авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:     | 1 |   ...   | 4 | 5 || 7 | 8 |   ...   | 13 |

«Проведение школы-конференции осуществлено при поддержке Российского фонда фундаментальных исследований Мирошников А.И., Председатель оргкомитета.Председатель ПНЦ РАН, ...»

-- [ Страница 6 ] --

В экспериментах использовали самцов белых беспородных мышей линии SHK. Для индукции АО с помощью ИКС и рентгеновского излучения использовали стандартную схему радиационного АО (0,1 Гр + через 24 ч 1,5 Гр). Уровень цитогенетических повреждений оценивали с помощью микроядерного теста, массу тимуса - по отношению среднего абсолютного веса органа к среднему живому весу животного в группе. Выживаемость мышей после облучения в дозе Гр рентгеновского излучения оценивали по стандартной методике.

В результате проведенных экспериментов было обнаружено, что: 1) предоблучение F0 мышей ИКС и рентгеновским излучением в дозе 0,1 Гр вызывало уменьшение цитогенетических повреждений в клетках костного мозга и восстановление массы тимусов после дополнительного облучения обеих групп в дозе 1,5 Гр по сравнению с группой мышей, облученных только 1,5 Гр, т.е в обоих кроветворных органах наблюдался АО, при этом на выживаемость мышей оба вида излучения не влияли;

2) в F1 поколении, полученном от самцов, облученных ИКС и дозой 0,1 Гр рентгеновского излучения, наблюдалось снижение радиочувствительности и отсутствие АО в клетках костного мозга и не наблюдалось восстановление массы тимусов по сравнению с F1 поколением от необлученных родителей, при этом, как и в F0, в F1 поколении оба излучения не влияли на выживаемость мышей;

3) полученные данные могут свидетельствовать о едином механизме влияния ИКС и рентгеновского излучения на мышей F0 и F1 поколения. Представленные данные имеют важное значение для понимания процессов, участвующих в индукции адаптационного состояния организма и передачи трансгенерационной геномной нестабильности, в условиях in vivo.

ВЛИЯНИЕ ПАРЕНТЕРАЛЬНОГО ПРИМЕНЕНИЯ ОЗОНИРОВАННОГО ФИЗИОЛОГИЧЕСКОГО РАСТВОРА НА ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ГОЛОВНОГО МОЗГА КРЫС Евдокимова О.С., Миронов А.А.

Нижегородская государственная медицинская академия, Нижний Новгород (Россия).

E-mail: evdokimova_os@mail.ru Центральная регуляция функций различных органов и систем организма является актуальной проблемой современной нейробиологии. В этом процессе исключительная роль отводится функциональному состоянию головного мозга как высшего интегративного органа управления. В биологических системах разработаны и успешно применяются методы окислительной терапии, обладающие комплексным воздействием на организм. Целью данной работы ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА явилось изучение влияния озонированного физиологического раствора (ОФР) на динамику поведения и структуру головного мозга крыс.





Введение ОФР с концентрацией озона в физиологическом растворе 0,7;

1,7 и 2,5 мкг/мл осуществляли внутрибрюшинно однократно и в течении 12 суток через сутки в количестве 1 мл. Исследования показали, что введение ОФР с концентрацией озона 0,7мкг/мл не изменяет двигательную и ориентировочно исследовательскую активность животных. Однако, оказывает влияние на сохранение и воспроизведение долговременной памяти и, как следствие, на сформированную стратегию поиска цели в водном лабиринте Морриса. Введение ОФР с концентрацией озона 1,7 мкг/мл - выявило тенденцию к увеличению двигательной и ориентировочно-исследовательской активности животных и не повлияло на сохранение долговременной памяти у крыс. Введение ОФР с концентрацией озона 2,5 мкг/мл оказывало угнетающее действие на показатели ориетировочно-исследовательской и двигательной активности крыс и выявило нарушение ответных реакций животных на новизну обстановки. Изменение структуры неокортекса наиболее выражены через 14 суток после применения ОФР. К 60 суткам структура коры головного мозга не отличалась от исходной после введения ОФР с низкими концентрациями озона, тогда как при применении высокой концентрации озона сохранялся умеренно выраженный отек.

ЛАЗЕРНАЯ ГИПЕРТЕРМИЯ ОПУХОЛЕЙ С ЗОЛОТЫМИ НАНОЧАСТИЦАМИ В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТА Елагин В.В.1, Сироткина М.А.1,2, Ширманова М.В.1, Агрба П.Д.2,3, Надточенко В.А.4, Загайнова Е.В. Нижегородская государственная медицинская академия, Нижний Новгород (Россия), Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород (Россия), Институт прикладной физики РАН, Нижний Новгород (Россия).

Институт химической физики РАН, Москва (Россия).

E-mail: elagin.vadim@gmail.com Существующие на сегодняшний день виды терапии опухоли имеют слишком высокий риск возникновения тяжелых осложнений и не обладают достаточной прицельностью. В связи с этим целью нашей работы явилась оценка эффективности проведения лазерной гипертермии опухоли с использованием золотых наночастиц. Исследование выполнено на 16 самках мышей линии CBA с перевитым раком шейки матки. Животным в опытной группе внутривенно вводили 0,2 мл золотых наночастиц. Частицы имели форму бипирамид размером 200 нм и пик плазмонного резонанса на 810 нм. Лазерное воздействие проводили в момент максимального накопления наночастиц в опухоли. Это время было определено методом оптической когерентной томографии и составляло 4 часа после введения. Животным контрольной группы вводили физиологический раствор. Для нагрева биоткани до температуры 44-45°С использовали лазер с длиной волны 810 нм. Контроль температуры осуществляли с помощью ИК термографа. В случае лазерной гипертермии с наночастицами необходимая температура опухоли достигалась за 3-4 мин при мощности лазера 1,2 Вт. Затем мощность уменьшали до 1 Вт, что позволяло поддерживать постоянную температуру в опухоли на протяжении 20 мин сеанса. Опухоль, не содержащая наночастиц, нагревалась до 44С при мощности 1,2 Вт за 10 мин. На 5-6-е сутки после воздействия наблюдалось снижение объема опухоли у животных в опытной группе. В дальнейшем наблюдался рост опухолевого узла за счет разрастания опухолевой ткани по периферии, которая находилась вне зоны ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА воздействия.





ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЕ НЕЙРОПЕПТИДА NPF НА МИТОТИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ КЛЕТОК В ТКАНЯХ РЕГЕНЕРИРУЮЩИХ ПЛАНАРИЙ Ермаков А.М.1, Крещенко Н.Д. Учреждение Российской академии наук Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино (Россия), Учреждение Российской академии наук Институт биофизики клетки РАН, Пущино (Россия).

E-mail: nkreshch@rambler.ru В суспензии клеток из тканей постбластемной (ПБ), окологлоточной (ОГ) и хвостовой (ХВ) областей тела планарий Girardia tigrina, определяли митотический индекс (MИ) и соотношение разных фаз митоза, в процентах к общему числу митозов. Предварительные данные показали, что через 24 ч после отсечения головного конца, у планарий, регенерирующих под воздействием нейропептида NPF (10-6 M), увеличивалось число пролиферирующих клеток: так, значение MИ в ПБ области возрастало в 1,3 раза, в ОГ области - в 1,6 раза и в ХВ области - в 1,4 раза, по сравнению с контрольной группой. Сходные изменения вызывал NPF в концентрации 10-7 М. Колхицин для накопления митозов не применялся. В ПБ области подопытных планарий в стадии профазы находилось 36,8% клеток, в стадии метафазы - 39,5%, в анафазе - 21,1% и телофазе - 2,6% клеток.

Интересно, что соотношение между фазами митоза существенно не отличалось от показателей в контрольной группе планарий. Минимальный прирост числа митозов в ПБ области подопытных животных можно объяснить постоянным расходованием клеток на нужды регенерационного процесса - построения регенерационной бластемы и дифференцировки недостающих тканей и органов.

Разница между увеличением числа митозов в ОГ и ХВ с одной стороны и ПБ с другой, позволяет предположить, что в ПБ области подопытных планарий к 24 ч регенерации около 20-33% этих поделившихся клеток приступили к процессу формирования бластемы и дифференцировке. Наблюдаемое увеличение MИ в тканях планарий под действием нейропептида NPF вероятно происходит за счет вовлечения дополнительного числа клеток в пролиферативный процесс, а именно стимулирования “спящих” необластов, находящихся в G2 фазе клеточного цикла. Поддержано грантом РФФИ № 09-04-00243a.

АНТИОКСИДАНТНЫЙ ЭФФЕКТ ПРИРОДНОГО ПОЛИМЕРА ХИТОЗАНА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ЛУЧЕВОЙ БОЛЕЗНИ Ешкова О.Ю., Саломатина Е.В., Таламанова М.Н.

Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород (Россия).

Е-mail: oksana2027@mail.ru При решении проблемы поиска эффективных антиоксидантов следует уделить внимание природным полимерам, к которым относится хитозан. Целью данной работы было исследование антиоксидантного действия хитозана с молекулярной массой 4 кДа при однократном действии гамма-облучения.

Терапевтическое введение хитозана (1 мл на животное перорально с помощью зонда периодичностью 1 раз в сутки) проводили в течение 7 суток, начиная лечение через 2 часа после общего однократного гамма-облучения животных в дозе 3 Гр (костномозговая форма лучевой болезни легкой степени тяжести). На 3, 14 и 28 сутки после окончания терапии в плазме крови животных определяли содержание продуктов ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА ПОЛ - триеновых конъюгатов (ТК) и оснований Шиффа (ОШ).

Установлено, что на 3 сутки статистически значимых изменений уровня ТК и ОШ у животных контрольной и опытной групп не наблюдалось. На 14 сутки выявлено снижение ТК и ОШ в опытной группе (p0,05) относительно контрольных животных, сохранившееся в следующие две недели, что свидетельствует о снижении интенсивности процессов пероксидации и как следствие антиоксидантом эффекте низкомолекулярного хитозана. Полученные данные свидетельствуют о длительном антиоксидантном эффекте хитозана при его пероральном введении в условиях экспериментальной лучевой болезни.

МОДУЛИРОВАНИЕ ЭКСТРАКТОМ СЛЮННЫХ ЖЕЛЕЗ IXODES PER SULCATUS МИТОГЕНИНДУЦИРОВАННОЙ АКТИВАЦИИ ЛИМФОЦИТОВ ИНТАКТНЫХ МЫШЕЙ ЛИНИИ BALB/c В СИСТЕМЕ IN VITRO Зырина Е.В., Фирстова В.В., Бикетов С.Ф.

Государственный научный центр прикладной микробиологии Федеральной службы Роспотребнадзора, Оболенск (Россия).

E-mail: zyrina_ev@mail.ru Модулирование иммунного ответа хозяина компонентами слюнных желез иксодовых клещей способствует длительному питанию паразита и передаче ряда возбудителей инфекционных заболеваний. Активация Т- и В-лимфоцитов является важным этапом в иммунном ответе на патогены. При активации этих клеток на их поверхности экспрессируется маркер CD69.

Цель работы - исследование модуляции экстрактом слюнных желез Ixodes persulcatus митогениндуцированной активации лимфоцитов интактных мышей линии BALB/c в системе in vitro.

Лимфоциты селезенки мышей линии BALb/c (2х106 кл./мл) инкубировали 48 ч при 37°С, во влажной атмосфере 5% CO2 с индукторами активации ConA/LPS в присутствии или без экстракта слюнных желез голодных и 3-х дневно кормленных I. persulcatus (50;

5 и 1 мкг/мл белка). После инкубирования клетки метили одномоментно моноклональными антителами к CD3, CD4, CD8, CD69, CD19 поверхностным рецепторам лимфоцитов. Анализ проводили на цитофлюориметре FACSCalibur в программе “Cell Quest”.

Выявлено уменьшение CD69-позитивных митогенактивированных Т- и В лимфоцитов под влиянием экстракта слюнных желез Ixodes persulcatus, которое носило дозозависимый характер. Наиболее выраженное снижение митоген индуцированной активации Т- и В-лимофцитов (CD3+CD4+CD69+ - 41,84%;

CD3+CD8+CD69+ - 51,11%;

CD19+CD69+ - 14,87%) наблюдали под влиянием экстракта слюнных желез (50 мкг/мл), выделенных из кормленных в течение 3-х дней I. persulcatus (CD3+CD4+CD69+ - 28,66%;

CD3+CD8+CD69+ - 31,64%;

CD19+CD69+ - 7,82%). Полученные результаты свидетельствуют о наличии иммуносупрессирующей активности компонентов слюны клещей. Ингибирование активации Т- и В-лимфоцитов под влиянием экстракта слюнных желез Ixodes persulcatus может способствовать проникновению патогенов в организм человека.

ГЕНОПРОТЕКТОРНЫЕ И РАДИОПРОТЕКТОРНЫЕ СВОЙСТВА МОЛЕКУЛЫ ГИДРАТИРОВАННОГО ФУЛЛЕРЕНА Иванов В.Е.1,2, Гудков С.В.1, Учреждение Российской академии наук Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино (Россия), ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород (Россия).

Пущинский государственный университет, Пущино (Россия).

E-mail: iwe88@rambler.ru В работе использовались водные растворы фуллерена С60, в которых единичные молекулы С60 находятся в виде донорно-акцепторных комплексов с молекулами воды. В качестве ключевого маркера окислительных повреждений ДНК использовали 8-оксогуанин (8-ОГ). Методом иммуноферментного анализа с использованием моноклональных антител к 8-оксогуанину in vitro определяли содержание 8-ОГ в ДНК. Показано, что фуллерены в концентрации 1- мкмоль/л, значительно уменьшали количество 8-ОГ, образующегося в ДНК при воздействии рентгеновского излучения. Исследование радиопротекторных свойств фуллерена in vivo проводили на самцах мышей (Kv:SHK). Наиболее значимый радиопротекторный эффект фуллерена наблюдается при его внутрибрюшинном введении в дозе 10 мг/кг за 1 час до воздействия ионизирующей радиации, причем на 30-й день после облучения выживало 15% животных. Кроме повышения уровня выживаемости облученных животных, фуллерен препятствовал снижению массы тела мышей, предотвращал образование гематом, вздутий и непроходимости в тонком кишечнике, кровоизлияний в легких и перикардии. Будут представлены данные о влиянии фуллерена на образования микроядер в полихроматофильных эритроцитах костного мозга тотально облученных рентгеновскими лучами мышей.

Работа поддержана грантом Президента Российской Федерации МК 108.2010.4.

ИНТЕГРАЛЬНАЯ ОЦЕНКА СТЕПЕНИ МОРФОЛОГИЧЕСКОЙ ДЕСТРУКЦИИ ПЕЧЕНИ ПРИ ГИПОКСИИ Иванская Н.Н.

Ульяновский государственный технический университет, Ульяновск (Россия).

E-mail: nivanskaya@yandex.ru Одной из причин гипоксии циркуляторного типа является острая кровопотеря. При недостатке кислорода возникает состояние энергетического дефицита, приводящее к разнообразным функциональным и морфологическим изменениям, направленным на формирование повышенной резистентности организма к гипоксическому воздействию.

Цель работы - изучить зависимость гистологических изменений печени от степени гипоксического воздействия.

Исследования проводили на крысах-самцах. Острую циркуляторную гипоксию вызывали по Sapirstein (1960) кровопотерей объемами 1,5% и 0,75% от массы тела животного. Сроки с момента кровопотери до декапитации составили 3, 7 и 24 часа. Интегральную оценку степени морфологической деструкции печени проводили по методу В.А. Журавлева с соавт. (А.В. Муратов, 2001).

Микропрепараты окрашивали гематоксилином и эозином и рассматривали в световой микроскоп при увеличении 7х40. с использованием окулярной измерительной сетки. На срезе учитывали количество точек окулярной сетки, случайно совпадающих с изучаемыми структурами. Общая учтенная площадь препарата соответствовала 100 точкам.

Установлено, что после воздействия через 3 часа степень повреждения печени средняя при обоих объемах кровопотери. Через 7 часов она остается средней при большем (1,5%) объеме потери крови, а при меньшем (0,75%) становится легкой. Через 24 часа после кровопотери степень повреждения становится легкой при большем объеме (1,5%) кровопотери, а при меньшем ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА объеме (0,75%) ткань печени восстанавливается до нормы.

Таким образом, выраженность морфологических изменений печени минимальна через 24 часа после кровопотери объемом 0,75% от массы тела крысы.

ИЗМЕНЕНИЕ АСТРОЦИТАРНОЙ СА2+ АКТИВНОСТИ В ПЕРЕЖИВАЮЩИХ СРЕЗАХ ГИППОКАМПА КРЫС ПОД ДЕЙСТВИЕМ РАЗНЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ ГЛУТАМАТА Калинцева Я.И.1, Потанина А.В.1, Пимашкин А.С.1, Семьянов А.В.1, Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород (Россия), RIKEN Brain Science Institute, Wako-shi (Japan).

E-mail: yasya13@mail.ru Астроциты - это электрически невозбудимые клетки, которые способны генерировать Са2+ сигналы, которые, в свою очередь, могут регулировать локальный кровоток. Глутамат рассматривается как один из основных передатчиков в нейрон-астроцитарных взаимодействиях.

В работе проводились исследования Са+ сигналов в астроцитах, индуцированных различными концентрациями экзогенного глутамата.

Эксперименты проводились на переживающих срезах гиппокампа крыс. Уровень Са+ в астроцитах оценивался по уровню флуоресценции Oregon Green BAPTA 1. В работе был использован лазерный сканирующий микроскоп Carl Zeiss LSM 510 Duoscan. В данной работе было показано, что при добавлении небольших концентраций глутамата (0,7 и 1 мкмоль) в астроцитах повышается частота Са+ событий, а при добавлении 10 мкмоль глутамата значительно повышается базовый Са+ уровень. Также при добавлении глутамата увеличивалось количество активных астроцитов в срезе. Амплитуда и длительность кальциевых сигналов не изменялись. Полученные данные демонстрируют связь между внеклеточной концентрацией глутамата и активностью астроцитов. Мы предполагаем, что эта зависимость является механизмом усиления внутримозгового кровообращения при повышении активности мозга.

Работа поддержана РФФИ (08-02-00724, 08-04-97109, 09-04-01432, 09-04 12254-офи_м), программой МКБ Президиума РАН, грантом Роснауки 2.1.1/ Аналитическая ведомственная целевая программа “Развитие научного потенциала высшей школы” (2009-2010 гг.).

ИССЛЕДОВАНИЕ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНОВ СИСТЕМЫ СВЕРТЫВАНИЯ КРОВИ И ФИБРИНОЛИЗА У “УСЛОВНО ЗДОРОВЫХ” БЕРЕМЕННЫХ ЖЕНЩИН Канаева М.Д.1, Вашукова Е.С.1,2, Глотов А.С.1, Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург (Россия), НИИ акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта СЗО РАМН, Санкт-Петербург (Россия).

E-mail: Smile9@list.ru Исследование полиморфизма генов системы гемостаза у беременных женщин является одним из интенсивно развивающихся направлений в современном акушерстве и гинекологии. Однако, несмотря на многочисленные исследования, до сих пор нет четкого представления о характере распределения полиморфизма генов системы гемостаза у “условно здоровых” беременных женщин. В настоящей работе с помощью “Фибр-биочипа” были ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА проанализированы 106 образцов ДНК “условно здоровых” беременных женщин Северо-Западного региона России. Был проведен комплексный анализ распределения частот генотипов и аллелей генов F5 1691GA, F2 20210GA, PAI1 -675 5G/4G, FGB 455GA, GP3a 1565ТС и MTHFR 677CТ. Распределение генотипов по всем исследованным генам соответствовало распределению Харди-Вайнберга. При сравнительном анализе частот генотипов и аллелей этих генов нами не были выявлены статистически значимые отличия между группой “условно здоровых” беременных женщин и группой жителей Северо-Западного региона России. Стоит отметить, что в основной группе в 96% случаев был выявлен полиморфизм хотя бы по одному из генов, в 46,2% полиморфизм по двум генам, в 22,6% - по трем генам и в 2,8% - по четырем генам. В 47% случаев нами был выявлен полиморфизм хотя бы по одному из наиболее значимых генов в развитии акушерских патологий (F5, F2 и MTHFR), их сочетания были обнаружены в 3,8%. Полученные результаты указывают на различную роль исследуемых генетических дефектов в развитии акушерских патологий и могут быть использованы для проведения дальнейших исследований, направленных на выявление их значимости в патогенезе осложнений беременности.

Работа выполнена при поддержке гранта Министерства образования и науки Российской Федерации (№ P2387).

ВЛИЯНИЕ ОКСИДА АЗОТА НА ПОКАЗАТЕЛИ СИСТЕМЫ КРОВИ БЕЛЫХ КРЫС Канунникова Е.В., Кислякова Е.М., Борченко Р.В.

Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева, Саранск (Россия).

E-mail: melissa128@mail.ru В последнее время усилилось отрицательное влияние нитратов и нитритов на здоровье человека и животных. Они способны оказывать свое действие на всех структурно-функциональных уровнях: от целого организма до отдельных молекул. Целью исследования явилось изучение функционального состояния эритроцитарной системы белых крыс при нитритной интоксикации.

Объектом исследования служили белые беспородные крысы (самки) массой 130-250 г. Животные были разделены на 2 группы: контрольная (внутрибрюшинное введение физ. раствора), опытная (введение нитрита натрия (НН) в дозе 5 мг/100 г веса животного). Анализ показателей проводили на 1-е, 3-е и 7-е сутки.

На 1-е сутки после введения НН отмечается снижение: содержания эритроцитов (СЭ) на 33%, уровня гемоглобина (Hb) - на 29%, антиоксидантной активности (АОА) эритроцитов - на 64% по отношению к контролю;

СОЭ увеличивается в 2,6 раза, ПОЛ эритроцитов - на 58% по отношению контрольной группе. На 3-и и 7-е сутки отмечается динамика роста СЭ, Hb, АОА, а также снижение СОЭ, ПОЛ, однако, их значения не достигают контрольного уровня.

Таким образом, интоксикация НН вызывает изменения в системе крови, характеризующиеся дисбалансом про-/антиоксидантных систем, метгемоглобинемией, гемолитической анемией, которая сопровождается выраженным внутрисосудистым гемолизом, обеспечивающим связывание нитрит-ионов и имеющим компенсаторно-приспособительное значение.

ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА ДИНАМИКА ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЙ МЯГКИХ ТКАНЕЙ ПОЛОСТИ РТА В ХОДЕ ФРАКЦИОННОГО ЛАЗЕРНОГО ФОТОТЕРМОЛИЗА В ЭКСПЕРИМЕНТАХ НА ЖИВОТНЫХ Карабут М.М., Киселева Е.Б., Фомина Ю.В., Мураев А.А., Гладкова Н.Д.

Нижегородская государственная медицинская академия, Нижний Новгород (Россия).

E-mail: maria.karabut@gmail.com Метод фракционного лазерного фототермолиза (нанесение матрицы из микроскопических тепловых лазерных ранок, окруженных неповрежденной тканью) способен увеличивать регенеративную способность биоткани. Учитывая опыт применения фракционного метода в практической косметологии, предполагается получить аналогичную восстановительную реакцию мягких тканей полости рта. Использовался диодный лазер на длине волны 980 нм, генерирующий излучение мощностью 18 Вт с продолжительностью единичного импульса 150 и 250 мс. Каждая колонка создавалась при контакте сапфирового наконечника диаметром 400 мкм с тканью. Эксперименты проводились на новозеландских кроликах. Лазерные колонки наносились рядами (по 2-3 колонки) на слизистую верхней и нижней челюсти в области резцов. Биопсийный материал, взятый из области колонок на 1-38 день, окрашивался гематоксилин эозином, по Ван-гизону, на лактатдегидрогеназу и пикросириусом красным.

Гистологические исследования зоны лазерного повреждения при режиме 150 мс показали, что сразу после повреждения в зоне колонки обнаруживаются деструкция эпителия, полная дезактивация ферментов и признаки слабой (или умеренной) коагуляции коллагена, в то время как полной дезорганизации коллагена не происходит. К 30 дню структура ткани полностью восстанавливается, при этом в эпителии устойчиво обнаруживается признаки паракератоза. Гистологические исследования зоны лазерного повреждения при режиме 250 мс показали, что принципиально сроки его заживления те же, что и при 150 мс, однако степень повреждения ткани и выраженность признаков заживления при режиме 250 мс выражены более значительно. Кроме того, заживление эпителия при режиме 250 мс характеризуется устойчивым развитием не только паракератоза, но и акантоза, что позволяет считать этот режим излучения менее оптимальным.

ИЗУЧЕНИЕ ДЕЙСТВИЯ НЕКОТОРЫХ АНТИГИПОКСАНТОВ НА ЛИПИДНЫЙ ОБМЕН В ТКАНЯХ ТИМУСА КРЫС ПРИ СТРЕССЕ Каримова Г.М., Абдуллаев Г.Р., Халиков Ж.Р., Алматов К.Т.

Национальный университет Узбекистана им. М. Улугбека, Ташкент (Узбекистан).

E-mail: karimova-gulya@mail.ru Известно, что некоторые антигипоксанты, в частности катацин и бензонал, ингибируют потребление кислорода в организме и подавляют скорость переноса электронов от субстратов окисления по дыхательной цепи митохондрий до молекулярного кислорода, что переводит метаболизм в тканях на более экономный режим расходования кислорода. Бензонал и катацин обладают ярко выраженным антигипоксическим эффектом при гипоксических состояниях организма различного генеза.

В связи с вышеизложенным большой интерес представляет изучение влияния катацина и бензонала на обмен веществ и энергии, в частности на обмен липидов разных органов и тканей при хроническом стрессе. Такого рода исследования представляются весьма интересными с точки зрения коррекции мембранных нарушений при различных воздействиях, в том числе при стрессе.

ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА Полученные в ходе эксперимента данные указывают на то, что антигипоксанты замедляют процесс образования липидов в тканях тимуса. Так, в отсутствии антигипоксантов содержание холестерина, свободных жирных кислот повышается соответственно на 114,8 и 94,2% от уровня нормы, а при наличии катацина содержание холестерина и свободных жирных кислот повышается всего лишь на 23,6 и 29,8%, бензонала - на 25,8 и 25,5%.

В стадии истощения (2 месяца стресса) в тканях тимуса без воздействия антигипоксантов содержание общих липидов и фосфолипидов уменьшается, а их наличие способствует восстановлению и приближению этих показателей к значениям нормы.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что катацин и бензонал почти полностью снимают отрицательный эффект хронического эмоционального стресса.

ГЕНОТОКСИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ ДОЛГОЖИВУЩИХ РАДИКАЛОВ БЕЛКА IN VIVO Карп О.Э.1, Гудков С.В.1,2, Брусков В.И.1, Учреждение Российской академии наук Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино (Россия), Пущинский государственный университет, Пущино (Россия).

E-mail: olgakarp1@rambler.ru Недавно установлено, что при воздействии ионизирующего излучения в растворах белков и клетках образуются долгоживущие радикалы белка (ДЖРБ) с временем полужизни 20 и более часов. Установлено, что ДЖБР являются источниками длительной генерации в растворе активных форм кислорода. В данной работе исследована способность ДЖРБ продлевать окислительный стресс и вызывать окислительные повреждения в ДНК in vivo. С помощью микроядерного теста исследовано влияние облученного крысиного сывороточного альбумина при внутривенном введении его самцам крыс.

Установлено, что введение облученного белка (1 мкг/г) приводит к увеличению количества полихроматофильных эритроцитов, содержащих микроядра, в 2, раза по сравнению с контролем. При скармливании в течение суток мышам обезжиренного и обезвоженного творога, облученного в дозе 100 Гр, в красном костном мозге происходит увеличение числа полихроматофильных эритроцитов с микроядрами. Их содержание эквивалентно количеству, образующемуся при тотальном облучении животных в дозе близкой к 0,2 Гр. Этот факт свидетельствует о способности долгоживущих радикалов сохранять свой окислительный потенциал и при переваривании пищи. При одновременном пероральном введении белка и приеме с питьевой водой в качестве природных антиоксидантов 5 мМ растворов инозина, L-триптофана, L-метионина и витамина С наблюдалось снижение величины цитогенетических повреждений. Таким образом, установлено, что облученные белки способны приводить к повреждению структуры ДНК in vivo и показана возможность нейтрализации генотоксических повреждений ДНК с помощью некоторых природных антиоксидантов.

Работа поддержана грантом Президента Российской Федерации МК 108.2010. ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА ПРОЦЕССЫ, ПРОИСХОДЯЩИЕ ПРИ ВОССТАНОВЛЕНИИ ПОСТУРАЛЬНЫХ МЫШЦ, АТРОФИРОВАННЫХ В УСЛОВИЯХ ДЛИТЕЛЬНОЙ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ РАЗГРУЗКИ Качаева Е.В., Туртикова О.В.

Учреждение Российской академии наук Государственный научный центр РФ Институт медико-биологических проблем РАН, Москва (Россия).

E-mail: e_kachaeva@mail.ru Функциональная разгрузка, возникающая при длительном соблюдении постельного режима вследствие травм или тяжелых заболеваний, в условиях космического полета, приводит к значительным изменениям скелетных мышц, что выражается в их атрофии, обусловленной изменением баланса между синтезом белка и протеолизом. Процесс восстановления мышц после атрофии, в особенности, на ранних этапах, изучен хуже. В данной работе мы исследовали изменения структурные изменения и некоторые сигнальные процессы, в атрофированной мышце в период восстановления 3 (группа HSR3) и 7 (группа HSR7) суток после антиортостатического вывешивания задних конечностей крыс (стандартная модель функциональной разгрузки, группа HS). В условиях разгрузки в камбаловидной мышце животных существенно возросла доля “быстрых” и “гибридных” волокон. К 7-м суткам полного восстановления миозинового профиля не произошло. Площадь поперечного сечения (ППС), а также масса камбаловидной мышцы начали восстанавливаться быстро, однако, к 7м суткам все еще оставались далеки от контроля. По-видимому, связано такое восстановление с накоплением воды, а не белка, поскольку масса высушенной мышцы менялась менее активно. Анализ уровня экспрессии IGF-1, регулирующего синтез белка в мышце, показал некоторое увеличение мРНК IGF 1 уже на 3 сутки и значительный рост на 7 сутки. Анализ мРНК убиквитин-лигаз MAFbx/атрогина-1, MuRF-1 и MuRF-2, отражающих уровень активности убиквитин-протеасомной системы показал, что мРНК атрогина-1 и MuRF- снижается уже на 3 стуки восстановления, тогда как количество мРНК MuRF- резко возрастает на 3 сутки восстановления и падает к 7 суткам до контроля.

Следовательно, на первой неделе восстановления атрофированной мышцы существенного сдвига баланса между синтезом белка и протеолизом не происходит. Работа поддержана Министерством науки и образования РФ.

МОРФОМЕТРИЯ ЭОЗИНОФИЛЬНЫХ И НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛ У НОРОК С ДЕФЕКТОМ ЛЕЙКОЦИТОВ В РАННЕМ ПОСТНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ Кижина А.Г.

Институт биологии КарНЦ РАН, Петрозаводск (Россия).

E-mail: golubewa81@yandex.ru Работа проводилась на щенках норок сапфирового окраса в возрасте десяти дней. Ранее проведенные исследования показали, что половозрелые особи этого типа окраски имеют дефект, который характеризуется наличием в различных клеточных элементах крови, включая нейтрофилы, лимфоциты, эозинофилы и базофилы, увеличенных цитоплазматических гранул, отсутствующих у нормальных животных. Сравнительное исследование гранулогенеза в эозинофилах десятидневных и шестимесячных животных выявило, что дефект гранулярного аппарата клетки у щенков выражен меньше.

Это подтверждается морфометрическими характеристиками эозинофильных гранул. Количество гранул на всех стадиях созревания клетки от миелоцита до зрелого эозинофила и после выхода его в периферическую кровь достоверно выше на ранних стадиях постнатального онтогенеза (P0,05), чем у животных ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА более старшего возраста. Величина гранул, в частности площадь одной гранулы, напротив, увеличивается с 0,46 мкм2 в среднем у миелоцита до 0,72 мкм2 у зрелого эозинофила. Причем у щенков она на всех этапах развития существенно ниже по сравнению с шестимесячными животными (P0,05), у которых размеры гранул колеблются в пределах от 0,65 мкм2 до 1,14 мкм2 соответственно. При светомикроскопических исследованиях зрелых нейтрофилов и их предшественников в препаратах крови и костного мозга не удалось, за некоторыми исключениями, установить достоверных отличий в количестве и в размере гранул между десятидневными и взрослыми животными. Таким образом, нарушение гранулогенеза происходит на ранних стадиях созревания клетки.

Между двумя типами гранулоцитов - нейтрофилами и эозинофилами обнаружены отличия в характере изменений аномальных гранул, которые объясняются функциональными особенностями этих типов гранулоцитов и, возможно, их различиями в кинетике.

Работа выполнена при финансовой поддержке гранта Президента РФ НШ 306.2008.4.

КРОСС-ПОЛЯРИЗАЦИОННАЯ ОПТИЧЕСКАЯ КОГЕРЕНТНАЯ ТОМОГРАФИЯ (КП ОКТ) КАК МЕТОД ПРИЖИЗНЕННОЙ ВИЗУАЛИЗА-ЦИИ КОЛЛАГЕНА И КЕРАТИНА СЛИЗИСТЫХ ОБОЛОЧЕК ЧЕЛОВЕКА Киселева Е.Б.1, Карабут М.М.1, Гладкова Н.Д.1, Сергеева Е.А.2, Юнусова Е.Э.3, Евдокимова О.С. Научно-исследовательский институт прикладной и фундаментальной медицины, Нижний Новгород (Россия), Институт прикладной физики РАН, Нижний Новгород (Россия), Нижегородская государственная медицинская академия, Нижний Новгород (Россия).

E-mail: kiseleva84@gmail.com Современная медицина предъявляет высокие требования к методам диагностики при выявлении патологии слизистых оболочек человека.

Своевременное выявление структурных нарушений в ткани является главной задачей успешного лечения любого заболевания. Метод кросс-поляризационной ОКТ (КП ОКТ) в визуализации тканевых структур (например, коллагена, кератина) отвечает условиям получения информации о состоянии ткани - неинвазивность, прижизненность, информативность. Основой метода КП ОКТ является получение и сравнение изображений поперечной структуры рассеяния биоткани в исходной и ортогональной поляризациях. В отличие от традиционной ОКТ метод КП ОКТ эффективен при исследовании процессов, происходящих как в эпителии (накопление кератина и кератинизация), так и в соединительнотканной строме (дезорганизация коллагена при воспалительных процессах). Известно, что коллагены стромальной ткани, составляющей основу здоровой слизистой оболочки, деполяризуют свет в большей степени, чем пораженные раком ткани, с измененным или восстановленным коллагеном. Задача исследования состояла в оценке коллагеновых структур на КП ОКТ-изображениях слизистых оболочек в норме и при патологии по такой поляризационной характеристике как способность деполяризовать свет. Проводилось параллельное исследование образцов методами лазерной сканирующей конфокальной микроскопии (ЛСКМ) и световой микроскопии в поляризованном свете с использованием специального гистологического красителя - пикросириуса красного. Эти методы позволили лучше понять и расшифровать сигнал на КП ОКТ-изображениях, а значит, приблизить повсеместное клиническое использование метода КП ОКТ.

ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА ИЗМЕНЕНИЕ СКОРОСТИ МОТОРНОЙ РЕАКЦИИ ПРИ ВОСПРИЯТИИ НЕОСОЗНАВАЕМЫХ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ ДЕТСКИХ ВОКАЛИЗАЦИЙ Ключко М.С., Александров А.Ю., Иванова В.Ю., Куликов Г.А.

Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург (Россия).

E-mail: jeffrey.mk@mail.ru Использование современных методов исследования зрительной информации подтвердило существование феномена неосознаваемого зрительного восприятия психофизиологическими средствами. Многими исследователями было убедительно показано влияние неосознаваемых зрительных стимулов на эмоциональное состояние человека. Вместе с тем, проблема о воздействии акустических неосознаваемых стимулов мало изучена, и данные по этому вопросу часто являются противоречивыми.

Цель представленной работы - выявление эмоциональной значимости неосознаваемых звуковых стимулов и их влияние на скорость моторной реакции человека.

Для обеспечения неосознаваемого восприятия стимула использовали дихотический метод предъявления. На правое ухо подавали тональные посылки (ТП) изменяющиеся и неизменяющиеся по частоте заполнения. На левое ухо подавали положительную детскую вокализацию (смех) на фоне коричневого шума. Эмоциональные стимулы предъявляли одновременно с половиной от общего числа предъявлений изменяющихся ТП. Вторую половину предъявлений изменяющихся ТП использовали в качестве контроля. Регистрацию скорости реакции человека осуществляли с помощью датчика механического усилия.

Испытуемый нажимал на кнопку, как только слышал изменение звука по частоте и пропускал нажатия во время звучания неизменных по частоте ТП.

Сравнивали время нажатия на кнопку в ответ на предъявление ТП, подаваемых вместе с неосознаваемым стимулом и без него. По результатам опытов выявили тенденцию к уменьшению времени достижения максимальной глубины нажатия на кнопку и увеличению скорости реакции при предъявлении ТП на фоне положительной вокализации.

ВЛИЯНИЕ АНДРОСТЕНОНА НА СОЦИАЛЬНОЕ ПОВЕДЕНИЕ И ГОРМОНАЛЬНЫЙ СТАТУС У ДОМОВОЙ МЫШИ Ключникова М.А., Вознесенская В.В.

Учреждение Российской академии наук Институт проблем экологии и эволюции им. А.Н. Северцова РАН, Москва (Россия).

E-mail: klyuchnikova@gmail.com Участие химических сигналов в регуляции различных типов социального, в том числе и агрессивного поведения, было продемонстрировано для различных видов млекопитающих. Содержание и баланс стероидных гормонов в организме млекопитающих отражает социальный и репродуктивный статус особи.

Выделяемые в наружную среду метаболиты стероидных гормонов, в свою очередь, рассматривают в качестве кандидатов на роль химических сигналов. В качестве модельного одоранта в наших исследованиях был использован стероид гонадного происхождения андростенон (5-андрост-16-ен-3-он, АНД). Мы исследовали возможные эффекты АНД на поведение и уровень гормонов у домовой мыши. Совокупность тенденций, которые были отмечены в стандартном тесте (снижение доли агрессивных животных, увеличение латентного периода первой атаки), свидетельствует о снижении уровня агрессивности самцов (n=24) по отношению к кастрированным самцам с нанесенным на аногенитальную область раствором АНД (0,1%). Получасовая экспозиция к 0,1% АНД вызывала ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА достоверное (p0,05) падение тестостерона в плазме крови у самцов мышей линии CBA/Lac (n=8). При этом уровень кортикостерона - основного биохимического показателя стрессированности животных, измеренный в тех же пробах, оставался неизменен. Отсутствие стрессирования АНД подтверждают и данные поведенческих экспериментов (“открытое поле”, тест на предпочтение запаха эстральной самки), проведенных после длительной, двухнедельной экспозиции к этому одоранту высокочувствительных мышей CBA. Совокупность полученных данных: достоверный гормональный ответ на экспозицию андростенона, тенденция к снижению агрессивного поведения под влиянием андростенона, а также вовлечение вомероназального органа в детекцию этого одоранта, свидетельствует о возможной хемосигнальной роли андростенона в регуляции социального поведения у домовой мыши.

НЕГАТИВНОСТЬ РАССОГЛАСОВНИЯ, КАК КРИТЕРИЙ АКТИВАЦИИ СИСТЕМЫ НАПРОИЗВОЛЬНОГО ВНИМАНИЯ И ЕГО СВЯЗЬ С РАЗВИТИЕМ ЦЕНТРАЛЬНОГО УТОМЛЕНИЯ Князева В.М., Дейнекина Т.С.

Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург (Россия).

E-mail: werwulf.90@mail.ru Целью работы было оценить связь центрального утомления и активации процессов непроизвольного внимания. Нами была поставлена задача установления корреляции между характеристиками вызванных потенциалов и развитием центрального утомления в условиях активации системы непроизвольного внимания и в обычных условиях, когда она не активирована. В качестве критерия активации данной системы мы использовали анализ особого компонента эндогенных вызванных потенциалов - негативности рассогласования.

В исследовании принимали участие 9 здоровых испытуемых (4 юноши и девушек) в возрасте от 19 до 22 лет. Все испытуемые-правши. Эксперимент проходил в течение двух дней. В один из дней испытуемому предъявлялся блок акустических стимулов в парадигме “oddball”, включавший стандартные стимулы с частотой 1000 Гц. и девиантные - с частотой 1200 Гц. Вероятность появления девиантного стимула составляла 15%. В следующий раз предъявлялась контрольная последовательность, включавшая только девиантные стимулы с частотой 1000 Гц, так называемая парадигма “deviants only”. Испытуемому было необходимо на каждый девиантный стимул сжимать рабочую часть динамометра до значения в 90% от максимальной силы сжатия, которая измерялась до начала эксперимента. Значение в 90% от максимальной силы сжатия отмечалось на мониторе линией, до которой испытуемый должен был довести волну, отражавшую силу сжатия динамометра. Во время эксперимента велась регистрация вызванных потенциалов мозга. Математическая обработка и последующий анализ полученных данных не показал наличия какой-либо значимой корреляции между значениями силы максимального сжатия, величины утомления, субъективного ощущения утомления по шкале Рюксборга и парадигмой эксперимента, то есть парадигмой “oddball” и парадигмой “deviants only”. При данных условиях нагрузки различия в степени утомления недостоверны.

ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА ВЛИЯНИЕ АКТГ-ПОДОБНЫХ ПЕПТИДОВ НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ МАКРОФАГОВ Ковалицкая Ю.А.1, Фунтикова А.Н.2, Садовников В.Б.1, Наволоцкая Е.В. Филиал Института биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А.

Овчинникова РАН, Пущино (Россия), Нижегородский государственный университет, Нижний Новгород (Россия).

E-mail: kovalitskaya@fibkh.serpukhov.su Известно, что АКТГ активно участвует во взаимодействии нейроэндокринной и иммунной систем. ПОМК - предшественник гормона синтезируется многими клетками иммунной системы. АКТГ взаимодействует с меланокортиновым рецептором 2 подтипа и оказывает иммуномодулирующее действие на Т- и В-лимфоциты. Однако действие гормона на макрофаги мало изучено.

В нашей лаборатории были синтезированы аналоги фрагмента АКТГ 15 18, со следующими структурами: (1) - Lys-Lys-Arg-Arg, (2) - CH3CO- Lys-Lys-Arg Arg-NH2, (3) - cyclo(Lys-Lys-Arg-Arg) и (4) - cyclo(Lys-Lys-Arg-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg), и изучено их действие на функциональную активность макрофагов.

Нами было исследовано влияние АКТГ-подобных пептидов на адгезию, распластывание и миграцию перитонельных макрофагов мыши in vitro в широком диапазоне концентраций 10-16-10-6 М. Было показано, что все пептиды ингибируют распластывание макрофагов, пептид 1 оказывал модулирующее действие на адгезию макрофагов, а пептиды 2 и 3 супрессирующее. По-разному проявилось влияние пептидов на подвижность клеток: пептид 1 при концентрации 0,1 нМ стимулировал подвижность клеток до 50%, в остальных случаях - ингибировал, пептид 2 угнетал миграцию на 40% (1-0,1 нМ), пептид 3 дозозависимо способствовал миграции клеток всем диапазоне концентраций, максимальное значение получено при 10 мкМ - 80%, пептид 4 уменьшает подвижность макрофагов до 40% при 0,1 мкМ.

В целом исследуемые пептиды ингибируют функциональную активность макрофагов, что совпадает с действием АКТГ. Однако структура исследуемых пептидов влияет на их свойства, пептиды Lys-Lys-Arg-Arg и cyclo(Lys-Lys-Arg-Arg) стимулируют спонтанную миграцию макрофагов.

ПРИСПОСОБЛЕНИЕ К СТРЕССУ ВЫНУЖДАЕТ НЕЙРОНЫ НА БОРЬБУ С НЕБЛАГОПРИЯТНЫМИ ФАКТОРАМИ Коканова Н.А.

Учреждение Российской академии наук Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино (Россия).

E-mail: kokanchik@rambler.ru Проводимые исследования по моделированию амилоидоза продемонстрировали деструктивное воздействие агрегированного бета-амилоида (А) на структуру и функцию маутнеровских нейронов (МН) интактных золотых рыбок, что наблюдается и в мозге высших позвоночных животных с поражением нервной системы. Это способствует разработке мер по предупреждению нейродегенеративных заболеваний, вызываемых амилоидозом.

Известно, что МН приобретают морфофункциональную резистентность при адаптации к стрессу (утомительной стимуляции). Мы предположили, что выработка адаптированного состояния сделает их устойчивыми к бета амилоидозу, как фактору, вызывающему нарушения в нервной системе.

По отработанной методике экспериментальных животных адаптировали к билатеральной стимуляции, апплицировали им фрагмент А25-35 и подвергали ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА естественной проверочной стимуляции. Для оценки воздействия А на МН изучали индивидуальные коэффициенты моторной асимметрии (КМА), методом 3-хмерной реконструкции получали целостную структуру нейронов и величину объемов составных частей каждого МН, проводили ультраструктурное изучение распределения амилоида в области расположения МН.

В результате работы было обнаружено, что КМА адаптированных рыбок под влиянием А практически не изменяется, что говорит о приобретении ими устойчивости к стресс-фактору, а ультраструктура и морфология их МН близки наблюдаемым у контрольных особей. Показано, что адаптация индуцирует функциональную резистентность рыбок и стабилизирует структуру МН к патологическому действию амилоида. Предполагается, что существенную роль в механизме защитного эффекта адаптации играет дофамин, который, как недавно установлено, способен разрушать лентовидные полимеры А in vitro и возможно так же действовать и в условиях in vivo.

ВЛИЯНИЕ АКСИАЛЬНЫХ ЛИГАНДОВ НА ЦИТОТОКСИЧНОСТЬ НИТРОКСИЛЬНЫХ КОМПЛЕКСОВ Pt(IV) Комлева Н.В.1, Костюк Г.В.1, Балакина И.В.2, Брилкина А.А.2, Сень В.Д.1, Терентьев А.А. Институт проблем химической физики РАН, Черноголовка (Россия), Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород (Россия).

E-mail: natalyavkom5@gmail.com Существенными недостатками комплексов платины как противоопухолевых химиотерапевтических препаратов является их высокая токсичность. С целью снижения токсичности в платиновые комплексы был введен нитроксильный радикал, который обладает антиоксидантными свойствами.

Синтезированные платина(IV)-нитроксильные комплексы (ПНК) имеют общую формулу Pt(IV)(NH3)(R•NH2)X2Cl2, и отличаются структурой аксиальных лигандов X или нитроксильного радикала R.

Цитотоксические свойства цисплатина, сатраплатина (JM216) и полученных ПНК исследовались на клетках HeLa, MCF-7 и H1299 с помощью окрашивания МТТ или нейтральным красным. Цисплатин и сатраплатин обладают сходной цитотоксичностью. Введение нитроксильного радикала существенно снижает цитотоксичность комплекса Pt(IV). Удлиннение аксиальных лигандов позволяет значительно повысить цитотоксичность ПНК и получить комплексы, превосходящие по цитотоксичности цисплатин и JM216.

С использованием метода флуоресцентной микроскопии после окрашивания ДНК красителем DAPI обнаружены сходные изменения в морфологии клеточных ядер при обработке клеток цисплатином и наиболее цитотоксичным из исследованных ПНК (X=H(CH2)4CO): оба комплекса вызывают характерную для апоптоза фрагментацию ядер.

Методом проточной цитофлуориметрии после окрашивания ДНК йодистым пропидием показано, что цисплатин и ПНК (X=H(CH2)4CO) также сходно влияют и на клеточный цикл: обнаружено накопление клеток в S фазе клеточного цикла и в области sub-G1 (погибшие клетки).

Работа поддержана грантом РФФИ 09-03-01187а.

ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА ГИПОХОЛЕСТЕРИНЕМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ЭКСТРАКТА ИЗ ЛАМИНАРИИ ЯПОНСКОЙ Кондратьева Е.В., Кушнерова Т.В.

Институт биологии моря им. А.В. Жирмунского ДВО РАН, Владивосток (Россия).

E-mail: kushnerova83@mail.ru Перегруженность эритроцитарной мембраны холестерином может приводить к нарушению функции эритроцитов вследствие изменения физических свойств мембраны. Следовательно, целесообразно использовать растительные препараты и биологически активные добавки, содержащие полифенольные структуры, для снижения мембранного холестерина. В связи с этим был выделен экстракт из ламинарии японской в состав которого входят полифенольные соединения (флоротаннины и их олигомерные и полимерные формы), минеральные вещества, аминокислоты (из них 7 незаменимых), полиненасыщенные жирные кислоты семейства n-3 и n-6, фосфолипиды, липофильные вещества и др. Экспериментальную гиперхолестеринемию у крыс линии Вистар массой 180-200 г вызывали в течение 6 недель введением в рацион животных повышенного содержания насыщенных жиров (растительное сало 25% от веса рациона), включающих 2,5% холестерина. Экстракт из ламинарии вводили перорально в дозе 100 мг/кг массы общих полифенолов в сутки. Показано, что гиперхолестеринемия сопровождалась увеличением объема и осмотической резистентности эритроцитов, коэффициента холестерин/фосфолипиды, количества холестерина, сфингомелина, лизофракций фосфолипидов, а также снижением эфиров холестерина, фосфатидилинозита и фосфатидной кислоты. Введение экстракта из ламинарии способствовало нормализации размерных характеристик эритроцитов, нормализации их осмотической устойчивости и соотношения фракций нейтральных и фосфолипидов в мембране. Экстракт обусловливал выведение холестерина из мембран и поступление в гепатоцит возросшего потока холестерина в этерифицированной форме в составе липопротеинов высокой плотности. Сопоставляя полученные результаты и оценивая позитивный эффект применения экстракта из ламинарии, следует отметить его высокий мембранопротекторный эффект в условиях гиперхолестеринового рациона.

МОДУЛЯЦИЯ СИНАПТИЧЕСКОЙ ПЕРЕДАЧИ В ДИССОЦИИРОВАННОЙ КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК ГИППОКАМПА С ПОМОЩЬЮ N АРАХИДОНОИЛДОФАМИНА.

Коротченко С.А.1,2, Мухина И.В.1,2, Ведунова М.В. Нижегородская государственная медицинская академия Росздрава, Нижний Новгород (Россия), Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород (Россия).

E-mail: svetlana_neuron@mail.ru В процессе онтогенеза в головном мозге формируется функциональная нейро-глиальная сеть. Однако, развитие различных патологических процессов может привести к нарушению нормальной активности такой сети. Одним из механизмов деструкции синаптических связей при длительной стимуляции сети является увеличение концентрации свободного внутриклеточного кальция. В нервных клетках существует защитный механизм, позволяющий приостановить нарастание концентрации внутриклеточного кальция и снизить последствия ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА “долговременной потенциации”. Этим защитным механизмом является эндоканнабиноидная система, работающая по принципу отрицательной обратной связи. В связи с этим, целью нашего исследования явилось изучение ретроградного модулирующего влияния на синаптическую передачу N арахидоноилдофамина - одного из синтетических аналогов эндоканнабиноидов.

В качестве модели использовались нейро-глиальные сети в диссоциированных культурах гиппокампа 18 дневных эмбрионов мышей. Такие сети формировались в течение 10 дней на мультиэлектродных матрицах. Затем изучалось влияние N арахадоноилдофамина на синаптическую передачу. Регистрация электрической активности культуры, спонтанной и модулированной, производилась при помощи мультиэлектродной матрицы MED64. Электрические параметры нейронной сети при ответе на химическое воздействие (частота, амплитуда ответа, латентное время ответа и т.д.) изменялись в зависимости от возраста культуры. Также был произведен флуоресцентный имиджинг активности первичной культуры гиппокампа при добавлении различных химических агентов и зарегистрировано изменение частоты и амплитуды кальциевых осцилляций.

ДИНАМИКА СПОНТАННОЙ БИОЭЛЕКТРИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ В СЕТИ ГИППОКАМПАЛЬНЫХ НЕЙРОНОВ IN VITRO Корягина Е.А.1,2, Мухина И.В.1,2, Казанцев В.Б.1, Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород (Россия), Нижегородская государственная медицинская академия Росздрава, Нижний Новгород (Россия), Институт прикладной физики РАН, Нижний Новгород (Россия).

E-mail: katerina_neuron@mail.ru Проблема исследования и анализа принципов работы нейронных систем является в настоящее время одной из наиболее актуальных в современной нейронауке. Исследована спонтанная биоэлектрическая активность нейронов гиппокампа in vitro в зависимости от времени развития культуры и плотности клеток. Для моделирования различных стадий функционального развития in vitro нейронных цепей использовали мультиэлектородную систему MED64.

Показана возможность регистрации спонтанной активности на самых ранних этапах развития нейронной сети в виде единичных некоррелированных спайков (внеклеточных потенциалов), что указывает на начало формирования функциональных синаптических связей. Развитие культуры гиппокампа характеризуется формированием межнейронных связей и появлением сетевой (коррелированной) активности. Для внеклеточной активности в нейрональных культурах типично возникновение сетевой пачечной, или burst-активности моментальной пространственно-временной последовательности спайков одного или нескольких нейронов с короткими межспайковыми интервалами. Такие последовательности можно трактовать как передачу возбуждения между элементами сформированной в культуре нейронной сети. Спайковые паттерны в пределах burst-разрядов являются самоподдерживающимися, возбуждения “циркулируют” по сети без специфического воздействия извне. Число событий, регистрируемых на электродах, с возрастом культуры существенно возрастает, что свидетельствует об активации достаточно большого числа клеток сети. Burst активность сохраняется на протяжении всего времени жизни культуры, но пространственно-временная структура в процессе развития изменяется.

Экспериментальные данные являются основой для проверки существующих теоретических гипотез и математических моделей работы нейронных сетей.

ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ Zn2+, Pb2+ И Co2+ С МИТОХОНДРИАЛЬНОЙ ПОРОЙ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОНИЦАЕМОСТИ Кравенская Е., Федирко Н.

Львовский национальный университет им. Ивана Франко, Львов (Украина).

E-mail: k.evgeniya.v.@gmail.com Известно, что некоторые металлы инициируют неспецифическую проницаемость митохондрий (НПМ), сопровождающююся открытием поры неспецифической проницаемости (ПНП), выходом Ca2+ из митохондрий (Мх) и их набуханием. Тем не менее, металл-индуцированная НПМ изучена недостаточно. Целью данной работы было исследование взаимодействия Zn2+, Pb2+ и Co2+ с ПНП.

Опыты проводили на изолированных Мх печени крыс. Набухание Мх изучали с использованием спектрофотометра и оценивали по: 1) максимальной скорости (V);

2) латентному периоду (ЛП);

3) амплитуде (А). Высвобождение Ca2+ через ПНП изучали с использованием Ca2+-селективного электрода и оценивали по: 1) максимальной скорости (V);

2) длительности (Т);

3) амплитуде (А).

Показано, что Zn2+ (0,1-10,0 мкM) активирует НПМ. Циклоспорин А (10 мкM) предотвращает Zn2+(0,1, 3,0 мкM)-индуцированное набухание Мх и Zn2+(1,0, 7, мкM)-индуцированный выход Ca2+ из Мх. В присутствии дитиотреитола (1 мM) V, ЛП и А Zn2+(0,1, 3,0 мкM)-индуцированного набухания Мх равняются 65±12 и 31±5%, 233±54 и 371±95%, 94±8 и 93±8%, а V, Т и А Zn2+(1,0, 7,0 мкM) индуцированного выхода Ca2+ из Мх 158±22 и 81±24%, 54±5 и 68±14%, 78±18 и 64±9% соответственно. В присутствии 2-этокси-1-этоксикарбонил-1,2 дигидрохинолина (1 мM) V, ЛП и А Zn2+(0,1, 3,0 мкM)-индуцированного набухания Мх равняются 126±16 и 72±13%, 34±8 и 39±11%, 132±10 и 108±8%, а V, Т и А Zn2+(1,0, 7,0 мкM)-индуцированного выхода Ca2+ из Мх 302±59 и 211±38%, 44± и 49±13%, 107±21 и 95±11% соответственно. В присутствии CGP-37157 (1 мкM) V, ЛП и А Zn2+(0,1, 3,0 мкM)-индуцированного набухания Мх равняются 121±5 и 74±6%, 84±21 и 76±15%, 84±12 и 87±7% соответственно. Интересно, что Pb2+ (0,1 50,0 мкM) и Co2+ (0,1-50,0 мкM) не инициируют НПМ.

Таким образом, Zn2+, в отличии от Pb2+ и Co2+, стимулирует НПМ, опосредуемую открытием ПНП и регулируемую SH-, COOH-группами, а также Na+/Ca2+-обменником Мх.

РАСПРЕДЕЛЕНИЕ КЛЕТОК ПО ФАЗАМ МИТОЗА У ПЛАНАРИЙ GIRARDIA TIGRINA Крещенко Н.Д.1, Ермаков А.М.2, Ермакова О.Н. Учреждение Российской академии наук Институт биофизики клетки РАН, Пущино (Россия) Учреждение Российской академии наук Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино (Россия).

E-mail: nkreshch@rambler.ru Cтволовые клетки планарий, необласты, служат источником для восстановления тканей и органов в ходе репаративной и физиологической регенерации. Пролиферативную активность изучали через 24 ч после отсечения головного конца тела у планарий G. tigrina в тканях, примыкающих к зоне регенерации (постбластемная область, ПБ), а также в окологлоточной (ОГ) и хвостовой (ХВ) областях, отдаленных от места регенерации. Суспензию клеток из тканей планарий окрашивали флуоресцентным красителем, подсчитывали число митозов у контрольных регенерирующих особей и после инкубации планарий в 0,05% растворе колхицина (при 20±1°С). Определяли митотический индекс (MИ), ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА как процент митозов, дополнительно учитывали фазу митоза.

MИ через 24 ч регенерации составил 0,90±0,12 (n=9), 0,45±0,05 (n=8) и 0,62±0,09 (n=10) в ПБ, ОГ и ХВ областях планарий соответственно, (где n - число подсчетов на 1000 клеток). В ПБ по фазам митоза клетки распределялись следующим образом: в профазе находилось 28,9% клеток, в стадии метафазы 36,1%, анафазы - 20,5% и телофазы - 14,4% клеток. После инкубации регенерирующих планарий в колхицине наблюдали накопление митотических клеток во всех областях тела. Значение MИ увеличивалось примерно в 1,5 раза и составило 2,27***±0,24 (n=4) в ПБ области, 1,16**±0,17 (n=4) в ОГ и 0,92*±0, (n=4) в ХВ области. Изменялось также процентное соотношение клеток, находящихся в разных фазах митоза. Существенно возрастало число метафаз, как в зоне регенерации, так и в областях, удаленных от места регенерации. Так, в ПБ в профазе находилось 7,5% клеток, в метафазе - 87,1%, анафазе - 1,1% и телофазе - 4,3%. Присутствие анафаз и телофаз после 24 ч инкубации планарий в колхицине, свидетельствует о том, что около 6% митозов в постбластемной области избегли колхициновой блокады. Поддержано РФФИ № 09-04-00243a.

АНТИМИКРОБНЫЕ ФАКТОРЫ ГЕМОЛИМФЫ И ЭКЗОСЕКРЕТА ЛИЧИНОК LUCILIA SERICATA (DIPTERA, CALLIPHORIDAE) Кругликова А.А.

Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург (Россия).

E-mail: a.a.kruglikova@yandex.ru Личинки зеленой мясной мухи Lucilia sericata применяются в лечении инфицированных хронических ран и язв, не поддающихся традиционным методам лечения. Повсеместное распространение резистентных к антибиотикам бактерий придает личиночной терапии особую актуальность. Однако механизмы, при помощи которых “хирургические личинки” подавляют патогенную микрофлору, остаются малоизученными.

В настоящей работе исследованы молекулярная природа и особенности функционирования двух основных защитных систем личинок L. sericata антимикробных соединений гемолимфы и экзосекрета, выделяемого питающимися личинками в окружающую среду. В гемолимфе личинок, подвергнутых бактериальному заражению, идентифицирован при помощи методов хроматомасспектрометрии набор индуцибельных антибактериальных пептидов, включающий дефензины, Р-пептиды и четыре новых полипептида.

Спектр бактерицидной активности комплекса включает представителей различных групп бактерий, в том числе наиболее актуального с медицинской точки зрения патогена - золотистого стафилококка. В состав антимикробного комплекса экзосекрета, как нам удалось установить, входят диптерицины, пептиды, отличные от известных компонентов гемолимфы, и низкомолекулярные соединения неизвестной природы.

Проведенные исследования характеризуют стратегии, используемые “хирургическими личинками” для защиты от патогенов и подавления микробных конкурентов, и позволяют лучше понять молекулярные механизмы личиночной терапии гнойных инфекционных заболеваний. В перспективе эти исследования могут послужить основой для создания принципиально новых препаратов для борьбы с обычными и резистентными к антибиотикам бактериальными инфекциями.

ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА АКТИВНОСТЬ ПАНКРЕАТИЧЕСКОЙ -АМИЛАЗЫ У КРЫС ПРИ ИНТОКСИКАЦИИ СОЛЯМИ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ Кудешова Г.Т., Шодмонова Ш.А.

Национальный университет Узбекистана, Ташкент (Узбекистан).

E-mail: k_gulchi@mail.ru К настоящему времени влияние ионов тяжелых металлов на гидролитическую способность поджелудочной железы практически не исследовано, несмотря на то, что во многих промышленных регионах концентрация ионов кадмия, свинца, ртути и др. превышает предельно допустимые концентрации. Секретируемые в полость двенадцатиперстной кишки панкреатические ферменты, включая -амилазу одними из первых вступают в контакт с ионами тяжелых металлов в пищеварительном канале, при наличии токсикантов в составе пищи и воды.

Поэтому целью настоящей работы явилось - выявление влияния ионов кадмия, свинца и ртути на -амилолитическую активность поджелудочной железы крыс. Хлорид ртути, хлорид свинца и хлорид кадмия добавляли в гомогенат в концентрации 10*10-4 M. перед биохимическим анализом активности -амилазы Инкубация ткани поджелудочной железы с субстратом и кадмием продолжалась 10 мин. Активность амилазы определяли методом А.М. Уголева (1969).

Оказалось, что активность фермента после добавления в гомогенат поджелудочной железы хлорида кадмия и хлорида свинца нисколько не изменялась, составляя 15,3±0,12;

15,8±0,12 и 14,8±0,13 мг/г ткани за минуту инкубации в контроле, и в пробах с добавлением хлоридов кадмия и свинца соответственно. Однако при наличии хлорида ртути в среде инкубации активность фермента была равной 1,2±0,1 мг/г ткани расщепленного крахмала за минуту инкубации, т.е. способность ткани поджелудочной железы переваривать крахмал была почти в 13 меньше по сравнению с контролем.

Таким образом, среди исследуемых ионов металлов заметное ингибирующее влияние на активность панкреатической -амилазы оказывали ионы ртути. Следовательно, длительные воздействия ионов этого токсиканта могут привести к необратимым последствиям в структуре ферментов, расщепляющих не только углеводы, и возможно белки и жиры в полости тонкой кишки.

СРАВНЕНИЕ ПАРАМЕТРОВ РЕФЛЕКТОРНЫХ ОТВЕТОВ ИКРОНОЖНОЙ МЫШЦЫ КРЫСЫ ПРИ ВИБРОСТИМУЛЯЦИИ ОПОРНЫХ ЗОН СТОПЫ НА ФОНЕ АНТИОРТОСТАТИЧЕСКОГО ВЫВЕШИВАНИЯ Кузнецов М.В.

Казанский государственный университет, Казань (Россия).

E-mail: mixonPRO@gmail.com Известно, что в условиях микрогравитации имеет место дефицит мышечной нагрузки, характерное для таких состояний перераспределение крови, лишение человека первичной опоры при поддержании естественной позы. Эти преобразования обуславливают существенную трансформацию интегральных свойств мышечной системы и отдельных мышечных групп, а также элементарных характеристик мышц, что вторично приводит к развитию изменений в деятельности всех других звеньев и компонентов двигательной системы. Целью работы являлось обнаружение эффектов вибростимуляции в условиях гравитационной разгрузки.

Исследования проводились на линейных лабораторных крысах. Опытные условия создавались путем антиортостатического вывешивания животных по ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА методике Morry-Holton E.R. et al., 2002. Сравнительные характеристики рефлекторных ответов регистрируемых в икроножной мышце животных, находившихся в условиях гравитационной разгрузки и подвергавшихся одностороннему раздражению опорных рецепторов стопы (вибростимуляции), показали, что через 7 суток пребывания в экспериментальных условиях порог Н ответа икроножной мышцы с вибростимуляцией был ниже значения порога, регистрируемого у животных, не подвергавшихся раздражению рецепторов опоры, значение амплитуда Н-ответа с вибростимуляцией выше. Через 14 суток порог и амплитуда Н-ответа мышц с вибростимуляцией незначительно отличались, и к 21 суткам сравнялся с пороговыми и амплитудными значениями Н-ответа после антиортостатического вывешивания.

Таким образом, односторонняя вибростимуляция способствует более быстрой адаптации центральной нервной системы к новым условиям двигательной активности, в частности, к нарушению опорной афферентации.

КОРРЕКЦИЯ ГИПЕРТРОФИИ МИОКАРДА ПРЕПАРАТАМИ КВЕРЦЕТИНА Кузьменко М.А., Тумановская Л.В., Павлюченко В.Б., Досенко В.Е.

Институт физиологии им. А.А. Богомольца НАН Украины, Киев (Украина).

E-mail: maria.kuzmenko.korol@gmail.com Известно, что биофлавоноиды оказывают кардиопротективный эффект при различных патологиях сердечно-сосудистой системы. Показано, что кверцетин уменьшает проявления гипертрофии миокарда, вызванной перенагрузкой сердца, а также при реноваскулярной гипертензии. Однако вопрос о возможном участии кверцетина в предупреждении развития гипертрофии сердца вследствие адренергического повреждения изучен недостаточно. Целью нашей работы было изучение влияние препаратов кверцетина на развитие процессов ремоделирования миокарда при гипертрофии сердца, индуцированной адренергическими влияниями. Гипертрофия сердца у крыс воспроизводилась с помощью изопротеренола (5мг/кг/день, 7 дней, подкожно). Терапия препаратами кверцетина предусматривала применение Корвитина (5мг/кг кверцетина, в/в, дней) и Квертина (15мг/кг кверцетина, 21 день, в составе корма). Степень выраженности процессов ремоделирования миокарда определялась в результате окрашивания гистологических препаратов по Ван-Гизону. Комплекс функциональных показателей кардиогемодинамики измерялся с помощью системы MPVS-400 и ультраминиатюрного катетера (Millar Instruments, USA).

Установлено, что длительное применение кверцетина приводило к увеличению ударного объема с 64,9±4,33 мкл до 105,1±3,51 мкл (n=9, Р0,05) и фракции выброса - с 17,9±0,95% до 25,2±1,01% (n=9, Р0,05). Проведенные эксперименты указывают на то, что препараты кверцетина способствуют нормализации гемодинамических параметров при развитии изопротеренол-индуцированной гипертрофии миокарда, а также в значительной степени уменьшают выраженность фибротических изменений в ткани сердца. Таким образом, следует полагать, что комбинированное применение растворимой и таблетированной форм кверцетина может иметь выраженный терапевтический эффект при лечении гипертрофии миокарда, вызванной адренергическими воздействиями.

ВЛИЯНИЕ ФАЗОВЫХ ФЛУКТУАЦИЙ СРЕДЫ НА МЕТАБОЛИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ОРГАНИЗМА ИНТАКТНЫХ ЖИВОТНЫХ Кулакова К.В.1, Щербатюк Т.Г.2, Давыденко Д.В.2, Чернов В.В. Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород (Россия), ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА Нижегородская государственная медицинская академия, Нижний Новгород (Россия), Институт прикладной физики РАН, Нижний Новгород (Россия).

E-mail: kulakova-k@yandex.ru Цель исследования - изучить динамику изменения параметров свободно радикального окисления: уровня индуцированной хемилюминесценции, содержания продуктов перекисного окисления липидов - диеновых конъюгатов и малонового диальдегида, активность антиоксидантных ферментов супероксиддисмутазы и каталазы, содержание карбонильных производных, характеризующих степень окислительной модификации белков, в организме интактных животных на протяжении 21 дня наблюдения. В течение всего периода исследования проводилась регистрация фазовых флуктуаций акустического импеданса среды, представляющая собой способ мониторинга и интегральной оценки космической погоды, по методике, разработанной В.В. Черновым в ИПФ РАН (Н. Новгород, 1995) с целью определения корреляционных взаимосвязей между исследованными параметрами. Для установления различий одновременно между семью анализируемыми выборками были использованы ранговый анализ вариаций по Краскелу-Уоллису и медианный тест. Степень согласованности изменений исследуемых признаков определялась по ранговому коэффициенту корреляции Спирмена (согласованность изменений считалась высоко значимой при p0,01).

Мониторирование фазовых флуктуаций среды показало, что в период эксперимента, начиная с 3 дня, имело место значительное снижение исследуемого параметра, достигшее своего минимума на 12-й день, с последующим возрастанием значений до исходного уровня. Показано, что у интактных животных в ходе исследования наблюдались изменения в значениях исследуемых биохимических параметров, подтверждавшиеся наличием корреляционных связей с изменением значений акустического импеданса, реагирующего на изменение состояния окружающей среды.

СОЗДАНИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ МОДЕЛИ И СПОСОБА ИЗЛЕЧЕНИЯ АНАЛЬНОЙ ИНКОНТИНЕНЦИИ Куликов Д.А.1,2, Машков А.Е. Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф.

Владимирского, Москва (Россия), Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино (Россия).

E-mail: zdolsk@mail.ru Недержанием кала (энкопрезом, анальной инконтиненцией) принято считать любые состояния, при которых периодически пачкается слизью и калом белье и кожа вокруг заднего прохода, или не удерживаются газы и/или кал.

Данное заболевание связано не только с физическими неудобствами для себя и окружающих, но и с тяжелыми психологическими расстройствами больных, часто приводящих их к суициду. По данным литературы распространенность энкопреза составляет до 4% среди взрослого населения. Существующие на данный момент методы лечения дороги, травматичны и не всегда достаточно эффективны, поэтому поиск новых способов лечения крайне актуален.

Цель данного исследования - создание метода компенсации врожденных и приобретенных патологий сфинктерного аппарата прямой кишки.

В экспериментах использовали крыс линии Вистар.

Животным иссекали клиновидный участок прямой кишки с мышцами наружного сфинктера. По прошествии определенного времени местно вводили аллогенные клетки костного мозга. Собственно работе предшествовали ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА исследования по подбору диеты животным до и после операции, с тем, чтобы полностью или в значительной степени исключить дефекацию в течение 2 дней после операции и минимизировать инфицированность раневой поверхности.

Введение клеток костного мозга приводило к значительно более быстрому образованию мышечной ткани и восстановлению сфинктерной функции прямой кишки у оперированных животных в сравнении с крысами, которым трансплантацию не проводили. Гистологические исследования показали, что регенерация мышечной ткани происходит через образование гранулем с минимальным развитием соединительной ткани.

Предварительные результаты исследований позволяют предполагать достаточную эффективность применения разрабатываемой методики как при врожденных, так и приобретенных формах энкопреза.

СОЗДАНИЕ МОДЕЛИ И МЕТОДИКИ ЛЕЧЕНИЯ ЭНКОПРЕЗА Куликов Д.А.

Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф.

Владимирского, Москва (Россия), Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино (Россия).

E-mail: zdolsk@mail.ru Недержанием кала (энкопрезом, анальной инконтиненцией) принято считать любые состояния, при которых периодически пачкается слизью и калом белье и кожа вокруг заднего прохода или не удерживаются газы и/или кал.

Данное заболевание связано не только с физическими неудобствами для пациента и окружающих, но и с тяжелыми психологическими расстройствами больных, часто приводящими их к суициду. По данным литературы распространенность энкопреза составляет до 4% среди взрослого населения, различные расстройства дефекации у детей встречаются с частотой 1,2-8%.

На практике достаточно часто встречается анальная инконтиненция, связанная с травмами мышечного аппарата прямой кишки - родовые травмы промежности, осложнения перенесенных операций (особенно часто - по поводу парапроктита и свищей прямой кишки), бытовые травмы и случаи сексуального насилия. Нередки случаи врожденной патологии, нейрогенного недержания, как следствие травм поясничного и крестцового отдела позвоночника.

Существующие на данный момент методы лечения дороги, травматичны и не всегда достаточно эффективны, поэтому поиск новых способов лечения крайне актуален.

Цель работы - создание метода лечения врожденных и приобретенных патологий сфинктерного аппарата прямой кишки.

В экспериментах используются крысы линии Вистар. По завершении экспериментальной части исследования - получение пакета патентов на разработанный способ и клинические испытания.

Для отработки модели энкопреза в предварительной серии экспериментов животным иссекали клиновидный участок прямой кишки с мышцами наружного сфинктера. По прошествии определенного времени местно вводили аллогенные клетки костного мозга.

Введение клеток костного мозга приводило к значительно более быстрому образованию мышечной ткани и восстановлению сфинктерной функции прямой кишки у оперированных животных в сравнении с крысами, которым трансплантацию не проводили. Гистологические исследования показали, что регенерация мышечной ткани происходит через образование гранулем с минимальным развитием соединительной (рубцовой) ткани.

Очень важно, что в случае клинического применения метода используется ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА аутологический материал, что снимает множество проблем, связанных с иммунной реакцией отторжения чужеродной ткани. Это же обстоятельство (использование собственной ткани) снимает этические и юридические вопросы, которые всегда возникают в случае алло- или ксеногенной трансплантации.

Потенциальными потребителями результатов исследований могут быть клинические (более 1% населения, в той или иной форме страдает энкопрезом) и научно-исследовательские (разработанные модели могут быть использованы как сравнительные при проверке влияния новых лекарственных препаратов и оперативных методик) подразделения.

Сегментом рынка для реализации конечного продукта научно исследовательской разработки могут выступить широкопрофильные и специализированные медицинские (педиатрические, проктологические и др.) учреждения и центры.

В заключении стоит сказать, что энкопрез является достаточно распространенным, социально значимым заболеванием, доставляет массу неудобств не только пациенту, но и всем членам его семьи. Пластических операций на запирательном аппарате прямой кишки предложено достаточно много, но большинство из них, в силу неудовлетворительных результатов лечения, особенно в отдаленном периоде, сейчас не используются. Из активно применяющихся на сегодняшний день операций, основными являются:

сфинктеропластика, сфинктеролеваторопластика, сфинктерограцилопластика и др., но эти методики достаточно дороги и травматичны.

Новизна данного исследования состоит в том, что впервые будет разработан способ лечения недержания кала, отличающийся от современных методов лечения малой травматичностью, быстрым и стойким достижением клинического эффекта. В перспективе разрабатываемая методика позволит оказывать помощь лицам с тяжелейшими врожденными патологиями прямой кишки.

АПОПТОЗ-ИНДУЦИРУЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ ПРОИЗВОДНЫХ N-ОКСИДА ХИНОЛИНА НА ОПУХОЛЕВЫЕ КЛЕТКИ Курмышкина О.В., Багина У.С.

Петрозаводский государственный университет, Петрозаводск (Россия).

E-mail: VolkovaTO@yandex.ru Апоптоз является физиологическим механизмом устранения избыточных и/или функционально аномальных клеток, необходимым как для нормального развития многоклеточного организма в эмбриональном периоде, так и для поддержания тканевого гомеостаза у взрослых особей. Нарушения механизмов индукции апоптоза могут являться важным фактором патогенеза различных заболеваний, в том числе онкологических. В настоящей работе нами была изучена способность производных N-оксида хинолина (хинолин-1-оксид - QO, 2 метилхинолин-1-оксид - 2-MeQO, 4-нитрохинолин-1-оксид - 4-NQO, 2-метил-4 нитрохинолин-1-оксид - 2-Me-4-NQO) индуцировать апоптоз в клетках опухолевых линий человека К562 и HL-60. Показано, что 4-NQO и 2-Me-4-NQO в концентрации 1 нМ на 4 сутки обработки индуцируют апоптоз клеток К562, аналогичный эффект реагентов по отношению к клеткам HL-60 регистрируется на 3 сутки. В опухолевых клетках наблюдается повышение активности каспаз-9, -3 и фрагментация ДНК. QO и 2-MeQO в концентрации 1 нМ не индуцируют апоптоз в опухолевых клетках. Однако при повышении дозы реагентов в 10 раз запуск процесса наблюдается в линии HL-60 к концу 5-х суток культивирования. Нами также установлено, что при взаимодействии 4-NQO и 2-Me-4-NQO с ДНК в УФ спектрах ДНК регистрируется сильный гипохромный сдвиг, что свидетельствует ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА об образовании комплексов. Процент гипохромного эффекта ДНК на фоне указанных реагентов составляет 10,7±1,2 и 11,3±1,3, соответственно. Тогда как при смешивании ДНК с QO или 2-MeQO изменения в спектрах поглощения выражены слабее: 2,4±0,6 и 2,8±0,3, соответственно. В данном случае способность реагентов связываться с ДНК коррелирует с их апоптогенной активностью. В работе обсуждается зависимость биологической активности соединений от их структуры (дизайна), концентрации, степени зрелости обрабатываемых клеток и их гистогенетической принадлежности.

Работа выполнена при финансовой поддержке НШ-306.2008.04.

КОРРЕКЦИЯ СТРЕССОВЫХ НАРУШЕНИЙ МЕМБРАН ЭРИТРОЦИТОВ ЭКСТРАКТОМ ИЗ ЛАМИНАРИИ ЯПОНСКОЙ Кушнерова Т.В., Кондратьева Е.В.

Институт биологии моря им. А.В. Жирмунского ДВО РАН, Владивосток (Россия).

E-mail: kushnerova83@mail.ru Одним из путей восстановления нарушенных стрессом структурных характеристик мембран эритроцитов, является использование растительных полифенольных комплексов, обладающих высокой антирадикальной и антиоксидантной активностью, то есть способностью эффективно инактивировать высокотоксичные гидроксил-радикалы, синглетный кислород, пероксинитрит, а также свободные радикалы, что обусловливает их мембранопротекторный эффект. В связи с этим из бурой водоросли ламинария японская (Laminaria japonica) был выделен экстракт с содержанием полифенолов (флоротаннины и их олигомерные и полимерные формы) в составе экстрактивных веществ в количестве 35%. Эксперимент проводили на белых крысах-самцах линии Вистар с массой тела 180-200 г. Стресс вызывали путем вертикальной фиксации животных за дорзальную шейную складку на 24 часа. Экстракты из ламинарии и элеутерококка (препарат сравнения) животным вводили внутрижелудочно через зонд в дозе 0,4 мл/100 г массы (доза общих полифенолов 100 мг/кг массы) 2 раза в сутки. Действие стресса сопровождалось снижением осмотической резистентности эритроцитов крыс, антиоксидантной защиты, эфиров холестерина и увеличением объема и диаметра эритроцитов, количества малонового диальдегида, холестерина, сфингомелина, лизофракций фосфолипидов. При введении экстракта из ламинарии или элеутерококка при стрессе наблюдалось сохранение системы антиоксидантной защиты эритроцитов, что дало возможность восстановить соотношение липидных компонентов в мембране, обеспечивая тем самым сохранение физиологических характеристик эритроцитов (СДЭ, СОЭр, осмотическая резистентность) и, соответственно, их функциональные свойства. При сравнении выраженности эффектов действия экстракта из ламинарии или экстракта элеутерококка проявляются определенные преимущества первого, так как большинство исследуемых показателей были наиболее близкими к контрольным значениям.

ВОЗМОЖНОСТИ МЕТОДА ДИФФУЗИОННОЙ ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ ТОМОГРАФИИ ДЛЯ ПРИЖИЗНЕННОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ДИНАМИКИ НАКОПЛЕНИЯ И ВЫВЕДЕНИЯ ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРОВ В ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ОПУХОЛЯХ Леканова Н.Ю.1, Крутова И.В.1, Ширманова М.В. Нижегородский государственный университет им. Н.И.Лобачевского, Нижний Новгород (Россия), ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА Нижегородская государственная медицинская академия, Нижний Новгород (Россия).

E-mail: nat-lekanova@yandex.ru Метод диффузионной флуоресцентной томографии (ДФТ) основан на получении информации о флуоресцирующих объектах в биоткани на глубине до нескольких сантиметров на основе обработки сигнала от прошедшего через ткань лазерного излучения. Данный метод нацелен на доклиническое испытание противоопухолевых препаратов, а также подбор флуоресцентных маркеров для решения исследовательских, а впоследствии и клинических задач.

Целью исследования являлась оценка возможностей метода диффузионной флуоресцентной томографии для прижизненного исследования динамики накопления и выведения фотосенсибилизаторов в экспериментальных опухолях.

Эксперимент проводился на мышах линии BDF1 с карциномой легких Льюис, BALB с карциномой Эрлиха и CBA с привитым подкожно раком шейки матки. Двумерные флуоресцентные изображения получали на ДФТ-установке, разработанной в Институте прикладной физики РАН. Было количественно исследовано распределение в организме трех фотосенсибилизаторов разной химической природы - фотосенса, аласенса и фотодитазина. Мониторинг проводился в течение 5 дней. Полученные in vivo результаты ДФТ подтверждены спектроскопией и конфокальной микроскопией образцов органов и тканей животных ex vivo.

В данной работе методом ДФТ прижизненно визуализировано накопление и выведение фотосенсибилизаторов в тканях животных-опухоленосителей.

Показана высокая степень корреляции результатов, полученных прижизненно с помощью ДФТ, и спектроскопией ex vivo. Выявлены сложности в идентификации отдельных органов животных на ДФТ-изображениях, однако, продемонстрированы возможности ДФТ в исследовании фармакокинетики флуоресцирующих препаратов.



Pages:     | 1 |   ...   | 4 | 5 || 7 | 8 |   ...   | 13 |
 





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.