авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ БИБЛИОТЕКА РОССИИ

КОНФЕРЕНЦИИ, КНИГИ, ПОСОБИЯ, НАУЧНЫЕ ИЗДАНИЯ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:     | 1 |   ...   | 5 | 6 || 8 | 9 |   ...   | 13 |

«Проведение школы-конференции осуществлено при поддержке Российского фонда фундаментальных исследований Мирошников А.И., Председатель оргкомитета.Председатель ПНЦ РАН, ...»

-- [ Страница 7 ] --

Полученные результаты свидетельствуют о перспективности применения нового метода ДФТ в экспериментальной онкологии для тестирования новых фотосенсибилизаторов на предклинической стадии, а также при проведении фундаментальных исследований роста и развития опухолей.

ВЛИЯНИЕ УГЛЕРОДНОГО СОРБЕНТА ГСГД И МАГНИТОЛАЗЕРНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ НА АНТИОКСИДАНТНУЮ СИСТЕМУ БЕЛЫХ КРЫС ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ПОРАЖЕНИИ ПЕЧЕНИ Лисничук Н.Е., Демкив И.Я., Кулицкая М.И., Масловская Л.П.

Тернопольский государственный медицинский университет им. И.Я.

Горбачевского, Тернополь (Украина).

E-mail: iria_ternopil@mail.ru Целью данного экспериментального исследования стало изучение изменений активности функционирования ферментов АОС в организме белых крыс в условиях смоделированного поражения печени и их коррекция с помощью углеродного сорбента IV поколения ГСГД и низкоенергетического магнитолазерного излучения (МЛИ).

Все животное были разделены на 5 груп: 1 группа - контрольная (20 крыс);

2-3 группы - токсический гепатит 7, 14 суток (30 животных);

4-5 группы токсический гепатит 7, 14 суток при коррекции сорбентом ГСГД и МЛВ ( животных). Токсическое поражение печени моделировали путем внутрижелудочного введения 50% раствора CCl4 на оливковом масле в дозе 0, мл чистого вещества на 100 г массы тела животного (Короленко Т.А., 1975). Для ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА коррекции использован одноканальный лазерный генератор “МИТ-1”.

Экспериментальным животным с интервалом в 24 год проводили 5 сеансов облучения длительностью 2 мин (энергия излучения - 1,33 кДж). Углеродный сорбент ІV поколения ГСГД вводили в дозе 1 мл (что отвечает чистой массе углеродного сорбента ГСГД 0,2 г) на 100 г массы тела животного (Николаев В.Г., 2007).

Активность каталазы (КТ) исследовали согласно методики М.А. Королюка и соавт. (1988). Активность глутатионпероксидазы (ГП) и глутатионредуктазы (ГР) по методике (Кругликова Г.О., 1976). Концентрацию возобновленного глутатиона (G - SH) согласно методики (Ellman G.L., 1959). Активность супероксиддисмутази определяли по (Чевари С., 1985).

На 7 и 14 сутки експеримента отмечено достоверное возростание активностей КТ (в 3,0 и 2,7 раза соответственно) и СОД (в 8,1 и в 7,5 раза соответственно). Активности ГП, ГР и концентрация G - SH в печени животных с токсическим гепатитом снижается в течение всего эксперимента сравнительно с аналогичным показателем в контрольной группе животных.





Применение сорбента ГСГД и МЛВ способствовало нормализации активностей КТ, СОД, ГП и ГР и неферментного показателя этой системы, а именно G - SH на 7 и 14 сутки эксперимента.

ИССЛЕДОВАНИЕ ТОКСИЧНОСТИ ФУЛЛЕРЕНОВ IN VIVO Литасова Е.В., Селина Е.Н., Родионова О.М.

Институт экспериментальной медицины СЗО РАМН, Санкт-Петербург (Россия).

E-mail: llitasova@mail.ru Одной из важнейших проблем при изучении биологических свойств фуллеренов является проблема токсичности. Поэтому мы исследовали острую токсичность одного из водорастворимых комплексов включения, а именно комплекса С60 с поливинилпирролидоном (С60/ПВП, содержание С60 0,5-0,6%, ПВП м.м. 12000).

Работа проведена на нелинейных белых мышах и крысах-самцах линии Вистар при внутрибрюшинном введении. Животным однократно вводили растворы комплекса С60/ПВП или ПВП в высоких концентрациях вплоть до максимально возможной (40%), мышам - 1мл на животное массой 25 г, крысам - мл на животное 200 г. За животными наблюдали на протяжении 14 дней, регистрировали их гибель и особенности поведения. Установлено, что ЛД комплекса С60/ПВП для мышей равна 14,1±1,1 г/кг, а для ПВП 11,6±0,8 г/кг, (первые сутки после введения). Наблюдения за животными показали, что в группах, получавших комплекс С60/ПВП, животные гибли только в течение первых двух суток. У мышей контрольной группы, получавших ПВП, гибель животных продолжалась на протяжении 7 суток. Учитывая количество погибших животных за 7 суток, ЛД50 комплекса С60/ПВП равна 11,2±0,8 г/кг, а для ПВП - 9,68±0,8 г/кг. В опытах на крысах исследуемые вещества вводили в диапазоне доз от 5 до 10 г/кг.

Гибель животных, получавших комплекс С60/ПВП, была зарегистрирована на 4 и 5-е сутки, а в контрольной группе - на 3-4-е сутки. Учитывая количество погибших животных за 5 суток, ЛД50 комплекса С60/ПВП составила 7,9±1,0 г/кг и 6,8±0,7 г/кг для ПВП.

Проведенное нами исследование показывает, что фуллерен С60 в комплексе с ПВП ослабляет токсическое действие высоких доз самого ПВП.

Следовательно, сам фуллерен С60 в данном комплексе острой токсичностью не обладает.

ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА ФОРМИРОВАНИЕ ПОВЕДЕНИЯ В ПОСТНАТАЛЬНОМ ПЕРИОДЕ У МЫШЕЙ С НАРУШЕНИЯМИ КОРТИКОГЕНЕЗА НА РАЗНЫХ СРОКАХ ЭМБРИОНАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ Лобанов А.В.

Филиал Учреждения Российской академии наук Института биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и А.А. Овчинникова РАН, Пущино (Россия).

E-mail: lobanov-av@yandex.ru К моменту рождения у незрелорождающихся животных, таких как грызуны, кора мозга представляет сложную многослойную структуру, нейроны которой обладают функциональной активностью. Однако роль отдельных клеточных элементов коры в обеспечении формирования раннего поведения остается мало изученным вопросом. Исследованию этого вопроса и было посвящено наше исследование. Решение поставленной задачи было реализовано благодаря созданию экспериментальной модели нарушения пролиферации клеточных структур коры на разных этапах эмбриогенеза. В качестве инструмента использовался антипролиферативный агент цитозинарабинозу (Ara-c), который вводился на раннем, среднем и позднем этапах закладки слоев коры у мышей.





Контроль нарушений в коре после введения Ara-c осуществлялся морфологическими методами и оценкой апоптотической гибели клеток методом TUNEL. В результате исследования было установлено избирательное действие Ara-c на различные отделы конечного мозга в пренатальный период. Характер выявленных изменений зависел от сроков введения вещества и отражал особенности динамики пролиферативных процессов в развивающемся мозге.

Было показано, что наибольшее число изменений в формировании поведенческих актов происходило у мышей с ранним и поздним воздействием на кортикогенез.

При раннем воздействии наиболее сильные изменения возникали в координации передних, а при позднем - задних конечностей. Нарушения в формировании пространственной ориентации и в формировании пространственной рабочей памяти также были наиболее выраженными у мышей с ранним и поздним воздействием. Изменение исследовательского поведения характеризовалось разнонаправленным изменением локальной и горизонтальной активности в зависимости от сроков воздействия на кортикогенез у мышей.

АКТИВНОСТЬ РИБОСОМАЛЬНЫХ КИНАЗ У ПАЦИЕНТОВ С РАЗНОЙ СТЕПЕНЬЮ ВЫРАЖЕННОСТИ АТРОФИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЙ, ВЫЗВАННЫХ ДЛИТЕЛЬНЫМ ПОТРЕБЛЕНИЕМ АЛКОГОЛЯ Лысенко Е.А.1, Казанцева Ю.В.2, Маслова Г.А.2, Шенкман Б.С. Государственный научный центр РФ - Институт медико-биологических проблем РАН, Москва (Россия), Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова, Москва (Россия).

E-mail: e.a.lysenko@gmail.ru Хроническая алкогольная интоксикация вызывает поражения различных органов и систем организма. Наименее изученным из них представляется поражение скелетной мускулатуры алкогольного генеза. Экспериментальные исследования с использованием животной модели показали, что после 16 недель хронического потребления алкоголя происходит существенное снижение скорости белкового синтеза, причиной которого является токсическое поражение ряда ключевых звеньев сигнальной системы mTOR (Lang et al., 2003). В то же время, до сих пор не было проведено детального исследования сигнальных механизмов контроля белкового синтеза у людей, больных хронической ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА алкогольной миопатией. Нами было обследовано 15 пациентов в возрасте 44,7± лет, со средней продолжительностью приема алкоголя - 15,9±2,1 лет и средним количеством потребляемого этанола - 178±19 мл/сут. Все пациенты были разделены на 3 группы. В первую группу вошли 5 пациентов без атрофии мышечных волокон m. vastus lateralis (критерием атрофии служило снижение площади поперечного сечения волокон), во вторую - 5 пациентов с атрофией волокон II типа, а в третью - 5 пациентов с атрофией волокон I и II типов.

Контролем была группа из 3 добровольцев, не употреблявших алкоголь в повседневной жизни. Методом электрофореза с последующим вестерн блоттингом в мышечных пробах пациентов оценивали общее содержание и уровень фосфорилирования рибосомальных киназ p70 и p90. Полученные данные свидетельствуют о значительном снижении (более чем на 35%) общего содержания и уровня фосфорилирования рибосомальных киназ у всех обследованных пациентов. Таким образом, впервые были выявлены глубокие нарушения функционирования сигнальных систем, контролирующих белковый синтез, при этом не было выявлено существенных различий между группами пациентов с разной выраженностью атрофических изменений.

УСИЛЕНИЕ РАБОТЫ РИАНОДИНОВОГО РЕЦЕПТОРА В НЕЙРОНАХ СТРИАТУМА МЫШИ, МОДЕЛИРУЮЩИХ БОЛЕЗНЬ ХАНТИНГТОНА Львовская С.В.1, Безпрозванный И.Б. Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург (Россия), Юго-Западный медицинский центр университета в Далласе (США).

E-mail: vetalvovskaya@gmail.com Болезнь Хантингтона (БХ) - аутосомно-доминантное нейродегенеративное заболевание. У больных наблюдается селективная потеря GABA-ергических срединных шипиковых нейронов (MSN). На молекулярном уровне, БХ вызывается мутацией в Хантингтине (Htt). Согласно одной из ведущих теорий наличие в нейронах мутантного белка вызывает нарушения в механизме кальциевого (Са2+) сигналинга, приводящие к поражению MSN. В настоящей работе сопоставлена активность Са2+ канала эндоплазматического ретикулума (ЭР) - рианодинового рецептора (RyR) в первичной культуре MSN из трансгенных YAC128 мышей мышиной модели БХ и мышей дикого типа (WT).

Для активации RyR использовался его активатор кофеин (Caf). Но аппликация только 2,5 мМ Caf не вызвала увеличения количества Ca2+ в цитоплазме, т.к. в нейронах для открытия этого канала необходимо повышенное содержание кальция в цитоплазме. Для достижения уровня Са2+, достаточного для активации RyR, вместе с Caf во внеклеточный раствор добавляли глутамат (Glu).

Для отделения Са2+ ответа на Glu от работы RyR, была проведена серия экспериментов по аппликации к клеткам только 2,5 мкМ Glu, что в равной степени приводило к увеличению количества Са2+ в цитоплазме и в YAC128, и в WT MSN.

Совместная аппликация 2,5 мкМ Glu и 2,5 мМ Caf вызывала значительно большее увеличение концентрации Са2+ (4 раза для YAC128 и 2 раза для WT), чем наблюдалось при аппликации Glu. Кроме того, Са2+ ответ в YAC128 MSN был в 2 раза больше по сравнению с WT. Таким образом, величина выхода Са2+ из депо через RyR в YAC128 MSN примерно в 2,5 раза больше, чем в WT.

Значительное усилении функции RyR в YAC128 MSN указывает на наличие вклада RyR в нарушение нейронального Са2+ сигналинга при БХ.

Работа выполнена при финансовой поддержке грантов: Госконтракт № 02.740.11.5007;

РФФИ № 09-04-12035;

РФФИ №10-04-00956;

НШ-3796.2010.4.

ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА АУТОТРАНСПЛАНТАЦИЯ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ПРИВОДИТ К УСИЛЕНИЮ РЕГЕНЕРАЦИИ МЫШЕЧНОЙ ТКАНИ У ПАЦИЕНТОВ С ХРОНИЧЕСКИМИ ОБЛИТЕРИРУЮЩИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ АРТЕРИЙ НИЖНИХ КОНЕЧНОСТЕЙ Мавликеев М.О., Табанакова А.В., Трондин А.А., Певнев Г.О., Бурганова Г.Р., Газизов И.М., Плотников М.В., Гумерова А.А., Киясов А.П.

Казанский государственный медицинский университет, Казань (Россия).

E-mail: Mikhail.mavlikeev@yahoo.com В последние годы все большее значение приобретают хронические облитерирующие заболевания артерий нижних конечностей (ХОЗАНК).

Доклиническими исследованиями доказана высокая эффективность клеточной терапии ХОЗАНК. В 2008-2009 гг. в Республиканской Клинической Больнице Минздрава Республики Татарстан были проведены клинические исследования по лечению больных ХОЗАНК аутологичными стволовыми клетками (СК). Целью нашего исследования было изучение влияния аутотрансплантации СК периферической крови (ПК) на регенерацию мышечной ткани больных ХОЗАНК.

Парафиновые срезы биоптатов икроножной мышцы пораженной конечности 30 больных ХОЗАНК до и через 3 месяца после внутримышечного введения мобилизованных аутологичных СК окрашивали иммуногистохимически с антителами к маркерам эндотелия (CD31, CD34, фактор фон Виллебрандта), а также с антителами к миогенину - маркеру миосателлитов. Далее производили морфометрический анализ образцов, подсчитывали число мышечных волокон и капилляров и определяли их соотношение.

Результаты исследования показали рост соотношения “число капилляров/число мышечных волокон” на 25% (p0,001). В биоптатах мышечной ткани до введения стволовых клеток мы наблюдали единичные миогенин позитивные клетки, их число увеличивалось через 3 месяца после трансплантации, появлялись клетки с миогенин-позитивными ядрами, также мы наблюдали слияние клеток с образованием миотуб и новых мышечных волокон.

Вывод: аутотрансплантация СК ПК приводит к улучшению васкуляризации ишемизированной конечности путем неоангиогенеза, что способствует активации миосателлитов и формированию новых мышечных волокон.

НЕРАВНОЗНАЧНОЕ ИЗМЕНЕНИЕ РЕАКЦИИ СИЛЫ СОКРАЩЕНИЯ МИОКАРДА КРЫС НА СЕРОТОНИН И НОРАДРЕНАЛИН В РЕЗУЛЬТАТЕ ХРОНИЧЕСКОГО ВВЕДЕНИЯ ИЗОПРОТЕРЕНОЛА И ФЛУОКСЕТИНА Мазитов Т.М., Хакимзянова М.А., Поляков П.О.

Казанский государственный медицинский университет, Казань (Россия).

E-mail: tim-mazitov@yandex.ru Общепринятой гипотезой прогрессирования сердечной недостаточности является нейрогормональная модель, согласно которой активируется симпатоадреналовая система. Однако отсутствуют данные о влиянии серотонина и норадреналина на модель сердечной недостаточности при хроническом экспериментальном воздействии b-адреномиметиков и ингибиторов обратного захвата серотонина. Цель: изучение влияния серотонина и норадреналина на силу сокращения миокарда желудочков у крыс с хроническим введением изопротеренола и флуоксетина. Модель ХСН создавалась ежедневным последовательным внутрибрюшинным введением растворов изопротеренола ( адреноблокатор) и флуоксетина (ингибитор обратного захвата серотонина) (Isoproterenol, Fluoxetine;

Sigma) в дозе 30 мг/кг. В качестве контроля в те же сроки вводился 0,9% раствор NaCl. У 10 наркотизированных уретаном (800 мг/кг) крыс вынимали сердце, вырезали полоски миокарда правого предсердия и ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА правого желудочка длиной 4-5 мм и диаметром 0,8-1 мм. В данной работы мы повторно оценили реакцию силы и амплитудно-временные характеристики сокращения полосок миокарда на серотонин, адреналин и агонист 5-HT рецепторов (m-CPP hydrochloride, Tocris) в трех последовательно возрастающих концентрациях: 0,1 mМ, 1,0 mМ и 10,0 mМ. Выводы: 1. Серотонин и агонист 5 НТ2в рецепторов увеличивают силу сокращения миокарда желудочков крыс после хронического введения изопротеренола и флуоксетина. Положительный инотропный эффект агониста 5-НТ2в рецепторов выше в правом, а серотонина в левом желудочке крыс. 2. У крыс после хронического введения изопротеренола и флуоксетина норадреналин увеличивает силу сокращения левого желудочка и снижает ее в правом желудочке. Отрицательная инотропная реакция в 2-3 раза выше, чем положительная.

ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТА ИФАВИРЕНЦ НА ИНФИЦИРОВАНИЕ КЛЕТОК РЕПЛИКАЦИОННО-ДЕФЕКТНЫМ РЕКОМБИНАНТНЫМ ЛЕНТИВИРУСОМ Мартынова Е.В.1, Головин Е.В.1, Блатт Н.Л.2, Галеев О.Р.1, Ризванов А.А.1, Казанский государственный медицинский университет, Казань (Россия), Казанский государственный университет, Казань (Россия).

E-mail: martynova85@gmail.com Одним из эффективных методов генной доставки in vitro и in vivo служат рекомбинантные ретровирусы, в то числе созданные на основе лентивируса ВИЧ.

Современные рекомбинантные вирусные системы основаны на использовании многокомпонентных плазмидных систем. Благодаря раздельному кодированию вирусных генов на отдельных плазмидах и удалению вирусных генов, отвечающих за патогенез в организме хозяина, получаемые рекомбинантные вирусы не способны к самостоятельной репликации, что значительно снижает их биологическую опасность. Применение репликационно дефектных лентивирусов позволяет проводить исследования противовирусной активности некоторых классов препаратов в стандартной лаборатории 2 класса биобезопасности.

Цель работы: определение влияния антиретровирусного препарата Ифавиренц (ИФВ) на инфицирование клеток человека in vitro рекомбинантным лентивирусом, экспрессирующим зеленый флуоресцентный белок GFP.

Материалы и методы: концентрация действующего вещества в сыворотке крови человека после однократного приема препарата в терапевтической дозе получила обозначение 1х Cmax. ИФВ добавляли в культуру клеток в концентрации 47 мкг/мл (10х Сmax), 4,7 мкг/мл (1х Cmax) или 0,47 мкг/мл (0,1х Cmax) и клетки инфицировали рекомбинантным лентивирусом в различных концентрациях. Подсчет доли инфицированных клеток осуществляли c помощью проточного цитофлуориметра FACSCalibur (Becton Dickinson).

Результаты и обсуждение: Эффективность вирусной инфекции по отношению к контрольному образцу составила 99,6%, 98,3% и 56,4% при концентрациях ИФВ 10х Сmax, 1х Cmax и 0,1х Cmax соответственно. Таким образом, предложенная нами in vitro тест-система применима для оценки фармакологической активности антиретровирусных препаратов.

УЧАСТИЕ ДЕНДРИТНЫХ КЛЕТОК В СОХРАНЕНИИ БЕРЕМЕННОСТИ Матвеичев А.В.1,2, Талаев В.Ю.1, Талаева М.В.1, Цатуров М.Э.1,2, Ломунова М.А.1, Заиченко И.Е.1, Бабайкина О.Н. Нижегородский НИИ эпидемиологии и микробиологии им. акад. И.Н. Блохиной, Нижний Новгород (Россия), ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород (Россия).

E-mail: alex_norton@mail.ru Беременность является уникальным иммунологическим феноменом, так как в ее ходе в организме матери сохраняется плод, несущий 50% чужих для матери отцовских генов. Данная работа посвящена исследованию роли дендритных клеток (ДК) в реализации механизмов, обеспечивающих толерантность иммунной системы матери и плода. Исследования проводили в экспериментальных моделях фето-плацентарного микроокружения in vitro. ДК получали из моноцитов крови культивированием с интерлейкином-4 и гранулоцитарно-макрофагальным колониестимулирующим фактором. Часть ДК созревала в присутствии клеток цитотрофобласта (ТР). Культуры ДК, росшие с ТР (ДК-ТР), содержали большое количество вытянутых веретенообразных клеток, в отличие от ДК, росших без ТР. Культуры ДК-ТР демонстрировали фенотипическую незрелость - снижение экспрессии молекул HLA-DR и процента клеток, несущих ее, повышение экспрессии моноцитарного маркера CD14. ДК, росшие без ТР, как и ДК-ТР, одинаково эффективно стимулировали пролиферацию аллогенных лимфоцитов. В то же время созревание ДК в присутствии ТР подавляло их способность стимулировать продукцию интерферона- - ключевого цитокина, управляющего наиболее опасными для плода клеточными формами иммунных реакций. Т-лимфоциты, стимулированные ДК-ТР, сохраняют экспрессию CD62L, что ограничивает маршрут их рециркуляции и возможность участия в конфликте матери и плода. Таким образом показано, что ДК участвуют в формировании цитокинового сдвига беременности и изменении миграции Т-клеток. Полученные данные открывают возможность поиска новых средств для лечения патологий беременности. Работа поддержана РФФИ, проекты 07-04-00244, 10-04-00304-а.

РЕАКЦИИ НЕЙРОНОВ ПАРАВЕНТРИКУЛЯРНОГО ЯДРА В УСЛОВИЯХ ВЫСОКОЧАСТОТНОЙ СТИМУЛЯЦИИ НИЖНЕГО ВЕСТИБУЛЯРНОГО ЯДРА Мелкумяан К.В., Саркисян С.Г., Минасян С.М.

Ереванский государственный университет, Ереван (Армения).

E-mail: karine.melkumyan@gmail.com Целью данной работы является изучение характера реакции нейронов паравентрикулярного ядра на высокочастотную стимуляцию нижнего вестибулярного ядра. Эксперименты проводились в условиях острого опыта на анестезированных крысах. В электрофизиологических исследованиях производили отведение спайковой активности одиночных нейронов ПВЯ на двухсторенную стимуляцию нижнего вестибулярного (НВЯ) ядер с ипси- и контралатеральной стороны. Высокочастотную (100Гц, 1 сек.) стимуляцию (ВЧС) с параметрами тока (0,05 мс, 0,16-0,20 мВ) производили биполярными электродами, экстраклеточную регистрацию - стеклянным микроэлектродом с кончиком 1-2 M заполненным 2 М NaCl. Регистрацию и анализ импульсной активности производили с помощью специально разработанной математической on-line программе. Анализ полученных данных производили по специально разработонному алгоритму на основе перистимульных гистограмм спайкового потока в реальном времени. Использованно так же программа выводяшяя “растер” пре- и постстимульного спайкинга активности единичных нейронов, распредиленных в реальном времени и построенных на их основе суммарных и/или усредненных гистофрамм. Исследовано 91 клетка ПВЯ, при стимуляции ипси- и контралатеральной стороны были ареактивнымы соответсвенно 8,8%, и 9,9%. Анализ характера реакции нейронов ПВЯ на тетаническую стимуляцию ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА выявил высокий процент посттетанической депрессии ипси-НВЯ - 35% и с контра НВЯ - 52,4%, а постетанических возбудительных проявлений выявлено соответсвенно ипси-НВЯ - 15,6%, и контра-НВЯ - 18,3%. Однако, тетаническая потенцация с последующим возбудительным или тормозным эффектом выявлено только при ВЧС исилатерального НВЯ, а на контралатеральной стороне таковые отсутствуют. Полученные результаты обсуждаются.

ВЛИЯНИЕ КАЛИФЕНА НА СТРЕССОРНЫЕ НАРУШЕНИЯ МЕТАБОЛИЗМА У МЕДИЦИНСКИХ РАБОТНИКОВ Мерзляков В.Ю., Кушнерова Н.Ф.

Тихоокеанский океанологический институт ДВО РАН, Владивосток (Россия).

E-mail: Vum77@mail.ru Известно, что одним из основных механизмов в развитии нарушений, снижающих резервы здоровья при стрессе, является активация перекисного окисления липидов и рассогласование каскада химических реакций антиоксидантной системы, изменения углеводно-липидного обмена, сопровождаемые сдвигом окислительно-восстановительного равновесия и нарушением энергообеспечения организма. Целью работы явилось профилактическое использование биологически активной добавки (БАД) “Калифен” из калины (патент № 2220614, cвидетельство на товарный знак № 228327, ТУ 9168-079-00480052-07) в процессе профессиональной деятельности медицинских работников. Проведено обследование женщин врачей (хирурги, анестезиологи) лечебно-профилактических учреждений г. Владивостока в возрасте 40-50 лет, подвергающихся в течение рабочего дня комплексному стрессовому воздействию (химический, психоэмоциональный, напряженность трудового процесса и др.), которым после биохимического обследования крови было предложено ежедневно утром после еды принимать в течение 6-ти недель по 2,5 мл БАД “Калифен” (они составили 3-ю группу). В плазме крови врачей отмечалась повышенная активность супероксиддисмутазы (СОД), что составляло 828,21±4,98 ед по сравнению с 764,26±5,87 ед в контроле (Р0,001) и сниженый уровень антирадикальной активности (АРА) (10,84±0,10 ед тролокса против 12,27±0,09 ед тролокса в контроле, Р0,001). Также наблюдалось увеличение концентрации малонового диальдегида (МДА) (4,09±0,15 нмоль/мл против 2,38±0,08 мкмоль/л в контроле;

Р0,001),что свидетельствует об активации перекисного окисления липидов и повышении проницаемости мембран. После приема БАД “Калифен” снизилась активность СОД, АРА и понизилась концентрация МДА. Для сохранения работоспособности и здоровья медицинских работников целесообразно проводить фармпрофилактику с помощью БАД, обладающих антиоксидантными и антирадикальными свойствами.

ИЗУЧЕНИЕ ОСНОВНЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ФИЗИЧЕСКОГО РАЗВИТИЯ ДЕТЕЙ МЛАДШЕГО ШКОЛЬНОГО ВОЗРАСТА Минасян А.М., Григорян Г.Б.

Арцахский государственный университет, Степанакерт (НКР).

E-mail: as_minasyan@mail.ru, Физическое развитие человека начинается с момента его рождения и достигает своего расцвета к 20-30-и годам. Каждый день, общаясь с детьми, взрослые оказываются ответственны за их нормальное физическое развитие.

Исходя из этого целью настоящей работы явилось изучение показателей ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА физического роста и развития мальчиков и девочек младшего школьного возраста (5-9 лет), в том числе массы тела, роста, обхвата грудной клетки и головы и, в соответствии с этим, изменение всех этих показателей у детей того же возраста в разные годы (1986, 1997, 2007 гг.) и сопоставление этих данных.

Большое внимание было уделено факторам (недоедание, ненормальные условия проживания в бомбоубежищах в течении длительного периода, стресс), повлиявшим на рост и развитие детей вышеуказанных возрастов в послевоенные годы. На основании полученных данных и их анализа были сделаны выводы, что:

1. При сравнении данных по массе тела, полученных в 2007 году с данными и 1997 годов, у 5-9-и летних мальчиков и девочек наблюдались явления акселерации, при этом у девочек увеличение этого показателя более слабое, что объясняется разницей в их половой принадлежности. 2. Уменьшение показателей роста при сравнении данных 1986-го и 1997-го годов говорит о децелерации у детей вышеуказанной возрастной группы (что объясняется воздействием указанных факторов), и акселерации при сравнении данных 1997 го и 2007-го годов. 3. Обхват грудной клетки у мальчиков 5-9-и лет изменялся неравномерно: особое усиление роста наблюдалось в 7 лет, что обусловлено характерными в этом возрасте физиологическими особенностями (период второго вытягивания). У девочек при сравнении тех же данных за 1986 и годы, наблюдалось явление децелерации, то есть уменьшение этого показателя роста и развития, и его усиление в период с 1997-го по 2007-й годы. 4. Изменение обхвата головы у мальчиков и девочек происходило одинаково: в период с 1986-й по 1997-й годы они выравниваются, а в 2007 году наблюдалось явное изменение в сторону увеличения этого показателя.

Полученные данные говорят о явном негативном воздействии вышеуказанных факторов (недоедание, ненормальные условия проживания в период войны, плохие социальные условия в послевоенные годы, стресс) на рост и развитие детей младшего школьного возраста на территории нашей республики, что, несомненно, может отразиться на физическом и психическом здоровье будущих поколений.

ВЛИЯНИЕ УЛЬТРАФИОЛЕТОВОГО ИЗЛУЧЕНИЯ НА ПРОЛИФЕРАЦИЮ НЕКОТОРЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ Мухаметзянова Э.Р., Садилова П.Ю., Кузяев М.В.

Ижевский государственный технический университет, Ижевск (Россия).

E-mail: p_sadilova@mail.ru В последнее время в различных отраслях медицины, в частности в косметологии, широкое применение получило ультрафиолетовое облучение.

Однако, несмотря на факты положительного воздействия УФО, выявляются случаи серьезных негативных последствий облучения, механизмы которых недостаточно исследованы. Целью данного исследования явилось выявление закономерностей влияния дозы и времени воздействия на пролиферативные процессы некоторых микроорганизмов, таких как плесневые грибы, Candida albicans, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, а также Pseudomonas aeruginosa.

В качестве ультрафиолетового источника был выбран стандартный физиотерапевтический “Облучатель ртутно-кварцевый ОРК-21”, применяемый с различными терапевтическими целями в медицинской практике, излучаемый видимый свет, доля которого составляет 41% от общего потока излучения, и УФ лучи всех трех диапазонов, причем на UV-A приходится 19%, на UV-В - 22-25,5% и на UV-С - 15%.

При воздействии УФО на колонии указанных микроорганизмов в течение 10 минут были получены следующие результаты. Так, количество колоний ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА плесневых грибов под воздействием УФО облучения увеличилось более чем в раза, при этом скорость их созревания также оказалась в 2 раза быстрее по сравнению с контролем. Скорость роста Candida albicans в опыте по сравнению с контролем не изменилась, но при этом количество колониеобразующих единиц ее стало в 2 раза меньше после облучения УФО. Колониеобразующая активность Escherichia coli и Staphylococcus aureus увеличилась в 10 и 103 раз соответственно по сравнению с контрольной серией после воздействия на них ультрафиолетового облучения. Наиболее чувствительна к губительному действию УФО оказалась синегнойная палочка, колониеобразующая активность которой уменьшилась после облучения в течение 10 минут по сравнению с контролем в 2 раза.

Таким образом, ультрафиолетовое облучение по-разному влияет на пролиферативные процессы различных микроорганизмов, что непременно должно учитываться в практической медицине.

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СОСТОЯНИЯ СИСТЕМЫ ТУЧНЫХ КЛЕТОК ПРИ ДЕЙСТВИИ НА ОРГАНИЗМ ЭКСТРЕМАЛЬНЫХ ФАКТОРОВ Мухлынина Е.А.

Институт иммунологии и физиологии УрО РАН, Екатеринбург (Россия), Уральский государственный университет им. А.М. Горького, Екатеринбург (Россия).

E-mail: eshengals@mail.ru Участие мастоцитов в развитии адаптационного синдрома было показано еще в прошлом веке Г. Селье. Однако механизмы реализации компенсаторных реакций тучными клетками остаются до конца не изученными.

Цель: изучить влияние экстремальных воздействий на состояние морфофункциональной активности тучных клеток в различных органах.

Методы исследования: в качестве экстремальных воздействий использовали острую массивную кровопотерю, иммобилизацию и воспаление.

Через 6 часов и 2 суток после воздействия у крыс определяли плотность, коэффициент дегрануляции тучных клеток в различных органах (кишечник, тимус, кожа, надпочечники).

Полученные результаты: Реакция тучных клеток разных органов на воздействия неодинакова. При этом разные воздействия вызывают в одних и тех же органах однонаправленные изменения состояния мастоцитов. Так все три воздействия вызывают снижение плотности тучных клеток в тимусе и коже.

Коэффициент дегрануляции мастоцитов в данных органах при этом повышается.

В кишечнике же, напротив, после всех трех воздействий наблюдается резкое повышение и числа тучных клеток и их функциональной активности. В надпочечниках после кровопотери и иммобилизационного стресса отмечается повышение плотности мастоцитов. Коэффициент дегрануляции при этом остается на уровне контроля.

Заключение: Разнонаправленные воздействия вызывают сходные изменения в состоянии системы тучных клеток. Повышение количества тучных клеток в органах предположительно связано с их миграцией из органов созревания и депонирования. Снижение плотности мастоцитов может быть обусловлено как уходом клеток из органа, так и их разрушением.

ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА ОБЩАЯ ОЦЕНКА МУКОЦИЛИАРНОГО ТРАНСПОРТА ПИЩЕВОДА ЛЯГУШКИ ОЗЕРНОЙ В СИТУАЦИИ ЭЛЕКТРОМАГНИТНОЙ СТИМУЛЯЦИИ ПОСЛЕ ПРЕДВАРИТЕЛЬНОЙ ХИМИЧЕСКОЙ ОБРАБОТКИ Нехороший А.А.

Педагогический институт Южного федерального университета, Ростов-на-Дону (Россия).

E-mail: momigel@yandex.ru Живые организмы обладают сложными и уникальными способностями и взаимодействуют с окружающей средой, что может быть успешно использовано в мониторинге окружающей среды. Для изучения антропогенного загрязнения окружающей среды используются самые разнообразные методы и технологии, выбор которых зависит от цели и особенностей научного исследования. Нами рассматривается возможность использования основных параметров активности мерцательного эпителия пищевода лягушки (как модели), для изучения влияния антропогенного загрязнения на естественные экосистемы. Следовательно, целью нашей работы явилось изучение активности мукоцилиарного транспорта (МЦТ) пищевода лягушки озерной (Rana ridibunda) при некоторых химических и электромагнитных воздействиях.

Исследовано влияние соляной, фосфорной и уксусной кислот различных концентраций, а также электромагнитного излучения (с частотами 1, 5, 10 и 15 Гц) на активность МЦТ. Выявлено, что низкие концентрации кислот приводят к усилению МЦТ, а при повышении кислотности происходит постепенное снижение скорости МЦТ пищевода. Причем слабые кислоты более интенсивно тормозят скорость МЦТ. При сочетании химического воздействия с электромагнитной стимуляцией возникает достаточно явное восстановление активности МЦТ.

Таким образом, проделанная работа указывает на возможность использования двигательной способности мерцательного эпителия в сферах мониторинга антропогенного влияния на состояние окружающей среды.

РАСПРЕДЕЛЕНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ТИПОВ ПОТЕНЦИАЛ-ЗАВИСИМЫХ Са2+ КАНАЛОВ И ИХ РОЛЬ В ПРОЦЕССЕ СЕКРЕЦИИ КВАНТОВ МЕДИАТОРА В МОТОРНОМ НЕРВНОМ ОКОНЧАНИИ ХОЛОДНОКРОВНЫХ Нуруллин Л.Ф., Ценцевицкий А.Н., Маломуж А.И.

Учреждение Российской академии наук Казанский институт биохимии и биофизики КазНЦ РАН, Казань (Россия).

E-mail: lenizn@yandex.ru Общепринято, что процесс освобождения медиатора в моторных нервных окончаниях холоднокровных запускается активацией N-типа Са2+-каналов. На протяженном двигательном нервном окончании лягушки существует проксимо дистальный градиент параметров квантовой секреции медиатора, выражающийся в понижении по ходу терминали квантового состава, минимальной синаптической задержки и асинхронности секреции.

Предположительно, такой градиент может быть обусловлен особенностями распределения на нервном окончании потенциал-зависимых Са2+-каналов различных типов и их разным вкладом в кинетику секреции медиатора в разных участках нервной терминали. Целью работы было изучение представительства потенциал-зависимых Са2+-каналов, плотности их распределения и роли в процессе секреции квантов медиатора в проксимальном и дистальном участках на нервно-мышечном синапсе лягушки. С использованием иммунофлуоресцентного метода было установлено, что кроме N-типа Са2+ каналов на синапсе лягушки присутствуют также каналы P/Q-типа. Плотность ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА распределения Са2+-каналов N- и P/Q-типов вдоль нервной терминали была одинаковой. Под действием специфических блокаторов Са2+-каналов N-, L- и P/Q типа, в каждой отдельной серии экспериментов, происходило увеличение синхронности вызванного квантового освобождения и уменьшение квантового состава, как в проксимальном так и дистальном участках терминали. При этом в присутствии блокаторов проксимо-дистальный градиент параметров секреции сохранялся. Таким образом, различия в параметрах квантовой секреции медиатора между разными участками нервной терминали холоднокровных, не могут быть объяснены особенностями распределения потенциал-зависимых Са2+-каналов разных типов и их различным вкладом в кинетику секреции медиатора.

Работа поддержана грантом РФФИ №09-04-01280.

СДВИГИ ПОКАЗАТЕЛЕЙ БЕЛОЙ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ОЗВУЧЕННЫХ КРОЛИКОВ ПРИ ВСКАРМЛИВАНИИ КОРНЯМИ СОЛОДКИ Оганисян А.О., Оганесян К.Р.

Ереванский государственный университет, Ереван (Армения).

E-mail: khovhannisyan@rambler.ru Длительное воздействие шума высокой интенсивности и частоты влияет на все органы - системы целостного организма, вызывая разнообразные изменения. По числу предлагаемых и используемых лечебных препаратов, среди многочисленных лекарственных растений, на первое место вышла солодка голая (Glycyrrhiza glabra L.). Целью представленной работы являлось изучение изменения показателей белой периферической крови кроликов в условиях шума при вскармливании корнями солодки (КС). Экспериментальные животные подвергались воздействию стабильного шума 1000 Гц с уровнем интесивности 114 дБ, в течении 30 дней по два часа ежедневно. В пищу добавляли корень солодки из расчета 150 мг/100 г массы тела. Анализ полученных данных показал, что при 30-дневном воздействии шума наблюдалось повышение абсолютного количества лейкоцитов периферической крови, на 10, 20, 30 дни исследования составляя соответственно 87,5% (p0,001);

22,3% (p0,05);

55,8% (p0,001) по сравнению с нормой, за счет повышения количества сегментоядерных нейтрофилов, моноцитов и лимфоцитов. Также наблюдалось гиперсегментация сегментоядерных нейтрофилов и цитолиз. Комбинированное 30-дневное воздействие шума и КС приводило к повышению количества лейкоцитов на 10, и 30 дни исследования на 56,8% (p0,001);

20,0% (p0,001) и 31,6% (p0,001) соответственно. Однако количество лимфоцитов оставалось ниже по сравнению с исходными данными. В данной группе превалирует влияние корней солодки.

Таким образом, наблюдаемое умеренное изменение направлено на поддержание лейкоцитарного гомеостаза периферической крови в условиях длительного воздействия стресс фактора - шума.

СТРЕССОВЫЕ ЭФФЕКТЫ ХИМИЧЕСКИХ ТОКСИНОВ В НИЗКИХ КОНЦЕНТРАЦИЯХ Парфенюк С.Б., Глушкова О.В., Новоселова Е.Г.

Институт биофизики клетки РАН, Пущино (Россия).

E-mail: lana_kras@mail.ru Исследовали воздействие in vitro и in vivo низких концентраций трех химических веществ, которые часто являются причиной загрязнения окружающей среды при техногенных авариях (аммиак, диэтиловый эфир, уксусная кислота), и которые можно применять как в качестве газов при воздействии на целый ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА организм животного, так и в качестве жидкостей, добавляемых непосредственно к средам культивирования клеток. Такой принцип экспериментального исследования дает возможность наиболее адекватно промоделировать реальную ситуацию экологического неблагополучия. Использовали предельно допустимые для рабочих зон концентрации химических веществ. Воздействие каждого из трех химических веществ на изолированные перитонеальные макрофаги и лимфоциты селезенки мышей-самцов линии NMRI вызывало увеличение продукции ряда цитокинов, особенно ФНО- и ИФН-, экспрессию индуцибельных форм белков теплового шока (HSP72 и HSP90-), а также активацию сигнальных каскадов NF-B и SAPK/JNK. Продукция оксида азота (NO) в макрофагах повышалась при добавлении только одного из трех веществ (аммиака) в среду культивирования клеток. Кроме того, в присутствии каждого их трех токсинов наблюдали стимуляцию экспрессии рецепторного белка TLR4.

При экспозиции мышей в специально сконструированной герметичной камере с примесями химических токсинов было показано увеличение продукции цитокинов, стрессовых и сигнальных белков в клетках при воздействии каждого из трех используемых токсинов в предельно-допустимых концентрациях. Также как в экспериментах in vitro, продукция оксида азота активировалась только в присутствии атмосферных примесей аммиака. Полученные результаты указывают на экологическую опасность химических примесей даже при столь низких концентрациях, которые, тем не менее, вызывают развитие стрессового ответа у животных.

ИЗМЕНЕНИЯ В ОКИСЛИТЕЛЬНОМ МЕТАБОЛИЗМЕ ФАГОЦИТОВ КАК ФАКТОР РИСКА РАЗВИТИЯ ЛИМФОТОКСИЧЕСКИХ ЭФФЕКТОВ ВОЗДЕЙСТВИЯ ИЗЛУЧЕНИЙ СОТОВЫХ ТЕЛЕФОНОВ GSM 900MHz Петренёв Д.Р., Якушев Д.Л., Гунькова Н.В., Конопля Е.Ф.

Институт радиобиологии НАН Беларуси, Гомель (Беларусь).

E-mail: danse@tut.by Эпидемиологические исследования подтверждают наличие связи между хроническим воздействием электромагнитного излучения (ЭМИ) сотовых телефонов и увеличением частоты онкологических заболеваний (Hardell, Sage, 2008). Однако, вопросы понимания механизмов реализации канцерогенных эффектов ЭМИ далеки от разрешения.

Предположительно, ключевыми механизмами, связующими воздействие ЭМИ и канцерогенез, являются нейроэндокринные реакции организма и воспаление, сопровождающиеся высвобождением цитокинов, гормональным дисбалансом, повышенной клеточной гибелью и усилением продукции активных форм кислорода (АФК) и азота (АФА). В связи с этим целью исследования было изучить возможные лимфотоксические эффекты длительного воздействия ЭМИ in vivo и охарактеризовать их связь с изменениями в окислительном метаболизме тканевых фагоцитов и с гормональными реакциями организма.

Исследование выполнено на 59 самцах крыс Вистар в возрасте 2,5 месяца на момент начала эксперимента. Животных в течение 14 дней подвергали действию переменного электромагнитного поля, имитирующего сигнал сотового телефона стандарта GSM в режиме разговора (35 канал, 897,2 МГц, 0,2-0, мВт/см2). Облучение производили в дневное время двумя фракциями по 4 часа с перерывом в 1 час. Животных выводили из эксперимента на восьмые сутки после начала облучения и через 1, 7, 14, 21 и 28 суток после завершения воздействия.

Контролем служили интактные животные того же возраста и пола.

Для сравнения пропорций в экспериментальной и контрольной группах ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА применяли преобразование и точный тест Фишера. В группе воздействия ЭМИ у 51,7% животных отмечали превышение 95% доверительного интервала уровня апоптотических лейкоцитов, определенного в контрольной группе, относительный риск составил 3,8 (P=0,0022;

1,46-10,40% CI). При этом динамика изменения показателя не была монотонной и демонстрировала наличие двух экстремумов.

Первое двукратное по сравнению с контролем повышение через неделю после начала воздействия ЭМИ с последующим восстановлением к окончанию воздействия, вероятно, соответствует прямому лимфотоксическому действию ЭМИ. Повторное увеличение этого показателя вдвое через 15 дней после отмены действия фактора, очевидно, связано с опосредованными эффектами ЭМИ. Так динамика уровня апоптотических лимфоцитов крови в пострадиационный период характеризовалась нормализацией показателей к окончанию периода наблюдения и совпадала с динамикой изменения концентрации кортикостерона и тестостерона в сыворотке крови и уровнем продукции АФА (корреляция по Пирсону r=0,398;

P=0,049;

0,003-0,685 95% CI) и АФК (корреляция по Пирсону r=0,461;

P=0,020;

0,081-0,725 95% CI) резидентными перитонеальными макрофагами. При этом у животных с повышенным уровнем продукции АФА вероятность регистрации повышенного уровня апоптотических лимфоцитов в крови была в 2,01 (P=0,149;

0,99-4,10, 95% CI) раза выше, чем в контрольной группе.

ВЛИЯНИЕ УГЛЕРОДНЫХ НАНОТРУБОК В СОСТАВЕ АЭРОЗОЛЯ НА ТЕЧЕНИЕ ХРОНИЧЕСКОГО ТУБЕРКУЛЕЗА У МЫШЕЙ, ЗАРАЖЕННЫХ ШТАММОМ H RV Полежаева О.В., Потапов В.Д., Фирстова В.В., Грищенко Н.С., Мочалов В.В.

Государственный научный центр прикладной микробиологии Федеральной службы Роспотребнадзора, Оболенск (Россия).

E-mail: polezhaevaov@mail.ru При исследовании туберкулезной инфекции большое значение приобретает изучение процессов активации иммунитета под действием химических или физических факторов. В ряде работ на культурах клеток и в макроорганизме, было доказано активирующие действие углеродных нанотрубок на клеточные реакции. Целью нашей работы являлось изучение действия нанотрубок углерода, в составе аэрозоля на установившееся равновесие количества микобактерий шт. H37 RV в легких хронически инфицированных мышей линии С57bl.

Результаты эксперимента по ингибированию роста шт. H37 Rv in vitro после инкубации в физрастворе, содержащем 10 мкг/мл углеродных нанотрубок, в течение 1 часа не показали бактерицидный эффект наночастиц по отношению к контрольному высеву на плотную питательную среду 7Н11 без их добавления.

Для изучения возможного эффекта аэрозоля, содержащего углеродные нанотрубки, были проведены эксперименты на хронически больных мышах линии С57bl, зараженных лабораторным штаммом H37 Rv.

Хронически зараженные мыши были однократно обработаны в течение 20 минут в аэрозольной камере Гласс-Колл суспензией, содержащей 0,8 мкг/мл углеродных нанотрубок, в динамическом режиме работы камеры при расчетной концентрации наночастиц 8 х 10-4 мкг/литр воздуха. Через 24 часа мыши опытной и контрольной групп подвергались эвтаназии. Анализ результатов проводили методом высева микроорганизмов из гомогената легких на плотную питательную среду 7Н11 и подсчета количества колониеобразующих единиц (КОЕ).

Полученные результаты показали эффект, выразившийся в том, что в опытной группе, обработанной аэрозолем с углеродными нанотрубками, количество КОЕ ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА снижалось на 50%.

ПЕНИЦИЛЛАМИН ИНГИБИРУЕТ ОБРАЗОВАНИЕ ФИБРИЛЛ ИЗ БЕТА-2 МИКРОГЛОБУЛИНА ЧЕЛОВЕКА IN VITRO Поляков Д.С.1, Грудинина Н.А.1, Соловьёв К.В.1, Егоров В.В.2, Шавловский М.М. НИИ экспериментальной медицины СЗО РАМН, Санкт-Петербург (Россия), НИИ гриппа СЗО РАМН, Санкт-Петербург (Россия).

E-mail: dipol@mail.org Бета-2-микроглобулин (B2M) - легкая цепь главного комплекса гистосовместимости I класса. С поверхности клеток этот белок поступает в кровь и деградирует в клетках проксимальных канальцев почек. У больных с хронической почечной недостаточностью такая элиминация B2M нарушена, но и процедура гемодиализа не обеспечивает достаточной очистки плазмы крови от B2M. Длительная персистенция высоких концентраций B2M считается основным условием формирования амилоидных фибрилл, которые вызывают осложнение гемодиализа - бета-2-микроглобулиновый амилоидоз. Для лечения и профилактики этого заболевания необходим безопасный для человека способ ингибирования фибриллогенеза или способ деполимеризации фибрилл.

Пеницилламин (ПА) - комплексообразующее соединение, образующее хелатные комплексы с ионами меди, ртути, свинца, и др. В качестве лекарственного средства, ПА применяют при Болезни Коновалова-Вильсона, цистинурии, ревматоидном артрите, отравлении свинцом. Мы провели серию экспериментов для оценки способности ПА ингибировать образование амилоидных фибрилл из мономера В2М. Рост фибрилл происходил в 100 mM глицин-HCl буфере (pH 2,0) или в 50 mM Na-фосфатном буфере (pH 7,0) без ПА или в присутствии 0,5-2- mM ПА. Концентрация В2М была 0,5 мг/мл. Кроме того, был проведен эксперимент, в котором к готовым фибриллам добавляли 10 mM ПА.

После 7-дневной инкубации при 37°С относительное количество фибрилл оценивались с помощью анализа флуоресценции комплексов фибрилл с тиофлавином Т. Также была проведена атомно-силовая микроскопия образцов.

Вывод: ПА ингибирует образование амилоидных фибрилл при кислых и физиологических pH in vitro. ПА деполимеризует амилоидные фибриллы при кислых pH. ПА может быть многообещающим препаратом для лечения и/или профилактики В2М амилоидоза, и, возможно, других амилоидозов.

Работа поддержана грантом РФФИ № 09-04-00788.

ГУМОРАЛЬНЫЙ ИММУННЫЙ ОТВЕТ НА ФИБРИЛЛЫ БЕТА-2 МИКРОГЛОБУЛИНА ЧЕЛОВЕКА Поляков Д.С., Алейникова Т.Д., Шавловский М.М.

НИИ экспериментальной медицины СЗО РАМН, Санкт-Петербург (Россия).

E-mail: dipol@mail.org Бета-2-микроглобулин (B2M) нековалентно связан с тяжелой цепью молекул МНС I класса. Поступающий в плазму крови белок деградирует в клетках проксимальных почечных канальцев. У больных на хроническом гемодиализе выведение B2M практически не происходит, и его концентрация в крови возрастает в десятки раз, что приводит к увеличению вероятности появления аномальных конформаций белка и образования амилоидных фибрилл. Бета-2 микроглобулиновый амилоидоз (АB2M) является серьезным осложнением гемодиализа.

Получение антител, специфически реагирующих с амилоидными ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА фибриллами, но не с мономером, из которого они получены, представляется актуальной задачей. Во-первых, такие антитела могут быть полезны для разработки малоинвазивного метода ранней диагностики АB2M. Во-вторых, это позволит уточнить некоторые иммунологические аспекты АB2M. С этой целью мы предприняли попытку длительной гипериммунизации кроликов амилоидными фибриллами, сформированными in vitro. Фибриллы, полученные из 100 мкг рекомбинантного B2M человека, смешивали с полным адъювантом Фрейнда (Sigma) в соотношении по объему 10:1. Полученную смесь вводили кролику внутрикожно. Вторая и последующие иммунизации проводились аналогично с интервалом 2 недели, только при приготовлении препарата смешивание происходило с неполным адъювантом Фрейнда. Кровь брали на 10-ый день после каждой иммунизации и методом высаливания сульфатом аммония получали IgG.

Та фракция IgG, которая специфически реагируюет с мономерным B2M, “истощалась” путем образования иммунных комплексов с B2M, адсорбированном на твердой фазе. К сожалению, нам пока не удалось полностью удалить эту фракцию, и полученные антитела взаимодействуют как с фибриллами B2M, так и с его мономером. Однако “истощенные” кроличьи IgG, при их использовании в DOT-BLOT’е, позволяют получить несколько более интенсивную окраску фибрилл B2M, чем мономера.

Работа поддержана грантом РФФИ № 09-04-00788.

ИССЛЕДОВАНИЯ УСТОЙЧИВОСТИ СУСПЕНЗИЙ НАНОДИСПЕРСТНОГО ДИОКСИДА ЦЕРИЯ В УСЛОВИЯХ БИОЛОГИЧЕСКОГО ОКРУЖЕНИЯ Попов А.Л.1,2,Селезнёва И.И.2,Гришина Е.А. Пущинский государственный университет, Пущино (Россия), Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино (Россия).

E-mail: toshka_bf@mail.ru Диоксид церия является одним из самых сильных антиоксидантов:

разовая доза наночастиц диоксида церия защищает клетки от свободных радикалов больше,чем разовое или многократное использование витамина Е, n ацетилцистеина или мелатонина. Ранее установлено, что он может выступать в качестве радио и нейропротекторного средства, препятствовать гибели фоторецепторных клеток вследствие окислительного стресса. Высказано предположение о перспективности использования оксида церия для лечения диабета, болезни Альцгеймера и Паркинсона, атеросклероза и инсультов.

Механизм защитного действия наночастиц диоксида церия аналогичен действию супероксиддисмутазы, при этом диоксид церия является материалом, проявляющим свои уникальные свойства именно на наноуровне. Было установлено, что антиоксидантная актиывность наночастиц снижается с увеличением концентрации, что объясняется возможной агломерацией частиц СеО2 при высоких концентрациях. Учитывая то, что при использовании препараты нанодисперсного церия вводятся в кровоток или в ткани животных, встает вопрос о необходимости исследования устойчивости данных препаратов в биологических средах.

Целью настоящей работы было проведение исследования устойчивости суспензий нанодисперстного диоксида церия в условиях биологического окружения. Для исследования было взято 2 образца: 1.) СеО2 стабилизированный цитратом натрия 2.) СеО2 стабилизированного аскорбатом натрия. При проведении исследования суспензию наночастиц разводили в 25, 50 и 100 раз водой, культуральной средой F-12 и культуральной средой F-12, содержащейи 5% ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА сыворотку FBS. Размер наночастиц и их агрегированность определяли с помощью наносайзера N5 Submicron Particle Size Analyser.

Было показано, что добавление образцов наночастиц в воду и в культуральную среду F-12 в разведении в 25 и 50 раз, приводит к агрегации наночастиц с начального размера 5-7 нм до 18-25 нм. Также обнаруживаются агрегаты размером более 1 мкм. При добавлении образцов в среду F-12, содержащую 5% сыворотку FBS, агрегативная устойчивость наночастиц сохраняется. Таким образом,можно сказать, что в условиях биологического окружения белки сыворотки являются фактором, стабилизирующим размер наночастиц.

ИЗМЕНЕНИЕ СПОНТАННЫХ КАЛЬЦИЕВЫХ ОСЦИЛЛЯЦИЙ АСТРОЦИТОВ ГИППОКАМПА КРЫС В ОНТОГЕНЕЗЕ Потанина А.В.1, Калинцева Я.И.1, Пимашкин А.С.1, Семьянов А.В. Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород (Россия), Институт мозга РИКЕН, RIKEN Brain Science Institute, Wako-shi (Япония).

E-mail: potaninaalexa@mail.ru Гиппокамп - это часть головного мозга, которая используется для хранения и обработки пространственной информации. Обучение и память имеют очень сложные молекулярные основы. Постнатальный период развития мозга характеризуется наряду с продолжающимся синаптогенезом высокой пластичностью. В этом процессе важную роль играет возбуждающая нейропередача. Известно, что астроциты могут генерировать кальциевые волны, которые в свою очередь могут запускать освобождение глутамата. Это позволило сделать предположение, что астроциты, возможно, интегрируют нейронную активность.

В данной работе сравнивалась спонтанная активность клеток переживающих срезов гиппокампа молодых и зрелых крыс. Уровень кальция в клетках оценивался по уровню флуоресценции кальциевых красителей. Записи спонтанной активности клеток проводили на лазерном сканирующем микроскопе Zeiss LSM510 NLO Duoscan. Данные обрабатывались с помощью оригинального программного пакета ASTROSCANNER по стэку образов. Было установлено, что частота спонтанных кальциевых осцилляций увеличивается в период постнатального развития крыс, но не изменяется в течение длительного времени (2 часа). Установленный факт, что число отростков астроцитов с возрастом увеличивается, подтверждает ранее полученные данные. Работа поддержана РФФИ (08-02-00724, 08-04-97109, 09-04-01432), 2.1.1/6223 Аналитическая ведомственная целевая программа “Развитие научного потенциала высшей школы” (2009-2010 гг.). Данные эксперименты проводились при поддержке лаборатории Института мозга Рикен, RIKEN Brain Science Institute (Япония), Нижегородской государственной медицинской академии.

ИЗУЧЕНИЕ ФАГОЦИТАРНОЙ АКТИВНОСТИ ГЕМОЦИТОВ МОЛЛЮСКОВ PLANORBARIUS CORNEUS (GASTROPODA, PULMONATA) Прохорова Е.Е.

Российский государственный педагогический университет, Санкт-Петербург (Россия).

E-mail: elenne@mail.ru Основными эффекторными элементами защитной системы пульмонат являются циркулирующие клетки гемолимфы - гемоциты. Показано, что в ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА гемоциты пульмонат представлены двумя клеточными популяциями гранулоцитами и гиалиноцитами - различающимися морфологически и функционально. Важной функциональной характеристикой гемоцитов является их способность к фагоцитозу.

В работе была проанализирована фагоцитарная активность гемоцитов моллюсков Planorbarius corneus из водоемов Ленинградской области.

Для исследования фагоцитарной активности гемоцитов моллюскам вводили суспензии бактерий Escherichia coli и Staphylococcus aureus, меченных флюоресцеин-5-изоционатом ФИТЦ. Затем гемолимфу анализировали на проточном цитометре с использованием канала (ПТМ2), который позволяет оценивать интенсивность флуоресценции. Наибольшая интенсивность флуоресценции гемоцитов выявляется через 3 часа после инъекции. Кишечную палочку фагоцитируют 49%, а стафилококка 78% гемоцитов. При этом кишечную палочку интенсивнее фагоцитируют гиалиноциты, а стафилококка гранулоциты. Микроскопический анализ клеток гемолимфы инъецированных Staphylococcus aureus моллюсков через 30 мин после инъекции также показал наличие в цитоплазме гранулоцитов флуоресцирующих структур, по размерам соответствующих бактериальным клеткам. В гиалиноцитах флуоресцирующих структур не обнаружено. Полученные данные указывают на функциональную специализацию гемоцитов в отношении антигена. Среди моллюсков, которым вводили меченного стафилококка часть особей была заражена трематодами р.

Cothylurus. Оказалось, что гемоциты зараженных моллюсков фагоцитируют бактерий в среднем на 28% меньше, чем незараженных. Полученные результаты могут свидетельствовать о подавлении защитных реакций моллюска паразитом.

ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ ЦИКЛОФОСФАНА НА УРОВЕНЬ НАСЫЩЕНИЯ КРОВИ КИСЛОРОДОМ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ОПУХОЛИ МЕТОДОМ ОПТИЧЕСКОЙ ДИФФУЗИОННОЙ СПЕКТРОСКОПИИ Пряникова Т.И.

Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород (Россия).

E-mail: tatka-echo@mail.ru Основным методом, используемым в настоящее время для оценки эффективности противоопухолевых агентов, является мониторинг изменений объема опухоли до и после лечения. Современной тенденцией является привлечение методов визуализации внутритканевых патологических процессов, таких, как УЗИ, компьютерная, магнитно-резонансная томография. Большинство из этих методов не позволяют получать информацию о физиологических свойствах опухолей, в частности, о степени оксигенации опухоли, параметре, необходимом при оценке ответа опухоли на действие терапии. Оптическая диффузионная спектроскопия (ОДС) - метод визуализации, позволяющий получать информацию об уровне насыщения крови кислородом (StO2), отражающем кислородный статус тканей. Целью работы была оценка возможностей ОДС для исследования динамики степени StO2 в ткани опухоли в ходе химиотерапии. В эксперименте были использованы белые нелинейные крысы с перевитой подкожно опухолью лимфосаркомой Плисса. ОДС исследование осуществлялось на 4-й, 6-й и 10-й день после перевивки опухоли.

Циклофосфан вводили внутрибрюшинно однократно, в качестве контроля использовали интактных животных. Для верификации результатов использовали метод иммуногистохимического анализа с экзогенным маркером гипоксии пимонидазолом. Как показали проведенные эксперименты, в контрольном варианте по мере роста опухоли наблюдалось снижение уровня насыщения ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА крови кислородом. После введения циклофосфана скорость роста опухоли снижалась, на фоне чего наблюдалось повышение уровня насыщения крови.

Таким образом, метод ОДС позволяет не только наблюдать изменения размеров, но и изучать динамику уровня кислородного статуса опухолей.

ИЗУЧЕНИЕ СЕКРЕЦИИ ANP ПРИ ВАЗОРЕНАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕНЗИИ У КРЫС Рахчеева М.В., Бугрова М.Л.

Нижегородская государственная медицинская академия, Нижний Новгород (Россия).

E-mail: maryrax@mail.ru В секреторных миоцитах предсердий синтезируется предсердный натрийуретический пептид (ANP), способный быстро снижать артериальное давление посредством нескольких механизмов. В клетках ANP находится в гранулах 2-х типов: предположительно, гранулы А-типа (имеющие мембрану) являются запасающими, гранулы В-типа (безмембранные) - выделяющими пептид. Секреторная активность кардиомиоцитов в условиях патологии изучена недостаточно. В связи с чем, целью данного исследования явилось изучение выброса ANP-иммунореактивных гранул миоцитами правого предсердия крыс при экспериментальной вазоренальной гипертензии. Вазоренальную гипертензию изучали на двупочечной модели с перевязкой одной левой почечной артерии по Когану на 30 и 60 сутки. Секреторные кардиомиоциты правого предсердия исследовали методами электронно-микроскопической иммуноцитохимии.

Применяли морфометрический метод подсчета гранул в полях зрения (37х мкм2). К 30 суткам развития вазоренальной гипертензии обнаружено снижение количества А-гранул на 53% (p0,001) и увеличение В-гранул на 64% (p0,001) на фоне уменьшения общего количества гранул на 18% (p0,001) относительно исходных значений, что свидетельствовало об активном выбросе ANP в ответ на развившуюся гипертензию. К 60 суткам на фоне снижения артериального давления происходило восстановление общего количества секреторных гранул и преобладание А-типа гранул над В-типом, что свидетельствовало о накоплении предсердного натрийуретического пептида. Таким образом, увеличение выведения ANP из кардиомиоцитов, отмеченное на 30 сутки эксперимента, по видимому, способствовало нормализации артериального давления к 60 суткам и восстановлению количества гранул, содержащих пептид, до исходного уровня.

ЭКЗОГЕННЫЙ ВНЕКЛЕТОЧНЫЙ БТШ70 МЛЕКОПИТАЮЩИХ ОСЛАБЛЯЕТ ПРОЯВЛЕНИЯ СЕПСИСА НА УРОВНЕ КЛЕТКИ И ОРГАНИЗМА Рожкова Е.А.1, Юринская М.М.2, Зацепина О.Г.1, Гарбуз Д.Г.1, Мурашев А.Н.3, Остров В.Ф.3, Маргулис Б.А.4, Винокуров М.Г.2, Евгеньев М.Б. Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, Москва (Россия), Институт биофизики клетки РАН, Пущино (Россия), Филиал Института биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А.

Овчинникова РАН, Пущино (Россия), Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург (Россия).

E-mail: soloveylena@rambler.ru В данном исследовании мы изучили, способны ли препараты БТШ разного происхождения защитить модельных животных (крыс) от эндотоксического шока и изменить ответ миелоидных клеток на введение липополисахаридов (ЛПС). Показано, что используемые препараты БТШ70 могут эффективно защищать организм от эндотоксического шока, значительно ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА уменьшая смертность и восстанавливая как гомеостаз, так и различные показатели гемодинамики. На клеточном уровне препараты БТШ70 значительно ингибировали ЛПС-индуцированную продукцию активных форм кислорода в разнообразных миелоидных клетках и уменьшали продукцию NO макрофагами, которая усиливается под действием ЛПС. В тоже время, прекондиционирование с БТШ70 частично нормализует апаптоз нейтрофилов, нарушенный в результате стимулирования ЛПС и, таким образом, способствует клиренсу нейтрофилов, предотвращая развитие воспаления. Накопленные результаты предполагают, что механизмы, лежащие в основе защитного действия препаратов БТШ использованных в этом исследовании, вероятно, реализуются на уровне мембранных рецепторных комплексов миелоидных клеток, которые представляются главной мишенью воздействия ЛПС. Полученные данные демонстрируют, что внеклеточный БТШ70 млекопитающих может играть важную роль в модуляции и стимуляции внутренних защитных механизмов клеток, что делает этот белок многообещающей основой для создания эффективных противовоспалительных лекарств.

РАЗВИТИЕ ЦИТОБИОХИМИЧЕСКОГО МЕТОДА: ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЛАКТАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ И ВЛИЯНИЕ УСЛОВИЙ ВЗЯТИЯ КРОВИ У КРЫС НА АКТИВНОСТЬ ДЕГИДРОГЕНАЗ В ПОКОЕ И ПРИ ИММОБИЛИЗАЦИОННОМ СТРЕССЕ Романова О.И.1,2, Хундерякова Н.В.1, Симонова М.А.1, Васильева А.А.1, Кондрашова М.Н. Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино (Россия), Филиал МГУ им. М.В. Ломоносова, Пущино (Россия).

E-mail: Nila1988@mail.ru Целью данной работы была разработка цито-био-химического (ЦБХ) определения лактатдегидрогеназы (ЛДГ) и для повышения чувствительности метода к изменениям состояния в организме, исследовать условия взятия крови у крыс на активность сукцинатдегидрогеназы (СДГ),- кетоглютаратдегирогеназы (КДГ).

Эксперименты выполнены на самцах крыс линии Вистар;

весом 165-180 г.

при взятии крови из коготка. Опытных животных подвергали иммобилизационному стрессу в пенале в течение 30 мин. Каждый опыт проводили на группе животных с максимально идентичными параметрами;

по весу, рождены в один день, отнятые от матери в 3 и 5 недель, исследованы в один день, в определенный интервал времени с 9 до 10.30 часов утра. ЦБХ определение активности СДГ, КДГ и ЛДГ проводили с помощью метода (Kondrashova et al., 2009) в лимфоцитах на мазках крови.

В результате проведенных экспериментов были подобраны условия для измерения ЛДГ ЦБХ методом и показана необходимость добавления малоната и НАД в среду инкубации. Была разработана также модель исследования на животных. В состоянии покоя у крыс показатели СДГ, КДГ и ЛДГ низкие, а при стрессе активность СДГ и ЛДГ увеличивалась в 2-4 раза, а активность КДГ была ингибирована. У крыс при 5 недельном вскармливании, в отличие от животных отнятых от матери в возрасте 3 недели уровень ЦБХ показателей;

эндогенных субстратов, СДГ, -КДГ и ЛДГ в два раза выше.

Работа поддержана Федеральной программой “Научные и научно педагогические кадры инновационной России” (Госконтракт 02.740.11.0312).

ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА ВЫЯВЛЕНИЕ ТОПИЧЕСКОГО ПРЕДСТАВИТЕЛЬСТВА МЕЖУШНОЙ ЗАДЕРЖКИ В ИЗОЧАСТОТНЫХ СЛОЯХ ЗАДНЕГО ДВУХОЛМИЯ МОРСКОЙ СВИНКИ Рочева М.И.

Институт физиологии им. И.П. Павлова РАН, Санкт-Петербург (Россия).

E-mail: t4kzpt-@list.ru Одним из ключевых центров слуховой системы при локализации источника звука являются ее среднемозговой отдел - заднее двухолмие. Хорошо известно, что центральое ядро заднего двухолмия имеет ламинарную организацию, которая является структурной основой его тонотопической организации. Целью данного эксперимента было посмотреть, а нет ли какой-либо упорядоченности внутри каждого тонотопического слоя.

Опыты проводились на наркотизированных морских свинках. Во время опыта животное находилось в звукозаглушонной камере. Исследовалась импульсная активность одиночных нейронов заднего холма при бинауральном предъявлении низкочастотных тональных и шумовых сигналов (до 2 кГц) с различной величиной межушной задержки. Нейронная активность регистрировалась с помощью пучка из 16 микроэлектродов.

При погружении в ЗХ разные электроды пучка могут одновременно отводить множество нейронов. При этом нейроны могут различаться между собой не только по настройке на межушную задержку, но и по величине оптимальной частоты, поэтому принадлежность нейрона к определенному изочастотному слою устанавливалась по его оптимальной частоте.

Проведенное исследование показало, что распределение оптимальной межушной задержки в заднем холме обнаруживает тенденцию к увеличению в рострокаудальном направлении. Эта тенденция сохраняется как в медиальной части заднего двухолмия, так и в его латеральной части. Определенная тенденция просматривается также в распределении оптимальных задержек относительно медиального направления. Изменения в этом направлении характеризуются увеличением значений оптимальной задержки при переходе от медиальной и латеральной частей ядра к центру.

Работа поддержана грантом № 09-04-01542.

НАНОСТРУКТУРИРОВАНИЕ СОЕДИНЕНИЙ НУКЛЕИНОВОЙ ПРИРОДЫ В СЛОИСТЫЕ ДВОЙНЫЕ ГИДРОКСИДЫ Рымко А.Н., Бурко Д.В., Квач С.В., Кухарская Т.А., Зинченко А.И.

Институт микробиологии НАН Беларуси, Минск (Беларусь).

E-mail: zinch@mbio.bas-net.by В последнее время большое внимание уделяется разработке систем доставки лекарственных субстанций в клетки-мишени с использованием разнообразных наноразмерных материалов. Среди кандидатов в переносчики лекарственных средств рассматриваются неорганические слоистые двойные гидроксиды (СДГ), из-за их дешевизны, низкой токсичности, высокой емкости, повышенной способности концентрироваться в опухолевых клетках и диссоциировать в кислой среде.

В настоящей работе проверена возможность иммобилизации соединений нуклеиновой природы (аденин, аденозин, АМФ, АТФ, диаденозинтетрафосфат, ДНК Escherichia coli) в СДГ c химической формулой Mg2Al(OH)6NO3·3,6H2O. По данным, полученным при помощи просвечивающей электронной микроскопии, размер полученных частиц в зависимости от интеркалированного соединения ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА варьировал от 200 до 600 нм. Установлено, что процессы включения в состав СДГ и высвобождения из комплексов не приводят к каким-либо химическим модификациям изученных соединений. Продемонстрировано, что СДГ обладают высокой емкостью, защищают иммобилизованные молекулы от воздействия повышенной температуры и ферментов (ДНКазы I, кислой фосфатазы Erwinia herbicola и др.). Выяснено, что количество включившихся в состав СДГ молекул “гостя” зависит от его заряда, размера, растворимости и от ряда других факторов.

Оказалось, что ДНК иммобилизуется в СДГ с помощью метода соосаждения в 2- раз эффективнее, чем при использовании ионного обмена. При этом размер защищаемого участка ДНК в наших экспериментах достигал 6 000 пар оснований.

Таким образом, проведенные исследования показали, что наночастицы СДГ могут эффективно защищать интеркалированные в них соединения нуклеиновой природы от воздействия неблагоприятных факторов, в связи с чем они могут быть использованы для доставки лекарственных веществ в клетки мишени.

ЭМБРИОТОКСИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ ФУЛЛЕРЕНОВ С60 В ЛИПОСОМАЛЬНОЙ СРЕДЕ, ПРОЯВЛЯЮЩЕЕСЯ В РАНЕМ ПОСТНАТАЛЬНОМ ПЕРИОДЕ РАЗВИТИЯ ПОТОМСТВА МЫШЕЙ Рябцева М.С.1, Алексеенко К.А.1, ОАО “Всероссийский научный центр молекулярной диагностики и лечения”, Москва (Россия), Волгоградский государственный медицинский университет Росздрава, Волгоград (Россия).

E-mail: Infantes@yandex.ru В последнее время активно ведутся поиски средств доставки лекарственных препаратов в наноформе, в частности на основе фуллеренов.

Применение фуллеренов сталкивается с противоречивостью данных о токсичности этого вещества;

в том числе эмбриотоксичности. Целью данного исследования являлось изучение в раннем постнатальном периоде развития потомства мышей эмбриотоксического действия фуллеренов С60, помещенных в липосомальную среду. Исследование проводилось на беременных мышах линии CBA, которые были разделены на 3 группы. Животным первой группы вводился изучаемый образец (С60 в дозе 635мкг/мышь, липосомы в дозе 208 мг/мышь), второй группе вводились липосомы в той же дозе, третьей группе - 0,9% раствор NaCl. Введение осуществлялось в/б с 1 по 17 день беременности в объеме 0, мл, в 0,9% растворе NaCl. Оценивалось физическое развитие потомства до 25дня и эмоционально-двигательное поведение. в тесте “открытое поле” на 15, 17 и 22 дни после рождения. В ходе исследования не было выявлено нарушений в физическом развитии потомства опытных и контрольной групп. Отмечены различия в поведенческой активности животных 1 и 2 групп, что проявилось в достоверном (p0,05, t-критерий Стьюдента) снижении латентного периода до начала двигательной активности по сравнению с контролем на 15 (на 43% и 51%) и 17 дни (на 43% и 45% соответственно). Отмечена тенденция к увеличению двигательной активности животных экспериментальных групп на 17 и 22 дни по сравнению с контролем, более выраженная в группе получавшей липосомы. Эти данные свидетельствуют об изменении динамики психо-эмоционального развития и повышенной общей тревожности потомства экспериментальных групп.

ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА ИЗМЕНЕНИЕ СУБЪЕДИНИЧНОГО СОСТАВА Са2+/КАЛЬМОДУЛИН ЗАВИСИМОЙ ПРОТЕИНКИНАЗЫ II КАК ОДИН ИЗ МЕХАНИЗМОВ НАСЛЕДСТВЕННОЙ ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТИ К СУДОРОГАМ Савина Т.А.1, Щипакина Т.Г.1, Учреждение Российской академии наук Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино (Россия), Пущинский государственный университет, Пущино (Россия).

E-mail: neurochem@mail.ru Са2+/кальмодулин-зависимая протеинкиназа типа II (СаМКII) - ключевой фермент внутриклеточного Са2+-пути вторичных посредников. В структурах переднего мозга СаМКII содержит 6-12 альфа (52 кДа) и бета (60 кДа) субъединиц в соотношении 3:1. Предполагается, что соотношение субъединиц фермента не является постоянным и зависит от уровня нейрональной активности. Целью работы было исследование особенностей субъединичного состава CаМКII в механизмах наследственной предрасположенности к судорогам и в развитии судорожной активности на модели наследственных аудиогенных судорог крыс линии Крушинского-Молодкиной (КМ).

Содержание альфа- и бета субъединиц фермента определяли методом иммуноблотинга с использованием специфических моноклональных антител в гиппокампе крыс трех групп: (1) Вистар, не чувствительных к действию звука, (2) КМ и (3) КМ после хронических 20-ти кратных судорог, которые вызывали звуком (80 дБ, 1 судорога в день, дней в неделю). Число животных в каждой группе n=7. Выявлено, что содержание альфа-субъединиц в гиппокампе крыс линии КМ и Вистар не различалось, однако уровень бета-субъединиц в гиппокампе крыс линии КМ был снижен на 40% (59,73±3,80% и 100±8,82% для групп КМ и Вистар, р0,01). Судороги вызывали дальнейшее снижение содержания бета-СаМКII в гиппокампе крыс (62,41±8,65%) по сравнению с группой интактных КМ (100±9,27%, р0,01), уровень альфа СаМКII не изменялся. Известно, что функционально бета-субъединица определяет локализацию фермента, заякоривая его на актиновых филаментах, а также связывает мономеры актина. Можно предположить, что в гиппокампе крыс линии КМ значительно изменена регуляция морфологических перестроек актинового цитоскелета нейронов, опосредуемая СаМКII. Работа выполнена при поддержке грантов РФФИ № 09-04-01254 и программы АВЦП № 2.11/3876.

ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ СТАБИЛИЗИРУЮЩИХ КОВАЛЕНТНЫХ МОДИФИКАЦИЙ - АЦЕТИЛИРОВАНИЯ И АМИНИРОВАНИЯ - НА ПРОТИВОСТРЕССОВЫЕ СТВОЙСТВА ПЕПТИДА KKRR Сажин А.И.

Филиал Института биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А.

Овчинникова РАН, Пущино (Россия).

E-mail: Calliope9@rambler.ru Ранее был получен синтетический пептид KKRR, обладающий выраженными стресспротекторными свойствами. Данная активность обусловлена его соответствием фрагменту 15-18 адренокортикотропного гормона (АКТГ) человека, по отношению к которому пептид KKRR выступает антагонистом.

Поскольку глюкокортикоиды активируют стрессовые процессы в организме, антагонисты АКТГ могут стать основой для противострессовых препаратов. Так как чистые пептиды стремительно расщепляются в плазме, их применение не оправдано. В то же время стабилизирующие модификации могут оказать непредсказуемый эффект на свойства пептида. Получив модифицированный пептид ac-KKRR-NH2 (Протектин) мы сравнили его активность с исходным ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА вариантом. Протектин при интраназальном введении крысам в дозах 1- мкг/животное за сутки до холодового, теплового шока или гипобарической гипоксии и при внутривенном введении в дозах 0,5-2 мкг/животное сразу после острой геморрагии нормализовал содержание кортикостерона и адреналина в надпочечниках и крови. Интраназальное введение протектина в дозах 1- мкг/крыса за сутки до теплового или холодового шока предотвращало нарушение равновесия в системе “содержание свободного гистамина - активность диаминоксидазы в миокарде”, вызванное резким изменением активности фермента при температурных воздействиях. Эффективность Протектина оказалась не только близка, но даже превосходила таковую для KKRR.

ДВУХКАССЕТНЫЕ ПЛАЗМИДНЫЕ КОНСТРУКЦИИ ДЛЯ СТИМУЛЯЦИИ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОГО АНГИОГЕНЕЗА Салафутдинов И.И.1, Кудряшова Н.В.1, Шафигуллина А.К.2, Ризванов А.А.1, Казанский государственный университет, Казань (Россия), Казанский государственный медицинский университет, Казань (Россия).

E-mail: sal.ilnur@gmail.com В ходе проведенной работы разработаны и созданы генетические конструкции на основе двухкассетной плазмиды pBudCE4.1: pBud-VEGF121 EGFP, pBud-VEGF165-EGFP, pBud-VEGF189-EGFP, pBud-VEGF121-FGF2, pBud VEGF165-FGF2, pBud-VEGF189-FGF2, pBud-EGFP-FGF2, pBud-EGFP, экспрессирующие ряд ключевых генов необходимых для индукции терапевтического ангиогенеза: комбинации изоформ фактора роста эндотелия сосудов (vegf121, vegf165, vegf189) и фактора роста фибробластов (fgf2) или репортерного гена - зеленого флуоресцентного белка (egfp).

Экспрессия клонированных генов подтверждена в ходе иммуноцитохимического анализа (изоформы VEGF) и иммуноблотинга (FGF2, EGFP), в трансфицированных клетках НЕК293 с помощью специфичных антител.

Методом флуоресцентной микроскопии показана экспрессия гена egfp при трансфекции различных клеточных линий (HeLa, SH-SY5Y, НEK293T, MCF7, PC12) плазмидами pBud-VEGF165-EGFP и pBud-EGFP-FGF2. выявлена стабильная экспрессия рекомбинантного гена в течение 9 дней во всех линиях, с наиболее интенсивной экспрессией гена egfp в клетках нейронального происхождения.

Увеличение уровня экспрессии мРНК рекомбинантных генов в трансфецированных мезенхимальных стволовых клетках показано методом ПЦР РВ и составило 10 000 и 1 000 раз для изоформ VEGF и FGF2соответственно.

Ангиогенную активность конструкций оценивали по влиянию кондиционированной среды на in vitro модели, показано увеличение пролиферативной активности клеток HUVEC, обработанных культуральной средой с клеток HEK293T, трансфецированных двухкассетными плазмидами экспрессирующими различные комбинации изоформ VEGF, FGF-2 и EGFP.

ОСОБЕННОСТИ АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМЫ ПЕЧЕНИ ЛИСО-ПЕСЦОВЫХ ГИБРИДОВ Сергина С.Н., Хижкин Е.А., Баишникова И.В., Антонова Е.П.

Институт биологии КарНЦ РАН, Петрозаводск (Россия).

E-mail: cvetnick@yandex.ru Функционирование антиоксидантной системы (АОС) животного определяется его систематикой, а также экологическими особенностями вида.

Межвидовая гибридизация позволяет получать новые формы, объединяющие ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА признаки родителей, а также обладающие собственными характеристиками. В связи с этим вызывает интерес выяснение состояния АОС у гибридов двух близкородственных, но различающихся по экогенетическим особенностям, видов семейства Canidae - лисицы и песца - в сравнении с родительскими формами.

Экспериментальными животными явились самцы лисо-песцовых гибридов (блюфрост), полученные в результате спаривания самок вуалевых песцов (Alopex lagopus L.) и самцов серебристо-черных лисиц (Vulpes vulpes L.), разводимых в неволе. В качестве интегрального показателя состояния ферментативного и неферментативного компонентов АОС использовали хемилюминесцентный анализ, также измеряли активности антиоксидантных ферментов супероксидисмутазы (СОД) и каталазы, содержание восстановленного глутатиона и уровень перекисного окисления липидов (ПОЛ).

В печени песцов выявлена более напряженная работа ферментативных антиоксидантов по сравнению с остальными животными. По активности СОД лисо-песцовые гибриды занимали промежуточное положение между песцами, у которых наблюдалась самая высокая активность фермента, и лисицами.

Активность каталазы у всех животных находилась в пределах доверительных границ. Уровень низкомолекулярных антиоксидантов также был выше у песцов по сравнению с лисицами и лисо-песцовыми гибридами, тогда как различий в содержании глутатиона между животными обнаружено не было. Уровень ПОЛ у гибридов оказался достоверно ниже, чем у исходных родительских форм.

Таким образом, выявлены как различия, так и сходства в функционировании АОС печени лисо-песцовых гибридов с антиоксидантами лисиц и песцов.

Работа выполнена при финансовой поддержке НШ - 306.2008.4.

АНТИРАДИКАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ ИЗВЛЕЧЕНИЙ ИЗ МОРСКИХ ВОДОРОСЛЕЙ ПРИБРЕЖНОЙ АКВАТОРИИ ЗАЛ. ПЕТРА ВЕЛИКОГО Сизова Л.А., Спрыгин В.Г.

Тихоокеанский океанологический институт им. В.И. Ильичева ДВО РАН, Владивосток (Россия).

E-mail: drugova_7@mail.ru В последнее время морские водоросли интенсивно исследуются в качестве источника пищевых полифенольных антиоксидантов, получивших широкое применение в биомедицине в качестве средства для повышения антиоксидантного статуса организма, нарушения которого играют важную роль в этиологии и патогенезе различных заболеваний человека.

Нами было проведено исследование по оценке антирадикальной активности (АРА) водно-спиртовых экстрактов, полученных из ряда видов бурых водорослей (Cystoseira crassipes, Sargassum pallidum, Agarum cribrosum, Laminaria cichroides, Laminaria japonica) акватории залива Петра Великого, а также предпринята попытка проведения корреляции уровня АРА с содержанием в экстрактах общих полифенольных соединений (ОПФ).

Содержание ОПФ в исследуемых объектах составило от 40,34 до 6,96 мг экв ГК на 1 г экстрактивных веществ в зависимости от вида водоросли.

Наибольшее содержание ОПФ наблюдалось в Sargassum pallidum, наименьшее в Laminaria japonica.

Величина АРА изменялась от 3,98 мкМ ГК на 1 г экстрактивных веществ в экстракте из Sargassum pallidum до 0,7 мкМ ГК в извлечении, полученном из Laminaria japonica.

Уровень АРА полученных экстрактов в основном пропорционален содержанию ОПФ. Основываясь на литературных данных об умеренной АРА ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И БИОМЕДИЦИНА других видов экстрактивных веществ из водорослей, таких как полисахариды и жирные пигменты можно предположить, что одним из основных носителей АРА извлечений полученных из бурых водорослей являются ОПФ.

Таким образом, полученные результаты показывают, что бурые водоросли, распространенные в прибрежных районах Японского моря, представляют собой интерес в качестве источника для получения комплексов природных антиоксидантов полифенольной природы.

ИССЛЕДОВАНИЕ РАЗВИТИЯ ПАТОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ В МОЗГЕ ЖИВОТНЫХ ПРИ ЭПИЛЕПТОГЕНЕЗЕ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ЭЛЕКТРОФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ И ИММУНОХИМИЧЕСКИХ МЕТОДОВ Синельникова В.В.1,2, Шубина Л.В. Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино (Россия), Пущинский государственный университет, Пущино (Россия).



Pages:     | 1 |   ...   | 5 | 6 || 8 | 9 |   ...   | 13 |
 





 
© 2013 www.libed.ru - «Бесплатная библиотека научно-практических конференций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.