток) наблюдается тенденция к снижению пероксидазной активности особей Drosophila melanogaster, при этом выявлено более плавное снижение активности фермента в течение жизни у самок по сравнению с самцами. Показано, что активность пероксидазы у самок на всём протяжении изучения существенно превышает активность пероксидазы самцов.

В перспективе на основании полученных данных по активности фермента в онтогенезе предоставляется возможность изучить поведение данного фермента при других воздействиях (электромагнитное и УФ облучение, влияние химических агентов и др.) и спрогнозировать функциональные изменения у более сложных организмов, в том числе и у человека.

Литература 1. Н. К. Зенков, В. З. Лакин, Е. Б. Меньшиков. Окислительный стресс. Биохимический и пато физиологический аспекты. – М.: Наука / Интерпериодика, 2001.

2. В. В. Полевой, Т. С. Саламатова. Живое состояние клетки и биология старения. – Спб.: Изд-во С.-Петерб. ун-та, 2004.

3. Г. Е. Яковлева. Ферменты в клинической биохимии: пособие для врачей. – Новосибирск: Вектор Бест, 2005.

4. B. Halliwel. The antioxidant paradox // Lancet. – 2000. – Vol. 335. – P. 1179-1180.

5. D. Harman. Free Radicals in Molecular Biology, Aging and Disease // Raven Press, New York, 1984. – P. 1.

Научный руководитель – канд. хим. наук, доцент Е. С. Мухина ИССЛЕДОВАНИЕ СТРУКТУРЫ КОРОТКОЖИВУЩИХ РАДИКАЛОВ ТРИПТОФАНА И ГУАНОЗИНА МЕТОДОМ ХПЯ С ВРЕМЕННЫМ РАЗРЕШЕНИЕМ Н. Н. Сапрыгина1,2, А. С. Кирютин Новосибирский государственный университет Международный томографический центр СО РАН, г. Новосибирск В последние годы большое внимание уделяется токсическому действию свободных радикалов, формирование которых в живых системах связывают с повышенным радиационным фоном, загрязнением окружающей среды, курением, а также действием УФ-излучения и видимого света высокой интенсивности.

Традиционными методами для регистрации радикалов являются методы электронного парамагнитного резонанса (ЭПР) и двойного электронно-ядерного резонанса (Electron Nuclear Double Resonance, ENDOR).

Спектры высокореакционных радикалов можно регистрировать в замороженных матрицах, при этом зачастую регистрируются только вторичные более стабильные радикалы, а данные кинетических исследований в таких условиях несопоставимы с условиями для реакций в растворах. Альтернативным подходом, использованным в данной работе для изучения короткоживущих радикалов биологически важных молекул в водном растворе, является метод химической поляризации ядер (ХПЯ). Геминальный спектр ХПЯ позволяет определить константы сверхтонкого взаимодействия (СТВ) в короткоживущих радикалах, поскольку на радикальной стадии реакции амплитуда сигнала ХПЯ в таком спектре пропорциональна константе СТВ с соответствующим ядром [1]. Метод ХПЯ с временным разрешением позволяет достаточно простым способом получить уникальную информацию о распределении спиновой плотности для ядер 1H, 13C и 15N в радикалах аминокислот, нуклеотидов и пептидов в условиях, близких к физиологическим, т. е. в водных растворах различной кислотности при комнатной температуре. Отклонения от пропорциональности могут указывать на наличие скрытых процессов (например, протонирование и депротонирование радикалов, димеризация и другие реакции) на геминальной стадии радикальной реакции.

В данной работе при использовании метода ХПЯ с временным разрешением было выявлено, что тушение триплета дипиридила в CD3CN приводит к образованию нейтрального радикала триптофана, в то время как при тушении триплета рибофлавина в DMSO образуется катион-радикал триптофана, и были определены 1Н константы СТВ в этих двух радикалов.

Поскольку на реакционную способность аминокислотных остатков влияет наличие пептидной связи между аминокислотами и наличие или отсутствие заряда концевой аминогруппы, было проведено систематическое изучение кинетики и механизма фотоиндуцированной реакции с участием дипептида триптофан-триптофан (Trp-Trp) в водных растворах в широком диапазоне значений рН. В ходе выполнения работы была установлена высокая степень селективности протекания обратимой реакции фотоокисления дипептида Trp-Trp триплетами 2,2'-дипиридила: при рН водных растворов ниже рКа концевой аминогруппы только С-концевой остаток дипептида участвует в обратимой реакции окисления.

Структура радикалов GMP при различных значениях рН водных растворов Аналогично были получены геминальные 15N ХПЯ спектры 15N-изотопнообогащенного по всем положениям нуклеотида гуанозин-5'-монофосфата (GMP) в присутствии 15N-изотопнообогащенного 2,2' дипиридила в качестве фотосенсибилизатора. 15N-константы СТВ радикалов дипиридила, известные из расчетов DFT, были использованы для калибровки сигналов ХПЯ радикалов GMP. Таким образом были определены величина и знак 15N-констант СТВ для 4 типов короткоживущих радикалов GMP в водных растворах в широком диапазоне значений рН.

Литература 1. O. B. Morozova, K. L. Ivanov, A. S. Kiryutin, R. Z. Sagdeev, T. Kohling, H. M. Vieth and A. V. Yurkovskaya. Time-resolved CIDNP: an NMR way to determine the EPR parameters of elusive radicals // Physical Chemistry Chemical Physics. – 2011. – 13. – № 14 – стр. 6619-27.

Научный руководитель – д-р физ.-мат. наук А. В. Юрковская АНТИОКСИДАНТНАЯ АКТИВНОСТЬ СОЕДИНЕНИЙ, СОДЕРЖАЩИХ 2-АЗАСПИРО[4,5]ДЕКАНОВЫЙ ФРАГМЕНТ Е. А. Свиридецкая Пермский государственный технический университет Институт технической химии УрО РАН, г. Пермь Незначительная часть кислорода, поступающего из воздуха в организм, превращается в активные формы – свободные радикалы, обладающие высокой химической активностью и вызывающие окисление белков, липидов и нуклеиновых кислот. Чаще всего окислению подвергается липидный слой биологических мембран. Такое окисление называется перекисным окислением липидов (ПОЛ) и осуществляется цепной реакцией свободнорадикального окисления, результатом чего становится дегенерация клеточных мембран.

Одной из групп антиоксидантов прямого действия являются вещества, способные выступать в роли доноров протона, – соединения с фенольной группой и азотсодержащие гетероциклы, кроме того, эффективными антиоксидантами могут быть соединения с ненасыщенными двойными связями. В данной работе определяли антиоксидантную активность производных, содержащих 2-азаспиро[4,5]декановый фрагмент.

Антиоксидантную активность соединений определяли по способности их ингибировать гемолиз эритроцитов, вызванный перекисью водорода, и перекисное окисление липидов мембран, вызванное железо аскорбатным воздействием. Перекисное окисление липидов определяли на клетках печени мышей. Влияние соединений на гемолиз эритроцитов, вызванный перекисью водорода, проводили на суспензии эритроцитов мыши.

Соединения Кх-12-2 и Кх-16 проявили антиоксидантную активность в обоих тестах. Соединения Кх-13, Кх-21, Кх-18 проявили активность только в тесте железо-аскорбат индуцированного ПОЛ. Можно предположить, что данное соединение может улавливать по фенильному фрагменту свободные радикалы, образовавшиеся в культуральной среде при искусственном добавлении ионов железа. Соединения Кх- и Кх-11 проявили активность в тесте гемолиза. В связи с тем, что данные производные не оказывают эффекта в тесте железо-аскорбат индуцированного ПОЛ, имеют положительный заряд и легко растворимы в воде, можно предположить, что их действие связано с мембраностабилизирующими свойствами.

Формулы соединений, проявивших активность в тесте гемолиза N N O NH N N S N O O O O O O КХ-17 КХ-12-2 КХ-16 КХ- Для проверки данной гипотезы были проведены дополнительные исследования по оценке возможности активных соединений стабилизировать мембраны эритроцитов в гипотоническом растворе и ингибировать гемолиз эритроцитов, вызванный теплом и ацидозом. По методике определения гемолиза в гипотоническом растворе было установлено, что все активные соединения проявляют антиоксидантную активность при концентрации гипотонического раствора 0,6 %, однако при её уменьшении являются малоэффективными. В тесте гемолиза эритроцитов, вызванного ацидозом, соединения КХ-11, КХ-12- и КХ-16 проявили антиоксидантную активность. В тесте гемолиза, вызванного теплом, антиоксидантную активность проявило только соединение КХ-11.

Таким образом, можно сделать вывод о том, что соединение КХ-11 проявляет антиоксидантную активность, связанную со стабилизацией мембран, и является наиболее перспективным для дальнейшего изучения его механизма действия.

Научный руководитель – канд. биол. наук, доцент Л. В. Аникина ИССЛЕДОВАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ ЭФФЕКТОВ УГЛЕРОДНЫХ НАНОТРУБОК Д. С. Песня, А. С. Песня Ярославский государственный университет им. П. Г. Демидова Нанотехнология и связанная с ней индустрия имеют очень высокие темпы развития, поскольку обещают значительные выгоды в области науки и экономики. Наноматериалы считаются применимыми к целому ряду различных областей: от авиационно-космической техники и нано-электроники до медицины [2].

Наночастицы благодаря очень малым размерам обладают рядом новых интересных физико-химических свойств. Тем не менее, именно эти характеристики связывают с некоторыми патологическими эффектами, которые могут возникать при попадании наночастиц в организм. Например, углеродные нанотрубки (УНТ) могут представлять опасность для здоровья при вдыхании, так как их тонкая удлиненная структура близка к структуре волокон асбеста. По мнению Всемирной организации здравоохранения в настоящее время актуально изучение влияния наночастиц, в том числе углеродных нанотрубок, не только на здоровье человека, но и на биосферу в целом, поскольку выбросы наноматериалов в окружающую среду могут быть очень значительными [2]. Влияние наночастиц на здоровье изучено мало, и в этом отношении наблюдается большой разрыв с темпами роста самой наноиндустрии. Так к настоящему моменту практически не изучены цитогенетические эффекты наночастиц [2].

Существует проблема выбора экономичных тест-объектов, чувствительных к наночастицам. Например, как показал ряд исследований, тест Эймса не применим при изучении УНТ, поскольку даёт ложноотрицательный результат из-за специфики клеточной стенки бактерий, которая не пропускает УНТ [2]. Однако клеточная стенка растений может пропускать УНТ достаточно свободно [1].

Целью данной работы являлось исследование физической структуры и цитогенетических эффектов многослойных углеродных нанотрубок (МСУНТ).

Для исследования структуры был взят порошок МСУНТ, произведенный в Институте микроэлектроники и информатики РАН. В качестве метода изучения структуры использовалась сканирующая тунельная микроскопия, которую позволяет осуществить прибор ФемтоСкан. Благодаря полученным на данном приборе изображениям нанотрубок, были произведены замеры их диаметра и длины. Так диаметр отдельных нанотрубок составляет от 6 до 25 нм. Диаметр пучков нанотрубок от 50 до 70 нм. Длина отдельных нанотрубок и их пучков варьирует до нескольких микрометров и выходит за пределы кадра.

2-х мерные изображения отдельных нанотрубок и их пучков Объектом для изучения цитогенетических эффектов были выбраны корневые меристемы Allium cepa L.

Среди растительных тест-объектов Allium test рекомендован как тест, чувствительный к различным наночастицам. Оценка цитогенетических эффектов МСУНТ с использованием Allium test произведена нами впервые. В ходе эксперимента первая группа луковиц проращивалась на очищенной воде, а вторая – на водной дисперсии нанотрубок в концентрации 1 г/л (стойкая дисперсия готовилась в ультразвуковой ванночке). Из корневых меристем готовились микропрепараты клеток. Производилась оценка митотической активности, а для анализа генетических повреждений использовались микроядерный тест и ана-телофазный анализ.

Митотический индекс в контроле был 11,4±0,48 %. Водная дисперсия нанотрубок (1 г/л) приводила к статистически значимому уменьшению митотического индекса до 5,8±0,32 %, что почти в 2 раза меньше чем в контроле. Следовательно водная дисперсия многослойных углеродных нанотрубок в концентрации 1 г/л вызывает митотоксический эффект в корневых меристемах A. cepa.

Частота хромосомных аберраций в контроле составила 0,6±0,19 %, а микроядер 0,06±0,02 %. Водная дисперсия нанотрубок (1 г/л) приводила к статистически значимому увеличению частоты хромосомных аберраций до 3,0±0,58 % и микроядер до 0,2±0,03 %. Следовательно водная дисперсия многослойных углеродных нанотрубок может вызывать мутагенный эффект в корневых меристемах A. cepa.

Литература 1. Q. Liu. Carbon nanotubes as molecular transporters for walled plant cells // Nano Lett. – 2009. – Vol. 9. – P. 1007–1010.

2. N. Singh, et al. NanoGenotoxicology // Biomaterials. – 2009. – Vol. 30. – P. 3891–3914.

Научный руководитель – канд. биол. наук, доцент И. М. Прохорова ИССЛЕДОВАНИЕ ПЕРСПЕКТИВНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ СВЕРХСШИТЫХ ПОЛИСТИРОЛОВ СЕРИИ СТИРОСОРБ ДЛЯ ЭЛИМИНАЦИИ БАКТЕРИЙ ИЗ КРОВИ Ю. И. Должикова, Н. Ю. Анисимова НИИ ЭДиТО Российского онкологического научного центра им. Н. Н. Блохина РАМН, г. Москва Как известно, одним из немаловажных факторов, в настоящее время провоцирующих развитие злокачественных новообразований, является загрязнение окружающей среды. Иммунокомпрометированное состояние онкологических больных вследствие массированной радио-, химио-, антибиотикотерапии, расширенного операционного вмешательства является причиной частого развития у этих пациентов гнойно септических осложнений. Поскольку инициаторами локального и системного воспаления в подавляющем большинстве случаев являются бактерии, их элиминация из системного крово- и лимфообращения в результате перфузии через сорбционную колонку могла бы иметь принципиальное значение в профилактике и терапии системных гнойно-септических осложнений. В настоящее время наиболее широко в медицинской практике применяются угольные сорбенты. Однако контакт этого соединения с кровью имеет негативный характер, приводя к гемолизу и тромбообразованию. Поэтому поиск новых биосовместимых сорбентов остается актуальной задачей современной науки. Одним из перспективных направлений является использование для экстракорпоральной детоксикации сверхсшитых полистиролов, обладающих биосовместимостью, высокой сорбционной активностью по отношению к цитокинам (белкам медиаторам развития воспаления) и токсинам бактерий.

Целью исследования являлось изучение возможности элиминации бактерий полистирольными сорбентами серии Стиросорб MN200 и MMN200.

Материалы и методы. Тестировали Стиросорб MN200 и Стиросорб MMN200, представляющие собой гранулы диаметром 0,3-1,0 мм с развитой внутренней структурой, и гранулированный активированный уголь (ГАУ) в качестве контроля. Подготовка сорбентов к исследованию включала 3-х кратное промывание этанолом и физиологическим раствором хлорида натрия. Образцами массой 1,33±0,11 г набивали макеты миниатюрных сорбционных колонок. В качестве объектов сорбции взяли культуры Bacilius subtilis (B. subtilis) и Lactobacillus acidophilus (L. acidophilus). Разведение взвесей соответствовало 0,5 единицы по шкале мутности McFarland. Бактериальные суспензии (15 мл) перфузировали 9 раз через модели колонок.

Далее производили посев инокулята бактериальной культуры на питательные среды в чашках Петри.

По окончании инкубационного периода (4 суток) количественно оценивали эффект торможения 1 КК п / с ТКО = 100 %, где ККп/с колониеобразования (ТКО) микроорганизмов с помощью формулы КК к среднее количество колоний на поверхности среды в чашке Петри после сорбции, ККк – среднее количество колоний в контрольном эксперименте. Определяли концентрацию бактерий в суспензии до и после перфузии через макеты колонок с исследуемыми сорбентами методом подсчета в камере Горяева с использованием световой микроскопии.

Результаты. Полученные результаты демонстрируют значительное уменьшение в сравнении с интактным контролем количества образованных обеими бактериальными культурами колоний: после перфузии через макет колонки с MMN200 более чем в 2 раза, с ГАУ - более чем в 8 раз и с MN200 - в 17 раз.

Показатель ТКО B. subtilus после контакта с сорбентом MMN200 составил 56 %, с сорбентом ГАУ – 88 %, а наилучший результат - 94 % был достигнут после перфузии через колонку с MN200. Подобные значения ТКО наблюдались и для L. acidophilus: 53 % (MMN200), 90 % (ГАУ), 94 % (MN200).

Подсчитанная концентрация клеток в суспензиях свидетельствует о снижении абсолютного количества микроорганизмов после контакта бактериальных культур с исследуемыми сорбентами относительно интактного контроля. Сорбенты на основе сверхсшитого полистирола уменьшали концентрацию бактериальных клеток в перфузате в 1,5-2 раза, а ГАУ – в 3 раза.

Стоит отметить, что наблюдается существенная, в 2 раза, деградация размера выросших колоний B. subtilus относительно интактной пробы.

Представленные данные свидетельствуют о значительном снижении количества колониеобразующих единиц микроорганизмов, оставшихся после перфузии через слой сорбентов, что можно расценивать как следствие нарушения жизнеспособности бактерий в результате токсического воздействия на них тестируемых материалов, а также иммобилизации микроорганизмов на поверхности гранул. Таким образом, поскольку перфузия через колонки с протестированными образцами сорбентов ряда Стиросорб MN и MMN200 способствует снижению количества колониеобразующих единиц бактерий, аналогично эффекту ГАУ, то указанные материалы можно рассматривать как перспективные для применения при экстракорпоральной детоксикации при лечении больных с гнойно-септическими осложнениями.

Научный руководитель – д-р. мед. наук, проф. М. В. Киселевский СПОСОБЫ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ НЕОБОГАЩЕННОГО ГЛАУКОНИТА С МИКРООРГАНИЗМАМИ Е. Г. Мухина, Е. М. Моисеева Балтийский федеральный университет им. Иммануила Канта, г. Калининград Минерал глауконит нашёл широкое применение в промышленности и сельском хозяйстве.

Его используют как сорбент для извлечения редкоземельных металлов и ионов железа из воды [2, 1].

Изучается влияние других минералов, близких по составу, например, цеолитов, на рост микроорганизмов [3]. Для промышленных целей обычно используют глауконит, обогащенный различными способами до 65–95 %. В нашем исследовании мы попытались выявить влияние необогащенного глауконита на некоторые микроорганизмы.

Цель исследования: выявить влияние необогащенного глауконита на микроорганизмы и определить его способность к очистке воды от кишечной палочки.

Материалы и методы. Для исследования микробиологических свойств глауконита были использованы штаммы Escherichia coli, выделенные из клинического материала пациентов с гнойно-септическими заболеваниями.

За рабочую концентрацию была взята взвесь микробов, по мутности соответствующая 0,5 ед. McF, что соответствует 1,5108 КОЕ/мл.

В первом эксперименте для исследования способности необогащенного глауконита сорбировать кишечную палочку из раствора рабочей концентрации было приготовлено разведение 5,0101 КОЕ/мл путем добавления 0,1 мл в 3 литра водопроводной воды. При контрольном высеве на среду Эндо получен рост колоний E. coli. Испытуемую воду в количестве 333 мл пропускали через фильтр, содержащий 33 г и тот же объем воды через фильтр с 66 г глауконита. Таким образом, соотношение глауконита и воды в опытах было 1:10 и 1:5. Пропущенную через фильтр воду по 0,1 мл засевали на среду Эндо.

Во втором эксперименте 333 мл испытуемой воды смешивали с глауконитом в соотношении 1:5 и 1: и проводили высев на среду Эндо, выдерживая экспозицию 30 минут, 2 часа и 18 часов.

Результаты исследования В первом опыте при пропускании воды с заданной концентрацией E. coli 5,0101 КОЕ/мл через необогащенный глауконит с соотношением к воде 1:10 получен рост 46 колоний, а при соотношении 1:5 – 58 колоний. Таким образом, при непродолжительном контакте необогащенного глауконита и воды с кишечной палочкой антимикробных свойств у глауконита выявлено не было.

Во втором опыте при контрольном высеве было получено 76 колоний на чашке со средой Эндо.

При дозированном контакте необогащенного глауконита и воды с концентрацией E. coli 5,0101 КОЕ/мл число колоний на среде Эндо уже через 2 часа уменьшилось в 2 раза, через 18 часов количество колоний уменьшилось на 60 %.

Зависимость концентрации E. coli от длительности экспозиции перед посевом и содержания глауконита в фильтре КОЕ на чашке со средой Эндо при экспозиции Количество глауконита 30 минут 2 часа 18 часов Фильтр с 33 г глауконита 73 43 Фильтр с 66 г глауконита 78 46 Выводы 1. Кратковременный контакт глауконита и воды с концентрацией E. coli 5,0101 КОЕ/мл не приводит к уменьшению концентрации кишечной палочки.

2. Увеличение времени контакта воды с глауконитом приводит к значительному падению концентрации кишечной палочки, что подтверждается дублированием посева на средах Эндо.

В литературе есть ссылки на аналогичные исследования с цеолитами, монтмориллонитами и так далее.

Там также указывается, что угнетающее на микрофлору действие субстратов обусловлено их химическим составом, наличием бактерий, кристаллической решеткой минералов.

Литература 1. Ю. И. Сухарев, Е. А. Кувыкина. Использование глауконита Уральского месторождения в процессах очистки воды от железа (II, III) / Химия и химическая технология. Известия Челябинского научного центра, вып. 1 (14), 2002.

2. Т. Г. Крупнова, К. Р. Зиганшина, Е. Л. Антонова. Применение глауконита для очистки воды от радиоактивных загрязнений, ионов иттрия и редкоземельных элементов // Фундаментальные исследования. – 2004. – № 10 – С. 78-79.

3. К. С. Голохваст. Взаимодействие организмов с минералами: монография / К. С. Голохваст;

отв. ред.

А. М. Паничев. – Владивосток: Изд-во ДВГТУ, 2010.

Научный руководитель – канд. мед. наук, доцент О. М. Хребтова АДАПТОГЕННЫЙ ЭФФЕКТ ПРЕПАРАТА ХИТОЗАНА В УСЛОВИЯХ ГИПОБАРИЧЕСКОЙ ГИПОКСИИ В. Н. Дыдыкина, О. Ю. Ешкова Нижегородский государственный университет им. Н. И. Лобачевского Неблагоприятная экологическая обстановка, техногенные катастрофы, высокий уровень загрязнения окружающей среды, частые и длительные стрессы отрицательно влияют на состояние здоровья человека.

Практически при всех нарушениях сердечно-сосудистой, дыхательной систем, системы крови изменяется либо доставка, либо утилизация кислорода. Классические антигипоксанты имеют серьезные побочные эффекты, поэтому актуальна разработка натуральных адаптогенов. Целью работы было исследование адаптогенного эффекта комплекса «хитозан-золото» (ХТЗ-Au) в условиях гипоксии при профилактическом пероральном введении крысам. Задача исследования – установить возникновение устойчивости к гипобарической гипоксии по индикаторным показателям системы крови, содержанию продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) и активности лактатдегидрогеназы (ЛДГ).

Исследования проводились на белых нелинейных крысах-самцах массой 200–230 г. В эксперименте использовали ХТЗ (Мо=130кДа) и ХТЗ, содержащий наночастицы золота. Животные были разделены на 4 группы: интактные, контроль (NaCl 0,9%), опытные («ХТЗ 130кДа», «ХТЗ-Au»). Препараты (ХТЗ 100 мг/кг, золото 50 мг/кг, физ. раствор) вводили перорально ежедневно в течение недели. Через 7 дней после окончания курса введения животных подвергали действию гипобарической гипоксии (8000 м, 30 минут). На следующие сутки после моделирования гипоксии в крови экспериментальных животных определяли количество лейкоцитов, лейкоцитарную формулу общепринятыми методами, активность ЛДГ и продуктов ПОЛ спектрофотометрически. Результаты обрабатывали с помощью программы BIOSTAT.

В результате эксперимента выявлено, что после гипоксии общая активность ЛДГ в контрольной группе и группе «ХТЗ 130кДа» статистически значимо увеличилась относительно интактных. В то же время общая активность ЛДГ в группе животных «ХТЗ-Au» сохранялась на уровне интактных крыс. Было также установлено повышенное содержание продуктов ПОЛ в контрольной группе животных, а профилактическое введение препарата «ХТЗ-Au» способствовало снижению активности процессов пероксидации, и данные показатели такие же, как в интактной группе. Индикаторные показатели - лимфоциты, сегментоядерные нейтрофилы указывали на отсутствие стресс-реакции у опытных животных и ее наличие в контроле.

Полученные результаты свидетельствуют, что профилактическое пероральное введение комплекса «хитозан-золото» повышает устойчивость организма к условиям гипоксии.

Литература 1. Л. Х. Гаркави, Е. Б. Квакина, Т. С. Кузьменко. Антистрессорные реакции и активационная терапия.

Реакция активации как путь к здоровью через процессы самоорганизации. – Москва: ИМЕДИС, 1998.

2. А. С. Корягин, Е. А. Ерофеева, Н. О. Якимович, Е. А. Александрова, Л. А. Смирнова, А. В. Мальков.

Анализ антиоксидантных свойств хитозана и его олигомеров //Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2006. – Том. 142 – № 10 – стр. 444-446.

3. О. И. Коновалова. Анализ адаптогенного действия пчелиного яда к гипобарической гипоксии при внутрибрюшинном и пероральном введении лабораторным животным //Автореф. канд. дисс. – Нижний Новгород, 2009.

Научный руководитель – д-р. биол. наук, проф. А. С. Корягин ФЕРМЕНТАТИВНАЯ АКТИВНОСТЬ И СТРУКТУРНО-ОПТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА НАТИВНОГО КОРОВЬЕГО И КОЗЬЕГО МОЛОКА О. В. Новикова, А. К. Аюпова Астраханский государственный университет Одним из важных экологических аспектов биобезопасности пищевого сырья, в частности молока сельскохозяйственных животных, является определение активности важнейших антиоксидантных ферментов и разработки физико-химических методов оценки качества сырья. Получение дополнительных сведений о составе и свойствах молока как уникального продукта питания, содержащего все необходимые для жизнедеятельности организма вещества, имеет важное практическое значение. Использование современных физико-химических подходов позволит охарактеризовать эту биологическую жидкость с новых позиций.

Цель исследования – изучение ферментативного спектра и морфоструктурных характеристик молока различных сельскохозяйственных животных.

Материалы и методы исследования. Объектом исследования явилось молоко 10 коров симментальской породы и 10 коз-аборигенов, обитающих на территории Астраханской области, Володарского района, с. Калинино. Исследования проводились в марте. Животные содержались в частном секторе, совершали ежедневный моцион. Основным кормовым продуктом служило сено.

Для исследований использовали молоко, полученное с помощью ручного доения в вечернее время суток (18.00 ч.), после чего молоко процеживали через сито. Затем небольшую порцию молока, около 20 мл, наливали во флакон и помещали в холодильник (+5 С) до утра. Полученные образцы молока изучали на следующий день. Определяли активность кислой и щелочной фосфатазы в молоке унифицированным методом по «конечной точке». Для исследования структурно-оптических свойств нативного коровьего и козьего молока использовали метод краевой дегидратации (аналитические ячейки).

Исследование анизотропных структур биологических жидкостей проводили с помощью аналитической ячейки, которая представляет собой каплю биожидкости, помещенную между предметным и покровными стеклом. Данный способ был назван методом краевой дегидратации, обеспечивающий медленное (в течение 48-72 часов) испарение воды из биологической жидкости через узкую щель по краю покровного стекла.

Посредством поляризационно-оптической микроскопии изучали анизотропные структуры, сформированные при краевой дегидратации коровьего (10 проб) и козьего (10 проб) молока.

Проведенные исследования позволили определить следующие морфотипы анизотропных структур молока: дендритные, веерные, игольчатые текстуры, сферолиты и лентовидные фибриллы. Дендритные структуры наблюдались во всех исследуемых образцах;

сферолиты – у 6 коров и 5 коз;

веерные – у 2 коров и 4 коз. Лентовидные фибриллы наиболее часто присутствовали в морфологической картине коровьего молока (8 случаев), аналогичные текстуры в козьем молоке отмечались в 2-х случаях. Кристаллы игольчатой формы были характерны только для коровьего молока и регистрировались у 3–х животных. Таким образом, полученные результаты позволили определить состав основных анизотропных структур коровьего и козьего молока и показали некоторые отличия в морфологической картине этой биологической жидкости у разных сельскохозяйственных животных.

Установлено, что соотношение монохромных и цветных кристаллов между образцами менялось в зависимости от периода лактации. Наибольшее количество цветных текстур в аналитических ячейках коровьего и козьего молока отмечалось в первые дни после отела. Постепенно содержание структур с различной цветовой гаммой уменьшалось при одновременном нарастании монохромных кристаллов.

Таким образом, прослеживается динамика изменений морфоструктурных характеристик молока сельскохозяйственных животных, заключающаяся в снижении количества цветных текстур в зависимости от периода лактации. Установлено, что описанный процесс происходит значительно быстрее у коз ( недели), чем у коров (3 месяца и более).

На основе вышеизложенного можно сделать следующие выводы:

1. Установлено, что основными морфотипами анизотропных структур коровьего и козьего молока являются дендритные текстуры и сферолиты.

2. В твердой фазе коровьего молока лентовидные фибриллы встречаются чаще, чем в аналитических ячейках козьего молока.

3. Для разных периодов лактации характерны различные морфологические анизотропные характеристики. В первые дни после отела наблюдается максимальное содержание цветных кристаллов, количество которых уменьшается на фоне нарастания монохромных текстур с увеличением срока лактации.

4. Установлено, что динамика изменений анизотропных характеристик молока имеет отличие у разных сельскохозяйственных животных: цветные анизотропные структуры в аналитических ячейках козьего молока исчезают в течение 4-х недель, в то время как в аналитических ячейках коровьего молока они сохраняются до 3-х месяцев.

Литература 1. Н. В. Барабанщиков. Молочное дело. М.: Агропромиздат, 1990. – 351с.

2. С. Н. Голубев. Живые кристаллы. Природа, 1989. – № 3. – Стр. 13-21.

Научный руководитель – д-р биол. наук, проф. Е. И. Кондратенко ОБОСНОВАНИЕ МИГРАЦИИ СЕЛЕНА В ЭКОЛОГИЧЕСКОЙ СИСТЕМЕ «ПОЧВА – РАСТЕНИЕ – ЖИВОТНОЕ»

Д. А. Чебанов Саратовский государственный аграрный университет им. Н. И. Вавилова Из 92 имеющихся в природе химических элементов 81 присутствует в организме животных и человека [1]. Микроэлементы входят в состав всех жидкостей и тканей, регулируя более 50 биохимических процессов [2], они необходимы для функционирования мышечной, сердечно-сосудистой, нервной и других систем;

принимают участие в синтезе жизненно важных соединений, в обменных процессах, кроветворении, пищеварении, нейтрализации продуктов обмена;

входят в состав ферментов и гормонов, влияют на их активность [4, 5].

Одним из таких элементов является селен. Селен – это биологически активный микроэлемент, входящий в состав ряда гормонов и ферментов, связан со всеми органами и системами организма.

Экспериментальная часть исследований проводилась в 2011 году в биогеохимической ситуации региона Саратовского Заволжья. В ходе исследований были взяты пробы кормов с тех мест, где были проведены исследования по определению селена в почве. Содержание селена в профиле почв, а соответственно, и в произрастающих на этих почвах растениях, унаследовано главным образом от материнской породы.

Установлено, что концентрация селена в почвах Саратовского Заволжья составляет 0,04±0,001 мкг/г, в воде 0,029±0,002 мкг/л. Установлено, что содержание селена в кукурузе составило 0,025 мкг/г, в ячмене – 0,012 мкг/г, в овсе – 0,036 мкг/г, в горохе – 0,021 мкг/г.

Следующим этапом исследований было определение содержания селена в сыворотке крови и тканях внутренних органов белых крыс до кормления этими кормами и после кормления в течение 3 месяцев.

Для исследований были использованы клинически здоровые самцы белых крыс, массой 180-200 г.

Содержание селена определяли флуорометрическим методом [6].

Результаты исследований представлены в таблице.

Накопление селена (мкг/г) в сыворотке крови и тканях внутренних органов белых крыс № п/п Исследуемые органы Контроль После скармливания кормов 1 Сыворотка крови 0,039±0,003 0,043±0, 2 Печень 0,048± 0,009 0,052±0, 3 Почки 0,039± 0,009 0,039±0, 4 Сердце 0,032± 0,005 0,033±0, 5 Головной мозг 0,028± 0,006 0,031±0, 6 Мышцы 0,029± 0,007 0,033±0, 7 Легкие 0,035± 0,009 0,033±0, Установленное содержание селена в почве и воде 0,04±0,001 мкг/г и 0,029±0,002 мкг/л соответственно позволяет отнести Саратовское Заволжье к неблагополучной биогеохимической провинции по селену.

Анализируя результаты, представленные в таблице, можно отметить, что после кормления белых крыс исследованными кормами уровень селена в сыворотке крови, в печени, головном мозге и мышцах имеет некоторую тенденцию к увеличению. Для решения вопроса о введении в рацион сельскохозяйственных животных селенсодержащих препаратов с целью предотвращения гипоселенозов необходимы дополнительные исследования.

Литература 1. Н. А.. Агаджанян, А. В. Скальный. Химические элементы в среде обитания и экологический портрет человека. – М.: Изд-во КМК, 2001. –С. 25.

2. Г. А. Бабенко. Микроэлементозы человека: патогенез, профилактика, лечение // Микроэлементозы в медицине. – 2001. – № 10. – С. 59 – 65.

3. О. А. Громова. Селен – впечатляющие итоги и перспективы применения // Трудный пациент, 2007. – № 14. – Т. 5. – С. 25 – 30.

4. В. И. Майстров. Антиоксидантно-антирадикальная и тиол-дисульфидная системы племенных бычков под влиянием комплекса биологически активных веществ // Сельскохозяйственная биология. – 2006. – № 2. – С. 64 – 68.

5. И. Н. Назаренко, И. В. Кислова, Т. М. Гусейнов. Флуорометрическое определение селена в биологическом материале с помощью 2,3-диаминонафталина. // Журнал аналитической химии. – 1975. – Т. 30. – № 4.2.

Научные руководители – канд. ветеринар. наук, доцент Н. А. Пудовкин, канд. биол. наук, доцент Т. Ю. Поперечнева МЕХАНИЗМЫ АЛЛЕРГИЧЕСКОГО ВОСПАЛЕНИЯ У ДЕТЕЙ В УСЛОВИЯХ ВОЗДЕЙСТВИЯ ЭКЗОГЕННЫХ ХИМИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ Р. А. Харахорина, Т. С. Лыхина Федеральный научный центр медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения, г. Пермь По данным эпидемиологических исследований в последние десятилетия отмечается непрерывный рост числа аллергических заболеваний. Состояние окружающей среды в связи с постоянно продолжающимся химическим загрязнением является одной из главных причин их бурного роста. Работами многих авторов доказана роль промышленных поллютантов в развитии аллергопатологии. Тяжелые металлы и органические соединения являются адъювантами облигатных аллергенов и способны запускать, а затем и поддерживать аллергический процесс. Аллергические заболевания характеризуются нарушением регуляции иммунитета, хроническим воспалением и повреждением тканей. Ведущая роль в развитии аллергии отводится реагиновому механизму повреждения тканей, но все большее внимание в возникновении и поддержании аллергического воспаления уделяется метаболитам арахидоновой кислоты, в том числе лейкотриенам (ЛТ) C4/D4/E4.

Цель исследования – оценка особенностей аллергических реакций у детей в условиях контаминации биосред техногенными химическими факторами.

Всего обследовано 43 ребенка в возрасте от 3 до 13 лет, имеющих в анамнезе аллергопатологию. Дети были разделены на 2 группы в зависимости от концентрации химических соединений в крови. Основную группу составили 36 детей с повышенным содержанием формальдегида и тяжелых металлов в крови.

Группа сравнения включала 7 детей с допустимым содержанием исследуемых соединений. Основная группа и группа сравнения были сопоставимы по полу, возрасту и соматической заболеваемости.

Исследование биосред (цельная кровь) на содержание металлов (марганец, хром) выполнено методом атомно-абсорбционного анализа. Определение органических соединений (формальдегид) выполнялось методом капиллярной газовой хроматографии.

Концентрацию IgE общего, IgE антигенспецифического и ЛТ определяли методом иммуноферментного анализа с помощью тест-систем фирм «Хема - Медика» (Россия), «Euroimmun» (Германия) и «Neogen Corporation» (США) на микропланшетном анализаторе Elx808IU «Bio-Tek Instruments» (США). Для количественного определения ЛТ предварительно проводили процедуру их экстракции из плазмы крови.

pH плазмы крови доводили до 3,5. Подготовленный образец элюировали через колонку С18 Sep-Pak (Waters Corporation, США) со скоростью 1 мл/мин. Остаток эйкозаноидов смывали 2 мл метанола, который в дальнейшем выпаривали с помощью модульного концентратора DUO (miVac, США).

Статистическую обработку результатов проводили с помощью пакета программ Microsoft Office, Microsoft Excel и дополнительной программы статистического анализа Statistica 6.0. Достоверность различий между группами считали значимыми при р 0,05.

В результате оценки уровня контаминации биосред выделены группы детей с повышенным содержанием химических соединений в крови. При этом средние показатели содержания формальдегида, марганца и хрома в крови достоверно (p0,05) превысили в 3,28, 1,55 и 1,45 раз соответственно референтные уровни их содержания.

В процессе исследования обнаружена тенденция к увеличению уровня общего IgE в сыворотке крови у детей с повышенной контаминантной нагрузкой. Нами проведена количественная оценка специфических IgE-антител к формальдегиду, марганцу и хрому. Специфический к формальдегиду IgE у детей с повышенной контаминацией гаптена составил 6,42±2,70 МЕ/мл, что превышает в 2,78 раз содержание IgE специфического в группе детей с допустимым уровнем формальдегида (2,31±0,86 МЕ/мл). При определении специфических IgE-антител к марганцу и хрому обнаружено увеличение исследуемых показателей в 2, и 3,52 раз соответственно в группах с повышенной концентрацией марганца и хрома по отношению к группам сравнения.

При количественной оценке лейкотриенов C4/D4/E4 нами установлено повышение их содержания в группах детей с повышенным уровнем формальдегида, марганца и хрома в крови (0,492±0,165 нг/мл, 0,453±0,091 нг/мл и 0,421±0,083 нг/мл соответственно) по отношению к группам сравнения (0,398±0,064 нг/мл, 0,383±0,079 нг/мл и 0,238±0,109 нг/мл).

Выявлено, что у большинства детей с повышенной контаминантной нагрузкой наблюдается одновременное увеличение содержания общего IgE и ЛТ, по сравнению с детьми с допустимым уровнем химических соединений в крови. Так, в среднем у 44 % детей с повышенным содержанием формальдегида, марганца и хрома наблюдается одновременное увеличение концентрации IgE общего и ЛТ, что говорит об участии в развитии гиперчувствительности реагинового механизма повреждения тканей наряду с лейкотриеновым. Одновременное повышение этих показателей в группе с допустимым содержанием исследуемых гаптенов наблюдалось в среднем у 20 % детей.

Таким образом, выявлено участие экзогенных химических соединений (формальдегида, марганца и хрома) в реализации реагинового и лейкотриенового механизмов аллергопатологии у детей. При этом в случае повышенной контаминации исследуемых аллергенов оба механизма работают одновременно, что способствует более выраженной перестройке иммунной системы детей с аллергией в направлении инверсии иммунного ответа по Тh2-зависимому типу.

Научный руководитель – д-р мед. наук, проф. О. В. Долгих ИССЛЕДОВАНИЕ ИММУННОГО СТАТУСА ОНКОЛОГИЧЕСКИХ ПАЦИЕНТОВ Н. А. Плужникова НИИ ЭДиТО Российского онкологического научного центра им. Н. Н. Блохина РАМН, г. Москва В настоящее время в условиях современного развития индустриального общества отмечается постоянный рост числа онкологических заболеваний, особенно злокачественных новообразований лёгких и желудочно-кишечного тракта. Помимо генетических факторов, стрессов, неправильного питания, несомненно, важную роль в возникновении злокачественных новообразований играет состояние окружающей среды. Неблагоприятная экологическая обстановка способствует тому, что организм подвергается воздействию вредных веществ, в том числе и канцерогенов.

Поскольку онкологические заболевания сопровождаются снижением общей резистентности организма и нарушением иммунитета, то представляется весьма актуальным исследование иммунного статуса больных со злокачественными новообразованиями. Целью работы являлось изучение соотношения основных субпопуляций лимфоцитов периферической крови пациентов с диагностированным раком желудка и пищевода.

С помощью метода проточной цитофлюорометрии, изучен фенотип лимфоцитов крови онкологических больных раком лёгких и желудка II–III стадии (n = 12), а также образцы крови здоровых доноров (n = 15) в качестве контроля. Для фенотипирования лейкоцитов использовали антитела к CD45, CD3, CD4, CD8, CD19, меченные флуорохромами (Becton Dickinson, США). Для выделения субпопуляции лейкоцитарных клеток использовали CD45, а для лимфоцитов – CD3.

В результате проведенных исследований было установлено, что у онкологических больных в отличие от контрольной группы отмечается достоверное снижение содержания CD45+CD3+CD4+ лимфоцитов:

34,19 % (8,84–43,31) и 21,88 % (18,29–27,64) соответственно (Р 0,05). При исследовании CD8+ цитотоксических Т-лимфоцитов наблюдается достоверное увеличение содержания CD45+CD3+CD8+ клеток по сравнению со здоровыми донорами: 34,47 % (24,69–44,50 и 26,80 % (19,64–30,52) (Р 0,05). Следует отметить, что общий процент CD3+ лимфоцитов у онкологических больных составил 72,85 % (69,46–75,55), что достоверно не отличается от группы контроля (76,14 % (68,12-77,32)), Р 0,05) и находится в пределах референтных значений (60–80 %). Изучение содержания В-лимфоцитов показало незначительное снижение CD45+CD3+CD19+ до 11,09 % (9,38-14,76), в отличие от здоровых доноров 13,03 % (9,96-15,89), что также соответствует показателям физиологической нормы.

Таким образом, проведенные исследования показали, что у онкологических больных наблюдаются признаки иммунологического дисбаланса, проявляющиеся в достоверном снижении числа Т-хелперов и увеличении субпопуляции Т-цитотоксических лимфоцитов по сравнению с группой здоровых доноров.

Полученные данные свидетельствуют о целесообразности оценки показателей иммунного статуса и проведения иммуннокоррекции у данной категории онкологических больных.

Научный руководитель – д-р. мед. наук, проф. М. В. Киселевский ИССЛЕДОВАНИЕ СУБПОПУЛЯЦИИ Т-ЦИТОТОКСИЧЕСКИХ ЛИМФОЦИТОВ ОНКОЛОГИЧЕСКИХ ПАЦИЕНТОВ Н. А. Плужникова, Ю. И. Должикова НИИ ЭДиТО Российского онкологического научного центра им. Н. Н. Блохина РАМН, г. Москва На сегодняшний день существует тенденция ухудшения экологической обстановки, что оказывает негативное влияние на здоровье человека и общества в целом. Одним из факторов отрицательного воздействия могут выступать канцерогенные вещества, способные вызывать развитие онкологических заболеваний. Так как развитие рака в организме сопровождается нарушением резистентности организма и нарушением функциональной активности иммунной системы, представляется весьма актуальным исследование иммунного статуса больных со злокачественными новообразованиями.

Цель работы: исследование уровня экспрессии CD25 – молекулы активации субпопуляции Т-цитотоксических лимфоцитов периферической крови пациентов с диагностированным раком желудка и пищевода.

С помощью метода проточной цитофлюорометрии изучен фенотип лимфоцитов крови больных раком лёгких и желудка II–III стадии (n = 12), а также образцы крови здоровых доноров (n = 15) в качестве контроля. Для фенотипирования лейкоцитов использовали антитела к CD45, CD3, CD8, CD25, меченные флуорохромами (Becton Dickinson, США). Для выделения субпопуляции лейкоцитарных клеток использовали CD45, а для лимфоцитов – CD3.

Субпопуляция Т-лимфоцитов CD45+CD3+CD8+ а)Немеченая проба б) Проба меченных клеток: CD8-FITC, CD25-PE В результате проведенных исследований было установлено, что у онкологических больных в отличие от контрольной группы отмечается достоверное увеличение содержания CD45+CD3+CD8+ клеток: 34,47 % (24,69–44,50) против 26,80 % (19,64–30,52) (Р 0,05). Следует отметить, что общий процент CD3+ лимфоцитов у онкологических больных составил 72,85 % (69,46–75,55), что достоверно не отличается от группы контроля (76,14 % (68,12–77,32)) (Р 0,05) и находится в пределах референтных значений (60–80 %). Изучение содержания CD25 на Т-лимфоцитах показало достоверное увеличение уровня экспрессии данного маркера по сравнению с контрольной группой: 5,15 % (2,44-6,00) и 2,13% (1,09-3,67) соответственно. Следует отметить, что показатели CD25 у онкологических больных незначительно, но превышают соответствующие показатели физиологической нормы. Это свидетельствует об увеличении как содержания, так и функциональной активности клеток иммунной системы.

Таким образом, проведённые исследования показали, что у онкологических больных наблюдаются признаки иммунологического дисбаланса, проявляющиеся не только в достоверном увеличении субпопуляции Т-цитотоксических лимфоцитов, но и уровня их активации по сравнению с группой здоровых доноров. Полученные данные свидетельствуют о целесообразности оценки показателей иммунного статуса у данной категории онкологических больных.

Научный руководитель – д-р. мед. наук, проф. М. В. Киселевский ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ ДИАГНОСТИКИ ЗДОРОВЬЯ ДЕТЕЙ, ПРОЖИВАЮЩИХ НА ПРОМЫШЛЕННЫХ ТЕРРИТОРИЯХ А. М. Гугович Федеральный научный центр медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения, г. Пермь Население крупных промышленных городов подвергается воздействию различных техногенных химических нагрузок. Среди неблагоприятных факторов техногенной среды особую роль играют тяжёлые металлы и различные органические соединения. Производственно обусловленные нарушения состояния здоровья могут развиваться под воздействием не только высоких, но и низких концентраций промышленных поллютантов. Наибольшую потенциальную опасность данные факторы представляют, прежде всего, для детей, состояние здоровья которых следует рассматривать как индикатор качества среды обитания. В настоящее время выявлена тенденция к снижению доли здоровых детей, что в последующем может повлечь за собой развитие иммуноопосредованных состояний. Формирование, поддержание и сохранение здоровья детей с малых лет является в настоящее время актуальной проблемой.

Цель настоящего исследования – оценка особенностей иммунного статуса у детей, проживающих на промышленных территориях.

Материалы и методы. Всего в обследовании приняли участие 330 детей, проживающих на территории Пермского края. Основную группу составили 283 ребенка из промышленно развитой территории с хлорорганической техногенной нагрузкой. В группу контроля были включены 47 детей, проживающих вне зон антропогенного воздействия. Основная и контрольная группы были сопоставимы по возрасту и соматической заболеваемости.

Исследование биосред (кровь) на содержание органических соединений (хлороформ) выполнялось на капиллярном газовом хроматографе «Кристалл 2000» (ЗАО СКБ «Хроматэк», Россия).

Фенотипирование лимфоцитов проводили методом иммунофлюоресценции с применением набора моноклональных антител для определения дифференцировочных антигенов лимфоцитов человека (CD3+, CD4+, CD8+, CD19+, CD16/56+, CD25+, CD95+). Апоптоз лимфоцитов оценивали методом проточной цитометрии с помощью специфических флюорохромов по появлению экспрессии на наружной мембране молекул фосфатидилсерина (Annexin V-FITC) и фрагментации ДНК (Propidium iodide). Анализ флюоресценции проводили на проточном цитометре FACSCalibur («Becton Dickinson», США), обработка данных велась в универсальной программе CellQuestPro. При регистрации результатов анализа оценивалось суммарно не менее 10 000 событий.

Для статистической обработки результатов исследования применялись методы математической статистики с помощью программы Microsoft® Office Excel 2003 и пакета прикладных программ Statistica 6.0.

Количественные признаки представлены как M ± (среднее ± стандартное отклонение). За порог достоверности различий принимали значение р 0,05.

Результаты исследования. Анализ уровня контаминации биосред исследуемой группы позволил установить, что в организме регистрируется значимое повышение концентрации хлороформа (0,0113 ± 0,0024 мкг/см3) по сравнению с контрольной группой (отсутствие контаминации).

У обследуемых детей было отмечено статистически значимое снижение относительного числа CD3+ – (68,05 ± 0,70 %) и CD3+CD4+-лимфоцитов (36,26 ± 0,68 %) по сравнению с группой контроля (72,59 ± 1,49 % и 40,58 ± 1,98 % соответственно) при p 0,05.

Выявлено, что у всех обследуемых основной группы наблюдалось статистически значимое повышение активационного маркера CD25+, как в относительных (6,49 ± 0,46 % при р 0,05), так и в абсолютных (0,17 ± 0,01 109/л при р 0,05) величинах по сравнению с контрольными значениями (5,42 ± 0,12 % и 0,14 ± 0,004 109/л соответственно).

Было показано, что в исследуемой группе зафиксировано достоверное (р 0,05) снижение количества клеток, вступивших как в стадию апоптоза – Annexin V-FITC+PI--клетки (1,62 ± 0,10 %), так и в стадию некроза – Annexin V-FITC+PI+-клетки 7,02 ± 0,59 %) по сравнению с группой контроля (1,96 ± 0,09 % и 9,88 ± 0,42 % соответственно).

Таким образом, полученные данные свидетельствуют об избыточной антигенной стимуляции организма, что ведет к активации клеток иммунной системы, однако возможность вступления их в стадию апоптоза снижена. Это может привести к возникновению опосредованных техногенными факторами иммунных нарушений (канцерогенез, аутоиммунные состояния).

Научный руководитель – д-р мед. наук, проф. О. В. Долгих ОСОБЕННОСТИ БИОХИМИЧЕСКОГО, ЭНДОКРИННОГО И МЕТАЛЛО-ЛИГАНДНОГО СТАТУСА ОРГАНИЗМА ПОДРОСТКОВ, ПРОЖИВАЮЩИХ В УСЛОВИЯХ ТЕХНОГЕННОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ ТЕРРИТОРИИ г. АМУРСКА ХАБАРОВСКОГО КРАЯ Е. Ю. Кирсанова Дальневосточный государственный гуманитарный университет, г. Хабаровск Проблема здоровья подростков Приамурья актуальна, так как его показатели на территории Дальнего Востока на 10-15 % ниже, чем в среднем по России, и в динамике отмечается их ухудшение (В. К. Козлов, Г. П. Евсеева, 2010). Одна из причин низкого уровня здоровья подростков г. Амурска отсутствие до 1996 г. необходимых мероприятий по демонтажу и демеркуризации территории обанкротившегося целлюлозно-картонного комбината (ЦКК). «Пилотное» исследование бывшего ЦКК показало, что элементарная ртуть (Hg), как побочный продукт производства, является открытой к доступу, попадает в водные источники, где может включаться в пищевую цепочку биогеоценоза (Р. А. Миронов, Ю. М. Литвин и др., 2008-2011).

Суммарное поступление загрязняющих веществ в организм из окружающей среды отражает микроэлементный состав твердых и жидких биологических сред (волосы, кровь) (Человек. Медико биологические данные..., 1977;

Р. С. Мусалимова, Р. М. Валиахметов, 2010). В исследованиях, проведенных ранее, определено высокое содержание Hg в шерсти 40 % овец (Е. Д. Целых, З. Ю. Билибина, Ю. М. Литвин, 2010), в 39 раз превышающее норматив. На основании данных было получено разрешение Этической комиссии на проведение исследования биохимического, эндокринологического и металло-лигандного гомеостаза организма детей 13-17 лет. Значительная часть обследуемой группы подростков (n = 194) отличалась высоким содержанием Hg в волосах (28 %) и сыворотке крови (СК) (91 % обследуемых с высоким содержанием в волосах). Установлена зависимость между высоким уровнем заболеваемости и повышенной концентрацией экотоксикантов в окружающей среде (З. Ю. Билибина, А. Е. Цуканов, Е. Ю. Кирсанова и др. 2009-2011 гг.). В составе питьевой воды не обнаружена концентрация поллютантов выше ПДК, источником поступления экотоксикантов в организм (Hg) явилась продукция дачных участков.

В связи с этим изучение влияния техногенного загрязнения на адаптивные реакции структурно-функционального статуса организма подростков имеет важное научно-практическое значение.

Цель исследования дать эколого-физиологическое обоснование формированию комплекса адаптивных реакций структурно-функционального статуса организма подростков, проживающих в условиях техногенного загрязнения территории г. Амурска Хабаровского края.

Методы исследования (измерительные и расчетные):

• антропометрические – показатели физического развития (ФР): рост, масса тела (МТ), дефицит МТ (ДМТ) по Лоренсу (Е. Н. Хрисанфова, И. В. Перевозчиков, 2002), окружность грудной клетки, уровень и гармоничность ФР по методике «сигмальных отклонений» (Л. К. Великанова, А. А. Гуминский и др., 1992);

• степень выраженности вторичных половых признаков (ВПП) с использованием шкалы J. M. Tanner (1986);

• биохимические арбитражные – макронутриенты суточного рациона: белок по методу Къельдаля, жиры по методу Сокслета, углеводы путем умножения на соответствующий коэффициент, калорийность) (В. Д. Ванханен и др., 1987);

• спектрофотометрические – состав элементов-примесей воды (n = 41), СК (n = 17), волос (n = 41), пищи рациона питания (n = 24), с использованием атомно-эмиссионной спектроскопии (Методические рекомендации. Масс-спектральное исследование, 2002);

• иммуноферментный (концентрация гормонов в СК фолликулостимулирующего (ФСГ), лютеинизирующего (ЛГ), свободного тироксина (СТ4), тиреотропина (ТТГ), пролактина (ПРЛ), эстрадиола (Э), 17-ОН-прогестерона (П), тестостерона (Т), дегидроэпиандростерон-сульфата (ДГЭА-с).

Впервые установлены сравнительные особенности адаптивных реакций организма подростков городского населения, проживающих в условиях загрязнения экосистемы г. Амурска. Показано снижение адаптивных возможностей сердечнососудистой системы у мальчиков () и девочек () 93,6 и 68,2 %, соответственно. Представлены данные о специфичности адаптивных метаболических реакций подростков, проживающих в условиях загрязнения окружающей среды повышении содержания общего белка СК у 58,07 % и 56,8 %. Определены очень низкие концентрации общего холестерина, имеющие дизадаптивный (патологический) характер у 77,4 % и у 68,2 %. Обнаружено дисфункциональное низкое содержание ФСГ, ПРЛ и ЛГ у 70,5 %, а ПРЛ, ФСГ, ЛГ, П (40 %) и Э (51,0 %) у. Определено дисгармоничное ФР (отклонение у 38,7 % и 45 % г. Амурска, связанное с ДМТ) и отставание развития ВПП на 1,5–2 года от сверстников г. Хабаровска, особенно в группе.

Высокое содержание токсичных элементов в почве, воде непитьевого назначения, а также дефицит и дисбаланс микро- и макронутриентов в суточном рационе питания, и эссенциальных микроэлементов в источниках питьевой воды являются предиктором формирования инверсионных физиологических, биохимических, эндокринных и морфологических адаптивных реакций структурно-функционального статуса организма подростков г. Амурска Хабаровского края и кумуляции токсичных, потенциально токсичных элементов в твердых и жидких биосубстратах.

Научный руководитель – д-р биол. наук, проф. Е. Д. Целых СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ КЛИНИЧЕСКИ ЗДОРОВЫХ ДЕВОЧЕК 6-9 ЛЕТ, ПРОЖИВАЮЩИХ В СЕВЕРНОМ ОКРУГЕ г. ОРЕНБУРГА А. П. Наймушина Уральская государственная академия ветеринарной медицины, г. Троицк, Челябинская обл.

Работа посвящена вопросам использования системного подхода для определения диагностической информативности и значимости некоторых социально-гигиенических и экологических факторов у девочек 6-9 лет при развитии патологии щитовидной железы в условиях г. Оренбурга. Развитие этого заболевания часто начинается в раннем возрасте, особенно в промышленных зонах города, подверженных техногенному воздействию. В связи с этим особое значение имеет ранняя диагностика патологий щитовидной железы у детей.

Материал и методика: оценку состояния щитовидной железы проводили по 47 показателям организма девочек. Показатели организма детей включали: 21 – общих характеристик, 9 – специальных, 17 – компоненты крови и гормоны железы. Полученные результаты подвергли специальной обработке, используя разработанный алгоритм, включающий более 20 статистических методов.

Результаты исследования. Выполнение алгоритма основывалось на существовании ряда закономерностей. Важнейшая из них – при создании большой системы показателей щитовидной железы – переход на систему более высокого уровня, в данном случае – придание всем без исключения элементам системообразующих и системоразрушающих свойств. Их обнаружение производят на основании закономерности, согласно которой отрицательные корреляционные связи укрепляют, а положительные – разрушают сформированную большую систему показателей. Использование этой закономерности позволило представить показатели щитовидной железы девочек 6–9 лет, как большую систему, формируемую из 27 подсистем в виде четырёхэшелонной пирамиды, где по горизонтали представлены подсистемы, а по вертикали – эшелоны. Первый (основание) отражает деятельность групп клеток, участвующих в организации большой системы показателей щитовидной железы;

второй – ткани, третий – совокупность тканей органов, четвертый – совокупность тканей систем органов.



Pages:     | 1 |   ...   | 13 | 14 || 16 | 17 |   ...   | 20 |
 



 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.