авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:     | 1 |   ...   | 6 | 7 || 9 | 10 |   ...   | 12 |

«ФОНД ПЕРВОГО ПРЕЗИДЕНТА РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН СОВЕТ МОЛОДЫХ УЧЕНЫХ ИННОВАЦИОННОЕ РАЗВИТИЕ И ВОСТРЕБОВАННОСТЬ НАУКИ В СОВРЕМЕННОМ КАЗАХСТАНЕ IV ...»

-- [ Страница 8 ] --

Эффективность этой работы зависит от качества применяемых диагностических препаратов [7, 8, 9]. При этом наибольшее распространение получила серологическая диагностика бруцеллеза, заключающаяся в обнаружении специфических антител в сыворотке крови животных. При постановке серологических реакций в качестве контроля используют негативную и позитивную бруцеллезные сыворотки.

Позитивная бруцеллезная сыворотка применяется для контроля РА, РСК, РДСК и других серологических тестов при исследовании неизвестных сывороток на бруцеллез [10].

При постановке РСК и РДСК в качестве компонентов реакции используют комплемент и гемолизин, от качества которых зависит результативность реакции.

Работа, проводимая нами, была направлена на оптимизацию получения позитивной бруцеллезной сыворотки, комплемента и гемолизина, путем обработки животных-продуцентов полученным нами по усовершенствованной методике иммуномодулятором – антитканевой сывороткой.

Материалы и методы. Исследования проводили в лаборатории эпизоотологии кафедры эпизоотологии и организации ветеринарного дела Казахского национального аграрного университета и лаборатории бруцеллеза ТОО научно-производственного предприятия «Антиген».

«Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

Серологические тесты (РА, РСК, РДСК и РБП), бактериологические и биологические исследования выполняли согласно «Наставлению по диагностике бруцеллеза», утвержденноМУ Комитетом ветеринарии МСХ РК (Астана, 1999). При этом были использованы диагностические препараты, полученные на ТОО НПП «Антиген», на которые разработана и утверждена МСХ РК нормативно-техническая документация.

В качестве продуцентов антитканевых сывороток использовали кроликов, для повышения специфичности конечного продукта в процессе иммунизации осуществляли сорбцию антител на гетерогенных и гомологичных антигенах – сорбентах, по запатентованной методике [4, 5, 6].

Активность и специфичность полученных сывороток контролировали в реакции преципитации в агаровом геле, и путем внутрикожной титрации на животных.

Изготовление позитивной бруцеллезной сыворотки, комплемента и гемолизина осуществляли по запатентованной нами методике [11].

Результаты исследований. При изготовлении позитивной бруцеллезной сыворотки, для приготовления иммунизирующих антигена использовали следующие штаммы бруцелл Brucella melitensis Rev-1, Brucella abortus 19, Brucella suis 61.

Гипериммунизацию волов проводили путём подкожных инъекций антигена по следующей схеме, представленной в таблице 1.

Таблица 1– Схема гипериммунизации волов Дата Штамм Объём,с Доза (в млрд. микробных клеток) Методы м3 введения 01.01 Br.ab. 19 0,5 40-50 Подкожно 05.01 Br.s. 61 0,5 40-50 Подкожно 10.01 Br.ab. 19 0,5 60-70 Подкожно 15.01 Br.s. 61 0,5 60-70 Подкожно 20.01 Br.m. Rev-1 0,3 3 Подкожно 25.01 Br.m. Rev-1 0,5 5 Подкожно 30.01 Br.m. Rev-1 0,7 7 Подкожно 07.02 Пробное крововзятие 10.02 Производственное крововзятие В процессе эксплуатации животных продуцентов, антитканевые сыворотки применяли в день грундиммунизации, а затем на 3, 5, 10 и 15 день после грундиммунизации, в оттитрованной дозе (0,01 см3 на 10 кг живой массы тела). За 2- дня до производственного крововзятия проводили пробное взятие крови для определения титра сыворотки.

Полученная нами сыворотка первоначально была проверена на активность в реакции связывания комплемента (РСК) (таблица 2).

Таблица 2 – Результаты титрования сыворотки в РСК Сыворотки Разведения Разведения антигена сыворотки 1:50 1:100 1:200 1:400 1:800 1: опытная 1:5 # # +++ ++ - 1:10 # # +++ + - 1:20 # # ++ - - 1:40 # # + - - 1:80 # +++ + - - 1:160 # ++ - - - 206 «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

контрольная 1:5 # # ++ + - 1:10 # # ++ - - 1:20 # +++ + - - 1:40 # ++ - - - 1:80 +++ + - - - 1:160 ++ + - - - Из данных таблицы 2 видно, что сыворотка, полученная по предложенной нами методике, имеет большее количество комплементсвязывающих антител (титр 1:80), нежели контрольная (титр 1:40). Далее полученная нами сыворотка была проверена в реакции агглютинации (РА). Данные полученные при этом отражены в таблице 3.

Таблица 3 – Активность позитивной сыворотки в РА Сыворотки Разведения сывороток 1:50 1:100 1:200 1:400 1:800 1:1600 1:3200 1: Опытная # # # # # +++ ++ + Контрольная # # # # +++ ++ + Приведенные в таблице 3 данные свидетельствуют, что опытные образцы сыворотки имели также высокие титры антител, при этом титр опытной сыворотки достигал 1:1600, а контрольной 1:800.

Таким образом, сыворотка, полученная путем иммунизации бычков продуцентов с использованием в качестве иммуномодулятора антитканевой сыворотки, обладала достаточно высокой активностью.

Антитканевая сыворотка нами использовалась также при получении гемолизина.

Получение гемолизина осуществляли путем иммунизации кроликов отмытыми эритроцитами барана, с последующим взятием крови и отделением сыворотки. Нами перед проведением иммунизации, кроликов обрабатывали 3-4 кратно антитканевой сывороткой, с интервалом 3-4 дня.

Иммунизацию кроликов осуществляли 4-6 кратно с интервалом 4-6 дней по схеме: в подушечки лапок по 0,2 мл;

внутривенно – 1 инъекция 0,3-0,5 мл, 2 инъекция 0,5-0,7 мл, 3 инъекция 0,7-1,0 мл, 4 инъекция 1,0-1,5 мл, 5 инъекция 1,5-2,0 мл.

Через неделю после последней инъекции антигена у кроликов брали кровь, отделяли сыворотку, инактивировали и титровали в гемолитической системе.

В результате учета результатов титрации гемолизина было установлено, что средний титр гемолизина был выше у кроликов опытной группы и составил в среднем 1:2200, тогда как у кроликов контрольной группы в среднем составил 1:1500. Кроме того у кроликов, иммунизированных с предварительной обработкой цитотоксической сывороткой, практически не отмечалось осложнений после иммунизации, тогда как у контрольных кроликов часто возникали осложнения после иммунизации. В дальнейшем, использование данной методики в производстве позволило получать высокоактивную гемолитическую сыворотку.

При получении комплемента осуществляют путем периодического взятия крови у морских свинок, отделением сыворотки и получением комплемента.

Нами предварительно (за 7-10 дней до крововзятия) морским свинкам вводилась антитканевая сыворотка в дозе 0,001-0,005 мл на кг живой массы тела.

Для исследования были взяты две группы морских свинок, по 25 голов в каждой.

Опытной группе за 7-10 дней до кровопускания вводили путем подкожной инъекции цитотоксическую сыворотку в дозе 0,001 мл на 1 кг живой массы. Для удобства дозировки перед использованием сыворотку разводили стерильным изотоническим раствором натрия хлорида 1:100.

«Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

Далее проводили титрацию комплемента. В результате учета результатов титрации комплемента морских свинок, было установлено, что средний титр комплемента был выше у животных опытной группы и составил в среднем 0,18, тогда как у животных контрольной группы в среднем составил 0,25.

При производственном испытании было получено несколько серий активного комплемента, соответствующего стандарту титра, при недостаточном титре у животных контрольной группы.

Таким образом, использование в качестве иммуномодулятора антитканевой сыворотки позволило в среднем в 1,5-2 раза повысить активность получаемых сывороток и увеличить срок эксплуатации продуцентов.

Литература 1. Ахметсадыков Н.Н., Хусаинов Д.М., Бабалиев С.У., Омарбекова У.Ж.

Закономерности воздействия органотропных цитотоксических сывороток на реактивность организма животных.//Материалы Первого международного ветеринарного конгресса./ Каз НАУ, Деп. Вет. МСХ РК, Предст. MARS/ -Т. 1, Алматы, 2002, С. 53 – 55.

2. Хусаинов Д.М. Взаимосвязь специфичности и эффективности органотропных цитотоксических сывороток.// Материалы Первого международного ветеринарного конгресса./ Каз НАУ, Деп. Вет. МСХ РК, Предст. MARS/ -Т. 1, Алматы, 2002, С. – 68.

3. А.А. Богомолец. Антиретикулярная цитотоксическая сыворотка как средство патогенетической терапии //О лечебном действии антиретикулярной цитотоксической сыворотки «АЦС».- 1942.- С.9.

4. Предпатент 12555 РК. Способ получения цитотоксической сыворотки / Н.Н.Ахметсадыков, Д.М.Хусаинов;

Промышленная собственность. Официальный бюллетень патентного ведомства РК.- бюл. № 1.- опубл. 15.01.2003.

5. Предпатент 12556 РК. Способ получения цитотоксической сыворотки / Н.Н.Ахметсадыков, Д.М.Хусаинов;

Промышленная собственность. Официальный бюллетень патентного ведомства РК.- бюл. № 1.- опубл. 15.01.2003.

6. Предпатент 12557 РК. Способ получения антиретикулярной цитотоксической сыворотки / Н.Н.Ахметсадыков, Д.М.Хусаинов и др.;

Промышленная собственность. Официальный бюллетень патентного ведомства РК.- бюл. № 1. опубл. 15.01.2003.

7. Триленко П.А. Бруцеллез сельскохозяйственных животных. -Ленинград: Колос, 1976.-280 с.

8. Сочнев В.В., Григорьева Г.П. Комплексный подход к серологической диагностике бруцеллеза животных // Тез. докл. науч.-произв. конф. по актуальным вопросам ветеринарии. – Горький, 1984. – С. 11-14.

9. Corbell M.J. International committee on systemstic bacteriology – subcommitettee on the taxonomy of Brucella // Int. J. Syst. Bacteriol. – 1988.-V.38.-P.450-452.

10. Студенцов К.П. Оздоровление крупного рогатого скота от бруцеллеза с включением в комплекс мероприятий вакцинации // В сб. Бруцеллез сельскохозяйственных животных и меры борьбы с ним.- Алма-Ата, 1958.- С. 40-47.

11. Предпатент 16597 РК. Способ получения бруцеллезной позитивной сыворотки / Н.П.Иванов, Д.М.Хусаинов;

Промышленная собственность. Официальный бюллетень патентного ведомства РК.- бюл. № 12. - опубл. 15.12.2005.

208 «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИИ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОЙ ТЕСТ-СИСТЕМЫ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ БРУЦЕЛЛЕЗА Д.М.Хусаинов Казахский национальный аграрный университет Введение. Бруцеллез – хроническая инфекционная болезнь животных, сопровождающаяся частыми обострениями и проявляется абортами, яловостью, нарушением репродуктивных функций животных. Свое название болезнь получила в честь английского военного врача Брюса, который впервые выделил возбудителя из селезенки умершего от «мальтийской лихорадки» солдата на острове Мальта [1].

Райтом было установлено, что сыворотка крови больных людей склеивает микрококки, выделенные Bruce. Bang и Stribolt в 1897 году изолировали из матки коровы «абортогенную бациллу», в 1902 году получившей название Bacterium abortus.

Traum выделил на ферме, где отмечались аборты у свиней, схожего возбудителя от недоношенннызх поросят. Evans в 1981 г. показала существование родства между Micrococcus melitensis и Bacterium abortus [2].

В 1929 году Huddleson (489) предложил следующую классификацию бруцелл:

Br.melitensis, Br. abortus, Br. Suis [3].

В 1957 г. Stoenner и Lackman выделили от больных бруцеллезом пустынных кустарниковых крыс (США) возбудитель вида Br. neotomae, в 1953 году в Новой Зеландии Buddle и Soyes выдели возбудитель вида Вr. оvis, в 1968 году Carmichael и Bruner выделили возбудитель вида Br. Canis, вызывавший аборты у сук [4].

Практически все виды бруцелл, хотя и имеют сходства по биологическим свойствам, имеют и определенные различия, благодаря которым осуществляется их дифференцирование.

Из средств диагностики бруцеллеза наиболее широкое применение получили различные серологические тесты.

Одним из высокочувствительных тестов является иммуноферментный анализ (ИФА) или ELISA (Enzime Linked Immunosorbent Assay-ферментозависимый иммуносорбционный анализ). Наибольшее распространение получил его твердофазный вариант, когда антиген или антитела адсорбируют на полистироловой плашке. По данным многих исследователей, ИФА при бруцеллезе по чувствительности превосходит другие тесты, однако иногда может давать ложноположительные реакции [5, 6, 7].

При этом известные способы получения тест-системы для диагностики бруцеллеза методом иммуноферментного анализа, включали сенсибилизацию полистироловой планшеты и других носителей корпускулярным антигеном с последующей инкубацией при 37°С в течение 15 мин. [8].

Целью исследований явилось повышение активности и специфичности тест системы при диагностике бруцеллеза.

Материалы и методы. Исследования проводили в лаборатории кафедры эпизоотологии и организации ветеринарного дела Казахского национального аграрного университета и лаборатории бруцеллеза ТОО научно-производственного предприятия «Антиген».

Серологические тесты, бактериологические и биологические исследования выполняли согласно «Наставлению по диагностике бруцеллеза», утвержденного Комитетом ветеринарии МСХ РК (Астана, 1999). При этом были использованы диагностические препараты и вакцины ТОО НПП «Антиген», на которые разработана и утверждена в МСХ РК нормативно-техническая документация.

«Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

Получение иммуноферментной тест-системы для диагностики бруцеллеза крупного рогатого скота и овец осуществляли по предложенным нами (Иванов Н.П., Хусаинов Д.М., 2009) способам [9, 10].

По разработанной технологии сенсибилизацию полистироловых планшет осуществляли соответственно при диагностике бруцеллеза крупного рогатого скота ультразвуковым лизатом бруцелл вида Brucella abortus 19, а при диагностике бруцеллеза овец - лизатом бруцелл вида Brucella melitensis Rev – 1.

При проведении ИФА, полистирооловые плашки перед проведением анализа выдерживают в течение 30 мин при температуре от 20 до 25 °С.

Затем планшет промывают один раз ФСБ-Т. По окончании промывки остатки жидкости удаляют активным встряхиванием, постукивая планшетом по сложенной в несколько раз фильтровальной бумаге.

Для внесения контрольных сывороток можно использовать любые лунки планшета. Для этого в лунку 1 вносят 100 мм К+, в две лунки (2 и 3) - по 100 мм К-, а в еще одну лунку (4) с РБР-С оставляют для контроля конъюгата. Раствор перемешивают пять раз пипетированием.

После этого планшет закрывают крышкой или заклеивают клейкой лентой и инкубируют в течение 30 мин при температуре (37±1) °С.

По окончании инкубации планшет промывают ФСБ-Т пять раз, как описано выше.

После промывки и удаления влаги в каждую лунку планшета вносят по 100 мм раствора конъюгата. Планшет закрывают крышкой или заклеивают клейкой лентой и инкубируют в течение 30 мин при температуре (37±1) °С.

По окончании инкубации планшет промывают ФСБ-Т пять раз, как описано выше.

Затем в каждую лунку планшета вливают по 100 мм раствора ортофенилендиамина или субстрата тетраметилбензидина. Планшет закрывают крышкой или заклеивают клейкой лентой и помещают на 15 мин в защищенное от света место при температуре (37±1) °С.

Реакцию останавливают внесением в каждую лунку планшета по 50 мм стоп реагента (0,1 М раствор серной кислоты).

Учет результатов реакции.

Результаты учитываются в течение 3-х ч. после остановки реакции визуально или спектрофотометрически.

Результаты ИФА на спектрофотометре. Оптическую плотность (ОП) измеряют при длине волны 450 нм. Нулевой уровень («бланк») задают по воздуху. Результаты считаются достоверными только в том случае, если значение ОП в лунке с контролем конъюгата (ОПКг) не превышает 0,15, в лунках с К- среднее значение ОП (ОПК-) не более 0,2, в лунках с К+ среднее значение ОП (ОПК+) не менее 1,0.

Визуальный учет: для положительной сыворотки антибруцелла КРС при визуальном учете достаточно окрашивание от оранжево-коричневого до коричневого цвета. Пробы с отрицательной сывороткой и конъюгатом не должны изменить окраску или могут иметь слабое пожелтение.

Активность препарата проверяли в сравнении с «контрольным» корпускулярным иммуноферментным диагностикумом.

Результаты исследований. При диагностике бруцеллеза крупного рогатого скота первый опыт проводили на животных, диагноз на бруцеллез у которых был предварительно установлен серологическим путём (РСК). В таблице 1 приведены результаты проверки специфичности препарата.

210 «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

Таблица 1 - Сравнительная специфичность опытного и контрольного иммуноферментных диагностикумов на бруцеллез Номер Вид Группы Вид ИФА- Количество Реагировало опыта живот- живот- диагностикума животных положительн ных ных неблагополуч- о ных стад 1 КРС Опытная из ультра- 25 звукового антигена 2 КРС Контроль- из корпуску- 25 ная лярного антигане Как видно из данных таблицы 1, иммуноферментный диагностикум из ультразвукового лизата бруцелл проявляет более высокую специфическую активность, чем общепринятый (корпускулярный) диагностикум, применяемый для диагностики бруцеллеза крупного рогатого скота.

Далее было проведено комплексное исследование на бруцеллез и в двух неблагополучных по бруцеллезу фермах крупного рогатого скота. Всего проведено комплексное (РСК и ИФА) исследование 326 коров разных возрастов.

При серологических исследованиях применялись официально реакция связывания комплемента (РСК), реакция агглютинации (РА) с коммерческими бруцеллезными антигенами и иммуноферментная тест-система, изготовленная по нашей методике (Иванов Н.П., Хусаинов Д.М., 2009).

В результате комплексного исследования выявлено наличие бруцеллеза в ИФА у 19 коров, что подтверждено в РСК и РА в 15 случаев. При этом коммерческим ИФА диагностикумом результат подтвержден в 17 случаях.

Следовательно, тест-система, для диагностики бруцеллеза крупного рогатого скота методом иммуноферментного анализа изготовленная из ультразвуковрого лизата, позволяет выявить в неблагополучных стадах дополнительно к общепринятым серологическим (РСК, РА) методам 25-27 % животных, инфицированных возбудителем бруцеллеза, а в сравнении с корпускулярным ИФА-диагностикумом – 11-12 %.

Аналогичные исследования были проведены при иммуноферментной диагностике бруцеллеза овец. Первый опыт также проводили на животных, диагноз на бруцеллез у которых был предварительно установлен серологическим путём (РСК). В таблице приведены результаты проверки специфичности препарата.

Как видно из данных таблицы 2, иммуноферментный диагностикум из ультразвукового лизата бруцелл проявляет более высокую специфическую активность, чем общепринятый (корпускулярный) диагностикум, применяемый для диагностики бруцеллеза овец.

Так же было проведено комплексное исследование на бруцеллез и в двух неблагополучных по бруцеллезу отарах овец. Всего проведено комплексное (РСК, РА и ИФА) исследование 548 овец разных возрастов.

При серологических исследованиях применялись официально реакция связывания комплемента (РСК), реакция агглютинации (РА) с коммерческими бруцеллезными антигенами и иммуноферментная тест-система, изготовленная по нашей методике.

«Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

Таблица 2 - Сравнительная специфичность опытного и контрольного иммуноферментных диагностикумов на бруцеллез Номер Вид Группы Вид ИФА- Количество Реагировало опыта живот- живот- диагностикума животных положительно ных ных неблагополуч ной отары 1 овцы опытная из ультра- 55 звукового антигена 2 овцы контроль- из 55 ная корпускулярного антигане В результате комплексного исследования выявлено наличие бруцеллеза с помощью ИФА у 38 овец, что подтверждено в РСК в 32 случаях, РА в 34 случаях. При этом коммерческим ИФА-диагностикумом результат подтвержден в 35 случаях.

Следовательно, тест-система, для диагностики бруцеллеза овец методом иммуноферментного анализа изготовленная из антигена-лизата, позволяет выявить в неблагополучных стадах дополнительно к общепринятым серологическим (РСК, РА) методам 11-18 % животных, инфицированных возбудителем бруцеллеза, а в сравнении с корпускулярным ИФА-диагностикумом – 8-9 %.

Выводы 1 Предложена тест-система, для диагностики бруцеллеза крупного рогатого скота методом иммуноферментного анализа изготовленная из липополисахардного антигена, позволяющая выявить в неблагополучных стадах дополнительно к общепринятым серологическим (РСК, РА) методам 25-27 % животных, инфицированных возбудителем бруцеллеза, а в сравнении с корпускулярным ИФА диагностикумом – 11-12 %.

2 Предложена тест-система для диагностики бруцеллеза овец методом иммуноферментного анализа изготовленная из липополисахардного антигена, позволяющая выявить в неблагополучных стадах дополнительно к общепринятым серологическим (РСК, РА) методам 11-18 % животных, инфицированных возбудителем бруцеллеза, а в сравнении с корпускулярным ИФА-диагностикумом – 8-9 %.

Литература 1. Bruсe D. Mote on discovery of microorganism in Malta fever.3//The praotitioner. - 1887.

- 39. - P.181-170.

2. Verges J.M. Brucella et brucellose // Cours international de microbiologie des aliments.

Unite «Laits et produits laitiers» du 25 Mai au 5 Juin 1999. – Institut Pasteur Litle.

3. Huddleson I.F. The differentiation of the species of genus Brucella. Am. J. Publ. Health.

– P. 18-24. – 1929.

4. Corbel M.J. Internanional committee on systematic bacteriology – subcommittee on the taxonomy of Brucella/Int.J.Syst.Dacteriol.-1988.-V.38.-P.450-452.

5. Chin J.C. Comparison of different antigenic preparations for the detection of ovine serum antibodies against Brucella ovis by ELISA//Aust. Vet. J.-1983.-V.60.-№9.-Р.261-264.

6. Меринов С.П., Заноснина Т.Ю., Голубицкий Е.П. Иммуноферментный метод обнаружения антигенов бруцелл и антител к ним//Современные аспекты профилактики зоонозных инфекций/Тез. докл. Всесоюзной науч. конф.- Иркутск, 1984.-Т.2.-С.11-13.

7. Желудков М.М. К вопросу об антигеном родстве возбудителя бруцеллеза и иерсиния энтероколитика сероварианта 0:9//Современные проблемы зоонозных 212 «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

инфекций/Тезисы докладов Всесоюзной межведомственной конф.- Москва, 1981. С. 98-99.

8. Маматова З.Б. Иммуноферментный метод диагностики бруцеллеза. Канд. дисс. М., 1986, С. 46-106.

9. Иванов Н.П., Хусаинов Д.М. Способ изготовления тест-системы для диагностики бруцеллеза крупного рогатого скота методом иммуноферментного анализа.

Промышленная собственность. Официальный бюллетень патентного ведомства РК (Предпатент РК № 21184).- бюл. № 5.-2009.

10. Иванов Н.П., Хусаинов Д.М. Способ изготовления тест-системы для диагностики бруцеллеза овец методом иммуноферментного анализа. Промышленная собственность. Официальный бюллетень патентного ведомства РК (Предпатент РК № 21183).- бюл. № 5.-2009.

ВЛИЯНИЕ ПОЛОВОЙ АКТИВНОСТИ ЯПОНСКИХ ПЕРЕПЕЛОВ НА ОПЛОДОТВОРЕННОСТЬ И ВЫВОДИМОСТЬ ЯИЦ В.А.Абрикосова, Н.А. Акимжан Казахский национальный аграрный университет Отбор самцов по живой массе, экстерьеру не всегда позволяет укомплектовать стадо самцами с высокой оплодотворяющей способностью. Установлено, что не всегда имеется прямая зависимость между живой массой и воспроизводительными функциями производится [1].

Имеются указания на факт несоответствия между показателями экстерьера петухов и олодотворенностью яиц. Такое несоответствие легко обнаруживается при гнездовом содержании птиц. Возможны случай, когда, несмотря на подбор в гнездо производителя, типичного по экстерьеру процент оплодворенности яиц очень низок или даже все яйца, снесенные несушками в этом гнезде, оказываются неоплодотворенными [2]. Высокие воспроизводительные качества перепелов являются одной из важнейших предпосылок эффективности использования птиц родительского стадо перепелов. Воспроизводительные качества перепелов характеризуется уровнем спермопродукции и их половой активностью и предопрределяются наследственными факторами, условиями содержания состоянием нервной, эндокринной и половой систем [3]. Половая активность птицы является наследуемым признаком, коэффициент наследуемости его варьирует от 0,25 до 0,76. Исследования, проведенные нами в 2006 2008гг., показывают зависимость половой активности перепелов от режимов содержания и выращивания [4]. Причиной низкой оплодотворенности является малая эффективность самцов т.е. большое количество неудачных спаривании из-за вмешательства наиболее агрессивных петухов. Было выявлено, что у различных самцов количество завершенных спариваний числа попыток варьирует от 15 до 97%.

Одной из отличительных особенностей проведения перепелов в стаде является большое количество садок, которое достигает у некоторых 36 в день. Чрезмерная половая активность петухов может отрицательно сказаться на оплодотворенности яиц, т.к. после каждого успешного спаривания уменьшается объем спермы и число сперматозоидов в эякуляте [5].

В литературе намине выявлено данных о половой активности петухов и в стаде кур, а также данных о влиянии половой активности перепелов при естественном спаривании на оплодотверенность и результаты инкубации яиц [6].

«Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

Работа проведена в КХ «Байболат» Илийского района, Алматинской области.

Под опытом находилось 32 перепела и 128 перепелок в возрасте от 1,5 до 12 месяцев.

Птица была размещена в двухъярусных клеточных батареях собственной конструкции при половом соотношении 1:4, в каждой клетке было размещено по 25 голов птицы.

Условия содержания и кормления соответствовали требованиям для птиц родительского стадо японских перепелов. Самцы были подобраны к перепелкам по половой активности (таблица 1), несушки разделены на группы при переводе в родительское стадо в возрасте 6 недель методом случайной выборки. Для получения перепелов с различной половой активностью применялось направленное выращивание петушков с суточного до 6 недельного возраста при различных световых режимах. Во второй серии опытов использовали тех же перепелов, что и в первой, но сгруппированных по половой активности в более контрастные группы. При этом более активные самцы были подсажены к курам, от которых в первой серии были получены худшие показатели по оплодотворенности и выводимости яиц, а менее активные к перепелкам, от которых в первой серии были получены более высокие инкубационные показатели.

Таблица 1 - Характеристика перепелов, используемых в испытании (число завершенных спариваний в среднем в день) Группа серия серия М±m Предел. М±m Предел.

спариваний спариваний 1 6,4±0,63 10,3±3,1 10,4±0,8 12- 2 3,7±0,52 6,3±3,0 7,3±0,4 8-6, 3 4,3±1,0 9,5±1,4 2,2±0,2 3-1, 4 - - 3,7±0,1 4-3, В первой серии исследования было осуществлено 3 закладки яиц на инкубацию, во второй – 2 от самок в возрасте 2,4,6,8,10 и 11,12 месяцев. Яйца на инкубацию собирали в течение 5 дней. Всего проинкубировано по 504-900 яиц от группы в первой серии во второй.

В качестве контроля во второй серии опытов использовали птицу, подобранную методом случайной выборки, без учета половой активности. Перепелов и содержащуюся идентичных условиях.

Оценку перепелов каждой группы по половой активности проводили в возрасте 11-12 месяцев методом непрерывного наблюдения за поведением их в течение 3-х световых дней продолжительностью 17 часов. При этом учитывали количество и время завершенных спариваний.

При проведении исследовании учитывали количество оплодотворенных яиц методом просвечивания и вскрытия на 10-е сутки инкубации, количество вылупившихся здоровых птенцов, а также количество замерших эмбрионов на стадии образования кровеносной системы и в последующие периоды инкубации.

Результаты инкубации яиц показали, что воспроизводительные качества этого вида птица во все возрастные периоды находились на достаточно высоком уровне (таблица 2,3). С 2 до 10 месячного возраста оплодотворенность яиц составила 83-91,9%, а вывод перепелят 56,3-76,5% от заложенных яиц. Резкое снижение воспроизводительных качеств перепелов происходило в 11-12 месячном возрасте.

Оплодотвореннность яиц в этот период восставил в контрольной группе 80,4-82,7%, а вывод перепелят от заложенных яиц 54,4-60,9%. Это явление, видимо, связано с началом интенсивной линьки птиц и утолением деятельности половых желез. Самый высокий процент оплдотворенности яиц (91,3) получен от перепелов с половой активностью 6,4 садки в среднем в день. При использовании перепелов с половой 214 «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

активностью 3,7 садки оплодотворенность яиц было на 5,8% меньше (Р0,99). Вывод перепелят из яиц от перепелок групп, где использовались самцы, совершающие в день 6,4 садки, был на 11,1% выше сем при использовании петухов с половой активностью 3,7 садки (Р0,99). В группе, где использовали петухов с половой активностью 4, садки, количество оплодотворенных яиц и вывод перепелят был ниже, чем в группе и выше, чем АО 2 группе.

Результаты инкубации, представленные в таблице 3, показывают, что более активные перепела обеспечивают лучшую оплодотворяемо сто яиц. По первой лучшую оплодотвояемость яиц получена в 1 группе, перепела которой имели среднюю половую активность 9,7 садки.

Таблица 2 Результаты инкубации перепелиных яиц № Половая Возраст Заложено № Получено группа активность птиц, яиц, шт. оплодотворенных здоровых перепелов месяцев яиц перепелят, голов.

2 138 90,2 4 97 91,8 1 6,4 6 127 91,9 8 84 91,1 10 90 91,4 В среднем: - 536 91,3 2 274 86,6 4 242 84,8 2 3,7 6 187 85,0 8 110 83,8 10 87 87,2 В среднем: 900 85,5 2 134 89,4 4 96 83,7 3 4,3 6 122 78,1 8 68 81,9 10 84 82,6 В среднем: 504 83,1 Продолжение таблицы № Половая активность Возраст % вывода от группа перепелов птиц, Заложенных яиц Оплодотворенных яиц месяцев 2 71,7 79, 4 75,3 81, 1 6,4 6 75,6 82, 8 73,8 81, 10 74,4 81, В среднем: - 74,1 81, 2 63,1 73, 4 64,9 76, 2 3,7 6 64,7 76, 8 60,9 72, 10 56,3 64, В среднем: 63,0 73, «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

2 74,6 83, 4 61,5 73, 3 4,3 6 62,3 80, 8 63,2 77, 10 61,9 74, В среднем: 65,5 78, Таблица 3 Результаты инкубации перепелиных яиц во 2 серии исследований № группа Количество садок в Возраст Заложено № среднем на каждого птиц, яиц, шт. оплодотворенных перепела месяцев яиц 1 9,7 11 96 89, 12 120 88, 2 7,2 11 101 90, 12 114 91, 3 2,3 11 89 69, 12 126 83, 4 3,6 11 118 85, 12 124 84, контроль не определялось 11 164 80, 12 154 82, Продолжение таблицы № группа Количество садок в Получено % вывода от среднем на каждого здоровых Заложенных Оплодотворенных перепела перепелят, яиц яиц голов.

1 9,7 59 61,4 68, 76 63,3 71, 2 7,2 62 61,4 68, 84 73,3 80, 3 2,3 53 59,5 85, 76 60,2 72, 4 3,6 72 60,6 71, 71 57,6 67, контроль не определялось 100 60,9 75, 84 54,4 66, Однако во второй закладке лучшие результаты получены при использование перепелов со средней половой активностью 7,2 садки. Мы предполагаем, что произошло изменение рантового соподчинения в группе перепелов, при котором доминирующее положение заняли не самые активные перепела. В стаде перепелок, где находятся несколько самцов, непременно существует поряд соподчинения.

Доминирующие самцы занимают господствующее положение хотя не всегда являются лучшему производителями. Эти же, видимо, обусловлено повышение процента оплотворенных яиц во второй закладке от птиц 3 группы, где использовали перепелов с самой низкой половой активностью. Вывод птенцов от числа оплодотворенных яиц в обеих закладках во 2 группе (половая активность перепелов в среднем 7,2 садки)самый высокий. Это говорит о том, что активные перепела производят более жизнеспособные, более качественные половые клетки.

216 «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

Вывод: При естественном спаривании в стаде перепелок половая активность самцов оказывает большое влияние на оплодотворенность и выводимость яиц. Половая активность японских перепелов в 12 месячном возрасте колеблется от 1 до 12 садок в день. Использование перепелов с высокой половой активностью повышает оплодотверенность яиц и вывод молодняка на 5,8%. Наиболее эффективно использовать перепелов в родительском стаде, совершающих в день 6-8 садок, так как при этом повышается не только количество оплодотворенных яиц (2-10%), но и вывод птенцов из оплодотворенных яиц (на 4-6%).

Литература 1. Байбатжанов М.К., Махатов Б.М., Абрикосова В.И.. Использование самцов с различными половой активностью в племенном перепеловодстве. //Жас алымдарды халыаралы ылыми-практикалы конференциясы материалдарыны жиынтыы 30-31 мамыр – Алматы, 2007. с14-17.

2. Махатов Б.М., Абрикосова В.И., Байбатжанов М.К., Сабденов А.К. Оценка производителей и их отбор при линейном разведении перепелов.// Академик К.С.

Сабденовты 75 жылдыына арналан «азастанны аграрлы секторындаы инновация» атты халыаралы ылыми-практикалы конференция. – Алматы, 2008, с. 331- 3. Махатов Б.М., Сабденов А.К., Абрикосова В.И., Сман К.Ж., Байбатжанов М.К.

Показатели спермопродукции японских перепелов местной популяции. // Профессора. Б. Байжмановты туанына 70 жыл толуына арналан «азастан Республикасыны бсекелістікке абылетті 50 елді атарына кіру стратегиясына байланысты ауылшаруашылыы саласындаы ылыми талдамалыларды жасау жне енгізу проблемалары» атты халыаралы ылыми-тжірибелік конференция. – Алматы 2008. с.132-136.

4. Духно З.И.Оценка продуктивности и племенных качеств кур-несушек по признаку половой активности. Материалы II конференции молодых ученых по генетике и разведению с-х животных. Т.1, 1970.

5. Агапова З.В. Половая активность петухов и кур как признак при селекции бройлерных линий на повышение воспроизводительных качеств. // Бюллетень ВНИИ разведения и генетика с-х животных. – 1988. – 108:24-27.

6. Елизаров Е., Шашина Г., Карпенко Л. Новый прием отбора мясных петухов. // Птицеводство. – 1997. - №3. –с.17-19.

ПРОДУКТИВНОСТЬ ПОТОМСТВА ОТ КОМОЛЫХ И РОГАТЫХ ПРОИЗВОДИТЕЛЕЙ СОЗДАВАЕМОЙ ПОРОДЫ «ЕТТІ МЕРИНОС»

Н.К.Жумадиллаев Юго-Западный научно-исследовательский институт животноводства и растениеводства Рога – биологически и экономически нецелесообразный орган, требующий много питательных веществ на свой рост, при этом имеют большой вес, кроме того, рога опасны для обслуживающего персонала, также большая травмируемость среди самих животных, при кормлении требуются большеразмерные кормушки [1,2]. Мериносовые бараны, как правило, имеют рога, матки же у них комолые. В последние годы селекция «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

на комолость, исходя из практических соображений, ведется в странах с развитым овцеводством в Австралии, Китае, Германии, Франции, Болгарии. В Казахстане создается комолый тип южно-казахских мериносов [3]. За рогатый скот в некоторых государствах платят при покупке на 2% меньше, чем за комолый. Поэтому, в настоящее время при создании новых типов, пород животных желательно учитывать признак комолости, ориентируясь на получение безрогих животных [4]. Исходя из вышеперечисленного, а также в результате многолетних наблюдений за живой массой, промерами, убойными показателями и шерстной продуктивностью в различные годы мы пришли к решению о целесообразности закрепления признака комолости у создаваемой тонкорунной мясной породы «Еттi меринос».

До использования немецких мясных мериносов в стадах казахской тонкорунной породы в производственных кооперативах (ПК) «Племзавод Алматы», им. Ескельды и общественном объединении (ОО) «Етті меринос» Алматинской области основная масса баранов-производителей (80-90%) были рогатые. Селекция на комолость с по 2009годы привела к ощутимым результатам, в первые годы доля комолых баранов была всего в пределах 3-4%, с зачатками рогов 3%, рогатые особи составляли 93-94%.

В процессе проводимого отбора доля безрогих особей достигла 80,5%, с зачатками рогов 7,3%, рогатых 12,2%. В перспективе планируется довести процент комолых животных до 90-95%. Живая масса комолых особей при рождении превосходит рогатых на 20%, с зачатками рогов (ЗР) на 8%.

В годовалом возрасте эта разница составляет между комолыми и рогатыми 12,3%, комолыми и ЗР 5,7%, между ЗР и рогатыми 6,8%. В 3-х летнем возрасте соответственно 12,6%;

6,7%;

6,7%. По промерам телосложения комолые животные имеют превосходство по объемным показателям. Бараны высокорослы и длинотелы:

высота в холке в пределах 85 - 80,5 см;

в крестце – 86 - 81,5 см;

косая длина туловища – 87 - 82 см;

у них развитая грудь: ширина груди - 44,5 - 38 см, глубина - 46,5 - 42,5см и обхват - 135,5 - 120 см;

имеют хорошие мясные формы: ширина в маклоках 27 - 24см, полуобхват зада - 62,5 - 58 см.

У рогатых баранов эти показатели меньше: высота в холке и крестце - 76,5 см;

косая длина тела - 76,5 см;

обхват груди - 110см, ширина груди - 33 см и глубина груди - 39 см и т.д. Выход туши комолых животных больше по сравнению с рогатыми на 4,8% и составляет 52,7%;

убойный выход 56,6% или больше на 6,7%, выход мякоти выше на 3,3%, коэффициент мясности на 1,2.

Соотношение массы рогов к живой массе баранов-производителей составляет 2 4%, что естественно приводит к уменьшению выхода туши и убойного выхода, по сравнению с комолыми животными. Исходя из вышеизложенного материала, селекция на комолость положительно повлияла на живую массу, величину, убойные показатели, шерстная продуктивность при этом не ухудшилась.

Для характеристики и сравнения живой массы, промеров телосложения потомства от рогатых и комолых производителей нами проведен анализ по получаемому потомству.

Живая масса молодняка, полученного от комолых и рогатых производителей, изучена по результатам индивидуального взвешивания ягнят при рождении и в месячном возрасте (таблица 1).

Исследование живой массы показало, что сравнительно высокую живую массу, как при рождении, так и при отбивке имело потомство от комолых баранов, нежели от рогатых. Так баранчики, от комолых баранов, рождаются хорошо развитыми, достаточно крупными и превосходят сверстников от рогатых отцов на 0,77 и 0,15кг или на 15 и 2,94%, ярки же соответственно на 1,0 и 0,18кг или на 20,7 и 3,6%.

218 «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

Таблица 1 - Живая масса подопытных ягнят Отцы Потомство пол кол-во, гол Живая масса, кг при рождении в 4,5 месяца бар 99 5,10 ±0,09 38,8 ± 0, Комолые яр 89 4,90 ± 0,09 35,9 ± 0, бар 76 4,95 ± 0,12 38,0 ± 0, Зачатки рогов яр 73 4,72 ± 0,10 35,1 ± 0, бар 75 4,33 ± 0,06 32,8 ± 0, Рогатые яр 70 3,90 ± 0,06 29,8 ± 0, В 4 месячном возрасте баранчики достигли живой массы 38,8-32,8 кг, а ярочки 35,9 - 29,8 кг. При этом превышение живой массы баранчиков и ярочек от комолых баранов над сверстниками от рогатых сохраняется, примерно в таких же пределах какими были при рождении. Так, живая масса баранчиков от рогатых баранов была меньше чем от комолых баранов на 6,0;

5,2 кг или на 15,5;

13,7%. У ярок наблюдается такая же тенденция.

По промерам у полученного потомства от комолых баранов заметно превосходство над ягнятами от рогатых родителей: по косой длине тела у баранчиков на 2,5 см или 6,9%, у ярок на 1,7см или 4,7%, глубине груди у баранчиков на 0,9см или 4,8% у ярок на 0,3см или 5,2%, ширина груди у баранчиков на 0,9см или 6,6% у ярок на 0,8см или на 6,6%, обхват груди у баранчиков на 3,1см или 7,7% у ярок на 3,3см или на 8,6% и особенно по полуобхвату зада у баранчиков на 5,3см или 24,2% у ярок на 5,2см или на 25,5% (таблица 2).

Таблица 2 – Промеры ягнят при рождении Наименования Баранчики Ярочки комолые ЗР рогатые комолые ЗР рогатые Количество, 10 10 10 10 10 гол.

Косая длина 38,7±0,3 37,5±0,3 36,2±0,3 37,2±0,4 36,1±0,4 35,5±0, туловища Глубина груди 19,6±0,4 19,4±0,5 18,7±0,4 18,3±0,4 18,0±0,5 17,4±0, Ширина груди 14,5±0,9 14,1±0,3 13,6±0,2 12,9±0,1 13,0±0,1 12,1±0, Обхват груди 43,4±0,3 42,1±0,3 40,3±0,3 41,5±0,4 41,4±0,4 38,2±0, Полуобхват 27,2±0,3 26,3±0,3 21,9±0,7 25,6±0,9 24,6±0,9 20,4±0, зада Как видно, из данных промеров заметно превосходство потомства от комолых баранов-производителей, т.е. получено потомство более крупное по величине, соответственно превосходящее по мясным характеристикам.

По итогам индивидуальной оценки (таблица 3) из общего количества годовалых ярок к элите и I классу отнесено от комолых баранов - 67,7%, с зачатками рогов - 59,7% и от рогатых – 55,1% особей. Из приведенных данных видно, что выход животных желательного типа наибольший от комолых производителей.

Таблица 3 - Классный состав ярок.

Показатель Комолые бараны Бараны с зачатками Рогатые бараны рогов гол % гол % гол % Эл. 31 20,0 17 12,6 13 11, I 74 47,7 63 47,0 52 44, II 48 31,0 51 38,1 45 38, «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

Брак 2 1,3 3 2,2 8 6, Итого 155 100 134 100 118 Исходя из вышеизложенного материала, селекция на комолость положительно повлияла на величину живой массы, промеры телосложения потомства и выход животных желательного типа наибольший от комолых производителей.

Литература 1. Кияткин. П.Ф. Процесс породообразования овец. –Ташкент: 1964г. -15с. -С.61-63.

2. Иванов М.Ф. Полное собрание сочинений. -М.: Колос, 1964. –Т.4. – С.448–453.

3. Абдраманов К.К.Продуктивность и биологические особенности комолых австрало южноказахских мериносов выведенных на юге Казахстана: автореф. дисс. канд. с.-х.

наук. –Шымкент: 2007. -25с.

4. Жумадилла К. Результаты использования каргалинских баранов с зачатками рогов //Матер. Межд. науч.-практ. конф., посвящ. проблемам повышения продуктивности сельскохозяйственных животных и растений. – Бишкек: 2002. -С.123-126.

УПИТАННОСТЬ И СОХРАННОСТЬ МЯСО-САЛЬНЫХ ПОРОД ОВЕЦ РАЗНЫХ ГЕНЕТИЧЕСКИХ ГРУПП В РАЗЛИЧНЫХ ПОПУЛЯЦИЯХ ЮГО ЗАПАДНОГО КАЗАХСТАНА В ЗИМНИЙ ПЕРИОД Э.Кансейтова, Е.Абдошев, Т.Кансеитов Юго-Западный научно-исследовательский институт животноводства и растениеводства После отбивки ягнят от маток провели выбраковку старовозрастных и нездоровых овцематок, тем самым сформировали отару разновозрастных овцематок нового генофонда казахской курдючной грубошерстной на юге Казахстана и заводского типа эдильбаевской пород в Атырауской области, на следующий год. До начало искусственного осеменения животных подготовили к случке с высшей и средней упитанностью. Прижизненная оценка мясной продуктивности овец осуществляется на основе ГОСТа 5111-55 «Овцы и козы для убоя. Определения упитанности».

По упитанности овец разделяют на три категории. Упитанность овец зависит от породы, время года, пола, возраста, экологии разведения, состояние пастбища и.т.д. От упитанности овец зависит их продуктивность здоровья, плодовитость, сохранность и.т.д., по этому созрело необходимость изучения указанный признак как новый создаваемый генофонд и ее реакции на среду обитания.

Нами изучена упитанность овец (зимой) у эдильбаевской породы в трех базовых хозяйствах составили: из учтенных 410 голов баранов-производителей высшей – 13,9%, средней - 82,2%, нижесредней упитанности - 9%;

а у овцематок из учтенных голов соответственно по упитанности 48,2%;

51,8%. Ремонтный молодняк 2009 года рождения из учтенных 3618 голов составил: высшей - 23,6%;

средней – 75,3% и нижесредней упитанности 1,1%, сверстники баранчики 2009 года рождения соответственно 8,1%;

85,2%;

6,7%, таблица 1.

220 «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

Исследованные три племенных (базовых) хозяйств специализированные на разведении эдильбаевской породы овец, расположеные в нарынских песках между рекой Едил (Волга) и Ак Жайык (Урал).

Природно-климатические кормовые условия одинаковые, но по упитанности овец отличаются. У баранов производителей высшая упитанность колеблется от 10,3 17,1%, средняя 80,0 - 84,6%, ниже – средняя 2,9 -5,1%, тем самым бараны производители ТОО «Акжонас» с высшей упитанностью больше чем в к/х «Нурет» и ПК «Курмангазы» соответственно на 6,8 и 3,9%.

У овцематок удельный вес животных с высшей упитанностью во всех хозяйствах больше, чем у баранов – производителей (Р0,001) и молодняка (Р0,001).

Таблица 1 - Показатели упитанности половозрастной группы эдильбаевской и грубошерстной казахской курдючной пород в разрезе хозяйств Упитанность Наимен-е Половоз- Кол ниже хозяйств растная группа во высший средний средний баран 39 10,3 ± 4,87 84,6 ± 5,7 5,1± 3, производитель овцематки 1370 41,3 ± 1,33 58,7 ± 1,33 к/х «Нурет»

ярки 2009 г.р. 161 19,3 ± 3,11 77,6 ± 3,28 3,1± 1, баранчики 50 8,0 ± 3,90 86,0 ± 4,90 6,0± 3, 2009 г.р.

баран 105 17,1 ± 3,67 80,0 ± 3,90 2,9± 1, производитель овцематки 4220 45,4 ± 0,77 54,6 ± 0,70 ТОО «Акжонас» ярки 2009 г.р. 1259 22,3 ± 1,17 75,5 ± 1,21 2,2± 0, баранчики 906 10,6 ± 30,0 84,3 ± 1,20 5,1± 0, 2009 г.р.

баран 266 13,2 ± 5,70 82,7 ± 2,31 4,1± 1, производитель ПК овцематки 6455 51,4 ± 0,62 48,6 ± 0,62 «Курмангазы ярки 2009 г.р. 2198 24,7 ± 0,92 75,0 ± 0,92 0,3 ± 0, »

баранчики 1564 6,6 ± 0,62 85,7 ± 0,88 7,7 ± 0, 2009 г.р.

баран 410 13,9 ± 1,70 82,2 ± 1,88 3,9 ± 0, производитель овцематки 48,2 ± 0,45 51,8 ± 0,45 ИТОГО ярки 2009 г.р. 3618 23,6 ± 0,70 75,3 ± 0,71 1,1 ± 0, баранчики 2520 8,1 ± 0,54 85,2 ± 0,70 6,7 ± 0, 2009 г.р.

баран 246 31,7 ± 2,97 66,7 ± 3,00 1,6 ± 0, производитель овцематки 3243 56,3 ± 0,87 43,7 ± 0,87 к/х «Сералы»

ярки 2009 г.р. 1400 43,2 ± 1,32 56,3 ± 4,20 0,5 ± 0, баранчики 478 17,8 ± 1,75 80,3 ± 1,81 1,9 ± 0, 2009 г.р.

баран 76 23,7 ± 4,88 73,7 ± 5,05 2,6 ± 1, производитель ТОО «Бек»

овцематки 1870 42,5 ± 1,14 57,5 ± 1,14 ярки 2009 г.р. 774 31,8 ± 1,67 66,0 ± 1,70 2,2 ± 0, «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

баранчики 363 12,4 ± 1,72 82,9 ± 1,97 4,7 ± 1, 2009 г.р.

баран 199 25,6 ± 3,09 72,9 ± 3,15 1,5 ± 0, производитель овцематки 1480 48,1 ± 1,30 51,9 ± 1,30 к/х «Рау»

ярки 2009 г.р. 429 36,6 ± 1,25 62,2 ± 2,34 1,2 ± 0, баранчики 450 16,2 ± 1,73 81,4 ± 1,83 2,4 ± 0, 2009 г.р.

баран 521 28,2 ± 2,0 70,1 ± 2,0 1,7 ± 0, производитель овцематки 6593 50,6 ± 0,61 49,4 ± 0,61 ИТОГО ярки 2009 г.р. 2603 38,7 ± 0,95 60,2 ± 0,95 1,1 ± 0, баранчики 1291 15,7 ± 1,01 81,4 ± 1,08 2,9 ± 0, 2009 г.р.

Примечание: к/х «Нурет», ТОО «Акжонас», ПК «КУрмангазы» - порода овец – эдильбаевская;

к/х «Сералы», ТОО «Бек», к/х «Рау» - порода овец – казахская курдючная грубошерстная Наибольший удельный вес овцематок высшей упитанности установлен в ПК «Курмангазы» (51,4%) и превосходят аналог ЭДП животных ТОО «Акжонас» на 6,0% (Р0,001), к/х «Нурет» на 10,1% (Р0,001).

Ярки 2009 года рождения с высшей упитанностью занимали промежуточное положения между баранами производителями и овцематками, в пределах 19,3 – 24,7%.

Наибольший выход ярок с вышей упитанностью у животных ПК «Курмангазы» и наименьший к/х «Нурет». Баранчики 2009г.р. в зимний период имели наименьшею упитанность: с высшей 6,6 – 10,6%, со средней 84,3 – 86,0% и нижесредней 5,1 – 7,7%.

Полученные данные по упитанности в зимний период указывают на приспособленность эдильбаевской породы к холодным погодным условиям в зимний период года, что зависит от пола, возраста и генотипа.

В четвертый месяц суягности нами определено состояние упитанности казахской курдючной грубошерстной породы овец в трех хозяйствах из учтенных голов баранов-производителей имели 28,2% высшею, 70,1% среднею, 1,7% нижесреднею упитанность. Из учтенных 6593 голов овцематок 50,6% имели высшею и 49,4% среднею упитанность. Из учтенных 2603 голов ярочек 2009 года 38,7% составил высшей упитанности, 60,2% средней, 1,1% ниже средней упитанности. Среди баранчиков 2009 года рождения из ученных 1291 голов 15,7% были высшей упитанность, 81,4% среднею и 2,9 ниже среднею упитанность.

Новый генотип казахской курдючной грубошерстной породы овец разводимый в Южном Казахстане также как и эдильбаевской породы в зимний период в зависимости от пола, возраста и хозяйства имели разное состояние упитанности. Самый наибольший выход высшей упитанности в половозрастной группе имели овцематки (42,5-56,3%), затем ярки 2009 г.р. (31,8 – 43,2%). Основные бараны производители имели промежуточное положения между ярками 2009 г.р. и овцематками. Наихудшую упитанность имели баранчики 2009г.р. (15,7 – 17,8%).

Животные к/х «Сералы» по упитанности высшее, чем животные в других сравниваемых хозяйствах. В целом животные нового генотипа казахской курдючной грубошерстной породы по упитанности в зимний период высшее, в сравнении с эдильбаевской. Это объясняется теплым климатическим условиями и обеспеченностью грубыми и концентрированными кормами.

Сохранность поголовья в различных популяциях в конце зимнего периода, перед расплодной компании у эдильбаевской и казахской курдючной грубошерстной пород составил 100%.

222 «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

ГОДОВОЙ НАСТРИГ ШЕРСТИ ОВЕЦ НОВОГО ГЕНОТИПА КАЗАХСКОЙ КУРДЮЧНОЙ ГРУБОШЕРСТНОЙ ПОРОДЫ В К/Х «СЕРАЛЫ»

Б.Батырбекулы, Э.Кансейтова, Т.Кансеитов, Е.Зайтбеков, Ж.Жсупбеков Юго-Западный научно-исследовательский институт животноводства и растениеводства Овечья шерсть как экологический чистый биологический продукт необходимый материал для изготовления: ткани, сукна, кошмы, валенок, ковров и.т.д. После перехода страны на рыночное отношения как и другие отрасли промышленности все прошли кризисный период. В результате между странами СНГ сформировались границы, а фабрики остались за ее пределам. За истекший период после перестройки распались связь и сбыт ценной, экологический чистой натуральной грубой шерсти упал до минимума, а население приобретало вещи (одежда, обувь, ковры, паласы и.т.д.) приготовленные из синтетического происхождения (волокна). Последнее время потребность и интерес к шерсти возрос, правительство РК выделяет субсидии на производство тонкой, полутонкой и для переработки густой шерсти, т.е. отделения пуха от ости и переходного волоса.

Грубая поярковая весенняя и осеняя шерсть очень необходимая в промышленности для получения валяльно–войлочных изделий. Последнее время от грубой шерсти отделяют пух, которой ценится высоко на внешнем рынке, поэтому изучение настрига шерсти у овец новой популяции, которая из года в год увеличивается поголовья имеет научно-практическое значение.

Животных новой популяции казахской курдючной грубошерстной породы стригут один раз в год. Настриг шерсти изучали путем взвешивания рун во время весенней стрижки, особенность животных нового генотипа ягнят в год рождения не стригут, а стригут по достижении годовалого возраста В таблице, показаны полученные данные по настригу шерсти казахской курдючной грубошерстной породы новой создаваемой популяции животных в к/х «Сералы» Южно–Казахстанской области в зависимости от пола и возраста.

Из данной таблицы, видно, что годовой настриг шерсти у овец казахской курдючной грубошерстной породы нового генотипа у переярок после рождения годовалом возрасте настриг шерсти составил 1,53 кг, у сверстников баранов 1,71 кг.

У двухлетних первоокоток годовой настриг шерсти составил 1,27 кг, у сверстников баранов 1,91 кг;

у трехлетних - овцематок 1,14 кг, баранов 2,02 кг;

у четырехлетних - овцематок 1,19 кг, баранов 2,11 кг и у пятилетних овцематок 1,24 кг.

Настриг шерсти у годовалых баранов больше на 180 г, чем у ярок (Р0,001).

Таблица - Годовой настриг шерсти казахской курдючной грубошерстной породы овец новой популяции в к/х «Сералы» в килограммах Масса шерсти Возраст животных, годы n овцематка n баран-производитель 1 33 1,53±0,07 31 1,71±0, 2 30 1,27±0,05 20 1,91±0, 3 32 1,14±0,04 23 2,02±0, 4 30 1,19±0,05 7 2,11±0, 5 21 1,24±0,06 - В двухлетнем возрасте по настригу баранов превосходят ярок на 640 г, трехлетнем возрасте на 880г, четырехлетнем возрасте на 920г (Р0,001).

«Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

НАСЛЕДОВАНИЕ ОКРАСОК И РАСЦВЕТОК СУР В ПОТОМСТВЕ ЛИНЕЙНЫХ БАРАНОВ СУР АТЫРАУСКОЙ ПОРОДЫ Х.Базарбаев, Э.Кансейтова, Т.Кансеитов Юго-Западный научно-исследовательский институт животноводства и растениеводства Линейное разведение в смушковом овцеводстве чаще, чем в других отраслях животноводства, видоизменяется вместе с селекционным процессом в стаде.

Продолжительность существования линии как селекционной единицы зависит от ее пластичности, способности в последующих поколениях давать производителей, превосходящих предшественников по основным смушковым свойствам и в еще большей мере отвечающей повышенным или измененным требованиям отбора. Это не лишает животных линии свойства необходимой консолидации, если не всех, то ведущих его производителей, консолидации в каждом из этапов ее развития.

Линия гибкая, не способная отвечать измененным требованиям, сколь не была бы ценной на одном этапе селекции, прекращает свое существование на следующем этапе.

Новые требования селекции определяются изменением спроса на каракуль, что является решающим в судьбе линии.

По мнению Н.А.Кравченко [1], главная особенность линии – сходство входящих в нее животных, которое обусловливается их родством, направлением подбора и отбора, создающие особый, присущий каждой линии тип. Это отличие является как бы надстройкой над общим типом (стандартом) породы.

Е.А.Богданов [2] отмечал, что линии сосредотачивают в себе все лучшее, что имеется в природе, и называл их микроприродой. Автор придавал важное значение пластичности существующих линий, т.е. они, обладая достаточной изменчивостью, должны быстро преобразоваться в нужном для селекционеров направлении.

Как правило, линии формируются и поддерживаются надлежащим отбором и подбором на протяжении 3-5 поколений. Затем они разветвляют-ся, из них выделяются более совершенные, или совсем теряются, т.к. идут под кросс с более прогрессивными.

Поэтому эволюционно более прогрессивны и перспективны большие группы животных, обладающие значительным разнообразием наследственных признаков.

Общеизвестно, что при чистопородном разведении животных высшей формой племенной работы является разведение их по линиям.

В смушковом овцеводстве в основном производят шкурки черной, серой и сур окрасок. Наиболее ценной и оригинальной является окраска сур, которая является рецессивной, нежели две другие окраски. Новая курдючная атырауская порода овец смушково-мясо-сальной продуктивности имеет окраску сур бронзовой, янтарной, платиновой, антрацитовой и др.расцветок. Нами приводится наследование окрасок в потомстве линейных баранов комбинированной продуктивности, таблица 1.

Таблица 1 – Наследование окрасок в потомстве линейных баранов атырауской породы в процентах Из них по окраскам Линии Учтено Родство ягнят сур черная коричневая прочие I 1633 77,81,03 19,30,98 2,30,37 0,60, родона чальник II 1268 81,21,09 16,71,04 1,60,35 0,50, I 832 81,51,35 16,21,28 1,80,46 0,50, сыновья II 691 84,61,37 13,51,29 1,50,46 0,40, 224 «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

I 317 84,72,02 13,91,94 1,30,63 0,30, внуки II 245 88,22,06 10,21,93 1,20,69 0,40, I 237 86,52,22 12,22,12 0,90,61 0,40, пра внуки II 154 90,92,32 7,82,16 0,70,67 0,60, Линейные бараны атырауской породы достаточно высоко наследуют селекционируемую окраску сур в потомстве (77,8-9,09%) и превосходят выход других окрасок (P0,001). Родоначальник II линии по выоду родительских окрасок в потомстве превосходят показателей I линии на 4,4% (P0,05). По выходу окраски сур в потомстве баранов II линии над показателями I линии сохраняется у потомков сыновей, внуков и правнуков (P0,05). Наибольший выход окраски сур установлены в потомстве внуков II линии 90,9%. Правнуки по этому показателю превосходят своих отцов (P0,05), дедов и прадедов (P0,01).

При разведении овец сур атырауской породы оригинальная окраска сур подразделяется по расцветкам, при этом все расцветки атырауской породы по своей красоте и изящности каждая желательная.

Наследование расцветок сур в потомстве линейных баранов атырауской породы приведены в таблице 2.

Таблица 2 – Наследование расцветок сур в потомстве линейных баранов атырауской породы в процентах Из них по расцветкам Линии Учтено Родство антраци ягнят бронзовая платиновая янтарная товая I 1271 81,51,09 2,30,42 6,90,71 9,30, родона чальник II 1030 78,51,28 3,60,58 10,10,93 7,80, I 678 83,21,43 2,20,56 6,90,97 7,71, сыновья II 585 80,81,63 2,90,69 8,91,17 7,41, I 268 85,82,13 1,90,83 6,01,45 6,31, внуки II 216 82,92,56 2,81,12 8,31,88 6,01, I 205 86,82,36 1,50,85 5,91,64 5,81, пра внуки II 140 85,03,02 2,81,62 7,92,23 4,31, Данные таблицы 2 показывают, что линейные бараны сур бронзовой расцветки атырауской породы стойко передают потомству (78,5-86,8%) и превосходят удельный вес других расцветок (P0,001). Сыновья, внуки и правнуки в потомстве по удельному весу селекционируемой бронзовой расцветки превосходят своих родоначальников.

Литература 1. Кравченко Н.А. Разведение сельскохозяйственных животных, М., 1973, 486 с.

2. Богданов Е.А. Избранные труды, М., 1977, 217с.

3. Кулешов П.Н. Избранные работы, М., 1949, 216с.

4. Лобанов М.Е., Джаппаридзе Т.Т. Генетика, Л., 1969, С.633-652.

5. Кисловский Д.А. Избранные сочинения, М., 1965, 535 с.

«Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

НОВАЯ ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ КИСЛОМОЛОЧНОЙ ПРОДУКЦИИ ИЗ ВЕРБЛЮЖЬЕГО МОЛОКА Б. М. Тоханов Юго-Западный научно-исследовательский институт животноводства и растениеводства Верблюжье молоко является целебным натуральным продуктом, максимально удовлетворяющие потребности организма человека в микро-макроэлементах, витаминах группы «В» и «С». Кроме того, в верблюжьем молоке отсутствует белковый аллерген, поражающий поджелудочную железу, в сравнении с коровьим молоком.

Шубат является продуктом заквашивания верблюжьего молока, литр шубата может обеспечить суточную потребность организма человека в витаминах;

А, С, В1, В и микроэлементами: кальция, железо. Шубат обогащен биологически активными соединениями, являющиеся лечащим биологическим лекарством, а также естественным продуктом для организма человека.

В шубате больше питательных веществ, чем в кумысе и кисломолочных продуктах приготовленных из коровьего молока [1].

Калорийность шубата – 911 ккал на 1 литр, в то время калорийность кобыльего молока равна – 528 ккал, а коровьего – 660ккал.

При традиционном способе приготовления шубата выявлены БККП (колиформы) в количестве 0,01 млн. и патогенные микроорганизмы 0,20 млн. Доенные верблюдицы подвержены к заразным болезням как туберкулез, бурцулез, поэтому необходимо пастеризация верблюжьего молока, различных экспозициях времени.

В целях улучшения качества шубата проводили пастеризацию верблюжьего молока при температуре 55С продолжительностью 20, 30, минут;

при температуре 65С продолжительностью 10, 15, 20 минут;

при температуре 75С продолжительностью 3, 6, 9 минут.

После пастеризации при режимах +550С, +650С, +750С, молока по классу бактериальной обсемененности приготовленные шубат соответствовал I–II классу стерильности.

Результаты экспериментальных исследований показали, что оптимальной продолжительностью пастеризации составили при температуре +55С – 40 минут, +65С –15 минут, +75С –3 и 6 минут Приготовленные из пастерилизованного молока по выше указанных технологиях, шубат является ценным, качественным и лечебным напитком (табл.1) И.П.РК [2].

Таблица 1 – Сравнительная оценка шубата после пастеризации молока Температура пастеризации, °С Показатели 55 65 Продолжительность пастеризации, 20 30 40 10 15 20 3 6 мин Класс по бактериальной обсемененности приготовляемого I I I I I I 1 I I шубата Содержание жира, % 3,5 3,5 3,5 3,5 3,5 3,5 3,5 3,5 3, Содержание белка, % 3,3 3,3 3,3 3,3 3,3 3,3 3,3 3,3 3, Белковый коэффициент 0,94 0,94 0,94 0,94 0,94 0,94 0,94 0,94 0, 226 «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

имеются круп мелкие хлопья мелкие хлопья мелкие хлопья однородная однородная однородная однородная однородная ные хлопья имеются имеются имеются Консистенция Содержание спирта, % 1,1 0,9 0,8 1,0 0,9 0,9 0,8 0,8 0, Органолептическая оценка: Вкус 3,5 4,0 5,0 4,0 5,0 5,0 5,0 5,0 4, Цвет 4,0 5,0 5,0 4,5 5,0 5,0 5,0 5,0 5, Запах 4,0 4,0 5,0 4,5 5,0 5,0 5,0 5,0 4, Бархатистость вкусового + + + + + + + + восприятия, +/ Проведены исследования сублимирование верблюжьего шубата, интервал давления составлял 10-1-10-2мм.рт. столба, нагрев продуктов в пределах от +2С до +44С, с последующим понижением до +20С готового продукта.

В результате усовершенствования технологии продолжительность сушки шубата длилась в течение 6-часов, с остаточной влажности порошка 4%. Сухой порошок шубата, представлял собой легкую и рыхлую сыпучую массу белого аморфного цвета. Консистенция однородная, запах, вкус специфический кисломолочный. Полученный сухой порошок шубата растворяли в дистиллированной воде при температуре +45-+550С. Восстановленный шубат после 2-4 часов имел однородную консистенцию, с шубатным привкусом [3].

По результатам оценки пищевой ценности полученного порошка сухого шубата (Заключение экспертизы ЗАО Академии питании МЗХ РК по сухому порошку шубата методом криосублимации от 03.11.2009г. №2-16/479, [4]) следует, что сухие порошки шубата полученные методом вакуумной и криосублимационной сушки по своим пищевыми, энергетическими и витаминными ценностями отличаются тем, что криосублимационная сушка максимально сохраняет витаминов в: А- 0,278 мг/100г, Е – 1,043 мг/100г, С – 49,87 мг/100г, концентратов белка, жира, минеральных веществ в сухом порошке, что говорит о высоком показателе криосублимационной сушки. А вакуумной сушки сохранность витаминов А – 0,037 мг/100г, Е – 0,12 мг/100г и С – 7, мг/100г. При криосублимационной сушке сухие порошки шубата получаются за 5- часов, что в 2 – 2,5 раза быстрее, чем при вакуумной сушке, при этом сохраняются все первоначальные вкусовые свойства как показаны в таблице 2.

Таблица 2 – Пищевая оценка сухих порошков шубата Сухой Цельное Сухой порошок Обозначение НД порошок при Показатели верблюжье при на методы вакуумной молоко криосублимации испытаний сушки Массовая доля 86,55 4,2 4,62 ГОСТ 3626- влаги, % Массовая доля ГОСТ 23327- 3,23 23,3 30, белков, % РК 09-4 1- Массовая доля ГОСТ 58-67- 5,4 39,6 48, жира, % РК 09-39- И.М.Скурихин, Массовая доля 3,85 22,98 8,45 1987 ГОСТ углевода, % 3628- «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

Массовая доля И.М.Скурихин, 7,0 7,0 7, золы, % Титруемая 22 140,0 140,0 ГОСТ 3624- кислотность, Т Плотность, г/см3 1,027 - - Энергетическая СанПиН ценность, 78 561 4.01.071. 100г/ккал Индекс раство - ниже 0,1 ниже 0,1 римости, мг/% Витамина, мг/% А 0,04 0,037 7,5 0, Р № 09-34- Е 0,12 0,63 1,65 1, С 6,77 7,7 6,4 49, В АО «Химфарм» проведены пробное экспериментальное таблетирование сухого порошка шубата. Таблетки слабо растворяются в воде при t + 380С – +420С.

Органолептическая оценка таблетки показали: 5 баллов - цвет, 4,5 баллов- запах, 4, баллов – с шубатным привкусом.

Впервые нами разработанный йогурт из верблюжьего молока с наполнителями бахчевых (арбузно-дынным концентратом) и зародыша пшеницы. И.П.РК [5].

Таблица 3 – Сравнительная оценка качества йогурта из коровьего и верблюжьего молока Наименование показателей Обозначение Йогурт из коровьего Йогурт из верблюжьего Н.Д на метод молока приготовленный соотношение молока приготовленный испытания фирмой ТОО Raimbek в% в «ЮЗНИИЖиР», в % Agro РК, в % 1.Содержание белка – 4,0 1.Содержание белка – 57› 1.Р №-09-39- 2.Содержание жира – 3,5 6,28 52,6› 2.Р №-09-39- 3.Содержание углевода- 2.Содержание жира – соответствует 3.Скурихин, 11,7 5,34 СанПиН 3.Содержание углевода - 27,8› 4. 01.07. 4.Энергетическая 11, ценность в калории – 96,7 4.Энергетическая 79,7 5.Р № 09-30- 5. Содержание витамина ценность в калории – С -1,7 123,6 66,1 6. Р № 09-32- 6.Содержание витамина 5. Содержание витамина РР -0,19 С -8,7 51,4 7. Р № 09-34- 7.Содержание витамина 6.Содержание витамина Е -0,17 РР -0,57 8. Р № 09/066- 38, 8.Содержание 7.Содержание витамина микроэлемента кальция – Е -0, 80,0 8.Содержание 9. Р № 09/066- 48, 9.Содержание микроэлемента кальция микроэлемента магния – – 133, 19,4 9.Содержание 10. ГОСТ 26928 28, 10.Содержание микроэлемента магния – микроэлемента железо – 29, 1,778 10.Содержание микроэлемента железо – 1, 228 «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

По оценке результатам в ЗАО «Академии питания» РК, йогурт из верблюжьего молока по биохимическим показателям превосходит йогурт из коровьего молока по таким показателям как: белок на 57%, жир – 52%, энергетическая ценность на 27,8%;

содержание витаминов С, РР и Е - на 79,7%, 66,1% и 51,4%;

микроэлементы кальций, магний, железо - на 38,7%, 48,7%, 28,7%, что еще раз подтверждает высокую пищевую и лечебную ценность продукции из верблюжьего молока [6].

Шубат полученный из верблюжьего молока содержит антитела, которые имеет свойств природного имунномодулятора и может эффективно применятся, как поливитаминные средства при лечении самых различных болезней.

Учитывая целебные свойства молочных продуктов из верблюжьего молока, Организацией Объединенных Наций принято решение по обеспечению населения Европы, Америки, Африки и Азии целебной кисломолочной продукции из верблюжьего молока [7].

Литература 1. Сеитов З.С. Кумыс. Шубат. – Алматы, 2005. – 288с.

2. Инновационный патент РК №20925 //«Способ получения шубата» (Опубл.

16.03.2009, бюл. №3.

3. Инновационный патент РК № 20926 //«Способ получения сухого молочного порошка шубата» Опубл. 16.03.2009г. бюл. №3.

4. Результаты исследования образца сухого шубата ЗАО «Академии питания»

(Нутритест от 03.11.2009 г. № 2-16/479).

6. Инновационный патент РК №21025 // Способ производства йогурта из верблюжьего молока. Опубл. 15.07.2009, бюл.

7. Результаты исследования образцов йогурта коровьего и верблюжьего молока ЗАО «Академии питания» (Нутритест от 16.06.2008г. №2-16/285).

8. «Деловая пресса» (RU, Интернет). Источник 25.04.2006г.

ДИАГНОСТИКА ПИРОПЛАЗМОЗА СОБАК, ПУТИ СОВЕРШЕНСТВОВАНИЯ Г.С.Шабдарбаева, А.И.Балгибаева, А.С.Ибажанова Казахский национальный аграрный университет Пироплазмоз, инвазионное заболевание собак, вызываемое простейшими Piroplasma canis, к которому также восприимчивы енотовидная собака, лисица, волк, играющие важную роль в сохранении возбудителя в природе [1, 2].

Болезнь имеет большое распространение во всем мире, в том числе и в Казахстане и наносит значительный экономический ущерб служебному собаководству и частным владельцам животных [3].

Диагностика и дифференциальная диагностика пироплазмоза собак, далеко несовершенна, так как основным методом диагностики является выявление кровепаразитов в мазках периферической крови. Этот метод недостаточно точен, т.к.

кровепаразиты довольно часто бывают морфологически похожи на различные включения. Кроме того, часто отмечаются различные артефакты при приготовлении, фиксации, окраске мазков, которые также затрудняют диагностику пироплазмоза собак.

Серологические методы диагностики в ветеринарной паразитологической практике при диагностике кровепаразитозов широкого распространения не получили, в основном, из-за недостаточного количества стандартного антигена, который «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

традиционно получали из крови экспериментально зараженных животных, а также невозможности и опасности содержания при лабораториях экспериментально зараженных трансмиссивными заболеваниями животных.

В литературе мы также не обнаружили данных, касающихся использования новых методологических подходов в диагностике пироплазмидозов, данных по динамике идиотипических и антиидиотипических антител при иммунизации лабораторных животных антигенами из пироплазм собак, данных по адаптации диагностикумов, приготовленных на основе антиидиотипии для диагностики пироплазмоза собак с применением современных серологических тестов - РНГА (реакции непрямой агглютинации), ИФА (иммуноферментного анализа).

Учитывая широкое распространение пироплазмоза собак, а также отсутствие препаратов для серологической диагностики данного заболевания, считаем, что изучение данной темы, безусловно, является актуальным.

Исследования проводили в лаборатории кафедре патологии и паразитологии Казахского национального аграрного университета, в научно-производственном предприятии «Антиген» и частных ветеринарных клиниках г.Алматы В работе в качестве объектов исследований использованы возбудители кровепаразитоза собак пироплазмы собак – Piroplasma canis.

На первом этапе из крови экспериментально зараженных пироплазмозом собак готовили несколько серий корпускулярных пироплазменных антигенов по методу Н.И.

Степановой (1970) [4], которые далее использовали для иммунизации кроликов с целью наработки паразитспецифичных антисывороток.

Нами вначале были испытаны три метода иммунизации лабораторных животных, пироплазменным антигеном, предложенных H. Fey et all.(1976), А.М.

Сафроновым (1976) и Г. Фримелем (1987).

Далее в процессе работы для получения более высоких титров антител нами были применены несколько модифицикаций метода иммунизации, сущность которых заключалась в комбинированном использовании методов H. Fey et all. (1976) и Г.

Фримеля (1987), в дополнительной гипериммунизации лабораторных животных.

Гипериммунные сыворотки крови получали иммунизацией кроликов (массой не менее 2,5 кг) пироплазменным антигеном из возбудителей P.canis по модифицированной и защищенной нами охранными документами методике.

Иммунизацию кроликов проводили антигеном в дозе 1,5 мг в смеси с полным адъювантом Фрейнда (ПАФ) в соотношении 1:1 в подушечки четырех лапок по 0,25 см в каждую. Через 21 день кроликов реиммунизировали той же дозой антигена с ПАФ в бедренные мышцы обеих лапок по 0,5 см3 смеси в каждую.

Начиная с 7-го дня после второй иммунизации вели ежедневный контроль за титром преципитирующих антител реакцией количественной преципитации (РКП) или иммуноферментным анализом (ИФА). При достижении титра преципитирующих антител не ниже 1 мг/ см3 в РКП или 1:25000 в ИФА от кроликов брали кровь из краевой ушной вены спирт-ксилольным методом по 40 мл трехкратно, с интервалом в 72 ч. При низких титрах (менее 1 мг/мл в РКП и ниже 1:25000 в ИФА) антител проводили дополнительную иммунизацию. Через 15 дней после реиммунизации проводили цикл внутривенных инъекций. Антиген в дозе 1,5 мг на кролика вводили двукратно с интервалом в 24 часа в центральную ушную вену. Во избежании аллергической реакции за 2 часа до внутривенного введения кроликов сенсибилизировали малыми дозами антигена (25 мкг). Контроль за титром антител осуществляли в РКП или в ИФА. Собирали сыворотки отдельно от каждого иммунизированного кролика. Затем из гипериммунной сыворотки крови путем высаливания сульфатом аммония (50 %) выделяли гамма-глобулиновую фракцию по общепринятой методике. Выделенный гамма-глобулин растворяли в минимальном количестве дистиллированной воды и обессоливали на колонке с сефадексом G-50 или 230 «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

диализом против проточной воды (12 часов), дистиллированной воды (24 часа) и физиологического раствора (24 часа).

После обессоливания гамма-глобулин концентрировали в диализных трубках на полиэтиленгликоле (ПЭГ) –600 до содержания белка 10 мг/см3.

Получение антигена из пироплазмид, антипироплазменной сыворотки, антипироплазменного гамма-глобулина и пироплазменного диагностикума осу (Предварительные патенты №№ 17196;

17203;

17204;

17722) [5, 6, 7, 8].

Подвергнуто обследованию – 1310 собак различных пород. Использованы в опытах кролики в количестве 90, собаки в количестве 129 голов.

Мы в своих исследованиях отработали некоторые параметры приготовления корпускулярных и растворимых антигенов из крови спонтанно и экспериментально зараженных животных на такой паразитологической модели, как пироплазмоз собак по следующей схеме: 1) получение штамма возбудителя, 2) экспериментальное заражение собак, 3) спленэктомия, 4) тотальный забор крови, 5) отмывание эритроцитов, 6) разхрушение эритроцитов, 7) получение и консервирование паразитарной массы.

При приготовлении корпускулярных антигенов мы вначале брали у животных в зависимости от их живой массы по 50-100 см3 крови, из которой готовили по методу Н.И. Степановой, (1970) так называемый «нормальный антиген», который использовали для извлечения аллотипов и изотипов и для контроля степени сорбции антиидиотипических антител.

Затем проводили заражение этих животных, путем введения внутримышечно инвазированной кровепаразитами крови с трилоном-Б, в дозе 10 см3. Следили за паразитемией микроскопическим методом. Убедившись в заражении животного и учитывая, что количество паразитарной массы определяет количество и качество получаемого антигена, применяли различные методы, способствующие усилению паразитемии у зараженных животных. Сравнительная оценка различных методов усиления паразитемии приведена в таблице 1.

Таблица 1 – Результаты экспериментального заражения собак пироплазмозом (n=9, M±m, P0,05) Вид простое Заражение + Заражение + Заражение + заражения заражение спленэктомия спленэктомия + спленэктомия + циклофосфан гидрокортизон Процент 19,4±3,04 60,8±4,01 71,8±4,7 66,1±4, паразитемии Как видно из таблицы 1 видно, наибольшая паразитемия достигалась при экспериментальном заражении в сочетании со спленэктомией и применением иммунодепрессанта циклофосфана, где процент паразитемии в группе составил 71,8%.

После применения различных способов увеличения паразитарной массы нами на высоте паразитемии зараженные животные были тотально обескровлены и из инвазионной крови были приготовлены корпускулярные антигены, основными этапами которой являются высвобождение из эритроцитов паразитов и последующее высокоскоростное центрифугирование для концентрации возбудителя и освобождения его от балластных белков.

Иммунизацию лабораторных животных проводили по трем схемам: 1) по модифицированной нами методике Fey et al. (1976) с использованием полного адъюванта Фрейнда (ПАФ), комбинируя введение антигена в подушечки лап кроликов с внутримышечным введением;

2) по методу Г. Фримеля (1987) сочетанием внутримышечных и внутривенных инъекций антигенов;

3) по методу А.М. Сафронова (1976) внутривенным введением антигенов в два этапа с предварительной «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

сенсибилизацией организма путем введения малых доз белка. Результаты проведенных опытов приведены в таблице 2.

Таблица 2 - Динамика антител – идиотипов к P.canis при различных схемах иммунизации лабораторных животных Титр антител – идиотипов на день иммунизации, мкг/мл Схема иммунизации 3 6 9 12 15 18 21 24 27 Fey et al 65 109 278 282 210 198 121 92 63 Г.Фримеля 45 62 262 213 201 154 66 44 38 Сафронова 51 67 80 133 140 88 72 66 36 Из таблицы 2 видно, что при иммунизации лабораторных животных антигеном из P.canis по модифицированной нами методике Fey et al. получен наивысший титр антител, который мы далее использовали для иммунизации лабораторных животных.

Следующим этапом наших исследований было выделение идиотипических антител из гипериммунных сывороток и их максимальная очистка от балластных веществ, аллотипов и изотипов.

Схема технологического процесса получения противопаразитарных антисывороток и сухой гамма-глобулиновой фракции к пироплазменному антигену выглядит следующим образом: 1) получение корпускулярного пироплазменного антигена из крови собак, зараженных пироплазмами, 2) иммунизация лабораторных животных корпускулярным антигеном из пироплазм, 3) получение гипериммунных сывороток крови к пироплазменному антигену, 4) выделение гамма-глобулиновой фракции из гипериммунной сыворотки крови, ее концентрация, 5) составление серии гамма-глобулина, расфасовка и этикетирование ампул, их фасовка.

Гипериммунные сыворотки крови получали иммунизацией кроликов (массой не менее 2,5 кг) пироплазменным антигеном по модифицированной нами методике Fey et al. Из гипериммунной сыворотки крови путем высаливания сульфатом аммония (50 %) выделяли гамма-глобулиновую фракцию по общепринятой методике.

По своей специфичности антиидиотипические антитела являются «зеркальным отражением» специфичности соответствующих антител, поэтому антиидиотипические антитела могут служить имитатором определенной антигенной детерминанты.

Поэтому, исходя из этого, мы при разработке методов получения антиидиотипических антител против P.canis, применяли два методологических подхода: иммунизацию лабораторных животных по модифицированному нами методу Fey et al. с использованием разных адъювантов – полного адъюванта Фрейнда (ПАФ) и гидроокиси алюминия (ГА).

Результаты проведенных опытов по изучению динамики антиидиотипических антител против пироплазм собак приведены в таблице Таблица 3 - Динамика антиидиотипических антител к P.canis Титр антиидиотипических антител на день иммунизации, мкг/мл Схема иммунизации 3 6 9 12 15 18 21 24 27 с ПАФ 12 84 480 512 524 360 282 127 98 с ГА 19 93 380 400 440 346 121 106 76 232 «Инновационное развитие и востребованность науки в современном Казахстане»

Анализируя результаты исследований по изучению динамики антиидиотипических антител, можно отметить, что схема иммунизации к возбудителю пироплазмоза собак по модифицированному нами методу Fey et al., дает наивысшие титры антител.

Полученные нами антиидиотипические антитела к пироплазмам собак были с положительными результатами испытаны в качестве диагностикумов в серологических реакциях: РСК, РНГА и ИФА с заведомо отрицательными сыворотками, полученными от щенят текущего года рождения и заведомо положительными сыворотками, полученными от экспериментально зараженных пироплазмозом животных.

Так, в РНГА антиидиотипический пироплазменный диагностикум к Piroplasma canis давал положительную реакцию в четыре креста при разведении специфических сывороток до 1:160, на два креста в разведении 1:320, а пироплазменные антиидиотипические антитела к P.bigeminum во всех разведениях с диагностикумом из антиидиотипических антител к Piroplasma canis давали отрицательный результат.

Корпускулярный антиген из P. Canis давал положительную реакцию в четыре креста до разведения 1:80;

и на два креста до разведения 1:160.

При постановке твердофазного метода ИФА, что пироплазменные антиидиотипические антитела к Piroplasma canis давали положительный результат на четыре креста при разведении 1:320, на два креста в разведении от 1:640 до 1:1280, антиидиотипические антитела против пироплазм крупного рогатого скота давали отрицательную реакцию при всех разведениях.Корпускулярный антиген, приготовленный из Piroplasma canis (1:200) давал реакцию на четыре креста в разведении 1:640, на два креста в разведении 1:1280, что свидетельствовало о незначительном превышении его активности в сравнении с антиидиотипическими антителами к Piroplasma canis. Контрольные, т.е. отрицательные сыворотки, во всех исследованиях давали отрицательные результаты.

Таким образом, из проведенных исследований видно, что антиидиотипические антитела к Piroplasma canis достаточно информативны, специфичны, и их вполне можно использовать в качестве диагностикумов в таких современных серологических тестах, как РНГА и ИФА для диагностики пироплазмоза собак.



Pages:     | 1 |   ...   | 6 | 7 || 9 | 10 |   ...   | 12 |
 



 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.